Duyuru

**igokcek** · 16 July 2012, 16:57

HUŞ, BETULA PENDULA

**igokcek** · 16 July 2012, 16:58

Betulinik Asit ve Onun Daha Güçlü Antiprotozoal Analoglarının Sentezine Yönelik Kimyasal Stratejiler

André Barreto Cunha , ¹Ronan Batista , ^1,^*María Ángeles Castro , ² ve Jorge Mauricio David ^1,^*
Bartolo Gabriele, Akademik Editör
¹ Instituto de Química, Universidade Federal da Bahia, Salvador 40170-280, BA, Brezilya; rb.abfu@oterraberdna
² Farmasötik Bilimler Bölümü, Farmasötik Kimya Bölümü, CIETUS/IBSAL, Eczacılık Fakültesi, Salamanca Üniversitesi, 37007 Salamanca, İspanya; se.lasu@gcam
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
Bu makale, PMC'deki diğer makaleler tarafından alıntılanmıştır .
Git: Soyut

Betulinik asit (BA, 3β-hidroksi-lup-20(29)-en-28-oik asit), ağırlıklı olarak Betula'da bulunan bir pentasiklik triterpen asittir .sp. (Betulaceae) ve aynı zamanda farklı bitki familyalarına ait birçok türde yaygın olarak yayılış göstermektedir. BA, sitotoksik, anti-HIV, anti-inflamatuar, antidiyabetik ve antiprotozoal etkiler de dahil olmak üzere antimikrobiyal aktiviteler gibi geniş bir dikkat çekici farmakolojik özellikler yelpazesi sunar. Bu derleme ilk olarak BA'nın kaynaklarını tanımlar ve doğal öncüsü olan betulin'den başlayarak bu molekülü üretmek için kimyasal stratejileri tartışır. Daha sonra, BA'nın antiprotozoal özellikleri kısaca tartışılmakta ve antiplazmodial, antileishmanial ve antitripanosomal aktiviteler sergileyen analogların sentezi için kimyasal stratejiler sistematik olarak sunulmaktadır. BA için tarif edilen antiplazmodiyal aktivite orta düzeydeydi, bununla birlikte, bazı C-3 pozisyonunda açillenmiş analoglar bu aktivitede bir gelişme gösterdi ve artesunik asitli hibrit modeller en ilginç özellikleri gösterdi. Bazı analoglar ayrıca BA ile karşılaştırıldığında daha yoğun anti-leishmanial aktiviteler sergilediler ve bunlara ek olarak C-2/C-3 pozisyonlarına kaynaşmış heterosikller ve amid türevleri en umut verici analoglardı. Antitripanozomal aktivite ile ilgili olarak, lupan iskeletinin C-28 karboksilik grubunda amid oluşumu ile bazı ilginç antitripanosomal türevleri hazırlandı. BA'nın farklı bitki ekstraktlarının izolasyonu ile veya kolaylıkla elde edilen betulin'in kimyasal transformasyonu ile üretilebileceği göz önüne alındığında, C-2/C-3 pozisyonlarına kaynaşmış heterosikller ve amid türevleri en umut verici analoglardı. Antitripanozomal aktivite ile ilgili olarak, lupan iskeletinin C-28 karboksilik grubunda amid oluşumu ile bazı ilginç antitripanosomal türevleri hazırlandı. BA'nın farklı bitki ekstraktlarının izolasyonu ile veya kolaylıkla elde edilen betulin'in kimyasal transformasyonu ile üretilebileceği göz önüne alındığında, C-2/C-3 pozisyonlarına kaynaşmış heterosikller ve amid türevleri en umut verici analoglardı. Antitripanozomal aktivite ile ilgili olarak, lupan iskeletinin C-28 karboksilik grubunda amid oluşumu ile bazı ilginç antitripanosomal türevleri hazırlandı. BA'nın farklı bitki ekstraktlarının izolasyonu ile veya kolaylıkla elde edilen betulin'in kimyasal transformasyonu ile üretilebileceği göz önüne alındığında,Betula ssp., BA'nın yeni antiprotozoal ajanların sentezi için bir başlangıç materyali olarak büyük ilgi gören bir molekül olduğu söylenebilir.

Anahtar Kelimeler: betulinik asit, antiprotozoal aktiviteler, triterpen asit türevleri, antiplazmodial aktivite, antileishmanial aktivite, antitripanozomal aktivite
Git: 1. Giriş

Betulinik asit (BA), yani 3β-hidroksi-lup-20(29)-en-28-oik asit, pentasiklik lupan tipi bir triterpendir (Şekil 1) 1939'da Cornus florida L.'nin (Cornaceae) kabuğundan ilk kez izole edildiği iddia edildi . O zaman, yapısal açıklama, bir dizi sentetik türevle karşılaştırılarak elde edilen verilere dayanıyordu [ 1 ]. Daha sonra BA, Zizyphus vulgaris Lam'ın tohumlarında da bulundu . (var. Spinosus Bunge, Rhamnaceae) [ 2 ], Platanus acerifolia'nın kabuğunda [ 3 ] ve Syncarpia laurifolia'nın lifli dış kabuğunda (şu anda var. glomulifera , Myrtaceae) [ 4]. İzolatların doğru tanımlanması için bilinen kimyasal türevlerin hazırlanması da gerekliydi. İlginç bir şekilde, BA'nın diğer türlerde daha da erken, ancak gratiolone ( Gratiola officinalis , Schropulariaceae'den izole edilmiştir) [ 5 ], platanol ve/veya platanin ( Platanus spp.'den) ve tanımlanamayan bir tür gibi farklı önemsiz isimler altında bulunduğu varsayılmaktadır. Cornus sanguinea L.'den elde edilen ve “platanoik asit” olarak adlandırılan bileşik [ 3 , 5 , 6 , 7 ].

Şekil 1
betulinik asit (BA), betulin (BE), lupeol (LU), oleanolik (OA) ve ursolik (UA) asitlerin yapıları.

Betula cinsi , Betulaceae familyası, özellikle Betula alba , B. pubescens , B. platyphylla , B. maximowicziana ve B. mandshurica'ya ait huş ağaçlarında yaygınlığı nedeniyle bu bileşiğe "Betulinik asit" adı verilmiştir.. Ek olarak, bu aile BA'nın ana doğal kaynağı olmasına rağmen, bu triterpen Amaranthaceae, Ancistrocladaceae, Apocynaceae, Asteraceae, Chrysobalanaceae, Convolvuleaceae, Dichapetalaceae, Dilleniaceae, Dioncophyllaceae, Ebenaceae, Ericaceae, Fabaceae, Fagaceae familyalarına ait birçok bitki türüne yayılmıştır. , Lamiaceae, Loganiaceae, Melastomataceae, Moraceae, Myrtaceae, Onagraceae, Ramnaceae, Ranunculaceae, Rhamnaceae, Rosaceae, Rubiaceae, Trochodendraceae, Verbenaceae ve Viscaceae [ 8 ]. İlginç bir şekilde, bu triterpen, Akania lucens Hook f'den büyük miktarlarda ekstrakte edilebilir . (Akaniaceae), Nerium zakkum L. (Apocynaceae), Avicennia marina L. (Verbenaceae), Lemaireocereusspp. (Cactaceae), Arbutus menziesii Pursh. ve Arctostaphylos uva-ursi (Ericaceae), Lavandula angustifolia var. officinalis (Lamiaceae), Nuytsia floribunda R. Br. (Loranthaceae), Tectona grandis L. f. (Verbenaceae), Davilla rugosa ve Dilleniaceae familyasının diğer türleri ( Dillenia , Wormia ve Acrotrema ). Bu nedenle BA, bu familyalar/cinsler için kemotaksonomik bir belirteç olarak düşünülebilir [ 9 , 10 , 11 ]. Bu bileşik, lupeolden (LU,Şekil 1) lupeol 28-oksidaz aktiviteleri gösteren çok işlevli bir enzim olarak karakterize edilen sitokrom CYP716A12 ile. Aynı sitokrom, β- ve α-amirinlerin metil C-28 oksidasyonundan sorumludur ve BA'ya ek olarak diğer yaygın triterpenler olenanolik (OA) ve ursolik (UA) asitleri sağlar (Şekil 1) [ 12 , 13 ].

Sadece 1976'da bileşiğin farmakolojik önemi kanıtlanmaya başlandı. BA içeren bitki özlerini kullanan bir çalışma, lenfositik lösemi P388 hücrelerine karşı yüksek sitotoksisite ve seçicilik sergilemiştir [ 14 ]. Sırayla, in vivo çalışmaların toksisite olmaksızın tümör büyümesinin inhibisyonunu gösterdiği göz önüne alındığında, BA, melanoma-spesifik sitotoksik bir bileşik olarak tanımlandı [ 15 ]. O zamandan beri BA ve türevleri ile antitümör ajanlar olarak çeşitli çalışmalar yayınlanmıştır [ 16 , 17 ]. Son araştırmalar, sitotoksisite için C-28'de karboksil fonksiyonunun varlığının gerekli olduğunu göstermiştir. Bu sonuç, BA türevlerinin genellikle betulin'den (BE) türetilenlerden önemli ölçüde daha güçlü olduğu gerçeğiyle desteklenmektedir (Şekil 1) [ 18 ]. BA ayrıca bir anti-HIV ajanı olarak potansiyel gösterir, türevlerinin çoğu, özellikle hibrit bileşikleri, HIV'e karşı oldukça etkilidir [ 19 , 20 ]. Azidotimidin (AZT) ile karşılaştırıldığında, spesifik hibrit türevleri daha güçlü veya eş etkili anti-HIV aktiviteleri sergilediler ancak daha az sitotoksisite sergilediler [ 21 ]. Ek olarak, BA için mantar, bakteri, protozoa, diyabet ve inflamatuar bozukluklara karşı diğer dikkate değer farmakolojik özelliklerin geniş bir spektrumunu açıklayan çok sayıda çalışma yayınlanmıştır [ 22 , 23 , 24 ]]. BA ve analogları için tüm bu potansiyel uygulamalar arasında, bu incelemeyi onların antiprotozoal aktivitelerine ve özellikle vektörler tarafından bulaşan tropikal hastalıklara uygulamalarına odakladık.

Vektör kaynaklı tropik hastalıklar, ılıman iklimlerde soğuk mevsim genellikle böcek popülasyonlarını (vektörleri) kış uykusuna zorlayarak kontrol ettiğinden, tropikal ve subtropikal bölgelerde yaygın olan bozukluklardır. En etkili tropik hastalıklar arasında, sıtma, leishmaniazlar ve tripanozomiyazlar küresel olarak yaygındır ve tedavi edilmediği takdirde potansiyel olarak zararlı sonuçlar doğurur [ 25 , 26 ].

Sıtma, enfekte dişi Anopheles sivrisineklerinin ısırıkları yoluyla insanlara bulaşan beş Plasmodium türünün ( P. falciparum , P. vivax , P. knowlesi , P. ovale ve P. malariae ) neden olduğu, yaşamı tehdit eden bir protozoon hastalığıdır . P. falciparum ve P. vivaxtüm insan sıtma enfeksiyonlarının %95'inden fazlasını oluşturur ve bu nedenle halk sağlığı için büyük bir tehdit ve ciddi bir tehdit oluşturur. 2019 yılında, tahmini 229 milyon vaka ve 409.000 ölümle dünya nüfusunun neredeyse yarısı sıtma riski altındaydı. Vakaların ve ölümlerin çoğu Sahra altı Afrika'da meydana gelir ve 5 yaşın altındaki çocukları daha ciddi şekilde etkiler [ 27 ].

Buna karşılık, leishmaniazlar, 20'den fazla Leishmania türünden protozoan parazitlerin neden olduğu bir hastalık grubudur. Bu parazitler, enfekte bir dişi flebotomin tatarcıklarının ısırması ile insanlara bulaşır ve daha sonra hastalığın üç ana formu ortaya çıkabilir: en yaygın form kutanöz leishmaniasis (CL); kala-azar olarak da bilinen visseral leishmaniasis (VL), en şiddetli form; ve hastalığın en engelleyici formu olan mukokutanöz leishmaniasis (MCL). 1 milyardan fazla insan leishmaniasis için endemik bölgelerde yaşıyor ve enfeksiyon riski altında. Yılda tahminen 30.000 yeni VL vakası ve 1 milyondan fazla yeni CL vakası ortaya çıkmaktadır [ 28 , 29 ].

Son olarak, insan tripanozomiyazı, Trypanosoma cinsinin protozoan parazitlerinin neden olduğu Afrika tripanozomiyazı ve Chagas hastalığını içerir . Afrika tripanosomiasisine T. brucei gambiense veya T. brucei rhodesiense neden olur ve Sahra altı Afrika'da, özellikle kırsal alanlarda ve savaş veya yoksulluk nedeniyle parçalanmış nüfuslarda yaklaşık 65 milyon insanı tehdit eder. Alternatif olarak, Chagas hastalığına T. cruzi neden olur ve esas olarak Latin Amerika'da meydana gelen yılda 21.000 ölümden sorumludur [ 29 , 30 ].

Tropikal hastalıklar, yeni ilaçların geliştirilmesi için ilaç şirketleri için çok çekici olmadığından [ 31 ], bu protozoa bozukluklarını tedavi etmek için piyasada çok az seçenek mevcuttur. Şu anda mevcut olan en etkili sıtma önleyici ilaçlar klorokin ve artemisinin türevleridir, oysa amfoterisin B, paromomisin, miltefosin, pentamidin ve sodyum stiboglukonat en önemli antileishmanial ajanlardır. Ek olarak, pentamidin, benznidazol ve nifurtimox, insan tripanozomiyazisinin tedavisi için tercih edilen ilaçlardır. Bu ilaçların yüksek ekonomik ve sosyal maliyetleri, toksik etkileri ve ilaç direncinin ortaya çıkmasıyla ilgili sorunlar, yeni antiprotozoal ilaçlara acilen ihtiyaç duyulduğuna işaret etmektedir [ 32 ].

Bu derleme, Plasmodium , Leishmania ve Trypanosoma parazitlerine karşı güçlü antiprotozoal aktiviteye sahip BA ve analoglarının sentezine yönelik şimdiye kadar yayınlanmış tüm kimyasal stratejileri kapsamayı amaçlamaktadır .

Git: 2. Betulin'den BA sentezi

Protozoal ve diğer etkileyen hastalıkları tedavi etmek için yeni ilaçların geliştirilmesinde BA'nın oldukça değerli potansiyeli göz önüne alındığında, yeni ve geliştirilmiş biyoaktif maddelerin hazırlanması için bir başlangıç materyali olarak kullanılmasına izin vermek için bu triterpenin uygun kaynaklarını oluşturmak gereklidir. analoglar. Bu senaryo dahilinde, biyokataliz ve diğer biyoteknolojik stratejilerle BA ve türevlerinin üretimine ilişkin umut verici sonuçların literatürde geniş çapta rapor edildiğini belirtmekte fayda var [ 33 , 34 , 35 ] ve bu nedenle bu derlemede ele alınmayacaktır. .

Bildiğimiz kadarıyla, henüz tam bir BA sentezi bildirilmemiştir. Her ne kadar LU, onun lupane C-28 metil eş ilişkili triterpeni, 1970'lerden beri tamamen sentezlenmiştir [ 36 , 37 ].

Halihazırda, BA'nın ticari üretimi büyük ölçüde huş ağacı kabuğundan geleneksel fitokimyasal ekstraksiyona bağlıdır [ 35 ], bu da kuru malzemeden ağ/ağ yaklaşık %0.025 [ 38 ] verir. BA ile ilgili yapı, triterpen alkol BE'dir (Şekil 1huş ağaçlarında çok daha fazla bulunur (kuru kabukların %34'üne kadar) [ 39 ], ancak biyolojik olarak BA'dan daha az aktiftir [ 38 , 40 ]. Bu nedenle BE, C-28'de bulunan birincil hidroksil grubunun oksidasyonu ile yarı sentez yoluyla BA'yı kolayca hazırlamak için bir başlangıç malzemesi olarak kullanılabilir.

BE'den BA sentezine ilişkin ilk raporlar 1930'ların sonlarında yayınlandı [ 1 , 41 ]. Bu çalışmada, yazarlar çok sayıda adımlı rotalar kullandılar ve sonuç olarak toplam verim düşüktü.

Onlarca yıl sonra, izomerleşmesini önlemek için C-3 OH grubunu (ikincil alkol) seçici olarak maskelemek için koruyucu grupların kullanıldığı klasik bir yöntem rapor edildi ( Şema 1 ). Bu çalışmada, bu klasik yol beş adımı içermesine ve hem sağlık hem de çevre için olan kimyasal ajanları (örneğin, CrO ₃ ) kullanmasına rağmen, BA avantajlı bir şekilde yüksek stereoselektivite ve iyi bir toplam verimle üretilebilir [ 38 ].

Bununla birlikte, BA'yı BE'den sentezlemek için kullanılan en yaygın metodoloji , %90'lık bir verimle ilk olarak ara betulonik asidi (BoA) oluşturmak için doğrudan bir Jones oksidasyon adımını ( _CrO₃ / H2S04 _{/ aseton) içerir.}Daha sonra BoA, sıcak metanol içinde yeniden kristalleştirmeden sonra saf BA elde etmek için NaBH4/2-propanol ile indirgenir _.Bu şekilde, %92'lik bir 3p-izomer verimi elde edilir ( Şema 2 ) [ 42 ].

Son zamanlarda, BA sentezini geliştirmek için katı destekli krom oksit ve potasyum permanganat kullanan iki aşamalı bir yol önerilmiştir [ 43 ]. Bu yaklaşımın ana adımı, makul bir verimle (%64) BeAL (betulinal) elde etmek için silika jel üzerine adsorbe edilen kromik oksit ile gerçekleştirilen BE'nin birincil alkol fonksiyonunun seçici oksidasyonudur. Daha sonra, aldehit türevi potasyum permanganat tarafından BA'ya oksitlenir ve bu da %85'lik bir verimle sonuçlanır ( Şema 3 ).

Yukarıda bahsedilen yaklaşımların tümü, genel olarak orta ila iyi verimler ile birden fazla sentetik adım kullanan küçük ölçekli preparasyonlar olacak şekilde tasarlanmıştır. Bu sınırlamaların üstesinden gelmek için, Csuk ve işbirlikçiler Şema 4'te [ 40 ] temsil edilen kısa tek adımlı yolu geliştirdiler. Yöntem, NaClO ve NaClO karışımı içeren bir reaksiyon ortamında BE'nin 4-asetamid-2,2,6,6-tetrametilpiperidin-1-oksil (4-asetamid-TEMPO) aracılık ettiği BA'ya katalitik dönüşümüne dayanıyordu. ₂ , 35 °C'de. Ucuz bir başlangıç malzemesinin kullanılmasına ve özellikle %86 verimle daha büyük ölçekte BA elde etme imkanına ek olarak, sentetik yolun basitliğinin bu çalışmadan kaynaklanan ana avantaj olduğunu belirtmekte fayda var. sadece bir adımda.

Hafifçe farklı bir tek adımlı yöntemde, ayrıca TEMPO tipi katalizörler kullanan patentli bir yolda, oksitleyici olarak hipervalent iyot reaktifi diasetoksi-iyodobenzen (DIB) kullanıldı [ 44 ]. Reaksiyon ılıman koşullar altında meydana gelir ve %90'a varan verimle hem ekonomik hem de çevre dostudur ( Şema 5 ).

Git: 3. Antiprotozoal BA Analoglarının Sentezi

Önceki çalışmalar, lupan iskeletli triterpenler tarafından sergilenen çok çeşitli antimikrobiyal (antiprotozoal dahil) özellikleri göstermiştir [ 24 , 45 ]. Bu bulgular, BA'nın daha güçlü antiprotozoal aktivitelere sahip BA türevlerine yol açan çeşitli modifikasyonlar için umut verici bir iskele olabileceğinin göstergesidir.şekil 2kimyasal türevlendirmeye duyarlı olarak C-2/C-3, C-20/C-29 ve C-28 pozisyonlarını vurgulayarak BA'nın moleküler yapısına genel bir bakış sunar. Bu nedenle, son yıllarda birkaç BA analogu tasarlanmış, sentezlenmiş ve parazitlere karşı Plasmodium sp ., Leishmania sp . ve Trypanosoma sp . bunlar aşağıda açıklanmıştır.

Ayrı bir pencerede aç
şekil 2
BA ve C-2/C-3, C-20/C-29 ve C-28 pozisyonlarının yapısal formülü kimyasal türevlendirmeye uygundur. 3.1. Antiplazmodiyal Analoglar

BA'nın in vitro antiplazmodiyal özellikleri ilk kez Bringmann ve işbirlikçileri tarafından rapor edildi. Bu çalışma, BA'nın insan sıtma paraziti P. falciparum'un aseksüel eritrosit evrelerine karşı in vitro olarak orta ila iyi antimalaryal aktivite sergilediğini tanımlamıştır [ 46 ].

Daha sonraki bir araştırmada, P. falciparum'un klorokine dirençli (K1) ve duyarlı (T9-96) suşlarına karşı BA için IC50 değerleri _hesaplandı ve sırasıyla 42.9 ila 56.7 uM arasında değişti [ 47 ]. Ek olarak, bu çalışma ayrıca, bir murin sıtma modelinde ( P. berghei ) in vivo test edildiğinde BA'nın, en yüksek doz olan 250 mg/kg/gün intraperitoneal olarak kullanıldığında bile parazitemiyi azaltmada etkisiz olduğunu ortaya koydu.

Bir başka ilginç çalışma, eritrositlerin ya BA ya da onun basit analogları BeAL, LU ( 1 ), BE, BA metil ester ( 2 ) ve BA amid ( 3 ) ile önceden yüklendiğini gösterdi (Figür 3) P. falciparum parazitleri için konak olarak hizmet etmemiştir [ 48 ]. Yukarıdaki bileşiklerin tümü, _{IC50 ile}P. falciparum büyümesini engelledideğerler 7-28 µM aralığındadır ve bu inhibisyon, konsantrasyona bağlı bir yaklaşımda stomatositlere veya ekinositlere doğru membran eğriliği değişikliklerinin derecesi ile iyi ilişkilidir. Yazarlar, BA ve analoglarının antiplazmodiyal aktivitelerinin, bu tür bileşiklerin eritrositlerin lipid çift tabakasına dahil edilmesiyle açıkça ilişkili olduğu ve parazit vakuolizasyonunda önemli bir rol oynayan kolesterol açısından zengin membran sallarının modifikasyonlarına neden olduğu sonucuna varmışlardır. Yazarlar ayrıca, eritrosit membran modifikasyonları ile antiplazmodiyal aktivite arasındaki bu kurulan bağlantının, yeni antimalaryal ilaçların geliştirilmesi için yeni bir hedef önerebileceği sonucuna varmışlardır [ 48 ].

Ayrı bir pencerede aç
Figür 3
Basit antiplazmodiyal BA analogları.

BA ve basit türevleri BoA, betulinik asit asetat ( 4 ), BA metil ester ( 2 ) ve BA metil ester asetat ( 5 ) in vitro değerlendirilmesi (Figür 3) klorokin dirençli P. falciparum parazitlerine karşı sırasıyla 9.89, 10.01, 5.99, 51.58 ve 45.79 μM IC50 değerleri gösterdi [ ₄₉] . Ek olarak, P. berghei ile enfekte olan ve 4 ile tedavi edilen fareler , parazitemide doza bağlı bir azalma gösterdi. Bu sonuçlar, daha sonra C-3 hidroksil grubunun basit esterleştirilmesinin antiplazmodiyal aktivitede bir gelişme ile sonuçlandığını gösteren Domínguez-Carmona [ 45 ] tarafından elde edilen sonuçlarla uyumludur.

Piperazin türevlerinin sıtma önleyici etkiye sahip olduğunu bildiren çalışmalara dayanarak, 4 [ 50 ]'nin C-28 konumundaki yeni piperazinil türevleri, P. falciparum klorokin duyarlı 3D7 suşuna karşı yeni sıtma önleyici bileşikler için prototipler olarak tasarlandı ve sentezlendi ( Şema 6 ) . Bunlar arasında, bileşikler 4 (IC50 ₌ 4 uM) ve 6'nın (IC50 ₌ 5 uM) iyi antiplazmodiyal aktivite gösterdiği bulunurken, 7'nin çok daha güçlü olduğu (IC50 ₌ 220 nM) ve ayrıca bir seçicilik sergilediği gösterildi. indeks = 18. Ancak, sonraki in vivo çalışmalar [ 51 ] şunu ortaya çıkardı:7 fareler için toksisite gösterdi ve yerleştirme çalışmaları, 7'nin P. falciparum'da bulunan bir SERCA tipi Ca+2-ATPase olan PfATP6'yı ve ayrıca seçiciliği tehlikeye atan daha yüksek afiniteye sahip memeli SERCA proteinini inhibe etmedeki varsayılan etki mekanizmasını gösterdi. parazite doğru bekleniyor.

Innocente ve işbirlikçileri tarafından gerçekleştirilen çalışma [ 50 ], sonuçları birkaç yıl sonra yayınlanan yeni BA piperazinil analoglarının sentezine ve antiplazmodiyal değerlendirmesine ilham vermek için faydalı oldu [ 52 ]. Analoglar 8 (IC50 ₌ 1 uM) ve 9 (IC50 ₌ 4 uM) ( Şema 6 ) P. falciparum klorokin duyarlı 3D7 suşuna karşı iyi bir antiplazmodiyal etki gösterdi. Ayrıca, yazarlar 8'in etki mekanizmasını araştırdılar ve bu türevin sitozolik Ca2 ^{+ artışına yol açtığını kaydetti.}ayrıca klorokin için gözlemlenenden daha düşük bir β-hematin oluşumu inhibisyonuna neden olur.

BA iskeletinin antimalaryal özelliklerini geliştirmek amacıyla C-3 OH grubunda karboksilik asit esterifikasyonuyla elde edilen yeni bir BA türevleri 10-18 serisi sentezlendi . Hazırlanan dokuz türev arasında (Şekil 4), daha küçük iki yan zincir sunan ( 15 ve 16 , IC50 = 5-8 uM), klorokin duyarlı P. falciparum _{3D7'ye karşı BA'dan (}_IC50 = 18 uM) iki ila üç kat daha güçlü olduğu bulundu. Ek olarak, bu tür analoglar, memeli hücre dizisi HEK293T'ye karşı sitotoksik değildi [ 53 ].

Ayrı bir pencerede aç
Şekil 4
C-3 OH grubundaki esterleşmeden antiplazmodiyal BA analogları.

Başka bir çalışmada, yeni bir BA türevleri dizisinin sentezi, C-3 OH grubunda asetik, butirik ve izobütirik esterleştirme ile ve ayrıca C-28 pozisyonunda karboksilde metoksi ve imidazol kısımları dahil edilerek gerçekleştirilmiştir [ 54 ]. ]. Tüm analogların antiplazmodiyal aktiviteleri, klorokin dirençli P. falciparum W2 suşuna karşı değerlendirildi . Sonuçlar, C-3'teki yapısal modifikasyonların, C-3 ve C-28 pozisyonlarındaki eşzamanlı modifikasyonlardan ziyade BA iskeletinin antiplazmodiyal özelliklerini arttırmak için daha umut verici olduğu sonucuna varmasına izin verdi. Hazırlanan tüm bileşiklerden, 3β-bütanoil betulinik asit ester türevinin ( 15 ) en güçlü ( _IC50 ) olduğu gösterildi._{= 3.4 uM) ve ayrıca VERO veya HepG2 hücrelerine (CC 50} > 400 uM) karşı sitotoksisite göstermedi, bu nedenle 117'den yüksek bir seçicilik indeksi sergiledi. Yerleştirme çalışmaları, Plasmodium proteaz PfSUB1 ile 15'lik olası bir etkileşimi gösterdi. Ayrıca, ek veriler , Plasmodium üzerindeki 15'in ana hedefinin , halka aşamasındaki diğer moleküller ve süreçlerle ilgili olabileceğini düşündürmektedir.

Farklı bir kimyasal yaklaşımda, dokuz 2,4-dinitrofenil-hidrazono-BA analogu hazırlandı [ 55 ], ancak yalnızca 19 (IC50 ₌ 15.3 uM) ve 20 (ICso = 10.2 uM) (IC50 = 15.3 uM) ₍Şekil 5) , klorokine dirençli P. falciparum W2 suşuna karşı BA'dan ( _IC50 = 38.8 uM) daha iyi antiplazmodiyal aktivite gösterdi .
[IMG2=JSON][][/IMG2]
Ayrı bir pencerede aç
Şekil 5
Orta derecede antiplazmodiyal aktiviteye sahip 2,4-Dinitrofenil-hidrazon-BA analogları.

Son derece aktif antimalaryal bileşik ferrokin ve önceden hazırlanmış artemisinin-ferrosen hibritinden esinlenerek, ferrosen ve/veya artesunik asit parçaları taşıyan bir dizi BA/BE bazlı dimer ve hibrit bileşik tasarlandı ve sentezlendi ( Şema 7 ), ferroseni içerecek şekilde parçayı bir bağlayıcı veya bir alt birim olarak yeni moleküllere dönüştürür [ 56 ]. Tüm yeni sentezlenmiş bileşikler 21-25'in yanı sıra önceden sentezlenmiş melezler 26 ve 27'nin antiplazmodiyal aktivitesi , P. falciparum 3D7 suşuna karşı değerlendirildi . Bileşik 23 (IC50 ₌ 1.49 uM), 26 (IC50 ₌ 0.26 uM) ve_{BA ve artesunik asidin hibritleri olan}27 (IC50 = 0.09 uM), en aktif antiplazmodiyal analoglar olarak bulundu.

Yukarıda açıklanan tüm sonuçlar, BA'nın zayıf bir antimalaryal ajan olduğunu ve sonuç olarak bu hastalık için bir ilaç olarak kullanılmaya uygun olmadığını göstermiştir. Bununla birlikte, bazı türevleri için bulunan antiplazmodiyal aktivitedeki gelişme, BA'yı ticari olarak temin edilebilen antimalaryal ilaçlara ulaşabilen ve hatta bu ilaçların gücünü artırabilen yeni analogları tasarlamak ve hazırlamak için iyi bir başlangıç materyali yapar. Bu anlamda, yeni kimyasal yaklaşımlar, daha güçlü antiplazmodiyal analogları sentezlemek için C-3 ve/veya C-28 pozisyonlarındaki diğer işlevleri keşfedebilir. Bu senaryoda, diğer antimalaryal ilaçlarla hibridizasyon, umut verici bir sentetik strateji gibi görünmektedir. 3.2. Antileişmanya Analogları

Betulinal (BeAL), literatürde rapor edilen, antileishmanial özelliklere sahip, doğal olarak oluşan BA-yapısal olarak ilişkili ilk bileşiktir. In vitro olarak zayıf bir aktivite gösterdi, Leishmania amazonensis amastigot enfeksiyonunu 136 µM'de %88 oranında azalttı, ancak bu yüksek doz aynı zamanda peritoneal makrofajlar için önemli ölçüde toksikti [ 57 ]. Bununla birlikte, analog 20(29)-dihidrobetulinik asit (DHBA), L. donovani promastigotlarının (IC50 ₌ 2.6 uM) ve amastigotların (IC50 ₌ 4.1 uM) büyümesini daha düşük konsantrasyonlarda güçlü bir şekilde inhibe etme yeteneğine sahip olarak tarif edilmiştir [ 58]. Ayrıca, DHBA'nın ayrıca DNA topoizomeraz I ve II'nin ikili bir inhibitörü olduğu ve enzim-DNA ikili kompleksinin oluşumunu önleyerek etki göstererek apoptozu indüklediği gösterilmiştir.

Daha sonra, 46 kıt doğal ürünün in vitro leishmanicidal aktivitesini araştırmayı amaçlayan bir tarama çalışmasında, BA'nın (IC50 = 87.5 uM) zayıf antileishmanial etkisi _ilk önce L. major promastigotlarına karşı kanıtlandı [ 59 ]. Benzer şekilde betulinik asit asetat ( 4 , IC50 = 44.9 uM) ve BoA (IC50 ₌ 51.2 uM) türevlerinin her ikisi de L. amazonensis'e _karşı zayıf bir şekilde aktifti [ 45 ].

28 – 34 numaralı heterosiklik analoglar , çok yönlü bir ara madde olarak BoA kullanılarak BE'den tasarlanmış ve sentezlenmiştir. BA yerine ucuz BE'nin kullanılması bu yolun bir avantajıdır. Farklı heterosikller, izoksazol, pirazin, piridin, indol ve pirazol grupları dahil olmak üzere lupan iskeletinin 2,3-pozisyonuna kaynaştırılırken, C-28 konumundaki karboksil grubu da bir amid türevine dönüştürülmüştür ( Şema 8 ). Test edilen tüm bileşikler arasında, 30 (IC50 ₌ 13.2 uM) ve 33 (IC50 ₌ 4.3 uM) analoglarının , L. donovani'nin aksenik amastigotlarına karşı en iyi antileishmanial aktiviteyi gösterdiği bulundu.33 , bu çalışmada bildirilenlerin hem en güçlü hem de seçici (SI = 12.9) anti-leishmanial analogudur [ 60 ].

Yeni imidazol karbamat ve N - asilimidazol türevleri 35-40 BoA'dan sentezlendi ( Şema 9 ) ve ilk olarak insan kanser hücre hatlarına karşı in vitro sitotoksisite aktivitesi için tarandı [ 61 ]. Daha sonra, bu imidazol analogları ayrıca L. infantum promastigotlara karşı da değerlendirildi [ 62 ]. C-2 konumunda ilave bir imidazol karbamata sahip olan Bileşik 40'ın (IC50 = 25.8 _uM ), en aktif analog olduğu gösterildi ve onun antileishmanial aktivitesi, 40'ı tedavi için kullanılan ilaç olan miltefosin ile ilişkilendirildiğinde sinerjistik olarak arttı. leishmaniasis'i tedavi edin.

BA türevlerini kullanan antileishmania çalışmaları hala erken aşamadadır. Şimdiye kadar sadece birkaç sonuç elde edilmiş olsa da, bilinen diğer BA analoglarının ilginç antileishmanial profiller gösterebileceğini ve bu nedenle Leishmania sp. geleneksel antileishmanial ilaçlarla kombinasyon da dahil olmak üzere parazitler. Ayrıca, heterosiklik betulin türevlerinin 8.9–30.0 µM [ 63 ] arasındaki _GI50 değerleriyle antileishmanial aktiviteler sergilediği dikkate alındığında , yeni heterosiklik BA analogları, sentez ve antileishmanial araştırma için dikkate değerdir. 3.3. Antitripanozomal Analoglar

BA zayıf antitripanozomal özellikler gösterir, ilk olarak bu triterpen bir Strychnos spinose Lam'den izole edildiğinde ortaya çıkar . antitripanozomal aktivite gösteren lipofilik yaprak özütü. Loganiaceae familyasının bu bitkisi, geleneksel olarak Afrika tripanosomiasisini tedavi etmek için kullanılır. İzole edilen BA, Trypanosoma brucei'nin _kan dolaşımı formlarına karşı test edildi ve IC50 = 32.6 uM (SI = 1.3) [ 64 ] gösterdi. Daha sonra BA, T. cruzi Tulahuen suşunun epimastigot formlarına karşı da test edildi ve yine BA zayıf bir şekilde aktifti (IC50 ₌ 50.0 uM) [ 45 ].

Bu bulgular, BA'nın daha güçlü ve seçici antitripanozomal analogların tasarımı ve sentezi için iyi bir yol gösterici olarak kabul edilebileceğini göstermiştir [ 65 ]. Önceki çalışmalar, C-28 karboksil grubundaki değişikliklerin BA ile karşılaştırıldığında gelişmiş antiprotozoal aktivitelere sahip analoglara yol açabileceğini öne sürmüştü. Böylece, yeni amid analogları 41 – 48 (Şekil 6) hazırlandı ve T. cruzi'nin tripomastigot formlarına karşı test edildi . En güçlü antitripanozomal etkiler 45 (IC50 = 1,8 µM; SI = 17,3), 46 (IC50 ₌ 5,4 µM; SI = 5,3) ve 48 (IC50 ₌ 5,0 µM; SI = 10,7) için gözlenirken BA _{görüntülenirken 19.5}_µM'lik bir IC50 değeri ve SI = 1. Bu çalışmada, yazarlar 45'i seçici bir anti - T. cruzi olarak tanımladılar.ajan ve ek deneysel veriler, bu analogun parazit hücrelerini nekrotik ölümle yok ettiğini ve ayrıca Chagas hastalığının tedavisinde yaygın olarak kullanılan antiparaziter ilaç olan benznidazol ile birlikte kullanıldığında sinerjistik aktivite sergilediğini gösterdi [ 65 ].

Ayrı bir pencerede aç
Şekil 6
Antitripanozomal aktiviteye sahip amid BA analogları.

Bu ilk sonuçlar, BA analoglarının umut verici antitripanozomal özelliklerini ortaya koymaktadır ve Trypanosoma sp . parazitler. Ayrıca, trifenilfosfonyum gruplarını BA iskeletine dahil etmeyi amaçlayan yeni kimyasal yaklaşımlar [ 68 ] sadece fiziksel özellikleri değil, aynı zamanda BA analoglarının etki mekanizmasını da geliştirerek daha güçlü antitripanozomal bileşiklere yol açabilir.

Git: 4. Sonuç Açıklamaları ve Perspektifler

BA, doğal kaynaklardan veya biyosentetik olarak ilişkili triterpenlerin kimyasal dönüşümüyle kolayca elde edilen bir bileşiktir. Toplam sentezi hala ticari olarak mümkün değildir, ancak BE'den yarı sentez iyi sonuçlar vermiştir. Ek olarak, doğal öncülerden BA ve türevlerini elde etmek için kullanılan halihazırda bildirilen kimyasal prosedürlerin yanı sıra, BE ve BA'nın mikroorganizmalar tarafından biyokatalizi kullanılarak aynı yönde umut verici bazı biyoteknolojik gelişmeler de elde edilmiştir [ 13 , 34 , 69 , 70 , 71 ] ve bitki hücreleri [ 72 ].

BA ve türevleri, özellikle antikanser ve anti-HIV özellikleri olmak üzere bir dizi biyolojik aktivite sunar. Bununla birlikte, antiprotozoal aktivite, özellikle tropikal ve subtropikal bölgelerde yüksek prevalansa sahip olan sıtma, leishmaniazlar ve tripanosomiazlar gibi vektör kaynaklı tropik hastalıklarla uğraşırken de çok ilginçtir. BA için tarif edilen antiplazmodiyal aktivite orta düzeydeydi, bununla birlikte C-3 pozisyonunda asillenmiş bazı analoglar bu aktivitede bir gelişme gösterdi ve artesunik asitli hibrit modeller en ilginç özellikleri gösterdi. Benzer şekilde, birkaç analog da BA'dan daha yoğun antileishmanial aktiviteler sergiledi ve C-2/C-3 pozisyonlarına kaynaşmış heterosikller ve amid türevleri en umut verici analoglardı.

Bugüne kadar, BA yapısı üzerinde gerçekleştirilen kimyasal dönüşümlerin çoğu, C-3 hidroksil grubunun esterleştirilmesi ve C-28 karboksilik grubunun türevlendirilmesi ile ilgilidir, ancak BA'da bulunan ve dönüşüme duyarlı başka bir fonksiyonel grup çift bağdır. C-20/C-29'da. Bu iyi araştırılmamıştır ve literatürde henüz bu pozisyonlardaki yapısal modifikasyonlardan BA antiparaziter analoglarını sentezlemeyi amaçlayan sağlam çalışmalar bulunmamıştır. Yakın zamanda yayınlanan bir çalışma, C-20/C-29 pozisyonlarındaki BA brominasyonunun daha güçlü antileishmanial analoglar üretebileceğini öne sürdü [ 73]. Kanaatimizce, sadece çift bağın kendisinin değil, aynı zamanda alilik konumlarının da dönüştürülmesiyle yeni türevler elde etmek için daha ileri çalışmalar ilgi çekici olacaktır. Bir antiprotozoal olarak değerlendirilmesi, BA'nın yapı-aktivite ilişkileri hakkında daha derinlemesine bilgi edinilmesini sağlayacaktır.

Moleküler konjugasyon veya hibridizasyonun, gelişmiş farmakokinetik ve farmakolojik özelliklere sahip bileşikler üretebildiği ve hatta öncülerine kıyasla direncin üstesinden gelebildiği iyi bilinmektedir [ 74 , 75 , 76 ]. Bu anlamda, BA'nın artesunik asit ile hibridizasyonunun iyi sonuçlar verdiği dikkate alındığında, bu stratejinin bilinen diğer antimalaryal, antileishmanial ve antitripanozomal ajanlara uygulanmasını araştırmaya değer olacaktır.

BA, farklı bitki özlerinin izolasyonu veya betulin'in kimyasal dönüşümü ile üretilebilir; Betula ssp'den kolayca elde edilebilir. Sonuç olarak, BA'nın ihmal edilen tropikal hastalıkların tedavisi de dahil olmak üzere antiprotozoal ajanlar olarak kullanılma potansiyeli ile yeni ticari ürünlerin elde edilmesine yönelik daha fazla araştırma için büyük ilgi gören bir öncü molekül olabileceği söylenebilir.

Ayrı bir pencerede aç
şema 1
Koruyucu gruplar kullanılarak betulin'den (BE) betulinik asit (BA) sentezi [ 38 ]. Reaktifler ve koşullar: ( i ) DHP/ CH2C1 _{2 /PPTS}₍ %95); ( ii ) Ac20 _/ piridin (%87); ( iii ) EtOH/PPTS (%95); ( iv ) Cr03 _/ H2S04 _/ aseton ₍ %80); ( v ) K2C03 _/ MeOH _/ H20 ₍ %88).

Ayrı bir pencerede aç
Şema 2
Doğrudan Jones oksidasyonu yoluyla BE'den BA sentezi.

Ayrı bir pencerede aç
Şema 3
BE'den katı destekli CrO ₃ oksidasyonu yoluyla BA sentezi [ 43 ]. Reaktifler ve koşullar: ( i ) 2 eq. CrO3 _/ Si02 ₍ 1:10), toluen, 60 dak (%84); ( ii ) 2 eş. KMnO4, aseton, 0 °C, 30 dak (~%100).

Ayrı bir pencerede aç
Şema 4
4-asetamido-TEMPO/NaClO/NaClO2 yoluyla BE'den BA'nın tek aşamalı _sentezi .

Ayrı bir pencerede aç
Şema 5
TEMPO tipi katalizörler/DIB aracılığıyla BE'den BA sentezi.

Ayrı bir pencerede aç
Şema 6
Asetil betulinik asidin yeni piperazinil türevlerinin sentezi. Reaktifler ve koşullar: ( i ) ClCOCOCl, 0 °C, 3 h; TEA, N-tert -butoksikarbonil-1,4-bis(3-aminopropil)piperazin, RT, 24 h; ( ii ) TFA %10/CH2CI2 _, RT , ₆ saat.

Ayrı bir pencerede aç
Şema 7
BA/BE'den türetilen dimerlere ve hibritlere giden sentetik yollar 21 – 25 . Reaktifler ve koşullar: ( i ) DCC, DMAP, CH2Cl2 , ₀ °C→ rt _;( ii ) DMAP, CH2Cl2 , ₀ °C→rt _.

Ayrı bir pencerede aç
Şema 8
Heterosiklik BA analoglarının sentezi [ 60 ]. Reaktifler ve koşullar: ( _i₎Jones oksidasyonu, Na2Cr207 , H2S04 _, H20 , aseton , oda sıcaklığı, 21 h (% ₄₄₎_;( ii ) uygun fenilhidrazin hidroklorür, HOAc, geri akış, 3 saat, (%21-42); ( iii ) etilendiamin, kükürt, morfolin, geri akış, 21 saat (%68); ( iv ) NH2OH _/ HCl, piridin, MeOH, geri akış, 16 saat (%84); ( v ) propargilamin, Cu(I)Cl, EtOH, geri akış, 17 saat (%11); ( vi ) 1. oksalil klorür, DCM, oda sıcaklığı, 3 h; 2. sulu amonyak, DCM, oda sıcaklığı, 1 saat, (~%100); (vii ) TFAA, DCM, oda sıcaklığı, 20 h, (%33); DCM ¼ diklorometan, TFAA ¼ trifloroasetik anhidrit.

Ayrı bir pencerede aç
Şema 9
İmidazol BA analoglarının sentezi [ 61 ]. Reaktifler ve koşullar: ( i ) CDI, kuru THF, N ₂ , geri akış, 8–9 h; ( ii ) DDQ, dioksan, N2 _, geri akış, 15 saat; ( iii ) ₀₂ , t -BuOK, t -BuOH, 40° C, 2 saat.

Git: Teşekkür

Yazarlar, burs için CAPES ve CNPq'ye teşekkür eder.

Git: Yazar Katkıları

Kavramsallaştırma, RB, JMD ve M.A.C.; yazılım, RB ve ABC; yazma—orijinal taslak hazırlama, ABC, RB, JMD ve M.A.C.; yazma—inceleme ve düzenleme, ABC, RB, JMD ve M.A.C.; görselleştirme, RB ve JMD; denetim, RB, JMD ve M.A.C. Tüm yazarlar, makalenin yayınlanan versiyonunu okudu ve kabul etti.

Git: Finansman

Bu araştırma Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), hibe numarası 406427/2018-6 tarafından finanse edilmiştir.

Git: Çıkar çatışmaları

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir. Finansörlerin çalışmanın tasarımında hiçbir rolü yoktu; verilerin toplanması, analizi veya yorumlanmasında; makalenin yazılmasında veya sonuçların yayınlanması kararında.

Git: Dipnotlar

Yayıncının Notu: MDPI, yayınlanan haritalarda ve kurumsal bağlantılarda yargı yetkisi iddiaları konusunda tarafsız kalır.

Git: Referanslar

1. Robertson A., Soliman G., Owen EC Polyterpenoid bileşikleri. Kısım, I. Cornus florida'dan Betulik asit L.J. Chem. Soc. 1939:1267–1273. doi: 10.1039/jr93900001267. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
2. Kawaguti R., Kim KW Zyzyphus vulgaris Lamark var. spinosus Bunge. II. Betulinik asit. Yakugaku Zashi. 1940; 60 :595–596. doi: 10.1248/yakushi1881.60.11_595. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
3. Bruckner GJ, Kovacs J., Koczka I. Çınar ağacının kabuğunda betulinik asit oluşumu. J. Chem. Soc. 1948:948–951. doi: 10.1039/JR9480000948. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
4. Ralph CS, Syncarpia laurifolia'dan White DE Betulik asit. J. Chem. Soc. 1949:3433–3434. doi: 10.1039/jr949003433. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
5. Retzlaff F. Ueber Herba gratiolae. Kemer Eczacılık (Weinh.). 1902; 240 :561–568. doi: 10.1002/ardp.19022400802. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
6. Zellner J., Fajner R. Wachsbestandteile, Hartriegelrinden (Cornaceae) Monatshefte'de. 1925; 46 :611–630. doi: 10.1007/BF01525581. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
7. Stabursvik A. Menyanthes trifoliata'da betulinik asit oluşumu L. Açta Chem. Tarama. 1953; 7 :446-447. doi: 10.3891/acta.chem.scand.07-0446. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
8. Pai SR, Joshi RK Bitki krallığında betulinik asidin dağılımı. Bitki. bilim Bugün. 2014; 1 :103–107. doi: 10.14719/pst.2014.1.3.58. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
9. Pavanasasivam G., Sultanbawa MUS Dilleniaceae'deki Betulinik asit ve doğal dağılımının gözden geçirilmesi. Fitokimya. 1974; 13 :2002–2006. doi: 10.1016/0031-9422(74)85143-5. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
10. David JM, Souza JC, Guedes MLS, David JP Estudo fitoquimico de Davilla rugosa: Flavonóides ve terpenóides. Braz. J. Pharmacogn. 2006; 16 :105–108. doi: 10.1590/S0102-695X2006000100019. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
11. Moghaddam MG, Ahmad FBH Betulinik asitin çeşitli botanik kaynakları: Bir inceleme. Asya J. Chem. 2012; 24 :4843-4846. [ Google Akademik ]
12. Fukushima EO, Seki H., Ohyama K., Ono E., Umemoto N., Mizutani M., Saito K., Muranaka T. CYP716A alt ailesi üyeleri, triterpenoid biyosentezinde çok işlevli oksidazlardır. Bitki. Hücre Fizyol. 2011; 52 :2050–2061. doi: 10.1093/pcp/pcr146. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
13. Zhou C., Li J., Li C., Zhang Y. Mayada betulinik asit biyosentezinin çoklu stratejiler kullanılarak iyileştirilmesi. BMC Biyoteknoloji. 2016; 16 :1–9. doi: 10.1186/s12896-016-0290-9. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
14. Trumbull ER, Bianchi E., Eckert DJ, Wiedhopf RM, Cole JR Vauquelinia corymbosa ( Rosaceae ) J. Pharm. bilim 1976; 65 :1407–1408. doi: 10.1002/jps.2600650938. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
15. Pisha E., Chai H., Lee I.-S., Chagwedera TE, Farnsworth NR, Cordell GA, Beecher CWW, Fong HHS, Kinghorn AD, Brown DM, ve diğerleri. Apoptoz indüksiyonu ile işlev gören insan melanomunun seçici bir inhibitörü olarak betulinik asidin keşfi. Nat. Med. 1995; 1 :1046–1051. doi: 10.1038/nm1095-1046. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
16. Zhang D., Xu H., Wang L., Li Y., Sun P., Wu X., Wang G., Chen W., Ye W. Potansiyel Antitümör Ajanlar Olarak Betulinik Asit ve Türevleri. Harv. Otobüs. Rev. 2008; 86 :84-92. doi: 10.1002/med.21353. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
17. Zhang X., Hu J., Chen Y. Betulinik asit ve tümör baskılamanın farmakolojik etkileri (İnceleme) Mol. Med. 2016 ; 14 :4489–4495. doi: 10.3892/mmr.2016.5792. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
18. Hoenke S., Heise NV, Kahnt M., Deigner HP, Csuk R. Betulinik asitten türetilen amidler oldukça sitotoksik, apoptotik ve seçicidir. Avro. J. Med. Kimya 2020; 207 :112815. doi: 10.1016/j.ejmech.2020.112815. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
19. Huang Q., Chen H., Luo X., Zhang Y., Yao X., Zheng X. Betulinik Asit Analoglarının Yapısı ve Anti-HIV Aktivitesi. Kör. Med. bilim 2018; 38 :387–397. doi: 10.1007/s11596-018-1891-4. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
20. Wu HF, Morris-Natschke SL, Xu XD, Yang MH, Cheng YY, Yu SS, Lee KH Doğal anti-HIV triterpenoidleri ve analoglarındaki son gelişmeler. Med. Araş. Rev. 2020; 40 :2339–2385. doi: 10.1002/med.21708. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
21. Wang Q., Li Y., Zheng L., Huang X., Wang Y., Chen CH, Cheng YY, Morris-Natschke SL, Lee KH Novel Betulinic Acid-Nucleoside Hybrids with Potent Anti-HIV Activity. Ac Med. Kimya Lett. 2020; 11 :2290–2293. doi: 10.1021/acsmedchemlett.0c00414. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
22. Ghaffari Moghaddam M., Bin H., Ahmed F., Samzadeh-Kermani A. Betulinik Asitin Biyolojik Aktivitesi: Bir İnceleme. farmakol. Eczacılık 2012; 03 :119–123. doi: 10.4236/s.2012.32018. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
23. Ríos JL, Máñez S. Betulinik Asit için Yeni Farmakolojik Fırsatlar. Bitki Med. 2018; 84 :8-19. doi: 10.1055/s-0043-123472. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
24. Hordyjewska A., Ostapiuk A., Horecka A., Kurzepa J. Betulin ve betulinik asit: Güçlü biyolojik potansiyele sahip triterpenoid türevleri. Bitki kimyası. Rev. 2019; 18 :929–951. doi: 10.1007/s11101-019-09623-1. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
25. Saccoliti F., Di Santo R., Costi R. Trypanothione Metabolizmasını Hedefleyen Yenilikçi Antiprotozoal Ajanların Araştırılmasında Son Gelişmeler. ChemMedChem. 2020:1–17. doi: 10.1002/cmdc.202000325. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
26. Sarma N., Patouillard E., Cibulskis RE, Arcand JL Sıtmanın ekonomik yükü: Kanıtların yeniden gözden geçirilmesi. Ben. J. Trop. Med. Hig. 2019; 101 :1405–1415. doi: 10.4269/ajtmh.19-0386. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
27. Dünya Sağlık Örgütü Sıtma. [(15 Aralık 2020'de erişildi)];Çevrimiçi olarak erişilebilir: https://www.who.int/health-topics/malaria#tab=tab_1 .
28. Dünya Sağlık Örgütü Leishmaniasis. [(15 Aralık 2020'de erişildi)];Çevrimiçi olarak erişilebilir: https://www.who.int/health-topics/le...asis#tab=tab_1 .
29. Dünya Sağlık Örgütü Human African Trypanosomiasis (Uyku Hastalığı) [(erişim tarihi 15 Aralık 2020)];Çevrimiçi olarak erişilebilir: https://www.who.int/health-topics/hu...asis#tab=tab_1 .
30. Dünya Sağlık Örgütü Chagas Hastalığı (Amerikan Trypanosomiasis) [(erişim tarihi 15 Aralık 2020)];Çevrimiçi olarak erişilebilir: https://www.who.int/health-topics/ch...ease#tab=tab_1 .
31. Manner CK, Graef KM, Dent J. WIPO Re:Search: Tropikal hastalık ilaçlarının keşfini ve geliştirilmesini hızlandırmak için kamu-özel sektör ortaklıklarını hızlandırmak. Trop. Med. Bulaş. Dis. 2019; 4:53 . doi: 10.3390/tropicalmed4010053. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
32. Bernal FA, Kaiser M., Wünsch B., Schmidt TJ Cinnamate Ester Analoglarının Potent Antiprotozoal Agents Olarak Yapı-Aktivite İlişkileri. ChemMedChem. 2020; 15 :68-78. doi: 10.1002/cmdc.201900544. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
33. Chen Q.-h., Liu J., Zhang H.-f., He G.-q., Fu M.-l. Mantarlar tarafından biyotransformasyon yoluyla betulin'den betulinik asit üretimi. enzim. Mikrop. Teknoloji. 2009; 45 :175–180. doi: 10.1016/j.enzmictec.2009.06.005. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
34. Liu J., Fu ML, Chen QH Betulin'in, kültürlenmiş Armillaria luteo-virens Sacc ZJUQH100-6 hücreleri tarafından katalize edilen betulinik asit üretimine biyotransformasyon optimizasyonu. J. Uygulama Mikrobiyol. 2011; 110 :90-97. doi: 10.1111/j.1365-2672.2010.04857.x. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
35. An T., Zha W., Zi J. betulinik asit ve türevlerinin biyoteknolojik üretimi ve uygulamaları. Uygulama Mikrobiyol. Biyoteknoloji. 2020; 104 :3339-3348. doi: 10.1007/s00253-020-10495-1. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
36. Stork G., Uyeo S., Wakamatsu T., Grieco P., Labovitz J. The Total Synthesis of Lupeol. J. Am. Kimya Soc. 1971; 93 :4945-4947. doi: 10.1021/ja00748a068. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
37. Surendra K., Corey EJ Temel pentasiklik triterpen lupeolün kısa bir enantioselektif toplam sentezi. J. Am. Kimya Soc. 2009; 131 :13928–13929. doi: 10.1021/ja906335u. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
38. Kim DSHL, Chen Z., Van Nguyen T., Pezzuto JM, Qiu S., Lu ZZ Betulin'den betulinik aside özlü yarı sentetik bir yaklaşım. sentez. Komün. 1997; 27 :1607-1612. doi: 10.1080/0037919708006099. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
39. Laszczyk MN Kanser tedavisinde araç olarak lupane, oleanane ve ursane grubunun pentasiklik triterpenleri. Bitki Med. 2009; 75 :1549–1560. doi: 10.1055/s-0029-1186102. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
40. Csuk R., Schmuck K., Schäfer R. betulinik asidin pratik bir sentezi. Dörtyüzlü Lett. 2006; 47 :8769-8770. doi: 10.1016/j.tetlet.2006.10.004. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
41. Ruzicka L., Lamberton AH, Christie EW Zur Kenntnis der Triterpene. 41. Mitteilung. Oksidasyon des Betulin-mono-asetatlar mit Chromtrioxyd zu sauren Produkten. Helv. Chim. Acta. 1938:1706-1717. doi: 10.1002/hlca.193802101208. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
42. Baltina LA, Flekhter OB, Nigmatullina LR, Boreko EI, Pavlova NI, Nikolaeva SN, Savinova OV, Tolstikov GA Lupane triterpenler ve antiviral aktiviteye sahip türevler. Biyoorganik Med. Kimya Lett. 2003; 13 :3549–3552. doi: 10.1016/S0960-894X(03)00714-5. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
43. Pichette A., Liu H., Roy C., Tanguay S., Simard F., Lavoie S. Bir antitümöral bileşik olan betulinik asidin hazırlanması için betulin'in seçici oksidasyonu. sentez. Komün. 2004; 34 :3925–3937. doi: 10.1081/SCC-200034788. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
44. Wickholm N., Alakurtti S., Yli-Kauhaluoma J., Koskimies J. betulinik asit hazırlama yöntemi 2013. W02013038316A1. 2013 21 Mart;
45. Domínguez-Carmona DB, Escalante-Erosa F., García-Sosa K., Ruiz-Pinell G., Gutierrez-Yapu D., Chan-Bacab MJ, Giménez-Turba A., Peña-Rodríguez LM Betulinic'in antiprotozoal aktivitesi asit türevleri. Bitkisel ilaç. 2010; 17 :379-382. doi: 10.1016/j.phymed.2009.08.002. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
46. Bringmann G., Saeb W., Assi LA, François G., Narayanan ASS, Peters K., Peters E.-M. Betulinik asit: Triphyophyllum peltatum ve Ancistrocladus heyneanus'tan izolasyon, antimalaryal aktivite ve benzil esterin kristal yapısı. Bitki Med. 1997; 63 :255–257. doi: 10.1055/s-2006-957666. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
47. Steele J., Warhurst D., Kirby G., Simmonds M. Bir antimalaryal olarak betulinik asidin in vitro ve in vivo değerlendirmesi. bitki Araş. 1999; 13 :115–119. doi: 10.1002/(SICI)1099-1573(199903)13:2<115::AID-PTR404>3.0.CO;2-1. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
48. Ziegler HL, Franzyk H., Sairafianpour M., Tabatabai M., Tehrani MD, Bagherzadeh K., Hägerstrand H., Stærk D., Jaroszewski JW Eritrosit membran modifiye edici ajanlar ve Plasmodium falciparum büyümesinin inhibisyonu: Yapı-aktivite ilişkileri betulinik asit analogları için. Biyoorganik Med. Kimya 2004; 12 :119–127. doi: 10.1016/j.bmc.2003.10.010. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
49. De Sá MS, Costa JFO, Krettli AU, Zalis MG, De Azevedo Maia GL, Sette IMF, De Amorim CâMara C., Filho JMB, Giulietti-Harley AM, Ribeiro Dos Santos R., et al. Betulinik asit ve türevlerinin in vitro olarak Plasmodium falciparum'a karşı ve P. berghei ile enfekte farelerde in vivo antimalaryal aktivitesi. parazitol. Araş. 2009; 105 :275–279. doi: 10.1007/s00436-009-1394-0. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
50. Innocente AM, Silva GNS, Cruz LN, Moraes MS, Nakabashi M., Sonnet P., Gosmann G., Garcia CRS, Gnoatto SCB betulinik asit ve ursolik asit analoglarının sentezi ve antiplazmodiyal aktivitesi. Moleküller. 2012; 17 :12003–12014. doi: 10.3390/moleküller171012003. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
51. Diedrich D., Wildner AC, Silveira TF, Silva GNS, dos Santos F., da Silva EF, do Canto VP, Visioli F., Gosmann G., Bergold AM, et al. SERCA, potansiyel antimalaryal aktiviteye sahip bir betulinik asit türevinin toksisitesinde çok önemli bir rol oynar. Kimya Biol. Etkileşim. 2018; 287 :70-77. doi: 10.1016/j.cbi.2018.03.014. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
52. Silva GNS, Schuck DC, Cruz LN, Moraes MS, Nakabashi M., Gosmann G., Garcia CRS, Gnoatto SCB betulinik asidin piperazin türevlerinin antimalaryal aktivitesi, sitotoksisitesi ve etki mekanizmasının araştırılması. Trop. Med. Int. İyileşmek. 2015; 20 :29–39. doi: 10.1111/tmi.12395. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
53. Da Silva GNS, Maria NRG, Schuck DC, Cruz LN, De Moraes MS, Nakabashi M., Graebin C., Gosmann G., Garcia CRS, Gnoatto SCB İki yeni yarı sentetik triterpen türevi serisi: Sıtma önleyici aktivitedeki farklılıklar , sitotoksisite ve etki mekanizması. Sıtma. J.2013 ; 12 :1–7. doi: 10.1186/1475-2875-12-89. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
54. Cargnin ST, Staudt AF, Medeiros P., de Medeiros Sol Sol D., de Azevedo dos Santos AP, Zanchi FB, Gosmann G., Puyet A., Garcia Teles CB, Gnoatto SB Semisynthesis, sitotoksisite, antimalaryal değerlendirme ve yapı - iki seri triterpen türevinin aktivite ilişkisi. Biyoorganik Med. Kimya Lett. 2018; 28 :265–272. doi: 10.1016/j.bmcl.2017.12.060. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
55. Ullah A., Baratto LC, Paula RC, Silva LHV, Soares MJ, Oliveira BH betulinik asit, steviol ve izosteviol türevlerinin hazırlanması ve antitripanozomal ve antimalaryal aktivitelerin değerlendirilmesi. J. Braz. Kimya Soc. 2016; 27 :1245-1253. doi: 10.5935/0103-5053.20160021. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
56. Karagöz A.Ç., Leidenberger M., Hahn F., Hampel F., Friedrich O., Marschall M., Kappes B., Tsogoeva SB Güçlü antimalaryal ve antiviral faaliyetler. Biyoorganik Med. Kimya 2019; 27 :110-115. doi: 10.1016/j.bmc.2018.11.018. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
57. Sauvain M., Kunesch N., Poisson J., Gantier JC, Gayral P., Dedet JP Amazon liana Doliocarpus dentatus ( Dilleniaceae ) Phyther'den leishmanicidal triterpenlerin ve lignanların izolasyonu . Araş. 1996; 10 :1–4. doi: 10.1002/(SICI)1099-1573(199602)10:1<1::AID-PTR757>3.0.CO;2-A. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
58. Chowdhury AR, Mandal S., Goswami A., Ghosh M., Mandal L., Chakraborty D., Ganguly A., Tripathi G., Mukhopadhyay S., Bandyopadhyay S., et al. Dihidrobetulinik asit, DNA topoizomeraz I ve II'yi hedefleyerek Leishmania donovani'de apoptozu indükler : Antileishmanial tedavideki etkileri. Mol. Med. 2003; 9 :26–36. doi: 10.1007/BF03402104. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
59. Takahashi M., Fuchino H., Sekita S., Satake M. Bazı kıt doğal ürünlerin in vitro leishmanicidal aktivitesi. bitki Araş. 2004; 18 :573–578. doi: 10.1002/ptr.1502. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
60. Haavikko R., Nasereddin A., Sacerdoti-Sierra N., Kopelyanskiy D., Alakurtti S., Tikka M., Jaffe CL, Yli-Kauhaluoma J. Heterosikl ile kaynaşmış lupan triterpenoidler, Leishmania donovani amastigotlarını inhibe eder. Medchemcomm. 2014; 5 :445–451. doi: 10.1039/C3MD00282A. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
61. Santos RC, Salvador JAR, Marín S., Cascante M. Sitotoksik aktiviteye sahip betulin ve betulinik asidin yeni yarı sentetik türevleri. Biyoorganik Med. Kimya 2009; 17 :6241-6250. doi: 10.1016/j.bmc.2009.07.050. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
62. Sousa MC, Varandas R., Santos RC, Santos-Rosa M., Alves V., Salvador JAR Yarı sentetik lupan triterpenoidler betulin ve betulinik asit türevlerinin antileishmanial aktivitesi: Miltefosin ile sinerjistik etkiler. PLoS BİR. 2014; 9 :e89939. doi: 10.1371/journal.pone.0089939. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
63. Alakurtti S., Heiska T., Kiriazis A., Sacerdoti-Sierra N., Jaffe CL, Yli-Kauhaluoma J. Heterosiklik betulin türevlerinin sentezi ve anti-leishmanial aktivitesi. Biyoorganik Med. Kimya 2010; 18 :1573–1582. doi: 10.1016/j.bmc.2010.01.003. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
64. Hoet S., Pieters L., Muccioli GG, Habib-Jiwan JL, Opperdoes FR, Quetin-Leclercq J. Strychnos spinosa ve ilgili bileşiklerin yapraklarından triterpenoidlerin ve sterollerin antitripanozomal aktivitesi. J. Nat. Ürün 2007; 70 :1360-1363. doi: 10.1021/np070038q. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
65. Meira CS, Barbosa-Filho JM, Lanfredi-Rangel A., Guimarães ET, Moreira DRM, Soares MBP Betulinik asit türevlerinin antiparazitik değerlendirmesi, etkili ve seçici anti-Trypanosoma cruzi inhibitörlerini ortaya çıkarır. Tecrübe. parazitol. 2016; 166 :108–115. doi: 10.1016/j.exppara.2016.04.007. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
66. Borkova L., Hodon J., Urban M. Modifiye A-Halkaları ile Betulinik Asit Türevlerinin Sentezi ve Potansiyel İlaç Adayları Olarak Uygulamaları. Asya J. Org. Kimya 2018; 7 :1542–1560. doi: 10.1002/ajoc.201800163. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
67. Hodon J., Borkova L., Pokorny J., Kazakova A., Urban M. Pentasiklik triterpen konjugatlarının tasarımı ve sentezi ve tıbbi araştırmalarda kullanımları. Avro. J. Med. Kimya 2019; 182 :1–25. doi: 10.1016/j.ejmech.2019.111653. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
68. Grymel M., Zawojak M., Adamek J. Betulin ve Betulinik Asitin Biyolojik Aktiviteli Trifenilfosfonyum Analogları: Kapsamlı Bir İnceleme. J. Nat. Ürün 2019; 82 :1719–1730. doi: 10.1021/acs.jnatprod.8b00830. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
69. Feng Y., Li M., Liu J., Xu TY, Fang RS, Chen QH, He GQ Cunninghamella blakesleeana tarafından katalize edilen betulin'in betulinik aside yeni bir tek aşamalı mikrobiyal dönüşümü. Gıda Kimyası 2013; 136 :73-79. doi: 10.1016/j.foodchem.2012.07.088. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
70. Chatterjee P., Kouzi SA, Pezzuto JM, Hamann MT Bacillus megaterium ATCC 13368 ile antimelanom ajanı betulinik asidin biyotransformasyonu . Çevre. Mikrobiyol. 2000; 66 :3850–3855. doi: 10.1128/AEM.66.9.3850-3855.2000. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
71. Wu J., Niu Y., Bakur A., Li H., Chen Q. Tasarlanmış Saccharomyces cerevisiae tarafından betulin'den pentasiklik triterpenoid bileşik betulinik asidin hücresiz üretimi. Moleküller. 2017; 22 :1075. doi: 10.3390/moleküller22071075. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
72. Häkkinen ST, Nygren H., Maiorova N., Haavikko R., Alakurtti S., Yli-Kauhaluoma J., Rischer H., Oksman-Caldentey KM Biotransformation of Cyclodexrine-Complexed Semisynthetic Betulin Türevleri Bitki Hücreleri. Bitki Med. 2018; 84 :743–748. doi: 10.1055/a-0585-6081. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
73. Cargnin ST, Staudt AF, Paula De Azevedo Dos Santos A., Gosmann G., Bioni C., Teles G., Gnoatto SB Lupan ve ursan bromlu türevlerin yarı sentezine etkili yaklaşım ve Leishmania amazonensis canlılığı üzerindeki etkileri . Anne. Med. Kimya Araş. 2017; 3 :1–5. [ Google Akademik ]
74. Tietze LF, Bell HP, Chandrasekhar S. İlaç keşfi için yeni liderler olarak doğal ürün melezleri. Ange. Kimya Int. Ed. 2003; 42 :3996–4028. doi: 10.1002/anie.200200553. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
75. Ojima I. İlaç Tasarımı ve Keşfine Modern Moleküler Yaklaşımlar. Acc. Kimya Araş. 2008; 41 :2–3. doi: 10.1021/ar700158c. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
76. Bansal Y., Silakari O. Çok işlevli bileşikler: Çok faktörlü hastalıklar için akıllı moleküller. Avro. J. Med. Kimya 2014; 76 :31-42. doi: 10.1016/j.ejmech.2014.01.060. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]

Böbrek Hastalıklarına Ne İyi Gelir İdrar Yolları Enfeksiyonu Nasıl Tedavi Edilir

Huş İle Kronik Böbrek Yetmezliği Tedavisi, Böbrek Yetmezliğine Ne İyi Gelir

**igokcek** · 16 July 2012, 16:58

Böbrek Yetmezliğine Ne İyi Gelir, Huş ile Böbrek Yetmezliği Tedavisi, Cilt Rengine Bitkisel Çözüm

**igokcek** · 16 July 2012, 17:04

Betula pendula yaprağı ekstraktının antioksidan aktivitesinin değerlendirilmesi ve model gıdalar üzerindeki etkileri.

Nurul Aini Mohd Azman , ^a,^bMonika Skowyra , ^aKwestan Muhammad , ^aMaría Gabriela Gallego , ^ave Maria Pilar Almajano ^a
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
Bu makale, PMC'deki diğer makaleler tarafından alıntılanmıştır .
Git: Soyut

Bağlam: Betula pendula Roth (Betulaceae) insanlarda antikanser, antibakteriyel ve antiviral etkiler dahil birçok farmakolojik aktivite sergiler. Bununla birlikte, BP'nin lipid bozulmasına yönelik antioksidan aktivitesi tam olarak belirlenmemiştir.

Amaç: BP etanol ve metanol özütleri, antioksidan aktiviteyi in vitro bir yöntemle belirlemek için değerlendirildi ve oksidatif stabiliteyi incelemek için sığır köftelerine liyofilize BP özütü eklendi.

Gereç ve yöntem: BP ekstraktlarının antioksidan aktiviteleri, Fenton reaksiyonu 2,2'-azino-bis-3-etilbenzotiazolin-6-sülfonik asit (TEAC) radikal katyonu, oksijen radikali tarafından oluşturulan metoksi radikaline karşı süpürücü radikal aktivite ölçülerek belirlendi. absorbans kapasitesi (ORAC) ve ferrik indirgeyici antioksidan güç (FRAP) testleri. (H / h) O ila 80:20 depolanan BP liyofilize ekstresi,% 0.1 (ağ / ağ)% 0.3 sığır köftesi lipid bozulma ₂ CO: ₂ 10 gün idi ° C için 4 ° C sıcaklıkta, modifiye atmosfer (MAP) tiyobarbitürik asitle reaksiyona giren maddeler (TBARS), % metmiyoglobin ve renk değeri kullanılarak belirlendi.

Sonuçlar: BP metanol özütü, kateşin, mirisetin, kuersetin, naringenin ve p- kumarik asit varlığını ortaya çıkardı . BP etanol (%50 w/w) özütü, sırasıyla 1.45, 2.81, 1.52 mmol Trolox eşdeğerleri (TE)/g DW değerleriyle TEAC, ORAC ve FRAP analizlerinde süpürme aktivitesi gösterdi. Lipid oksidasyonunda azalmalar, renk ve metmiyoglobin konsantrasyonundaki değişikliklerle kendini gösterdiği gibi, liyofilize BP özütü (%0.1 ve %0.3 a/a) ile muamele edilen numunelerde bulundu. BP'li bir ön çalışma filmi, kas gıdalarında lipid bozulmasını geciktirdiğini gösterdi.

Sonuç: Mevcut sonuçlar, BP ekstraktlarının doğal gıda antioksidanları olarak kullanılabileceğini göstermiştir.

Anahtar Kelimeler: Polifenol, lipid oksidasyonu, aktif paketleme
Git: Tanıtım

Günümüzde tüketiciler, doğal gıdalara, sağlıklı beslenmeye ve gıda endüstrisinde kullanılan sentetik antioksidanların olası toksikolojik etkilerine giderek daha fazla ilgi duymaktadır. Doğal antioksidanlar, aktivitelerini temel olarak çoğu bitkisel bitki, meyve ve sebzede bulunan polifenol bileşiklerinden alır. Önceki çalışmalar, antioksidanlar açısından zengin bitkisel gıdaların tüketiminin sağlığa faydalı olduğunu ve kalp problemleri, diyabet, nörodejeneratif bozukluk ve kanser gibi birçok hastalığın önlenmesine yardımcı olduğunu göstermektedir (Halliwell 1996 ; Decker ve ark. 2005 ; Pandey & Rizvi 2009 ; Aliakbarlu & Tajik ; 2012). Ayrıca, et burger ve mayonez gibi model gıdalarda sentetik antioksidanın yerini almak için doğal antioksidanların kullanımı son yıllarda yoğun bir şekilde araştırılmaktadır. Kas gıdalarına doğal antioksidanların dahil edilmesi sadece etin raf ömrünü uzatmakla ve oksidasyon sürecini başarılı bir şekilde geciktirmekle kalmamış, aynı zamanda etin besin kalitesini de iyileştirmiştir (Sanchez-Escalante ve diğerleri 2003 ; Hayes ve diğerleri 2010 ; Doménech-Asensi ve diğerleri . 2013 ).

Son strateji, doğal antioksidanların gıda paketleme formülasyonlarına dahil edilmesine dayalı aktif paketleme sistemlerinin geliştirilmesine odaklanmıştır (Gómez-Estaca ve diğerleri 2007 ; Bao ve diğerleri 2009 ). Bu çevre dostu biyolojik olarak parçalanabilen ambalaj, gıdaya güvenlik avantajları sağlamakla kalmaz, gıda kalitesini başarıyla kontrol eder ve raf ömrünü uzatır, aynı zamanda çevreye zararlı ticari parçalanmayan plastiğin yerini alır. Film hazırlamada kullanılan biyopolimerler, birçok avantajı olan ve bol miktarda bulunan protein kaynaklarından elde edilir. Kollajen hidrolizi ile elde edilen jelatin, film yapımında popüler bileşenlerden biridir ve avantajları arasında film oluşturma yeteneği yer alır (Ali ve ark. 2014 ).

Bugüne kadar, doğal bir antioksidan kaplamaya sahip biyolojik olarak parçalanabilen ambalajlar büyük ilgi gördü ve bu alanda çok sayıda araştırma projesi yürütülüyor (Bao ve diğerleri 2009 ; Ahmad ve diğerleri 2012 ; Bitencourt ve diğerleri 2014 ). Filme dahil edilmek üzere seçilen bitkilerden elde edilen doğal antioksidanlar, bol miktarda polifenol bileşeni içerir. Polifenollerin çok çeşitli faydalı sağlık etkileri vardır ve bunların lipid oksidasyonunu geciktirme ve inhibe etme potansiyelleri iyi çalışılmıştır. %25 (a/a) limon otu esansiyel yağı ile kaplanmış jelatin bazlı bir film, levrek dilimlerinin kalitesini artırmış ve raf ömrünü uzatmıştır (Ahmad ve ark. 2012).). Çay polifenol yüklü kitosan nanoparçacıklarının (TPCN) bir jelatin filme dahil edilmesi, antioksidan aktivitesini geliştirirken, Curcuma longa Linn (Rutaceae) rizomlarından elde edilen fenolik bileşikler, jelatin bazlı filmlere verilen bariyer özellikleri ve antioksidan kapasiteyi çıkarır (Bao ve diğerleri, 2009). ; Bitencourt ve diğerleri 2014 ).

Betula pendula Roth (Betulaceae), Kanada'dan Japonya'ya kadar kuzey yarımkürede yaygın olarak dağıtılan bir huş ağacı olarak bilinir. Huş ağacı, özellikle gümüş huş ağacı, tüm bitki parçalarının çeşitli tıbbi amaçlar için kullanıldığı birçok ülkede geleneksel olarak önemli olmuştur. Betula pendula (BP) başta egzama, enfeksiyonlar, iltihaplar, romatizma ve idrar yolu rahatsızlıkları olmak üzere cilt hastalıklarını tedavi etmek için kullanılmıştır ve tomurcuk yağı ayrıca kozmetik ürünlerde, özellikle saç ürünlerinde tonik ve antiseptik olarak yaygın olarak kullanılmaktadır (Jäger). ve diğerleri 2008 ; Jine ve diğerleri 2012 ; Rosado ve diğerleri 2012 ; Meyer-Hoffert & Brasch 2013). Ayrıca, yıllar içinde bitkilerin insan sağlığına olan faydalarına dair çok sayıda araştırma yapılmıştır (EMA: Avrupa İlaç Ajansı 2014 ). Başer ve Demirci ( 2007 ) , çeşitli in vitro teknikler kullanarak birkaç Betula türünün antifungal, antibakteriyel ve antioksidan etkilerinin potansiyelini ortaya koymuştur . Germanò ve ark. ( 2012 ), BP ekstraktının , serbest radikal süpürücü ve antioksidan özellikleri ile bilinen kateşin, p- kumarik asit, mirisetin, kersetin ve kaempferol gibi birçok polifenol bileşeni içerdiğini belirtti. Bu yüksek fenolik bileşik içeriği Betula'yı yapabilir. Gıda endüstrisinde antioksidan kaynağı olarak kullanıma uygun türler.

Bununla birlikte, BP yaprak ekstraktının lipid oksidasyonuna yönelik antioksidan aktivitesi henüz tam olarak belirlenmemiştir. Böylece, hedefleri (1) LCMS kullanılarak bitkide antioksidan aktiviteye katkıda BP özü fenolik bileşiklerin belirlenmesi için, (2) kullanılarak, BP antioksidan aktivitesini değerlendirmek için olan in vitro sıkı bağlamak, TEAC, ORAC dahil olmak üzere deneylerde EPR temizleme aktivitesi ve (3) BP ekstraktının, köfte bileşimine veya aktif ambalajın formülasyonuna dahil edilerek sığır etinde lipid bozulmasını önleme kabiliyetini gösterme.

Git: Malzemeler ve yöntemler

Malzemeler

BP yaprakları 2014 baharında Pàmies Hortícoles'ten (Balaguer, İspanya) satın alındı ve kayıtlı bitkisel şirketin sahibi Josep Pàmies tarafından taksonomik olarak doğrulandı. Betula pendula , Navarra Üniversitesi'nin herbaryumunda listelenmiştir (Pamp 3045).

Kullanılan tüm reaktifler ve solventler analitik derecedeydi ve Panreac (Barselona, İspanya) ve Sigma Aldrich'ten (Gillingham, İngiltere) elde edildi. Betula pendula çıkarılması

BP'nin hazırlanması, özütlenmesi ve geri kazanılması, Azman ve arkadaşlarının yöntemine göre gerçekleştirilmiştir. ( 2015). BP'nin kurutulmuş yaprakları, standart bir mutfak robotu kullanılarak ince bir şekilde öğütüldü. Öğütülmüş BP, üç farklı yolla özütlendi: (1) 50:50 (h/h) etanol:su ile; (2) 75:25 (h/h) etanol:su ve (3) 90:10 (h/v) etanol:su ile, her zaman 1:30 (a/h) oranında. Ekstraksiyonlar karanlıkta 4 ± 1 °C'de 24 saat sürekli karıştırılarak yapıldı. BP'nin özüt çözeltileri, Whatman Filtre kağıdı, 0.45 um (Whatman, GE Healthcare, Wauwatosa, WI) kullanılarak süzülerek geri kazanıldı. Süpernatantın bir kısmı, antiradikal kapasiteyi belirlemek için sonraki kullanım için alındı. Kalan süpernatantın hacmi ölçüldü ve fazla etanol, döner bir buharlaştırıcı (Buchi Re111, İsviçre) kullanılarak vakum altında çıkarıldı ve -80 °C'de 24 saat donduruldu. Tüm ekstraktlar bir dondurarak kurutucuda (Unicryo MC2L -60 °C, Almanya) nemi gidermek için üç gün boyunca -60 °C'de vakum altında. Son olarak, çözünür katı konsantrasyonunu (g/L) belirlemek için liyofilize BP tartıldı. LCMS kullanarak fenolik bileşik tayini

%50 (h/h) BP metanol özütlerinin hazırlanması, yukarıdaki özütleme yönteminde tarif edildiği gibi gerçekleştirildi. LCMS analiz prosedürü, Skowyra ve ark. ( 2014) küçük değişikliklerle. Bileşikler, Agilent'ten bir 1200 Serisi HPLC (Wilmington, DE) ile elde edilen bir LC-ESI–QTOF-MS sistemi kullanılarak belirlendi. LC cihazında iki izokratik yüksek basınçlı karıştırma pompası, bir vakumlu gaz giderme ünitesi ve bir kromatografik fırın bulunur. QTOF kütle spektrometresi, Dual-Spray ESI kaynağı ile donatılmış bir Agilent 6520 modeliydi. Bileşikler, Phenomenex'ten (Torrance, CA) bir C18 (4 mm x 2 mm) koruma kartuşuna bağlı bir Agilent Zorbax Eclipse XDB C18 kolonunda (100 mm x 2 mm, 3.5 m) ayrıldı. Her ikisi de %0.1 formik asit içeren ultra saf su (A) ve asetonitril (B), aşağıdaki gradyanlar uygulanarak mobil fazlar olarak kullanıldı: 0-10 dakika, %3 B; 15-17 dakika, %100 B; 11 dk %3 B. Mobil faz akışı 0.2 mL/dk idi, standartlar ve numune ekstraktları için enjeksiyon hacmi 10 μL idi ve kolon sıcaklığı 30 °C'ye ayarlandı. Hareketli faz akışı, gradyanlar kullanılarak 0.2 mL/dk idi: 0-10 dakika, %3 B; 10-25 dakika, %100 B; 27–38 dakika, %3 B. Nitrojen (%99,999), nebulizasyon (35 psi) ve kurutma gazı (330 °C, 10 °C/dak) olarak kullanıldı (Carburos Metálicos, A Coruña, İspanya). QTOF cihazı 2 GHz modunda çalıştırıldı (Genişletilmiş Dinamik Aralık, 4500'den kütle çözünürlüğü,m/z 100, ila 11.000, m/z 900'de) ve bileşikler, sırasıyla 3500 ve 160 V kapiler ve parçalayıcı voltajlar uygulanarak pozitif ESI'de iyonize edildi. LC-ESI-QTOF-MS sisteminin tüm veri toplama parametrelerini kontrol etmek ve ayrıca elde edilen verileri işlemek için Mass Hunter Workstation yazılımı kullanılmıştır. Tam tarama MS spektrumları, 100 ila 1700 m/z birim aralığında elde edildi . Polifenol bileşiminin tanımlanması , MS modunda elde edilen iyon kümelerindeki ([M ⁺ H] ⁺ ) doğru kütlelere, izotopik bolluklara ve sinyallerin aralığına ve ayrıca MS/MS parçalanma modellerine ve ürün iyonlarının tam kütlesi. Toplam fenolik içeriğin (TPC) belirlenmesi

Folin-Ciocalteu yöntemi, Santas ve diğerleri tarafından bildirildiği gibi toplam fenolik içeriği (TPC) belirlemek için kullanıldı. ( 2008 ). Serbest radikal süpürücü aktivite deneylerinin belirlenmesi

In vitro olarak antioksidan kapasite tayini

Ekstraktların antioksidan aktivitesinin değerlendirilmesi için üç farklı yöntem kullanıldı: 2,2′-azino-bis-(3-etilbenztiazolin)-6-sülfonik asit (ABTS ^•+ ) TEAC tahlili (Almajano ve ark. 2008 ), Oksijen Radikal Absorbans Kapasitesi (ORAC) testi (Skowyra ve diğerleri 2014 ) ve Ferrik İndirgeyici Antioksidan Gücü (FRAP) yöntemi (Gallego ve diğerleri 2013 ). Sonuçlar, bitkinin kuru ağırlığının (DW) gramı başına μM Trolox eşdeğeri (TE) olarak ifade edildi.

Elektron paramanyetik rezonans (EPR) spektroskopisi radikal süpürme deneyi

EPR radikal süpürme aktivitesi, Azman ve ark.'nın yöntemi izlenerek ölçüldü. ( 2014a ). Ekstraksiyon 1:10 (a/h) oranında MeOH içinde gerçekleştirildi ve liyofilizasyon ile BP'nin çözünür konsantrasyonu belirlendi. Döndürerek yakalayan bir reaksiyon karışımı, 100 uL DMPO'dan (35 mM) oluşuyordu; H 50 uL ₂ O ₂ (10 mM); Farklı konsantrasyonlarda 50 μL BP özütü veya referans olarak kullanılan 50 μL ferulik asit (0–20 g/L) veya kontrol olarak kullanılan 50 μL saf MeOH; ve son olarak, FeSO 50 uL ₄ (2 mM), bu sırayla ilave edildi. Nihai çözeltiler (125 uL) dar (iç çap = 2 mm) bir kuvars tüpe geçirildi ve EPR spektrometresinin boşluğuna verildi. Tayfı FeSO ilavesinden sonra 10 dakika boyunca kaydedildi ₄çözüm, radikal ekleme sinyali en büyük olduğunda. X-bandı EPR spektrumları, aşağıdaki koşullar altında bir Bruker EMX-Plus 10/12 spektrometresi ile kaydedildi: mikrodalga frekansı, 9.8762 GHz; mikrodalga gücü, 30.27 mW; merkez alan, 3522.7 G; süpürme genişliği, 100 G; alıcı kazancı, 5.02 × 10 ⁴ ; modülasyon frekansı, 100 kHz; modülasyon genliği, 1.86 G; zaman sabiti, 40.96 ms; dönüştürme süresi, 203.0 ms. Gıda modelinde antioksidan aktivitenin belirlenmesi

Köftelerin Hazırlanışı

Sığır köftelerinin ilk hazırlama yöntemi Azman ve ark. ( 2014b ). Et 4 gruba ayrıldı ve %1.5 NaCl (a/a) ve (i) kontrol (ilave yok), (ii) %0.1 BHT, (iii) %0.1 liyofilize BP, (iv) %0.3 ile karıştırıldı. liyofilize BP ve daha küçük porsiyonlar halinde kalıplandı (her biri yaklaşık 20 g). Modifiye atmosfer düşük gaz geçirgenliği (8-12 cm BB4L torba (Cryovac) yerleştirilmiştir polistiren B5-37 (Aerpack) tepsileri kullanılarak muhafaza edildi ³ m ² /24 saat). Tepsilerdeki hava 80:20 (v/v) O ₂ :CO ₂ ile yıkandıEAP20 karışımı ile (Carburos Metalicos, Barcelona) ve tepsiler paketlendi. Numuneler, tiyobarbitürik asit reaktif maddeler (TBARS) yöntemiyle oksidasyon derecesini, % metmiyoglobin, renk, pH ve mikrobiyal kaliteyi analiz etmek için 10 gün boyunca 4 ± 2 °C'de karanlıkta saklandı. Her ölçüm, 10 gün boyunca her gün üç kopya halinde yapıldı (3 günde bir yapılan mikrobiyolojik analiz hariç).

Tiyobarbitürik asitle reaksiyona giren maddeler (TBARS)

Lipid peroksidasyonu, oksidatif hasarın bir göstergesi olarak alındı ve tiyobarbitürik asit reaktif maddelerin (TBARS) içeriği ölçülerek değerlendirildi (Grau ve diğerleri 2000 ). Modifiye edilmiş yöntem, Azman ve ark. ( 2014b ). Tüm sonuçlar, numunenin kg'ı başına mg malondialdehit olarak rapor edildi (mg MDA/kg numune).

Renk ölçümü ve metmyglobin yüzdesi

Objektif renk ölçümleri, bir CR 400 kolorimetre (Minolta, Osaka, Japonya) kullanılarak yapıldı. Her bir köfte kesildi ve dilimlerin rengi her nokta için üç kez ölçüldü. CIELAB alanındaki et rengini ölçmek için darbeli xenon ark lambası, 0° görüş açısı geometrisi ve 8 mm açıklık boyutuna sahip taşınabilir bir kolorimetre kullanıldı (Hafiflik, L*; kırmızılık, a*; sarılık, b*) . Her ölçüm serisinden önce cihaz beyaz seramik karo kullanılarak kalibre edilmiştir. Metmiyoglobin yüzdesi, Xu ve arkadaşları tarafından geliştirilen yöntemle belirlendi. ( 2010 ). Tüm numune ölçümleri üç kopya halinde gerçekleştirildi. Antioksidan kaplamalı jelatin filmin geliştirilmesi

Antioksidan kaplamalı jelatin bazlı filmin üretimi ve karakterizasyonu Bodini ve ark. ( 2013 ). Filmojenik solüsyon sorbitolün çözündürülmesinden sonra soğutulurken, %0.1 (a/a) BP özü/jelatin ve %0.1 (a/a) BHT/jelatin ilave edildi. Lipid degradasyonu, yukarıda bahsedildiği gibi TBARS yöntemi kullanılarak ölçülmüştür. istatistiksel analiz

Minitab 16 yazılım programı ( α = 0.05) kullanılarak tek yönlü bir varyans analizi (ANOVA) yapıldı . Sonuçlar ortalama değerler ( n ≥ 3) olarak sunuldu .

Git: Sonuçlar ve tartışma

Ekstraksiyon verimi, toplam fenolik içerik (TPC) ve antioksidan aktivite

Bir dizi çalışma, BP ekstraktlarının antioksidan aktivitesinin fenolik içerik ile ilişkili olduğunu bulmuştur ve bu nedenle bitki ekstraktındaki fenolik bileşiklerin tanımlanması, çeşitli analizlerde antioksidan aktiviteden sorumlu bileşikleri ortaya çıkarabilir (Germanò ve diğerleri, 2012 ; Bertrams). ve diğerleri 2013 ; Raudonė ve diğerleri 2014 ). BP'nin %50 metanol özünde beş polifenol bileşeni bulundu (tablo 1) daha önce rapor edilmişti (Germanò ve diğerleri 2012 , 2013 ). Ayrıca, önceki çalışmalar metanol özünde kaempferol ve türevleri de dahil olmak üzere 26'dan fazla polifenol bileşeni buldu. Çalışmaları Betula spp. BP dahil bileşenler birkaç yazar tarafından rapor edilmiştir (Germanò ve diğerleri 2012 ; EMA: The European Medicines Agency 2014 ). Huş ağacı yapraklarındaki ana polifenolik bileşen grubu olarak flavonoidlerin kimyasal bileşimi, birkaç yıldır oldukça kapsamlı bir şekilde araştırılmaktadır. Örneğin, Raal ve ark. ( 2015 ) birkaç huş ağacı türünün kimyasal indikatörü olarak fenolik bileşiklerin kullanımını geliştirirken Evans ( 2000)), bir BP ekstraktındaki ana flavonoidler olarak kersetin ve hiperosidin kimyasal yapılarını tanımladı. Yukarıda listelenen bileşenler arasında kuersetin, huş ağacı yapraklarının ana aktif bileşeni olarak rapor edilmiştir ve çeşitli flavonoidlerin ve fenolik bileşenlerin olası bir sinerjik etkisi de BP aktif bileşenlerinde tanımlanmıştır (EMA: The European Medicines Agency 2014 ). BP'den flavonoid bileşenlerinin izolasyonu, insan sağlığına sayısız farmakolojik yararları nedeniyle araştırılmıştır. Tablo 1.

LCMS kullanılarak BP'nin metanol özünde tanımlanan polifenol bileşimi.

1	14.2	Cı- ₁₅ , H ₁₄ O ₆	298.0718	kateşin
2	17.3	Cı- ₉ H ₈ O ₃	163.0401	p- kumarik asit
3	29.31	C ₁₅ H ₁₀ O ₈	317.0303	mirisetin
4	31.6	C ₁₅ H ₁₀ O ₇	301.0354	kuersetin
5	32.8	C ₁₅ H ₁₂ O ₅	271.0612	naringenin

Toplam polifenollerin analizi ve serbest radikal aktivite deneyleri

Toplam fenolik içerik ve in vitro antioksidan aktivite

Ortalama olarak, %50 etanol ile BP ekstraksiyonu, %75 ve %90 etanolden daha fazla kuru çözünür ekstrakt ağırlığı üretti. Alkol, gıda endüstrisindeki uygulamalar için kullanılabilen bir GRAS (Genel Olarak Güvenli Olarak Tanınan) olarak kabul edildiğinden, özütleme çözücüsünde kullanım için etanol seçilmiştir (Fernández-Agullóa ve diğerleri, 2013 ). Etanol ayrıca flavonoidlerin ve bunların glikozitlerinin, katekollerin ve tanenlerin ham bitki materyallerinden ekstraksiyonunda da etkilidir. Raal et al. ( 2015 ), HPLC kromatogramlarında eğri altındaki net alan (AUC) ile analiz edilen en yüksek polifenol verimini etanolün %20'sinin verdiğini bildirdi.

Tablo 2%50 etanol ekstraksiyonunun, %90 ve %75 etanol ekstraksiyonuna kıyasla önemli ölçüde daha yüksek fenol içeriği değeri verdiğini gösterir ( p < 0.05). Genel olarak, %50 etanol ile ekstrakte edilen BP, ORAC tahlillerinde daha yüksek antioksidan aktivite değerleri gösterdi ( p < 0.05). Fernández-Agullóa ve ark. ( 2013 ), etanol ekstraktının fenolik içerik ve TEAC değerlerinin petrol eteri Soxhlet ekstraktlarından daha yüksek değerleri olduğunu göstermiştir. ORAC tahlili, FRAP ve TEAC tahlillerine kıyasla en yüksek antioksidan aktivite değerlerini verdi ve ekstraktın peroksi radikallerine karşı temizleme aktivitesini gösterdi (OOH ^•) tahlilde üretilir. Literatür, DPPH yöntemi, nitrik oksit temizleme aktivitesi ve indirgeme gücü testi kullanılarak analiz edilen BP'nin antioksidan aktivitesini bildirmiştir. Bildiğimiz kadarıyla, bu, ORAC yöntemleri kullanılarak değerlendirilen BP'den elde edilen ekstraktların antioksidan aktivitesinin ilk raporudur. Tablo 2.

BP ekstraktlarının çözünür konsantrasyonu, polifenol içeriği ve antioksidan aktivitesi.

Çözünür konsantrasyon (g/L)	19,83 ± 0,05 ^bir	20,1 ± 0,02 ^b	22,6 ± 0,05 ^c
Toplam fenolik içerik (mg GAE/g DW)	10.8 ± 0.05 ^bir	9,11 ± 0,03 ^b	11,23 ± 0,02 ^ac
FRAP (mmol TE/g DW)	1,59 ± 0,02 ^bir	1,06 ± 0,06 ^b	1.52 ± 0.01 ^ac
TEAC (mmol TE/g DW)	1.27 ± 0.05 ^bir	1,36 ± 0,03 ^ab	1.45 ± 0.02 ^bc
ORAC (mmol TE/g DW)	1.56 ± 0.05 ^bir	1,67 ± 0,05 ^b	2.81 ± 0.03 ^{° C}

Değerler ortalama ± standart sapmadır ( n = 3).

GAE: gallik asit eşdeğeri; TE: trolox eşdeğeri; DW: kuru ağırlık.

^a–c Farklı harflere sahip bir satırdaki ortalamalar önemli ölçüde farklıdır ( p < 0.05).

EPR süpürücü radikal tahlili

EPR radikal süpürme yöntemi Azman ve arkadaşları tarafından geliştirilmiştir. ( 2014a ) tarafından Fenton reaksiyonu ile üretilen serbest metoksi radikalini (CH ₃ O ^• ) değerlendirmek için BP ekstresine uygulandı.Şekil 1artan BP özütü konsantrasyonu ile EPR'nin azalan sinyalini gösterdi. Karşı BP ekstrelerinin serbest radikal yutma faaliyeti metoksi (CH ₃ O ^• ) EPR spektroskopisi kullanılarak spin tutucu olarak DMPO varlığında bir rekabetçi yöntemi ile araştırılmıştır radikalidir. CH ₃ O ^• radikali Fenton prosedür, nispeten kısa bir yarı ömre sahiptir fakat DMPO, DMPO-OCH ile kararlı bir nitroksit ürünü elde edecek şekilde yeteneğinin EPR ile teşhis edildi göre üretilen ₃ (aşırı ince bölme sabitleri, bir _N = 13.9 G ve bir _H = 8.3 G). Bu kararlı DMPO-OCH ₃bileşik, EPR spektrumundan gelen sinyalin çift entegrasyon değeri ile tespit edilebilir. Farklı konsantrasyonlardaki BP özütü, metoksi radikallerinin süpürülmesinde spin tuzak DMPO ile rekabet etti. Böylece antioksidan, radikal eklentilerin miktarını azalttı ve buna bağlı olarak EPR sinyalinin yoğunluğunu azalttı. EPR sinyalinin yoğunluğu ile en iyi uyum üstel fonksiyon olarak gösterildi (Şekil 1) eğer konsantrasyon değerleri g/L ise Denklem (1)'e karşılık gelir :
y = 74.959e - 0.003 x ; R, ² = 0.964
(1)

Ayrı bir pencerede aç
Şekil 1.
Alan elektron paramanyetik rezonans (EPR) dalga radikali katkı maddesi DMPO-OCH bölgesinin ₃ H çözeltisinden elde edilen ₂ O ₂ [2 mM] ve FeSO ₄ [0.04 mM] DMPO ile [14 mM] MeOH içerisinde eğirme tuzak olarak çözücü. EPR sinyalinin alanı, BP metanolik ekstrelerin konsantrasyonuna karşı çizilir.

Grafik, BP konsantrasyonu arttıkça spektrumdaki sinyaldeki azalmanın üstel ilişkisini gösterir. Bu çalışma, polifenol bileşenleri içeren BP ekstrelerinin süpürme aktivitesinin , EPR spektrumunda DMPO-OCH ₃ eklentisinin spektral bantlarının yoğunluğunun azalmasıyla ölçülebileceğini doğruladı . BP'nin radikal temizleme aktivitesi, Germanò ve diğerleri tarafından bildirildiği gibi DPPH radikal süpürme aktivitesi ve demirli iyon-şelatlama aktivitesi dahil olmak üzere çeşitli yöntemlerle önceden belirlenmiştir. ( 2013 ). Bununla birlikte, bu çalışma, Fenton reaksiyonundan üretilen metoksi radikallerini temizleyerek antiradikal bir bileşik olarak hareket etme potansiyeli olan BP ekstraktlarının ölçümünün ilk raporudur. Gıda modelinde antioksidan aktivite

Renk ve % metmiyoglobin

Et rengi, et kalitesini gösteren en önemli parametrelerden biridir. Açıklığı (L*), kırmızılığı (a*) ve sarılığı (b*) temsil eden renk değerleri aşağıda gösterilmiştir.Tablo 3. Başlangıç ortalama hafiflik (CIE L*) 29.773 ± 0.866 idi ve kontrol numunesi 10 günlük depolama sonunda en yüksek L* değerini gösterdi. L* değerleri, artan yağ oranı nedeniyle etin hafifliğinin arttığını ancak kırmızılığın azaldığını göstermiştir. Depolama süresinin sonunda %0,3 BP içeren numuneler en düşük L* değerini gösterirken, BHT içeren numune ile %0,1 BP içeren numune benzer değerler göstermiştir. Sonuçlarımız Triki ve ark. ( 2013 ) ve Hayes ve ark. ( 2010) kas gıdalarındaki azaltılmış yağın, kontrol yağ ürünlerine kıyasla L*'yi azaltma ve a*'yı artırma eğiliminde olduğunu, saklama süresi ile kızarıklık azaldığını ve hafifliğin arttığını göstermiştir. Birkaç yazar, lipid oksidasyonunun kızarıklıkta bir azalma ile sonuçlandığını bildirmiştir (Pérez-Álvarez & Fernández-López 2009 ; Kim ve diğerleri. 2013a , 2013b ). %0,3 BP içeren sığır köftesi, ekran boyunca daha kırmızı bir renk (a*) muhafaza ederken, kontrol sığır köftesi MAP'de 6 günden sonra renk değiştirdi. Tüm numuneler, 8 günlük depolamadan sonra önemli bir kırmızı renk düşüşü gösterdi ( p < 0.05). Tablo 3.

Sığır köftelerin 10 gün soğukta muhafaza edilen renk değerleri.

L *
Kontrol	29,77 ± 0,87 ^a1	38,68 ± 1,50 ^a2	29.20 ± 0.326 ^a1	37,10 ± 1,23 ^a2	37,23 ± 0,45 ^a2	45,61 ± 2,22 ^a3
%0.1 BHT	29,77 ± 0,87 ^a1	32,86 ± 1,78 ^b2	30,55 ± 0,967 ^b3	35,44 ± 1,06 ^b4	37,99 ± 1,19 ^a5	40,58 ± 0,46 ^b6
%0.1 BP	29,77 ± 0,87 ^a1	34,47 ± 1,73 ^c2	30,91 ± 1,518 ^b3	37.30 ± 0.94 ^a4	41.02 ± 1.08 ^b5	40,98 ± 0,46 ^b5
%0.3 BP	29,77 ± 0,87 ^a1	28,42 ± 1,58 ^d1	36.45 ± 1.744 ^c2	33.12 ± 1.38 ^c3	36,47 ± 1,99 ^c2	36.23 ± 1.90 ^c2
bir *
Kontrol	7,49 ± 0,08 ^a1	6,76 ± 0,29 ^a2	6,54 ± 0,328 ^a2	6,26 ± 0,42 ^a2	4,72 ± 0,38 ^a3	0,89 ± 0,01 ^a4
%0.1 BHT	7,49 ± 0,08 ^a1	8,18 ± 0,43 ^b2	9,28 ± 0,282 ^b3	7,05 ± 0,26 ^b1	7,36 ± 0,41 ^b1	2,86 ± 0,01 ^b4
%0.1 BP	7,49 ± 0,08 ^a1	7,37 ± 0,23 ^c1	8,74 ± 0,130 ^c2	7,25 ± 0,32 ^b1	5,64 ± 0,15 ^c3	1.24 ± 0.04 ^b4
%0.3 BP	7,49 ± 0,08 ^a1	9,16 ± 0,18 ^d2	8,68 ± 0,340 ^c3	8,38 ± 0,18 ^c3	6,75 ± 0,13 ^d4	2,90 ± 0,01 ^b5
b *
Kontrol	7,42 ± 0,32 ^a1	4,86 ± 0,06 ^a2	7,67 ± 0,362 ^a1	8,55 ± 0,09 ^a3	9,95 ± 0,14 ^a4	6,77 ± 0,16 ^a5
%0.1 BHT	7,42 ± 0,32 ^a1	6,68 ± 0,01 ^b2	8,40 ± 0,150 ^b3	8,39 ± 0,07 ^a3	8,38 ± 0,06 ^b3	2,10 ± 0,44 ^b4
%0.1 BP	7,42 ± 0,32 ^a1	6,36 ± 0,23 ^b2	8,96 ± 0,526 ^b3	8,41 ± 0,12 ^a3	8,76 ± 0,02 ^b3	2,12 ± 0,33 ^b4
%0.3 BP	7,42 ± 0,32 ^a1	9,19 ± 0,51 ^c2	10.19 ± 0.270 ^c3	7,90 ± 0,18 ^b1	5.00 ± 0.06 ^a4	6,90 ± 0,20 ^a5

Tüm değerler, üç kopyanın ortalama ± standart sapması olarak ifade edilir.

^a–d Aynı sütundaki (varyantlar) farklı harflerle ortalama değerler önemli ölçüde farklıdır ( p < 0.05).

^1–6 Farklı sayılarla aynı satırdaki (depolama süresi) ortalama değerler önemli ölçüde farklıdır ( p < 0.05).

L* = hafiflik; a* = kızarıklık; b* = sarılık.

Kontrol = antioksidan içermeyen sığır köftesi, %0,1 BHT = %0,1 bütillenmiş hidroksitoluen içeren sığır köftesi, %0,1 BP = %0,1 BP özü içeren sığır köftesi, %0,3 BP = %0,3 BP özü içeren sığır köftesi.

Tüketiciler etin tazeliğini görsel kırmızılığı ile inceler ve kırmızı renk etteki pigmentin oksidasyon durumunu yansıtır (Kim ve diğerleri 2013a ). Depolamanın sonunda, kontrol numunesinin a* değeri, test edilen diğer numunelerinkinden önemli ölçüde düşüktü ( p ≤ 0.05). Bu nedenle, doğal bitki özleri et rengini etkiledi ve et ürününün oksidasyonunu ve renk bozulmasını geciktirmede potansiyel olarak faydalı oldu. Genel olarak, depolama sırasında numunelerin b* değerlerinde önemli bir farklılık ( p > 0.05) gözlenmedi. Mevcut bulgular, et köftelerindeki sarılığın saklama süresinden ve paketleme koşullarından etkilenmediğini ortaya koyan diğer araştırmalarla tutarlı görünmektedir (Kim ve ark. 2013b).; Triki ve ark. 2013 ). Bu arada, Muthukumar ve ark. ( 2012 ) ve Rojas ve Brewer ( 2007 ) antioksidanlı pişmiş ve çiğ köftelerin b* değerinin, depolama sırasında kontrole kıyasla daha kademeli bir düşüş gösterdiğini bildirmiştir.

BP ile muamele edilmiş numunelerdeki değişiklikler ve BHT'nin depolama sırasında MMb oluşumu üzerindeki etkisi şu şekilde sunulmuştur: şekil 2. Hem kontrol hem de muamele edilmiş numuneler, depolamanın ardından MMb oluşumunda ( p > 0.05) bir artış ( p < 0.001) gösterdi . MMb değeri, enstrümantal renk a* değerleriyle ilgilidir. Ette lipid oksidasyonu ile üretilen serbest radikaller, depolama sırasında etin renginin bozulmasına neden olan oksimiyoglobinin (kırmızı renk) metmiyoglobine (kahverengi renk) oksitleyici reaksiyonunu başlatmaya duyarlıdır. Antioksidan ile muamele edilen numuneler, oksimiyoglobinin oksidasyonundan üretilen hidroksil radikallerini temizleyerek metmiyoglobinin oksidasyonunu azaltabilir. Bu bulgu, kas gıdalarındaki rengin azalmasının, depolama sırasında metmiyoglobin konsantrasyonundaki azalmadan etkilendiğini gözlemleyen birkaç yazar tarafından desteklenmektedir (Formanek ve ark. 2003 ; Xu ve ark. 2010).).

Ayrı bir pencerede aç
Şekil 2.
BP özütü ve BHT'nin, 4 °C'de 10 günlük soğuk depolama sırasında sığır köftelerindeki metmiyoglobin değişiklikleri üzerindeki etkileri.

Kontrol = antioksidan içermeyen sığır köftesi, %0,1 BHT = %0,1 (a/a) bütillenmiş hidroksitoluen içeren sığır köftesi, BP (%0,1) = %0,1 (a/a) BP özütü içeren sığır köftesi, BP (%0,3) = %0,3 (a/a) BP özütü içeren sığır köftesi. Her numune üç kopya halinde ölçüldü ve her numune için ortalama standart sapma %5'ten azdı.

Sığır köftelerinde TBARS analizi

Farklı konsantrasyonlarda BP ve BHT'nin et köftelerinde 4 °C'de 10 günlük depolama sırasında TBARS değerleri üzerindeki etkisi aşağıdaki şekilde gösterilmiştir. Figür 3. Antioksidan ile muamele edilen tüm numunelerin TBARS değerleri , MAP atmosferinde depolama süresi boyunca kontrol ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde ( p < 0.05) azaldı. Ancak, BHT numunesi ve %0,1 BP numunesi depolama boyunca önemli ölçüde farklı değildi. Bu, %0.1 BP'nin MDA oluşumunu önemli ölçüde inhibe etmek için yeterli olacağını ve aktivitede MAP'de %0.1 BHT'ye benzer olduğunu gösterdi. %0.3 (a/a) BP, depolama süresinin sonunda 1.0 mg malondialdehit/kg'dan daha az numune ile en düşük TBARS değerlerini göstermiştir; ve bu, numunenin güçlü bir antioksidan etki yaşadığını gösterir. %0,1 BHT karşılaştırma olarak eklenmiştir ve gıdada kullanım için yasal sınırlama dahilinde etkili bir dozdur (Post ve ark. 2007).). BP ekstraktının etteki lipid oksidasyonu üzerindeki etkisi hiç rapor edilmemiştir. MAP'ta et köftelerinde BP ile lipid oksidasyonunun azaltılması, diğer flavonoidlerin yanı sıra kateşinler açısından zengin polifenollerin varlığına bağlanabilir. BP'nin aktif özellikleri daha önce birçok yazar tarafından rapor edilmiştir (Germanò ve diğerleri 2012 ; Bertrams ve diğerleri 2013 ; Raal ve diğerleri 2015).). LCMS çalışmamız, ekstraktta etteki lipid oksidasyonunun inhibisyonuna katkıda bulunabilecek fenolik asitlerin varlığını da göstermiştir. Fenolik bileşiklerin antioksidan aktivitesi, hidrojen atomları bağışlama ve serbest radikalleri nötralize etme yeteneğine sahip aromatik halkaya bağlı hidroksil grubu ile yakından ilişkilidir. TBARS yöntem ile ölçülebilir, örneğin MDA aktif oksitlenmiş bileşiklerin, (Kim ve ark., Bu mekanizma, blok daha bozunma 2013a , 2013b ). Çalışma, BP özütünün sığır köftelerinde lipid bozulmasını önleme potansiyelini doğruladı.

Ayrı bir pencerede aç
Figür 3.
Sığır köftelerinin MAP atmosferinde 10 gün boyunca ışıksız olarak soğutularak TBARS değerleri (mg malondialdehit/kg numune).

Kontrol = antioksidan içermeyen sığır köftesi, %0,1 BHT = %0,1 (a/a) bütillenmiş hidroksitoluen içeren sığır köftesi, %0,1 BP = %0,1 (a/a) BP özü içeren sığır köftesi, %0,3 BP = %0,3 (a/a) BP özü. Her numune üç kopya halinde ölçüldü ve her numune için ortalama standart sapma %5'ten azdı.

Aktif paketleme ile sığır etinde TBARS analizi

% 0.1 oranında uygulanan BP ve BHT gibi antioksidanlarla kaplanmış filmlerin altına paketlenmiş et, kontrol numunesine kıyasla lipid oksidasyonunda bir azalma yaşadı. Testin ilk günlerinde test edilen numuneler arasında önemli bir fark gözlenmedi. TBARS değerlerindeki önemli farklılıklar 2. günde ( p < 0.05) meydana geldi ve farklılıklar 17 günlük depolamaya kadar devam etti. Sentetik ve doğal antioksidan içeren örnekler marjinal olarak farklı olma eğilimi göstermiştir ( p < 0.1) depolama süresi boyunca. %0.1 antioksidan ürün içeren filmlerin altında paketlenen etin TBARS değerleri de kontrole kıyasla tüm depolama süresi boyunca etin lipid oksidasyonunda önemli bir azalma gösterdi. BP ve BHT içeren numunelerin artan gıda stabilitesi,Şekil 4BP özütü ve önemli bir antioksidan olarak kabul edilen BHT içeren numuneler arasındaki marjinal farkın, gıda endüstrisi için alternatif bir koruyucu olarak doğal antioksidanın etkinliğini gösterdiği belirtilebilir. Literatür, BP'nin, birkaç tahlilde gösterildiği gibi, güçlü antioksidan aktivitesine katkıda bulunan birçok fenolik bileşik içerdiğini bildirmektedir (Germanò ve diğerleri. 2012 ; Bertrams ve diğerleri. 2013 ; EMA: The European Medicines Agency 2014 ).

Ayrı bir pencerede aç
Şekil 4.
Işıksız 4 ± 1 °C'de 17 günlük depolama sırasında MAP atmosferinde %0,1 (a/a) BHT ve BP özütü içeren kontrol ve numunede TBARS değerlerinde (mg malodialdehit/kg numune) değişiklikler. Her numune üç kopya halinde ölçüldü ve her numune için ortalama standart sapma %5'ten azdı.

Raudonė et al. ( 2014 ), BP ekstraktlarının (hiperozid ve klorojenik asit içeren) fenolik bileşenlerinin, HPLC-FRAP kolon deneyi ile ölçüldüğünde güçlü antioksidan aktiviteye sahip olduğunu göstermiştir. BP özütüne ilişkin LCMS analizimiz, kateşin ve p- kumarik asit gibi birkaç fenolik bileşenin , antioksidan ve antikanser etkileri de dahil olmak üzere insanlar için birçok farmakolojik faydaya katkıda bulunma potansiyeline sahip antioksidan aktivite sergilediğini gösterdi (Yeh & Yen 2003 ; Duthie et al. diğerleri 2013 ; Kılıç & Yeşiloğlu 2013 ; Nithiyanantham ve diğerleri 2013). Ayrıca, BP özütünde bulunan birçok bileşen, ORAC ve TEAC tahlilleri ile ölçülen antioksidan aktivite ile önemli ölçüde ilişkilidir ve insanlarda endojen bileşiklerin detoksifikasyonunda önemli roller oynayabilir (Yeh & Yen 2003 ).

Bu çalışma, bir gıda modelinde lipid oksidasyonunu geciktirmede BP ekstraktının potansiyel etkilerini değerlendirmek amacıyla yapılmıştır. Antioksidan aktivitenin umut verici sonucunun ve ekstrakttaki polifenollerin varlığının yanı sıra, bu, gıdalar için çevre dostu ambalajlama için BP ekstresi içeren jelatin bazlı filmin özelliklerinin ön çalışmasıdır. Duthie et al. ( 2013 ) , bitkisel tozlarla karıştırılmış tavuk köftelerinde LCMS kullanılarak ölçülen p- kumarik asit dahil fenolik asitlerin varlığını göstermiştir . Duthie ve ark. ( 2013) çalışması, BP ekstraktının et köftelerine iyi bir koruyucu etki sağladığı bulgularımızla ilgilidir. Ayrıca, çalışmamız ayrıca %0.1 BP özü ile işlenmiş jelatin bazlı filmlerin etkinliğini de gösterdi.

Git: Sonuçlar

%50 sulu etanol ile hazırlanan BP özütü, FRAP, TEAC ve ORAC deneyleriyle ölçülen yüksek bir fenolik içerik ve antioksidan aktivite gösterdi. BP özünde bulunan çeşitli polifenol bileşenleri, antioksidan aktiviteye ve toplam polifenol içeriğine katkıda bulunur. BP özütü, EPR tarafından değerlendirilen Fenton reaksiyonu tarafından üretilen metoksi radikallerine karşı süpürme yeteneği gösterdi. Liyofilize BP ekstraktları (%0.1 ve %0.3 w/w) et köftelerinde antioksidan olarak uygulanabilir çünkü bu ekstraktlar MAP altında paketlenmiş numunelerde lipid oksidasyonunu önemli ölçüde engellemiştir. BP'nin liyofilize ekstraktının %0.3'ü, etin renk bozulmasını ve metmiyoglobin testi ile ölçülen kahverengi rengi önemli ölçüde azaltmıştır. 0 ile kaplanmış jelatin bazlı filmin etkisinin ön çalışması.p < 0.05). Bu nedenle, bu çalışma, bir antioksidan kaynağı olarak BP'nin gıda endüstrisi tarafından kullanılma potansiyeline sahip olduğunu doğrulamaktadır.

Git: Finansman Beyanı

Aini Azman, Malezya Eğitim Bakanlığı ve Malezya Pahang Üniversitesi tarafından desteklendi ve araştırma Katalonya Teknik Üniversitesi tarafından desteklendi.

Git: Açıklama bildirimi

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması bildirmemektedir. Bu makalenin içeriğinden ve yazımından yalnızca yazarları sorumludur.

Git: Referanslar

Ahmad M, Benjakul S, Sumpavapol P, Nirmal NP.. 2012. Limon otu esansiyel yağı ile birleştirilmiş jelatin film ile sarılmış levrek dilimlerinin kalite değişiklikleri . Int J Gıda Mikrobiol . 155 :171–178. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Ali Y, Benjakul S, Prodpran T, Sumpavapol P.. 2014. Fesleğen yaprağı esansiyel yağı ve çinko oksit nanoparçacıkları içeren balık proteini izolatı/balık derisi jelatin filminin özellikleri ve antimikrobiyal aktivitesi . Gıda Hidrokolloidleri . 41 :265–273. [ Google Akademik ]
Aliakbarlu J, Tajik H.. 2012. Borago officinalis çiçeklerinin çeşitli ekstraktlarının antioksidan ve antibakteriyel aktiviteleri . J Gıda İşlemi Koruması . 36 :539-544. [ Google Akademik ]
Almajano MP, Carbó R, Jiménez JAL, Gordon MH.. 2008. Çay infüzyonlarının antioksidan ve antimikrobiyal aktiviteleri . Gıda Kimyası . 108 :55-63. [ Google Akademik ]
Azman NAM, Gallego M, Juliá L, Fajari L, Almajano MP.. 2015. Gıda modellerinde potansiyel bir antioksidan olarak Convolvulus arvensis kurutulmuş ekstraktının etkisi . Antioksidanlar . 4 :170–184. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Azman NAM, Peiró S, Fajarí L, Julià L, Almajano MP.. 2014a. Beyaz çayın ve flavonoid bileşenlerinin elektron paramanyetik rezonans (EPR) spektroskopisi ile radikal olarak temizlenmesi . J Agr Gıda Kimya . 62 :5743-5748. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Azman NAM, Gordon MH, Skowyra M, Segovia F, Almajano MP.. 2014b. Farklı atmosferlerde saklanan taze sığır köftelerinde liyofilize ve toz haline getirilmiş Gentiana lutea kökünün kullanımı . J Sci Gıda Tarım . 95 :1804–1811. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Bao S, Xu S, Wang Z.. 2009. Çay polifenol yüklü kitosan nanoparçacıkları ile birleştirilmiş jelatin filmlerin antioksidan aktivitesi ve özellikleri . J Sci Gıda Tarım . 89 :2692-2700. [ Google Akademik ]
Başer KHC, Demirci B.. 2007. Betula uçucu yağları üzerine araştırmalar . Arkivoc . 7 :335–348. [ Google Akademik ]
Bertrams J, Kunz N, Müller M.. 2013. TLC ve TLC-MS'ye dayalı Alman propolis örneklerinin botanik orijin tayini için markör bileşikler olarak fenolik bileşikler . J Appl Bot Yemek Kal . 153 :143–153. [ Google Akademik ]
Bitencourt CM, Fávaro-Trindade CS, Sobral PJ, Carvalho R.. 2014. Zerdeçal etanol özü ile katkılı jelatin bazlı filmler: antioksidan aktivite ve filmlerin fiziksel özellikleri . Gıda Hidrokolloidleri . 40 :145–152. [ Google Akademik ]
Bodini RB, Sobral PJ, Favaro-Trindade CS, Carvalho R.. 2013. Etanol-propolis özü eklenmiş jelatin bazlı filmlerin özellikleri . LWT-Gıda Bilimi Teknolojisi . 51 :104-110. [ Google Akademik ]
Decker E, Warner K, Richards MP, Shahidi F.. 2005. Gıdalarda antioksidan etkinliğinin ölçülmesi . J Tarım Gıda Kimya . 53 :4303-4310. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Doménech-Asensi G, García-Alonso FJ, Martínez E, Santaella M, Martín-Pozuelo G, Bravo S, Periago MJ.. 2013. Domates salçası ilavesinin mortadella'nın besinsel ve duyusal özellikleri üzerine etkisi . Et Bilimi . 93 :213–219. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Duthie G, Campbell F, Bestwick C, Stephen S, Russell W.. 2013. Bitkisel tozların pişmiş hindi eti köftelerinin lipid ve protein oksidatif stabilitesi üzerindeki antioksidan etkinliği: sağlık üzerindeki etkileri . Besinler . 5 :1241-1252. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
EMA: Avrupa İlaç Ajansı 2014. C1995-2012, Londra [İnternet]. [2012 Mart 5'te alıntılanmıştır). Şu adresten edinilebilir: http://www.ema.europa.eu/ema/ [ Google Akademik ]
Fernández-Agullóa A, Pereira E, Freire MS, Valentão P, Andrade PB, González-Álvarez J, Pereira JA.. 2013. Solventin ceviz ( Juglans regia L.) yeşil kabuğu özlerinin antioksidan ve antimikrobiyal özellikleri üzerindeki etkisi . Ind Mahsul Prod . 42 :126–132. [ Google Akademik ]
Evans WC. 2000. Trease ve Evans farmakognozisi . Edinburg, Birleşik Krallık: Saunders. [ Google Akademik ]
Formanek Z, Lynch A, Galvin K, Farkas J, Kerry JP.. 2003. Üzeri sarılmış kıymanın raf ömrü stabilitesi üzerinde ışınlamanın ve doğal antioksidanların kullanımının birleşik etkileri . Et Bilimi . 63 :433–440. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Gallego MG, Gordon MH, Segovia FJ, Skowyra M, Almajano MP.. 2013. Suda yağ emülsiyonlarında üç aromatik bitkinin (biberiye, kekik ve lavanta) antioksidan özellikleri . J Am Oil Chem Soc . 90 :1559–1568. [ Google Akademik ]
Germanò MP, Cacciola F, Donato P, Dugo P, Certo G, D'Angelo V, Mondello L, Rapisarda A.. 2012. Betula pendula yaprakları: polifenolik karakterizasyon ve cilt beyazlatma ürünlerinde potansiyel yenilikçi kullanım . Fitoterapi . 83 :877-882. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Germanò MP, Cacciola F, Donato P, Dugo P, Certo G, D'Angelo V, Mondello L, Rapisarda A.. 2013. Betula pendula Roth yaprakları: HPLC parmak iziyle basılmış metanolik özütün mide koruyucu etkileri . Nat Prod Res . 27 :1569–1575. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Gómez-Estaca J, Montero P, Giménez B, Gómez-Guillén MC.. 2007. Soğuk tütsülenmiş sardalyada ( Sardina pilchardus ) fonksiyonel yenilebilir filmlerin ve yüksek basınçlı işlemenin mikrobiyal ve oksidatif bozulma üzerinde etkisi . Gıda Kimyası . 105 :511-520. [ Google Akademik ]
Grau A, Guardiola F, Boatella J, Barroeta A, Codony R.. 2000. Koyu tavuk etinde türev spektrofotometrisi yoluyla 2-tiobarbitürik asit değerlerinin ölçümü: çeşitli parametrelerin etkisi . J Agr Gıda Kimya . 48 :1155–1159. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Halliwell B. 1996. İnsan sağlığı ve hastalıklarında antioksidanlar . Annu Rev Nutr . 16 :33–50. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Hayes JE, Stepanyan V, Allen P, O'Grady MN, Kerry JP.. 2010. Paketlenmiş çiğ kıyma köftelerinin kalitesi ve raf ömrü stabilitesi üzerinde lutein, sesamol, ellagic asit ve zeytin yaprağı ekstraktının etkisi . Et Bilimi . 84 :613–620. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Jäger S, Laszczyk MN, Scheffler A.. 2008. Huş ağacının ( Betulae alba cortex) dış kabuğunun özünden elde edilen ana pentasiklik triterpen olan betulin'in ön farmakokinetik çalışması . Moleküller . 13 :3224–3235. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Jine Y, Lis M, Szczypka M, Obmińska-Mrukowicz B.. 2012. Betulinik asidin farelerde lenfosit alt kümeleri ve hümoral bağışıklık tepkisi üzerindeki etkisi . Pol J Vet Sci . 15 :305–313. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Kılıç I, Yeşiloğlu Y.. 2013. P- kumarik asidin antioksidan aktivitesi üzerine spektroskopik çalışmalar . Spectrochim Açta A Mol Biomol Spectrosc . 115 :719-724. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Kim SJ, Min SC, Shin HJ, Lee YJ, Cho AR, Kim SY, Han J.. 2013a. On yenilebilir bitki ekstraktının antioksidan aktivitelerinin ve beslenme özelliklerinin değerlendirilmesi ve bunların taze kıymaya uygulanması . Et Bilimi . 93 :715–722. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Kim SJ, Cho AR, Han J.. 2013b. Yapraklı yeşil sebze ekstraktlarının antioksidan ve antimikrobiyal aktiviteleri ve et ürünlerinin korunmasına uygulamaları . Gıda Kontrolü . 29 :112–120. [ Google Akademik ]
Meyer-Hoffert U, Brasch J.. 2013. Huş ağacının ( Betula alba ) dış kabuğundan elde edilen betulin içeren triterpen özütünün neden olduğu alerjik kontakt dermatit . Kontakt dermatit . 68 :382-383. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Muthukumar M, Naveena BM, Vaithiyanathan S, Sen R, Sureshkumar K.. 2012. Moringa oleifera yaprağı ekstraktının öğütülmüş domuz köftelerinin kalitesine etkisi . J Gıda Bilimi Teknolojisi . 51 :1–9. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Nithiyanantham S, Siddhuraju P, Francis G.. 2013. Ham ve işlenmiş Jatropha curcas L. çekirdek küspesi özlerinin toplam fenolik içeriğini ve antioksidan aktivitesini geliştirmek için umut verici bir yaklaşım . Ind Mahsul Prod . 43 :261–269. [ Google Akademik ]
Pandey KB, Rizvi SI.. 2009. İnsan sağlığı ve hastalıklarında diyet antioksidanları olarak bitki polifenolleri . Oksit Med Hücre Uzunev . 2 :270–278. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Pérez-Álvarez JA, Fernández-López J.. 2009. Et ve kümes hayvanı analizinin renk özellikleri, işlenmiş et ve kümes hayvanı analizi el kitabı In: Nollet L., FT editörleri. Boca Raton: CRC Press; P. 355-373. [ Google Akademik ]
Post R, Budak C, Canavan J, Duncan-Harrington T, Jones B, Jones S, Murphy-Jenkins R, Myrick T, Wheeler M, White P, et al.. 2007. Et için federal gıda etiketleme gereksinimlerine yönelik bir rehber, kümes hayvanları ve yumurta ürünleri . Washington (DC): Hogan & Hartson LLP; P. 45-49. [ Google Akademik ]
Raal A, Boikova T, Püssa T.. 2015. Betula spp.'de polifenollerin içeriği ve dinamiği . Estonya'da doğal olarak büyüyen yapraklar . Rec Nat Prod . 1 :41-48. [ Google Akademik ]
Raudonė L, Raudonis R, Janulis V, Viškelis P.. 2014. Huş ağacı ( Betula pendula Roth) yapraklarının kuru ekstraktlarının farklı preparatlarının kalite değerlendirmesi . Nat Prod Res . 28 :1645-1648. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Rojas MC, Brewer MS.. 2007. Doğal antioksidanların dondurulmuş, vakumla paketlenmiş sığır eti ve domuz etinin oksidatif stabilitesi üzerindeki etkisi . J Gıda Kalitesi . 31 :173–188. [ Google Akademik ]
Rosado T, Bernardo P, Koci K, Coelho AV, Robalo MP, Martins LO.. 2012. Metil şırınga: bakteri ve mantar lakkazları için etkili bir fenolik aracı . Bioresour Technol . 124 :371–378. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Sanchez-Escalante A, Djenane D, Torrescano G, Beltran JA, Roncales P.. 2003. Modifiye atmosferde paketlenmiş sığır köftelerinde hodan, biberiye, kekik ve askorbik asidin antioksidan etkisi . J Gıda Bilimi . 68 :339-344. [ Google Akademik ]
Santas J, Carbo R, Gordon M, Almajano M.. 2008. İki İspanyol soğan çeşidinin antioksidan aktivitesinin karşılaştırılması . Gıda Kimyası . 107 :1210–1216. [ Google Akademik ]
Skowyra M, Falguera V, Gallego G, Peiró S, Almajano MP.. 2014. Tara ( Caesalpinia spinosa ) baklalarının sulu ve etanolik ekstraktlarının in vitro ve model gıda emülsiyonlarında antioksidan özellikleri . J Sci Gıda Tarım . 94 :911–918. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Triki M, Herrero M, Rodríguez-Salas L, Jiménez-Colmenero F, Ruiz-Capillas C.. 2013. Düşük yağlı, n-3 PUFA ile zenginleştirilmiş kuru fermente sosisin soğutulmuş depolama özellikleri, sağlıklı bir yağ kombinasyonu ile yeniden formüle edilmiştir. konjac matrisi . Gıda Kontrolü . 31 :158–165. [ Google Akademik ]
Xu Z, Tang M, Li Y, Liu F, Li X, Dai R.. 2010. Du-zhong ( Eucommia ulmoides Oliv.) ekstraktlarının antioksidan özellikleri ve bunların çiğ domuz köftelerinin renk stabilitesi ve lipid oksidasyonu üzerindeki etkileri . J Tarım Gıda Kimya . 58 :7289-7296. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
Yeh CT, Yen GC.. 2003. Fenolik asitlerin antioksidan aktiviteleri ile ilgili olarak insan fenolsülfotransferazları üzerindeki etkileri . J Agr Gıda Kimya . 51 :1474–1479. [ PubMed ] [ Google Akademik ]

**igokcek** · 16 July 2012, 17:07

Kronik Böbrek Yetmezliği, Huş Ağacı, Böbrek Yetmezliği Tedavisi

**igokcek** · 16 July 2012, 17:08

Huş Ağacının Özelikleri, Böbrek Yetmezliği Nasıl Tedavi Edilir, Böbrek Yetmezliğini Ne Tetikler

**igokcek** · 16 July 2012, 17:08

Böbrek Yetmezliği Tedavisi, Huş ile Romatizma Tedavisi, Huş ile Cilt Kanseri Tedavisi

**igokcek** · 16 July 2012, 17:09

Huş Ağacının Faydaları, Huş Romatizmayı İyileştirir, Böbrek İltihaplanması, Eklem Kireçlenmesi

**igokcek** · 16 July 2012, 17:10

İdrar yolları enfeksiyonu, Prostatit, Sistit, Huş Forte

**igokcek** · 16 July 2012, 17:12

Kronik Böbrek Yetmezliği, Huş Forte, Nefrotik Sndrom, Nefrit, Böbrek iltihaplanması

**igokcek** · 16 July 2012, 17:15

Kronik Böbrek Yetmezliği, Huş, Kulak Çınlaması, Baş Dönmesi, Sedef Hastalığı, Tiroid Bezi

**igokcek** · 23 July 2012, 10:33

Protein Kaçağı Tedavisi, Nefrotik Sendrom Problemine Son, Protein Kaçağına Doğal Çözüm

**igokcek** · 05 August 2012, 11:11

Böbrek ağrısı neden olur, Böbrek Ağrısı Nereye Vurur, Böbrek Ağrısı Tedavisi

**igokcek** · 18 August 2012, 16:26

Böbrek Ağrısı Nereye Vurur, Böbrek Ağrısı Tedavisi, Böbrek Ağrısı Nedenleri,

Duyuru

Huş Forte, Kronik Böbrek Yetmezligi, Nefrit

Huş Forte, Kronik Böbrek Yetmezligi, Nefrit

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap