Duyuru

***maturidi*** · 27 July 2020, 17:06

Propolis'in Antibakteriyel Özellikleri
tarafından Izabela Przybyłek veTomasz M. Karpiński^*
Poznań Tıp Bilimleri Üniversitesi, Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Wieniawskiego 3, 61-712 Poznań, Polonya
Yazışmanın ele alınması gereken yazar.
Akademik Editör: Juraj Majtan
Moleküller 2019 , 24 (11), 2047; https://doi.org/10.3390/molecules24112047
Gönderim Tarihi: 10 Mayıs 2019 / Revize: 25 Mayıs 2019 / Kabul Tarihi: 26 Mayıs 2019 / Yayınlanma: 29 Mayıs 2019

Öz
Araştırmacılar, karmaşık bileşimi ve ilişkili geniş aktivite yelpazesi nedeniyle propolisin tüm özelliklerini keşfetmeye devam ediyorlar. Bu derleme, bu maddenin antibakteriyel aktivitesi alanındaki en son bilimsel raporları karakterize etmeyi amaçlamaktadır. Propolisin 600'den fazla bakteri suşu üzerindeki etkisi üzerine yapılan çalışmaların sonuçları analiz edildi. Propolinin Gram-pozitif bakterilere karşı Gram-negatif bakteriden daha büyük aktivitesi doğrulandı. Ayrıca, dünyanın farklı bölgelerinden propolisin antimikrobiyal aktivitesi karşılaştırıldı. Sonuç olarak, hem Gram-pozitif ( Staphylococcus aureus ) hem de Gram-negatif ( Escherichia coli ) ile ilişkili olarak Ortadoğu'dan yüksek propolis aktivitesi bulunmuştur.) suşlar. Eş zamanlı olarak, en düşük aktivite Almanya, İrlanda ve Kore'den propolis örnekleri için gösterilmiştir.
Anahtar Kelimeler: propolis ; arı ürünü ; antibakteriyel ; Staphylococcus aureus ; Escherichia coli ; polifenoller ; terpenoids

1. Giriş
Propolis, arılar tarafından kovanı savunmak için kullanılan maddelerin bir karışımıdır. Bu koruma, kovanın duvarlarındaki boşlukları doldurmak, soğuk günlerde girişi azaltmak ve talep edilen davetsiz misafirleri mumyalamak, böylece çürümelerini önlemekle ilgilidir [ 1 ]. Bu propolis'in neden arı yapıştırıcısı olarak da bilindiğini açıklar [ 2 ]. Propolis kelimesi Yunanca kökenlidir ve şehre girişte anlamına gelir [ 3 , 4 ]. Propolisin kökeni üzerine tartışmalar eski zamanlardan beri devam etmektedir. Kökeni kökeni bitkilerden mi yoksa arılardan mı geldiği konusunda şüpheler doğmuştur. Günümüzde analitik tekniklerin geliştirilmesi ile propolisin yaklaşık bileşimi ve onu etkileyen faktörler bilinmektedir [ 1 ]. Arılar tomurcuklardan, eksüdalardan ve bitkilerin diğer kısımlarından reçineler toplar, bunları kendi tükürük enzimleri ve propolis oluşturan balmumu ile karıştırır [ 5 , 6 ]. Propolis üretmek için kullanılan farklı kıtalar, bölgeler ve bitki türleri bileşimini birbirinden farklı kılar. Propolis farklı bir kimyasal bileşime sahip olmasına rağmen, antibakteriyel, antifungal, antiviral, antiparaziter, antienflamatuar, antiproliferatif ve antioksidan gibi benzer aktivitelere sahiptir [ 7 , 8 , 9 , 10 ].

Polonya da dahil olmak üzere Orta Avrupa'da arılar kavak tomurcuklarından ( Populus spp.), Kızılağaçtan ( Alnus spp.) Salgı toplarlar . Farklı kavak türleri, diğer Avrupa ülkelerinde, yani Bulgaristan, Macaristan, Arnavutluk ve İngiltere'nin yanı sıra ılıman bölge ülkelerinde (ABD, Moğolistan, Batı Asya ve Kuzey Afrika) bir reçine kaynağıdır. Huş ağacı ( Betula spp.) Kuzey Avrupa'da, örneğin Rusya'nın Kuzey Avrupa bölgesinde bir propolis kaynağıdır. Arılar ayrıca söğüt tomurcukları ( Salix spp.), Meşe ( Quercus spp.), Kül ( Fraxinus spp.), Kestane ağacı ( Aesculus spp.) Ve ladin ( Picea spp.) Gibi iğne yapraklı ağaçlardan ağaç kabuğu , köknar (Abies spp.) Veya çam ( Pinus spp.). Tropikal ülkelerde, arılar Xanthorrhoea (Avustralya), Akasya (Kuzey Afrika), Plumeria (Hawaii), Clusia (Orta Amerika) ve Baccharis , Araucaria , Okaliptüs (Brezilya) gibi bitkilerin salgılarını kullanırlar [ 1 , 2 , 11 , 12 , 13 ].

Brezilya, propolis de dahil olmak üzere arı ürünleri konusunda araştırmalarda lider ülke konumundadır [ 14 ]. Brezilya'da, botanik kökenleri nedeniyle birçok propolis türü ayırt edilir. Bu iklimde arılar yıl boyunca propolis toplar. Bueno-Silva ve arkadaşları, yaptıkları çalışmada, kırmızı olarak adlandırılan ve birincil bitki kaynağı Dalbergia ecastophyllum olan en yaygın Brezilya propolis türlerinden birini analiz ettiler . Propolisin toplanma zamanının etkisi, kimyasal bileşimi ve antibakteriyel aktivitesi incelendi. Vestitol, neovestitol ve isoliquiritigenin konsantrasyonu arasında mevsimsel değişkenlik gözlenmiştir. Bu bileşenlerin ve antibakteriyel aktivitenin en yüksek içeriği yağmur mevsimi boyunca kaydedildi (Ocak-Mayıs dönemi) [ 15].

Başka bir propolis türü iğnesiz arılardan (örneğin, Melipona mondury , M. scutellaris ) gelir ve buna jeopropolis denir. Apis spp.'ye ait arılar tarafından üretilen propolis'e çok benzer . hem bileşimde hem de biyolojik aktivitede [ 16 , 17 ]. Torres ve diğ. yaptıkları çalışmada, iğnesiz bir arı türü olan Melipona quadrifasciata ve Tetragonisca angustula'dan toplanan iki etanolik propolis özütü (EEP) karşılaştırılmıştır . Çalışma, jeopropolis ekstrelerinin Gram-pozitif bakterilere ( Staphylococcus aureus MSSA ve MRSA, Enterococcus faecalis ) karşı Gram-negatif (Klebsiella pneumoniae , Escherichia coli ). Analiz edilen iki jeopropolden Melipona türleri daha etkiliydi [ 18 ].

Ham propolis doğrudan analiz veya tedavide kullanılamaz. İlk olarak, en aktif bileşenleri çözmek ve serbest bırakmak için ekstrakte edilmelidir. Ekstraktanlar olarak aşağıdaki çözücüler kullanılır: etanol, metanol, su, heksan, aseton, diklorometan ve kloroform. Ekstraktlar yaklaşık% 70 konsantrasyon propolis içerir [ 19 , 20 ]. Antibakteriyel aktivite açısından flavonoidler ve fenolik bileşikler gibi maddelerin içeriği önemlidir [ 21 , 22 , 23]. Bununla birlikte, kullanılan çözücüye bağlı olarak, farklı biyolojik aktivite bulunur. Devequi-Nunes ve diğ. kahverengi, yeşil ve kırmızı propolis etanolik özütlerinde süper kritik özütleme ile elde edilen özütlere göre yaklaşık iki kat daha yüksek fenolik bileşik konsantrasyonları bulundu. Aynı zamanda flavonoid düzeyleri, yeşil ve kırmızı propolisin etanolik ekstraktlarında daha yüksek ve kahverengi propoliste daha düşük, süperkritik ekstraksiyona göre daha düşüktü [ 24 ]. Wieczyńska ve diğ. çalışmalarında, Polonya propolisinden etanolik ekstraktların hekzan ekstraktlarından daha güçlü bir antimikrobiyal aktivitesi bulmuşlardır [ 25 ].
Bu derlemenin amacı, propolisin ana aktif maddelerini ve bu arı ürününün antibakteriyel aktivitesini göstermektir.

2. Propolisin Kimyasal Bileşikleri
Propolisin kimyasal bileşimi, onu üretmek için kullanılan bitki kaynaklarının reçineleri ve balzamları ile yakından ilgilidir. Araştırmanın ilerlemesiyle birlikte propolis'in 300'den fazla kimyasal bileşeni tanımlanmıştır. Reçineler dışında propolis'te bulunduğu bulunan ana kimyasal bileşik grupları, mumlar, polifenoller (fenolik asitler, flavonoidler) ve terpenoidlerdir ( Şekil 1 ).

Şekil 1. Propolisin bileşimi.
Polifenoller ve terpenoidler de en aktif olarak kabul edilir [ 26 ]. Flavonoid grubu chrysin, pinokembrin, apigenin, galangin, kaempferol, quercetin, tectochrysin, pinostrobin ve diğerlerini içerir ( Şekil 2 ). Propolis bileşiklerinin bir başka kritik grubu, en sık ferulik, sinnamik, kafeik, benzoik, salisilik ve p-cumarik asitlerde meydana gelen aromatik asitlerdir ( Şekil 3 ) [ 27 , 28 , 29 ]. Polonya propolisinde, flavonoid bileşiklerinin içeriği% 6.2 ila 18.8 arasında değişmektedir. Flavonoidler arasında en yüksek miktarlar pinokembrin (ortalama% 4.7), pinobenchin (ortalama% 3.1), galangin (ortalama% 2.2) ve chrysin (ortalama% 2.1) idi [ 27]. Ek olarak propolis, karakteristik kokusundan sorumlu olan diğer fenolik bileşikleri (örn. Artepilin C) ve terpenler (terpineol, kafur, geraniol, nerol, farnesol) de içerir ( Şekil 4 ). Propoliste mikro ve makro elementler (Mn, Fe, Si, Mg, Zn, Se, Ca, K, Na, Cu) ve B1, B2, B6, C ve E vitaminleri bulunabilir [ 1 , 2 , 28 , 29 , 30 , 31 , 32 ]. Kimyasal bileşimin bu çeşitliliği propolis'e bir antibakteriyel ajan olarak ek bir avantaj sağlar. Birçok aktif bileşenin kombinasyonu ve bunların çeşitli oranlardaki mevcudiyeti, bakteri direncinin meydana gelmesini önler [ 33 ].

Şekil 2. Propolis'te bulunan flavonoidler: ( a ) chrysin; ( b ) pinokembrin; ( c ) apigenin; ( d ) galangin; ( e ) kaempferol; ( f ) kuersetin; ( g ) tektokrisin; ( h ) pinostrobin.

Şekil 3. Propolis'te bulunan aromatik asitler: ( a ) ferulik asit; ( b ) sinnamik asit; ( c ) kafeik asit; ( d ) benzoik asit; ( e ) salisilik asit; ( f ) p- kumarik asit.

Şekil 4. Propolisin karakteristik kokusundan sorumlu maddeler: ( a ) fenolik bileşik artepilin C; terpenler: ( b ) kafur; ( c ) terpineol; ( d ) geraniol; ( e ) nerol; ( f ) farnesol.

3. Propolis'in Antimikrobiyal Özellikleri
Propolisin antibakteriyel aktivitesi iki düzeyde düşünülmelidir. Birincisi, mikroorganizma üzerindeki doğrudan etki ile, diğeri de organizmanın doğal savunmalarının aktivasyonuyla sonuçlanan bağışıklık sisteminin uyarılması ile bağlantılıdır [ 5 ]. Propolis mekanizmalarının analizi, mikroorganizmanın hücresel zarının geçirgenliği, membran potansiyelinin bozulması ve adenozin trifosfat (ATP) üretiminin yanı sıra bakteri hareketliliğini azaltma üzerindeki etkisini ortaya çıkarmasına izin verir ( Şekil 5)). Genel olarak propolisin antimikrobiyal aktivitesinin Gram-pozitif ile ilişkili olarak Gram-negatif bakterilerden daha yüksek olduğu gözlenir. Bu, Gram-negatif bakterilerin dış zarının türe özgü yapısı ve propolisin aktif bileşenlerini parçalayan hidrolitik enzimlerin üretimi ile açıklanmaktadır [ 31 , 34 ]. Artepilin C (3,5-diprenil- p - koumarik asit) propolis'te bulunan çok sayıda fenolik bileşikten ( p- koumarik asidin prenil türevi ) biridir. Brezilya'da Veiga ve ark. heksan ekstraktlarına kıyasla propolisin etanolik ekstraktlarında artepilin C'nin daha yüksek bir konsantrasyonunu gösterir. Bu ekstreler ayrıca MRSA S. aureus üzerinde yüksek antibakteriyel aktivite göstermiştir.[ 35 ]. Anaerobik bakteri Porphyromonas gingivalis'e karşı yapılan çalışmalarda , artepillin C'nin membran sızması ile bakteriyostatik aktiviteye sahip olduğu bulunmuştur [ 36 ]. Artepilin C ayrıca NF-kappaB'nin modülasyonu ve prostaglandin E (2) ve nitrik oksidin inhibisyonu ile aracılık eden anti-enflamatuar etkileri gösterir [ 37 ].

Şekil 5. Bakterilere karşı propolis aktivitesinin mekanizmaları.
Propolis'te bulunan diğer prenil türevleri, yani 3-prenil-sinnamik asit alil ester ve 2-dimetil-8-prenilkromen de benzer antimikrobiyal aktiviteye sahiptir [ 38 ]. S. aureus gibi cilt enfeksiyonuna bağlı mikroplar üzerindeki antimikrobiyal etki de kaempferid sunar [ 39 ]. Yüksek konsantrasyonlarda kaempferid, artepilin-C, drupanin ve p- koumarik asit içeren propolisin etanolik ekstresi, S. aureus , S. saprophyticus , Listeria monocytogenes ve E. faecalis'e karşı antioksidan aktivite ve antibakteriyel göstermiştir [ 40 ].

Propoliste bulunan diğer flavonoidler pinokembrin ve apigenin'dir. Veloz ve ark. Şili propolisinde, bu bileşiklerin her ikisinin de Streptococcus mutans'a karşı antibakteriyel aktivitesinin, minimum inhibitör konsantrasyonları (MIC'ler) 1.4 ug / mL ve 1.3 ug / mL ile polifenol karışımı veya hatta klorheksidin (MIC'ler = 1.6 ug / mL) aktivitesinden daha yüksek olduğu bulundu. sırasıyla [ 41 ]. Çeşitli çalışmalar izole edilmiş pinokembrinin S. mutans , S. sobrinus , S. aureus , E. faecalis , L. monocytogenes , Pseudomonas aeruginosa ve K. pneumoniae'ye karşı antibakteriyel aktivitesini göstermiştir [ 42, 43 , 44 , 45 ]. İzole apigenin Gram-negatif bakterilere karşı etki eder: P. aeruginosa , K. pneumoniae , Salmonella enterica serotip Typhimurium, Proteus mirabilis ve Enterobacter aerogenleri [ 46 ]. Ayrıca β-laktam metisiline dirençli karşı antibiyotik apigenin sinerjistik antibakteriyel etki gözlenmiştir S. aureus (MRSA), [ 47 seftazidim dirençli karşı seftazidim ile] ve apigenin Enterobacter cloacae [ 48 ].

Sinnamik asit ve türevleri, bitki krallığında yaygın olarak bulunan bir grup aromatik, karboksilik asittir. Hem bitkilerin yeşil kısımlarında hem de çiçeklerde bulunurlar. Propolis, büyük ölçüde bitki salgılarından oluşan bir malzeme olarak, zengin bir sinnamik asit ve ester kaynağıdır. Birçok çalışma, sinnamik asidin Aeromonas spp., Vibrio spp., E. coli , L. monocytogenes , Mycobacterium tuberculosis , Bacillus spp., Staphylococcus spp. Streptococcus pyogenes, Micrococcus flavus , P. aeruginosa , S. enterica serotip Typhimurium,Enterobacter cloacae ve Yersinia ruckeri [ 49 , 50 , 51 ]. Sinnamik asit ve türevleri, hücre zarına zarar vererek, ATPazları, hücre bölünmesini ve biyofilm oluşumunu engelleyerek bakterileri inhibe eder. Dahası, çekirdek karşıtı algılama faaliyeti vardı [ 52 ].

İlginç bir şekilde, terpenoid lupeol, flavonoidler gibi propolisin başka bileşenleri de vardır: quercetin, chrysin, kaempferol, fisetin veya dekanoik asitler, yani 10-hidroksil-2-decenoik asit [ 32 ]. Bazı çalışmalar quercetin, chrysin ve kaempferolün antibakteriyel ve antienflamatuar aktivitesini analiz etmektedir [ 45 , 53 , 54 , 55 , 56 , 57 ].

Park et al. Tarafından Kore'de yapılan araştırmada, bilim adamları, propolis ekstraktındaki yağ asitleri seviyelerini düşürmede lipazların etkinliğini fark ettiler. Balmumu ve reçineler propolis'in ana bileşenleridir ve her ikisi de hidrofobiktir. Yağ bozundurucu enzimlerin kullanımı, aktif propolis bileşiklerinin ekstraksiyonunu ve izolasyonunu geliştirmeye yardımcı olur ve bu da onu daha yaygın olarak kullanılabilir. Lipozim TL IM içeren reaksiyon, Staphylococcus epidermidis ve Propionibacterium akne'ye karşı antimikrobiyal aktiviteyi arttırır [ 58 ].

Kubiliene ve diğ. polietilen glikol 400 (PEG), su ve zeytinyağı gibi alternatif, alkolsüz bir çözücü karışımı ile hazırlanan propolis ekstraktlarının bileşimi ve biyolojik aktivitelerini karşılaştırdı. Etanolik ekstraktlara kıyasla fenolik bileşiklerin toplam içeriğinde önemli bir fark bulamadılar. Bununla birlikte, farklı bileşik sınıflarının belirlenmesi spesifik değildi. PEG-su çözeltileri naringenin, galangin ve kaempferol sundu. Daha yüksek bir sıcaklık ferulik, kafeik, ekstraksiyon etkin için PEG ilavesi, maruz bağlı s -coumaric asitler, kuersetin ve propolis C alkolik ekstre su, yağ ve PEG karıştırılarak hazırlanır ve karşısında da benzer ya da daha yüksek, antimikrobiyal aktivite sunuldu artepillin S. aureus ,Bacillus cereus , P. aeruginosa ve K. pneumoniae sonra EEP [ 59 ].

Son zamanlarda, propolis ekstraktlarının antibakteriyel aktivitesinin değerlendirilmesi, toplam fenolik içeriğinin (TP) ve flavonoidlerin (FP) belirlenmesine dayanmaktadır. Çalışmalarında Bridi ve ark. TP ve FP testlerinin in vitro antimikrobiyal aktiviteyi her zaman yeterince yansıtmadığını bulmuşlardır. En yüksek ve en düşük içeriğe sahip numunelerdeki TP sonuçları, flavonoidlerin içeriği ve antioksidan özellikleri ile doğru orantılıydı. Bununla birlikte, antibakteriyel aktivite durumunda açık değildi. Propolis için uluslararası kalite standartlarının belirlenmesinde ORAC (Oksijen Radikal Absorbans Kapasitesi) ve antimikrobiyal testler gibi diğer testlerin de dikkate alınması önerilmektedir [ 60 ].

Propolis ve diğer arıların ürünlerinin antibakteriyel aktiviteye sahip olduğu varsayılarak, bunların kombinasyonu bu etkiyi yoğunlaştırmalıdır. Al-Waili ve diğ. Suudi Arabistan ve Mısır'da toplanan propolis ve bal kombinasyonuna böyle bir bağımlılığı inceledi. Bu çalışmanın sonuçları propolis ve bal kombinasyonunun antimikrobiyal etkilerini arttırdığını doğrulamaktadır ( S. aureus ve E. coli için ). Bu etki Suudi propolis için anlamlıydı (MIC değerini neredeyse iki kat düşürdü). Mısır hammaddeleri çok daha az aktivite göstermiştir [ 61 ].

Propolisin anaerobik bakteriler üzerindeki etkisi hakkında sınırlı araştırma vardır. Bununla birlikte, bu araştırma bu arı ürününün Clostridium , Bacteroides , Porphyromonas , Prevotella , Fusobacterium , Actinomyces ve Propionibacterium türlerine karşı yüksek aktivitesini göstermektedir [ 62 , 63 , 64 , 65 ]. Polonya çalışmalarında, Fusobacterium cinsinin anaerobik bakterileri, propolis'ten (EEP) düşük konsantrasyonlara (0.01-0.06 mg / mL) etanolik özütlere en duyarlı olanlardır. Bununla birlikte, Actinomyces cinsinin bakterileri ,Bacteroidler , Clostridium , Peptococcus , Peptostreptococcus ve Propionibacterium yüksek konsantrasyonlarda (1-3 mg / mL) EEP'ye duyarlıydı [ 66 , 67 , 68 ].

4. Veri Analizi
Minimal inhibitör konsantrasyonu (MIC), bir agar veya et suyu seyreltme duyarlılık testinde bir mikroorganizmada büyüme gözlenmeyen antimikrobiyal bir ajanın en düşük konsantrasyonudur [ 69 ]. Bu çalışma, et suyu seyreltme yöntemi kullanılarak propolis özütleri için MİK belirten bilimsel yayınları içermiştir. MIC mililitre [ug / mL] başına mikrogram olarak ifade edilir.

Bu inceleme için tamamlanan literatürün analizi, farklı mikroorganizma grupları için toplam yaklaşık 600 propolis MIC değerini içermiştir. Toplanan sonuçları aritmetik ortalama değerler şeklinde görselleştirmek için 3 MIC değerinden daha düşük mikroorganizmalar analizden çıkarılmıştır. Bunlar Actinomyces naeslundii (1 kayıt) [ 16 ], B. cereus (1) [ 70 ], Bifidobacterium bifidum (1), B. infantis (2), B. longum (1), Clostridium butyricum (2), C. paraputrificum (1), C. perfringens (1) [ 71 ], L. monocytogenes(2) ve P. gingivalis (1) [ 36 ].

Propolisin (EEP) etanol ekstresi en yaygın olarak analizlerde, yani 324 kayıtta kullanıldı. Benzer bir frekansta (209 kayıt) ekstraktan olarak metanol (MeEP) kullanıldı. Alkolsüz ekstreler çok daha az analiz edilir. Bu gibi durumlarda, çözücüler 19 kayıtta su (WEP), 12 kayıtta dimetil sülfoksit (DMSO), 10 kayıtta diklorometan (DCM) ve altı kayıtta hekzan ve süperkritik sıvı (SCEP) idi.

Propolisin antibakteriyel aktivitesi çoğunlukla E. coli , S. aureus , Salmonella spp. ve P. aeruginosa . En sık analiz edilen on bakteri Şekil 6'da gösterilmektedir .

Şekil 6. Propolis ekstraktlarına duyarlılık açısından en çok analiz edilen on bakteri suşu ile yapılan bir dizi çalışma.
Propolis özütleri için ortalama MIC değerlerinin analizi, Gram-pozitiflere karşı Gram-negatif bakterilere göre daha yüksek etkinliklerini doğruladı. EEP için MIC değerleri, birinci grup için 117-1840 ug / mL ve ikinci grup bakteri için 34-5000 ug / mL idi. Tüm veriler Gram-pozitif bakteriler için Tablo 1'de ve Gram-negatif bakteriler için Tablo 2'de gösterilmiştir.

Tablo 1. Gram-pozitif bakterilere karşı farklı propolis ekstraktlarının aktivitesi.

Tablo 2. Gram-negatif bakterilere karşı farklı propolis ekstraktlarının aktivitesi.

Gram-pozitif bakterileri temsil eden S. aureus ve Gram-negatif suşları temsil eden E. coli'nin propolis (EEP) 'nin coğrafi köken temelinde etkisini karşılaştırmak en iyisidir . Bu, listelenen türler üzerinde mevcut en fazla testtir. Olarak S. aureus, yüksek aktivite, sırasıyla 8, 10 ve 81 ug / mL, MIC değerleri ile Türkiye, Tayvan ve Umman EEP için gözlenmiştir. En düşük aktivite Şili, Avustralya ve Almanya'dan propolis örnekleri için gözlenmiştir. EEP için MIC değerleri sırasıyla 1445, 1200 ve 750 ug / mL idi. E. coli'ye karşı ,en aktifleri sırasıyla 116, 302 ve 510 ug / mL MIC'leri olan Türkiye, Umman ve Slovakya'dan elde edilen propolisin etanol özütleridir. Sonunda, en düşük aktivite ile, 1200-5000 ug / mL arasında MIC değerleri olan Almanya, Kore ve İrlanda'dan propolis örnekleri vardı. İlginç bir şekilde, Brezilya, propolis üzerinde en fazla araştırmaya sahip olmasına rağmen, hem Gram pozitif hem de Gram negatif bakteriler için ortadaydı. Analiz edilen tüm bakteriyel türlerin sonuçları Tablo 3 ve Tablo 4'te sunulmaktadır .

Tablo 3. Gram-pozitif bakterilere karşı farklı coğrafi kökenli EEP için MIC değerleri (“-” - veri yok).

Tablo 4. Gram-negatif bakterilere karşı farklı coğrafi kökenli EEP için MIC değerleri (“-” - veri yok).

Her iki durumda da en aktif olanı Türkiye ve Umman'da toplanan propolis örnekleri olmuştur. Her iki ülke de koku ticareti ile ünlü Ortadoğu ülkelerine dahil edilebilir. Aynı bitkiler muhtemelen propolis üretimi için arılar için bir kaynaktır. Ülkenin kentleşme derecesinin propolisin kalitesi ve biyolojik etkinliği üzerindeki etkisini analiz etmek de ilginç olacaktır. Ancak, bu konuda araştırma yapılamamaktadır.

5. Sonuçlar
Propolis önemli bir antimikrobiyal arı ürünüdür. Hem Gram-pozitif hem de Gram-negatif yanı sıra aerobik ve anaerobik bakterilere karşı etki eder. Propolisin aktivitesi kimyasal bileşime bağlıdır ve her ülkede farklıdır.

Yazar Katkıları
Kavramsallaştırma, TMK ve IP; literatür taraması, IP ve TMK; yazma - orijinal taslak hazırlama, IP; yazma - inceleme ve düzenleme, TMK; kimyasal yapıların görselleştirilmesi, TMK; fon edinimi, TMK

Finansman
Bu araştırma herhangi bir dış finansman almamıştır.

Çıkar çatışmaları
Yazarlar çıkar çatışması bildirmemişlerdir.

Referanslar

Kędzia, B. Pochodzenie propolisu w świetle teorii i badań naukowych. Teori ve bilimsel araştırmalarda propolisin kökeni. Herba Pol. 2008 , 54 , 179-186. [ Google Akademik ]
Zabaiou, N .; Fouache, A .; Trousson, A .; Baron, S .; Zellagui, A .; Lahouel, M .; Lobaccaro, JA Propolis ekstraktlarının biyolojik özellikleri: Eski bir üründen yeni bir şey. Chem. Phys. Lipidler 2017 , 207 , 214-222. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Wagh, VD Propolis: Harika bir arı ürünü ve farmakolojik potansiyelleri. Gelişmiş. Pharmacol. Sci. 2013 , 2013 , 308249. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Toreti, VC; Sato, HH; Pastore, GM; Park, YK Propolisin biyolojik ve kimyasal bileşimleri ve botanik kökeni için son gelişmeler. Evid. Tabanlı Tamamlayıcı. Alternat. Med. 2013 , 2013 , 697390. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Sforcin, JM; Bankova, V. Propolis: Yeni ilaç geliştirme potansiyeli var mı? J. Ethnopharmacol. 2011 , 133 , 253-260. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Silva, JC; Rodrigues, S .; Feás, X .; Estevinho, LM Antimikrobiyal aktivite, fenolik profil ve propolis iltihabındaki rolü. Food Chem. Toxıcol. 2012 , 50 , 1790–1795. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Schnitzler, P .; Neuner, A .; Nolkemper, S .; Zundel, C .; Nowack, H .; Sensch, KH; Propol ekstrelerinin ve seçilmiş bileşiklerin antiviral aktivitesi ve etki şekli. Phytother. Res. 2010 , 24 (Ek 1), S20 – S28. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Ramanauskiene, K .; Inkeniene, A. Propolis yağı özütü: Kalite analizi ve antimikrobiyal aktivitesinin değerlendirilmesi. Nat. Prod. Res. 2011 , 25 , 1463-1468. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Franchin, M .; Cólon, DF; Castanheira, FV; da Cunha, MG; Bueno-Silva, B .; Alencar, SM; Cunha, TM; Rosalen, PL Brezilya kırmızı propolisinden izole edilen vestitol, enflamatuar süreçte nötrofil göçünü inhibe eder: Etki mekanizmasının aydınlatılması. J. Nat. Prod. 2016 , 79 , 954-960. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
De Freitas, MCD; de Miranda, MB; de Oliveira, DT; Vieira-Filho, SA; Caligiorne, RB; de Figueiredo, SM Kırmızı propolisin biyolojik aktiviteleri: Bir gözden geçirme. Patx'ın Pat. Endocr. Metab. Immun. Uyuşturucu Keşfi. 2017 , 11 , 3-12. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Warakomska, Z .; Maciejewicz, W. Polonya bölgelerinden propolisin mikroskobik analizi. Apidologie 1992 , 23 , 277. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Jabłoński, B .; Kołtowski, Z. Polonya şartlarında yetişen bal bitkilerinin nektar salgısı ve bal potansiyeli. J. Api. Sci. 2005 , 49 , 59. [ Google Akademik ]
Szeleszczuk, 8 .; Zielińska-Pisklak, M .; Goś, P. Propolis - panaceum prosto z ula. Lek W Polsce 2013 , 23 , 32-39. [ Google Akademik ]
Şenel, E .; Demir, E. 1980-2016 yılları arasında tamamlayıcı tıp literatüründe apiterapinin bibliyometrik analizi . Ther. Clin. Pract. 2018 , 31 , 47-52. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Bueno-Silva, B .; Marsola, A .; Ikegaki, M .; Alencar, SM; Rosalen, PL Mevsimlerin Brezilya kırmızı propolisine ve botanik kaynağına etkisi: Kimyasal bileşim ve antibakteriyel aktivite. Nat. Prod. Res. 2016 , 31 , 1318-1324. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
da Cunha, MG; Franchin, M .; de Carvalho Galvão, LC; de Ruiz, AL; de Carvalho, JE; Ikegaki, M .; de Alencar, SM; Koo, H .; Rosalen, PL İğnesiz arı Melipona scutellaris jeopropolünün antimikrobiyal ve antiproliferatif faaliyetleri . BMC Tamamlayıcısı. Altern. Med. 2013 , 13 , 23. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Santos, TLAD; Queiroz, RF; Sawaya, ACHF; Lopez, BG; Soares, MBP; Bezerra, DP; Rodrigues, ACBC; Paula, VF; Waldschmidt, AM Melipona mondury antioksidan, antibakteriyel ve antiproliferatif aktiviteleri olan bir jeopropolis üretir. Bir. Acad. Sütyen. Cienc. 2017 , 89 , 2247-2259. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Torres, AR; Sandjo, LP; Friedemann, MT; Tomazzoli, MM; Maraschin, M .; Mello, CF; Santos, ARS Melipona quadrifasciata quadrifasciata ve Tetragonisca angustula iğnesiz arılardan elde edilen propolisin kimyasal karakterizasyonu, antioksidan ve antimikrobiyal aktivitesi . Braz. J. Med. Biol. Res. 2018 , 51 , e7118. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Gómez-Caravaca, AM; Gómez-Romero, M .; Arráez-Román, D .; Segura-Carretero, A .; Fernández-Gutiérrez, A. Arılardan elde edilen ürünlerdeki fenolik bileşiklerin analizindeki ilerlemeler. J. Pharmac. Biomed. Anal. 2006 , 41 , 1220–1234'te açıklanmaktadır. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Miguel, MG; Nunes, S .; Dandlen, SA; Cavaco, AM; Antunes, MD Fenoller ve Portekiz'in güneyindeki Algarve'den propolis hidro-alkolik ekstraktlarının antioksidan aktivitesi. Food Chem. Toxıcol. 2010 , 48 , 3418-3423'te açıklanmaktadır. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Inui, S .; Hatano, A .; Yoshino, M .; Hosoya, T .; Shimamura, Y .; Masuda, S .; Ahn, MR; Tazawa, S .; Araki, Y .; Kumazawa, S. Brezilya kırmızı propolisinin etanol özütlerinde antibakteriyel aktiviteye katkıda bulunan fenolik bileşiklerin tanımlanması. Nat. Prod. Res. 2014 , 28 , 1293-1296'da açıklanmaktadır. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Brodowska, KM Doğal flavonoidler: Flavonoid analoglarının sınıflandırılması, potansiyel rolü ve uygulaması. Avro. J. Biol. Res. 2017 , 7 , 108-123. [ Google Akademik ]
Górniak, I .; Bartoszewski, R .; Króliczewski, J. Bitki flavonoidlerinin antimikrobiyal aktivitelerinin kapsamlı bir derlemesi. Phytochem. Rev. 2019 , 18 , 241-272. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Devequi-Nunes, D .; Machado, BAS; Barreto, GA; Rebouças Silva, J .; da Silva, DF; da Rocha, JLC; Brandão, HN; Borges, VM; Umsza-Guez, MA Altı farklı propolis ekstraktının geleneksel yöntemler ve süperkritik ekstraksiyon ile kimyasal karakterizasyonu ve biyolojik aktivitesi. PLOS ONE 2018 , 13 , e0207676. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Wieczyńska, A .; Weżgowiec, J .; Więckiewicz, W .; Czarny, A .; Kulbacka, J .; Nowakowska, D .; Gancarz, R .; Wilk, KA Polonya'nın batı Pomeranya bölgesinden farklı propolis ekstraktlarının antimikrobiyal aktivitesi, sitotoksisitesi ve toplam fenolik içeriği. Açta Pol. Pharm. 2017 , 74 , 715-722. [ Google Akademik ] [ PubMed ]
Pimenta, HC; Violante, IM; Musis, CR; Borges, Á.H .; Aranha, AM Brezilyalı kahverengi propolisin Enterococcus faecalis'e karşı in vitro etkinliği . Braz. Oral Arş. 2015 , 29 , 1-6. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Kędzia, B .; Hołderna-Kędzia, E. Pinocembryna - flawonoidowy składnik krajowego propolisu o działaniu opóźniającym rozwój choroby Alzheimera. Pinokembrin - Alzheimer hastalığının gelişiminin geciktirici etkisi ile yerli propolisin flavonoid bileşeni. İleti. Fitoter. 2017; 18, 223-228. [ Google Akademik ]
Bankova, VS; Castro, DSL; Marcucci, MC Propolis: Kimya ve bitki kaynaklı son gelişmeler. Apidologie 2000 , 31 , 3-15. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Kędzia, B. Skład chemiczny i aktywność biologiczna propolisu pochodzącego z różnych rejonów świata. İleti. Fitoter. 2006 , 1 , 23-35. [ Google Akademik ]
Wolska, K .; Górska, A .; Adamiak, A. Właściwości przeciwbakteryjne propolisu. İleti. Mikrobiol. 2016 , 55 , 343-350. [ Google Akademik ]
Sforcin, JM Propolisin biyolojik özellikleri ve terapötik uygulamaları. Phytother. Res. 2016 , 30 , 894-905. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Pasupuleti, VR; Sammugam, L .; Ramesh, N .; Gan, SH Bal, propolis ve arı sütü: Biyolojik etkileri ve sağlık yararları üzerine kapsamlı bir derleme. Oxid. Med. Cell Longev. 2017 , 2017 , 1259510. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Pamplona-Zomenhan, LC; Pamplona, BC; da Silva, CB; Marcucci, MC; Mimica, LM Brezilyalı sınıflandırılmış propolisin etanol ekstraktının Staphylococcus aureus suşları üzerinde in vitro antimikrobiyal aktivitesinin değerlendirilmesi . Braz. J. Microbiol. 2011 , 42 , 1259-1264'te açıklanmaktadır. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Kędzia, B .; Hołderna-Kędzia, E. Aktywność antybiotyczna propolisu krajowego i europejskiego. Yerli ve Avrupa propolisinin antibiyotik aktivitesi. İleti. Fitoter. 2013 , 2 , 97-107. [ Google Akademik ]
Veiga, RS; De Mendonça, S .; Mendes, PB; Paulino, N .; Mimica, MJ; Lagareiro Netto, AA; Marcucci, MC Artepillin C ve yeşil propolis ve Baccharis dracunculifolia DC'nin antimikrobiyal ve antioksidan aktivitesinden sorumlu fenolik bileşikler . J. Appl. Microbiol. 2017 , 122 , 911–920. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Yoshimasu, Y .; Ikeda, T .; Sakai, N .; Yagi, A .; Hirayama, S .; Morinaga, Y .; Furukawa, S .; Nakao, R.Porphyromonas gingivalis'e karşı propolisin hızlı bakterisidal etkisi . J. Dent. Res. 2018 , 97 , 928-936. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Paulino, N .; Abreu, SRL; Uto, Y .; Koyama, D .; Nagasawa, H .; Hori, H .; Dirsch, VM; Vollmar, AM; Scremin, A .; Bretz, WA Brezilya propolisinde biyoyararlanabilen bir bileşik olan artepillin C'nin anti-enflamatuar etkileri. Avro. J. Pharmacol. 2008 , 587 , 296-301. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Viuda-Martos, M .; Ruiz-Navajas, Y .; Fernández-López, J .; Pérez-Álvarez, JA Bal, propolis ve arı sütünün fonksiyonel özellikleri. J. Food Sci. 2008 , 73 , R117-R124. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Guz, NR; Stermitz, FR; Johnson, JB; Beeson, TD; Willen, S .; Hsiang, JF; Lewis, K. Bir Staphylococcus aureus çok ilaca dirençli pompanın flavonolignan ve flavon inhibitörleri : Yapı-aktivite ilişkileri. J. Med. Chem. 2001 , 44 , 261-268. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Seibert, JB; Bautista-Silva, JP; Amparo, TR; Petit, A .; Pervier, P .; Dos Santos Almeida, JC; Azevedo, MC; Silveira, BM; Brandão, GC; de Souza, GHB; vd. Potansiyel bir doğal koruyucu olarak kullanılmak üzere antioksidan ve antimikrobiyal aktivite ile propolis nanoemülsiyonunun geliştirilmesi. Food Chem. 2019 , 287 , 61-67. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Veloz, JJ; Alvear, M .; Salazar, LA Bireyin Streptococcus mutans'ına ve Şili propolis'te bulunan ana polifenolik bileşiklerin karışımlarına karşı antimikrobiyal ve antibiyofilm aktivitesi . Biomed. Res. Int. 2019 , 2019 , 7602343. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Soromou, LW; Zhang, Y .; Cui, Y .; Wei, M .; Chen, N .; Yang, X .; Huo, M .; Baldé, A .; Guan, S .; Deng, X .; vd. Pinokembrin'in alt inhibitör konsantrasyonları, a-toksin ekspresyonunu azaltarak anti- Staphylococcus aureus aktivitesi uygular . J. Appl. Microbiol. 2013 , 115 , 41-49. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Joray, MB; Trucco, LD; González, ML; Napal, GN; Palacios, SM; Bocco, JL; Carpinella, MC Flourensia oolepis'ten izole edilen bileşiklerin antibakteriyel ve sitotoksik aktivitesi . Evid. Tabanlı Tamamlayıcı. Alternat. Med. 2015 , 2015 , 912484. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Hernández Tasco, AJ; Ramírez Rueda, RY; Alvarez, CJ; Sartori, FT; Sacilotto, ACBC; Ito, IY; Vichnewski, W .; Salvador, MJ Lychnophora markgravii'den elde edilen ham özlerin ve izole bileşiklerin antibakteriyel ve antifungal özellikleri . Nat. Prod. Res. 2018 , 1-5. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Kharsany, K .; Viljoen, A .; Leonard, C .; van Vuuren, S. Yeni vızıltı: Güney Afrika propolisinde bulunan biyoaktif bileşikler arasındaki antimikrobiyal etkileşimlerin araştırılması. J. Ethnopharmacol. 2019 , 238 , 111867. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Nayaka, HB; Londonkar, RL; Umesh, MK; Tukappa, A. Antibakteriyel izole apigenin özellikleri Portulaca oleracea L. Int. J. Bacteriol. 2014 , 2014 , 175851. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Akilandeswari, K .; Ruckmani, K. Apigenin'in β-laktam antibiyotiklerle sinerjik antibakteriyel etkisi ve metisiline dirençli Staphylococcus aureus'a karşı olası bir membran etkisi ile bakteriyel direncin modülasyonu . Celi Mol. Biol. 2016 , 62 , 74-82. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Eumkeb, G .; Chukrathok, S. Seftazidime ve apigenin kombinasyonunun seftazidime dirençli Enterobacter cloacae'ye karşı sinerjik aktivitesi ve etki mekanizması . Phytomedicine 2013 , 20 , 262-269. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Heleno, SA; Ferreira, IC; Esteves, AP; Ćirić, A .; Glamočlija, J .; Martins, A .; Soković, M .; Queiroz, MJ Ganoderma lucidum özütünün, p-hidroksibenzoik ve sinnamik asitlerin ve bunların sentetik asetillenmiş glukuronid metil esterlerinin antimikrobiyal ve demelanize edici aktivitesi . Food Chem. Toxıcol. 2013 , 58 , 95-100. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Guzman, JD Antimikrobiyal aktiviteye sahip doğal sinamik asitler, sentetik türevler ve melezler. Moleküller 2014 , 19 , 19292–19349. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Yılmaz, S .; Sova, M .; Ergün, S. Trans-sinnamik asidin antimikrobiyal aktivitesi ve önemli balık patojenlerine ve patojenik olmayan izolatlara karşı yaygın olarak kullanılan antibiyotikler. J. Appl. Microbiol. 2018 , 125 , 1714-1727. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Vasconcelos, NG; Croda, J .; Simionatto, S. Tarçın ve bileşenlerinin antibakteriyel mekanizmaları: Bir gözden geçirme. Microb. Pathog. 2018 , 120 , 198-203. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Gopu, V .; Meena, CK; Shetty, PH Quercetin, gıda kaynaklı bakterilerde çekirdek algısını etkiler: In-vitro ve in-silico kanıtı. PLOS ONE 2015 , 10 , e0134684. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Siriwong, S .; Teethaisong, Y .; Thumanu, K .; Dunkhunthod, B .; Eumkeb, G. Quercetin artı amoksisilinin amoksisiline dirençli Staphylococcus epidermidise karşı sinerjisi ve etki şekli . BMC Pharmacol. Toxıcol. 2016 , 17 , 39. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Harasstani, OA; Tham, CL; Sepraf farelerin hayatta kalmasını iyileştirmek için Israf, DA Kaempferol ve chrysin sinerjileri. Molecules 2017 , 22 , 92. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Ming, D .; Wang, D .; Cao, F .; Xiang, H .; Mu, D .; Cao, J .; Li, B .; Zhong, L .; Dong, X .; Zhong, X .; vd. Kaempferol, Staphylococcus aureus'ta biyofilm oluşumunun birincil bağlanma aşamasını inhibe eder . Ön. Microbiol. 2017 , 8 , 2263. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Wang, S .; Yao, J .; Zhou, B .; Yang, J .; Chaudry, MT; Wang, M .; Xiao, F .; Li, Y .; Yin, W. Quercetin'in in vivo antibiyotik alternatifi olarak bakteriyostatik etkisi ve in vitro antibakteriyel mekanizması. J. Food Prot. 2018 , 81 , 68-78. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Park, H .; Bae, SH; Choi, H .; Suh, HJ Propolis ekstraktından lipaz aracılı lipit giderimi ve bunun antiradiakal ve antimikrobiyal aktivitesi. J. Sci. Gıda Tarım 2015 , 95 , 1697-1705. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Kubiliene, L .; Laugaliene, V .; Paviloniis, A .; Maruska, A .; Majiene, D .; Barcauskaite, K .; Kunilus, R .; Kasparaviciene, G .; Savickas, A. Propolis ekstraktlarının alternatif hazırlanması: Bileşimlerinin ve biyolojik aktivitelerinin karşılaştırılması. Tamamlayıcı. Altern. Med. 2015 , 15 , 156. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Bridi, R .; Karadağ, G .; Nuñez-Quijada, G .; Giordano, A .; Morán-Romero, FM; Jara-Pezoa, I .; Speisky, H .; Atala, E .; López-Alarcón, C. Uluslararası propolis kalitesi düzenlemeleri: Gerekli testler mutlaka polifenolikle ilgili in vitro aktivitelerini yansıtmaz. J. Food Sci. 2015 , 80 , C1188 – C1195. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Al-Waili, N .; Elhamdi, A .; Ansari, MJ; Al-Attal, Y .; Salom, K. Bal ve propolisin ilaca çok dirençli Staphylococcus aureus , Escherichia coli ve Candida albicans'a karşı sinerjik etkileri, tek ve polimikrobiyal kültürlerde izole edilir. Int. J. Med. Sci. 2012 , 9 , 793-800. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Boyanova, L .; Kolarov, R .; Gergova, G .; Mitov, I. Bulgar propolisin 94 klinik anaerobik bakteri izolatına karşı in vitro aktivitesi. Anaerob 2006 , 12 , 173-177. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Ferreira, FB; Torres, SA; Rosa, OP; Ferreira, CM; Garcia, RB; Marcucci, MC; Gomes, BP Propolis ve diğer maddelerin seçilen endodontik patojenlere karşı antimikrobiyal etkisi. Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod. 2007 , 104 , 709-716. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Koru, O .; Toksoy, F .; Acikel, CH; Tunca, YM; Baysallar, M .; Üsküdar Güçlü, A .; Akca, E .; Özkok Tuylu, A .; Sorkun, K .; Tanyuksel, M .; vd. Belirli oral patojenlere karşı farklı coğrafi kökenlerden propolis örneklerinin in vitro antimikrobiyal aktivitesi. Anaerob 2007 , 13 , 140-145. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Shabbir, A .; Rashid, M .; Tipu, HN Propolis, dirençli periodontal patojenlerin tedavisinde gelecek için bir umut. Cureus 2016 , 8 , e682. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Kędzia, A. Działanie wyciągu etanolowego z propolisu na bakterie beztlenowe. Herba Pol. 1986 , 32 , 53-57. [ Google Akademik ]
Kędzia, A .; Kałowski, M. Ocena skuteczności działania wyciągu etanolowego z propolisu na bakterie bezwzględnie beztlenowe jamy ustnej. Czas. Stomat. 1988 , 41 , 757-762'de açıklanmaktadır. [ Google Akademik ]
Kędzia, A. Wrażliwość bakterii bezwzględnie beztlenowych na wyciąg etanolowy z propolisu. Herba Pol. 1988 , 34 , 267-272. [ Google Akademik ]
Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü. Aerobik olarak büyüyen bakteriler için antimikrobiyal duyarlılık testlerini seyreltme yöntemleri. Onaylı Standartlar-Dokuzuncu Baskı. M07-A9. 2012; 32, 3. [ Google Akademik ]
Mavri, A .; Abramovič, H .; Polak, T .; Bertoncelj, J .; Jamnik, P .; Smole Možina, S .; Jeršek, B. Sloven propolis'in kimyasal özellikleri ve antioksidan ve antimikrobiyal aktiviteleri. Chem. Biodiv. 2012 , 9 , 1545–1558. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Wang, X .; Sankarapandian, K .; Cheng, Y .; Woo, SO; Kwon, HW; Perumalsamy, H .; Ahn, Y.-J. Güney Kore'de 20 farklı bölgeden toplam fenolik içerik ve propolisin biyolojik özellikleri arasındaki ilişki. BMC Tamamlayıcısı. Altern. Med. 2016 , 16 , 65. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Bittencourt, MLF; Ribeiro, PR; Franco, RLP; Hilhorst, HWM; de Castro, RD; Fernandez, LG Brezilya propolisinin metabolik profili, antioksidan ve antibakteriyel aktiviteleri: Korelasyon ve çok değişkenli analizlerin kullanımı. Gıda Arş. Int. 2015 , 76 , 449-457. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Popova, M .; Giannopoulou, E .; Skalicka-Woźniak, K .; Graikou, K .; Widelski, J .; Bankova, V .; Kalofonos, H .; Sivolapenko, G .; Gaweł-Bęben, K .; Antosiewicz, B .; vd. Polonya'dan propolisin karakterizasyonu ve biyolojik değerlendirmesi. Molecules 2017 , 22 , 1159. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Moncla, BJ; Guevara, PW; Wallace, JA; Marcucci, MC; Ne de JE; Bretz, WA Enterococcus türlerine karşı tipik propolisin inhibitör aktivitesi . Z. Naturforsch. C. 2012 , 67 , 249-256. [ Google Akademik ] [ PubMed ]
Uzel, A .; Sorkun, K .; Önçağ, Ö .; Çoğulu, D .; Gençay, Ö .; Salih, B. Dört farklı Anadolu propolis örneğinin kimyasal bileşimleri ve antimikrobiyal aktiviteleri. Microbiol. Res. 2005 , 160 , 189-195. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Popova, MP; Chinou, IB; Marekov, IN; Bankova, VS Cretan propolis'ten antimikrobiyal aktiviteye sahip Terpenes. Bitki Kimyası. 2009 , 70 , 1262–1271. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Popova, M .; Dimitrova, R .; Al-Lawati, H .; Tsvetkova, I .; Najdenski, H .; Bankova, V. Omani propolis: Kimyasal profil oluşturma, antibakteriyel aktivite ve yeni propolis bitki kaynakları. Chem. Cent. J. 2013 , 7 , 158. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Wojtyczka, RD; Dziedzic, A .; İdzik, D .; Kępa, M .; Kubina, R .; Kabała-Dzik, A .; Smoleń-Dzirba, J .; Stojko, J .; Sajewicz, M .; Wąsik, TJ Staphylococcus aureus klinik izolatlarının tek başına veya antimikrobiyal ilaçlarla kombinasyon halinde propolis ekstraktına duyarlılığı . Moleküller 2013 , 18 , 9623-9640. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Patel, J .; Ketkar, S .; Patil, S .; Fearnley, J .; Mahadik, KR; Paradkar, AR Uygulama için niosomal bazlı sistem aracılığıyla propolisin antimikrobiyal etkinliğinin güçlendirilmesi. İntegr. Med. Res. 2014 , 4 , 94-101. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Schmidt, EM; Stok, D .; Chada, FJG; Parmak, D .; Sawaya, AC; Eberlin, MN; Felsner, ML; Quináia, SP; Monteiro, MC; Torres, YR A Brezilya taze ve yaşlı propolisinin karakterizasyonu ve biyolojik özellikleri arasındaki karşılaştırma. Biomed. Res. Int. 2014 , 2014 , 257617. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Campos, JF; dos Santos, UP; Macorini, LFB; de Melo, AMMF; Balestieri, JBP; Paredes-Gamero, EJ; dos Santos, EL Melipona orbignyi'den (Hymenoptera, Apidae) propolisin antimikrobiyal, antioksidan ve sitotoksik aktiviteleri . Food Chem. Toxıcol. 2014 , 65 , 374-380. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Campos, JF; Dos Santos, UP; da Rocha Pdos, S .; Damião, MJ; Balestieri, JB; Cardoso, CA; Paredes-Gamero, EJ; Estevinho, LM; de Picoli Souza, K .; Dos Santos, EL İğnesiz arı Tetragonisca fiebrigi'den (Jataí) gelen propolisin antimikrobiyal, antioksidan, antienflamatuar ve sitotoksik aktiviteleri . Evid. Tabanlı Tamamlayıcı. Alternat. Med. 2015 , 2015 , 296186. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Massaro, CF; Simpson, JB; Powell, D .; Brooks, P. Bal arısının ( Apis mellifera ligustica ) propolisin subtropikalden kimyasal bileşimi ve antimikrobiyal aktivitesi . Sci. Nat. 2015 , 102 , 68. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Regueira, NMS; Tintino, SR; da Silva, ARP; Costa, MDS; Boligon, AA; Matias, EFF; de Queiroz Balbino, V .; Menezes, IRA; Melo Coutinho, HD Brezilya kırmızı propolisinin mevsimsel değişimi: Antibakteriyel aktivite, sinerjistik etki ve fitokimyasal tarama. Food Chem. Toxıcol. 2017 , 107 PT B , 572-580. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Dantas Silva, RP; Machado, BA; Barreto, GA; Costa, SS; Andrade, LN; Amaral, RG; Carvalho, AA; Padilha, FF; Barbosa, JD; Umsza-Guez, MA Çeşitli Brezilya propolis özütlerinin antioksidan, antimikrobiyal, antiparaziter ve sitotoksik özellikleri. PLOS ONE 2017 , 12 , e0172585. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
El-Ani, I .; Zimmermann, S .; Reichling, J .; Wink, M. Avrupa propolisinin antimikrobiyal aktiviteleri tek başına ve antibiyotiklerle birlikte çeşitli coğrafi kökenlerden toplanmıştır. Tıp 2018 , 5 , 2. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
El-Guendouz, S .; Aazza, S .; Lyoussi, B .; Bankova, V .; Popova, M .; Neto, L .; Faleiro, ML; Miguel, MDG Fas propolis: Staphylococcus aureus'a karşı sürekli maruziyetten sonra direnç indüksiyonu olmayan doğal bir antioksidan, antibakteriyel ve antibiyofilm. Evid. Tabanlı Tamamlayıcı. Alternat. Med. 2018 , 2018 , 9759240. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Yue-Wen, C .; Siou-Ru, Y .; Chieh, T .; Yu-Hsiang, Y. Tayvan yeşil propolisinden propolinlerin antibakteriyel aktivitesi. J. Food Drug Anal. 2018 , 26 , 761-768. [ Google Akademik ]
Nina, N .; Quispe, C .; Jiménez-Aspee, F .; Theoduloz, C .; Feresín, GE; Lima, B .; Leiva, E .; Schmeda-Hirschmann, G. Orta Şili'deki Región del Maule'den antibakteriyel aktivite, antioksidan etki ve propolisin kimyasal bileşimi. Moleküller 2015 , 20 , 18144-18167. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Wojtyczka, RD; Kępa, M .; İdzik, D .; Kubina, R .; Kabała-Dzik, A .; Dziedzic, A .; Wąsik, TJ Polip propolisin biyofilm oluşturan Staphylococcus epidermidis suşlarına karşı etanolik ekstraktının in vitro antimikrobiyal aktivitesi . Evid. Tabanlı Tamamlayıcı. Alternat. Med. 2013 , 2013 , 590703. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Kim, MJ; Kim, CS; Kim, BH; Ro, SB; Lim, YK; Park, SN; Cho, E .; Ko, JH; Kwon, SS; Ko, YM; vd. Kore propolisinin Kore'den izole edilen mutans streptokoklara karşı antimikrobiyal etkisi. J. Microbiol. 2011 , 49 , 161. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Barrientos, L .; Herrera, CL; Karadağ, G .; Ortega, X .; Veloz, J .; Alvear, M .; Cuevas, A .; Saavedra, N .; Salazar, LA Şili propolisinin kimyasal ve botanik karakterizasyonu ve karyojenik bakteriler üzerindeki biyolojik aktivite Streptococcus mutans ve Streptococcus sobrinus . Braz. J. Microbiol. 2013 , 44 , 577-585. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]
Martins, ML; Leite, KL; Pacheco-Filho, EF; Pereira, AF; Romanos, MTV; Maia, LC; Cavalcanti, YW Kırmızı propolis hidro-alkolik ekstraktının Streptococcus mutans biyofilm oluşumunu ve dental emaye demineralizasyonunu kontrol etmede etkinliği . Arch. Oral Biol. 2018 , 93 , 56-65. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Righi, AA; Alves, TR; Negri, G .; Marques, LM; Breyer, H .; Salatino, A. Brezilya kırmızı propolis: Bildirilmemiş maddeler, antioksidan ve antimikrobiyal aktiviteler. J. Sci. Gıda Tarım 2011 , 91 , 2363–2370. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
De Marco, S .; Piccioni, M .; Pagiotti, R .; Pietrella, D. Pseudomonas aeruginosa'ya karşı propolis ve tomurcuk kavak reçinelerinin antibiofilm ve antioksidan aktivitesi . Evid. Tabanlı Tamamlayıcı. Alternat. Med. 2017 , 2017 , 5163575. [ Google Akademik ] [ CrossRef ] [ PubMed ]
Campana, R .; Patrone, V .; Franzini, BT; Diamantini, G .; Vittoria, E .; Baffone, W. İnsan Campylobacter jejuni'ye karşı iki propolis örneğinin antimikrobiyal aktivitesi . J. Med. Gıda. 2009 , 12 , 1050-1056. [ Google Akademik ] [ CrossRef ]

***maturidi*** · 28 July 2020, 16:32

ARAŞTIRMA YAZISI

Propolis: Candida türleri enfeksiyonlarıyla savaşmak için potansiyel bir doğal ürün

Flávia K Tobaldini-Valerio1,2,3, Patricia S Bonfim-Mendonça1, Helen C Rosseto4, Marcos L Bruschi4, Mariana Henriques2, Melyssa Negri1, Sonia Silva *, 2 ve Terezinha IE Svidzinski

Amaç: Propolisin Candida türü planktonik hücrelere ve muadili biyofilmlere etkisini değerlendirmek. Gereç ve yöntem: Kandida planktonik hücrelerde MİK değerleri, zaman öldürme eğrileri ve filamentasyon formu inhibisyonu belirlendi. Propolisin Candida biyofilmleri üzerindeki etkisi CFU'ların ölçümü ile değerlendirildi. Bulgular: 220 ila 880 μg / ml arasında değişen MIC değerleri C. albicans ve C. parapsilosis üzerinde C. tropicalis hücrelerine göre daha yüksek verim göstermiştir. Buna ek olarak, propolis Candida türü biyofilm oluşumunu önleyebildi ve olgun biyofilmlerini ortadan kaldırarak C. tropicalis ve C. albicans filamentasyonunda önemli bir azalma sağladı. Sonuç: Propolis, Candida virülans faktörlerinin bir inhibitörüdür ve kandidiyazla mücadelede yenilikçi bir alternatiftir. İlk taslak sunuldu: 8 Aralık 2015; Yayına kabul edildi: 20 Mayıs 2016; Çevrimiçi yayın tarihi: 9 Ağustos 2016
Candida türleri, sağlıklı bireylere zarar vermeden cilt, GI yolu, genitoüriner sistem, orofarinks ve üst solunum yollarında yaygın olarak bulunan insan komensal mikroplardır [1]. Bununla birlikte, konakçı bağışıklık ve savunma sistemi zayıflatıldığında veya bazı uygun koşullar altında, fırsatçı olan bu türler enfeksiyonlara neden olabilir [2]. Bu enfeksiyonlar, vulvovajinal, özofagus veya orofaringeal kandidiyazis gibi yüzeyselden, bağışıklığı baskılanmış popülasyonlar arasında yüksek mortalite ile ilişkili olan kandidemi dahil hayatı tehdit eden invaziv bozukluklara kadar değişebilir [1]. Uzun yıllar boyunca Candida albicans, Candida cinsinin neden olduğu enfeksiyonların çoğunluğundan (% 60-80) sorumlu baskın tür olarak bildirilmiştir [3]. Ancak, diğer C olmayan. albicans Candida glabrata, Candida tropicalis ve Candida parapsilosis gibi Candida (NCAC) türleri, çoğunlukla antifungal ajanların gelişigüzel reçetelenmesi nedeniyle sıklıkla izole edilmiştir [4-6]. Ayrıca, kandidiyaz patogenezi tüm Candida türleri için ortaktır ve tıbbi cihazlara veya konakçı hücrelere yapışabilme, biyofilm gelişimi ve ipliksi form geçişi de dahil olmak üzere bir dizi öldürücü faktör tarafından kolaylaştırılmaktadır [7]. Klinik açıdan Candida biyofilmleri, yüksek düzeyde antifungal direnç nedeniyle tedavi başarısızlığı ile ilişkilidir [8,9]. Bu gerçek, sadece hasta enfeksiyonunun tedavisi için değil, aynı zamanda halk sağlığı için de ciddi klinik kaygıları tetiklemektedir [10-12]. İlaca dirençli patojenlerin görülme sıklığı, sınırlı sayıda terapötik seçenek ve bileşiklerin toksisitesi, alternatif ürünlerin geliştirilmesini teşvik eden doğal ürünlerin antimikrobiyal aktivitesine dikkat çekmiştir [13-15]. Propolis, bal arılarının, özellikle Apis mellifera'nın dallardan ve çiçeklerden topladığı reçineli bir maddedir. Karmaşık bir kimyasal bileşime sahiptir ve polifenoller (çoğunlukla flavonoidler), mumlar, reçineler, balzamlar, amino asitler ve diğer yağlar bakımından zengin olduğu bilinmektedir, bu nedenle propolis bileşimi bitki kaynağına göre değişir [16-18]. Propolisin antimikrobiyal, antioksidan, antikanser, antiviral, immünomodülatör, yara iyileşmesi ve antiseptik etki gibi çok çeşitli terapötik özelliklere sahip olduğu bildirilmektedir [19-28]. Bu nedenle, Candida enfeksiyonlarıyla ilişkili problemleri bilmek, mikrobiyal virülansı azaltabilen alternatif tedavilerin geliştirilmesi son derece önemlidir [29]. C. albicans'ın virülans faktörlerinin propolis tarafından inhibisyonu hakkında çok az bilgi mevcuttur [24,30–31]; yine de bilgi NCAC türleri ile ilgili hala kıttır. Bu nedenle, bu çalışmanın temel amacı propolisin C. albicans, C. parapsilosis ve C. tropicalis planktonik hücrelerinin klinik muadilleri ve benzerlerinin biyofilmleri üzerindeki etkisini araştırmaktı.

Malzemeler ve yöntemler

● Propolisin kökeni, ekstraktın hazırlanması ve karakterizasyonu

Yeşil Brezilyalı propolis, Mel Apinor'dan (Wal-Luz arı kovanı, Maringá, Paraná Eyaleti, Brezilya) satın alındı. Bu malzeme -18 ° C'de en az 24 saat soğutuldu. Daha sonra natura propolis, endüstriyel bir karıştırıcıda ezildi, plastik torbalarda paketlendi ve bir dondurucuda (-18 ° C) saklandı. Propolis özütü (PE), turbo-ekstraksiyon tekniği ile etanol içindeki% 30 (a / a) önceden indirgenmiş propolisten hazırlanmıştır [32]. Kısaca, bir bardak turbo ekstraktörde, 30 g propolis 70 g etanol (% 96, h / h) ile karıştırıldı ve bu sistem 24 saat buzdolabında tutuldu. Bu süreden sonra buharlaştırılmış alkol ağırlığı tamamlandı ve karışım, turbo ekstraksiyonuna tabi tutuldu. Daha sonra, filtre kağıdından vakumla süzüldü ve kehribar cam şişede saklandı. PE'nin kalite kontrolünün değerlendirilmesi için, kullanılan teknikler resmi kodlarla onaylanmış ve birçok yazar tarafından, göreceli yoğunluk, pH, kuruluk kalıntısı (DR) ve toplam fenol içeriği (TPC) olarak tanımlanmıştır [18]. DR'yi belirlemek için, su banyosunda 3.0 g PE miktarı yavaşça çalkalanarak buharlaştırıldı.

● Candida suşları

On dört C. albicans (kandan 12 izolat ve idrardan iki izolat), 14 C. parapsilosis (13 kan ve bir idrardan) ve 14 C. tropicalis (dört kan ve on idrardan) kullanıldı. Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu'ndan (ATCC) üç Candida referans suşu, yani C. albicans ATCC 90028, C. parapsilosis ATCC 22019 ve C. tropicalis ATCC 40042 bu çalışmaya dahil edilmiştir. İdrar ve kandan klinik izolatlar ticari antifungallere karşı yüksek direnç nedeniyle seçilmiştir [34] ve Tıbbi Mikoloji Laboratuvarı, Universidade Estadual de Maringá, Brezilya'nın arşivinin toplanması için elde edilmiştir. Her deneyde izolatlar, gece boyunca 37 ° C'de Sabouraud Dekstroz Agar (SDA; Merck, Münih, Almanya) veya Sabouraud Dekstroz Broth (SDB; Merck, Münih, Almanya) üzerinde alt kültürlendi. Hücresel yoğunluk, her tahlilden önce bir Neubauer odası kullanılarak ayarlandı.

Daha sonra konsantre materyal, Ohaus-MB 200 kızılötesi analitik terazisi (Pine Brook, NJ, ABD) üzerinde sabit ağırlığa kadar 110 ° C'de kurutuldu. DR, en azından üç tespitin ortalamasını temsil eder. TPC, bazı modifikasyonlarla Folin-Ciocalteau yöntemi ile ölçüldü [33]. Bunun için 25 ml'lik bir şişede 10 ml saf su ve 1 ml fosfomolibdotungstik reaktif R (Folin-Ciocalteau) ile bir PE (2.0 ul) alikuotu karıştırıldı. Daha sonra hacim,% 14.06 (a / h) sulu bir sodyum karbonat çözeltisi ile tamamlandı. Telafi edici çözelti olarak, arıtılmış su kullanılmıştır. Çözeltilerin beklemesi sağlandı, oda sıcaklığında 15 dakika süreyle ışıktan korundu ve daha sonra absorbans, 760 nm dalga boyunda bir Shimadzu çift ışınlı UV-VIS spektrofotometresinde (Model 1650, Tokyo, Japonya) okundu. Farklı gallik asit dilüsyonlarına sahip bir kalibrasyon eğrisi referans olarak kullanılmıştır. Böylece, TPC, PE'deki toplam fenolik maddelerin yüzdesi olarak ifade edildi. Testler ortalama altı değerlendirmeyi oluşturdu.

● Propolisin planktonik hücreler üzerindeki etkisi

Antifungal duyarlılık testi PE'nin antifungal aktivitesi, doğal ürünler için bazı değişikliklerle [36] CLSI standardı M27-A3 [35] 'e göre et suyu mikrodilüsyon yöntemi ile belirlenmiştir. Bu test için seri seyreltme, 1: 2 ila 1: 1024 arasında iki oranda gerçekleştirildi. Bu şekilde PE'nin konsantrasyonları, gallik asit içinde eksprese edilen toplam fenol içeriğinin 13.9 ila 7100 μg / ml arasında değişmektedir. Test RPMI 1640 (Roswell Park Memorial Institute, Gibco) içinde l-glutamin (sodyum bikarbonat ile) ve 0.165 M 3- (N-morfolino) propanesülfonik asit (pH 7.2) tampon (Sigma) ve% 2 olarak gerçekleştirildi. 96 oyuklu düz tabanlı mikrotitrasyon plakalarında glikoz (Orange Scientific, Braine-l'Alleud, Belçika). 37 ° C'de 72 saat süreyle inkübasyondan sonra, MIC'ler doğrudan gözlem yoluyla belirlenmiştir. MIC sonuçları TPC'ye göre değerlendirilmiş ve ilacın yokluğunda yetiştirilen organizmalara kıyasla büyümenin% 100'ünü azaltan TPC konsantrasyonu olarak tanımlanmıştır. Minimum fungisidal konsantrasyon (MFC), SDA plakaları üzerinde, farklı PE konsantrasyonlarına maruz bırakılan süspansiyonların tohumlanmasıyla belirlenmiştir. Plakalar daha sonra 37 ° C'de 24 saat inkübe edildi. MFC, mikroorganizmaların geri kazanımının gözlenmediği test bileşiğinin en düşük konsantrasyonu olarak tanımlandı. Flukonazol bir kontrol olarak kullanıldı (Pfizer, Brezilya) ve testler ayrıca CLSI'nin M27-A3 yönergelerine göre belirlendi. Flukonazolün MİK'si, bu antifungalın, ilaçsız pozitif kontrole göre büyümenin% 50'sini inhibe edebilen en düşük konsantrasyonu olarak tanımlandı. CLSI tarafından tanımlandığı gibi, negatif kontroller (sadece ortam), pozitif kontroller (orta ve maya) ve referans suşu C. albicans ATCC 90028 her testte kullanıldı. Suşları duyarlılık (S), doz bağımlı bağımlı (DDS) ve dirençli (R) olarak tanımlamak için flukonazole duyarlılık sınır değerleri CLSI takviyesi M27- S3 [37] 'e göre kullanıldı: flukonazol (S ≤ 8 μg / ml; DDS = 16-32 μg / ml; R ≥ 64 μg / ml).

Zaman öldürme eğrisi prosedürleri

Üç Candida referans suşu olan C. albicans ATCC 90028, C. parapsilosis ATCC 22019 ve C. tropicalis ATCC 40042 için daha önce tarif edilenlerde küçük değişiklikler yapılarak zaman öldürme eğrileri belirlendi [38]. Testten önce, mantarlar SDA üzerinde alt-kültürlendi ve aşı, bir Neubauer odası kullanılarak RPMI 1640 ortamında, 1-5 x 105 maya / ml'ye ayarlandı. Daha sonra, her Candida suşu süspansiyonu, 450 ve 900 ug / ml TPC'ye eşdeğer konsantrasyonlarda PE varlığında büyütüldü. Propolis içermeyen RPMI 1640 ortamı, pozitif kontrol olarak kullanıldı. Test süspansiyonları bir çalkalayıcıya yerleştirildi ve 37 ° C'de inkübe edildi. Önceden belirlenmiş zaman noktalarında (0, 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 24, 28 ve 36 s), CFU'ların belirlenmesi için SDA üzerinde seri seyreltmeler yapıldı. 37 ° C'de 24 saat süreyle inkübasyonun ardından CFU sayısı belirlendi.
Propolisin filaman formu geçişine etkisi
Propolisin Candida türü filamantasyonuna karşı etkisini değerlendirmek için dört C. albicans, dört C. parapsilosis ve dört C. tropicalis klinik izolatları ve bunların ilgili suşları test edilmiştir. Klinik izolatlar rastgele seçildi. Candida hücreleri gece boyunca YPD (% 1 maya ekstraktı;% 2 pepton;% 2 dekstroz) ortamında büyütüldü. Ve daha sonra, 1 × 106 maya / ml, RPMI 1640 ortamında,% 10 fetal sığır serumu (FBS) ile PE'nin varlığında veya yokluğunda (450 μg / ml TPC, hepsi için uyumlu bir konsantrasyon kullanmak üzere seçildi) inkübe edildi. MICs değerlerine uygun türler), 4 saat boyunca 37 ° C'de. Blastospor ve filamentli formlar, Toenjes ve ark.'nın tarif ettiği kriterlere göre bir faz kontrast mikroskobu altında gözlem yoluyla sayıldı. (2005) [39]. Her suş için iki kopya halinde 100'den fazla hücre sayıldı. Ek olarak, mikroorganizmaların kalkoflor beyazı (Sigma-Aldrich, St Louis, Missouri, EUA) ile boyanmasından sonra hücre morfolojilerinin görüntüleri elde edilmiştir. Hücreler, birleştirilmiş BX51 Olympus epifloresans mikroskobu ile görüntülendi DP72 dijital kamera ile (Olympus Portugal SA, Porto, Portekiz). Tüm görüntüler Olympus Cell-B yazılımı kullanılarak elde edildi.

● Propolisin antibiyofilm etkisi

Bilindiği gibi biyofilmler, mikroorganizmanın muadili planktonik hücrelere göre 100 kat daha fazla direnç olarak tanımlanan topluluğudur [7]. Bu nedenle, çalışmanın bu bölümünde kullanılan PE konsantrasyonları bu konsepte ve önceki antimikrobiyal duyarlılık bulgularımıza dayanmaktadır. Propolisin biyofilm oluşumu üzerindeki etkisi PE'nin Candida türlerinin biyofilm oluşumu üzerindeki etkisini değerlendirmek için, yapışma aşamasından sonra PE eklenmiştir (2 saat). Bunun için Candida hücreleri, 24 saat boyunca 37 ° C'de SDA üzerinde büyütüldü, daha sonra SDB'ye aşılandı ve 18 saat süreyle 37 ° C'de 120 rpm'de çalkalanarak inkübe edildi. İnkübasyondan sonra hücreler, 3000 x g'de 10 dakika, 4 ° C'de santrifüj edilerek toplandı ve iki kez 15 ml fosfat tamponlu salin ([PBS]; pH 7; 0.1 M) ile yıkandı. 1 x 105 maya / ml hücre süspansiyonu RPMI 1640 ortamında hazırlandı, 200 ul süspansiyon 96 oyuklu polistiren plakalara aşılandı ve bağlanmaya izin vermek için 37 ° C'de bir çalkalayıcıda 120 rpm / dak. 2 saat inkübe edildi. abiyotik yüzeye hücre. Yapışmayan hücreler steril PBS ile yıkanarak uzaklaştırıldı. Daha sonra her bir oyuğa 200 ul PE (500, 700 ve 1400 μg / ml TPC konsantrasyonları RPMI 1640 ortamında) ilave edildi. Plakalar, biyofilm oluşumuna izin vermek için 37 ° C'de 24 saat inkübe edildi. Negatif kontroller de (sadece RPMI 1640 ortamının 200 ul'si) dahil edildi. Biyofilmler CFU tayini ile analiz edildi. Bunun için toplam ortam çıkarıldı ve biyofilmler bir kez 200 ul PBS ile yıkandı. Daha sonra biyofilmler ilgili kuyucuklardan sıyrıldı ve süspansiyonlar hücreleri matristen ayırmak için yaklaşık 2 dakika kuvvetlice vortekslendi [13]. Seri seyreltmeler PBS içinde yapıldı, SDA üzerine kaplandı ve 24 saat 37 ° C'de inkübe edildi. Sonuçlar CFU'ların logları açısından sunuldu.

Propolisin önceden oluşturulmuş biyofilmler üzerindeki etkisi

PE'nin etkisi 24 saat önceden oluşturulmuş biyofilmler üzerinde değerlendirildi. Bunun için, yukarıda tarif edildiği gibi 24 saat boyunca biyofilmler oluşturuldu, ortam aspire edildi ve yapışkan olmayan hücreler biyofilmlerin bir kez 200 ul PBS ile yıkanmasıyla çıkarıldı. Daha sonra, her bir oyuğa 200 ul PE (RPMI 1640 ortamında 500, 700 ve 1400 μg / ml TPC) ilave edildi. Biyofilmler 24 saat daha, 37 ° C'de bir çalkalayıcı üzerinde 120 rpm / dakikada inkübe edildi. PE'nin Candida biyofilmleri üzerindeki etkisi, yukarıda tarif edildiği gibi CFU sayısının ölçülmesi yoluyla değerlendirildi. Sonuçlar CFU logları açısından sunuldu.

Propolisin biyofilm yapısı üzerindeki etkisi

Candida biyofilm yapısı ve hücre morfolojisi, PE varlığında ve yokluğunda (1400 μg / ml TPC) büyüme sonrası, elektron mikroskopisi (SEM) taraması ile karakterize edildi. Biyofilmler yukarıda tarif edildiği gibi hazırlandı, ancak 24 oyuklu mikrotiter plakalar (turuncu Scientific, Braine-l’Alleud, Belçika) kullanıldı. Biyofilmler, artan etanol konsantrasyonları (10 dakika boyunca% 70 etanol, 10 dakika boyunca% 95 etanol ve 20 dakika boyunca% 100 etanol kullanılarak) ile dehidre edildi ve daha sonra 20 dakika boyunca havada kurutuldu. Numuneler analize kadar bir desikatör içinde tutuldu. Gözlemden önce, oyukların tabanı çıkarıldı ve alüminyum saplamalara monte edildi, altınla kaplandı ve bir S-360 tarama elektron mikroskobu (Leo, MA, ABD) kullanılarak görüntülendi.

● Sitotoksisite deneyi

Fibroblastlar 3T3 (CCL-163),% 10 buzağı sığır serumu (Gibco) ve% 1 penisilin streptomisin (Gibco) içeren Dulbecco Modifiye Kartal Ortamı (DMEM - Gibco) içinde büyütüldü. Sonra ayrılma, 105 oyuklu bir plakaya 105 hücre / ml'lik bir süspansiyon ilave edildi ve hücrelerin,% 80'lik birleşmeye ulaşana kadar büyümelerine izin verildi. Sitotoksisite deneylerinden önce, oyuklar iki kez PBS ile yıkandı. Hücrelere PE (220 ila 1400 ug / ml TPC konsantrasyonları) ilave edildi ve% 5 CO2 altında 37 ° C'de 24 saat inkübe edildi. Aynı etanol konsantrasyonu ile muamele edilmiş hücreler kontrol olarak kullanılmıştır. Daha sonra sitotoksisite, MTS (3- [4,5-dimetiltiyazol-2-il] -5- [3-karboksimetoksifenil] -2- [4-sülfofenil] -2H-tetrazolium) fenol kırmızısı olmadan DMEM içinde. 4 saat sonra nihai çözeltinin absorbansı 490 nm'de okundu. Bileşiğin sitotoksisitesi, üç tekrarlı üç bağımsız deneyin ortalaması olarak sunulmaktadır [40]. Hücre canlılığı yüzdesi (% CV) aşağıdaki denklemle hesaplandı:% CV = (Abs örneği / Abs boş) × 100, burada boşluk hücreler ve MTS içeren ortamdır.

● İstatistiksel analiz

Veriler, en az üç bağımsız deneyin ortalama ± standart sapması (SD) olarak ifade edilmiştir. Sonuçlar, iki yönlü ANOVA ve ardından Bonferroni çoklu karşılaştırmaları, GraphPad Prism sürüm 6 (GraphPad Software, CA, ABD) kullanılarak karşılaştırıldı. Anlamlılık düzeyi p <0.05 olarak belirlendi.

Sonuçlar

● Propolis ekstraktının hazırlanması ve karakterizasyonu

Bu çalışmada kullanılan yeşil propolis örneği Paraná eyaletinin (Brezilya) kuzeyinde bulunan kovanlardan toplanmıştır. Arı kovanı, Baccaris drancunculifolia ve okaliptüs rezervinin baskın olduğu yerli ormanlarla çevrilidir. Bu bölgenin yeşil Brezilya propolisi "tip BRP" olarak sınıflandırılmıştır. Önceki çalışmalarda, bu tip propolis içeren hazırlanan etanolik ekstreler standartlaştırılmış ve kimyasal olarak karakterize edilmiştir [18,41].

PE'nin fizikokimyasal değerlendirmesi, pH'ın 5.12 ± 0.05 olduğunu ve nispi yoğunluğun 0.8722 ± 0.0009 g / ml-1 olduğunu gösterdi. PE'nin DR değeri% 19.33 ± 0.01 (a / a) ve elde edilen TPC değeri% 1.42 ± 0.07 (a / a) olarak belirlendi. Bu değerler literatürle uyumlu olup, iyi fizikokimyasal özelliklerini göstermektedir ve bu durumda PE'nin mevcut çalışmada kullanılabileceğini göstermektedir [18,36,41].

Propolisin Candida planktonik hücreler MIC'ler ve MFC'ler üzerindeki etkisi PE MIC'lerinin sonuçları% 50 (yani test edilen izolatların% 50'sini inhibe edebilen konsantrasyon) ve% 90 (yani% 90'ı inhibe edebilen konsantrasyon) Farklı patojenik mayalar için test edilen izolatların) Tablo l'de gösterilmektedir. PE, 220 ila 880 ug / ml TPC arasında değişen MIC değerleri olan Candida türlerinin tüm klinik izolatlarına karşı benzer ve güçlü inhibitör aktivite gösterdi. Her durumda, MIC değeri muhabir MFC değerine eşitti. Bu sonuçlara dayanarak, 450-1400 μg / ml TPC arasındaki PE konsantrasyonları aşağıdaki deneylerde kullanılmak üzere seçilmiştir. Ayrıca, sitotoksisite değerlendirmesine izin vermek için PE ile doğrudan temastan sonra (bu konsantrasyonlarda) fibroblastların yaşayabilirlik yüzdesi belirlendi. Sonuçlar, test edilen tüm PE konsantrasyonları için sitotoksisitenin% 35'in (% 15-35) altında olduğunu göstermiştir (veriler gösterilmemiştir). Zaman öldürme eğrilerinin belirlenmesi Zamana (36 saat) karşı log10 CFU / ml'den çizilen PE'nin öldürme aktivitesi, Şekil l'de gösterilmektedir. Candida türlerinin büyümesi üzerinde iki farklı etki gözlenmiştir. 450 μg / ml TPC'de, test edilen tüm türler için, hafif önleyici etki 12 saate kadar gözlendi, ancak bu süreden sonra elde edilen eğriler kontrol için olanlarla hemen hemen aynı oldu. 900 ug / ml TPC konsantrasyonunda, kontrol grubu ile karşılaştırıldığında canlı hücre sayısında önemli bir zamana bağlı azalma gözlenmiştir. Ek olarak, sonuçlar PE etkisinin C. albicans ve C. parapsilosis türlerinde daha belirgin olduğunu ve 36 saatte ≥% 99,9 (4 ve 3 log) azalmasıyla kontrol grubuna (PE'siz) kıyasla daha belirgin olduğunu göstermiştir. Aslında 36 saatte bile C. tropicalis tarafından gözlemlenen azalma, azalmanın yaklaşık% 90'ını (1.5 log) aşmamıştır. Bu tür, C. albicans ve C. parapsilosis ile karşılaştırıldığında, MIC'den PE'ye daha yüksekti.

Candida türleri lifli formasyon oluşumu üzerinde propolis etkisi

Propolisin mayanın filamentli formlara geçişi üzerindeki etkisi değerlendirildi (Şekil 2). C. albicans, C. tropicalis ve C. parapsilosis türlerinin dört klinik izolatı ve ilgili referans suşları analiz edildi. Sonuçlar, C. parapsilosis'in ipliksi formlar oluşturamadığını (veriler gösterilmemiştir) ve C. albicans'ın C. tropicalis'den daha fazla ipliksi formlar sunduğunu ortaya koymuştur. Ayrıca PE'nin (450 ug / ml TPC konsantrasyonunda), 4 saatlik maruziyetten sonra, tüm C. albicans ve C. tropicalis suşlarında filamentöz formların oluşumunu yaklaşık% 80 ila 5 oranında azalttığı gözlenmiştir

(Şekil 2). .

● Propolis antibiyofilm aktivitesi

Bu çalışmanın ikinci amacı propolisin Candida biyofilm oluşumu (Şekil 3) ve Candida önceden oluşturulmuş biyofilmlere (Şekil 4) karşı aktivitesini değerlendirmektir. Sonuçlar PE'nin Candida biyofilmlerini türe ve suşa bağlı bir şekilde azaltabildiğini ortaya koydu. PE'nin biyofilm oluşumu üzerindeki etkisi ile ilgili olarak sonuçlar, her bir türün dört klinik izolatı ve bunun için ekilebilir hücre sayısında önemli bir azalma olduğunu ortaya koymuştur.

Şekil 1. Propolis ekstresinin Candida türlerine karşı öldürme kinetiği. (A) C. albicans Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu (ATCC) 90028; (B) C. parapsilosis ATCC 22019; (C) C. tropicalis ATCC 40042. Standartlaştırılmış maya hücreleri süspansiyonları 450 ve 900 ug / ml toplam fenol içeriğine maruz bırakıldı. Belirlenen zaman aralıklarında numuneler seri olarak seyreltildi ve koloni sayıları için plakalandı. Her veri noktası üç deneyden ortalama sonucu ± standart sapmayı (hata çubukları) temsil eder.
ilgili referans suşları (Şekil 3A). Test edilen üç PE konsantrasyonu arasında önemli bir fark gözlenmemiştir. Candida albicans suşları, test edilen tüm PE konsantrasyonları için sırasıyla yaklaşık 2.8 ve 2 log'luk bir azalma ile en yüksek biyofilm redüksiyonunu (∼3.5 log) ve ardından C. parapsilosis ve C. tropicalis gösterdi (Şekil 3A). Önceden oluşturulmuş Candida biyofilmlerine karşı propolis etkisi (Şekil 4A), biyofilm oluşumu üzerindeki etkisine kıyasla daha düşüktü. Aslında, biyofilm olgunlaşma aşamasında, incelenen tüm Candida suşları için 500 ug / ml TPC için biyofilm azalması gözlenmemiştir. Ayrıca, PE konsantrasyonları 700 μg / ml TPC ile önceden oluşturulmuş biyofilm azalması, kontrol grubuyla karşılaştırıldığında biyofilm oluşumu için gözlemlenenlere benzerdi. C. tropicalis ile ilgili olarak, 500 ve 700 ug / ml TPC'de PE sırasıyla yaklaşık 1.5 ve 2.4 log azaltabilmiştir. Bu azalma, biyofilm oluşum çalışmalarında (Şekil 3A) gözlemlenenlerden daha yüksekti, hatta 1400 ug / ml TPC'nin PE konsantrasyonları için bile, burada CFU sayısında yaklaşık 3.5 günlük bir azalma gözlemlendi.

● Propolisin biyofilm yapısı üzerindeki etkisi

PE'nin Candida türü biyofilm oluşumu (Şekil 3B) ve önceden oluşturulmuş biyofilmlere (Şekil 4B) karşı etkisini incelemek için SEM analizi yapıldı. Bunun için, bir klinik izolatın biyofilmleri ve ilgili referans türü, 1400 ug / ml TPC'de PE ile muamele edildi ve işlenmemiş biyofilmlerle karşılaştırıldı. Muamele edilmemiş biyofilmlerin incelenmesi, Candida biyofilmlerinde farklı hücresel morfolojilerin varlığını gösterdi. Candida albicans ve C. parapsilosis biyofilmleri, düzensiz kümeleri olan bir blastokonidya agregat tabakası sergilerken, C. tropicalis biyofilmleri, maya hücreleri daha birbirine bağlı daha kompakt ve sürekli bir yapı geliştirdi (Şekil 3B ve Şekil 4B: Kontroller). İlginç bir şekilde, Candida türlerinin PE ile tedavi edildiğinde biyofilmlerinin (1400 μg / ml TPC) hücre sayısında önemli bir azalma ve tutarlı bir biyofilm bozulması olduğu gözlenmiştir (Şekil 3B ve Şekil 4B: Tedavi Edildi). Ek olarak, PE ile muamele edilmiş biyofilmler üzerindeki maya hücreleri, hücre duvarlarında morfolojik değişiklikler ve bütünlük kaybı geçirdi. Ayrıca, PE varlığında C. albicans biyofilmleri ipliksi formların sayısında bir azalma göstermiştir.

Tartışma

Son yirmi yılda kandidiyaz insidansı önemli bir artış göstermiştir ve C. albicans hala en yaygın türdür, ancak NCAC türlerinin sıklığı da artmaktadır [42-44]. Bu gerçek, mayaların klinik uygulamada en sık kullanılan antifungal ajanlara duyarlılığının düşük olmasından kaynaklanabilir [45]. Ayrıca morfolojik geçiş ve biyofilm oluşumu gibi virülans faktörlerinin ekspresyonu, tedavilerindeki güçlüklerle ilişkilendirilmiştir [2,46]. İlaca dirençli patojenlerin görülme sıklığı, sınırlı sayıda terapötik seçenek ve geleneksel bileşiklerin toksisitesi, alternatif ürünlerin geliştirilmesini teşvik eden doğal ürünlerin antimikrobiyal aktivitesine dikkat çekmiştir [47]. Propolis önemli antimikrobiyal aktivite göstermiştir ve bu biyoaktivite son yıllarda araştırılmıştır [24,48]. Propolisin antimikrobiyal aktivitesi karmaşıktır ve çeşitli güçlü biyolojik bileşenleri, özellikle fenolik ve flavonoid bileşikleri arasındaki sinerjistik aktiviteye bağlanmıştır [49]. Flavonoidler propolis'te yaygın olarak bulunan çok önemli bir polifenol sınıfı oluşturmaktadır [50]. Propolis biyolojik aktivitesinin büyük kısmı polifenollere atfedilir [51]. Yeşil Brezilya propolis tipi BRP zengin fenolik madde kaynağıdır; bunların çoğu prenile fenilpropanoidler ve sinnamik asitlerdir, başlıca prenil grupları taşıyan bileşiklerdir [18,36,41]. Bu nedenle, fizikokimyasal analiz,

Şekil 2. 4 saat boyunca 37 ° C'de fetal sığır serumu RPMI 1640 ortamında propolis özütü ile C. albicans ve C. tropicalis filamentasyonunun inhibisyonu. (A) Candida planktonik hücreleri propolis'e maruz bırakıldıktan (tedavi edilen) sonra gözlenen filamentöz formların yüzdesi. (B) Görüntüler, kalkoflor beyazı ile boyanmış bir floresan mikroskop kullanılarak elde edilen C. albicans ve C. tropicalis hücrelerini temsil etmektedir. Propolis özütü 450 ug / ml'lik bir konsantrasyonda ilave edildi. Yıldız işaretleri propolis kalıntılarını temsil eder. ATCC: Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu.

PE kalitesinin değerlendirilmesi. Sonuçlar PE'nin iyi özelliklerini gösterdi ve TPC'nin spektrofotometrik tayini polifenollerin miktarını karakterize etmek için yararlı oldu. Elde edilen değer TPC'nin% 1.42 ± 0.07 (a / a) idi ve bu miktar diğer araştırmalara uygundur [36,41]. Propolisin C. albicans'ın virülans faktörlerine karşı etkisi üzerine geliştirilen bazı çalışmalara rağmen [24,30–31] kıtlığı NCAC türlerini içeren çalışmalardır. Bu nedenle, bu çalışmanın temel amacı propolisin en önemli üç Candida türü olan C üzerindeki etkisini araştırmaktı. albicans, C. tropicalis ve C. parapsilosis. Hem planktonik hücreler hem de biyofilmler üzerindeki etkinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır.
İlk olarak, C. albicans, C. tropicalis ve C. parapsilosis suşlarının PE'ye planktonik yatkınlığı belirlendi (Tablo 1). Verilerimiz, tüm Candida türlerinin 220 ila 880 μg / ml TPC MIC aralığında PE'ye duyarlı olduğunu gösterdi. Dahası, bu çalışmalar PE'nin flukonazole (MIC 16 μg / ml) duyarlılık doz bağımlılığı olan suşlara karşı, yani C. tropicalis durumunda bile etkili olduğunu göstermiştir. Dolayısıyla bu sonuçlar Dalben-Dota ve ark. (2010) [36] Candida türlerinin PE'ye duyarlılığını göstermiştir. Bu yazarlar PE'nin MIC'sinin 6.14 ila 3145.50 mg / ml flavonoid içeriği (polifenol içeriğine dahil) arasında değiştiğini ve bunun

Şekil 3. Candida türleri tarafından biyofilm oluşumu sırasında propolis ekstraktı etkisinin Candida hücre biyofilmlerinin (A) sayısının logaritması ve taramalı elektron mikroskobu görüntüleri (B). Candida hücrelerinin 2 saat yapışmasına izin verildi, daha sonra propolis ilave edildi ve 37 ° C'de 24 saat daha inkübe edildi. Grafiklerde gösterilen hata çubukları standart sapmayı gösterir. Görüntülerde (a1 & a2) izolat klinik C. albicans (a3 & a4) ATCC C. albicans 90028 (b1 & b2) izole klinik C. parapsilosis (b3 & b4) ATCC C. parapsilosis 22019 (c1 & c2) izolatı temsil eder. klinik C. tropicalis (c3 & c4) ATCC C. tropicalis 40042. *, ** ve **** sırasıyla p <0.05, p <0.01 ve p <0.0001'e karşılık gelir. Kontroller: propolis ekstresi olmadan RPMI ortamında büyütülen biyofilmler; Arıtılmış: toplam fenol içeriğinin 1400 μg / ml varlığında RPMI ortamında büyütülen biyofilmler. Görüntülerdeki çubuk 20 μm'ye karşılık gelir. Büyütme × 1000. ATCC: Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu.

PE'nin C. albicans, C. parapsilosis ve C. tropicalis büyümesi üzerindeki kinetik etkisini belirlemek için bir zaman öldürme analizi yapıldı (Şekil 1). Sonuçlar, tüm türler için büyümesinde yaklaşık% 90 oranında azalma olduğunu ve Candida hücrelerinin yetiştirilebilirliğini etkili bir şekilde azalttığını ortaya koymuştur. Aslında PE yaklaşık üç log (% 99.9) C. albicans ve C. parapsilosis ve yaklaşık 1.5 log C. tropicalis azaltabilmiştir. Bu sonuçlar, C. tropicalis'in en yüksek MIC değerine sahip türler olduğu duyarlılık sonuçlarına uygundur. Önceki çalışmalar sadece PE'nin planktonik Candida tür hücrelerine karşı etkin bir aktivitesini gösterdiğinden [36,52] bu çalışma, PE'nin maya-filamentöz geçiş ve biyofilm oluşum yeteneği gibi Candida türü virülans özellikleri üzerindeki etkisini değerlendirerek bu bilgiyi genişletmeyi amaçlamaktadır. Hipha oluşumunun, C. albicans'ın enfeksiyona yol açan müteakip invazivlik ile konakçı dokulara nüfuz etmesine yardımcı olduğu bilinmektedir [53]. Böylece PE'nin ipliksi formların oluşumunu inhibe etme yeteneği değerlendirildi ve sonuçlar PE'nin C. albicans ve C. tropicalis'te maya ipliksi formların% 90'ını bloke edebildiğini gösterdi (Şekil 2). Maya-filamentöz formların PE ile geçişinin bu şekilde engellenmesi, Candida enfeksiyonlarını kontrol etmek için çok çekici bir seçenek sunar. Biyofilm oluşumu gibi birçok işlemde mayadan hifa hücrelerine morfolojik geçişin önemli olduğu daha önce bildirilmişti [54]. Bu nedenle, PE'nin yüksek maya-hipha geçişini etkin bir şekilde önleme kapasitesi, biyofilm oluşumunu önleme kabiliyeti ile ilişkili olabilir. Ayrıca, bu ürün çeşitli farmakolojik aktiviteleri ve düşük toksisitesi nedeniyle klinisyenlerin ve araştırmacıların dikkatini çekmiştir [20,55].

Mikroorganizmalar tarafından biyofilm oluşumu, kalıcı kolonizerler olmalarına, konakçı bağışıklık sistemi ve antibiyotiğin etkisine karşı direnç göstermelerine izin veren bir mekanizmadır [56]. İlginç bir şekilde PE'nin biyofilm oluşumunu inhibe edebildiği (Şekil 3) ve olgun biyofilmleri yok edebildiği gözlenmiştir.
(Şekil 4) C. albicans, C. parapsilosis ve C. tropicalis suşları. 450 ve 700 μg / ml TPC'de PE'nin biyofilm oluşumunun (Şekil 3A) yaklaşık% 90'ını inhibe edebildiğini ve 1400 μg / ml TPC'nin% 99,9'da önceden oluşturulmuş biyofilmleri azaltabildiğini vurgulamak önemlidir (Şekil 4A). . Önceki çalışmalar, farklı propolis konsantrasyonlarının (% 0.25-1.25) in vitro C. albicans biyofilm oluşumunun% 40-45'ini azaltabildiğini göstermiştir [57]. Ayrıca, Capoci ve ark. (2014) ayrıca, MIC'den daha düşük PE konsantrasyonunda C. albicans biyofilm oluşumu (<0.5 log) üzerinde küçük bir azalma olduğunu ortaya koymuştur [24]. Bununla birlikte, C. tropicalis ve C. parapsilosis için elde edilen ümit verici sonuçlar daha önce hiç belirtilmemiştir. SEM görüntüleri, PE'nin filamanı önleme yeteneğini güçlendirerek, ekilebilir hücre tayini (Şekil 3A ve Şekil 4A) ile gösterilen biyofilm bozulmasını (Şekil 3B ve Şekil 4B) desteklemektedir (Şekil 2).

Sonuç ve gelecek perspektifi

Bu çalışma PE'nin Candida planktonik hücreler ve biyofilmler üzerinde etkili olan güçlü bir antifungal ajan olduğunu göstermiştir. Bu etkilerin sadece C. albicans'a karşı değil, C. tropicalis ve C. parapsilosis gibi diğer NCAC türlerinde de gözlendiğini vurgulamak önemlidir. NCAC türlerinin geleneksel antifungal ajanlara karşı oldukça dirençli olduğu göz önüne alındığında, bu çok umut verici bir veridir. Candida virülansının inhibitörü olarak PE'nin bu özellikleri, klasik antimikrobiyal ajanlara dirençli patojenler için alternatif ve yenilikçi bir kemoterapi yollarını temsil eder.

Finansal ve rekabet eden çıkarların açıklanması

Yazarlar, alınan mali destek için Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (Cnpq) ve Fundação Araucária'ya teşekkür eder. Flávia Tobaldini-Valerio, CAPES - Proc'un mali desteğini kabul etmektedir. / 14-1 9469. Yazarlar ayrıca UID / BIO / 04469/2013 biriminin Stratejik Projesi için FCT'ye, RECI / BBBEBI / 0179/2012 (FCOMP-01-0124-FEDER- 027.462). Yazarlar, bildirilen konular dışında makalede veya makalede tartışılan materyaller ile ilgili finansal çıkarları olan veya finansal çıkarları olan herhangi bir kuruluş veya kuruluşla ilgili başka herhangi bir bağlılığa veya finansal ilişkiye sahip değildir. Bu yazının yapımında hiçbir yazılı yardım kullanılmamıştır.

YÖNETİCİ ÖZETİ

● Propolis potansiyel antifungal aktivite gösterir.
● Propolis, filamentöz form oluşumunun daha güçlü bir inhibitörüdür.
● Propolis Candida türü biyofilmleri azaltabilir ve yok edebilir.
● Propolis, antifungal geleneksel tedaviye umut verici bir alternatiftir.

REFERANS

Yapar N. Epidemiology and risk factors for invasive candidiasis. Ther. Clin. Risk Manag. 10(1), 95–105 (2014).
Martins N, Ferreira ICFR, Barros L, Silva S, Henriques M. Candidiasis: predisposing factors, prevention, diagnosis and alternative treatment. Mycopathologia 177(5–6), 223–240 (2014).
Guinea J. Global trends in the distribution of Candida species causing candidemia. Clin. Microbiol. Infect. 20, 5–10 (2014).
Arendrup MC. Candida and Candidaemia: susceptibility and epidemiology. Dan. Med. J. 60(11), 1–32 (2013).
Sanguinetti M, Posteraro B, Lass-Flörl C. Antifungal drug resistance among Candida species: mechanisms and clinical impact. Mycoses 58, 2–13 (2015).
Krcmery V, Barnes AJ. Non-albicans Candida spp. causing fungaemia: pathogenicity and antifungal resistance. J. Hosp. Infect. 50(4), 243–260 (2002).
Silva S, Negri M, Henriques M, Oliveira R, Williams DW, Azeredo J. Candida glabrata, Candida parapsilosis and Candida tropicalis: biology, epidemiology, pathogenicity and antifungal resistance. FEMS Microbiol. Rev. 36(2), 288–305 (2012).
Douglas LJ. Candida biofilms and their role in infection. Trends Microbiol. 11(1), 30–36 (2003).
Rautemaa R, Ramage G. Oral candidosisclinical challenges of a biofilm disease. Crit. Rev. Microbiol. 37(4), 328–336 (2011).
Ramage G, Rajendran R, Sherry L, Williams C. Fungal biofilm resistance. Int. J. Microbiol. 2012, 528521 (2012).
Uppuluri P, Chaturvedi AK, Srinivasan A et al. Dispersion as an important step in the Candida albicans biofilm developmental cycle. PLoS Pathog. 6(3), e1000828 (2010).
Uppuluri P, Pierce CG, López-Ribot JL. Candida albicans biofilm formation and its clinical consequences. Future Microbiol. 4(10), 1235–1237 (2009).
Alves CT, Ferreira ICFR, Barros L, Silva S, Azeredo J, Henriques M. Antifungal activity of phenolic compounds identified in flowers from north eastern Portugal against Candida species. Future Microbiol. 9(2), 139–146 (2014).
Martins N, Barros L, Santos-Buelga C, Henriques M, Silva S, Ferreira ICFR. Evaluation of bioactive properties and phenolic compounds in different extracts prepared from Salvia officinalis L. Food Chem. 170, 378–385 (2015).
Sardi JCO, Almeida AMF, Mendes Giannini MJS. New antimicrobial therapies used against fungi present in subgingival sites – a brief review. Arch. Oral Biol. 56(10), 951–999 (2011).
Lustosa SR, Galindo AB, Nunes LCC, Randau KP, Rolim Neto PJ. Propolis: atualizações sobre a química e a farmacologia. Brazilian J. Pharmacogn. 18(3), 447–454 (2008).
dos Santos Pereira A. e Francisco Radler de Aquino Neto FRMSS. Própolis: 100 anos de pesquisa e suas perspectivas futuras. Quim. Nova 25(2), 321–326 (2002).
Franco SL, Bruschi ML, Moura LPP, Bueno JH. Avaliação farmacognóstica da própolis da região de Maringá. Rev. Bras. Farmacogn. 9–10(1), 1–10 (2000).
Righi AA, Alves TR, Negri G, Marques LM, Breyer H, Salatino A. Brazilian red propolis: unreported substances, antioxidant and antimicrobial activities. J. Sci. Food Agric. 91(13), 2363–2370 (2011).
Frozza CO da S, Garcia CSC, Gambato G et al. Chemical characterization, antioxidant and cytotoxic activities of Brazilian red propolis. Food Chem. Toxicol. 52, 137–142 (2013).
Urushisaki T, Takemura T, Tazawa S et al. Caffeoylquinic acids are major constituents with potent anti-influenza effects in Brazilian green propolis water extract. Evid. Based Complement. Alternat. Med. 2011, 254914 (2011).
Búfalo MC, Bordon-Graciani AP, Conti BJ, de Assis Golim M, Sforcin JM. The immunomodulatory effect of propolis on receptors expression, cytokine production and fungicidal activity of human monocytes. J. Pharm. Pharmacol. 66, 1497–1504 (2014).
Sforcin JM, Fernandes Junior A, Lopes CAM, Funari SRC, Bankova V. Seasonal effect of Brazilian propolis on Candida albicans and Candida tropicalis. J. Venom. Anim. Toxins. 7(1), 139–144 (2001).
Capoci GRI, Bonfim-Mendonça PS, Arita GS et al. Propolis is an efficient fungicide and inhibitor of biofilm production by vaginal Candida albicans. Evid. Based Complement. Alternat. Med. 2015, 287693, (2015).
Nina N, Lima B, Feresin GE, Giménez A, Capusiri ES, Schmeda-Hirschmann G. Antibacterial and Leishmanicidal activity of Bolivian propolis. Lett. Appl. Microbiol. 62(3), 290–296 (2016)
Fiordalisi SAL, Honorato LA, Loiko MR et al. The effects of Brazilian propolis on etiological agents of mastitis and the viability of bovine mammary gland explants. J. Dairy Sci. 99(3), 2308–2318 (2016).
Massaro CF, Simpson JB, Powell D, Brooks P. Chemical composition and antimicrobial activity of honeybee (Apis mellifera ligustica) propolis from subtropical eastern Australia. Naturwissenschaften 102(11–12), 68 (2015).
Tobaldini FK, Bonfim-Mendonca PS, Rosseto HC et al. Propolis potential activity against Candida tropicalis adhered cells and its biofilm. Presented at: 7th Trends Medical Mycology. 9–12 October 2015, Lisbon, Portugal, 58(Suppl. 4), 199 (2015).
Pfaller MA. Antifungal drug resistance: mechanisms, epidemiology, and consequences for treatment. Am. J. Med. 125(Suppl. 1), S3–S13 (2012).
D’Auria FD, Tecca M, Scazzocchio F, Renzini V, Strippoli V. Effect of propolis on virulence factors of Candida albicans. J. Chemother. 15(5), 454–460 (2003).
Gomaa OM, Gaweesh AS. Variation in adhesion and germ tube formation of oral Candida using Egyptian propolis. Can. J. Microbiol. 59(3), 197–203 (2013).
List PH, Schmidt PC. Phytopharmaceutical Technology. Heyden & Son, London, UK.
TeixeiraÉ W, Message D, Negri G, Salatino A, Stringheta PC. Seasonal variation, chemical composition and antioxidant activity of Brazilian propolis samples. Evidence-based Complement. Altern. Med. 7(3), 307–315 (2010).
da Matta DA, de Almeida LP, Machado AM et al. Antifungal susceptibility of 1000 Candida bloodstream isolates to 5 antifungal drugs: results of a multicenter study conducted in São Paulo, Brazil, 1995–2003. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 57(4), 399–404 (2007)
Clinical and Laboratory Standards Institute. M27-A3, Reference Method For Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing Of Yeasts: Approved Standard (3rd Edition).
Dalben-Dota KF, Faria MGI, Bruschi ML, Pelloso SM, Lopes-Consolaro ME, Svidzinski TIE. Antifungal activity of propolis extract against yeasts isolated from vaginal exudates. J. Altern. Complement. Med. 16(3), 285–290 (2010)
Clinical and Laboratory Standards Institute. M27-S3, Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts. Third Informational Supplement.
Klepser ME, Wolfe EJ, Jones RN, Nightingale CH. Antifungal pharmacodynamic characteristics of fluconazole and amphotericin B tested against A Candida albicans. Antimicrob. Agents Chemother. 41(6), 1392–1395 (1997).
Toenjes KA, Munsee SM, Ibrahim AS et al. Small-molecule inhibitors of the budded-tohyphal-form transition in the pathogenic yeast Candida albicans. Antimicrob. Agents Chemother. 49(3), 963–972 (2005).
Malich G, Markovic B, Winder C. The sensitivity and specificity of the MTS tetrazolium assay for detecting the in vitro cytotoxicity of 20 chemicals using human cell lines. Toxicology 124(3), 179–92 (1997).
Bruschi ML, Klein T, Lopes RS, Franco SL, Gremião MPD. Contribuição ao protocolo de controle de qualidade da própolis e de seus extratos. Rev. Ciênc. Farm. 23(2), 289–306 (2002).
Kauffman CA, Vazquez JA, Sobel JD et al. Prospective multicenter surveillance study of funguria in hospitalized patients. Clin. Infect. Dis. 30(1), 14–18 (2000).
Manzano-Gayosso P, Hernández-Hernández F, Zavala-Velásquez N et al. Candiduria in Type 2 diabetes mellitus patients and its clinical significance. Candida spp. antifungal susceptibility. Rev. Médica Del Inst. Mex. del Seguro Soc. 46(6), 603–610 (2008).
Ruan S-Y, Hsueh P-R. Invasive candidiasis: an overview from Taiwan. J. Formos. Med. Assoc. 108(6), 443–451 (2009).
González GM, Elizondo M, Ayala J. Trends in species distribution and susceptibility of bloodstream isolates of Candida collected in Monterrey, Mexico, to seven antifungal agents: results of a 3-year (2004–2007) surveillance study. J. Clin. Microbiol. 46(9), 2902–2905 (2008).
Ramage G, Martínez JP, López-Ribot JL. Candida biofilms on implanted biomaterials: a clinically significant problem. FEMS Yeast Res. 6(7), 979–986 (2006).
Ahmad A, Khan A, Akhtar F et al. Fungicidal activity of thymol and carvacrol by disrupting ergosterol biosynthesis and membrane integrity against Candida. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 30(1), 41–50 (2011).
Silva-Carvalho R, Baltazar F, Almeida-aguiar C. Propolis: a complex natural product with a plethora of biological activities that can be explored for drug development. Evid. Based Complement. Alternat. Med. 2015, 206439 (2015).
Al-Waili N, Al-Ghamdi A, Ansari MJ, Al-Attal Y, Salom K. Synergistic effects of honey and propolis toward drug multiresistant Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida albicans isolates in single and polymicrobial cultures. Int. J. Med. Sci. 9, 793–800 (2012).
Bankova V. Recent trends and important developments in propolis research. Evid. Based Complement. Alternat. Med. 2(1), 29–32 (2005).
Burdock GA. Review of the biological properties and toxicity of bee propolis (propolis). Food Chem. Toxicol. 36(4), 347–363 (1998).
Ota C, Unterkircher C, Fantinato V, Shimizu MT. Antifungal activity of propolis on different species of Candida. Mycoses 44(9–10), 375–378 (2001).
Sun L, Liao K, Wang D. Effects of magnolol and honokiol on adhesion, yeast-hyphal transition, and formation of biofilm by Candida albicans. PLoS ONE 10(2), e0117695 (2015).
Mayer FL, Wilson D, Hube B. Candida albicans pathogenicity mechanisms. Virulence 4(2), 119–128 (2013).
Agarwal G, Vemanaradhya GG, Mehta DS. Evaluation of chemical composition and efficacy of Chinese propolis extract on Porphyromonas gingivalis and Aggregatibacter actinomycetemcomitans: an in vitro study. Contemp. Clin. Dent. 3(3), 256–61 (2012).
Donlan RM, Costerton JW. Biofilms: survival mechanisms of clinically relevant microorganisms. Clin. Microbiol. Rev. 15(2), 167–193 (2002).
De Castro PA, Bom VLP, Brown NA et al. Identification of the cell targets important for propolis-induced cell death in Candida albicans. Fungal Genet. Biol. 60, 74–86 (2013).

***maturidi*** · 03 August 2020, 11:07

Propolis nedir? Propolis faydaları nelerdir?

Propolis, arıların iğne yapraklı ağaçlardan, bitkilerin tomurcuk, yaprak, gövde ve salgılarından topladığı maddeleri başlarında bulunan salgı bezlerinden salgıladıkları enzimlerle işleyerek ürettiği, reçine benzeri bir üründür. Antioksidan ve antimikrobiyal özelliği bulunan propolisi arılar, bacillus larvae gibi bakteri ve mantar enfeksiyonlarına karşı kovanlarını korumak, peteklerin hijyenini sağlamak, diğer böcek ve hayvanların kovana girişini engellemek için kullanır. Ayrıca kovan içinde yer alan bal peteklerini güçlendirmek ve çatlakları onarmak için de kullanılan propolis sayesinde arılar, kovana koruyucu bir kanaldan girip çıkarlar. Böylece hem kovanın hem de kendilerinin hijyeni sağlanmış olur. Yunanca'da giriş ve savunma anlamına gelen "pro" ve şehir anlamına gelen "polis" kelimelerinin birleşiminden oluşan propolis, arıların kovanlarının güvenliğini ve hijyenini sağlamak için ürettiği bir tür reçinedir. Çoğunlukla koyu kahverengi renkte ve kendine has bir kokuya sahip olan propolis, arı poleninden farklı ve çok daha zengin bir içeriğe sahiptir. Tarih boyunca insanlar tarafından farklı enfeksiyonların tedavisinde ilaç olarak tüketilen bu ürün üzerine günümüzde pek çok çalışma yapılmış ve yapılmaya devam etmektedir. Bu çalışmalar, insan sağlığına faydasının yanı sıra, farklı bölgelerdeki bitkilerden toplanarak arılar tarafında üretilen propolis içeriğinin, temel bileşenler açısından değerlendirildiğinde birbirine benzediğini ve mevsimler arasında üretilen propolis içeriğinde belirgin bir fark olmadığını göstermiştir.

Propolis Nedir?

Arıcılar arasında preboli ya da arı zamkı olarak da bilinen propolis, arıların kovan içinde yer alan peteklerin sterilizasyonunu sağlamak, dışarıdan gelen böcek, mantar, bakterilere karşı kovanı korumak, bal peteklerini onarmak ve güçlendirmek için kullandığı bir üründür. Arılar, propolisi üretmek için başta iğne yapraklı ağaçlar olmak üzere pek çok bitkinin gövde, yaprak, tomurcuk ve nektarlarından elde ettiği maddeleri, kendi salgılarıyla biyokimyasal değişime uğratırlar. Propolis, antibakteriyel özelliği sayesinde kovanın hijyenini sağlamak ve reçinemsi özelliğiyle de kovanın savunmasını güçlendirmek için de kullanılır. Çoğunlukla koyu kahverengi olan propolisin rengi, toplandığı bölgeye göre şeffaf, kırmızı, sarı ve yeşil renklerde olabilir. Zengin bir içerikten oluşan propolis, tarih boyunca insanlar tarafından ilaç olarak kullanılmıştır. Günümüzde ise kullanımının sağlığa olumlu etki yarattığına dair bazı bilimsel çalışmalar bulunur. Sıklıkla kullanılan kavak tipi propolisin içeriğinde 150'ye yakın biyoaktif bileşen olmak üzere yaklaşık 300 farklı bileşiğe rastlanmıştır. Arı poleninden farklı olarak B1, B2, C, E vitamini barındıran propolis ayrıca çinko, bakır, demir, kalsiyum, magnezyum, sodyum ve potasyum gibi mineraller açısından da zengindir. İnsanlar tarafından kullanıldığında zararlı virüs ve bakterilerin yok edilmesine yardımcı olduğu bilinen propolis, yetişkinler ve çocuklar tarafından bağışıklık sisteminin güçlendirilmesi için kullanılabilen doğal bir üründür. Mantarlara karşı da etkili olduğu bilinen propolis, tüm bunların yanında antioksidan ihtiyacının karşılanması için de kullanılabilir. Ancak işlenmemiş propolis, sindirilmesi güç, bal mumu benzeri bir maddeyle karışık hâldedir. Doğada bulunan propolisin yaklaşık yarısını oluşturan bal mumu benzeri maddenin, reçine benzeri besleyici kısmından ayrıştırılması önemlidir. Propolisin doğru şekilde bal mumundan ayrıştırılması, ürünün sindirilebilirliği açısından son derece önemlidir. Bu işlem, propolisin bitki ve larva kalıntılarından da ayrışmasını sağlar. Bu yüzden doğadan kazınarak toplanan işlenmemiş ürünlerin tüketilmesi önerilmez.

Propolis Faydaları Nelerdir?

%50 oranında reçine, %30 bal mumu, %10 esansiyel ve aromatik yağlar, %5 polen ve %5 mineral madde ve organik kalıntılarda oluşan propolisin, insan sağlığı üzerinde pek çok olumlu etkisi bulunduğu saptanmıştır. Propolis, faydaları bakımından oldukça zengin bir üründür. Antibakteriyel, antiviral, antifungal ve antienflamatuar içeriğinin yanı sıra pek çok farklı rahatsızlık için de önleyici ve tedavi edici özelliği bulunduğu bilinir. Propoliste yer alan etanol ekstraktı (faydalı bileşenlerin ayrıştırılarak tüketime hazır hâle getirilmesi işlemi) bağışıklık sisteminin güçlenmesine yardımcı olur. Etanol ekstraktı, aynı zamanda iltihap önleyici, antibakteriyel, antiviral, antifungal, antioksidan ve lokal anestezik gibi özelliklere sahiptir. Propolis içeriğinde yer alan kafeik asit fenil ester ve clerodane diterpenoidin de kanserli hücrelerin gelişimini engellediği ve sağlıklı hücrelerin, kanserli hücreye dönüşme ihtimalini azalttığı düşünülmektedir. Meme, cilt, gırtlak, karaciğer, kolon, mesane, ve yumurtalık kanseri tedavisinde rol oynadığı öne sürülür. Bu içeriğin karaciğeri zararlı maddelere karşı koruduğu da yapılan sınırlı çalışmalarda görülmüştür. Propolis içeriğindeki diğer etken maddelerin adenovirüs ve influenza gibi virüslere karşı etkili olduğu, yara iyileşmesinde rol oynadığı da aynı sınırlı çalışmalarda saptanmıştır. Propolisin içeriğinde yer alan bioflavonoidler ise virüslere karşı etkin koruma sağlar. Bazı araştırmalar, propolisin soğuk algınlığı ve grip gibi rahatsızlıkların iyileşmesine yardımcı olduğunu gösterir. Diş macununa eklenerek kullanılan propolisin, ağızda bakteri oluşumunu azalttığı, diş etlerinde var olan bazı rahatsızlıkları iyileştirmeye yardımcı olduğu düşünülür. Propolisin cilde faydaları, çoğunlukla yara ve yanıkların iyileştirilmesi ile sınırlıdır. Hücre büyümesini hızlandırdığı için cilt yanıklarının daha hızlı iyileşmesinde etkili olan propolisin, ülseratif kolit, ülser, mide ve bağırsak kanserlerinin yanı sıra diğer gastrointestinal sistem rahatsızlıklarına karşı koruma sağladığı ve bu hastalıkların tedavisine de yardımcı olduğu yönünde sınırlı çalışmalar bulunur. Aynı çalışmada propolisin, helicobacter pylori gibi sağlık üzerinde olumsuz etkisi bulunan patojenleri etkili bir şekilde yok ettiği de gösterilir. Sıklıkla sorulan "Propolis faydaları nelerdir?" sorusu bu şekilde yanıtlanabilir.

Propolis Nasıl Kullanılır?

Arıların, ağaç ve bitkilerden topladığı maddeleri, kendi salgılarıyla biyokimyasal etkileşime sokmaları sonucu oluşturduğu propolisin, insan sağlığı üzerinde olumlu etkileri olduğu bilinir. Özellikle bağışıklık sisteminin güçlendirilmesi, ağız ve boğazda var olan rahatsızlıkların giderilmesinde etkili olduğu düşünülen propolis, suda çözünür damla, tablet, kapsül, krem, sprey, şurup ve toz formlarında bulunur. Formlarının çeşitliliği nedeniyle genel olarak propolis kullanımının oral ya da cilt üzerine sürülerek yapıldığı söylenebilir. Damla propolis, ağız yaraları ve boğaz enfeksiyonları için sıvı ve katı gıdalara damlatılarak tüketilebileceği gibi gargara yapılarak da kullanılabilir. Tablet ve kapsül propolis, bağışıklık sisteminin güçlendirilmesi ve uyku problemlerinin giderilmesi amacıyla su ile birlikte yutularak; krem propolis, küçük yanık ve yaraların tedavisi için cilt üzerine sürülerek kullanılır. Sprey formda olan propolis boğaz enfeksiyonlarının tedavisine yardımcı olarak boğaza sıkılarak, şurup ise öksürük ve ağız yaraları için uygulanır. Toz formunda olan propolisin ise bal ile birlikte tüketildiğinde daha etkili olduğu bilinir. İçeceklere ve yoğurda eklenerek tüketilebilir. Hastalıkların tedavisi için propolis kullanılmadan önce mutlaka hekime danışılmalı ve hekimin belirlediği doz ve sürede kullanılmalıdır.

Propolis Kullanmadan Önce Dikkat Edilmesi Gerekenler

Propolis kullanımından önce ürünün kullanım talimatları dikkatlice okunmalı, kişiyi şüpheye düşürecek bir durumun varlığında mutlaka hekime danışılmalıdır. Ayrıca kronik hastalığı olan kişiler de propolis kullanmadan önce mutlaka hekime danışmalıdır. Propolis kullanımından önce dikkat edilmesi gerekenlerin bir kısmı şunlardır:

Propolisin içeriğinde yer alan doğal bileşenlerden bazıları kanın pıhtılaşmasını yavaşlatabilir. Bu yüzden planlanan bir operasyon öncesinde propolis ve diğer doğal, bitkisel ürün ya da ilaçların tüketimi bırakılmalıdır.
Bala alerjisi olan kişilerin propolis tüketmemesi önerilir.
Gebe ve emziren annelerin, propolis kullanmadan önce hekime danışmaları son derece önemlidir.
Propolis alkol ile birlikte kullanılmamalıdır.
Astım gibi solunum ile ilgili rahatsızlığı olanların, propolis kullanımından önce hekimden görüş almaları gerekir.
Propolis de dahil olmak üzere hiçbir doğal ya da bitkisel ürün, yüksek miktarda tüketilmemelidir.
Propolisin uzun süre ile kullanımı alerjik reaksiyonlara yol açabilir. Sağlıklı günler dileriz. Dyt. Betül Ayan

**omery** · 23 October 2020, 11:02

Propolis Nedir, Nasıl Oluşur- Propolis Ne İçerir, Neye İyi Gelir

**omery** · 23 October 2020, 11:03

Propolis Sprey Nedir- Propolis Sprey Faydaları Nelerdir

**omery** · 23 October 2020, 11:46

Vajinal Mantara Ne İyi Gelir- Propolis Ne İçerir- Neye İyi Gelir

Duyuru

Propolis, Propolisin faydaları

Propolis, Propolisin faydaları

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap