İğde, Elaeagnus Angustifolia

[maturidi]

İğde Çekirdeği Tozu ne işe yarar ve faydaları nelerdir? İğde Çekirdeği Tozu nasıl tüketilir?


Kurak topraklarda bile kolayca yetişten iğde hakkında uzmanlardan heyecanlandıran bir araştırma sonucu ortaya çıktı. Şifası çok büyük olan iğdenin çekirdeğinden elde edilen tozu bağırsak rahatsızlıklarından kemik gelişimine, enfeksiyon kurutmasından yüksek tansiyonu dengelemeye kadar birbirinden etkili faydaları olduğu ortaya çıktı.

Türkiye'nin hemen hemen her yerinde yetişebilmesine rağmen iğde toplumda pek bilinmiyor. Meyve denildiğinde akla pek gelmeyen iğdenin faydaları say say bitmiyor. İbrahim Saraçoğlu'nun faydalarından sık sık bahsettiği iğde böbrek hastalıkları için faydalı bir meyvedir. Bu yüzden böbrek sorunu yaşayan kişiler tarafından yoğun olarak iğde tüketilmesi önerilir. İğdenin meyvesinin yanı sıra çiçeği ve yaprağından elde edilen çayın da böbrek hastalıklarına iyi geldiği ifade edilmektedir.

Mayhoş bir tadı olan ve genellikle çoğu kişinin hoşlanmadığı iğde hem yaprakları hem de çekirdeğiyle tam olarak bir şifa deposu. Aktarlardan kolayca temin edebileceğiniz bu çekirdekler genellikle toz olarak satılıyor lakin evinizde kendiniz de iğde çekirdeği tozu yapabilirsiniz.

İĞDE ÇEKİRDEĞİ VE TOZU NEYE İYİ GELİR?

• Soğuk algınlığı, grip ve nezle gibi hastalıklara iyi gelir.
• Kemik gelişimine etki etmesi dışında kemik erimesini de önler.
• Damar ve kalp sağlığı açısından oldukça önemlidir.
• Bağırsakların düzgün çalışmasını sağlar ve ishal gibi sorunların önüne geçer.
• Ağrı kesici özelliği vardır. Özellikle kas ve eklem ağrılarında fayda sağlar.
• Zindelik verir, stres ve yorgunluğun etkilerini azaltır.
• Bağışıklık sisteminin güçlendirmede olumlu etkileri vardır.
• Form tutma ve kilo verme konularında hızlandırıcı etkisi vardır.
• Cilt ve saç bakımı için de önerilen iğde çekirdeği tozu bakım yağlarıyla birlikte kullanılırsa kısa sürelerde canlı, pürüzsüz ve doğal bir görünüme kavuşmanızı sağlar.
• Enfeksiyonların kurumasında etkilidir.
• İçeriğinde yüksek oranda kolajen barındırdığı için hücrelerin yenilenmesini sağlar.
• Çatlak ve kırıkların kısa sürelerde iyileşmesi sağlar.
• Siroz hastalığında etkili bir alternatif ilaç olarak kullanılır.
• Yüksek tansiyonu dengelemek için kullanılabilir.
• Kolesterol düşürücü özelliği vardır.
• Belli bir yaş üzeri için düzenli kullanım ile Alzheimer hastalığını önler.
• Toksinlerin vücuttan atılmasında etkilidir.
• Böbrek sağlığı açısından çok faydalıdır.
• Ağızda meydana gelen yaraların iyileşmesini sağlar

İĞDE ÇEKİRDEĞİ VE TOZU NASIL KULLANILIR?

Aktarlardan alabileceğiniz ya da evde kendiniz yapabileceğiniz iğde çekirdeği tozu içeriğinde bol miktarda omega 7 barındırırken C, K, B1 ve B2 vitaminlerini de içerir.

• İçecek olarak:

Hem çocukların hem de yetişkinlerin severek tüketebileceği bir içecek hazırlamak isterseniz bir bardak süt ile 1 tatlı kaşığı iğde çekirdeği tozunu karıştırabilirsiniz. Şeker kullanmamanız gereken bu tarif için içmekte zorlanıyorsanız 1 çat kaşığı bal ilavesi yapılabilir.

• Ara öğün olarak:

Özellikle kilo vermek isteyenlere önerilen iğde çekirdeği tozunu bir kâse yoğurt ile karıştırılarak tüketilebilir. Hem hafif hem de tok tutma özelliği ile ara öğünlerde bu karışımı yiyebilirsiniz. Eğer çocuklara yedirmek isterseniz karşımın içerisine mevsim meyveleri de eklenebilir.
Çay olarak:Bildiğiniz üzere bitkisel çaylar genellikle bitkilerin yaprak, çiçek ya da çekirdeklerinden yapılır. İğde çekirdeği tozunu da bu şekilde kullanmak isterseniz bir bardak kaynar suya bir tatlı kaşığı atarak 5 dakika dinlendirip içebilirsiniz.

• Baharat olarak

Belirgin ve keskin bir tadı olmayan iğde çekirdeği tozunu yemek, çorba ya da salatalarınıza baharat olarak ekleyebilirsiniz.

[maturidi]

Rus zeytini ( Elaeagnus angustifolia L.): Çeşitli geleneksel tıbbi uygulamalardan aktif antioksidan, antiinflamatuar, anti-mutajenik ve analjezik ajan olarak yeni rollerine kadar

Rafie ^Hamidpour , Dr. , ^a , ^∗ Soheila Hamidpour , Dr. , ^b Mohsen Hamidpour , Dr. ^_ _ _ ^_ _ _ ^_ _ _ ^{_ _}
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri PMC Sorumluluk Reddi
^a Bitkisel İlaç Departmanı, Pars Bioscience, Leawood, KS, Amerika Birleşik Devletleri
^b Missouri Üniversitesi Kansas City, Tıp Fakültesi, Patoloji Bölümü, Amerika Birleşik Devletleri
^c Hematoloji ve Kan Bankacılığı Bölümü, Paramedikal Bilimler Fakültesi, Shahid Beheshti Tıp Bilimleri Üniversitesi, Tahran, İran
Rafie Hamidpour: moc.ecneicsoibsrap@eifar ; Soheila Hamidpour: moc.ecneicsoibsrap@aliehos ; Mohsen Hamidpour: moc.ecneicsoibsrap@neshom ; Mina Shahlari: moc.ecneicsoibsrap@anim ; Mahnaz Sohraby: moc.ecneicsoibsrap@zanhaM
^∗ Sorumlu yazar. Dr. Rafie Hamidpour, Bitkisel İlaç Departmanı, Pars Bioscience LLC, 14109 Cambridge Lane, Leawood, Kansas, 66224, Amerika Birleşik Devletleri. Tel.: +1 (913) 432 0107; Faks: +1 (913) 432 5708. moc.ecneicsoibsrap@eifar
Git:

Soyut
Halk arasında iğde veya Rus zeytini olarak bilinen Elaeagnus angustifolia L., Elaeagnacea familyasından yaprak döken bir bitkidir . Bu bitki, çok çeşitli çevresel koşulları tolere edebilir ve hayatta kalabilir. E. angustifolia bitkisinin farklı kısımları , özellikle meyveleri ve çiçekleri, mide bulantısı, öksürük, astım, ateş, sarılık ve ishal gibi çeşitli yaygın hastalıkların tedavisinde geleneksel olarak kullanılmıştır. Meyve tozu ve E. angustifolia özü kullanımıL.'nin romatoid artritli hastalarda ağrıyı hafifletmede ve ayrıca yaralı kişide yaraların iyileşme süresini kısaltmada etkili olduğu gösterilmiştir. Ayrıca, son zamanlarda yayınlanan bazı raporlar, iğde bitkisinin antioksidan, antienflamatuar, antimikrobiyal, antikanser ve diğer bazı özelliklerine işaret etmektedir. Bu bitkinin diğer önemli özelliği, bazı toksik elementler için çevreyi biyolojik olarak izlemedeki rolü ve ayrıca sıkıntılı topraklarda bir biyo-gübre ajanı olarak faaliyet göstermesi olacaktır. E. angustifolia L. ve biyoaktif bileşenleri üzerinde daha ileri çalışmalarla bu bitkinin potansiyel olarak etkili olabileceği ve ilaç endüstrisinde kronik ve ciddi sorunların tedavisinde doğal bir alternatif kaynak olarak kullanılabileceği görülmektedir.Şekil 1.

Şekil 1
Fotoğraf: Pars Bioscience, LLC, Leawood Kansas.

Anahtar Kelimeler: Rus zeytini, Antioksidan, Antiinflamatuar, Anti kanser, Antimikrobiyal
Git: grafik özet


Git:

1. Giriş
Elaeagnus angustifolia L. (iğde, Rus zeytini, Yabani zeytin) , Elaeagnacea (Araliaceae) familyasının Elaeagnus cinsine aittir . ¹ Dünya çapında bulunan 90'dan fazla Elaeagnus türü vardır ve bunlar esas olarak Asya, Avrupa ve Kuzey Amerika'nın bazı bölgelerinde subtropikal bölgelerde dağıtılır. ² E. angustifolia L., küçük kırmızımsı kahverengi, eliptik şekilli meyveleri olan bir zeytin ağacını andırdığı için genellikle Rus zeytini olarak adlandırılan yaprak döken bir ağaç veya büyük bir çalıdır. ³

Rus zeytini, 10 m yüksekliğe ve 30 cm çapa kadar hızla büyüyen ve 5-6 yıl sonra meyve vermeye başlayan uzun ömürlü (80-100 yıl) bir ağaçtır. ⁴ Bu ağaç, sel, şiddetli kuraklık, taşlı, kumlu ve yüksek tuzluluk veya alkali topraklar gibi çok çeşitli sert çevre koşullarını tolere edebilir. ⁵ Rus zeytin bitkisinin farklı kısımları, çeşitli tıbbi biçimlerde, parfüm endüstrilerinin yanı sıra ahşap işçiliği ve müzik aletleri üretiminde kullanılmıştır. ⁴

Rus zeytin meyveleri yüksek besin değerlerine sahiptir ve protein, şeker, vitamin ve mineraller içerir. ^{3 , 6} Çiçekler küçük, hoş kokulu ve sarımsı beyaz renktedir ve bal arıları için nektar kaynağı ve likör üretiminde aroma maddesi olarak kullanılmıştır. ^{3 , 4} Çiçekler geleneksel tıpta tetanozu tedavi etmek için de kullanılmıştır. ⁷

E. angustifolia L.'nin meyvesinin, çiçeğinin, yaprağının ve kabuğunun kaynatılması ve aşılanması geleneksel olarak çeşitli hastalıkları ve semptomlarını tedavi etmek için kullanılmıştır. Çiğ veya haşlanmış meyve boğaz ağrısı, öksürük, grip, soğuk algınlığı, ateş, bulantı, kusma, sarılık, astım, ishal ve diğer bazı belirti ve hastalıkların tedavisinde tüketilmektedir. ^{5 , 8 , 9} İran halk tıbbında meyveler, romatoid artritli hastalarda ağrı ve iltihabı gidermek ve yaralı bir bölgede yara iyileşme sürecini hızlandırmak için kullanılmıştır. ¹

Yakın tarihli farmakolojik çalışmalar, E. angustifolia L.'nin anti-enflamatuar, antimikrobiyal, antioksidan ve bir dizi rahatsızlığın tedavisinde kullanılabilecek bazı diğer sağlık yararlarına sahip olduğunu göstermiştir . ⁷

Git: 2. Kompozisyon
E. angustifolia L.'nin meyveleri tokoferol, karoten, C vitamini, tiamin B1 gibi vitaminler ve kalsiyum, magnezyum, potasyum, demir ve manganez gibi mineraller açısından zengin bir kaynak olarak geleneksel olarak taze veya kurutulmuş olarak tüketilmektedir. ¹⁰ Çalışmalar, E. angustifolia L.'nin farklı bölümlerinin farklı konsantrasyonlarda mineral içerdiğini göstermiştir . Kök, kök kabuğu, dallar, gövde kabuğu ve yapraklar demir, kurşun, bakır, kadmiyum, çinko, krom, nikel ve kobalt içerir. ¹¹ E. angustifolia L. meyvesinde en fazla bulunan mineral potasyum (8504 mg/kg), ardından sodyum (1731 mg/kg) ve fosfor (635 mg/kg) gelmektedir. ¹²Daha önce belirtilen metallere maruz kalma, kronik akciğer hastalığı, nefrotoksisite, kanser, böbrek toksisitesi ve hastalığı, hipertansiyon, hiperglisemi ve diğer sağlık sorunlarına neden olabilir, ancak yalnızca yüksek düzeyde, uzun süreli maruz kalma durumunda. ⁴⁶

E. angustifolia L. meyve ekstraktının fitokimyasal çalışmaları , flavonoid bileşiklerin, polisakkaritlerin, sitosterollerin, kardiyak glikozitlerin, terpenoidlerin, kumarinlerin, fenol karboksilik asitlerin, amino asitlerin, saponinlerin, karotenoidlerin, vitaminlerin ve tanenlerin varlığını göstermektedir. ^{8 , 13 , 14} Fenolik hidroksil gruplarından dolayı ağırlıklı olarak meyve ve sebzelerde bulunan flavonoidler, metalleri şelatlayabilir, lipid peroksidasyonunu azaltabilir ve yüksek bir antioksidan ve serbest radikal süpürücü aktivite göstermiştir. ¹³

4 (+)-catechin, (-)-epicatechin, (+)-gallocatechin, (-)-epigallocatechin, kaempferol, quercetin, luteolin, isorhamnetin ve isorhamnetin-3- 0 -β- d -galactopyranoside gibi bir grup flavonoid E. angustifolia L. ¹³ ekstraktından izole edilmiş ve tanımlanmıştır.

E. angustifolia L. bitkilerinde en bol bulunan fenolik bileşiklerin , benzoik gruptan 4-hidroksibenzoik asit (45.8 mg/100 g kuru ağırlık [ağırlık]) ve sinnamik gruptan kafeik asit (32 mg//) olduğu bilinmektedir. 100 g kuru ağırlık). ¹⁴ Çözünür şekerler arasında; fruktoz (%27.1 kuru ağırlık) ve glikozun (%22.3 kuru ağırlık) fenolik bileşiklerle birlikte E. angustifolia L. meyvesinin tatlı tadından sorumlu ana monosakkarit olduğu bulundu . ¹⁴

E. angustifolia L. yüksek miktarda yoğunlaştırılmış tanen içerir. ¹⁵ Kondanse tanenlerin içerikleri bitkinin farklı kısımlarında değişkenlik gösterir. Ağacın kabuğu maksimum miktarda tanen içerir, bunu yapraklar ve yıllık dallar takip eder. ¹⁵

Çaylarda, kırmızı şaraplarda ve bazı meyve ve sebzelerde bulunan yoğunlaştırılmış tanenlerin sağlığa faydaları birçok çalışmada kanıtlanmıştır. Tanenlerin vücudumuzda anti-kolesterol, antiinflamatuar, anti-kanser, kardiyoprotektif ve kemopreventif etkileri olduğu ve ayrıca cilt dokularının yaralı bölgesinde anjiyogenez aktivitelerini artırarak iyileşme süresini kısaltmaya yardımcı olduğu gösterilmiştir. ¹⁵

Çalışmada E. angustifolia L meyvesinin ekstraktında laurik, tridekanoik, miristik, pentadekanoik, palmitik, palmitoleik, heptadekanoik, linoleik, linolenik, oleik, stearik, eikosanoik ve dokosanoik asitler gibi bazı yağ asitleri tespit edilmiştir . 16 Çalışma, numunelerdeki başlıca yağ asitlerinin palmitik asit (%34,31) olduğunu, ardından oleik asit (%26,23) ve lignoserik (%17,47) olduğunu göstermektedir ^{. 17} Çalışmada , E. angustifolia L.'nin meyve kabuğunda bol miktarda palmitoleik asit ve tohumlarında yüksek miktarda linoleik asit ve palmitik asit rapor edilmiş olup, bu durum genotiplerdeki, iklim koşullarındaki ve toprak bileşimindeki farklılıklarla açıklanabilir. ¹⁷

Sonuç olarak, E. angustifolia L. meyvesi insan sağlığına yararlı bazı besin maddeleri, mineraller, kimyasal bileşikler ve antioksidanlar açısından zengin bir kaynaktır. ¹²

Git: 3. Uygulamalar

3.1. Yara iyileştirici etkiler
Yara iyileşmesi, yaralanmaya yanıt olarak, işlevi hasarlı dokuya geri döndürecek olan ve dört kesin ve yüksek düzeyde programlanmış aşama içeren temel ve aktif bir süreçtir. ⁸ Bu aşamalar; hemostaz (kanamanın durması), iltihaplanma, proliferasyon ve doku onarımı. Hemostaz sürecini takiben, yara iyileşmesinin enflamasyon fazı, enfeksiyöz mikroorganizmaların ortadan kaldırılması, iyileştirici faktörlerin yaralı bölgeye salınması ve ayrıca proliferatif faz için hücrelerin göçünü ve bölünmesini kolaylaştırmak için önemli bir bölümdür. İnflamasyon fazının devam etmesi iyileşme sürecini durdurabileceğinden inflamatuar yanıt süresinin kısa olması önemlidir. <sup>8

Proliferatif faz, temel olarak, bağ</sup> dokusunun önemli bir parçası olan ve yaraların iyileşmesinde ve dokunun onarılmasında önemli rolü olan kollajen adı verilen bir proteinin dokuda birikmesini içerir . ¹⁹

Kollajenin ana bileşeni, dokudaki kollajen biyosentezinin ana göstergesi olan ve pro ve hidroksipro amino asitlerden yapılan hidroksiprolindir. Hidroksiprolin, siklik düzeni ile kollajene yapı ve güç sağlar ve kollajen dokuya kuvvet verir ve daha sonraki aşamada yeniden epitelizasyon sürecine yardımcı olur. ²⁰ Çalışmanın bulgusu E. angustifolia L. meyvesinin ekstraktının yaralı bölgeye uygulanmasının ardından dokuda kollajen yapımında önemli bir faktör olan hidroksiprolin içeriğinin arttığını göstermektedir. ^{8 , 21} Ayrıca başka bir çalışma E. angustifolia'nınL. meyve özleri, sıçanlarda yara iyileşme sürecini hızlandırmada ve iltihap ve ağrıyı azaltmada önemli bir etkiye sahiptir. ⁸

İran geleneksel tıbbında, kurutulmuş toz iğde yaprakları (Farsça; Senjed ), kanamayı kontrol etmek ve yara iyileşme sürecini hızlandırmak için bir çare olarak kullanılmıştır. ^{8 , 22} Çalışma, iğde yaprağı ekstresi (OLE) uygulamasının yara alanını önemli ölçüde azalttığını ve kontrol grubuna kıyasla tedavi edilen grupta kılcal tomurcuk ve fibroblast sayısını oldukça artırdığını göstermektedir. Fibroblastlar, cilt bağ dokusundaki yapışık hücrelerdir ve yara iyileşme sürecinde önemli bir rol oynarlar. ²²

E. angustifolia L. ekstraktının içerdiği flavonoidler ve antioksidanlar yara iyileşme sürecinde önemli faktörlerdir. Flavonoidler, ciltte yara kapanma hızını ve epidermisin yenilenmesini artırmaya yardımcı olan antimikrobiyal aktiviteleri ile bilinirler. ⁸ Antioksidanlar, dokuları oksidatif hasarlardan korumada önemli bir role sahiptir ve yara iyileşmesinin ilerlemesinde DNA sentezini önemli ölçüde destekler. Gelecekte yara iyileşme sürecinde terapötik bir ajan olarak kullanılabilecek olan bu bitkinin farmakolojik özelliklerinden sorumlu olan aktif bileşenleri ve etki mekanizması daha sonraki fitokimyasal çalışmalarla belirlenebilir ve izole edilebilir. ⁸

3.2. Mide-bağırsak [GI] iyileşmesi
İğde meyvelerinden elde edilen müstahzarlar, bağırsaklarda yara iyileştirici doku oluşumunu arttırdığı için Avrupa ve Orta Asya'nın bazı bölgelerinde peptik ülser tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. ²³ Bu çalışmada, meyve yağının karotenoid fraksiyonunun GI ülserlere karşı koruyucu bir etkisi olduğu kanıtlanmıştır. ²³

Başka bir çalışmanın sonucu, E. angustifolia L.'nin metanolik meyve özütünün etanol kaynaklı ülserli sıçanlara uygulanmasından sonra, histopatolojik inceleme ve ülser indeksi tayini yapıldıktan sonra dokuda güçlü bir gastroprotektif aktivite gözlemlendiğini düşündürmektedir. ²⁴ Ayrıca meyve polifenolik bileşiklerinin bir konsantrasyonu olan E. angustifolia L.'den yapılan pshatin adlı bir ilaç da Ermenistan'da kolit ve diğer gastrointestinal sistem hastalıklarının tedavisinde uzun süredir kullanılmaktadır. ²⁵ E. angustifolia'nın farmakolojik yönleri ve etki mekanizması hakkında ileri çalışmalar önerilmektedir.L. ekstraktın vasküler ve solunum düz kas hücreleri (SMC) üzerindeki inhibitör etkilerine ek olarak nöronlar üzerinde ekstrakt. Gelişmiş fitokimyasal çalışmalar, bu bitkinin çeşitli biyolojik aktivitelerine dahil edilen ana maddeleri kolaylaştıracak ve belirleyecektir. ²⁴

3.3. Kas gevşetici aktivite
E. angustifolia L.'nin meyve, yaprak ve çiçek özleri, geleneksel olarak çeşitli kas ağrısı ile ilgili rahatsızlıkların tedavisinde kullanılmıştır. İğde çiçeğinin halk hekimliğinde tetanoz tedavisinde kullanılması da bu bitkinin kas gevşetici etkisinin göstergesi olabilir. ²⁶

Çalışmada, E. angustifolia L. meyve tohumlarının sulu ve etanol ekstraktlarının kas gevşetici aktivitesi farelerde traksiyon testi kullanılarak incelenmiştir. Sonuç, ekstraktların artan dozları ile dokunun kas gevşetici özelliğinin de arttığını gösterdi. Daha yüksek dozlarda, sulu ve etanol ekstraktlarının etkinliği, gerilimi azaltmak ve kasları gevşetmek için kullanılan kimyasal bir ilaç olan diazepam (2 mg/kg) ile benzerdi. ²⁶

E. angustifolia L.'nin kas gevşetici aktivitesi, benzodiazepin reseptörleri üzerinde kısmi agonistik etkiye sahip bazı flavonoidlerin veya krizin gibi flavon bileşenlerinin etkisinden kaynaklanıyor olabilir. ²⁶ Bitki ekstraktlarının aktif bileşenleri ile reseptörler arasındaki etkileşim mekanizmasını açıklamak için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.

Bu rapor, E. angustifolia L.'nin yaprak ve çiçek ekstraktının gastrointestinal düz kas aktivitesi üzerindeki etkisi üzerine başka bir çalışma başlatmıştır . Sonuçlar, izole edilmiş bazı düz kas hücrelerinin aktivitelerinin, E. angustifolia L. ekstraktı tarafından inhibe edildiğini gösterdi; bu, E. angustifolia L.'nin mide bulantısı, kusma ve şişkinlik tedavisindeki yararlı etkilerinin bir nedeni olabilir . Bu semptomlar motorla ilgili fonksiyonlar olmasına ve sinir sisteminin kontrolü altında olabilmesine rağmen, E. angustifolia'nın yararlı etkilerinin olup olmadığını anlamak zordur.L.'nin bu hastalıkları tedavi etmesi, düz kas hücrelerinin kasılması üzerindeki doğrudan etkisinden veya gastrointestinal motor fonksiyonların nöral kontrolünden kaynaklanmaktadır. ²⁴

3.4. antioksidan aktivite
Birçok sentetik antioksidanın toksik ve tehlikeli yan etkileri ve doğal antioksidanların ve meyvelerde, sebzelerde ve diyet antioksidanlarında bulunan fenolik bileşiklerin muazzam faydası, birçok insanın diyetlerinde daha fazla doğal antioksidan tüketimine olan ilgisini artırdı. yaşam kalitelerini ve birçok hastalığa yakalanma riskini azaltmaktadır. ²

Birçok bitkinin meyve, çiçek, tohum ve yapraklarında bulunabilen fenolik ve flavonoid bileşikler gibi doğal kaynaklı aktif bileşiklerin, elektronları serbest bırakma ve serbest radikalleri yakalama yeteneklerinden dolayı antioksidan aktiviteye sahip oldukları gösterilmiştir. ² Bu bitkilerin sekonder metabolitlerinin miktarında iklim, toprak ve ekolojik koşullar gibi birçok faktör rol oynamaktadır. ²

E. angustifolia L.'nin yaprak ve çiçek özleri, antioksidan özelliklere sahip olan ve hücreleri oksidatif hasarlardan koruyan ve birçok dejeneratif hastalığın riskini geciktiren veya azaltan fenolik ve flavonoid bileşikler içerir. ² Yapılan araştırmalar, fenolik ve flavonoid bileşiklerin miktarlarının bitkinin yapraklarında çiçeklerinden daha fazla olduğunu göstermiştir. Açıklama, yapraklarda meydana gelen fotosentez sürecinden ve ayrıca yapraklarda diğer organlardan daha yüksek miktarda flavonoid biyosentetik yolak öncüllerinin varlığından kaynaklanıyor olabilir. ²

Yapılan araştırmalarda E. angustifolia L.'nin amino asitler, flavonoidler, fenolik bileşikler, polisakkaritler ve diğer bazı esansiyel elementler gibi çeşitli kimyasal bileşiklerden oluştuğunu göstermiştir. Polisakkaritler, anti-radyasyon, antioksidan ve immün düzenleyici aktivitelerle E. angustifolia L.'nin önemli bir bileşenidir. E. angustifolia L. polisakkaritlerinin karakterizasyonunu ve antioksidan aktivitesini incelemek için iki polisakkarit ( E. angustifolia L. polisakkarit-1 (PEA-1) ve (PEA-2)) bu bitkinin meyvelerinden hazırlanmış ve incelenmiştir. . ²⁷ Bu çalışmanın sonucu, PEA-1 ve PEA-2'nin in vitro güçlü antioksidan aktivitesini göstermiştir.orta düzeyde süpürme özelliği ve lipid peroksidasyon inhibisyon etkisi ile. Bazı yeni doğal ilaçların geliştirilmesi için bu bitkinin güvenliğini ve potansiyel kullanımını değerlendirmek için daha ileri çalışmalara ihtiyaç vardır. ²⁷

Çalışmada dört flavonoid bileşiği izole edilerek Quercetin 3,4′-O-β- d -diglucoside ( 1 ), Isorhamnetin-3- O -β-D-galactopyanoside ( 2 ), Quercetin 3-O-β olarak tanımlanmıştır. -D-Galactopyrano -side-4'-O-β- d -glukopiranozit ( 3 ) ve Isorhamnetin 3-O-β- d -Galaktopiranosid-4'-O-β- d -glukopiranozit ( 4 ). ⁷ Bu çalışmada, bu flavonoid glikozitlerin antioksidan aktivitesi değerlendirildi ve sonuç, bu bileşiklerin her birinin konsantrasyona bağlı bir antioksidan aktiviteye sahip olduğunu ve aralarında Quercetin 3,4′-O-β-d- diglucoside ( 1) diğerlerinden daha yüksek antioksidan aktiviteye sahiptir. ⁷

3.5. kardiyoprotektif aktivite
Kalp krizi veya akut miyokard enfarktüsü (MI), kardiyovasküler hastalıklar arasında en önemli ölüm nedenlerinden biridir. Bazen kalp atardamarlarının kısmen veya tamamen tıkanması, kalp kasına giden kan akışının azalmasına neden olabilir, buna miyokardiyal veya kalp iskemi adı verilir. Bu, kalp kasına zarar verebilir, verimli bir şekilde pompalama yeteneğini azaltabilir ve kalbin oksijen kaynağını azaltabilir. Kalp yaralanmasını azaltmanın en etkili yolu, kanın kalbe hızla geri dönmesidir. Garip bir şekilde, bir süre sonra dokuya kan akışının geri dönmesi, miyokardiyal iskemi-reperfüzyon (I/R) hasarı olarak adlandırılan dokuda iltihaplanma ve oksidatif stres hasarına neden olarak kalbe zarar verebilir. Bir dizi çalışma, E vitamini, katalaoz (CAT), melatonin gibi bazı antioksidanların,²⁸Antioksidanların iskemik-reperfüzyon hasarına karşı kalp dokusunun direncini sağlamadaki yararlı etkileri birçok çalışmada kaydedilmiştir. Miyokardiyal antioksidanlar, hücre altı proteinler, karbonhidratlar, lipidler ve DNA'daki oksidatif hasarları azaltabilir veya durdurabilir. ²⁹ Antioksidanların etki mekanizması şunlar olabilir: reaktif oksijen türlerinin (ROS) oluşumunun engellenmesi, ROS veya öncüllerinin temizlenmesi, endojen antioksidan üretiminin geliştirilmesi ve anti-death genini artırarak hücre ölümünün azaltılması. ²⁹

Çalışmada E. angustifolia L. yapraklarının sulu ekstraktının etkinliği ve indüklenmiş iskemi/reperfüzyonda (I/R) kardiyoprotektif aktivitesi izole edilmiş sıçan kalbinde gösterildi. Sonuç, E. angustifolia L.'nin 0,5 mg/mL ve 1,0 mg/mL dozlarında kardiyak fonksiyonun restorasyonunu ve miyokardiyal biyokimyasal değerleri normal miktara doğru önemli ölçüde iyileştirdiğini gösterdi. ²⁸ Bu sonuç, E. angustifolia'nın ekstrakt yapraklarının miyokardiyal dokuda ekstraktın antioksidan aktiviteyi artırmasına bağlı olabilecek miyokardiyal iskemi reperfüzyon hasarı üzerinde koruyucu bir etkiye sahip olduğunu gösterebilir . ²⁸

3.6. Antinosiseptif ve antiinflamatuar etkiler
Daha az zararlı etkiye sahip yeni analjezik ilaçlar ararken, geleneksel olarak uzun yıllardır kullanılan şifalı bitkilere bakmak mantıklıdır. İğde, ağrı kesici ve iltihap önleyici özellikleri nedeniyle İran halk tıbbında eski zamanlardan beri kullanılmaktadır. E. angustifolia L. meyve ekstraktının fitokimyasal çalışmaları, flavonoidlerin ve terpenoidlerin , E. angustifolia L. meyve ekstraktının analjezik ve antiinflamatuar etkileri için ana bileşenler olarak kabul edildiğini göstermektedir . ²⁴ Birçok çalışma, E. angustifolia L. meyvesinin sulu ekstraktının kullanımının, hayvan modellerinde ve ayrıca aterosklerozu olan hastalarda ağrı ve iltihabı azaltmada etkili olduğunu göstermiştir. Ekstrakt, siklooksijenaz tip 1 ve tip 2 enzimlerinin aktivitesini inhibe etme yeteneğine sahiptir ve aynı zamanda iyi bir anti-enflamatuar ilaç olma yolunda doğru bir aday gibi görünmektedir. ³⁰

Çalışmanın raporu, E. angustifolia L. ekstraktının (formalin enjeksiyonunun neden olduğu) kronik ağrı ve iltihaplanmayı azaltmadaki etkinliğinin, steroid olmayan bir anti-enflamatuar ilaç (NSAID'ler) olan indometasin gibi kimyasal ilaçlarla karşılaştırılabilir olduğunu göstermektedir. Deksametazon, antiinflamatuar ve immünosupresan bir ilaç olarak kullanılan steroid bir ilaçtır. ³⁰ İndometasin, siklooksijenaz tip 1 ve 2 enzimlerinin inhibisyonu yoluyla hareket eder ve deksametazon, fosfolipaz A2 enzim aktivitelerinin inhibisyonunda rol oynar. İn vitro çalışmanın sonucu, E. angustifolia ekstresininL., siklooksijenaz tip 1 ve tip 2 enzimleri üzerinde indometazin ile karşılaştırılabilir inhibe edici etkiye sahiptir ve sonuç, gastrointestinal sistemin mukoza zarı üzerinde herhangi bir sert etki göstermediğinden, E. angustifolia L. özü, bir bitki olarak iyi bir aday olabilir. insanlarda kronik ağrının giderilmesi için doğal anti-inflamatuar ilaç. ³⁰ Kesin etki mekanizması net olmamakla birlikte, E. angustifolia L.'nin meyve ve tohum ekstresi üzerinde yapılan çalışmalar, ekstraktın sıçanlarda anti-enflamatuar ve antinosiseptif etkilere sahip olduğunu göstermiştir. ³⁰ Son araştırmalar, flavonoidlerin ve sitosterollerin bitkinin anti-enflamatuar ve analjezik etkilerinden sorumlu olduğunu göstermektedir. ⁸

Döküntü benzeri semptomları olan oral kronik inflamatuar bir hastalık olan oral liken planus (OLP) hastalarında E. angustifolia L. kullanımı üzerine yapılan çalışma, E. coli'nin %19 sulu jelinin topikal kullanımının etkili olduğunu göstermiştir . angustifolia L.'nin bu semptomlar üzerinde ağrı kesici, iltihabı azaltıcı ve iyileştirici etkisi vardır. ⁶ Topikal veya sistemik kortikosteroid kullanımı hastalığın tedavisinde terapötik etkilere sahip olabilse de, bu ilaçların kullanımına bağlı mantar enfeksiyonları, adrenal supresyon, malignite ve baş ağrısı gibi bazı yan etkiler vardır. Bu yan etkiler nedeniyle, yan etkileri en az olan yeni bir tedavi ve ikame arayışı her zaman göz önünde bulundurulmuştur. ⁶

Birçok hastada ağrının hafifletilmesinde daha güvenli ve daha etkili bir yol bulunmasıyla ilgili birçok biyolojik çalışma yapılmıştır. Rapor, bu ağrı kesici ilaçların nispeten yüksek maliyetine ek olarak, bu ilaçları almanın sindirim sistemi sorunları, yara iyileşmesinde gecikme, enfeksiyon riskinde artış ve ilaçlara bağımlılık gibi birçok yan etkisinin olduğunu gösteriyor. ³⁰

3.7. Kireçlenme
Geleneksel olarak İran'da, Rus zeytini demlendi ve romatoid artrit hastalarında ağrıyı hafifletmek için analjezik bir ajan olarak kullanıldı. ² Çalışmalar, ekstraktın flavonoid bileşenlerinin antinosiseptif ve antiinflamatuar etkilere sahip olduğunu göstermiştir. Ekstraktın kas gevşetici aktivitesinin eklenmesi, onu bazı kas-iskelet sistemi bozuklukları için de uygun bir tedavi haline getirir. ³¹

Osteoartrit, genellikle yaşla birlikte ilerleyen, ağrılı, kronik bir eklem hastalığıdır. Ağrı ve rahatsızlığı gidermek için, genellikle nonsteroid antiinflamatuar ilaç analjezikleri (NSAID'ler) veya seçici siklooksijenaz-2 (COX-2) inhibitörleri ve eklem içi tedaviler kullanılabilir; bu ilaçların kullanımıyla ilişkili bazı yan etkiler yer almak. Kronik ağrı bozukluklarının tedavisinde bitkisel ilaç gibi alternatif terapi kullanımının, bu hastalıklardan mustarip hastalarda faydalı olduğu gösterilmiştir. Daha yeni bir denemede kombine zencefil ve E. angustifolia L. meyve özleri kullanıldıktan sonra ağrı ve iltihabın hafifletilmesiyle ilgili olarak bildirilen bazı yararlı etkiler vardır . Rapor, 200 mg E. angustifolia alan hastalarınSekiz haftalık L. meyvesi ve zencefil özleri, ağrı yoğunluğunda ve ağrı oluşmasında önemli bir gelişme göstermiştir. ³² Bu çalışmanın sonucu, zencefil ve Rus zeytin özleri kombinasyonunun güvenli olduğunu ve osteoartritli hastalarda ağrıyı azaltmada etkili olabileceğini düşündürmektedir. Farklı doz ve sürelerin etkisine ilişkin ileri çalışmalar önerilmektedir. ³²

3.8. Hafıza
Alzheimer hastalığı, genellikle kolinerjik sistemin azalmış aktivitesinin neden olduğu bilişsel ve hafıza fonksiyonlarının bozulması ile karakterizedir. Morris su testi ile yapılan çalışmada E. angustifolia L.'nin su ekstraktının etkisi, skopolamin enjeksiyonu ile hafızası ve öğrenmesi geçici olarak bozulmuş sıçanlarda incelenmiştir. Sonuç, E. angustifolia L. su ekstraktının artan alımıyla , skopolamin ile indüklenen sıçanların uzamsal öğrenme ve hafızasının doza bağlı olarak geliştiğini gösterdi. ^{33 , 34}

3.9. Anti-tümör aktivitesi
Elaeagnus ailesinin E. angustifolia L., Elaeagnus umbellate , Elaeagnus pungens ve Elaeagnus glabra gibi kanser hücrelerine karşı sitotoksik aktiviteleri ile bilinen birkaç türü vardır . Bu türlerden izole edilen triterpenoid, flavonoid, lignanoid ve bezenoid gibi antitümör aktivitelerinden sorumlu olabilecek bazı biyoaktif bileşenler bulunmaktadır. ³⁵ Bir deneyde, E. angustifolia L.'nin farklı asetik eter özü fraksiyonlarının antioksidan ve anti-tümör aktivitesi incelenmiştir. Her numunenin konsantrasyonunun ve polarite seviyesinin artmasıyla, antioksidan ve radikal yakalama aktiviteleri nispeten arttı. Çalışma, daha yüksek konsantrasyonda E. angustifolia L. ekstraktının kullanılmasıyla Hela hücrelerinin in vitro proliferasyonu üzerinde önemli bir inhibitör etki olduğunu göstermektedir . ^{36 , 37}

Tümör büyümesinin ve metastazının temel kısmı anjiyojeneze (yeni kan damarlarının oluşumu) bağlıdır. Çalışmada, E. angustifolia L. hidroalkolik ekstraktının insan göbek endotel hücreleri (HUVEC) üzerindeki etkisi, 200 μg/ml'deki E. angustifolia L. çiçeği ekstraktının HUVEC'in anjiyogenez aktivitesini inhibe edebileceğini göstermiştir, bu nedenle ekstrakt bir anjiyogenez ile ilgili bozuklukların önlenmesi ve tedavisi için iyi bir aday. ^{38 , 39}

3.10. Antimikrobiyal etkinlik
Son yıllarda, antibiyotiğe dirençli mikroorganizmaların neden olduğu hastalıkların artması nedeniyle, doğal antimikrobiyal aktiviteleri olan şifalı bitkiler gibi daha iyi alternatiflerin kullanılmasının önemi önemli ölçüde artmıştır. ⁴⁰ Bazı şifalı bitkiler ve bunların bileşenleri, anti-mikrobiyal bir madde olarak kullanılmak üzere potansiyel olarak iyi bir kaynak olabilir. Bu bitki bazlı antimikrobiyal ajanların geliştirilmesine yönelik ilk adım, bitkilerin in vitro antimikrobiyal aktiviteleri açısından taranması olacaktır . E. angustifolia L. çalışması, hedeflenen kültüre karşı antimikrobiyal aktiviteyi gösteren meyve ekstraktının MCI (minimum inhibitör konsantrasyon) değerinin 0,1 mg/mL ila 7,5 mg/mL arasında değiştiğini göstermiştir. Her şeyden önce, bu çalışmada Escherichia coli'ye karşı 1,62 mg/mL MIC ile güçlü antimikrobiyal aktivite gösterilmiştir. Rapor, E. angustifolia L. meyve özlerinde ümit vaat eden antimikrobiyal ajanların varlığına işaret ediyor .⁴⁰ E. angustifolia L. yapraklarının metanol ekstraktının bazı mikroorganizmalara karşı in vitro antimikrobiyal aktivitesi değerlendirilmiş ve çalışmanın sonucu ekstraktın Bacillus subtilis RSKK 245, Staphylococcus aureus RSKK 2392, Salmonella typhimurium RSKK19 ve özel olarak Yersinia enterocolitica NCTC 11174. Bu çalışmalarda antimikrobiyal aktivite standart antibiyotiklerle değerlendirildi. ³⁴ Başka bir çalışmada, E. angustifolia L.'nin yaprak ekstraktının %42 oranında pozitif inhibitör etkisi olduğu gösterilmiştir.S. typhimurium TA 100. ¹³ Hedeflenen kültürlerde ekstraktın antimikrobiyal aktivitesinden sorumlu bileşikleri bulmak için ileri çalışmalar gereklidir. ⁴⁰

3.11. Biyo-monitör etkinliği
Uzun yıllardır, farklı endüstriyel faaliyetler tarafından üretilen zararlı atıklar ve ağır metaller ile suyun kirlenmesi, çevre, tarım ve insan refahı üzerindeki toksik etkilerinden dolayı büyük bir endişe kaynağı olmuştur. Ni, Cd, Hg, Zn, Pb ve Cr gibi ağır metallerin çoğu biyolojik olarak parçalanamadıkları ve toksik oldukları için zamanla canlı organizmalarda birikerek bir takım hastalık ve rahatsızlıklara neden olurlar. ⁴¹ Metal kirliliğinin birikmesi, birikmesi ve dağılımı mantarlar, likenler, yosunlar gibi bazı bitki materyalleri ve ayrıca bitki yaprakları tarafından tespit edilmiştir. Son birkaç on yılda, çevredeki ağır metal kirliliğinin biyo-izlenmesi için çoğunlukla daha yüksek bitki yaprakları kullanılmıştır. ⁴²

E. angustifolia L., çok çeşitli coğrafi ve çevresel koşulları tolere edebildiği, hava ve toprak kaynaklı ağır metalleri ayırt edebildiği ve ayrıca kirleticileri belirlemek amacıyla kolayca örneklenebildiği için, o zaman bir tür olabilir . ağır metalleri taramak için bir biyo-monitör ajan olarak kullanılmak üzere iyi bir aday. ⁴² Artan sayıda endüstri ve su kaynaklarının ağır metaller tarafından kirletilmesiyle ilgili çevresel endişelerin yanı sıra, biyo-izleme ve toksinlerin sudan uzaklaştırılması kritik öneme sahiptir. İyon değişimi, pıhtılaşma, adsorpsiyon ve elektrokimyasal biriktirme gibi yöntemlerin çoğu çok maliyetlidir. Bu kirleticileri sulu çözeltilerden uzaklaştırmanın daha uygun maliyetli yolu, biyo-absorpsiyon yöntemi veya pirinç samanı, talaş, tütün tozu, portakal, elma veya havuç kalıntıları, hindistancevizi kabuğu tozu, hint yaprağı tozu gibi tarımsal atık maddelerin kullanılmasıdır. , vb. Adsorpsiyon yönteminde, adsorbat molekülleri, adsorban ve adsorbe edilen moleküller arasında denge sağlanana kadar adsorbanın yüzeyine çekilir. ⁴¹ Bir deneyde sulu çözeltide E. angustifolia L. meyve tozunun Cr (VI), Cd (II) ve Ni (II) adsorpsiyon potansiyeli incelendi ve sonuç, bu doğal Biyo-emicinin kirleticilerin giderilmesinde etkili olduğunu gösterdi. ve pH, emici dozaj ve temas süresine bağlıydı. ⁴¹

3.12. Azot fiksasyonu (biyo-gübre) aktivitesi
Sorunlu arazilere nitrojen bağlayıcı ağaç türlerinin dikilmesi veya bunların başka ürünlerle birlikte dikilmesi, besin kaynaklarını artırmanın ve bölgeye üretkenliği geri getirmenin yaygın bir yoludur. ⁴³ Tuza dayanıklı ve Orta Asya'ya özgü bir tür olan E. angustifolia L. uzun zamandan beri meyve, odun, nektar ve bal üretimi gibi birçok amaçla ve ayrıca tıbbi amaçlarla kullanılmaktadır. E. angustifolia L., özellikle sıkıntılı bölgelerde çok çeşitli iklim ve toprak koşullarında yetişebilir ve yayılabilir. ⁴³

Bir deneyde, E. angustifolia L.'nin nitrojen fiksasyon özelliği, birkaç fiksaj yapmayan bitki ile karışık bir plantasyonda tuzlu ve fosfor eksikliği olan toprak koşullarında incelenmiştir. Sonuç, her büyüme mevsimi ile toprakta nitrojen, organik karbon ve bitki tarafından sağlanan fosfor miktarının önemli ölçüde arttığını gösterdi. Toprak verimliliğindeki bu gelişme, türün bazı sıkıntılı arazilerde ağaçlandırma işlemine uygunluğunun göstergesidir. ⁴³

Git: 4. Yan etkiler
Çalışmaya göre, ekstrelerin yüksek dozlarının kullanılmasına rağmen insanlarda veya sıçanlarda büyüme gecikmesi veya anormalliklerin tetiklenmesi gibi zararlı yan etkiler gözlenmedi. ⁴⁴ E. angustifolia L.'nin polenleri üzerine yapılan bir çalışmaya ilişkin bir rapor, bu alerjenlerin solunmasının duyarlı bazı hastalarda burun tahrişi semptomlarına neden olabileceğini göstermektedir. ⁴⁵

Git: 5. Sonuç
E. angustifolia L. bitkisi ve özleri hakkında yapılan birçok çalışmanın raporları, bu bitkinin birçok yaygın semptom ve sorunun yanı sıra diğer bazı daha ciddi hastalıkların giderilmesi ve iyileştirilmesi için bir çare olarak geleneksel kullanımına bilimsel bir doğrulama sağlamıştır. Bitki özlerinin antioksidan, antimikrobiyal, antimutajenik ve birçok ciddi hastalıkta önleyici etki içerebilen diğer bazı terapötik özelliklere sahip olduğu gösterilmiştir. Ek olarak, sıkıntılı bölgelere iğde ağaçlarının dikilmesi, her büyüme mevsimi ile toprak besin maddelerinin arttığını ve sonuçta daha yüksek tarımsal üretimi göstermiştir. E. angustifolia'nın biyoaktif elementleri hakkında daha fazla araştırmaL., özellikleri, etkinlikleri ve bu bitkinin güvenliği faydalıdır ve gelecekte bu bitki kullanılarak farmasötik ve gıda ürünlerinin geliştirilmesinde dikkate alınabilir.

Git: Çıkar çatışması
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Git: Dipnotlar
Ulusal Tayvan Üniversitesi Gıda ve Biyomoleküller Merkezi'nin sorumluluğunda akran değerlendirmesi.
Garantör: Sorumlu yazar, sunumun garantörüdür.

Git: Referanslar
1. Sahan Y., Dündar AN, Aydın E. İğde ( Elaeagnus angustifolia L.) unu katkılı kurabiyelerin özellikleri : fizikokimyasal, duyusal ve tekstürel özellikler. J Agr Sci. 2013; 5 160. [ Google Akademik ]
2. Saboonchian F., Jamei R., Sarghein SH Elaeagnus angustifolia L.'nin (yaprak ve çiçek) fenolik ve flavonoid içeriği Avicenna J Phytomed. 2014; 4 :231. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
3. Fonia A., White IR, White JML Alerjik kontakt dermatit Elaeagnus bitkisine (İğde) Contact Derm. 2009; 60 :178–179. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
4. Kiseleva TI, Chindyaeva LN Menzilinin kuzeydoğu sınırındaki iğde biyolojisi ( Elaeagnus angustifolia L.). Contemp Probl Ecol. 2011; 4 :218–222. [ Google Akademik ]
5. Asadiar LS, Rahmani F., Siami A. Rus zeytininde ( Elaeagnus angustifolia ) genetik çeşitliliğin ISSR genetik belirteçlerine dayalı olarak değerlendirilmesi. Rahip Ciênc Agron. 2013; 44 :310–316. [ Google Akademik ]
6. Taheri JB, Anbari F., Maleki Z., Boostani S., Zarghi A., Pouralibaba F. Semptomatik oral liken planus tedavisinde Elaeagnus angustifolia topikal jelinin etkinliği. J Dent Res Dent Clin Dent Beklentileri. 2010; 4:29 . [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
7. Wang Y., Guo T., Li JY, Zhou SZ, Zhao P., Fan MT Elaeagnus angustifolia'nın hamurlarından elde edilen dört flavonoid glikozit ve bunların antioksidan aktiviteleri. Adv Mat Res. 2013; 756 :16–20. [ Google Akademik ]
8. Natanzi MM, Pasalar P., Kamalinejad M. Elaeagnus angustifolia meyvesinin sulu ekstraktının sıçanlarda deneysel kutanöz yara iyileşmesi üzerindeki etkisi. Açta Medica İran. 2012; 50 :589–596. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
9. Qureshi RA, Ghufran MA, Sultana KN, Ashraf M., Khan AG Gilgit bölgesi ve çevresindeki tıbbi bitkilerin etnobotanik çalışmaları. Ethnobot Res Uygulaması 2006; 5 :115–122. [ Google Akademik ]
10. Boudraa S., Hambaba L., Zidani S., Boudraa H. Cezayir'de yeterince tüketilmeyen beş türün meyvelerinin mineral ve vitamin bileşimi: Celtis australi s L., Crataegus azarolus L., Crataegus monogyna Jacq., Elaeagnus angustifolia L. ve Zizyphus lotus L. Meyveler. 2010; 65 :75–84. [ Google Akademik ]
11. Khan SU, Khan AU, Shah SM, Hussain S., Ayaz M., Ayaz S. Elaeagnus angustifolia'nın ağır metal içeriği, fitokimyasal bileşimi, antimikrobiyal ve böcek öldürücü değerlendirmesi . Toksikol End Sağlık. 2013 0748233713498459. [ PubMed ] [ Google Scholar ]
12. Cansev A., Sahan Y., Çelik G., Taşkesen S., Özbey H. Elaeagnus angustifolia L. meyvelerinin kimyasal özellikleri ve antioksidan kapasitesi. Asya J Chem. 2011; 23 :2661–2665. [ Google Akademik ]
13. Okmen G., Türkcan O. Elaeagnus angustifolia L. yapraklarının antimikrobiyal, antioksidan ve antimutajenik aktiviteleri üzerine bir araştırma. Afr J Geleneksel Tamamlayıcı Altern Med. 2013; 11 :116–120. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
14. Ayaz FA, Bertoft E. Ticari olarak depolanan iğde meyvelerinin şeker ve fenolik asit bileşimi. J Gıda Zorunlu Anal. 2001; 14 :505–511. [ Google Akademik ]
15. Zeng F., Wang W., Zhan Y., Xin Y. Yoğun tanenlerin üretimi için Elaeagnus angustifolia'nın kallus ve hücre süspansiyon kültürünün oluşturulması . Afr J Biotechnol. 2009:8. [ Google Akademik ]
16. Yıldırım İ., Gökçe Z., Yılmaz Ö. Eleagnus agnustifolia'nın biyokimyasal içeriğinin araştırılması . J Turk Chem Soc, Sect A Chem. 2015; 2 :34–41. [ Google Akademik ]
17. Sahan Y., Göçmen D., Cansev A. Soyulmuş ve soyulmamış iğde ( Elaeagnus angustifolia L.) unlarının kimyasal ve tekno-fonksiyonel özellikleri J Appl Bot Food Qual. 2015; 88 [ Google Akademik ]
18. Zhou S., Salisbury J., Preedy VR, Emery PW Kasta yara iyileşmesi sırasında kollajen sentezinde artış. PLoS Bir. 2013; 8 :e58324. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
19. Bigoniya R., Agrawal S., Verma NK Euphorbia hirta Linn'in potansiyel yara iyileştirme aktivitesi. toplam flavonoid fraksiyonu. Int J Pharm Sci Rev Arş. 2013; 22 :149–156. [ Google Akademik ]
20. Ponrasu T., Jamuna S., Mathew A. Sıçanlarda kutanöz yara iyileşmesi sırasında erken tepkiler üzerinde l-prolin uygulamasının etkinliği. Amino asitler. 2013; 45 :179–189. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
21. Mehrabani NM, Nejad SG, Kamalinejad M. Albino farelerde sulu Elaeagnus angustifolia ekstraktının kullanılmasının ardından histolojik değişiklikler ve yara iyileşme tepkisi . Klinik Biyokimya. 2011; 44 :S39. [ Google Akademik ]
22. Koca U., Süntar İ., Akkol EK, Yılmazer D., Alper M. Olea europaea L. yaprak ekstraktlarının in vivo deneysel modellerle ortaya çıkan yara onarım potansiyeli ve ekstraktların antioksidan aktivitelerinin karşılaştırmalı değerlendirmesi. J Med Gıda. 2011; 14 :140–146. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
23. Gürbüz İ Üstün O., Yeşilada E., Sezik E., Kutsal O. Türkiye'de halk ilacı olarak kullanılan bazı bitkilerin anti-ülserojenik aktivitesi. J Etnofarmakol. 2003; 88 :93–97. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
24. Mohammed FI, Al-Essa MK, Shafagoj YA, Afifi FU Elaeagnus angustifolia L.'nin (Elaeagnaceae) alkollü ekstraktının kobayın dağınık bağırsak düz kas hücreleri üzerindeki doğrudan etkilerinin araştırılması. Bilim Ecz. 2006; 74:21 . [ Google Akademik ]
25. Abizov EA, Tolkachev ON, Mal'tsev SD, Abizova EV Rusya'nın Avrupa kısmında tanıtılan Rus zeytininin ( Elaeagnus angustifolia ) meyvelerinden izole edilen biyolojik olarak aktif maddelerin bileşimi . Eczacı Kimya J. 2008; 42 :696–698. [ Google Akademik ]
26. Hosseinzadeh H., Ramezani M., Namjo N. Farelerde Elaeagnus angustifolia L. meyve tohumlarının kas gevşetici aktivitesi . J Etnofarmakol. 2003; 84 :275–278. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
27. Chen Q., Chen J., Du H. Elaeagnus angustifolia L. Int J Mol Sci. 2014; 15 :11446–11455. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
28. Wang B., Qu H., Ma J. Elaeagnus angustifolia yaprak ekstraktının izole edilmiş sıçan kalbinde miyokardiyal iskemi/reperfüzyon yaralanmasına karşı koruyucu etkileri. J Chem. 2014 [ Google Akademik ]
29. Dhalla NS, Elmoselhi AB, Hata T., Makino N. İskemi-reperfüzyon hasarında miyokardiyal antioksidanların durumu. Kardiyovasküler Res. 2000; 47 :446–456. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
30. Farahbakhsh S., Arbabian S., Emami F. Farelerde Elaeagnus angustifolia'nın sulu ekstraktı ile siklooksijenaz tip 1 ve 2 enziminin inhibisyonu . Temel Klinik Nörobilim. 2011; 2 :31–37. [ Google Akademik ]
31. Hosseinzadeh H., Taheri MR Farelerde Elaeagnus angustifolia meyvesinin antinosiseptif etkisi. Med J İslam Cumhuriyeti İran. 2000; 14 :77–81. [ Google Akademik ]
32. Rabiei K., Ghobadifar A., Ebrahimzadeh MA, Saeedi M., Mobini M. Semptomatik diz osteoartritinde zencefil ve Elaeagnus angustifolia özlerinin etkileri . Zahedan J Med Sci. 2015:29–33. [ Google Akademik ]
33. Ge Y., Liu J., Su D. Elaeagnus pungens yaprağından ekstrakt ve fraksiyonların anti-astımlı, öksürük önleyici ve balgam söktürücü aktivitelerinin in vivo değerlendirmesi . J Etnofarmakol. 2009; 126 :538–542. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
34. Tamtaji OR, Taghizadeh M., Takhtfiroozeh SM, Talaei SAR Elaeagnus angustifolia su ekstraktının sıçanlarda skopolamin kaynaklı hafıza bozukluğu üzerindeki etkisi . Zanjan Univ Med Sci J ZUMS J. 2014; 22 :101–111. [ Google Akademik ]
35. Liao CR, Kuo YH, Ho YL Elaeagnus oldhamii Maxim'in yapraklarından alınan sitotoksik bileşenler üzerine çalışmalar . küçük hücreli dışı akciğer kanseri A549 hücrelerinde. moleküller. 2014; 19 :9515–9534. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
36. Ya W., Shang-Zhen Z., Chun-Meng Z. Elaeagnus angustifolia L. Adv J Food Sci Technol. 2014; 6 :707–710. [ Google Akademik ]
37. Chan AT, Ogino S., Fuchs CS Aspirin ve COX-2 ekspresyonu ile ilgili olarak kolorektal kanser riski. N İngilizce J Med. 2007; 356 :2131–2142. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
38. Li LH, Baek IK, Kim JH Bir Kore tıbbi bitkisi olan Elaeagnus glabra'nın metanol özü , HT1080 tümör hücresi istilasını inhibe eder. Oncol Temsilcisi 2009; 21 :559–563. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
39. Badrhadad A., Kh Piri, Mansouri K. Elaeagnus angustifolia L. çiçeğinin ve Nepeta crispa L. arial kısmının hidroalkolik ekstraktından in vitro anti-anjiyojenik aktivite fraksiyonları . J Med Fabrikası Arş. 2012; 6 :4633–4639. [ Google Akademik ]
40. Dehghan MH, Soltani J., Kalantar E. Elaeagnus angustifolia'dan bir antimikrobiyal özütün karakterizasyonu . Int J Enteric Pathog. 2014; 2 :e20157. [ Google Akademik ]
41. Amiri MJ, Fadaei E., Baghvand A., Ezadkhasty Z. Ağır metallerin Cr (VI), Cd (II) ve Ni (II)'nin Elaeagnus angustifolia'nın biyoabsorbsiyonu ile sulu çözeltiden çıkarılması . Int J Environ Res. 2014; 8 :411–420. [ Google Akademik ]
42. Aksoy A., Şahin U. Elaeagnus angustifolia L. as a biomonitor of ağır metal kirliliği. Türk J Bot. 1999; 23 :83–88. [ Google Akademik ]
43. Khamzina A., Lamers JP, Vlek PL Orta Asya'nın bozulmuş tarım arazilerinin ıslahında Elaeagnus angustifolia tarafından nitrojen fiksasyonu. Ağaç Fiziği. 2009 tpp017. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
44. Malihezaman M., Mahbobe M., Maryam SL Zataria multiflora Boiss ve Elaeagnus angustifolia'nın sulu ekstraktlarının fare fetüsü midesinde ultrastrüktürel ve stereolojik çalışması. J Biol Sci. 2007; 7 :648–652. [ Google Akademik ]
45. Sastre J., Lluch-Bernal M., Bustillo AMG Rus zeytin poleni ( Eleagnus angustifolia ) Alerjisinin alerjenitesi ve çapraz reaktivitesi . 2004; 59 :1181–1186. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
46. Goyer RA, Clarkson TW Metallerin toksik etkileri. İçinde: Klaassen CD'si, editör. Casarett & Doull'un Toksikolojisi. Zehirlerin Temel Bilimi. 5. baskı McGraw-Hill Sağlık Meslekleri Bölümü; 1996. ISBN, 71054766. [ Google Akademik ]

[maturidi]

laeagnus angustifolia Bitki Özü , Üçlü-Negatif Meme Kanseri Hücrelerinde P53 ve Sinyal Transdüseri ve Transkripsiyon 3 Sinyal Yollarının Aktivatörü Yoluyla Apoptozu İndükler

Arij Fouzat , ¹ Ola Jihad Hussein , ¹ Ishita Gupta , ² Halema F. Al-Farsi , ² Ashraf Khalil , ¹ ve Ala-Eddin Al Moustafa ^{2 , 3 , *}
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri PMC Sorumluluk Reddi
¹ Eczacılık Fakültesi, QU Health, Katar Üniversitesi, Doha, Katar
² Tıp Fakültesi, QU Health, Katar Üniversitesi, Doha, Katar
³ Biyomedikal Araştırma Merkezi, Katar Üniversitesi, Doha, Katar
Sorumlu yazar.
Düzenleyen: Mostafa Waly, Sultan Qaboos Üniversitesi, Umman
İnceleyen: Varna Taranikanti, Oakland Üniversitesi William Beaumont Tıp Fakültesi, Amerika Birleşik Devletleri; Daniel Commane, Northumbria Üniversitesi, Birleşik Krallık; Muhammed Asif Hanif, Ziraat Üniversitesi, Faysalabad, Pakistan
*Yazışma: Ala-Eddin Al Moustafa, ac.lligcm@afatsuomla.nidde-ala , aq.ude.uq@afatsuomlaa
Bu makale, Frontiers in Nutrition dergisinin bir bölümü olan Nutritional Epidemiology'ye gönderilmiştir.

İlişkili Veriler
Veri Kullanılabilirliği Bildirimi
Git:

Soyut
Elaeagnus angustifolia ( EA ), Orta Doğu'da çok sayıda insan hastalığını tedavi etmek için alternatif bir ilaç olarak kullanılmaktadır. Yakın zamanda, EA çiçek özütünün hücre proliferasyonunu ve insan oral ve HER2-pozitif meme kanseri hücrelerinin istilasını engellediğini bildirdik . Bununla birlikte, EA ekstraktının üçlü negatif meme kanseri (TNBC) hücreleri üzerindeki sonucu henüz araştırılmamıştır. Burada sulu EA ekstraktının (100 ve 200 ul/ml) iki TNBC hücre hattı (MDA-MB-231 ve MDA-MB-436) üzerindeki etkisini 48 saat boyunca araştırıyoruz ve bunun altında yatan moleküler yolları araştırıyoruz . Verilerimiz, EA'nınekstrakt, hücre proliferasyonunu yaklaşık %50 oranında baskılar ve bu iki kanser hücresi hattının hücre döngüsü ilerlemesini değiştirir. Ek olarak, EA ekstraktı, proapoptotik belirteçlerin (Bax ve bölünmüş kaspaz-8) yukarı regülasyonu ve anti-apoptotik belirteç Bcl-2'nin aşağı regülasyonu ile birlikte %40-50 oranında hücre apoptozunu indükler. Ayrıca, EA ekstresi, eşleştirilmiş kontrollerine kıyasla koloni oluşumunu engeller. Daha da önemlisi, EA ile tedavi edilen hücrelerin moleküler yol analizi, EA'nınekstrakt, her iki hücre hattında da toplam ve fosforile Sinyal Transdüseri ve Transkripsiyon Aktivatörü 3'ün (STAT3) ekspresyonunu inhibe ederken p53 ekspresyonunu geliştirir; Bulgularımız, EA çiçek özünün TNBC'ye karşı bir antikanser ilacı olarak önemli bir potansiyele sahip olabileceğini düşündürmektedir.

Anahtar Kelimeler: Elaeagnus angustifolia , üçlü negatif meme kanseri, apoptoz, stat3, p53
Git: giriiş
Meme kanseri (MK), dünya çapında en yaygın kanserdir ve kadınlardaki tüm malignitelerin yaklaşık üçte birini oluşturan, kadınlarda yaygın olarak teşhis edilen bir malignitedir ( 1 ). Çeşitli genetik değişiklikler, morfolojik özellikler, klinik sonuç ve terapötik müdahaleler, BC'yi oldukça heterojen bir hastalık haline getirir. BC, yeterli prognostik ve öngörü gücü ile birlikte klinik fayda sağlamak için dört alt tipte (Luminal A, Luminal B, HER-2 pozitif ve üçlü negatif) sınıflandırılır ( 2 ). Dört alt tipten, üçlü negatif meme kanseri (TNBC), insan epidermal büyüme faktörü reseptörü-2'nin (HER-2) yokluğu veya zayıf ifadesi ile birlikte östrojen ve progesteron reseptörlerinin (ER, PR) ifadesinden yoksundur. TNBC, tüm meme kanseri vakalarının yaklaşık %12-20'sini oluşturur (3 , 4 ); insidans menopoz öncesi kadınlarda artar ve genç kadınlarda daha sıktır ( 4 , 5 ). TN tümörleri, diğer BC alt tiplerine kıyasla mevcut tedavilere kısa yanıt süresi, kötü prognoz ve hayatta kalma ile birlikte merkezi sinir sistemi, kemik, akciğer ve karaciğere erken metastaz ile agresif davranış ile karakterize edilir ( 6-8 ) . ER ve HER-2 pozitif BC'den farklı olarak, TNBC'ler endokrin ve moleküler hedefli tedavilere duyarsız oldukları için mevcut tedavilere oldukça dirençlidir; şu anda sistemik kemoterapi ve cerrahi, TNBC yönetiminin bel kemiğidir ( 6 , 9). Genel olarak, aşırı biyolojik heterojenliği nedeniyle TNBC'ye karşı yeni ajanlar geliştirmek ve değerlendirmek zordur. Bununla birlikte, üçlü negatif tümörler terapötik modalitelere dirençli hale gelir ve tekrar ortaya çıkabilir ve metastatik yetenekler geliştirebilir. Bu nedenle, daha az istenmeyen yan etkilerle etkili olan TNBC'ye karşı yeni potansiyel terapötik ajanların tanımlanmasına ve geliştirilmesine acil bir ihtiyaç vardır.

Kemoterapi ilaçlarına ek olarak birçok tamamlayıcı ve alternatif ilaç (CAM) büyük ölçüde doğadan ilham almaktadır, tıbbi tedaviler için doğal kaynak olarak çoğunlukla bitki bazlı fitokimyasallar kullanılmaktadır ( 10 , 11 ). Diyet fitokimyasalları, etkili ve koruyucu özelliklerinden dolayı kanser tedavisi için rekabetçi bir alternatif olma potansiyeline sahip, doğal olarak oluşan biyoaktif bileşiklerdir ( 10 , 12 ). Elaeagnus angustifolia ( EA ), dünyanın farklı yerlerinde, özellikle Orta Doğu bölgesinde yüzyıllardır folklor tıbbında kullanılan böyle bir tıbbi bitkidir ( 13 – 15 ). EAzengin bir vitamin, protein, kalsiyum, magnezyum, potasyum ve demir kaynağıdır; bu nedenle, EA'nın taze veya kurutulmuş farklı kısımları tüketilir ( 16 , 17 ). Aslında EA , antioksidan, antiinflamatuar, antimikrobiyal ve antikanser özellikleri nedeniyle astım, osteoporoz ve romatoid artrit gibi birçok hastalığı tedavi etmek için kullanılır ( 16 , 18 ). Bu bağlamda, EA'daki flavonoid, lignanoid ve bezenoid gibi biyoaktif bileşiklerin anti-tümör özelliklere sahip olabileceğini vurgulamak önemlidir ( 19 – 21 ). Bununla birlikte, EA'nın kanser önleyici rolünü araştıran verilerbirkaç çalışma ile sınırlıdır. Grubumuz daha önce EA ekstraktının Erk1/Erk2 sinyal yolları aracılığıyla insan ağız kanseri hücrelerinin hücre istilasını baskıladığını bildirmişti ( 22 ). Başka bir çalışma, hidroalkolik EA çiçeği özünün anjiyogenezi önemli ölçüde baskıladığını ortaya çıkardı ve bu da onun bir anti-kanser ilacı olma potansiyeline işaret ediyor ( 23 ). HER2-pozitif insan meme kanseri hücreleri üzerine yakın tarihli araştırmamız, EA sulu ekstraktının hücre proliferasyonunu önemli ölçüde engellediğine ve hem HER2 hem de JNK aktivasyonunu baskılayarak apoptozu tetiklediğine işaret etti ( 24 ). Bununla birlikte, EA'nın sonucunu açıklayan hiçbir çalışma yoktur.TNBC'ye ve bunun altında yatan moleküler mekanizmalara karşı ekstrakte edin. Bu nedenle, burada EA çiçeği ekstraktının TNBC hücreleri ve mekanizması üzerindeki potansiyel terapötik ve anti-tümör özelliklerini araştırmayı amaçladık .

Bu araştırmada, EA ekstraktının iki insan TNBC hücre hattında hücre proliferasyonu, hücre döngüsü ilerlemesi, apoptoz ve koloni oluşumu üzerindeki etkisini inceledik . Çalışmamız, EA'nın, p53 ve Stat sinyal yolları yoluyla meydana gelen TNBC hücrelerinde dramatik hücre apoptozunu indüklediğini ortaya koydu .

Git: Malzemeler ve yöntemler
Bitki Materyalinin Toplanması ve Ekstraksiyonu
Elaeagnus angustifolia çiçekleri Haziran ayında Montreal, Quebec, Kanada'dan toplandı ve sulu ekstrakt daha önce grubumuz tarafından tarif edildiği gibi hazırlandı ( 24 ). Kısaca çiçekler kurutuldu ve oda sıcaklığında karanlıkta saklandı. Ekstrakt hazırlamak için 3 gram kurutulmuş EA çiçeği 100 ml otoklavlanmış distile suda 100°C'de 15 dakika kaynatıldı ve sürekli karıştırıldı. Kaynatmanın ardından, EA çiçek özü solüsyonu steril bir filtre ünitesi (0.45 um gözenek boyutu) kullanılarak filtrelendi ve ileride deneysel kullanım için 4°C'de saklandı. EA ekstraktlarının dilüsyonları, hücre kültürü ortamında hazırlandı ve her bir deney seti için ekstrakt taze olarak hazırlandı.

Hücre kültürü
İki farklı insan TNBC hücre çizgisi (MDA-MB-231 ve MDA-MB-436) ve tümörijenik olmayan epitel hücre çizgisi (MCF 10A), American Type Culture Collection'dan (ATCC) (Rockville, MD, Amerika Birleşik Devletleri) ticari olarak elde edildi. ). Hücre çizgileri, %10 fetal sığır serumu (FBS, Gibco, Life Technologies, Massachusetts, MA, Amerika Birleşik Devletleri) ile desteklenmiş Dulbecco's Modified Eagle's Media-yüksek glukozda (DMEM, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Amerika Birleşik Devletleri) kültürlendi. ), 10 mM esansiyel olmayan amino asitler (Gibco, Life Technologies, Massachusetts, MA, Amerika Birleşik Devletleri), 0,5 mM sodyum piruvat (Gibco, Life Technologies, Massachusetts, MA, Amerika Birleşik Devletleri), 2,5 mM L-glutamin (Gibco, Life Technologies, Massachusetts, MA, Amerika Birleşik Devletleri), 37 ^o'da %1 antibiyotik (penisilin-streptomisin, Gibco, Life Technologies, Massachusetts, MA, Amerika Birleşik Devletleri)%5 CO ₂ ve %85 nem ile C. Tüm deneyler, hücreler %70-80 birleşmeye ulaştığında gerçekleştirildi.

Hücre Canlılığı
TNBC hücre hatları (MDA-MB-231 ve MDA-MB-436) ve habis olmayan göğüs epitel hücre hattı (MCF 10A), oyuk başına 1 x 104 hücre yoğunluğuna sahip 96 oyuklu plakalara ekildi ^. Hücreler, yukarıda tarif edildiği gibi DMEM ortamında büyütüldü. MDA-MB-231, MDA-MB-436 ve MCF 10A hücreleri , 48 saat boyunca farklı konsantrasyonlarda (25, 50, 75, 100, 150 ve 200 ul/ml) EA ekstresi çözeltisi ile muamele edildi. İşlenmemiş hücreler kontrol olarak kullanıldı ve 100 ul ortam içinde kültürlendi. EA'nın etkisini belirlemek için AlamarBlue™ hücre canlılığı testi (Invitrogen, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, Amerika Birleşik Devletleri) kullanıldı.üreticinin protokolüne göre hücre çoğalmasını özütleyin. Hücreleri boya ile 4 saat inkübe ettikten sonra, flüoresanstaki kayma, bir flüoresan plaka okuyucu (Infinite M200, Tecan, Grödig, Avusturya) kullanılarak iki dalga boyunda, 570 nm'de eksitasyon dalga boyunda ve 590 nm'de emisyon dalga boyunda ölçüldü. Hücre canlılığının yüzdesi, işlenmiş hücrelerin işlenmemiş hücrelere floresansı temel alınarak hesaplandı.

Hücre Morfolojisi Analizi
^{İki TNBC hücre çizgisi (MDA-MB-231 ve MDA-MB-436) ve MCF 10A hücreleri, 24 saat boyunca 6 oyuklu plakalara (2.5 x 105} hücre/oyuk) ekildi. Daha sonra eski ortam atıldı ve hücreler, 48 saat boyunca yarı maksimum inhibe edici konsantrasyonda (IC50 ₎ EA ekstresi (100 ve 200 ul/ml) ile muamele edildi. Hücre morfolojisi, 24 ve 48 saat sonra 10X büyütmeli bir ışık mikroskobu kullanılarak incelendi. EA tedavisinin etkisi altında hücre morfolojisindeki değişiklikler, Leica DFC550 dijital kamera (Leica Microsystems, Wetzlar, Almanya) ile 12.5 Megapiksel çözünürlükte hücrelerin görüntüleri alınarak analiz edildi.

Hücre Döngüsü Analizi
Hücre döngüsü analizi için, TNBC hücrelerinin toplam 1 x 106 ^hücresi 24 saat boyunca 100 mm Petri kaplarına ekilmiştir. Hücreleri G0 fazına senkronize etmek için tohumlanmış hücreler, gece boyunca serumsuz DMEM ortamı ile aç bırakıldı. Senkronize hücreler, 48 saat boyunca EA sulu özü (100 ve 200 ul/ml) ile işlendi . Tedavi sonrası hücreler, buz gibi soğuk %70 etanol ile sabitlendi. DNA daha sonra, üreticinin tavsiyelerine göre 50 ug/ml'de FXCycle PI/RNase boyama solüsyonu (Invitrogen, Thermo Fisher Scientific) kullanılarak boyandı. G0/G1, S ve G2/M fazlarındaki hücreler, Flow Jo yazılımı kullanılarak ölçüldü.

Annexin V Apoptoz Testi
Hücresel apoptoz, üreticinin protokolüne göre ApoScreen ^® Annexin V-floresein izotiyosiyanat (FITC)/7-amino-aktinomisin D (7-AAD) Apoptosis Kiti (SouthernBiotech, Amerika Birleşik Devletleri) ile değerlendirildi . ^{Kısaca, TNBC hücreleri, 1 x 106} hücre/tabak yoğunluğunda 100 mm Petri kaplarına ekildi ve gece boyunca inkübe edildi. Ertesi gün, hücreler EA ile muamele edildi.48 saat boyunca 100 ve 200 ul/ml konsantrasyonda ekstrakte edin. Yapışkan ve yüzen hücreler, trypsinization ile toplandı, iki kez soğuk PBS ile yıkandı ve Annexin Bağlama Tamponunda yeniden süspanse edildi, ardından konjuge Annexin V-FITC, PI veya her iki lekeyle 15 dakika süreyle boyandı. Boyamadan sonra örnekler BD FACSAria™ II Flow Cytometer ve Flow Jo yazılımı ile analiz edildi. Enkaz hariç hücre popülasyonu, ileri dağılım (FSC-A) ve yan dağılım (SSC-A) ile kapılandı. Çiftler, FSC-yüksekliği ve FSC-Genişliği çizimi kullanılarak dışlandı ve ardından tekli hücreler, PerCP-Cy5.5-A'ya (7-AAD) karşı FITC-A'nın (annexinV) nokta çizimleri olarak sunuldu. Canlı hücrelerin (annexin V düşük, 7-AAD düşük), erken proapoptotik hücrelerin (annexin V yüksek, 7-AAD düşük) ve geç apoptoz/nekrotik hücrelerin (annexin V yüksek, 7-) yüzdesini hesaplamak için Quad Gates kullanıldı. AAD yüksek).

Yumuşak Agar Koloni Oluşumu Deneyi
TNBC hücrelerinin ankrajdan bağımsız bir şekilde büyüme kabiliyetini araştırmak için, daha önce grubumuz tarafından tarif edildiği gibi yumuşak agar koloni oluşumu deneyi yapıldı ( 25 ). Kısaca, TNBC hücreleri , %0.3 agar içeren DMEM ortamına yerleştirilen 100 ve 200 ul/ml EA ekstresi (sırasıyla işlenmiş/kontrol) içeren/olmayan 6 oyuklu plakalara (1 x 104 hücre/oyuk) ekildi ^ve üzerine kaplandı. %10 FBS içeren ve %0.4 agar içeren bir DMEM ortamı tabakası. Büyüyen koloniler 3 hafta boyunca 2 günde bir incelendi. Her kuyudaki koloniler, önceden belirlenmiş beş alanda bir ışık mikroskobu, Leica SP8 UV/Görünür Lazer konfokal mikroskop (Leica Microsystems, Wetzlar, Almanya) altında sayıldı.

Western Blot Analizi
İmmunoblotlama analizi, daha önce grubumuz tarafından tarif edildiği gibi yapıldı ( 20 , 25 ). Kısaca, toplam 1 x 106 ^TNBC hücresi (MDA-MB-231 ve MDA-MB-436) Petri kaplarına ekildi ve sulu EA özütü ile işlendi.çiçekler (100 ve 200 ul/ml) 48 saat. Protein lizatları, kontrol ve işlenmiş hücrelerden ekstre edildi. Daha sonra, eşit miktarlarda protein, %10 poliakrilamid jeller üzerinde çalıştırıldı ve PVDF membranlarına aktarıldı. Membranlar, aşağıdaki birincil antikorlarla gece boyunca inkübe edildi; fare anti-Bax (ThermoFisher Scientific: MA5-14003), fare anti-Bcl-2 (Abcam: abID# ab692), fare anti-bölünmüş kaspaz-8 (Cell Signaling Technology, CST: mAb #9748), tavşan anti-p53 (Hücre Sinyal Teknolojisi, CST: mAb #2527), fare anti-Sinyal Dönüştürücü ve Transkripsiyon 3 Aktivatörü (STAT3) (Hücre Sinyal Teknolojisi, CST: mAb #9139) ve tavşan anti-fosforile-STAT3 (Hücre Sinyal Teknolojisi, CST: mAb #9131). Proteinlerin eşit şekilde yüklendiğini doğrulamak için PVDF zarları, tavşan anti-GAPDH (Abcam: abID# ab9485) ile yeniden incelendi. Primer antikor boyama sonrası,

Üretici tarafından tarif edildiği gibi immünoreaktiviteyi saptamak için kemilüminesans ECL-Western lekeleme substrat kiti (Pierce Biotechnology, Waltham, MA, Amerika Birleşik Devletleri) kullanıldı. Niceleme, ImageJ yazılımı tarafından gerçekleştirildi ve bantların yoğunlukları, her hücre hattındaki nispi protein ekspresyonunu belirlemek için GAPDH'ye normalleştirildi.

İstatistiksel analiz
Tüm deneyler, IBM Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) sürüm 27 yazılımı kullanılarak analiz edildi. EA ile tedavi edilen ve edilmeyen hücreler arasındaki farkı analiz etmek için tek yönlü ANOVA testi ve ardından Tukey çoklu karşılaştırma testi yapıldı. Veriler, üç bağımsız deneyden elde edilen ortalama ± SEM olarak sunuldu ( n = 3). P-değerleri <0.05 anlamlı kabul edildi.

Git: Sonuçlar
EA çiçeklerinin sulu ekstraktının TNBC üzerindeki antikanser aktivitesini belirlemek için, iki hücre dizisi, MDA-MB-231 ve MDA-MB-436, farklı konsantrasyonlarda (0, 25, 50, 75, 100) EA ekstraktı ile muamele edildi. , 150 ve 200 ul/ml) 48 saat. Verilerimiz, EA ekstraktının her iki hücre hattının çoğalmasını doza bağlı bir şekilde önemli ölçüde engellediğini gösterdi (Şekil 1A,B). Daha spesifik olarak, 100 ve 200 ul/ml ile tedavi, MDA-MB-231 hücrelerinin proliferasyonunu sırasıyla %30 ve %55 inhibe ederken, MDA-MB-436 hücreleri için proliferasyon sırasıyla %40 ve %50 azaldı. Özellikle, EA ekstraktının 100 ve 200 µl/ml konsantrasyonlarının tümörijenik olmayan epitel hücre hattı MCF 10A'nın hücre canlılığı üzerinde anlamlı bir etkisinin olmadığını bulduk (Şekil 1C) ve dolayısıyla her iki TNBC hücre hattında ileri araştırmalar için 100 ve 200 ul/ml konsantrasyonları seçildi.


ŞEKİL 1
EA çiçeklerinin farklı konsantrasyonlarda ekstraktının TNBC hücre çizgileri (A) MDA-MB-231, (B) MDA-MB-436 ve (C) tümörijenik olmayan hücre çizgisi, MCF 10A'nın 48 saat sonra hücre canlılığı üzerindeki etkisi tedavi Veriler, her iki TNBC hücre hattında tedavi konsantrasyonları ile hücre canlılığı arasında ters bir ilişki olduğunu gösterirken, MCF 10A hücrelerinin canlılığı etkilenmemiştir. Veriler, kontrole göre büyüme yüzdesi olarak ifade edilir (ortalama ± SEM; n = 3). Tedavi gruplarını karşılaştırmak için tek yönlü ANOVA ve ardından Tukey'nin post hoc testi kullanıldı ve kontrol grubuyla karşılaştırıldığında p < 0.05 olduğunda sonuçlar istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. *** p < 0.001.

Daha sonra, faz kontrast mikroskobu kullanılarak 100 ve 200 µl/ml EA özütünün etkisi altında MDA-MB-231, MDA-MB-436 ve MCF 10A'nın hücre morfolojisini inceledik. Da gösterildiği gibişekil 2, işlenmemiş TNBC hücreleri (kontrol), MDA-MB-231 ve MDA-MB-436, yüksek oranda birleşmişti ve fibroblast benzeri fenotip sergiliyordu. Bununla birlikte, 100 ul/ml EA ekstraktı ile muameleden sonra , TNBC hücreleri şekillerini kaybetmeye başladı ve deformasyon, zar bütünlüğünün kaybı, temas inhibisyonu, hücre büzülmesi ve apoptotik cisimlerin oluşumu dahil olmak üzere çeşitli morfolojik değişikliklere uğradı. Daha yüksek EA konsantrasyonunda (200 ul/ml), morfolojik değişiklikler, ayrılan hücrelerde derin bir artış ve canlı hücrelerin sayısında azalma ile daha belirgin hale gelir ve TNBC'de hücre ölümüne işaret eder. Aksine, bu etki, aşağıda gösterildiği gibi tümörijenik olmayan hücre dizisi MCF 10A'da gözlenmedi.şekil 2.


ŞEKİL 2
EA özütünün MDA-MB-231, MDA-MB-436 ve MCF 10A'nın hücre morfolojisi üzerindeki etkisi. Sitotoksik etki göstermeyen ve sağlıklı bir fibroblast benzeri fenotip hücresi sergileyen tedavi edilmemiş (kontrol) ile karşılaştırıldığında, 100 ve 200 ul/ml EA ekstraktı ile 48 saat boyunca yapılan tedavinin, hücre çoğalmasını engellediğini ve her iki hücre hattında da ölümü indüklediğini not ettik . Görüntüler 10x büyütmede alınmıştır.

Daha sonra, EA'nın TNBC hücrelerinin hücre döngüsü ilerlemesi üzerindeki etkisi, akış sitometrik aracı kullanılarak araştırıldı. Da gösterildiği gibiFigür 3, verilerimiz, 100 ve 200 µl/ml konsantrasyonlardaki EA ekstraktının, her iki TNBC hücre hattının G0/G1 ve G2/M fazlarında dikkate değer bir düşüşle, hücre- EA ekstraktının etkisi altında döngü ilerlemesi .


FİGÜR 3
TNBC hücre hatları, (A) MDA-MB-231 ve (B) MDA-MB-436'nın hücre döngüsü akış sitometrisi analizi. Hücreler, 48 saat boyunca 100 ve 200 ul / ml EA ekstresi ile muamele edildi, ardından propidyum iyodür (PI) ile boyandı. Eşleştirilmiş kontrollerine kıyasla EA ekstraktı ile işleme tabi tutulduktan sonra test edilen hücre hatlarında alt G0, G0\G1, S ve G2/M aşamalarını gösteren temsili DNA içeriği histogramı . Hücre döngüsü histogram sonuçları, bu konsantrasyonlarda EA ekstraktının, G0/G1 ve G2/M fazlarında kayda değer bir düşüşle birlikte S fazında önemli bir hücre döngüsü durmasını indüklediğini ortaya koymaktadır. Niceleme, ortalama ± SEM ( n = 3) olarak temsil edilir. Tek yönlü ANOVA ve ardından Tukey'nin post hoc'utedavi gruplarını karşılaştırmak için test kullanıldı ve p < 0.05 olduğunda istatistiksel anlamlılık gösterildi . * p < 0,05, ** p < 0,01 ve *** p < 0,001.

EA ekstraktının hücre apoptozu üzerindeki etkisini daha fazla değerlendirmek için Annexin V-FITC/7-AAD testi yaptık. Verilerimiz, EA ekstraktının her iki TNBC hücre hattında doza bağlı bir şekilde erken ve geç apoptozu önemli ölçüde indüklediğini ortaya koymaktadır (Şekil 4).

ŞEKİL 4
(A) MDA-MB-231 ve (B) MDA-MB-436 hücrelerinde EA ekstraktı ile apoptozun uyarılması , Annexin V-FITC ve 7-AAD apoptoz tahlili ile belirlendiği gibi. Hücreler , 48 saat boyunca 100 ve 200 ul/ml EA ekstresi ile muamele edildi . Veriler Ortalama ± SEM ( N = 3) olarak sunulur . Sonuçlar, Tek yönlü ANOVA ve ardından Dunnett'in post hoc testi kullanılarak analiz edildi. İstatistiksel anlamlılık için p < 0.05 kabul edildi. * p < 0,05 ve ** p < 0,01.

Ardından, EA ekstraktının (100 ve 200 μl/ml konsantrasyonlar) 4 haftalık bir süre boyunca yumuşak agarda TNBC hücre hatlarının koloni oluşumu üzerindeki etkisini araştırdık . Verilerimiz , aşağıda gösterildiği gibi, kontrole kıyasla EA ekstraktının etkisi altında her iki TNBC hücre hattı için koloni sayısında önemli bir azalma gösterdi.Şekil 5. EA ekstresi, MDA-MB-231 koloni oluşumunu sırasıyla 100 ve 200 µl/ml EA ekstraktında %62 ve %94 oranında inhibe etti. Öte yandan, MDA-MB-436 hücrelerinde oluşan koloni sayısı , kontrole kıyasla sırasıyla 100 ve 200 µl/ml EA ekstraktında %96 ve %99 oranında azaldı . Bu sonuçlar, EA ekstraktı ile muameleden sonra her iki TNBC hücre hattında koloni oluşturma kabiliyetinin kaybolduğunu kanıtlamaktadır ; bu, in vivo olarak tümörijenezi inhibe etme kabiliyetini yansıtabilir .


ŞEKİL 5
EA ekstraktının yumuşak agarda, insan TNBC hücre hatlarında (A) MDA-MB-231 ve (B) MDA-MB-436'da koloni oluşumu üzerindeki etkisi. EA ekstresi, eşleşen kontrol hücrelerine kıyasla MDA-MB-231 ve MDA-MB-436'nın koloni oluşumunu engeller. Görüntüler 10x büyütmede alınmıştır. Koloniler manuel olarak sayıldı ve kontrole göre tedavi yüzdesi olarak ifade edildi (ortalama ± SEM; n = 3). *** p < 0.001.

EA ekstraktının apoptoz üzerindeki rolünü daha fazla doğrulamak için , 100 ve 200 ul/ml ile 48 saatlik tedavinin ardından TNBC hücrelerinde (MDA-MB-231 ve MDA-MB-436) apoptozun anahtar belirteçlerinin ekspresyon modellerini inceledik. Western blot analizi kullanılarak EA özü. Verilerimiz, EA ile tedavi edilen hücrelerde proapoptotik belirteçlerin (Bax ve bölünmüş kaspaz-8) ifadesinde, kontrole kıyasla, gösterildiği gibi önemli bir artış ortaya koydu.Şekil 6. Öte yandan, anti-apoptotik proteinin (Bcl-2) ekspresyonu her iki hücre hattında da azaldı. Paralel olarak, Bax/Bcl-2 oranı , görüldüğü gibi, EA ekstraktı ile tedavi edilen hücrelerde derinden arttı.Şekil 6. Birlikte ele alındığında, bu bulgular, EA ekstraktının, Bcl-2/Bax/kaspaz sinyal yolunun deregülasyonu ile ilişkili olan TNBC hücrelerinde apoptozu indükleyebildiğine dair kanıt sağlar.




ŞEKİL 6
(A) MDA-MB-231 ve (B) MDA-MB-436 hücre hatlarında Bax, BCL-2, Caspase-8, P53 ve STAT3'ün ifade modellerinde EA özütünün sonucu . EA ekstraktının, kontrollerine kıyasla proapoptotik belirteçlerin (Bax ve Caspase-8) aşırı ekspresyonunu indüklediğini, anti-apoptotik işaretleyici Bcl-2'nin inhibe edildiğini not ettik . Ayrıca, EA bitki özü, STAT3'ün fosforilasyonunu inhibe ederken p53'ün ifadesini arttırır. GAPDH, bu tahlilde bir kontrol olarak görev yaptı. Hücreler, 100 ve 200 ul / ml EA ile muamele edildiMalzemeler ve yöntemler bölümünde açıklandığı gibi 48 saat ekstrakte edin. Değerler temizlik proteini GAPDH'nin ifadesi için düzeltildi ve kontrolün kat değişimi olarak sunuldu. Veriler, Tek yönlü ANOVA ve ardından Dunnett'in post hoc testi kullanılarak analiz edildi. * P-değeri < 0,05 , istatistiksel anlamlılık için kabul edildi. *p < 0,05, **p < 0,01 ve ***p < 0,001. Veriler, kontrole göre tedavinin yüzdesi olarak sunulur (Ortalama ± SEM; n = 3).

EA ekstraktının hücre canlılığı, apoptoz ve TNBC hücrelerinin koloni oluşumunun inhibisyonu üzerindeki altta yatan moleküler yolları ile ilgili olarak , TNBC'lerde yaygın olarak değiştirilen p53 ve STAT3'ün ( 26 , 27 ), düzenlenmesinde hayati bir rol oynayabileceğini varsayıyoruz. EA ekstraktının etkisi altındaki bu biyolojik olaylar . Bu nedenle, EA ekstraktına maruz bırakılan MDA-MB-231 ve MDA-MB-436 hücre hatlarında p53, STAT3 ve p-STAT-3'ün ifade modelini, eşleştirilmiş (işlenmemiş hücreler) kontrolleriyle karşılaştırarak değerlendirdik. EA ekstraktı ile yapılan tedavinin, p53'ün ekspresyon modelini uyardığını, oysa EA'nınekstrakt, kontrol hücrelerine kıyasla her iki hücre hattında STAT3'ün ekspresyonunu ve fosforilasyonunu inhibe eder.

Git: Tartışma
Doğal ürünlerin, kanser de dahil olmak üzere çeşitli insan hastalıkları için önemli ve zengin bir terapi kaynağı olduğu sürekli olarak kanıtlanmıştır ( 10 , 11 ). Bu çalışmada, EA çiçeği ekstraktının TNBC hücre hatlarında (MDA-MB-231 ve MDA-MB-436) hücre proliferasyonu, morfolojik değişiklikler, hücre döngüsü ve apoptoz ile ilgili etkisini ilk kez araştırdık. altta yatan moleküler yollar. Burada EA'yı rapor ediyoruzekstrakt, tümörijenik olmayan epitelyal hücre dizisi MCF 10A'nın büyümesi üzerinde minimal bir etkiye sahipken, TNBC hücre dizilerinin hücre apoptozunun indüklenmesine ek olarak hücre proliferasyonunu inhibe edebilir, normal morfolojiyi değiştirebilir ve hücre döngüsü ilerlemesini serbest bırakabilir. Ayrıca, EA çiçeğinin sulu ekstraktının, in vivo tümör inhibisyonu ile ilişkili olan TNBC hücrelerinin koloni oluşumunu inhibe edebildiğini not ettik . Laboratuvarımızda, EA ekstraktının , kolorektal kanser geliştirmeye yatkın olan hem vahşi tip hem de K-RAS mutantı Drosophila melanogaster sineklerinin hayatta kalma oranını önemli ölçüde artırdığını da bulduk. Bu in vivo veriler açıkça göstermektedir ki EAekstrakt, kolorektal kanser büyümesini engelleyebilir, bu da EA ekstraktının (hazırlanıyor) anti-kanser rolünü gösterir.

Elaeagnus angustifolia bitkisi geleneksel olarak analjezik, ateş düşürücü, iltihap önleyici, antioksidan ve idrar söktürücü bitkisel ilaç olarak yüzyıllardır kullanılmaktadır ( 13 – 15 , 28 ). Ayrıca, EA'da kanser gelişimini ve ilerlemesini önlemede rol oynadığı düşünülen fenolik asitler ve flavonoidler gibi birkaç biyoaktif bileşik tanımlanmıştır ( 18 , 20 ). Çalışmalar, bu bileşiklerin DNA onarımı, hücre döngüsü ilerlemesi, apoptoz indüksiyonu ve hücre sinyal kaskadları gibi çoklu hücresel süreçleri düzenleyebildiğini göstermiştir ( 29 , 30) .). Son zamanlarda, kemo-önleyici ve/veya antikanser ajanlar olarak potansiyel terapötik kullanımlarına büyük ilgi duyulmaktadır. Bununla birlikte, bildiğimiz kadarıyla, bu şifalı bitkinin TNBC üzerindeki etkisi daha önce araştırılmamıştır. Bu nedenle, bu çalışmada EA'nın TNBC'deki sitotoksik potansiyelini değerlendirdik . Özellikle, çeşitli kültürlerde ve özellikle Ortadoğu'da yaygın olarak çay içeceği olarak tüketilen EA çiçekleri kaynatma yoluyla ekstrakte edilmiş ve EA çiçeklerinin diyet alımının TNBC üzerindeki sonucunu incelemek için TNBC hücre hatlarında test edilmiştir ( 31 ).

Öte yandan, kontrolsüz hücre çoğalması ve apoptozdan kaçma, kanserin iyi bilinen ayırt edici özellikleri ve tedavi direncinin hayati bileşenleridir; bu nedenle, ilişkili düzensiz yolakları hedeflemek, ana kanser terapötik aracı olarak kabul edilir ( 32 , 33 ). Verilerimiz, EA bitki özütünün TNBC hücrelerinin hücre proliferasyonunu inhibe ettiğini, bu arada proapoptotik proteinlerin (Bax, bölünmüş kaspaz-8) yukarı regülasyonu ve anti-apoptotik proteinin (Bcl) aşağı regülasyonu ile birlikte TNBC hücre modellerimizde hücre apoptozunu kışkırttığını ortaya koymaktadır. -2). İlginç bir şekilde, tümörijenik olmayan hücrelere ilişkin verilerimiz, EA'nınekstraktın kontrol hücre dizisi MCF10'da çok az toksik etkisi vardır veya hiç toksik etkisi yoktur, bu da meme kanseri hücrelerinde antikanser ajanların geliştirilmesinde olumlu bir özellik olan seçici bir sitotoksik aktivite olduğunu düşündürür. Bu bulgular, EA'nın insan oral ve HER2 + göğüs kanseri hücrelerine karşı antikanser potansiyeli hakkındaki son raporlarımızla uyumludur ( 22 , 24 ). İlginç bir şekilde, oral ve HER2+ hücrelerinde tümörün ilerlemesini önleyen altta yatan moleküler mekanizmalar, farklı yolları hedef aldı. Oral kanser hücrelerinde EA, anjiyogenezi ve Erk1/Erk2 sinyal yolları yoluyla hücre istilasını inhibe etti ( 22 ). Öte yandan HER2+ hücrelerinde EA bulduk.epitelyal-mezenkimal geçişi inhibe etmek ve HER2 inaktivasyonu ve JNK yolu yoluyla apoptozu tetiklemek ( 24 ).

Altta yatan moleküler yolun analizi, EA ekstraktının, en azından kısmen tümör baskılayıcı gen p53'ün yukarı regülasyonu ve STAT3 sinyalinin eşlik eden baskılanması yoluyla aracılık edilebilecek apoptozu kışkırttığını ortaya koymaktadır. P53, Bax, Bid, Noxa ve Puma gibi Bcl-2 ailesinin proapoptotik üyelerinin transkripsiyonunu kontrol ederek apoptoz indüksiyonuna neden olur ( 34 , 35 ). Böylece tümör baskılayıcı gen p53'ün ifadesini analiz ettik. Özellikle, EA'nınekstrakt, p53'ün ifadesini ve aşağı akış sinyalini (Bax) önemli ölçüde yukarı doğru düzenler. Öte yandan, STAT3 onkojenik potansiyele sahiptir ve kanser hücresi proliferasyonu, anti-apoptoz, migrasyon, invazyon, immün baskılama, köklenme ve kemoterapi direncine katkıda bulunur ( 26 , 36 , 37 ). Son kanıtlar, STAT3'ün aşırı eksprese edildiğini ve TNBC'nin başlaması, ilerlemesi ve metastazı ile ilişkili olan TNBC'de yapısal olarak aktive olduğunu göstermiştir ( 26 , 38) .). STAT3'ün onkojenik potansiyeli, STAT3'ün homo- veya hetero-dimerizasyonu ve ardından nükleer translokasyon, STAT3'ü spesifik DNA yanıt elemanlarına bağlama ve hedef genleri aktive etme ile sonuçlanan Tyr705 üzerindeki fosforilasyonu ile tetiklenir (39 – 41 ) . STAT3, proliferasyon düzenleyici proteinler (siklin D1 ve survivin) ve anti-apoptotik proteinler (Bcl-2 ve Bcl-xl) dahil olmak üzere birçok proteinin ekspresyonunu düzenler ( 41 – 43). İlginç bir şekilde, verilerimiz EA ekstraktının STAT3, fosfo-STAT3'ün ekspresyonunu ve ayrıca anti-apoptotik protein Bcl-2 dahil olmak üzere hedef genlerini inhibe ettiğini göstermektedir. Bu bulgular, Annexin-V boyaması ile kanıtlandığı gibi artan sayıda apoptotik hücreye yol açan kaspaz-3 ve kaspaz-8 birikimi ile belirtildiği gibi artan apoptoz ile ilişkilendirildi. Birlikte ele alındığında, bu sonuçlar, EA ekstraktının neden olduğu apoptoza STAT3'e bağlı mekanizma aracılığıyla aracılık edilebileceğini göstermektedir.

İlginç bir şekilde, STAT3 ve p53'ün karşıt rollere sahip olduğu göz önüne alındığında, burada p53 apoptotik yolu teşvik eder ve STAT3'ün aktivasyonu hayatta kalma sinyallerini yukarı doğru düzenler; p53 ve STAT3'ün birbirlerini negatif olarak düzenledikleri bir etkileşime girdikleri gösterilmiştir ( 44 , 45 ). Birçok çalışma, kanser hücrelerinde STAT3 aktivitesinin bloke edilmesinin, p53 ekspresyonunu teşvik ettiğini ve bunun da p53 aracılı hücre apoptozu ile sonuçlandığını göstermiştir ( 45 , 46 ). Daha spesifik olarak, Lin ve ark. vahşi tip p53'ün ekspresyonunun, ancak mutant p53'ün ekspresyonunun önemli ölçüde STAT3'ün tirozin fosforilasyonunu azalttığını ve DU145 prostat kanseri hücre hattında STAT3 DNA bağlanmasını inhibe ettiğini bildirdi ( 47). Ayrıca, birkaç çalışma STAT3 aktivasyonu ve p53 mutasyonları ile kanserde terapi direnci arasında bir ilişki olduğunu göstermiştir ( 45 , 48 , 49 ). Bu nedenle, p53 ve STAT3'ün ikili hedeflemesi, terapi direncinin üstesinden gelmek için umut verici bir yaklaşım olabilir. Toplu olarak, verilerimiz, EA'nın STAT3 sinyalini düşürürken aynı anda p53'ü yukarı regüle edebileceğini ortaya koyuyor, bu da bunun TNBC'de potansiyel etkili bir tedavi olarak hizmet edebileceğini öne sürüyor. Gelecekteki çalışmalar, EA ekstraktının fitokimyasal bileşenlerinin çıkarılmasını ve analiz edilmesini ve bu fitokimyasalların kanser önleyici etkinliğinin test edilmesini içerir.

Git: Çözüm
Mevcut çalışmamız, ilk kez EA çiçek özünün TNBC'ye ve moleküler sinyal yoluna karşı antikanser potansiyelini ortaya koymaktadır. Ayrıca, burada EA ekstraktının TNBC hücrelerinde hücre apoptozunu tetiklediğini rapor ediyoruz; buna proapoptotik ve anti-apoptotik genlerin deregülasyonu eşlik eder. Ek olarak, verilerimiz, p53 ve STAT3 yollarının, doğal ürünler yoluyla TNBC tedavisi için potansiyel bir hedef olarak rolünü vurgulamaktadır. Toplu olarak, bu çalışma, EA'nın meme kanseri yönetimi, özellikle TNBC alt tipi için umut verici bir terapötik aday olarak rolünü göstermektedir .

Git: Veri Kullanılabilirliği Bildirimi
Çalışmada sunulan orijinal katkılar makaleye/ek materyale dahil edilmiştir, daha fazla araştırma ilgili yazara yönlendirilebilir.

Git: Yazar Katkıları
A-EA: kavramsallaştırma. AF ve OH: metodoloji, doğrulama ve veri iyileştirme. A-EA, HA-F ve AK: kaynaklar, yazma—inceleme ve düzenleme ve denetim. AF, OH ve IG: yazma—orijinal taslak hazırlama. AK ve HA-F: finansman edinimi. Tüm yazarlar makalenin yayınlanan versiyonunu okudu ve kabul etti.

Git: Çıkar çatışması
Yazarlar, araştırmanın potansiyel bir çıkar çatışması olarak yorumlanabilecek herhangi bir ticari veya finansal ilişki olmaksızın yürütüldüğünü beyan eder.

Git: Yayıncının Notu
Bu makalede ifade edilen tüm iddialar yalnızca yazarlara aittir ve bunların bağlı kuruluşlarının veya yayıncının, editörlerin ve hakemlerin iddialarını mutlaka temsil etmez. Bu makalede değerlendirilebilecek herhangi bir ürün veya üreticisi tarafından ileri sürülebilecek herhangi bir iddia, yayıncı tarafından garanti edilmemekte veya onaylanmamaktadır.

Git: teşekkürler
Amal Kassab'a taslağı eleştirel bir şekilde okumasından dolayı teşekkür etmek isteriz.

Git: Finansman
Laboratuvarımız Katar Üniversitesi'nden alınan hibelerle desteklenmiştir: # QUST-1-CPH-2021-22, QUCP-CMED-22/23-529 ve QUCG-CMED-20/21-2.

Git: Referanslar

1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, Laversanne M, Soerjomataram I, Jemal A, et al. Küresel kanser istatistikleri 2020: GLOBOCAN, 185 ülkede 36 kanser için dünya çapında insidans ve mortalite tahminleri. CAA Kanser J Kliniği. (2021) 71 :209–49. 10.3322/caac.21660 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
2. Perou CM, Sørlie T, Eisen MB, van de Rijn M, Jeffrey SS, Rees CA, et al. İnsan meme tümörlerinin moleküler portreleri. Doğa. (2000) 406 :747–52. 10.1038/35021093 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
3. Vehbe HA, El-Hadaad HA. Üçlü negatif meme kanseri tedavisinde güncel yaklaşımlar. Kanser Biol Med. (2015) 12 :106–16. 10.7497/j.issn.2095-3941.2015.0030 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
4. Anders CK, Carey LA. Üçlü negatif meme kanserli hastaların biyolojisi, metastatik modelleri ve tedavisi. Klinik Meme Kanseri. (2009) 9 ( Ek 2 ):S73–81. 10.3816/CBC.2009.s.008 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
5. Millikan RC, Newman B, Tse CK, Moorman PG, Conway K, Dressler LG, et al. Bazal benzeri meme kanseri epidemiyolojisi. Meme Kanseri Tedavisi. (2008) 109 :123–39. 10.1007/s10549-007-9632-6 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
6. Nedeljković M, Damjanović A. Üçlü negatif meme kanserinde kemoterapi direncinin mekanizmaları-zorlukların üstesinden nasıl gelebiliriz. hücreler. (2019) 8 : 957 . 10.3390/cells8090957 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
7. Dent R, Trudeau M, Pritchard KI, Hanna WM, Kahn HK, Sawka CA, et al. Üçlü negatif meme kanseri: klinik özellikler ve nüks paternleri. Klinik Kanser Arş. (2007) 13(15 Pt 1) :4429–34. 10.1158/1078-0432.Ccr-06-3045 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
8. Kennecke H, Yerushalmi R, Woods R, Cheang MC, Voduc D, Speers CH, et al. Meme kanseri alt tiplerinin metastatik davranışı. J Clin Oncol. (2010) 28 :3271–7. 10.1200/jco.2009.25.9820 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
9. Lebert JM, Lester R, Powell E, Seal M, McCarthy J. Üçlü negatif meme kanserinin sistemik tedavisinde gelişmeler. Curr Oncol. (2018) 25 ( Ek 1 ):S142–50. 10.3747/co.25.3954 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
10. Atanasov AG, Waltenberger B, Pferschy-Wenzig EM, Linder T, Wawrosch C, Uhrin P, et al. Farmakolojik olarak aktif bitki kaynaklı doğal ürünlerin keşfi ve ikmali: bir inceleme. Biyoteknoloji Av. (2015) 33 :1582–614. 10.1016/j.biotechadv.2015.08.001 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
11. Atanasov AG, Zotchev SB, Dirsch VM, Orhan IE, Banach M, Rollinger JM, et al. İlaç keşfinde doğal ürünler: gelişmeler ve fırsatlar. Nat Rev İlaç Keşfi. (2021) 20 :200–16. 10.1038/s41573-020-00114-z [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
12. Harvey AL, Edrada-Ebel R, Quinn RJ. Genomik çağda ilaç keşfi için doğal ürünlerin yeniden ortaya çıkışı. Nat Rev İlaç Keşfi. (2015) 14 :111–29. 10.1038/nrd4510 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
13. Amiri Tehranizadeh Z, Baratian A, Hosseinzadeh H. Bir şifalı bitki olarak Rus zeytini ( Elaeagnus angustifolia ). Biyoetkiler. (2016) 6 :155–67. 10.15171/bi.2016.22 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
14. Ahmadiani A, Hosseiny J, Semnanian S, Javan M, Saeedi F, Kamalinejad M, et al. Elaeagnus angustifolia meyve özünün antinosiseptif ve antiinflamatuar etkileri . J Etnofarmakol. (2000) 72 :287–92. 10.1016/s0378-8741(00)00222-1 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
15. Gürbüz İ, Üstün O, Yeşilada E, Sezik E, Kutsal O. Türkiye'de halk ilacı olarak kullanılan bazı bitkilerin anti-ülserojenik aktivitesi. J Etnofarmakol. (2003) 88 :93–7. 10.1016/s0378-8741(03)00174-0 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
16. Hamidpour R, Hamidpour S, Hamidpour M, Shahlari M, Sohraby M, Shahlari N, et al. Rus zeytini ( Elaeagnus angustifolia L.): çeşitli geleneksel tıbbi uygulamalardan aktif antioksidan, antienflamatuar, anti-mutajenik ve analjezik ajan olarak yeni rollerine kadar. J Geleneksel Tamamlayıcı Med. (2017) 7 :24–9. 10.1016/j.jtcme.2015.09.004 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
17. Boudraa S, Hambaba L, Zidani S, Boudraa H. Cezayir'de az tüketilen beş türün meyvelerinin mineral ve vitamin bileşimi: Celtis australis L., Crataegus azarolus L., Crataegus monogyna Jacq., Elaeagnus angustifolia L. ve Zizyphus lotus L. .Int J Trop Subtrop Bahçıvanlık. (2010) 65 :75–84. [ Google Akademik ]
18. Saboonchian F, Jamei R, Hosseini Sarghein S. Elaeagnus angustifolia L.'nin (yaprak ve çiçek) fenolik ve flavonoid içeriği . Avicenna J Phytomed. (2014) 4 :231–8. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
19. Ayaz FA, Bertoft E. Ticari olarak depolanan iğde meyvelerinin şeker ve fenolik asit bileşimi. J Gıda Bileşik Anal. (2001) 14 :505–11. 10.1006/jfca.2001.1004 [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
20. Carradori S, Cairone F, Garzoli S, Fabrizi G, Iazzetti A, Giusti AM, et al. Elaeagnus angustifolia'dan toz haline getirilmiş meyvelerin ve yaprakların fitokompleks karakterizasyonu ve biyolojik değerlendirmesi . moleküller. (2020) 25 : 2021 . 10.3390/molecules25092021 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
21. Abizov EA, Tolkachev ON, Mal'tsev SD, Abizova EV. Rusya'nın Avrupa kısmında tanıtılan Rus zeytininin ( Elaeagnus angustifolia ) meyvelerinden izole edilen biyolojik olarak aktif maddelerin bileşimi . Pharm Chem J. (2008) 42 :696–8. 10.1007/s11094-009-0203-5 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
22. Saleh AI, Mohamed I, Mohamed AA, Abdelkader M, Yalcin HC, Aboulkassim T, et al. Elaeagnus angustifolia bitki özü, anjiyogenezi inhibe eder ve Erk1/Erk2 inaktivasyonu yoluyla insan ağız kanseri hücrelerinin hücre istilasını azaltır. Beslenme Kanseri. (2018) 70 :297–305. 10.1080/01635581.2018.1412472 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
23. Badrhadad A, Piri KH, Mansouri K. Elaeagnus angustifolia L. çiçeğinin ve Nepeta crispa L. arial kısmının hidroalkolik ekstraktından in vitro anti-anjiyojenik aktivite fraksiyonları . J Med Tesisleri Arş. (2012) 6 :4633–9. 10.5897/jmpr11.1573 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
24. Jabeen A, Sharma A, Gupta I, Kheraldine H, Vranic S, Al Moustafa AE, et al. Elaeagnus angustifolia bitki özü, epitelyal-mezenkimal geçişi inhibe eder ve HER2-pozitif meme kanseri hücrelerinde HER2 inaktivasyonu ve JNK yolu yoluyla apoptozu indükler. moleküller. (2020) 25 : 4240 . 10.3390/molecules25184240 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
25. Kheraldine H, Gupta I, Alhussain H, Jabeen A, Cyprian FS, Akhtar S, et al. JNK ve ERK1/ERK2 sinyal yolları yoluyla HER2-pozitif insan meme kanserinde çıplak PAMAM dendrimerleri tarafından kışkırtılan önemli hücre apoptozu. Comput Struct Biotechnol J. (2021) 19 :2881–90. 10.1016/j.csbj.2021.05.011 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
26. Qin JJ, Yan L, Zhang J, Zhang WD. Üçlü negatif meme kanserinde potansiyel bir terapötik hedef olarak STAT3: sistematik bir inceleme. J Uzm Kliniği Kanser Arş. (2019) 38 : 195 . 10.1186/s13046-019-1206-z [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
27. Jin MS, Park IA, Kim JY, Chung YR, Im SA, Lee KH ve diğerleri. Bir tümör baskılayıcı olarak p53 proteininin biyolojik rolüne ilişkin yeni içgörü: üçlü negatif meme kanserinde klinik öneminin yeniden değerlendirilmesi. Tümör Biol. (2016) 37 :11017–24. 10.1007/s13277-016-4990-5 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
28. Farzaei MH, Bahramsoltani R, Abbasabadi Z, Rahimi R. Elaeagnus angustifolia L. J Pharm Pharmacol'un fitokimyasal ve farmakolojik yönleri üzerine kapsamlı bir inceleme . (2015) 67 :1467–80. 10.1111/jphp.12442 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
29. Hui C, Qi X, Qianyong Z, Xiaoli P, Jundong Z, Mantian M. Flavonoids, flavonoid subclasses and meme kanseri riski: epidemiyolojik çalışmaların bir meta-analizi. PLoS Bir. (2013) 8 : e54318 . 10.1371/journal.pone.0054318 [ PMC ücretsiz makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
30. Zhang HW, Hu JJ, Fu RQ, Liu X, Zhang YH, Li J ve diğerleri. Flavonoidler, insan meme kanseri hücrelerinde PI3Ky aracılı PI3K/AKT/mTOR/p70S6K/ULK sinyal yolunun aşağı regülasyonu yoluyla hücre proliferasyonunu inhibe eder ve apoptozu ve otofajiyi indükler. Sci Rep. (2018) 8 : 11255 . 10.1038/s41598-018-29308-7 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
31. Liu Z, Ding D, Cui H, Wang C, Liu J, Chen L, et al. Çiçeklenme mevsimi boyunca Elaeagnus angustifolia L. çiçeklerindeki uçucu bileşikler üzerinde gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi ve ileri kemometri ile birleştirilmiş bir çalışma . J Gıda Kal. (2021) 2021 :1–8. 10.1155/2021/7111120 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
32. Hanahan D, Weinberg RA. Kanserin belirtileri. Hücre. (2000) 100 :57–70. 10.1016/s0092-8674(00)81683-9 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
33. Plati J, Bucur O, Khosravi-Far R. Kanserde apoptotik sinyallemenin düzensizliği: moleküler mekanizmalar ve terapötik fırsatlar. J Hücre Biyokimyası (2008) 104 :1124–49. 10.1002/jcb.21707 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
34. Hemann MT, Lowe SW. p53-Bcl-2 bağlantısı. Hücre Ölüm Farkı. (2006) 13 :1256–9. 10.1038/sj.cdd.4401962 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
35. Fridman JS, Lowe SW. Apoptozun p53 ile kontrolü. onkojen. (2003) 22 :9030–40. 10.1038/sj.onc.1207116 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
36. Yu H, Lee H, Herrmann A, Buettner R, Jove R. Kanserde STAT3 sinyalinin tekrar gözden geçirilmesi: yeni ve beklenmedik biyolojik fonksiyonlar. Nat Rev Kanser. (2014) 14 :736–46. 10.1038/nrc3818 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
37. Guanizo AC, Fernando CD, Garama DJ, Gough DJ. STAT3: çok yönlü bir onkoprotein. Büyüme faktörleri. (2018) 36 :1–14. 10.1080/08977194.2018.1473393 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
38. Sirkisoon SR, Carpenter RL, Rimkus T, Anderson A, Harrison A, Lange AM, et al. STAT3 ve GLI1/tGLI1 onkojenik transkripsiyon faktörleri arasındaki etkileşim, üçlü negatif meme kanserlerinin ve HER2 ile zenginleştirilmiş meme kanserinin saldırganlığını arttırır. onkojen. (2018) 37 :2502–14. 10.1038/s41388-018-0132-4 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
39. Lee H, Jeong AJ, Ye SK. STAT3'ü kanser tedavisi için potansiyel bir ilaç hedefi olarak vurguladı. BMB Rep. (2019) 52 :415–23. 10.5483/BMBRep.2019.52.7.152 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
40. Darnell JE, Jr. STAT'lar ve gen regülasyonu. Bilim. (1997) 277 :1630–5. 10.1126/science.277.5332.1630 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
41. Kamran MZ, Patil P, Güde RP. STAT3'ün kanser metastazındaki rolü ve translasyonel ilerlemeler. Biomed Res Int. (2013) 2013 : 421821 . 10.1155/2013/421821 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
42. Al Zaid Siddiquee K, Turkson J. STAT3, katı ve hematolojik tümörlerde apoptozu indüklemek için bir hedef olarak. Hücre Res. (2008) 18 :254–67. 10.1038/cr.2008.18 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
43. Chun J, Song K, Kim YS. Inula helenium L.'nin seskiterpen laktonlarla zenginleştirilmiş fraksiyonu, MDA-MB-231 meme kanseri hücrelerinde sinyal transdüserlerinin ve transkripsiyon 3 sinyal yolunun aktivatörlerinin inhibisyonu yoluyla apoptozu indükler. Fitoterapi Arş. (2018) 32 :2501–9. 10.1002/ptr.6189 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
44. Romeo MA, Gilardini Montani MS, Benedetti R, Santarelli R, D'Orazi G, Cirone M. STAT3 ve mutp53, HSP90 ve mevalonat yolunu içeren bir pozitif geri besleme döngüsüne girer. Ön Kol. (2020) 10 : 1102 . 10.3389/fonc.2020.01102 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
45. Pham TH, Park HM, Kim J, Hong JT, Yoon DY. STAT3 ve p53: kanser tedavisi için ikili hedef. Biyotıplar. (2020) 8 : 637 . 10.3390/biomedicines8120637 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
46. Niu G, Wright KL, Ma Y, Wright GM, Huang M, Irby R, et al. Stat3'ün p53 ifadesini ve işlevini düzenlemedeki rolü. Mol Hücre Biol. (2005) 25 :7432–40. 10.1128/mcb.25.17.7432-7440.2005 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
47. Lin J, Tang H, Jin X, Jia G, Hsieh JT. p53, yapısal olarak aktif Stat3 ifade eden insan prostat kanseri hücrelerinde Stat3 fosforilasyonunu ve DNA bağlanma aktivitesini düzenler. onkojen. (2002) 21 :3082–8. 10.1038/sj.onc.1205426 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
48. Tan FH, Putoczki TL, Stylli SS, Luwor RB. STAT3 sinyalinin, kanser tedavisine karşı tümör direncine aracılık etmedeki rolü. Curr İlaç Hedefleri. (2014) 15 :1341–53. 10.2174/1389450115666141120104146 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
49. Hientz K, Mohr A, Bhakta-Guha D, Efferth T. p53'ün kanser ilacı direncinde ve hedeflenen kemoterapideki rolü. Oncotarget. (2017) 8 :8921–46. 10.18632/oncotarget.13475 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]

---

[maturidi]

Elaeagnus angustifolia L. ekstraktı ve quercetin'in diz osteoartritinin fare modelinde karşılaştırılması

Mitra Heydari Nasrabadi , ^a Malahat Parsivand , ^a Narges Mohammadi , ^b ve Nastaran Asghari Moghaddam ^{b, ∗}
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri PMC Sorumluluk Reddi
^a Biyoloji Bölümü, Parand Şubesi, İslami Azad Üniversitesi, Tahran, İran
^b Biyoloji Bölümü, Merkez Tahran Şubesi, İslami Azad Üniversitesi, Tahran, İran
Nastaran Asghari Moghaddam: ri.ca.btcuai@maddahgomirahgsa.san
^∗ Sorumlu yazar. ri.ca.btcuai@maddahgomirahgsa.san
Git:
Soyut
Osteoartrit (OA), şiddetli ağrıya neden olan ve hastanın yaşam kalitesini bozan en sık görülen artritik hastalıktır. Bu çalışma , Elaeagnus angustifolia ekstraktı ve quercetin'in diz osteoartriti (OA) fare modeli üzerindeki etkisini araştırmayı ve karşılaştırmayı amaçladı . OA'nın monosodyum iyodoasetat (MIA) modelini oluşturmak için altmış Balb-C faresi kullanıldı. Daha sonra, tedavi edilmemiş OA grubuna (normal beslenme), E. angustifolia'ya randomize edildi.ekstraktla tedavi edilen grup (sondayla 32 mg/kg), kuersetinle tedavi edilen grup (sonla 20 mg/kg) ve ibuprofenle tedavi edilen grup (20 mg/kg). MIA tedavisi olmayan 15 fare, normal kontroller olarak kabul edildi. Fareler 28 gün tedavi edildi. Histopatolojik analiz diz eklemlerinde yapıldı. Ek olarak serumdaki matriks metaloproteinaz 3 ve 13'ün (MMP-1 ve MMP-13) ekspresyon seviyeleri değerlendirildi. Histopatolojik çalışma, quercetin ile tedavi edilen grupta femur ve tibia kalınlığının önemli ölçüde arttığını gösterdi (P < 0.05). E. angustifolia tarafından tedavi edilen gruplar arasındaekstrakt, kersetin ve ibuprofen, MMP-3 konsantrasyonu sırasıyla 5,47 ± 1,75 ng/ml, 4,38 ± 1,78 ng/ml ve 4,86 ± 1,40 ng/ml idi. Serumdaki MMP-13 seviyesi aynı sırayla 3,32 ± 1,64 ng/ml, 2,67 ± 1,73 ng/ml ve 5,31 ± 1,68 ng/ml idi (P < 0,05).

Bu çalışmanın sonuçları, quercetin'in OA semptomlarının azaltılmasında yararlı olduğunu ve hasarlı kıkırdağın iyileşmesini artırdığını düşündürmektedir. Bu nedenle, OA tedavisinde yararlı bir tıbbi destek olabilir. Ayrıca E. angustifolia ekstraktı ve quercetin serum MMP-3 ve MMP-13 konsantrasyonlarını önemli ölçüde azaltmıştır. E. angustifolia'nın OA remisyonunda rol oynamasının mekanizmalarından biri olabilir .

Anahtar Kelimeler: Matrix metalloproteinaz-3, Matrix metalloproteinaz-13, Osteoartrit, Elaeagnus angustifolia , Quercetin
Git: 1. Giriş
Osteoartrit (OA), kıkırdakta dejeneratif değişikliklere neden olan ve eklem fonksiyonunu bozan bir kas-iskelet sistemi hastalığıdır [ 1 ]. Yaşamın yedinci on yılındaki nüfusun yarısından fazlasının OA'dan muzdarip olduğu tahmin edilmektedir [ 2 , 3]. Artan sayıda yaşlı nüfus, OA'yı önümüzdeki yıllarda küresel bir tıbbi sorun haline getirecektir. OA'nın ana özellikleri, eklem kıkırdağının ilerleyici dejenerasyonu ve eklemlerin merkezinde ve kenarlarında yeni kemik oluşumudur. Hastalık sadece kıkırdak ile sınırlı olmayıp sinoviyal eklemi ve sinovyum, subkondral kemik, menisküs ve bağlar gibi tüm ilişkili dokuları tutmaktadır. Eklem kıkırdağının ilerleyici yıkımına subkondral kemiğin deformasyonu eşlik eder ve zamanla bu deformasyon eklem çevresinde osteofit oluşumuna yol açar ve sonuçta eklem hareketini kısıtlar. OA tüm eklemleri etkileyebilir; ancak diz ve kalça gibi yük taşıyan eklemlerde daha sık görülür [ [4] , [5] , [6]].

Matriks metalloproteinaz (MMP) enzimleri, OA gelişiminde önemli bir rol oynar [ 7 ]. OA'nın ilerlemesi sırasında, MMP'lerin üretimini uyaran inflamatuar mediatörler (örneğin, interlökinler) salgılanır [ 8 ]. MMP'ler, özgüllüklerine ve etki alanı organizasyonuna göre birkaç alt gruba ayrılır [ 9 ]. MMP-3, MMP'lerin stromelisin sınıfına aittir. Daha önce yayınlanmış literatür, MMP-3'ün, hücre dışı matrisin bozulmasına yol açan MMP kaskadındaki kritik rolüne dayalı olarak OA teşhis hedefi olarak hizmet edebileceğini göstermiştir [7 , [ 9] , [10] , [11]]. Ayrıca MMP-13 veya kolajenaz-3'ün aktif formu, kıkırdak matriksinin ana bileşeni olan tip II kollajeni hidrolize ederek kıkırdak yıkımında baskın bir rol oynar ve OA'nın başlamasını indükler. Patolojik kondrositler MMP-13 üretir, dolaşımdaki konsantrasyonu hastalığın ilerlemesine paralel olarak yükselir [ 8 , 9 , 12 ].

OA'nın fizyolojik ve moleküler belirleyicileri ve semptomları iyi bilinmesine ve ilişkili risk faktörlerinin ayrıntılı olarak çalışılmasına rağmen, onu iyileştirecek kesin bir tedavi henüz kurulmamıştır [13 ] .

İran'ın geleneksel tıp sistemi, OA için potansiyel bir tedavi olarak Rus zeytinini ( Elaeagnus angustifolia L.) tanıttı. Dünya çapında 90'dan fazla E. angustifolia türü mevcuttur. Kuzey Asya'da Himalayalar ve Avrupa'ya yaygın olarak dağıtılırlar. E. angustifolia türü , İran halk tıbbında romatoid artrit tedavisinde antiinflamatuar ve analjezik olarak kullanılmaktadır [ 14]. Meyvesinde potasyum, magnezyum ve kükürt gibi mineraller, palmitik, oleik ve linoleik asitler gibi çeşitli yağ asitleri bulunur. Ayrıca, Rus zeytinlerinde çeşitli fenolik asitler (örn. kafeik asit, valinik asit, protokatekuik asit, vb.) ve kersetin dahil olmak üzere farklı varyasyonlarda bulunan flavonoidler rapor edilmiştir. Flavonoller adı verilen bir flavonoid alt sınıfına aittir. Quercetin glikozitleri bitkiler aleminde her yerde bulunur [ 15 ] çeşitli meyve ve sebzelerde, özellikle soğan, elma, kiraz, üzüm, yemiş, çay ve bazı tohumlarda [16 ]]. Quercetin gibi flavonoidler antioksidanlardır. Aerobik organizmalarda metabolik prosedür sırasında üretilen reaktif oksijen türlerini (ROS) temizlerler. Düşük konsantrasyondaki ROS, bağışıklık sistemini düzenleyen sinyal yollarında etkili bir rol oynar. Öte yandan, aşırı ROS, biyomoleküller için zararlı olabilir ve bu, OA dahil olmak üzere inflamasyonla ilişkili hastalıklara yol açabilir. Organizmaların kendi hücresel antioksidan sistemleri olmasına rağmen; bazen oksidatif stresin olumsuz etkilerinin üstesinden gelmek veya azaltmak için antioksidan moleküllerin alınması gerekir [ 17 ]. Bu strateji, ROS'un neden olduğu hasarın önlenmesi veya azaltılmasında faydalı olabilir. Çeşitli çalışmalar, Rus zeytinlerinin analjezik ve antioksidan özelliklere sahip olduğunu ve dolayısıyla artrit tedavisinde yararlı olduğunu göstermiştir.14 , 18 ].

Bu çalışma, E. angustifolia ekstraktı ve quercetin'in diz OA üzerindeki iyileştirici etkilerini araştırmayı ve bunları matriks metaloproteinaz-3 (MMP-3) ve matris metalloproteinaz-13 (MMP) ekspresyonu açısından standart tedavi (ibuprofen) ile karşılaştırmayı amaçlamaktadır. -13) serum ve histopatolojik değerlendirme. Bu nedenle, bu çalışma E. angustifolia ekstraktının diz OA'sı üzerindeki koruyucu etkilerini bildirmek ve E. angustifolia ekstraktı ile majör etken maddesi olan quercetin'in etkilerini karşılaştırmak için tasarlanmıştır .

Git: 2. Malzemeler ve yöntemler
2.1. Bitki materyali
E. angustifolia ekstraktını [İran Ulusal Bitki Gen Bankası Herbaryumu (HNPGBI) 6868] hazırlamak için bütün meyveler (kabuk, et ve tohum dahil) kurutuldu ve toz haline getirildi (150 g). Daha sonra 1000 ml kaynar suya ilave edilerek 20 dakika çalkalanarak kaynatıldı. Ekstrakt süzüldü, buharlaştırıldı ve -20 °C'de saklandı. Elde edilen kurutulmuş ekstrakt 20 g idi.

2.2. Toplam polifenol ve flavonoid konsantrasyonu ve antioksidan aktivite
Toplam polifenol içeriği miktarı, standart olarak gallik asit kullanılarak Folin-Cicalteau yöntemiyle belirlendi. Ekstraktın antioksidan aktivitesini değerlendirmek için Cansev ve ark. [ 19 ]. Flavonoid konsantrasyonu, Lin ve diğ. [ 20 ].

2.3. Hayvanlar
20 ± 5 g ağırlığındaki yetmiş beş on haftalık erkek Balb-C faresi, Tahran Üniversitesi Veteriner Fakültesi tarafından sağlandı. Sıcaklık (20–23 °C), nem (%50 ± 5) ve fotoperiyot 12 saat ışık: 12 saat karanlık döngüsünden oluşan standart çevresel koşul altında tutuldular ve ad libitum yiyecek ve su tüketmelerine izin verildi. On gün boyunca laboratuvara alıştırıldıktan sonra, her biri 15 üyeden oluşan beş deney grubuna randomize edildi. Deney, Yayın Prensibi Laboratuvar Hayvanları Bakımı (NIH yayını n. 86–23, 1985'te revize edildi) yönergelerine uygun olarak yapıldı ve 2016'da İslami Azad Üniversitesi Merkez Tahran Şubesi tarafından onaylandı (sertifika No. 10130517942003).

2.4. OA modeli
Altmış fareye anestezi uygulandı ve daha önce Ogbonna ve ark. [ 21 ]. Sağ dizine normal salin enjekte edildi.

2.5. Dozaj
Kurutulan ekstrakt çift distile su ile karıştırıldı. Quercetin tozu (Sigma-Aldrich, Almanya) normal salinle karıştırıldı. İbuprofen (Sigma-Aldrich) damıtılmış suda çözüldü. Müdahaleler, MIA tedavisinden 14 gün sonra, birbirini takip eden 28 gün boyunca günde bir kez uygulandı, fareler aşağıdaki dozajla tedavi edildi: E. angustifolia ekstresi ile tedavi edilen grup, 32 mg/kg; quercetin ile tedavi edilen grup, 20 mg/kg (ilaçlar sonda ile uygulandı). Normal kontroller ve tedavi edilmeyen grup (negatif kontrol) tipik olarak standart diyetle beslendi.

2.6. Biyokimyasal analiz
28 günlük tedaviden sonra, tüm hayvanlar aşırı dozda narkotik ile öldürüldü. Kan orbital sinüsten toplandı ve biyokimyasal analiz için serum elde etmek üzere 4 °C'de 2500 RPM ile 20 dakika santrifüjlendi. MMP-3 ve MMP-13 konsantrasyonları MMP kiti (Bioassay Technology Laboratory, China) ile değerlendirildi. Mevcut analiz üç kopya halinde gerçekleştirildi.

2.7. histolojik çalışma
Sol diz ekleminin yumuşak dokusu çıkarıldı. Numuneler %10 formaldehit içinde saklandı. Dekalsifikasyon, %5 nitrik asit ile işlenerek sağlandı. Seri 5 mikron sagital kesitler kesildi. Son olarak, slaytlar hematoksilen ve eozin ile boyandı. Tibial kıkırdak kalınlığı (TTC), femoral kıkırdak kalınlığı (TFC), tibial kondrosit sayısı (NTC), femoral kondrosit sayısı (NFC), tibia (ICT) ve femur inflamatuar hücreleri (ICF) ile birlikte mikroskobik gözlem ile değerlendirilmiştir.

2.8. istatistiksel analiz
Sonuçlar Ortalama ± SD olarak ifade edildi. Grupları karşılaştırmak için tek yönlü ANOVA kullanıldı. Post-hoc test olarak Tukey düzeltmesi kullanıldı. P < 0.05 anlamlı kabul edildi. Tüm istatistiksel analizler SPSS versiyon 23 (SPSS Inc, ABD) ile hesaplandı.

Git: 3. Sonuçlar
3.1. OA modeli oluşumunun teyidi
14 günlük bir sürede verilen MIA enjeksiyonu, kıkırdak yapısında belirgin değişiklik ve yüzey fibrilasyonuna neden oldu. Ayrıca subkondral kemik açığa çıkmış, kondrosit sayısı ve kıkırdak kalınlığı azalmıştır. Bu nedenle, MIA enjeksiyonunun etkisi zamana bağlıydı. Hem tibia hem de femur eklem kıkırdağı yüzeysel olarak ve özellikle 28 gün sonra fibrilasyon açısından düzensizdi.

3.2. Polifenoller ve flavonoidler içeriği ve antioksidan kapasitesi
E. angustifolia ekstraktının ortalama toplam fenolleri, 0.043 mg gallik asit eşdeğeri (GAE)/g kurutulmuş ekstrakt olarak ölçüldü. Ekstraktın ortalama toplam flavonoid içeriği 0.014 mg quercetin eşdeğeri (QE)/g kurutulmuş ekstrakt idi. DPPH testi, E. angustifolia ekstraktının antioksidan aktivitesini belirledi . Ekstraktın antioksidan kapasitesi 5.72 μg/ml idi.

3.3. histopatolojik analiz
Normal kontrol grubunda OA kanıtı gözlenmedi. Eklem kıkırdağı sağlamdı ve hasar olmaması barizdi (Şekil 1). OA grubunda eklem kıkırdağı ileri derecede bozuktu. E. angustifolia ekstraktı ile tedavi edilen grupta , tibial ve femoral kıkırdak kalınlığı, OA grubuna ve ayrıca ibuprofen grubuna kıyasla anlamlı derecede daha yüksekti (P < 0.05). Bu gruptaki söz konusu kıkırdakların kalınlık değişiminin kuersetin verilen gruba göre daha az olması dikkat çekicidir (P < 0.05). Tibial ve femoral kondrositlerin sayısı bu grupta ibuprofen ile tedavi edilen grupla karşılaştırıldığında daha yüksekti (P < 0.05). Ancak, kuersetin ile tedavi edilen gruba kıyasla sayılar daha azdı (P < 0.05). Enflamatuar hücrelerin sayılması, E.angustifolia ekstresi, tedavi edilen gruplar arasında en yüksek azalmaya sahipti (P < 0.05). Quercetin ile tedavi edilen grup, diğer gruplarla karşılaştırıldığında TTC, TFC, NTC ve NFC'de önemli artış gösterdi (P < 0.05), bu da quercetin'in OA üzerinde etkili olduğunu gösterir. Ek olarak, quercetin tedavisi ICT ve ICF'yi önemli ölçüde azalttı (P < 0.01); ancak etki, E. angustifolia ekstraktından daha az önemliydi. TTC ve TFC'deki değişim, OA grubu ile karşılaştırıldığında anlamlı olarak farklı değildi. OA grubuna kıyasla tibial kondrosit sayısında anlamlı bir değişiklik yoktu. Öte yandan, tedavi edilen her iki grupta da NFC, OA modelinden anlamlı derecede yüksekti (P < 0.05). En yüksek NFC, E. angustifolia ile karşılaştırıldığında quercetin ile tedavi edilen farelerde gözlendi.ekstraktla işlenmiş grup (P < 0.05) (İncir. 2).


Şekil 1
Diz eklemlerinin histopatolojik değerlendirmesi. (a) normal, (b) OA modeli, (c) quercetin ile tedavi edilen grup, (d) E. angustifolia ekstresi ile tedavi edilen grup, (e) ibuprofen ile tedavi edilen grup (hematoksilen ve eozin boyama, x40).



İncir. 2
(a) Tibial kıkırdak (TTC) kalınlığı ve femoral kıkırdak (TFC) kalınlığı, (b) Tibial kondrosit (NTC) ve femoral kondrosit (NFC) sayısı, (c) tibia inflamatuar hücreleri (ICT) ve femur inflamatuar hücreleri (ICF) (∗ normal veya diğer gruplarla karşılaştırıldığında, P < 0.05; # OA modeliyle karşılaştırıldığında, P < 0.05; ## OA modeliyle karşılaştırıldığında, P < 0.01).

3.4. MMP-3'ün serumdaki konsantrasyonu
Normal kontrol, quercetin ve ibuprofen ile tedavi edilen grupların serumundaki ortalama MMP-3 protein konsantrasyonu aynı aralıktaydı (Şek. 3A). OA grubunda MMP-3 varlığı, normal kontrol ile karşılaştırıldığında anlamlı olarak daha yüksekti (P < 0.05). Quercetin, MMP-3 konsantrasyonunu önemli ölçüde azalttı (P < 0.05). E. angustifolia ekstresi ve ibuprofen grupları, serumda MMP-3'te önemli bir azalma göstermedi (P > 0.05).

Şek. 3
(a) Serumdaki MMP-3 seviyesi, (b) serumdaki MMP-13 seviyesi. ∗ Diğer gruplarla karşılaştırıldığında, p < 0.05. ∗∗ Diğer grupla karşılaştırıldığında, p < 0.01.

3.5. Serumda MMP-13 konsantrasyonu
E. angustifolia özü ve quercetin, MMP-13 serum seviyesinin konsantrasyonunu keskin bir şekilde azalttı (P < 0.01). Bu muhtemelen enzimin baskılanmasına neden olan flavonoid yapılarından kaynaklanmaktadır (Şek. 3). Ayrıca, sonuçlar E'nin etkisinin olduğunu göstermiştir . angustifolia ekstresi ve quercetin, ibuprofen ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha yüksekti (p < 0.01).

Git: 4. Tartışma
Bu çalışmanın amacı, E. angustifolia ekstraktı ve fraksiyonlarından biri olan quercetin'in diz OA'sı üzerindeki etkisini değerlendirmek ve karşılaştırmaktı. Bu amaca ulaşmak için MIA kaynaklı diz OA modelleri uygulandı. OA, farelerde sinovyal sıvıda azalma, hücresel hasar ve kondrosit sayısında azalma ile kendini gösterdi. Sonuçlar benzer çalışmalarla tutarlıydı [ 22 , 23 ]. Histopatolojik analiz, E. angustifolia ekstresi ve quercetin müdahalesinden sonra , eklem kıkırdağı kusurlarının derecesinin, negatif kontrole kıyasla önemli ölçüde azaldığını ortaya koydu. Sonuçlar ayrıca E. angustifolia'nınekstrakt, tedavi edilmemiş OA grubuna kıyasla femur ve tibia üzerinde anti-inflamatuar etkilere sahipti. Ayrıca kuersetin grubunda kondrosit sayısı diğer gruplara göre daha fazlaydı (P < 0.05). Hem tibia hem de femurdaki kondrosit sayısının quercetin grubunda E. angustifolia ekstraktı ile tedavi edilen grupla karşılaştırıldığında artması ilginçti , bu da ekstraktın önemli anti-inflamatuar özelliğe sahip olduğunu gösteriyor. E. angustifolia ekstraktının iyileştirici özelliğinin muhtemelen meyvenin tamamında bulunan antiinflamatuar ajanlar ve mikro besinlerden kaynaklandığı öne sürülebilir . Birkaç çalışma, E'nin önemini bildirmiştir.OA tedavisinde angustifolia ekstresi. Ek olarak, bazı çalışmalar kuersetin'in (E. angustifolia'nın önemli bir flavonoid glikozidi) OA üzerindeki etkisini değerlendirmeye odaklandı . Örneğin, Panahi ve ark. E. angustifolia ekstraktının OA hastalarının semptomlarını azalttığını göstermiştir [ 18 ].

Oksidatif stres sırasında kondrositler apoptoza uğrar ve ardından otofaji OA'nın ilerlemesinde önemli bir rol oynar [ 24 ]. Hücrelerin hücresel antioksidan sistemi aktive olmasına rağmen; hasarlı dokuda aşırı ROS nedeniyle bir dengesizlik ortaya çıkar [ 25 ]. Diz ekleminde aşırı ROS'un varlığı, kondrosit matriks yıkımına, kondrositlerin yaşlanmasına ve apoptoza yol açar [ 26 ]. Kondrositlere verilen hasarın, ROS'u azaltarak azaltılabileceği görülmektedir [ 27 ]. Rus zeytinlerinde çeşitli konsantrasyonlarda flavonoidler, alkaloidler, saponinler ve terpenoidler bulunur. Bu bileşikler, antioksidan aktiviteye sahiptir ve E. angustifolia'nın nedeni bu gibi görünmektedir.ekstrakt, tedavi edilen farelerde OA'nın ilerlemesini zayıflattı. Bu ekstraktın OA ağrısının hafifletilmesi ve MMP'lerin ve enflamatuar sitokinlerin biyokimyasal olarak azaltılması üzerindeki potansiyel yeteneği, çeşitli çalışmalarda belgelenmiştir [ 28 , 29 ]. Ekstraktın anti-enflamatuar etkilerinin kuersetin ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha yüksek olduğunu belirtmek çok önemlidir; Öte yandan, quercetin'in kondrositler ve kıkırdak dokusu üzerindeki etkisi ekstraktla karşılaştırıldığında anlamlı derecede yüksekti. Quercetin'in OA üzerindeki olumlu etkileri iyi bir şekilde belgelenmiştir [ [[30] , [31] , [32] ].

MMP'ler , OA'nın ayırt edici özelliği olan hücre dışı matriks dejenerasyonundaki ana fizyolojik faktörlerden biri olarak kabul edilir [ 28 ]. Kondrositler gibi enflamatuar ve yapısal hücreler MMP'ler üretir [ 33 ]. Osteoartritte, hücre dışı matrisin aşırı bozunması daha fazla iltihaplanmayı tetikler. Durumu tersine çevirmek için MMP'lerin doğal inhibitörleri düşünülmelidir [ 34 ]. OA'daki iki önemli MMP, MMP-13 [ 33 ] ve MMP-3'tür [ 35 ]. Bu çalışmada quercetin ve E. angustifolia'nın etkisiBu iki MMP'nin varlığı üzerine ekstrakt değerlendirildi. Elde edilen sonuçlar, negatif kontrol ile karşılaştırıldığında tedavi edilen gruplar arasında MMP-3 ve MMP-13 seviyelerinde bir düşüş olduğunu gösterdi. Bu sonuç, Lee ve ark. [ 36 ]. Muhtemel mekanizma, Qiu ve ark. daha önce bildirilen [ [30] , [31] , [32] ].

Git: 5. Sonuç
Mevcut çalışma , pozitif kontrol olarak ibuprofen ile karşılaştırıldığında E. angustifolia ekstresi ve quercetin'in OA ilerlemesi üzerindeki etkilerini değerlendirmek için MIA kaynaklı OA modelini kullandı . 28 günlük tedaviden sonra diz ekleminin histolojisi ve serumdaki MMP-3 ve MMP-13 seviyeleri değerlendirildi. Sonuçlar, tibial ve femoral kemikler ile kıkırdakta daha az hasar ve kanda MMP-3 ve MMP-13'ün aşağı regülasyonunu gösterdi. Sonuçlar ibuprofen ile tedavi edilen hayvanlarla uyumluydu ve bazı durumlarda sonuçlar daha iyiydi. Bu nedenle, E. angustifolia ekstresi ve quercetin, OA'nın ilerlemesini engellemek için uygun bitkisel ilaçlar olarak kullanılabilir.

Git: Finansman kaynakları
Hiçbiri. Bu araştırma, kamu, ticari veya kar amacı gütmeyen sektörlerdeki finansman kuruluşlarından herhangi bir özel hibe almamıştır.

Git: Çıkar çatışması
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Git: Yazar Katkıları
Mitra Haydari Nasrabadi: Kavramsallaştırma, Metodoloji, Doğrulama, Biçimsel analiz, Kaynaklar, Veri iyileştirme, Yazma-inceleme ve düzenleme, Denetim, Proje yönetimi.

Mahtab Parsivand: Kavramsallaştırma, Metodoloji, Yazılım, Doğrulama, Biçimsel analiz, Araştırma, Kaynaklar, Veri toplama, Yazma - orijinal taslak ve inceleme ve düzenleme.

Narges Mohammadi: Yazılım, Doğrulama, Biçimsel analiz, Araştırma, Kaynaklar, Veri iyileştirme, Yazma - orijinal taslak ve inceleme ve düzenleme, Görselleştirme.

Nastaran Asghari Moghaddam: Kavramsallaştırma, Metodoloji, Yazılım, Biçimsel analiz, Araştırma, Veri iyileştirme, Yazma- orijinal taslak ve inceleme ve düzenleme, Görselleştirme, Denetim, Proje yönetimi.

Git: Dipnotlar
Transdisipliner Üniversite, Bangalore sorumluluğunda akran değerlendirmesi.



Git: Referanslar

1. Glyn-Jones S., Palmer AJR, Agricola R., Price AJ, Vincent TL, Weinans H., et al. Kireçlenme. Lancet. 2015; 386 (9991):376–387. doi: 10.1016/s0140-6736(14)60802-3. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
2. Rahmati M., Nalesso G., Mobasheri A., Mozafari M. Yaşlanma ve osteoartrit: Hücre dışı matrisin merkezi rolü. Yaşlanma Res Rev. 2017; 40 :20–30. doi: 10.1016/j.arr.2017.07.004. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
3. Collins JA, Diekman BO, Loeser RF Osteoartritte hastalık modifikasyonu için yaşlanmayı hedefleme. Curr Opin Rheumatol. 2018; 30 (1):101–107. doi: 10.1097/bor.0000000000000456. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
4. Sandell LJ, Aigner T. Eklem kıkırdağı ve artritteki değişiklikler. Giriş: osteoartritin hücre biyolojisi. Artrit Res. 2001; 3 (2):107–113. doi: 10.1186/ar148. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
5. Peat G., McCarney R., Croft P. Yaşlı erişkinlerde diz ağrısı ve osteoartrit: toplum yükünün ve birinci basamak sağlık hizmetlerinin mevcut kullanımının gözden geçirilmesi. Ann Rheum Dis. 2001; 60 (2):91–97. doi: 10.1136/2Fard.60.2.91. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
6. Weiss E., Jurmain R. Osteoartrit yeniden ziyaret edildi: etiyolojinin çağdaş bir incelemesi. Int J Osteoarkeol. 2007; 17 (5):437–450. doi: 10.1002/oa.889. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
7. Zeng JJ, Wang HD, Shen ZW, Yao XD, Wu CJ, Pan T. Zerdeçal, osteoartritte matriks metaloproteinaz-3'ün ekspresyonunu aşağı doğru düzenleyerek sinovyal hücrelerin proliferasyonunu inhibe eder. Ortopedi Cerrahı 2019; 11 (1):117–125. doi: 10.1111/os.12412. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
8. Mehana ESE, Khafaga AF, El-Blehi SS Osteoartrit patogenezinde matris metaloproteinazların rolü: güncellenmiş bir derleme. Hayat Bilimi 2019; 234 :116786. doi: 10.1016/j.lfs.2019.116786. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
9. Xie XW, Wan RZ, Liu ZP Anti-osteoartrit ajanları olarak selektif matriks metaloproteinaz-13 inhibitörlerinde son araştırmalarda gelişmeler. ChemMedChem. 2017; 12 (15):1157–1168. doi: 10.1002/cmdc.201700349. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
10. Hao HQ, Zhang JF, He QQ, Wang Z. Kıkırdak oligomerik matris proteini, tip II kollajenin C-terminali çapraz bağlanan telopeptidi ve diz ve kalça osteoartriti (OA) teşhisi için biyobelirteçler olarak matris metaloproteinaz-3: sistematik inceleme ve meta-analiz. Osteoartrit Kıkırdak. 2019; 27 (5):726–736. doi: 10.1016/j.joca.2018.10.009. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
11. Kodama R., Muraki S., Iidaka T., Oka H., Teraguchi M., Kagotani R., et al. Genel Japon popülasyonunda romatoid artrit ile ilişkili matriks metalloproteinaz-3 ve otoantikorların serum seviyeleri ve bunların osteoporoz ve osteoartrit ile ilişkisi: ROAD çalışması. J Kemik Madenci Metabol. 2018; 36 (2):246–253. doi: 10.1007/s00774-017-0834-7. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
12. Li H., Wang D., Yuan Y., Min J. Erken osteoartrit patogenezinde MMP-13 düzenleyici ağı hakkında yeni görüşler. Artrit Res. 2017; 19 (1):248. doi: 10.1186/s13075-017-1454-2. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
13. Nasiri N., Hosseini S., Alini M., Khademhosseini A., Baghaban Eslaminejad M. Eklem kıkırdağı rejenerasyonu ve osteoartrit tedavisi için hedeflenen hücre iletimi. Bugün Uyuşturucu Keşfi. 2019 Kasım; 24 (11):2212–2224. doi: 10.1016/j.drudis.2019.07.010. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
14. Hamidpour R., Hamidpour S., Hamidpour M., Shahlari M., Sohraby M., Shahlari N., et al. Rus zeytini (Elaeagnus angustifolia L.): çeşitli geleneksel tıbbi uygulamalardan aktif antioksidan, anti-enflamatuar, anti-mutajenik ve analjezik ajan olarak yeni rollerine kadar. J Geleneksel Tamamlayıcı Med. 2017; 7 (1):24–29. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
15. Dell'Albani P., Di Marco B., Grasso S., Rocco C., Foti MC Quercetin türevleri, glioma hücrelerinde seçici sitotoksisitenin güçlü indükleyicileri olarak. Eur J Pharmaceut Sci. 2017; 101 :56–65. doi: 10.1016/j.ejps.2017.01.036. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
16. Snyder SM, Zhao B., Luo T., Kaiser C., Cavender G., Hamilton-Reeves J., et al. Quercetin ve quercetin içeren elma ve vişne özlerinin tüketimi, obez C57BL/6J yüksek yağla beslenen farelerde kan şekeri konsantrasyonunu, hepatik metabolizmayı ve gen ekspresyon modellerini etkiler. J Nutr. 2016; 146 (5):1001–1007. doi: 10.3945/jn.115.228817. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
17. Treml J., Šmejkal K. Hidroksil radikallerinin güçlü temizleyicileri olarak flavonoidler. Compr Rev Food Sci Food Saf. 2016; 15 (4):720–738. doi: 10.1111/1541-4337.12204. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
18. Panahi Y., Alishiri GH, Bayat N., Hosseini SM, Sahebkar A. Diz osteoartriti tedavisinde Elaeagnus angustifolia ekstresinin etkinliği: randomize kontrollü bir çalışma. EXCLI J.2016; 15 :203–210. doi: 10.17179/2Fexcli2015-639. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
19. Cansev A., Sahan Y., Çelik G., Taşkesin S., Özbey H. Elaeagnus angustifolia L. meyvelerinin kimyasal özellikleri ve antioksidan kapasitesi. Asya J Chem. 2011; 23 (6):2661–2665. [ Google Akademik ]
20. Havelin J., Imbert I., Cormier J., Allen J., Porreca F., King T. İlerlemiş osteoartritli bir sıçan modelinde devam eden ağrının merkezi sensitizasyonu ve nöropatik özellikleri. J Ağrı. 2016; 17 (3):374–382. doi: 10.1016/j.jpain.2015.12.001. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
21. Ogbonna AC, Clark AK, Gentry C., Hobbs C., Malcangio M. C57Bl/6 farelerinde osteoartritin monosodyum iyodoasetat modelinde ağrı benzeri davranış ve spinal değişiklikler. Eur J Ağrı. 2013; 17 (4):514–526. doi: 10.1002/j.1532-2149.2012.00223.x. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
22. Lin JY, Tang CY Seçilen meyve ve sebzelerde toplam fenolik ve flavonoid içeriğinin yanı sıra bunların fare splenosit proliferasyonu üzerindeki uyarıcı etkilerinin belirlenmesi. Gıda Kimyası 2007; 101 :140–147. doi: 10.1016/j.foodchem.2006.01.014. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
23. Quercetin tarafından hedeflenen Ma D., Yu T., Peng L., Wang L., Liao Z., Xu W. PIM1, CYP1B1 ve HSPA2, achyranthes bidentata ile osteoartrit tedavisinde önemli roller oynar. eCAM. 2019; 2019 (1):1–10. doi: 10.1155/2019/1205942. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
24. Tang Q., Zheng G., Feng Z., Chen Y., Lou Y., Wang C., et al. Trehaloz, osteoartrit gelişiminde seçici otofaji stimülasyonu ve otofajik akı restorasyonu yoluyla oksidatif stres aracılı mitokondriyal disfonksiyonu ve ER stresini iyileştirir. Hücre Ölüm Dis. 2017; 8 (10) doi: 10.1038/cddis.2017.453. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
25. Lepetsos P., Osteoartritte Papavassiliou AG ROS/oksidatif stres sinyali. Biochim Biophys Açta. 2016; 1862 (4):576–591. doi: 10.1016/j.bbadis.2016.01.003. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
26. Oikonomidis SA, Simos YV, Toliopoulos IK, Verginadis, Oikonomidis AS, Ragos VN, et al. Diz osteoartritinin ciddiyeti üzerine oksidatif stres insidansı. J. Kas-iskelet. Res. 2017; 20 (2):1750008. doi: 10.1142/S0218957717500087. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
27. Mahboubi M. Elaeagnus angustifolia ve osteoartritte terapötik uygulamaları. End. Mahsul Üretimi 2018; 121 :36–45. doi: 10.1016/j.indcrop.2018.04.051. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
28. Nikniaz Z., Ostadrahimi A., Mahdavi R., Ebrahimi AA, Nikniaz L. Elaeagnus angustifolia L. takviyesinin diz osteoartritli kadınlarda serum inflamatuar sitokinler ve matris metaloproteinaz seviyeleri üzerindeki etkileri. Med. 2014; 22 (5):864–869. doi: 10.1016/j.ctim.2014.07.004. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
29. Ebrahimi AA, Nikniaz Z., Ostadrahimi A., Mahdavi R., Nikniaz L. Elaeagnus angustifolia L. bütün meyve ve medulla tozunun diz osteoartritli kadınlar üzerindeki etkisi: randomize, kontrollü bir klinik çalışma. Eur J Integr Med. 2014; 6 (6):672–679. doi: 10.1016/j.eujim.2014.07.016. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
30. Wei B., Zhang Y., Tang L., Ji Y., Yan C., Zhang X. Bir tavşan diz osteoartrit modelinde quercetin'in inflamasyona ve oksidatif strese karşı koruyucu etkileri. İlaç Devi Arş. 2019; 80 (3):360–367. doi: 10.1002/ddr.21510. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
31. Qiu L., Luo Y., Chen X. Quercetin, OA farelerinde yukarı regüle edilmiş AMPK/SIRT1 sinyal yolu yoluyla mitokondriyal işlev bozukluğunu ve biyogenezisi azaltır. Biyomedikal Eczacı. 2018; 103 :1585–1591. doi: 10.1016/j.biopha.2018.05.003. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
32. Lay E., Samiric T., Handley CJ, Ilic MZ Eklem kıkırdağının curcumin veya quercetin'e kısa ve uzun süreli maruz kalması agrekan kaybını engeller. J Nutr Biochem. 2012; 23 (2):106–112. doi: 10.1016/j.jnutbio.2010.11.004. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
33. Akhtar N., Rasheed Z., Ramamurthy S., Anbazhagan AN, Voss FR, Haqqi TM MicroRNA-27b, insan osteoartrit kondrositlerinde matris metalloproteinaz 13'ün ekspresyonunu düzenler. Artrit Rheum. 2010; 62 (5):1361–1371. doi: 10.1002/2Fart.27329. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
34. Gallagher B., Tjoumakaris FP, Harwood MI, Good RP, Ciccotti MG, Freedman KB Kondroproteksiyon ve dizde osteoartrit ilerlemesinin önlenmesi: tedavi ajanlarının sistematik bir incelemesi. Ben J Sports Med. 2015; 43 (3):734–744. doi: 10.1177/2F0363546514533777. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
35. Takahashi K., Goomer RS, Harwood F., Kubo T., Hirasawa Y., Amiel D., et al. Hiyalüronanın osteoartrit gelişimi sırasında matriks metalloproteinaz-3 (MMP-3), interlökin-1β(IL-1β) ve metaloproteinaz-1 (TIMP-1) gen ekspresyonunun doku inhibitörü üzerine etkileri. Osteoartrit Kıkırdak. 1999; 7 (2):182–190. doi: 10.1053/joca.1998.0207. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
36. Lee YJ, Lee EB, Kwon YE, Lee JJ, Cho WS, Kim HA, et al. Östrojenin, osteoartrit kondrositlerinde matris metaloproteinaz (MMP)-1, MMP-3 ve MMP-13'ün ekspresyonu ve metaloproternaz-1'in doku inhibitörü üzerindeki etkisi. Romatol Uluslararası 2003; 23 (6):282–288. doi: 10.1007/s00296-003-0312-5. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]

[maturidi]

Elaeagnus Angustifolia L. Yapraklarının Antimikrobiyal, Antioksidan ve Antimutajenik Aktiviteleri Üzerine Bir Araştırma

Gök Ökmen ve O Türkcan
Yazar bilgileri Telif hakkı ve Lisans bilgileri PMC Sorumluluk Reddi
Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi, Fen Fakültesi, Biyoloji Bölümü, TÜRKİYE
Sorumlu yazar.
E-posta: moc.liamg@nemkonetlug
Git: Soyut
arka plan
Bu çalışmanın amacı, E. angustifolia'dan elde edilen metanol ekstraktlarının antimikrobiyal, antioksidan ve antimutajenik potansiyellerini araştırmaktı .

Malzemeler ve yöntemler
Metanol ekstraktları, farklı 4 Gram pozitif ve 3 Gram negatif bakteri türlerine ve bir mantara karşı antimikrobiyal aktivite açısından tarandı. Bu bakteriler, gıda patojenlerini içerir. Yaprak özü, disk difüzyon tahlili kullanılarak test edildi.

Sonuçlar
E. angustifolia'nın metanol ekstraktı, Yersinia enterocolitica'ya karşı maksimum 16 mm'lik inhibisyon bölgesi gösterdi . Oysa Escherichia coli ATCC 1122 ve Candida albicans RSKK 02029'a karşı metanol ekstraktı ile inhibisyon bölgesi belirlenmemiştir. MIC, bitki ekstraktları üzerinde antimikrobiyal aktivite olarak değerlendirilmiştir. Yersinia enterocolitica hariç tüm bakteri suşları, E. angustifolia'nın metanol ekstraktına (3,5 mg/mL) karşı en düşük duyarlılığı göstermiştir.NCTC 11174. Ek olarak bitki özleri, kararlı DPPH (2,2-difenil-1-pikril-hidrazil-hidrat) serbest radikaline karşı test edildi. Son olarak, metanol ekstraktı güçlü bir antioksidan aktivite sergiledi (Trolox eşdeğeri = 1.49 mM). Ayrıca E. angustifolia metanol özleri, sıçan mikrozomal karaciğer enzimi (-S9) yokluğunda Ames testi ile sodyum azite karşı antimutajenik aktiviteleri açısından tarandı. Sonuçlar, E. angustifolia metanol ekstraktlarının sodyum azidin mutajenik ajanlarını inhibe edebildiğini gösterdi. %36 sodyum azit inhibisyonuna sahip bitki yaprağı ekstraktları, Salmonella typhimurium TA100'deki mutajenik ajanları azaltmada orta düzeyde bir potansiyel göstermiştir .

Çözüm
E. angustifolia metanol özleri, antimikrobiyal, antioksidan ve antimutajenik potansiyele sahiptir.

Anahtar Kelimeler: Elaeagnus , antimikrobiyal aktivite, antioksidan aktivite, antimutajenik aktivite
Git: giriiş


Şifalı bitkiler, çeşitli rahatsızlıkların tedavisinde sıklıkla kullanılan değerli bitkisel ürünler veren doğal kaynaklardır ( Grabley ve Thiericke, 1999 ). Elaeagnus angustifolia (Rus zeytini, Rus gümüş üzümü, Zakkum) bu bitkilerden biridir ( Farahbakhsh ve ark. , 2011 ). E. angustifolia, Elaeagnaceae familyasının bir üyesidir . E. angustifolia flavonoid bileşikleri, sitosteroller, kardiyak glikozitler, terpenoidler içerir ( Burgess, 2008 ; Beigom Taheri ve diğerleri , 2010). Flavonoidler, flavon, flavonoller, izoflavon, flavanol, flavanon, antosiyanin ve proantosiyanidin dahil olmak üzere düşük moleküler ağırlıklı polifenolik maddelerden oluşan bir grup, meyve ve sebzelerde yaygın olarak bulunur. Aslında, bu flavonoid bileşikler, güçlü in vitro ve in vivo antioksidan aktiviteleri ve serbest radikalleri temizleme, radikal zincir reaksiyonunu kırma ve metalleri şelatlama yetenekleri nedeniyle gıda ve tıp bilimcilerinin dikkatini çekmiştir ( Liu ve Yao, 2007 ). Şimdiye kadar, (+)-catechin, (-)-epicatechin, (+)-gallocatechin, (-)-epigallocatechin, kaempferol, quercetin, luteolin, isorhamnetin ve isorhamnetin-3-O -β-D-galactopyranoside dahil olmak üzere dokuz flavonoid zaten bu bitkiden izole edilmiş ve tanımlanmıştır (Si ve ark. , 2009 ; Wang ve Wei, 2010 ). Tıbbi bitkiler, zengin bir antimikrobiyal madde kaynağını temsil eder. Bu bitkiler, farklı ülkelerde tıbbi olarak kullanılmaktadır ve birçok etkili ve güçlü ilacın kaynağıdır ( Srivastava ve diğerleri , 1996 ). Dünya Sağlık Örgütü'ne göre, şifalı bitkiler, çeşitli ilaçlar elde etmek için en iyi kaynak olacaktır. Bu nedenle, özelliklerini, güvenliklerini ve etkinliklerini daha iyi anlamak için bu tür bitkiler araştırılmalıdır ( Nascimento ve diğerleri , 2000 ).

Birçok bitki antimikrobiyal özellikleri nedeniyle, özellikle bitkinin sekonder metabolizmasında sentezlenen bileşikler nedeniyle kullanılmıştır. E. angustifolia yapraklarının antimikrobiyal aktivitesi araştırılmamıştır. Muğla'da yetişen bitkinin yaprak kısımlarının in vitro antimikrobiyal aktivitesi disk difüzyon yöntemi kullanılarak değerlendirilmiştir. Ek olarak, E. angustifolia'nın antioksidan ve antimutajenik aktiviteleri bildirilmemiştir. Bu çalışmada, bitki yapraklarından elde edilen metanol ekstraktlarının antimikrobiyal, antioksidan ve antimutajenik aktiviteleri incelenmiştir.

Git: Araç ve yöntemler

Bitki materyali

E. angustifolia örnekleri Temmuz 2012'de Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi Yerleşkesinden toplanmıştır. Bitki materyali Olcay Ceylan tarafından doğrulanmıştır ve Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi Biyoloji Bölümü herbaryumunda bir örnek depolanmıştır. Bu örneklerin teşhisleri Flora of Turkey ( Davis, 1965 ) kullanılarak yapılmıştır . Yapraklar 2-3 kez akan su ve bir kez de steril distile su ile iyice yıkandı. Taze bitki materyali havayla kurutuldu. Kurutulmuş yapraklar bir karıştırıcıda toz haline getirildi. Tüm numuneler, ilk numune hazırlığına kadar ortam sıcaklığında saklandı, ardından analiz için gerekli olana kadar 4 °C'de saklandı. bitki çıkarma

Bitki örneklerinin (10 g) havayla kurutulmuş ve toz haline getirilmiş yaprakları, Soxhlet aparatı kullanılarak metanol (100 mg/mL) ile özümlendi. Ekstrakt buharlaştırıldı ve daha sonra metanol içerisinde ekstrakte edildi ve daha sonra kullanılana kadar küçük steril opak şişelerde soğutulmuş koşullar altında tutuldu.

Mikroorganizmalar ve yetiştirme
Bitki yapraklarının özleri, Bacillus subtilis RSKK 245, Staphylococcus aureus RSKK 2392, Salmonella typhimurium RSKK 19, Enterococcus faecalis ATCC 8093, Escherichia coli ATCC 11229, Listeria monocytogenes ATCC 7644, Yersinia enterocolitica NCTC 11174 ve Can gibi gıda patojenik suşlara karşı ayrı ayrı test edilmiştir. Candida albicans RSKK 02029. Bakteriler, Mueller-Hinton Broth (Merck) içinde 37°C'de 24 saat büyütüldü. C. albicans, Sabouraud Dextrose Broth (Merck) içinde 30°C'de 24-48 saat büyütüldü. Bu bakteri suşları ve C. albicansATCC (Amerikan Tip Kültür Koleksiyonu, ABD), RSKK (Refik Saydam Ulusal Tip Kültür Koleksiyonu, Türkiye) veya NCTC'den (Ulusal Tip Kültür Koleksiyonu) temin edildi.

Antimikrobiyal aktivite testi
Antimikrobiyal aktivite için Bauer-Kirby yöntemi uygulandı. Yaprak metanol özü, disk difüzyon tahlili kullanılarak test edildi. Bakteriler, 37°C'de Mueller-Hinton agar plakalarında (MHA, Merck) tutuldu ve mantar, Sabouraud Dextrose agar plakalarında (SDA, Merck) tutuldu ( Bauer ve diğerleri , 1966 ). Bakteriler ve C. albicans kültürleri 0.5 McFarland'a ayarlandı. Bu deney üç kopya halinde gerçekleştirildi. İnkübasyonlar, bakteriler için 24 saat boyunca 37°C'de yapıldı. C. albicans30°C'de 24 saat inkübe edildi. İnkübasyondan sonra inhibisyon bölgeleri oluştu ve ölçüldü. Negatif kontrol olarak metanol kullanıldı. Tetrasiklin (30 ug), kloramfenikol (30 ug), vankomisin (30 ug), nistatin (100 ug), penisilin (10 ug), ampisilin (10 ug) ve eritromisin (15 ug) antibiyotikleri pozitif kontrol olarak kullanıldı.

Minimum inhibitör konsantrasyonun (MIC) belirlenmesi
MIC, bitki özleri üzerinde antimikrobiyal aktivite olarak değerlendirildi. MIC, inkübasyondan sonra büyümeyi engelleyen en düşük konsantrasyon olarak alındı. Seri seyreltme deneyi, CLSI standartlarında ( CLSI, 2003 ; CLSI, 2006 ) açıklandığı gibi yapıldı. Bu test, her ekstraktın nihai konsantrasyonlarında (6.5; 3.25; 1.625; 0.812; 0.406 mg/mL) yapıldı.

İn vitro Antioksidan Aktivite
Antioksidan aktiviteler, serbest radikal olarak DPPH kullanılarak belirlendi. 3.9 mL 0.1 mM metanol DPPH çözeltisine ekstrakt (0.1 mi) eklendi. 30 dakika inkübasyondan sonra ekstraktın absorbansı spektrofotometre kullanılarak 515 nm'de belirlendi. Metanol içindeki DPPH, kontrol olarak kullanıldı ( Brand-Williams ve diğerleri , 1995 ). DPPH radikal süpürme aktivitesi, aşağıdaki formül kullanılarak belirlendi: DPPH radikal süpürme aktivitesi (%) = [Abs (kontrol) - Abs (ekstrakt)] × 100.

In vitro Antimutajenik Aktivite
Antimutajenik aktivite , Dr. BN Ames (Berkeley, CA, ABD) tarafından sağlanan Salmonella typhimurium tester suşları TA98 ve TA100 kullanılarak, ön inkübasyon yöntemiyle (-S9) metabolizasyonu olmadan (-S9) Salmonella -mikrozom testi ile değerlendirildi ( Maron ve Ames, 1983 ). Maron ve Ames'in (1983) Salmonella histidin nokta mutasyon deneyi, S9 karışımı içermeyen ekstraktların antimutajenik aktivitesini test etmek için kullanıldı. Bu çalışmada, E. angustifolia metanol ekstraktlarının antimutajenitesini ölçmek için iki farklı tester suş kullanıldı . Bu suşlar Salmonella typhimurium'u içermektedir.TA 98 ve TA 100. İnhibisyon yüzdesinin hesaplanması, Ong ve diğerleri (1986) tarafından verilen formüle göre yapıldı: Antimutajenik Yüzde = [1-T/M] x100; burada T, mutajen ve test numunesinin mevcudiyetinde plaka başına geri dönenlerin sayısıdır ve M, pozitif kontrolde plaka başına geri dönenlerin sayısıdır ( Ong ve diğerleri , 1986 ).

Git: Sonuçlar

E. angustifolia yaprak metanol ekstraktlarının antimikrobiyal aktivitesi, gıdalarda bazı hastalıklara neden olduğu bilinen 8 mikroorganizma test türüne karşı in vitro olarak değerlendirilmiştir . Kullanılan bitkinin metanol ekstraktının test bakterilerine karşı antimikrobiyal aktivitesinin sonuçları, aşağıda gösterilmiştir.tablo 1. Ayrıca referans antibiyotiklerin test mikroorganizmalarına karşı inhibisyon zon çapları da gösterilmiştir.Tablo 2. tablo 1


Elaeagnus angustifolia yaprak özlerinin antimikrobiyal aktivitesi

mikroorganizmalar	İnhibisyon bölgesi (mm)
Basil subtilis RSKK 245	9
Staphylococcus aureus RSKK 2392	9
Listeria monocytogenes ATCC 7644	11
Enterococcus faecalis ATCC 8093	10
Escherichia coli ATCC 1122	-
Yersinia enterocolitica NCTC 11174	16
Salmonella typhimurium RSKK 19	9
Candida albicans RSKK 02029	-

Ayrı bir pencerede aç Tablo 2


Mikroorganizmaları test etmek için referans antibiyotiklerin inhibisyon bölgesi çapları

mikroorganizmalar	Antibiyotikler (inhibisyon bölgesi-mm)
TE	C	VA	NS	P	AM	E
Basil subtilis RSKK 245	(nt)	(nt)	(nt)	(nt)	10	10	(nt)
Staphylococcus aureus RSKK 2392	(nt)	(nt)	(nt)	(nt)	(nt)	10	(nt)
Listeria monocytogenes ATCC 7644	(nt)	(nt)	(nt)	(nt)	10	12	(nt)
Enterococcus faecalis ATCC 8093	(nt)	(nt)	(nt)	(nt)	(-)	(-)	(nt)
Escherichia coli ATCC 11229	14	20	(nt)	(nt)	10	(nt)	(nt)
Yersinia enterocolitica NCTC 11174	20	30	(-)	(nt)	(nt)	(nt)	(nt)
Salmonella typhimurium RSKK 19	14	21	(-)	(nt)	(nt)	(nt)	(nt)
Candida albicans RSKK 02029	(nt)	(nt)	(nt)	7	(nt)	(nt)	(nt)

Ayrı bir pencerede aç
TE: Tetrasiklin (30ug); C: Kloramfenikol (30ug); VA: Vankomisin (30 ug); NS: Nistatin (100ug); P: Penisilin (10ug); AM: ampisilin (10ug); E: Eritromisin (15ug); (-) : bölge oluşmadı; (nt): test edilmedi

Sonuçlar, bitki yaprağının metanol ekstraktının altı bakterinin büyümesini inhibe ettiğini ve inhibisyon bölgelerinin 9-16 mm arasında değiştiğini göstermektedir. Ayrıca, bu bitkinin metanolik ekstraktı, kullanılmış mayaya karşı antikandidal etki belirlememiştir. Ayrıca, E. angustifolia'nın metanol ekstraktı , kullanılan bir Gram negatif bakteriye karşı antimikrobiyal etki göstermemiştir. Sonuçlar ayrıca bitki yapraklarının metanol ekstraktlarının 9 mm inhibisyon bölgeleri ile 3 bakterinin büyümesini inhibe ettiğini göstermektedir.

Kullanılan tüm materyaller için mm cinsinden inhibisyon zonu olarak kaydedilen antimikrobiyal aktivite sonuçları aşağıdaki gibidir: Yaprağın metanol ekstraktının E. coli ATCC 1122 hariç tüm Gram pozitif ve negatif bakterilere karşı oldukça etkili olduğu bulunmuştur. (tablo 1). Maksimum inhibisyon bölgesi, Yersinia enterocolitica NCTC 11174'e (16 mm) karşı metanol ekstraktı tarafından üretildi . Escherichia coli ATCC 1122 ve Candida albicans RSKK 02029'a karşı metanol ekstraktı ile inhibisyon zonu saptanmazken, Escherichia coli ATCC 1122 ve Candida albicans RSKK 02029 metanol ekstraktına dirençli bulundu. Ekstraktın Bacillus subtilis RSKK 245, Staphylococcus aureus RSKK 2392 ve Salmonella typhimurium RSKK 19'un büyümesini önlemede eşit derecede etkili olduğu bulundu .

Tetrasiklin (30 ug), kloramfenikol (30 ug), vankomisin (30 ug), nistatin (100 ug), penisilin (10 ug), ampisilin (10 ug) ve eritromisin (15 ug) antibiyotikleri pozitif kontrol olarak kullanıldı. Tetrasiklin ve kloramfenikol, Yersinia enterocolitica'nın büyümesini çok güçlü bir şekilde inhibe ederken , kloramfenikol, Salmonella typhimurium ve E. coli'ye karşı çok büyük bir inhibisyon bölgesi sergiledi (Tablo 2).

Tablo 3seri seyreltme yöntemi kullanılarak elde edilen E. angustifolia yaprağı metanol ekstraktlarının MIC'lerini gösterir . Yersinia enterocolitica NCTC 11174 (6,5 mg /mL) hariç tüm bakteri suşları, E. angustifolia'nın (3,25 mg/mL) metanol ekstraktına karşı en düşük duyarlılığı göstermiştir . Tablo 3


E. angustifolia'nın metanolik ekstraktlarının minimum inhibe edici konsantrasyonu

bakteri	MİK (mg/mL)
Basil subtilis RSKK 245	3.25
Staphylococcus aureus RSKK 2392	3.25
Salmonella typhimurium RSKK 19	3.25
Enterococcus faecalis ATCC 8093	3.25
Escherichia coli ATCC 11229	3.25
Listeria monocytogenes ATCC 7644	3.25
Yersinia enterocolitica NCTC 11174	6.5
Candida albicans RSKK 02029	3.25

Ayrı bir pencerede aç
Bitki ekstraktının antioksidan aktivitesi, DPPH radikal yakalama kapasitesi ile değerlendirildi.Tablo 4referans olarak troloks ile DPPH radikal yakalama kapasitesinin yüzdesini gösterir. Ekstrakt, 100 mg/mL konsantrasyonda %57 inhibisyon gösterdi (Tablo 4). Tablo 4


E. angustifolia yaprak ekstraktının DPPH radikal süpürme kapasitesi

Bitki materyali (100 mg/mL)	Troloks eşdeğeri (mM)
57 ± 0,08	1.49

Ayrı bir pencerede aç
E. angustifolia yapraklarının antimutajenik potansiyeli üzerine yapılan çalışmalardan elde edilen sonuçlar,Tablo 5. E. angustifolia'nın antimutajenitesini değerlendirmek için numune plakalarına tanısal mutajenler dahil edildi. Bu çalışmada, bitki yapraklarının antimutajenitesini ölçmek için iki farklı tester suşu kullanıldı. E. angustifolia yaprak ekstresi (100 mg/plaka), Salmonella typhimurium TA 100 için zayıf bir pozitif inhibitör etki (%36) göstermiştir. Öte yandan, ekstrakt, Salmonella typhimurium TA 98 için mutajenik etki belirlemiştir (Tablo 5). Tablo 5


E. angustifolia yaprak ekstraktının (100 mg/plaka) antimutajenik etkisi

test maddeleri	Salmonella typhimurium TA 98 + S9 -		Salmonella typhimurium TA 100 + S9 -
	Geri dönenler (CFU/plaka)	İnhibisyon (%)	Geri dönenler (CFU/plaka)	İnhibisyon (%)
Kontrol	42±3		42±3
Pozitif kontrol (sodyum azid)	80±5		251±5
Negatif kontrol (metanol)	43±1		43±1
E. angustifolia yaprağı ekstresi	66±1	mutajenik	161±35	36

Ayrı bir pencerede aç
Git: Tartışma

Şifalı bitkiler dünya çapında geleneksel olarak çeşitli insan hastalıklarının tedavisi için kullanılmaktadır ( Chitme ve diğerleri , 2004 ). Birçoğu yeni farmasötikler geliştirmek için bileşikler olarak kullanılmış olan bol miktarda biyolojik olarak aktif bileşik kaynakları olduklarını kanıtladılar ( Palombo, 2011 ). E. angustifolia, ilgili etnomedikal kullanımına göre seçilmiştir ( Baytop, 1999 ; Bulut ve diğerleri , 2010).

Bu çalışmada, metanolde elde edilen bitki yaprağı ekstresi, 8 test organizması türüne karşı test edilmiştir. Antimikrobiyal aktivite, standart antibiyotiklerle karşılaştırıldı. Bununla birlikte, metanol ekstresi, Yersinia enterocolitica'ya karşı maksimum inhibisyon göstermiştir (tablo 1). Birçok bitki türünden elde edilen uçucu yağların antibakteriyel aktiviteleri kapsamlı bir şekilde araştırılmış olmasına rağmen, bu bitkinin antimikrobiyal mekanizması çok detaylı olarak rapor edilmemiştir. Esansiyel yağların aktif antimikrobiyal bileşikleri doğaları gereği fenolikler ve terpenler olduğundan ( Jansen ve diğerleri , 1987 ; Saxena ve diğerleri , 1994 ), bunların etki biçimlerinin diğer fenolik bileşiklerinkine benzer olması makul görünmektedir. Flavonoidler ve fenolik bileşikler bitkilerde hali hazırda rapor edilmiştir ( Chopra ve diğerleri , 1986 ). Bu bileşikler antibakteriyel ve antifungal aktivitelere sahiptir. Bu çalışmada yaprakların metanol ekstraktlarının hastalığa karşı etkili olduğu tespit edilmiştir.S. typhimurium RSKK 19 (tablo 1). Ratha ve ark. (2012) , Hemidesmus sp. ve Vetiveria sp. Salmonella typhi'nin büyümesi üzerinde en yüksek antibakteriyel aktiviteyi sergiledi . Bu çalışmada yaprak metanol ekstraktının S. aureus RSKK 2392'ye karşı en düşük etkili olduğu bulunmuştur (tablo 1). Eclipta alba yaprağı ekstraktı ile benzer sonuçlar Peraman ve ark. (2011).

Fenolik bileşikler, son 30 yılda kapsamlı bir şekilde araştırılmıştır. Potansiyel olarak indirgeyici ajanlar, hidrojen veren antioksidanlar ve singlet oksijen söndürücüler olarak hareket edebilen hidroksil gruplarını taşıyan bir veya daha fazla aromatik halkaya sahiptirler ( Rice-Evans ve diğerleri , 1996 ; Mattei ve diğerleri , 1998 ). Fitokimyasal çalışmalar, E. angustifolia'nın sulu meyve özütünün sitosteroller, kardiyak glikozitler, terpenoidler gibi flavonoid bileşikleri içerdiğini göstermektedir ( Burgess, 2008 ; Beigom Taheri ve diğerleri , 2010)). Flavonoidler biyolojik sistemlerde farklı roller oynarlar. Flavonoidler, fenolik hidroksil grupları ve metalleri şelatlama kapasiteleri nedeniyle antioksidan aktivitelere sahiptir ve serbest radikal seviyelerini azaltabilir ve lipid peroksidasyonunu azaltabilir. Ayrıca bu ekstrakt, bu bitkinin terapötik etkilerinden sorumlu olduğuna inanılan antioksidan aktiviteye sahiptir ( Robak ve Gryglewski, 1996 ). Bu çalışmada, metanol ekstraktı 100 mg/ml konsantrasyonlarda %57 serbest radikal inhibisyonu göstermiştir (Tablo 4). Alseodaphne semecarpifolia yaprak özütü ile benzer sonuçlar Charles ve arkadaşları tarafından elde edilmiştir . (2012) . Başka bir araştırma, guarana tohumu metanol ekstraktının yüksek antibakteriyel aktiviteye sahip olmasının yanı sıra yüksek fenolik içeriklere sahip olduğunu bulmuştur ( Majhenic ve diğerleri , 2007 ). DPPH serbest radikal yöntemi kullanılarak bitki ekstraktlarının taranmasının, antioksidan aktiviteye sahip olabileceklerin seçiminde etkili olduğu kanıtlanmıştır.

Bu özler, antioksidanlar olarak bilinen flavonoidler gibi radikal temizleyiciler açısından zengin olabilir. Birçok şifalı bitkinin serbest radikal süpürücü ve antioksidan aktivitelerinin kansere, doku iltihabına, kardiyovasküler hastalığa karşı terapötik etkilerinden sorumlu olduğu bildirilmiştir ( Cai ve diğerleri , 2004 ).

Çalışmamızda E. angustifolia yaprak ekstraktı (100 mg/plaka) Salmonella typhimurium TA 100 (Tablo 5). Genel olarak, dolaylı ve doğrudan etkili mutajenlerin mutajenitesini güçlü bir şekilde engelleyen bileşikler ayrıca yüksek bir serbest radikal süpürme aktivitesine sahiptir ( Chung ve diğerleri , 2007 ; Chung ve diğerleri , 2008 ). Yukarıdaki sonuçlardan, bitki özlerinin gıda patojenlerine karşı antimikrobiyal, antioksidan ve antimutajenik bileşikler olarak büyük potansiyele sahip olduğu sonucuna varılabilir. E. angustifolia'nın gösterdiği önemli antimutajenik aktivite, bu bitkinin geleneksel kullanımı için bilimsel bir doğrulama sağlar. Çalışmamız, E. angustifolia'nınyaprak etkili ve güvenli antioksidan, antimutajen ve antibakteriyel kaynak olarak kullanılabilir. Ancak, E. angustifolia'nın biyolojik aktivitelerinden sorumlu olan başka biyoaktif bileşiklerin araştırılmasına ihtiyaç vardır.

Git: Referanslar

1. Bauer AW, Kirby WM, Sherris JC, Turck M. Standart tek disk yöntemiyle antibiyotik duyarlılık testi. Ben J Clin Pathol. 1966; 45 (4):493–496. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
2. Baytop T. Türkiye'de Şifalı Bitkilerle Tedavi (Geçmişten Günümüze) Nobel Tıp Yayını İstanbul; 1999. [ Google Akademik ]
3. Beigom Taheri J, Anbari F, Maleki Boostani S, Zarghi A, Pouralibaba F. Semptomatik Oral Liken Planus Tedavisinde Elaeagnus angustifolia Topikal Jelin Etkinliği . J Dent Res Dent Clin Dent Beklentileri. 2010; 4 (1):29–32. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
4. Brand-Wıllıams W, Cuvelier ME, Berset C. Antioksidan aktiviteyi değerlendirmek için bir serbest radikal yönteminin kullanımı. Lebensm-Wiss Technol. 1995; 28 :25–30. [ Google Akademik ]
5. Bulut G, Tuzlacı E, İşbilen DF A. Türk Halk Şifalı Bitkileri, VIII: Lalapaşa (Edirne) Marmara Pharma J. 2010; 14 :47–52. [ Google Akademik ]
6. Burgess C. Topikal vitaminler. J İlaçlar Dermatol. 2008; 7 (7):2–6. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
7. Cai Y, Luo Q, Sun M, Corke H. Antikanserle ilişkili 112 geleneksel Çin şifalı bitkisinin antioksidan aktivitesi ve fenolik bileşikleri. Hayat Bilimi 2004; 74 :2157–2184. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
8. Charles A, Joseph M, Ramani VA. Alseodaphne semecarpifolia yaprak ekstraktının in vitro antioksidan potansiyeli . Eur J Exp Biol. 2012; 2 (2):354–357. [ Google Akademik ]
9. Chitme HR, Chandra M, Kaushik S. Calotropis gigantea R. Br'nin anti-ishal aktivitesi üzerine çalışmalar . deney hayvanlarında. J Ecz Ecz. Sci. 2004; 7 :70–75. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
10. Chopra RN, Nayar SL, Chopra LC. Hint şifalı bitkiler sözlüğü. Yeni Delhi: Bilimsel ve Endüstriyel Araştırma Konseyi; 1986. [ Google Akademik ]
11. Chung MJ, Kang AY, Park SO, Park KW, Jun HJ, Lee SJ . E vitamini eklenmiş veya eklenmemiş diyet otunun ( Artemisia Princes ) esansiyel yağlarının oksidatif stres ve kolesterolle ilgili bazı genler üzerindeki etkisi metabolizma. Gıda Kimyasal Toksikol. 2007; 45 :1400–1409. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
12. Chung MJ, Sung NJ, Park CS, Kweon DK, Mantovani A, Moon TW, Lee SJ, Park K H. HepG2 hücresinde ve C57 BL/6J farelerinde suda çözünür puerarin glikozitlerin antioksidan ve hipokolesterolemik aktiviteleri. Eur J Pharmacol. 2008; 578 :159–170. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
13. Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü (CLSI), yazar Metotlar Seyreltme Yöntemleri Aerobik Olarak Büyüyen Bakteriler için Antimikrobiyal Duyarlılık Testi; Onaylı Standart M7-A. 6edn. Wayne, Philadelphia: Ulusal Klinik Laboratuvar Standartları Komitesi; 2003. [ Google Akademik ]
14. Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü (CLSI), yazar Antimikrobiyal Duyarlılık Testi için Performans Standartları 16. ^Bilgi Eki M100-S16. Wayne, Philadelphia: Ulusal Klinik Laboratuvar Standartları Komitesi; 2006. [ Google Akademik ]
15. Davis P H. Türkiye ve Doğu Ege Adaları Florası. Edinburg: Edinburg Üniversitesi Yayınları; 1965. [ Google Akademik ]
16. Farahbakhsh S, Arbabian S, Emami F, Rastegar Moghadam B, Ghoshooni H, Noroozzadeh A, Sahraei H, Golmanesh L, Jalili C, Zrdooz H. Farelerde Elaeagnus angustifolia'nın sulu ekstraktı ile Cyclooxygenase tip 1 ve 2 enziminin inhibisyonu . Temel Klinik Nörobilim. 2011; 2 (2):31–37. [ Google Akademik ]
17. Grabley S, Thiericke R. Doğadan ilaç keşfi. Berlin: Springer; 1999. Doğal ürünlerin ilaç keşfi üzerindeki etkisi. [ Google Akademik ]
18. Jansen AM, Cheffer JJC, Svendsen A B. Uçucu yağların antimikrobiyal aktivitesi: 1976-1986 literatür taraması. Test yöntemlerinin yönleri. Bitki Med. 1987; 40 :395–398. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
19. Liu Q, Yao HY. Arpa tohumu özlerinin antioksidan aktiviteleri. Gıda Kimyası 2007; 102 :732–737. [ Google Akademik ]
20. Majhenic L, Skerget M, Knez Z. Guarana tohumu ekstraktının antioksidan ve antimikrobiyal aktivitesi. Gıda Kimyası 2007; 104 :1258–1268. [ Google Akademik ]
21. Maron DM, Ames B N. Salmonella Mutajenite Testi için Gözden Geçirilmiş Yöntemler. Mutat Arş. 1983; 113 :173–215. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
22. Mattei R, Dias RF, Espinola FB, Carlini EA, Barros SB M. Guarana ( Paullinia cupana ): laboratuvar hayvanlarında toksik davranışsal etkiler ve in vitro antioksidan aktivite . J Ethnopharm. 1998; 60 :111–116. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
23. Nascimento GGF, Lacatelli J, Freitas PC, Silva GL. Bitki ekstraktlarının ve fitokimyasalların antibiyotiğe dirençli bakteriler üzerindeki antibakteriyel aktivitesi. Brezilyalı J Microbiol. 2000; 31 (4):886–891. [ Google Akademik ]
24. Ong T, Wong W, Stwart J D. Chlorophyllin, çevresel ve diyet kompleksi karışımına karşı güçlü bir antimutajen. Nutr Arş. 1986; 173 :111–115. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
25. Palombo EA. Oral bakterilere karşı aktiviteye sahip geleneksel şifalı bitki özleri ve doğal ürünler: Oral hastalıkların önlenmesi ve tedavisinde potansiyel uygulama. Kanıta Dayalı Tamamlayıcı Alternatif Med. 2011 680354. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
26. Peraman MK, Ramalingam P, Bapatla JNN S. Eclipta alba yapraklarının ekstraktlarının antiinflamatuar ve antimikrobiyal aktiviteleri . Eur J Exp Biol. 2011; 1 (2):172–177. [ Google Akademik ]
27. Ratha M, Subha K, Senthilkumar G, Panneerselvam A. Hemidesmus indicus (L.) ve Vetiveria zizanoides (L.) Europ J Experim Biol. 2012; 2 (2):363–368. [ Google Akademik ]
28. Rice-Evans CA, Miller NM, Paganda G. Flavonoidlerin ve fenolik asitlerin yapı-antioksidan aktivite ilişkileri. Serbest Radikal Biol Med. 1996; 20 :933–956. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
29. Robak J, Gryglewski R J. Flavonoidlerin biyoaktivitesi. Pol J Pharmacol. 1996; 48 :555–564. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
30. Saxena G, McCutcheon AR, Farmer S, Towers GHN, Hancock RE W. Rhus glabra'nın antimikrobiyal bileşenleri . J Ethnopharm. 1994; 42 :95–99. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
31. Si CL, Xu J, Wu L, Hui LF, Liu PT, Liu Z. Elaeagnus angustifolia kabuğundan antioksidan flavonoidler . Bitki Med. 2009; 75 :943. doi: 10.1055/s-0029-1234478. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
32. Srivastava J, Lambert J, Vietmeyer N. Şifalı bitkiler. Geliştirmede genişleyen bir rol. Washington: Dünya Bankası Teknik. 320; 1996. [ Google Akademik ]
33. Wang XR, Wei S N. Elaeagnus angustifolia'nın biyolojisi ve kimyasal bileşenleri üzerine çalışma. Shannxi Tarım Bilimi. 2010; 6 :47–50. [ Google Akademik ]