Rooibos Çayı, Kızıl Çalı, Aspalathus linearis

[maturidi]

Evde Nasıl Yapıldığından Bir An Önce Keşfetmeniz Gereken Faydalarına: Rooibos Çayı

Zeynep Çetin
Yemek yemediğim zamanları, ne yiyeceğimi düşünerek değerlendiririm.
Son yıllarda popülerleşen bitki çaylarından rooibos çayını yakından tanımak isteyen herkes buraya!

Kendisi son zamanlarda aktarlarda, hatta market raflarında sıkça karşımıza çıkıyor, faydaları sebebiyle her geçen gün rooibos çayı tüketenlerin sayısı artıyor. Peki bu çay gerçekten ne işe yarıyor dersiniz? Gelin bugün hep birlikte rooibos çayı nedir, nasıl yapılır, rooibos çayının faydaları nelerdir birlikte keşfedelim.

Rooibos çayını ilk kez tüketecek olanları da adını şu zamana dek hiç duymamış olanları da hemen aşağıya doğru alalım. Bakalım onu tanıyınca siz neler düşüneceksiniz? Yorumlarda buluşalım. Rooibos çayı nedir?

Son zamanların en popüler isimlerinden rooibos çayı, adını aldığı rooibos bitkisinden elde edilen bitkisel bir çay. Ana vatanı Afrika olan bu özel bitkiden çay hazırlamak isteyenler ise ülkemizde onu güvenilir aktarlardan temin edebiliyor. Piyasada hazır olarak paketlenmiş halde, farklı aromalarla tatlandırılmış şekilde de bulunabiliyor.

Uzun yıllardır vücuda olan faydaları sebebiyle adeta doğal bir ilaç gibi kullanılan bu çayı son zamanlarda daha popüler hale getiren özellikleriyse bağışıklık sistemi üzerinde olan olumlu etkileri ve kafein içermemesi. Rooibos çayını kısaca tanıdığımıza göre gelin bu çayı evde nasıl yaparız, birlikte öğrenelim şimdi. Rooibos çayı nerede bulunur?



Bu özel çayı nereden bulabileceğinizi düşünüyor olabilirsiniz. Hemen açıklayalım: Rooibos çayına aktarlardan ya da doğal ürün satışı yapan market ve mağazalardan ulaşabilirsiniz. Rooibos çayı nasıl yapılır?

Sıra geldi bu nefis çayın nasıl hazırlandığına. Çok pratik bir şekilde hazırlayabileceğiniz bu çay için gerekli malzemeler ve temel bir tarif aşağıda. Rooibos çayı için gerekli malzemeler:

• 1 su bardağı su
• 1 tatlı kaşığı kadar kurutulmuş rooibos bitkisi
• Bir dilim limon, portakal, bal ya da çubuk tarçın gibi lezzetler (Aromalandırmak isterseniz)

Rooibos çayı tarifi nasıl yapılır?

• Suyu kaynatarak işe başlayın.
• Ardından kaynayan suyu bir bardağa alıp içine 1 tatlı kaşığı kurutulmuş rooibos çayını ekleyin ve bardağın ağzını küçük bir tabak ya da kabakla kapatın.
• Bu şekilde yaklaşık 3-4 dakika demlenmeye bırakın.
• Ardından çayı süzdürüp taneleri içinden çıkarın ve afiyetle tüketin.
• Eğer çayın tadını yetersiz bulur ya da beğenmezseniz çayı demleyip süzdürdükten sonra içine çubuk tarçın, dilim halde limon ya da portakal ekleyebilir, çayın biraz ılımasını bekledikten sonra içine bal ilave edip karıştırarak da tüketebilirsiniz. Şifa olsun.

Rooibos çayının faydaları nelerdir?



"Rooibos çayı ne işe yarıyor ki?" diye düşünenleri de hemen böyle alalım ve içeriğindeki yararlı maddeler sayesinde vücuda çeşitli yararları olduğu söylenen bu çayın faydalarını bir bir anlatmaya başlayalım:

• Rooibos çayı düzenli olarak tüketildiğinde bağışıklık sisteminin güçlenmesine yardımcı oluyor.
• Hem kafein hem de şeker içermediği için kan şekerinin dengelenmesine destek oluyor, özellikle kan şekeri yüksek olanlara öneriliyor.
• Kan dolaşımının sağlıkla devam etmesini sağlıyor.
• Bu sayede baş ağrısı başta olmak üzere vücutta oluşan birçok ağrı karşısında doğal bir ağrı kesici etkisi gösteriyor.
• Kasların gevşemesine yardımcı olduğundan stres ve buna bağlı kas ağrılarının, uykusuzluğun önüne geçebiliyor.
• Gergin ve sinirli hissedenlere de rahatlatması sebebiyle sıkça öneriliyor.
• Sindirim sisteminin sağlıkla çalışmasına yardım ediyor.
• Bu özelliği sayesinde özellikle şişkinlik, hazımsızlık, ödem gibi sorunlar yaşayanlara destek oluyor.
• Rooibos çayı karaciğerin sağlıkla çalışmasına da destek oluyor, özellikle karaciğer yağlanması sorunu yaşayanlara iyi geldiği söyleniyor.
• Hücrelerin yenilenmesine ve yeni hücre oluşumuna destek olduğundan cilt sağlığını da olumlu yönde etkiliyor.
• Düzenli olarak tüketildiğinde ciltte oluşan çeşitli yara ve izlerin daha hızlı iyileşmesini sağlıyor.
• Yaşlanma karşıtı bir etki oluşturarak kırışıklıkların oluşmasını olabildiğince geciktirdiği biliniyor.

Çok önemli bir not: Rooibos çayının bilinen ciddi bir yan etkisi bulunmuyor ancak her zaman olduğu gibi sizin tedbiri elden bırakmamanız gerekiyor. Eğer daha önce rooibos çayı tüketmediyseniz temkinli davranmanızda fayda var. Aynı şekilde hamilelik ve emzirme dönemlerindeyseniz doktorunuza danışmadan bu çayı asla tüketmemelisiniz. Düzenli olarak ilaç kullananların, kronik, ciddi bir rahatsızlığı bulunanların, alerjik bir bünyeye sahip olanların da bu çayı tüketmeden önce doktorlarına mutlaka danışmalarında ve doktorlarının önerileri doğrultusunda davranmalarında yarar var. Son olarak her şeyde olduğu gibi rooibos çayında da asla aşırıya kaçmamanız gerektiğini unutmamalısınız, her şeyin fazlası zarar, aman diyelim.

[maturidi]

Aspalathus linearis (Rooibos) ve Agmatin, Bağırsak Sıkı Bağlantı Bütünlüğünü ve Enflamatuar Profili Yararlı Bir Şekilde Modüle Etmek İçin Sinerjistik Olarak Hareket Edebilir

L. Pretorius ¹ ve C. Smith ^{2, *}
Antonella Di Sotto, Akademik Editör ve Silvia Di Giacomo, Akademik Editör
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
¹ Fizyolojik Bilimler Bölümü, Fen Fakültesi, Stellenbosch Üniversitesi, Stellenbosch 7600, Güney Afrika
² Klinik Farmakoloji Anabilim Dalı, Tıp Bölümü, Tıp ve Sağlık Bilimleri Fakültesi, Stellenbosch Üniversitesi, Cape Town 7500, Güney Afrika
^* Yazışma: az.ca.nus@htimsc İlişkili Veriler

Tamamlayıcı Malzemeler Veri Kullanılabilirliği Bildirimi
Git: Soyut


Gastrointestinal sağlığı desteklemek için, gastrointestinal bozuklukların prevalansındaki önemli artışlar terapötik araştırmalardaki benzer artışlarla paralel olmalıdır. Nutrasötik müdahaleler hasta yönetiminde önemli bir rol oynayabilir. Mevcut çalışma , Aspalathus linearis'in potansiyelini belirlemeyi amaçlamıştır.(rooibos), yüksek doz eser-amin (TA) maruziyetinden kaynaklanan gastrointestinal düzensizliği önlemek için. Fonksiyonel gastrointestinal bozukluklardaki önemli kadın önyargısı ve rooibosun önerilen fitoöstrojenitesi göz önüne alındığında, çalışma tasarımı, yeşil rooibos etanol ekstraktının ve 17β-estradiolün (E2) etkileri arasında bir karşılaştırmaya izin verdi. Yüksek seviyelerde ρ-tiramin (TYR) ve agmatin (AGM), ancak β-fenetilamin (PEA) veya triptamin (TRP) değil, prostaglandin E2 (PGE2) hipersekresyonu, sıkı bağlantı proteini (TJP; okludin ve ZO-) artışı ile sonuçlandı. 1) sekresyon ve (farklı olarak) TJP hücresel dağılım profilini bozmuştur. Rooibos ve E2'nin modüle edici faydaları TA'ya özgüdür. Rooibos ön tedavisi genellikle tüm TA koşullarında IL-8 salgılanmasını azalttı ve hem TYR hem de AGM'ye maruz kaldıktan sonra PGE2 aşırı salgılanmasını önledi, ancak yalnızca AGM'ye maruz kalan hücrelerde TJP seviyelerini ve dağılım profilini normalleştirebildi. Buna karşılık, E2 ön tedavisi yalnızca TYR ile ilişkili PGE2 hipersekresyonunu ve TJP düzensizliğini önledi. Birlikte, veriler, rooibos'un fitoöstrojeniteden ziyade antioksidan ve antiinflamatuar etkilerinin, rooibos için gösterilen faydaları etkilediğini göstermektedir.

Anahtar Kelimeler: iz aminler, okludin, ρ-tiramin, 17β-estradiol, prostaglandin E2, HT-29'lar
Git: 1. Giriş


Fonksiyonel gastrointestinal bozukluklar (FGID'ler), yaşam kalitesini önemli ölçüde azaltan ve dünya çapında sağlık sistemlerine muazzam ekonomik yükler getiren oldukça yaygın (küresel nüfusun yaklaşık %40'ı) durumlardır [ 1 , 2 , 3 ]. Daha da önemlisi, birçok FGID'nin kadın ağırlıklı olduğu rapor edilmiştir [ 4 , 5 , 6 , 7 ], bu da gastrointestinal rahatsızlıklara karşı potansiyel olarak östrojen kaynaklı bir kırılganlık olduğunu düşündürür. Mevcut terapötik stratejiler (ilaç ve biyolojik tedaviler dahil) henüz bu yönü ele almamaktadır ve olumsuz kardiyovasküler olaylar gibi olumsuz sistemik etkilerle ilişkilendirilmiştir [ 8 , 9], bu da hasta rahatsızlığını şiddetlendirebilir. Bu nedenle, fonksiyonel gıdaların/nutrasötiklerin kullanımı, yan etkileri en aza indirirken gastrointestinal sağlığın geliştirilmesinde araştırma ilgisi kazanıyor [ 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , 16 ].

Mevcut çalışma bağlamında özellikle ilgi çekici olan, rooibos bitki çayı (fermente edilmemiş veya fermente edilmiş Aspalathus linearis'ten demlenmiştir), önemli ve benzersiz olması nedeniyle fonksiyonel bir gıda olarak halihazırda önerilmiş olan, yaygın olarak tüketilen geleneksel bir Güney Afrika çayıdır [ 17 , 18 ]. güçlü antioksidan etkilerle bağlantılı olan biyoaktif polifenollerin karışımı [ 19 , 20 , 21]. Rooibos ekstraktlarının hazırlanmasının - örneğin, solvent seçimi ve işleme (fermentasyon ya da değil) - elde edilen antioksidan etkinin gücünü etkilediği, yeşil (fermente edilmemiş) ekstraktların daha fazla antioksidan etki gösterdiği gösterilmiştir. Bildirilen mekanizmalar başlıca hidrojen-iyon bağışı ve süperoksit söndürmeyi içerir [ 22 ]. Mevcut çalışmada kullanılan spesifik etanolik yeşil rooibos özütü (GRE) açısından benzer mekanizmalar bildirilmiştir. Örneğin, sinir koruma bağlamında, ORAC değeri 8.1 µmol TE/mg [ 23 ] olan GRE'nin, nöronal hücreleri LPS'den korumak için hem sentetik (DPPH) hem de fizyolojik (süperoksit) radikalleri söndürebildiğini gösterdik. kaynaklı oksidatif hasar [ 23 ].

Spesifik olarak bağırsak sağlığını geliştirme açısından, yetersiz literatür, izo-orientin [24 , 25 ] , quercetin [ 26 , 27 , 28 , 29 , 30 ], krizoeriol, orientin, vitexin ve rutin [ 31 ] çeşitli in vitro ve in vivo modellerde FGID semptomolojisini potansiyel olarak azaltabilir. Son zamanlarda, rooibos'un ekstraksiyona/işlemeye çok bağlı bir şekilde bağırsak mikroplarının salgılama profilini faydalı bir şekilde modüle ettiğini göstererek bu literatürü genişlettik [ 32] .]. Aynı çalışmada, mikrobiyal salgı fonksiyonundaki 17β-östradiol (E2) ile ilişkili değişiklikler, rooibos takviyesinin kadınlarda bağırsak sinyal profilini stabilize edebileceğini ve bunun da hasta yönetimine yardımcı olabileceğini öne sürerek, büyük ölçüde rooibos tarafından reddedildi. Bununla ilgili olarak, rooibos için orta düzeyde bir fitoöstrojenite rapor edilmiştir [ 33 , 34 , 35 ], bu da onu irritabl barsak sendromu gibi kadınların baskın olduğu bozukluklarda araştırma için ilginç bir aday nutrasötik haline getirir.

Wan ve arkadaşlarına göre. (2019), bağırsak sağlığını belirleyen iki önemli faktör, yani bağırsak mikrobiyotası ve bağırsak epitel bariyeri. Gerçekten de, gastrointestinal semptomolojinin abartılmasında eser-aminerjik tutuluma ilişkin mevcut hipotezimize paralel olarak [ 36 ], son zamanlarda yüksek eser-amin (TA) yükünün bağırsak epitelyal sıkı bağlantı proteinleri (TJP'ler) ve enflamatuar üzerindeki zararlı etkilerini gösterdik. durum [ 37 ]. Bu bağlamda, rooibos ve bazı polifenolik bileşenlerinin bilinen zayıf absorpsiyonu ve düşük sistemik biyoyararlanımının [ 38 , 39 , 40] rooibosun faydalı modülasyonu doğrudan bağırsak epitel seviyesinde meydana gelirse önemli bir sınırlama olmayabilir. Bu düşünceyi desteklemek için yakın zamanda yapılan bir gözden geçirme, diyet polifenollerinin bağırsak mikropları tarafından metabolize edilebileceğini ve bunun sistemik olarak olduğu kadar bağırsak epitelyumuna doğru da yararlı etkiler gösterebileceğini ileri sürdü [41 ] . Bağırsak bariyeri bütünlüğü ve bağırsak iltihabı açısından, flavonoidlerin koruyucu etkileri, hem in vitro hem de in vivo modellerin kullanıldığı çeşitli çalışmalarda tarif edilmiştir [ 13 , 42 , 43 , 44] .], nutrasötik müdahalelerin birçok gastrointestinal durumun temelini oluşturan gastrointestinal işlev bozukluğunu ve iltihabı iyileştirebileceğini düşündürmektedir. Bununla birlikte, bildiğimiz kadarıyla, rooibosun bağırsak hücreleri üzerindeki etkilerini araştıran hiçbir çalışma yoktur.

Bu nedenle, rooibos'un bağırsak sağlığını iyileştirme potansiyelini belirlemek için bu çalışma, TA-'ya karşı koruma sağlamak için ön tedavi olarak seçilmiş bir ( ek materyale bakın) rooibos preparasyonunun (yeşil rooibosun etanol özü; GRE) kullanımını araştırmayı amaçladı. kolon adenokarsinomu (HT-29) hücrelerinde eş zamanlı inflamatuar durum değerlendirmeleri ile indüklenen TJP bozulması. Özellikle spesifik TA'lar β-fenetilamin (PEA), triptamin (TRP), ρ-tiramin (TYR) ve agmatin (AGM), gastrointestinal fizyolojideki bilinen rolleri göz önüne alındığında kullanıldı [ 45 , 46 , 47 , 48 , 49 ] ve/veya gastrointestinal bozukluklar [ 50 , 51 , 52]. Ek olarak, enflamatuar değerlendirmeler, mevcut bulguları FGID'lerle ilişkili bilinen enflamatuar profile göre tahmin etmek için bir sitokinler ve prostaglandin E2 (PGE2) panelini içermiştir [ 53 , 54 ]. Rooibos'un potansiyel fitoöstrojenitesinin araştırılmasını sağlamak için, rooibos yerine E2 ön işleminin kullanıldığı paralel bir deney de dahil edildi.

Git: 2. Sonuçlar

2.1. Rooibos ve Estradiol, İz-Amine Maruz Kalmanın Ardından Sıkı Bağlantı Bütünlüğü Üzerinde Farklı Koruyucu Etkilere Sahiptir


TJP (oklüdin ve zona oklüdens-1 (ZO-1)) seviyeleri ve dağılım profilleri, bağırsak bariyeri epitel bütünlüğünün bir göstergesi olarak HT-29 kolon adenokarsinomu tek tabakalarında değerlendirildi. Bu veriler hem nicel olarak temsil edilir (Şekil 1) ve niteliksel olarak (şekil 2). Hücrelerin E2 veya GRE ile şartlandırılması açısından, TA'ya maruz kalmanın yokluğunda, her iki tedavi de - arttırılmadıysa - normal hücresel morfolojiyi korudu, ancak toplam ZO-1 ifadesinde hiçbir değişiklik görülmedi (Şekil 1). Daha spesifik olarak, E2'nin hücre boyutu ve şekli üzerinde yararlı bir modülatör etkisi olduğu görüldü, bu da daha düzgün boyutlu bir hücre tek tabakasıyla sonuçlandı (şekil 2F), GRE tedavisi oklüdin sinyalini önemli ölçüde azaltırken (şekil 2K) kontrol koşullarıyla karşılaştırıldığında ( p < 0.05).

Şekil 1
Yeşil rooibos özü (GRE) ve 17β-estradiol'ün (E2), sıkı bağlantı proteinleri oklüdin ( A – D ) ve ZO-1 ( E – H) için pozitif boyanan, görüntülenmiş HT-29 hücre tek tabakasının göreli alanının yüzdesi üzerindeki etkileri ) seçilen TA maruziyetini takiben (200 ng/mL): ( A , E ) β-fenetilamin (PEA), ( B , F ) triptamin (TRP), ( C , G ) ρ-tiramin (TYR) ve ( D , H ) agmatin (AGM). Veriler, ortalama (toplam görüntülenen alanın yüzdesi) ± SEM olarak temsil edilir. İstatistiksel analiz: Tukey çoklu karşılaştırma testleri ile 2 yönlü ANOVA'lar: * = p< 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001, **** = p < 0,0001.


şekil 2
İz aminlerin (TA, çerçeveler ( B – E )), yeşil rooibos ekstraktının (GRE, çerçeve ( F )) , 17β-estradiol (E2, çerçeve ( K )) ve kombine tedavilerin ( çerçeveler ( G ) etkilerini gösteren temsili floresan mikrograflar – J , L – O )) ve kontrol ( A) HT-29 hücre tek tabakalarında sıkı bağlantı proteinleri üzerinde. Yeşil sinyal = ZO-1, kırmızı sinyal = oklüdin, sarı sinyal = kollokalize ZO-1 ve oklüdin sinyali ve mavi sinyal = Hoechst. Tüm flüoresan görüntüler, 60x yağa daldırma hedefi kullanılarak görüntülenen, elde edilen z yığınlarının maksimum yoğunluk projeksiyonlarıdır. Ölçek çubuğu = 10 mikron. Kısaltmalar: PEA: β-fenetilamin, TRP: triptamin, TYR: ρ-tiramin, AGM: agmatin.

TA'ların varlığında ve ön tedavi (kontrol) olmadan, TJP'ler diferansiyel olarak bozuldu (kümelenmiş veya dağılmış ve düzensiz bir şekilde lokalize edilmiş) ve hücresel morfoloji, dahil edilen tüm TA'lar tarafından değişen derecelerde değiştirildi. PEA ve TRP'ye maruz kalma en az zararlı görünürken, AGM'ye maruz kalma tek tabakalı bütünlüğe en önemli zararı verdi (şekil 2E). PEA tedavisi TJP seviyelerini önemli ölçüde değiştirmemesine rağmen (Şekil 1A,E), niteliksel olarak okludinin hafif bir hücre içi yeniden dağılımının yanı sıra ZO-1 ekspresyonu olmayan daha geniş alanlar gözlemlendi (şekil 2B). TRP tedavisi, hücresel morfolojiyi yalnızca biraz değiştirdi (şekil 2C), önemli ölçüde artan toplam ZO-1 ekspresyon seviyelerine rağmen (Şekil 1F; p < 0.01 vs. kontrol). Buna karşılık, değerlendirilen tüm TA'lar arasında, TYR tedavisi okludini önemli ölçüde artırdı (Şekil 1C; p < 0.01) en çok. Bu ≈ %20'lik artış, okludin'in önemli ölçüde içselleştirilmesi ve kümelenmesi ile ilişkilendirilmiştir (şekil 2D). TYR tedavisi ayrıca ZO-1 ifadesini önemli ölçüde artırdı (Şekil 1G; kontrolden daha az organize görünen p < 0.0001). AGM tedavisi total oklüdini belirgin şekilde artırdı (Şekil 1D; p < 0.05) ve ZO-1 ifade seviyeleri (Şekil 1H; p < 0.05). Özellikle, AGM işlemi, TJP'leri, bozulmamış tek tabakalı alanlardaki membran bağlantı noktalarında yoğun bir şekilde kümeledi - hücrelerin hepsinde olmasa da bazılarında yoğun sarı sinyalle kanıtlandı (şekil 2E)—ama aynı zamanda TJP bozulmasının belirgin olduğu serpiştirilmiş alanlara da neden oldu. TJP profili açısından TYR ve AGM için bu farklı sonuçlar, TJP'lerin hem ifade düzeylerini hem de hücresel dağılım profillerini değerlendirmenin önemini vurgulamaktadır.

Ayrıca, E2 ön işleminin TA'ya maruz kalmaya hücresel yanıt üzerindeki etkileri değişkendi. PEA ve TRP tedavisi bağlamında, E2'nin varlığı okludini önemli ölçüde artırdı (Şekil 1A,B) ve daha az ölçüde ZO-1 ifadesi (Şekil 1E, F). Bu sonuçlar, artan okludin kümelemesini ve içselleştirmeyi gösteren ilgili temsili görüntülere yansıtılır (şekil 2G) ve daha yüksek seviyelerde ZO-1 sinyali (şekil 2H). Belirgin bir şekilde, TYR işleminin ardından, önceden işlenmiş E2 tek tabakaları normalleştirilmiş okludin ve ZO-1 seviyelerine sahipti (Şekil 1C, G). Gerçekten de, E2 ve TYR grubu, diğer her iki TYR grubundan ( her ikisi için p < 0.0001) önemli ölçüde daha düşük okludine sahipti, bu da düzenli TJP dağılımına ve lokalizasyonuna çevrildi (şekil 2I), bir kontrol profiline benzer. AGM açısından, belirgin bir E2 etkisi görülmedi.

Dikkatleri rooibos'a çevirerek, TA'ların yokluğunda GRE ön işleminin oklüdin seviyeleri üzerindeki önemli sönümleme etkisine rağmen, GRE ön tedavisinin, TA maruziyetine oklüdin tepkisini önleyemediği, AGM maruziyetine verilen yanıt haricinde, önemli ölçüde engellendi (Şekil 1D). Bu bağlamda, hücresel morfoloji genel olarak korunmuştur ve TJP dağılımı, TA tedavisinin yokluğunda kontrol hücrelerine görsel olarak benzer olmuştur.şekil 2Ö). PEA, TRP ve TYR tedavisi ile ilgili olarak, GRE ön tedavisinin mutlak TJP seviyeleri üzerinde hiçbir etkisi olmadı, ancak TYR kombinasyonu grubundaki hücresel morfoloji bir şekilde modüle edilmiş göründü (şekil 2N). Birlikte ele alındığında, hem E2 hem de GRE ön işleminin, karmaşık ancak farklı eylem mekanizmalarını akla getiren çok özel etkileri olmuştur. 2.2. Rooibos ve Estradiol, İz-Amin Maruz Kalmasının Ardından Prostaglandin E2 Salgısını Farklı Şekilde Modüle Eder


Enflamatuvar profil değerlendirmesi açısından prostaglandin E2 (PGE2) ve inflamatuar sitokin düzeyleri belirlendi. TA'ya maruz kalma olmadığında, ne E2 ne de GRE ön işlemi HT-29 hücrelerinin PGE2 salgılamasını etkilemedi (Figür 3). TJP verilerine benzer şekilde, PEA ve TRP'ye maruz kalma, PGE2 sekresyonunda artışa yol açmadı ve bu bağlamda ne E2 ne de GRE ön işleminin belirgin bir etkisi olmadı (Figür 3A, B). Buna karşılık, kontrol koşulları altında TYR'ye maruz kalma, değerlendirilen tüm TA'nın ( kontrole karşı p < 0.01) PGE2 seviyelerini en belirgin biçimde artırdı (Figür 3C). Hem E2 hem de GRE, PGE2'yi temel seviyelerde tutarak bu artışı engelledi. Bununla birlikte, TYR kaynaklı PGE2 salgılanması üzerindeki bu modülatör etkiye, bu hücre tek tabakalarının temsili mikrograflarından hem E2 hem de GRE aracılık ederken, yalnızca E2'den gelen etkilerin, TJP bütünlüğünün ve hücresel bütünlüğünün korunması açısından daha faydalı bir sonuca dönüştüğü görüldü. morfoloji. Son olarak, AGM maruziyetine yanıt olarak, önemli ancak hafif bir PGE2 yanıtı, yalnızca E2 varlığında belirginken, GRE, ön tedavi AGM'ye maruz kalmama durumuna kıyasla PGE2 yanıtını önemli ölçüde azalttı (Figür 3D; p < 0.05).

Figür 3
Yeşil rooibos ekstraktının (GRE) ve 17β-estradiol'ün (E2), seçilen TA-maruziyetini (200 ng/mL) takiben HT-29 hücre tek tabakaları tarafından salgılanan prostaglandin E2 (PGE2) konsantrasyonu üzerindeki etkileri: (A) β- fenetilamin ( PEA), ( B ) triptamin (TRP), ( C ) ρ-tiramin (TYR) ve ( D ) agmatin (AGM). Veriler, ortalama ± SD, n = 3 olarak temsil edilir. İstatistiksel analiz: Tukey çoklu karşılaştırma testleri ile 2 yönlü ANOVA'lar: * = p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001. 2.3. Rooibos, ancak Estradiol Değil, İz-Amin Maruz Kalmasının Ardından IL-8 Salgısını Farklı Şekilde Modüle Eder


Sitokin sekresyonu açısından, genel hücresel sitokin tepkisi oldukça düşüktü ve yalnızca saptanabilir seviyelerde salgılanan IL-8 (Şekil 4). Kullanılan tüm TA'lar, TRP için istatistiksel anlamlılığa ulaşmasa da, IL-8 tepkisini azaltıyor gibi görünüyordu. TA tedavisi yokluğunda, GRE ön tedavisi IL-8'i düşürürken, TA varlığında etkisi korunmuştur. Tersine, E2 ön tedavisinin IL-8 salınımı üzerinde bir etkisi yok gibi görünüyordu, bu da E2 ve GRE'nin bu bağlamda bağımsız rol oyuncuları olduğunu düşündürüyor.

Şekil 4
Yeşil rooibos ekstraktının (GRE) ve östradiolün (E2), seçilen TA maruziyetini (200 ng/mL) takiben HT-29 hücre tek tabakaları tarafından salgılanan interlökin-8 (IL-8) konsantrasyonu üzerindeki etkileri: (A) β - fenetilamin (PEA), ( B ) triptamin (TRP), ( C ) ρ-tiramin (TYR) ve ( D ) agmatin (AGM). Veriler, ortalama ± SD, n = 3 olarak temsil edilir. İstatistiksel analiz: Tukey çoklu karşılaştırma testleri ile 2 yönlü ANOVA'lar: * = p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001, *** * = p < 0.0001.

Git: 3. Tartışma


Gastrointestinal epitel, gastrointestinal homeostazı etkileyebilen çok sayıda eksojen (diyet, mikrobiyal ve tıbbi) metabolitlere/bileşiklere ve endojen uyaranlara (inflamatuar, hormonal ve nöral) maruz kalır. Epitel hücrelerinin hem gerekli besinleri emmesi hem de potansiyel olarak zararlı mikropların veya diyet antijenlerinin girişini önlemesi için bağırsak bariyeri geçirgenliğinin dinamik olarak düzenlenmesi çok önemlidir. Bu bağlamda, polifenol açısından zengin nutrasötikler, diyet takviyesi olarak kullanımlarında çarpıcı bir artış gördü. Bunun nedeni muhtemelen oksidatif hasar ve inflamasyona karşı geniş çapta bildirilen korumaları ve bağırsak bariyeri bütünlüğünün yararlı modülasyonudur [ 13 , 42 , 43 , 44 , 55 ,56 ], artan bağırsak geçirgenliği ile ilişkili kronik enflamatuar durumların tedavisinde rol oynamalarını destekler.

Mevcut veriler aşağıdaki ana yeni bulguları vermiştir: (i) HT-29 hücrelerinin E2 veya GRE ile ön muamelesi, her ikisi de farklı olsa da hücresel ince yapıyı iyileştirmiştir; (ii) TA'lara maruz kalma, genellikle enflamatuar sitokin (IL-8) salgılanması açısından enflamatuar yanıtı bastırdı, ancak TYR (ve daha düşük bir dereceye kadar AGM), TJP'nin artan toplam seviyeleri ve değiştirilmiş TJP ile ilişkili olan önemli bir PGE2 tepkisi ortaya çıkardı. dağıtım; (iii) E2 ön işlemi, TJP düzeylerini ve dağılımını normalleştirerek yalnızca TYR'ye verilen PGE2 tepkisini önledi; (iv) GRE, hem TYR hem de AGM'de TA kaynaklı PGE2 ve IL-8 sekresyonunu önledi, ancak yalnızca AGM için TJP seviyelerini ve dağılım profilini normalleştirebildi.

Mevcut veriler, hem E2 hem de GRE ile ön işlemin HT-29 tek tabaka morfolojisini iyileştirdiğini göstermektedir; bu da, bu bağlamda sıkı bağlantı engellerinin bilinen yararlı modülasyonunu bildiren literatüre katkıda bulunmaktadır. E2 bağlamında, bu sonuca potansiyel olarak östrojen reseptörü (ER)-β ve/veya G proteini-bağlı ER 1(GPER) etkileşimleri aracılık etmiştir — her ikisi de HT-29 hücrelerinde rapor edilmiştir [57, 58 , 59 ] . ]. Bu yorum, ERβ-/- farelerinin bir özelliği olarak hücresel bütünlüğün ve hücre mimarisinin istikrarsızlaşmasını açıklayan literatürle uyumludur [ 59], ERβ'nin E2 tarafından aktivasyonunun tekdüze hücresel mimariyi desteklediğini öne sürüyor. Bu kavram aynı zamanda, E2 düzeylerinin en düşük seviyede olduğu adet dönemlerinde abartılı gastrointestinal semptomoloji ile de uyumludur [ 60 ]. Bununla birlikte, rooibos bağlamında, TJP'ler üzerindeki etkilerine ilişkin literatür seyrektir ve genellikle kan-beyin bariyeri (BBB) değerlendirmeleri bağlamındadır. Bildiğimiz kadarıyla, bu çalışmada gösterilen sonuçlar, rooibos'un TA (özellikle AGM) maruziyetini takiben kolonik TJP'leri faydalı bir şekilde modüle etme potansiyeli hakkında bilgi veren ilk sonuçlardır. Literatüre göre, uzun süreli fermente rooibos çayı tüketiminin sıçanlarda iskemik yaralanmayı takiben BBB bozulmasına ve beyin ödemine karşı koruma sağladığı bulunmuştur [ 61]. Benzer şekilde, Fisher ve ark. (2020), bir in vitro BBB modelinde aspalatin açısından zengin bir rooibos tentürünün koruyucu etkilerini bildirdi. Özellikle bu çalışma, TJP okludini eksprese etmeyen bEnd5 hücrelerini kullanmıştır [ 62]. Çalışmamızda, yeşil rooibosun bir etanol özütü, Fisher ve ark. (2020), sıkı kavşak bariyerlerinin rooibos ile ilgili yararlı modülasyonu için birden fazla potansiyel etki mekanizması önermektedir. Daha da önemlisi, toplam mutlak okludin ekspresyon seviyelerinin bu aşağı regülasyonu, hücresel bütünlüğü veya morfolojiyi tehlikeye atmadı. Bu bulgu için olası bir açıklama, bağırsakta rooibos alımı ve taşınması ile ilgilidir. Bu bağlamda, kullanılan GRE'nin ana bileşeni olan aspalatinin potansiyel olarak paraselüler olarak taşındığı kuvvetle öne sürülmüştür [ 63] .], gözlenen oklüdindeki düşüşün, bu bağlamda parasellüler taşınımın artmasından kaynaklanabileceğini motive eder, ancak bu, oyundaki asıl mekanizmayı aydınlatmak için daha kapsamlı araştırmalar gerektirir.

İnflamatuvar durum üzerine TA'nın neden olduğu etkiler açısından; belirgin bir prostanoid olarak PGE2 seviyeleri, bu çalışmada TA'ya maruz kalmanın (özellikle TYR ve AGM) neden olduğu TJP durumundaki değişikliklerle ilişkili görünse de; sitokin analizleri, tahta genelinde TA tedavisini takiben nispeten bastırılmış bir inflamatuar yanıtı ortaya çıkardı. Bununla birlikte, artan PGE2 düzeyleriyle çelişki gibi görünen bu durum literatürle uyumludur. Örneğin, Kelly ve arkadaşlarına göre. (2015), bağırsak bariyeri disfonksiyonu ve enflamatuar süreçler arasında bir ileri besleme döngüsü vardır. Bu bağlamda, yazarlar, genellikle TJP bozulması ile ilişkili olan bağırsak geçirgenliğindeki artışın, bir enflamatuar yanıtı uyarmak için mukozal inflamasyondan önce gelebileceğini ileri sürmüşlerdir [64] .]. Ek olarak, benzer bir modelde, PGE2'deki artışların genellikle IL-8 seviyelerindeki artışlardan önce geldiği bildirilmiştir [ 65 ]. Membran fosfolipitlerinden üretildikten sonra PGE2, para- veya otokrin etkiler göstermek için pasif difüzyon veya aktif taşıma yoluyla salgılanır - bu, gözlemlenen daha yüksek PGE2 seviyelerini açıklayabilir.

Mevcut veriler, TYR'yi özellikle PGE2 stimülasyonunda göstermektedir. Kesitsel bir çalışmada [52] inflamatuar barsak hastalığı olan hastalarda yüksek fekal TYR seviyeleri diferansiyel bir biyobelirteç olarak tanımlandığından ve TYR yüksek dozlarda hücresel sitotoksisite gösterdiğinden [ 37 , 66 ], bunun gastrointestinal bozukluklarla özel bir ilgisi vardır. Ayrıca, biz ve diğerleri, TYR'nin bol miktarda bulunan bir mikrobiyal metabolit olduğunu gösterdik [ 32 , 67 , 68 ]. L-tirozin dekarboksilasyonu yoluyla TYR oluşumu, laktik asit bakterilerinin (LAB) iyi bilinen bir özelliğidir [ 69]], genellikle probiyotik takviyeleri olarak tüketilir. TYR'yi mikrobiyal bir metabolit olarak ele aldığımızda, Luqman ve ark. (2018), TYR varlığında bakteriyel yapışmanın ve ardından içselleştirmenin (HT-29'lar) teşvik edildiğini göstermiş olsa da, düşük veya gecikmiş bir sitokin yanıtı, konakçı bağışıklık sistemlerinden kaçmak için mikrobiyal adaptasyonlarla uyumlu olabilir [70 ] . Ayrıca, genel olarak güçlü PGE2 yanıtına rağmen, düşük sitokin yanıtını potansiyel olarak açıklayabilen ek mekanizmalar açısından, golgi kompleksinin okludin ile ilişkili tıkanıklığını varsayıyoruz [ 71] .]—caveolin-1'e bağlı mekanizmalar aracılığıyla—sitokin salgılanmasında gecikmeye neden olmuş olabilir ve PGE2 ile IL-8 sonuçları arasındaki tutarsızlığı potansiyel olarak açıklayabilir. Bu yorumu desteklemek için temsili mikrograflarımız, genel olarak TA tedavisini takiben belirgin okludin yeniden dağılımını ve en kapsamlı içselleştirmeyi TYR varlığında gösterdi. Önemli olarak, caveolin proteinleri, plazma zarından hücreye taşınmasını kolaylaştırmak için golgi kompleksi ile birleşir [ 72 , 73 ]. Bu nedenle, bu bağlamda oklüdin endositozuna muhtemelen caveolin-1 aracılık eder [ 74], caveolae (plazma zarı invajinasyonları) oluşturan ve bildirildiğine göre immün aracılı TJP düzenlemesi için gerekli. Ayrıca, genel olarak, caveolin-1'in inflamatuar yanıtı sınırladığı bildirilmiştir [ 72 ]. Bunu desteklemek için, LPS ve diğer mikrobiyal ürünlerin, TJP bütünlüğü tehlikeye girdiğinde (mikrobiyal) hücrelere/bariyerleri aşmalarına yardımcı olabilecek caveolin'i aktive ettiği gösterilmiştir [72 , 75 ] . Kuşkusuz, bazı patojenler, lizozomal yolaktan kaçındığı için, hayatta kalmalarına izin verecek bir içselleştirme yolu olarak kaveoladan yararlanır [ 76 ]. Aslında, caveolin-1 ekspresyonu, M hücrelerinin Salmonella enfeksiyonuna duyarlılığını arttırmıştır [ 77], mikrobiyal patojen içselleştirme ağ geçidinde caveolin-1'i ima eder. Bu etki mekanizması mevcut çalışmada doğrulanmamış olsa da, burada bildirilen enflamatuar profili - en azından kısmen - açıklayabilir. Bu nedenle, gelecekteki çalışmalarda caveolin-1, oklüdin içselleştirmesi ve TYR arasındaki potansiyel bağlantıları değerlendirmek ilginç olacaktır.

TYR ve AGM'nin nispeten benzer etkilerine rağmen—önceki çalışmamızla uyumlu olarak [ 37]—hem PGE hem de IL-8 düzeylerini değiştirmede ve toplam TJP konsantrasyonlarını artırmada, bu etkilerde önemli bir ayırt edici faktör, özellikle okludin dağılımıyla ilgilidir. TYR durumunda, daha önce bahsedildiği gibi, yoğun oklüdin içselleştirmesi (yani, ZO-1 ile kollokalizasyon kaybı) gözlenirken, AGM'ye maruz kalma, bozulmamış tek tabakalı alanlarda, ancak görünür TJP kaybıyla birlikte ZO-1'i ve oklüdin kollokalizasyonunu destekledi. diğer alanlarda ifade Mevcut çalışmada, tedavi öncesi koşulların (E2 ve GRE) dahil edilmesi, TYR ve AGM arasındaki etki mekanizmalarındaki potansiyel farklılıkları göstermeye hizmet eder. Örneğin, E2 ön-muamele bağlamında E2, TYR'nin neden olduğu PGE2 artışlarını önleyerek, TJP seviyelerini ve hücresel dağılımı, özellikle de okludin'i normalleştirdi. TYR'nin TJP'leri bozduğu kesin etki mekanizması bilinmemekle birlikte, en azından kısmen, TYR'nin monoamin oksidaz (MAO) yoluyla oksidasyonunun bir yan ürünü olarak hidrojen peroksidin oksidatif strese ve hasara neden olabileceğini öneriyoruz. birleşme proteinlerini ve bütünlüğünü bozar. Aslında, MAO-A izoformları bağırsakta baskındır (<%80).78 ], bununla TYR ve diğer TA'lar (ancak MOA-B için oldukça seçici olan PEA değil) deamine edilir. Ek olarak, sıçan beyni homojenatlarında MAO substratlarının endojen prostaglandin sentezi üzerindeki etkisini araştıran bir çalışma, tirozin (TYR'nin öncüsü L-amino asit) varlığının siklooksijenaz aktivitesinde 2 kat artışa neden olduğunu ve PGE2 seviyelerini önemli ölçüde artırdığını bildirdi. [ 79 ], amin bozunması sırasında oluşan hidrojen peroksitin prostaglandin sentezini uyardığını ileri sürer. Okludin'in TYR ile ilişkili içselleştirilmesine daha karmaşık mekanizmalar aracılık edebileceği düşünülmekle birlikte, PGE2'nin bağırsak epitel bariyer fonksiyonunu bozabileceği ve spesifik olarak oklüdini in vitro olarak hücre içi konumlara doğru yeniden dağıtabileceği bildirilmiştir [ 80]. Bu bağlamda önleyici E2 etkisi ile ilgili olarak, östrojen veya ERβ agonistlerinin anti-enflamatuar etkileri, kronik bağırsak iltihabı modellerinde iyi tanımlanmıştır [ 58 , 81 , 82 , 83 ]. Spesifik olarak, E2 tedavisinin mukus tabakasının oksidatif hasarını önlediği ve aşağıdaki apoptozu ve geçirgenliği azalttığı HT-29'lar dahil olmak üzere çeşitli doku tiplerinde [ 84 , 85 , 86 , 87 ], E2'nin hidrojen peroksidin neden olduğu oksidatif hasarı azalttığı rapor edilmiştir. hidrojen peroksit mücadelesi [ 88]. Birlikte ele alındığında, E2 ön işlemi TYR ile ilişkili hidrojen peroksidi söndürdüyse, mevcut verilerde görüldüğü gibi PGE2 ve oklüdin yeniden dağılımındaki müteakip artış hafifletilebilirdi. (Bilinen antioksidan) rooibos ön işleminin PGE2 yanıtını da azaltabilmesi gerçeği - TJP profilinin varlığında veya TYR'de normalleşmesi olmasa da, bu bağlamda antioksidanların bir rolünü destekler, ancak aynı zamanda birden fazla mekanizmanın olduğunu öne sürer. oyunda TYR ile ilişkili risk bağlamında, E2'nin doğrudan antioksidan yanıtının (yukarıda açıklandığı gibi) diğer mekanizmalara (potansiyel ERβ ve/veya GPER etkileşimleri gibi) göreli önemi açıklığa kavuşturulmayı beklemektedir. Ne olursa olsun, mevcut verilerin pratik çıkarımları açısından, E2'nin varlığının TYR'nin neden olduğu epitelyal bozulmaları ortadan kaldırdığı gerçeği, Bağırsak TYR seviyeleri yüksek olan kadın hastaların, mens sırasında potansiyel olarak önemli ölçüde abartılı gastrointestinal semptomolojiye sahip olabileceğini düşündürmektedir. Bu gerçek ve daha önce bahsedildiği gibi LAB tarafından salgılanan yüksek TYR oranı, aynı zamanda bu bakterilerin FGID'de probiyotik takviyeleri olarak reçete edilmesine karşı uyarıda bulunur.

AGM'ye maruz kalmanın farklı sonuçlarını ele almaya devam edersek, rooibos'un etkileri, redoks dengesinin, literatürde çok daha düşük seviyelerde de olsa çoğunlukla faydalı roller atfedilen AGM'nin etkilerini optimize etmede son derece önemli olduğunu göstermektedir. AGM'nin etkilerine daha yakından bakıldığında, literatür genel olarak , özellikle BBB stabilizasyonu ve BBB geçirgenliğinde AGM ile ilişkili azalmalar bağlamında [ 90 ] bir nöroprotektif etki önermektedir [ 89 ]. Daha da önemlisi, mevcut çalışmada temsili mikrograflar, hücre zarı boyunca ZO-1'deki artışları ve oklüdin kollokalizasyonunu yansıttı; .

AGM fonksiyonunun TJP'ler üzerindeki bu olumlu değerlendirmesine rağmen, TJP'den yoksun serpiştirilmiş alanlar, hücresel zar bütünlüğünün bozulmasını önermektedir - bu daha az arzu edilen bir sonuçtur. Bununla birlikte, rooibos'un bu profili normalleştirdiği gerçeği göz önüne alındığında, iki nedenden dolayı bu olumsuz sonucun kullanılan hücresel modelin bir yapay ürünü olduğunu iddia etmek isteriz. İlk olarak, AGM'nin normalde in vivo olarak gerçekleşeceği gibi aşağı akış poliamin metabolitlerine (putresin, spermidin ve spermin) metabolize olması olası değildir. Gerçekten de, ornitin dekarboksilaz aktivitesi ve ifadesinin AGM ile ilişkili aşağı regülasyonuna atfedilen, minimal müteakip katabolizma ile HT-29'ların içinde ekzojen AGM birikimi rapor edilmiştir [ 91]. Bu nedenle, yüksek dozlarda AGM, doğrudan epitelyal apoptoz ile sonuçlanmış olabilir. Bu yorum, AGM'nin sitokrom c gibi pro-apoptotik pro-oksidan faktörlerin salımını arttırarak, dış mitokondriyal membranın seçici geçirgenliği yoluyla apoptozu potansiyel olarak indüklemesiyle uyumludur [92 ] .

İkinci olarak, hücresel modelde AGM ile ilişkili poliaminlerin göreceli yokluğu daha da önemlidir. Enzimatik olmayan antioksidanlar [ 93 , 94 ] olan bu poliaminlerin, TJP ekspresyonunu arttırarak [ 95 , 96 ] gastrointestinal epitelyal bütünlüğü ve restorasyonu iyileştirdiği bildirilmiştir . Bu koruyucu etki, hücre zarındaki lipitlerin poliaminler, özellikle spermin tarafından stabilizasyonuna atfedilir.]. Bu nedenle, AGM, kendi metabolizmasının antioksidan poliaminlere dönüşmesini önleyerek TJP kollokalizasyonu üzerinde yararlı etkilere sahipken, AGM'nin artan mevcudiyeti, mevcut verilerle ve ayrıca aşırı AGM alımına karşı uyarıda bulunan literatürle uyumlu olarak çevredeki hücrelerde oksidatif hasarı kolaylaştırabilir. 47 ]. Yararlı ve zararlı etkiler arasında ince bir çizgi varmış gibi göründüğünden, mevcut veriler AGM'nin doz düzenlemesinin önemini açıkça göstermektedir.

AGM bağlamında, rooibos için önemli bir rol gösterilmiştir. İlk olarak, Dludla ve ark. (2020) yakın zamanda spesifik bir rooibos formülasyonunun (aspalathin ve PPAG'ın bir kombinasyonu - her ikisi de burada kullanılan GRE'de dikkate değer miktarlarda mevcuttur) spesifik olarak anti-apoptotik özellikler uyguladığını bildirmiştir [98 ] . İkinci olarak, GRE'nin yüksek polifenol (yani ayrıca enzimatik olmayan antioksidan) içeriği, muhtemelen burada poliaminle ilişkili antioksidan aktivitenin göreceli eksikliğini hafifletiyordu. Bu faydadan sorumlu GRE'nin spesifik bileşenleri açısından, bir aday, reaktif oksijen türleri [99] tarafından DNA oligonükleotitlerinde oksidatif hasarı önlediği bilinen en yaygın polifenolik flavonoid olarak ve GRE ekstraktımız içinde konsantre olan quercetin olacaktır . .

Birlikte ele alındığında, mevcut veriler, E2'nin (veya reseptörlerinin) manipülasyonunun terapötik etki sağlayabileceğini öne sürerek, TYR'yi gastrointestinal bozukluklarda ana tetikleyici olarak gösteren literatürü genişletmektedir. Ayrıca, verilerimiz, AGM ve GRE ile kombinasyon tedavisinin, bağırsak iltihabı ve bariyer bozulması bağlamında önemli fayda sağlayabileceğini göstermektedir. GRE'nin bu faydaları, fitoöstrojenik bir etkiden ziyade doğrudan antioksidan ve - daha az ölçüde - anti-enflamatuar özellikleriyle bağlantılı görünmektedir. Bu veriler, sağlam bir in vivo modelde daha fazla tedavi geliştirmeyi garanti eder, böylece hücre kültürü modellerinin sınırlamalarının üstesinden gelinebilir.

Git: 4. Yöntemler ve Malzemeler

4.1. Rooibos Hazırlama


Fermente edilmemiş (yeşil) rooibos yapraklarından (GRE) etanol özü Bay Roy van Brummelen (Van Brummelen Danışmanları, Pretoria, Güney Afrika) tarafından bağışlanmıştır. Ekstraktın ana bileşenlerinin bir profili ek materyalde sunulmuştur (Ek Şekil S1) . Bu öz, DMSO içinde sulandırıldı ve hücre kültürü ortamında 100 ug/mL'lik nihai deneysel konsantrasyona seyreltildi. 4.2. Hücre Kültürü Bakımı


Kolon adenokarsinomu (HT-29) hücreleri Dr Tanya Davis tarafından nazikçe bağışlanmıştır. Genel bakım için hücreler, farklılaşmayı kolaylaştırmak için 5 mM D-galaktoz takviyeli, glukozsuz RMPI (Gibco, Waltham, MA, ABD, 11879-020) kültür ortamında kültürlendi. Kültür ortamı ayrıca %10 ısıyla inaktive edilmiş, gama ışınına tabi tutulmuş fetal sığır serumu (FBS) (Biowest, Nuaille, Fransa, S181Y-500) ve %1 PenStrep ile desteklenmiştir. Hücreler, 1x tripsin ile alt kültürlendi ve 37 °C'de %5 _{C02'de nemlendirilmiş bir inkübatörde tutuldu.} Tüm deneyler üç kopya halinde yapıldı ve en az üç kez tekrarlandı. Ek olarak, GRE dozajını optimize etmek için WST-1 tahlili kullanılarak hücre canlılığı gerçekleştirildi ( Ek Şekil S2). Benzer aspalatin içeriği (≈%20) içeren çok daha yüksek dozlarda (≈2 ila 4 kat) yeşil rooibos özütlerinin HT-29 hücrelerinde hücre canlılığını azalttığı gösterilmiştir [56], bu modelde ölçülen sonuçları etkilemiş olabilir . Bununla birlikte, mevcut çalışmada kullanılan doz önemli ölçüde daha düşüktü ve hiçbir hücre toksisitesi görülmedi ( Ek Şekil S2 ), bu nedenle sitotoksisitenin bu çalışmada veri yorumlamada bir karıştırıcı olması muhtemel değildir. 4.3. Sıkı Bağlantılı Protein İmmünofloresan Boyama


GRE'nin bağırsak sağlığına aracılık etme yeteneğini araştırmak için, HT-29 hücreleri daha önce TJP profilini zararlı şekilde etkilediği gösterilen TA dozlarına maruz bırakıldı [ 37 ]. ^{Kısaca, HT-29 hücreleri 1.5 x 105'te} ekilmiştir.önceden ECL hücre eki matrisi (Merck, Rahway, NJ, ABD, 08-110) ile kaplanmış ve gün aşırı yenilenmiş sterilize edilmiş 12 mm yuvarlak cam lamellerin üzerine hücreler/oyuk (24 oyuklu plaka). 8 günlük kültürlemeden sonra hücre tek tabakaları, 100 ug/mL GRE, 1 nM E2 veya bir ortam aracı (kontrol) ile ön işleme tabi tutuldu. 24 saatlik ön muameleden sonra, hücre tek tabakaları, 200 ug/mL TA (β-fenetilamin (PEA), triptamin (TRP), ρ-tiramin (TYR) veya agmatin (AGM)) içeren taze ortam veya ortam aracı ile işlendi. (kontrol) 24 saat daha GRE (100 μg/mL) veya E2 (1 nM) varlığında veya yokluğunda. Süpernatanlar ek analizler için toplandı, ardından hücre tek tabakaları bir kez PBS ile yıkandı. Tek tabakalar 15 dakika 20°C'de sabitlendi (buz gibi soğuk %4 PFA ve %50 MeOH çözeltisi), tekrar S-PBS (PBS içinde %0.1 saponin) ile yıkandı, ve oda sıcaklığında 1 saat bloke edildi (S-PBS içinde %20 FBS ve %5 eşek serumu). Primer antikorlar kullanılarak 4 °C'de gecelik birincil antikor inkübasyonları izlendi: 1:250 fare anti-ZO-1 (Invitrogen, Waltham, MA, ABD, 33-9100) ve 1:250 tavşan anti-oklüdin (Novus Biologicals, Littleton) , CO, ABD, NBP1-87402) engelleme arabelleğinde. Daha sonra, tek tabakalar ikincil antikorlarla inkübasyondan önce 3 kez S-PBS ile yıkandı: 1:250 Alexa Fluor 488 eşek anti-fare (Invitrogen, A-21202) ve Alexa Fluor 594 eşek anti-tavşan (Invitrogen, A- 21207) bloklama tamponunda 1 saat oda sıcaklığında. Son olarak, tek tabakalar Hoechst (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, ABD, birincil antikorlar kullanılarak: 1:250 fare anti-ZO-1 (Invitrogen, Waltham, MA, ABD, 33-9100) ve 1:250 tavşan anti-oklüdin (Novus Biologicals, Littleton, CO, ABD, NBP1-87402) engelleme tamponu. Daha sonra, tek tabakalar ikincil antikorlarla inkübasyondan önce 3 kez S-PBS ile yıkandı: 1:250 Alexa Fluor 488 eşek anti-fare (Invitrogen, A-21202) ve Alexa Fluor 594 eşek anti-tavşan (Invitrogen, A- 21207) bloklama tamponunda 1 saat oda sıcaklığında. Son olarak, tek tabakalar Hoechst (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, ABD, birincil antikorlar kullanılarak: 1:250 fare anti-ZO-1 (Invitrogen, Waltham, MA, ABD, 33-9100) ve 1:250 tavşan anti-oklüdin (Novus Biologicals, Littleton, CO, ABD, NBP1-87402) engelleme tamponu. Daha sonra, tek tabakalar ikincil antikorlarla inkübasyondan önce 3 kez S-PBS ile yıkandı: 1:250 Alexa Fluor 488 eşek anti-fare (Invitrogen, A-21202) ve Alexa Fluor 594 eşek anti-tavşan (Invitrogen, A- 21207) bloklama tamponunda 1 saat oda sıcaklığında. Son olarak, tek tabakalar Hoechst (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, ABD, 250 Alexa Fluor 488 eşek anti-fare (Invitrogen, A-21202) ve Alexa Fluor 594 eşek anti-tavşan (Invitrogen, A-21207) oda sıcaklığında 1 saat boyunca engelleme tamponunda. Son olarak, tek tabakalar Hoechst (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, ABD, 250 Alexa Fluor 488 eşek anti-fare (Invitrogen, A-21202) ve Alexa Fluor 594 eşek anti-tavşan (Invitrogen, A-21207) oda sıcaklığında 1 saat boyunca engelleme tamponunda. Son olarak, tek tabakalar Hoechst (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, ABD,R37605 ), PBS ile 4 kez yıkanmadan önce 20 dakika boyunca. Cam lameller daha sonra Dako Floresan Montaj Ortamı (Diagnostech, Johannesburg, Güney Afrika, S3023) ile mikroskop lamlarına monte edildi. Floresan lekeli hücre tek katmanları, 60 kat yağa daldırma hedefi kullanılarak Carl Zeiss Confocal LSM 780 Elyra PS1 ile görüntülendi. İlgili Z yığını (10 dilim) görüntüleri alındı ve maksimum yoğunluk projeksiyonları, Zeiss ZEN görüntüleme yazılımı kullanılarak ZO-1 ve okludin'in ortak lokalizasyonu için analiz edildi. 4.4. Süpernatan Analizleri


Hücre kültürü süpernatanı prostaglandin E2 (PGE2) konsantrasyonları, üreticinin kılavuz protokolü izlenerek ticari olarak temin edilebilen bir enzime bağlı immünosorbent tahlil (ELISA) kiti (E-EL-0034, Elabscience, Wohan, Çin) kullanılarak tahlil edildi. Ek olarak süpernatanlar, bir İnsan Manyetik Lumineks Tarama Testi (LXSAHM-06, R&D Systems, Minneapolis, MN, ABD) kullanılarak IFN-y, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10 ve TNFa için analiz edildi. üreticinin kılavuz protokolünü takip ederek. 4.5. İstatistiksel Analizler


Tüm deneyler üç kopya halinde gerçekleştirildi ve en az üç kez tekrarlandı. Sunulan tüm veri noktaları için nihai bir n = 3 elde etmek üzere üçlü değerlerin ortalaması alındı. Tüm verilerin istatistiksel analizleri, GraphPad Prism Sürüm 9.1.2 (GraphPad Software LLC, San Diego, CA, ABD) kullanılarak tamamlandı. TJP verileri niteliksel olarak temsili görüntüler olarak ve niceliksel olarak ortalama ± standart ortalama hatası (SEM) olarak temsil edilirken, PGE2 ve sitokin verileri ortalama ± standart sapma (SD) olarak temsil edilir. İstatistiksel analizler, Tukey'nin TJP, PGE2 ve sitokin verileri için çoklu karşılaştırma testleri ile 2 yönlü ANOVA'ları gerektirdi. < 0.05'lik bir p değeri, istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

Git: teşekkürler


Yazarlar, floresan görüntüleme konusundaki yardımları için Lize Engelbrecht'e (Floresan Mikroskopi Ünitesi, CAF) ve Yigael Powrie'ye teşekkür eder.

Git: Tamamlayıcı Malzemeler


Aşağıdaki destekleyici bilgiler şu adresten indirilebilir: https://www.mdpi.com/article/10.3390/ph15091097/s1 , Şekil S1: Farklı rooibos işleme nedeniyle on beş ana fenolik bileşenin bağıl dağılımındaki değişiklikler (toplamın yüzdesi) ; Şekil S2 : HT - 29 kolon hücresi canlılığı üzerindeki değişen yeşil rooibos özü ( GRE ) dozlarının etkisini gösteren WST - 1 sonuçları , 112 , 113 , 114 ,115 , 116 , 117 , 118 , 119 , 120 ].
Ek veri dosyası için buraya tıklayın. ^{(446K, zip)}
Git: Finansman Tablosu


Güney Afrika Rooibos Konseyi mali yardım için kabul edildi. LP, Güney Afrika Ulusal Araştırma Vakfı (S007260, DST-NRF İnovasyon Doktora Bursu, #135978) tarafından mali olarak desteklenmiştir.

Git: Yazar Katkıları


Kavramsallaştırma ve çalışma tasarımı, LP ve CS tarafından ortaklaşa gerçekleştirildi; LP, taslağın ilk taslağını yazmadan önce CS'nin gözetimi altında tüm deneyleri, veri azaltmayı ve yorumlamayı gerçekleştirdi. Tüm yazarlar makalenin yayınlanan versiyonunu okudu ve kabul etti.

Git: Kurumsal İnceleme Kurulu Beyanı


Uygulanamaz.

Git: Bilgilendirilmiş Onam Beyanı


Uygulanamaz.

Git: Veri Kullanılabilirliği Bildirimi


Veriler, makale ve ek materyal içinde yer almaktadır .

Git: Çıkar çatışmaları


Yazarların beyan edecek çıkar çatışması yoktur.

Git: Dipnotlar




Yayıncının Notu: MDPI, yayınlanan haritalardaki ve kurumsal bağlantılardaki yetki iddiaları konusunda tarafsız kalır.



Git: Referanslar

1. Canavan C., West J., Card T. İnceleme makalesi: İrritabl bağırsak sendromunun ekonomik etkisi. Besin. Eczane. orada. 2014; 40 :1023–1034. doi: 10.1111/apt.12938. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
2. Tack J., Stanghellini V., Mearin F., Yiannakou Y., Layer P., Coffin B., Simren M., Mackinnon J., Wiseman G., Marciniak A., et al. Altı Avrupa ülkesinde kabızlıkla birlikte orta ila şiddetli derecede irritabl barsak sendromunun ekonomik yükü. BMC Gastroenterol. 2019; 19:69 . doi: 10.1186/s12876-019-0985-1. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
3. Sperber AD, Bangdiwala SI, Drossman DA, Ghoshal UC, Simren M., Tack J., Whitehead WE, Dumitrascu DL, Fang X., Fukudo S., et al. Fonksiyonel Gastrointestinal Bozuklukların Dünya Çapında Yaygınlığı ve Yükü, Roma Vakfı Global Araştırmasının Sonuçları. Gastroenteroloji. 2021; 160 :99–114.e3. doi: 10.1053/j.gastro.2020.04.014. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
4. Avramidou M., Angst F., Angst J., Aeschlimann A., Rossler W., Schnyder U. Genç ve orta yaşlı İsviçreli erişkinlerde gastrointestinal semptomların epidemiyolojisi: 28 yıldan uzun süreli bir popülasyon kohortunda prevalanslar ve komorbiditeler. BMC Gastroenterol. 2018; 18:21 . doi: 10.1186/s12876-018-0749-3. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
5. Chatila R., Merhi M., Hariri E., Sabbah N., Deeb ME İrritabl barsak sendromu: Yetişkin bir Lübnan popülasyonunda prevalans, risk faktörleri. BMC Gastroenterol. 2017; 17 :137. doi: 10.1186/s12876-017-0698-2. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
6. Heitkemper M., Jarrett M. İrritabl barsak sendromu: Cinsiyet önemli midir? J. Psychosom. Res. 2008; 64 :583–587. doi: 10.1016/j.jpsychores.2008.02.020. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
7. Mulak A., Tache Y., Larauche M. İrritabl barsak sendromu modülasyonunda seks hormonları. Dünya J. Gastroenterol. 2014; 20 :2433–2448. doi: 10.3748/wjg.v20.i10.2433. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
8. Tack J., Camilleri M., Chang L., Chey WD, Galligan JJ, Lacy BE, Muller-Lissner S., Quigley EM, Schuurkes J., De Maeyer JH, et al. Sistematik inceleme: Gastrointestinal bozukluklar için geliştirilen 5-HT(4) agonistlerinin kardiyovasküler güvenlik profili. Besin. Eczane. orada. 2012; 35 :745–767. doi: 10.1111/j.1365-2036.2012.05011.x. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
9. Wilkins T., Pepitone C., Alex B., Schade RR Erişkinlerde IBS Teşhisi ve Yönetimi. Am. Dostum. Doktor. 2012; 86 :419–426. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
10. Elmalıklis IN, Liveri A., Ntelis B., Paraskeva K., Goulis I., Koutelidakis AE Artan Fonksiyonel Gıdaların Tüketimi ve Akdeniz Diyetine Bağlılık Gastrointestinal Hastalıkların Ortaya Çıkmasında Koruyucu Bir Etkiye Sahip Olabilir: Bir Vaka-Kontrol Çalışması. İlaçlar. 2019; 6:50 . doi: 10.3390/medicines6020050. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
11. Luvian-Morales J., Varela-Castillo FO, Flores-Cisneros L., Cetina-Perez L., Castro-Eguiluz D. Kronik hastalıklarda inflamasyonu ve metabolizmayı modüle eden fonksiyonel gıdalar: Sistematik bir derleme. kritik Rev. Gıda Bilimi Nutr. 2021; 62 :4371–4392. doi: 10.1080/10408398.2021.1875189. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
12. Lyu M., Wang YF, Fan GW, Wang XY, Xu SY, Zhu Y. Kardiyometabolik Hastalıkların Önlenmesi ve Tedavisi İçin Bağırsak Mikrobiyotasını Modüle Etme Yoluyla Dengeleyici Bitkisel İlaç ve Fonksiyonel Gıda. Ön. Mikrobiyoloji. 2017; 8 :2146. doi: 10.3389/fmicb.2017.02146. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
13. Mijan MA, Lim BO Enflamatuar bağırsak hastalığı için alternatif tedaviler olarak diyetler, fonksiyonel gıdalar ve nutrasötikler: Mevcut durum ve gelecekteki eğilimler. Dünya J. Gastroenterol. 2018; 24 :2673–2685. doi: 10.3748/wjg.v24.i25.2673. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
14. Shimizu M. Diyet Maddeleriyle Bağırsak İşlevlerinin Modülasyonu: Sağlığın Teşviki ve Geliştirilmesine Etkili Bir Yaklaşım. J. Gelenek. Tamamlayıcı. Med. 2012; 2 :81–83. doi: 10.1016/S2225-4110(16)30080-3. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
15. Wan MLY, Ling KH, El-Nezami H., Wang MF Fonksiyonel gıda bileşenlerinin bağırsak sağlığı üzerindeki etkisi. kritik Rev. Gıda Bilimi Nutr. 2019; 59 :1927–1936. doi: 10.1080/10408398.2018.1433629. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
16. Yanni A., Kourkoutas Y. Editoryal: Sindirim Sağlığını İyileştirmek ve Sürdürmek İçin Fonksiyonel Besinler ve Biyoaktif Bileşikler. Ön. Nutr. 2021; 8 :815370. doi: 10.3389/fnut.2021.815370. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
17. Abdul NS, Marnewick JL Rooibos, COVID-19 salgını sırasında destekleyici bir rol oynayacak mı? J. İşlev. yiyecekler. 2021; 86 :104684. doi: 10.1016/j.jff.2021.104684. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
18. Smith C., Swart A. Aspalathus linearis (Rooibos)—Kardiyovasküler hastalığı hedefleyen fonksiyonel bir gıda. Gıda İşlevi. 2018; 9 :5041–5058. doi: 10.1039/C8FO01010B. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
19. Bond TJ, Derbyshire EJ Rooibos Çay ve Sağlık: Son İki On Yılın Kanıtlarının Sistematik Bir İncelemesi. Nutr. Gıda Teknolojisi Açık Erişim. 2020; 6 doi: 10.16966/2470-6086.166. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
20. Hoosen M. Aspalathus linearis'in (Rooibos Çayı) Nitrik Oksit (NO) ve Sitokin Aktivitesi Üzerindeki Etkileri . Int. J. Hum. Sağlık Bilimi 2019; 3 :150–157. doi: 10.31344/ijhhs.v3i3.93. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
21. Villaño D., Pecorari M., Testa MF, Raguzzini A., Stalmach A., Crozier A., Tubili C., Serafini M. Fermente edilmemiş ve fermente edilmiş rooibos çayları ( Aspalathus linearis ), sağlıklı insanlarda plazma toplam antioksidan kapasitesini arttırır. Gıda Kimyası 2010; 123 :679–683. doi: 10.1016/j.foodchem.2010.05.032. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
22. Standley L., Winterton P., Marnewick JL, Gelderblom WCA, Joubert E., Britz TJ Rooibos Çayının Antimutajenik ve Antioksidan Potansiyelleri Üzerinde İşleme Aşamalarının Etkisi. J. Agric. Gıda Kimyası 2001; 49 :114–117. doi: 10.1021/jf000802d. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
23. Lopez V., Casedas G., Petersen-Ross K., Powrie Y., Smith C. Yeşil rooibos ( Aspalathus linearis ) polifenolik ekstresinin nöroprotektif ve anksiyolitik potansiyeli. Gıda İşlevi. 2022; 13 :91–101. doi: 10.1039/D1FO03178C. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
24. Cheng Q., Yu X., Zhang R., Chen L. Isoorientin, Nrf2/NQO1 Yoluyla NLRP3 Enflamasyon Aktivasyonunu Engelleyerek Enflamatuvar Bağırsak Hastalığını Hafifletiyor. Curr. Tepe. Nutrasötik Res. 2020; 18 :392–397. doi: 10.37290/ctnr2641-452X.18:392-397. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
25. Küpeli E., Aslan M., Gürbüz İ., Yeşilada E. Isoorientin'in in vivo Biyolojik Aktivite Profilinin Değerlendirilmesi. Z. Naturforsch. 2004; 59 :787–790. doi: 10.1515/znc-2004-11-1204. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
26. Lin R., Piao M., Song Y. Dietary Quercetin, Citrobacter rodentium-Enfekte Farelerde Kolonik Mikrobiyal Çeşitliliği Artırır ve Kolit Şiddetini Azaltır. Ön. Mikrobiyoloji. 2019; 10 :1092. doi: 10.3389/fmicb.2019.01092. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
27. Qin HY, Zang KH, Zuo X., Wu XA, Bian ZX Quercetin, Postinflamatuvar İrritabl Bağırsak Sendromu Sıçanlarında Visseral Aşırı Duyarlılığı ve 5-Hidroksitriptamin Bulunabilirliğini Azaltır: Kolondaki Enterokromaffin Hücrelerinin Rolü. J.Med. Yiyecek. 2019; 22 :663–671. doi: 10.1089/jmf.2018.4264. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
28. Shi T., Bian X., Yao Z., Wang Y., Gao W., Guo C. Quercetin, antibiyotikle tedavi edilen farelerde bağırsak disbiyozunu iyileştirir. Gıda İşlevi. 2020; 11 :8003–8013. doi: 10.1039/D0FO01439G. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
29. Sun L., Xu G., Dong Y., Li M., Yang L., Lu W. Quercetin, Nrf2 Yolunun Aktivasyonu Yoluyla Etlik Piliçlerde Lipopolisakarit Kaynaklı Bağırsak Oksidatif Stresine Karşı Korur. moleküller. 2020; 25 :1053. doi: 10.3390/moleküller25051053. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
30. Zou Y., Wei HK, Xiang QH, Wang J., Zhou YF, Peng J. Quercetin'in taşıma stresinden sonra domuz bağırsağı bütünlüğü üzerindeki koruyucu etkisi, oksidatif durum ve inflamasyonun düzenlenmesi ile ilişkilidir. Vet. Med. bilim 2016; 78 :1487–1494. doi: 10.1292/jvms.16-0090. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
31. Gilani AH, Khan A., Ghayur MN, Ali SF, Herzig JW Rooibos Çayının ( Aspalathus linearis ) Antispazmodik Etkileri, Ağırlıklı Olarak K ⁺ -Kanal Aktivasyonu Aracılığıyla Gerçekleştirilir . Temel Klinik. Eczane. Toksikol. 2006; 99 :365–373. doi: 10.1111/j.1742-7843.2006.pto_507.x. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
32. Pretorius L., Van Staden AD, Kellermann TA, Henning N., Smith C. Rooibos ( Aspalathus linearis ), in vitro probiyotik ve kommensal mikropların sekretom eser amin profilini değiştirir. J. Ethnopharmacol. 2022; 297 :115548. doi: 10.1016/j.jep.2022.115548. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
33. Monsees TK, Opuwari CS Rooibos'un ( Aspalathus linearis ) dişi sıçan üreme sistemi ve karaciğer ve böbrek fonksiyonları üzerindeki in vivo etkisi. Afr. J.Bot. 2017; 110 :208–215. doi: 10.1016/j.sajb.2016.11.013. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
34. Shimamura N., Miyase T., Umehara K., Warashina T., Fujii S. Aspalathus linearis'ten Phytoestrogens . Biol. eczane Boğa. 2006; 29 :1271–1274. doi: 10.1248/bpb.29.1271. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
35. Sirotkin AV Rooibos ( Aspalathus linearis ) sağlık ve yumurtalık fonksiyonları üzerindeki etkisi. J. Animasyon Fizyol. Animasyon Nutr. 2021 doi: 10.1111/jpn.13624. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
36. Pretorius L., Smith C. İz aminerjik sistem: IBS için cinsiyete duyarlı terapötik bir hedef mi? J. Biomed. bilim 2020; 27:95 . doi: 10.1186/s12929-020-00688-1. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
37. Pretorius L., Van Staden ADP, Van der Merwe JJ, Henning N., Smith C. Mikrobiyal sekretomda östrojen tarafından yapılan değişiklikler, hassas bağırsak sendromunda cinsiyet yanlılığına katkıda bulunabilir. İnflammofarmakoloji. 2022; 30 :267–281. doi: 10.1007/s10787-021-00906-8. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
38. Breiter T., Laue C., Kressel G., Groll S., Engelhardt UH, Hahn A. Farklı rooibos formülasyonlarının tüketimini takiben insanlarda rooibos flavonoidlerin biyoyararlanımı ve antioksidan potansiyeli. Gıda Kimyası 2011; 128 :338–347. doi: 10.1016/j.foodchem.2011.03.029. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
39. Kreuz S., Joubert E., Waldmann KH, Ternes W. Aspalathus linearis'te (rooibos) bir flavonoid olan Aspalathin, domuz bağırsağında bir C-glikozit olarak emilir. Nutr. Res. 2008; 28 :690–701. doi: 10.1016/j.nutres.2008.08.002. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
40. Stalmach A., Mullen W., Pecorari M., Serafini M., Crozier A. Fermente edilmemiş ve fermente edilmiş rooibos çaylarının alımını takiben insanlarda C-bağlı dihidrokalkon ve flavanon glikozitlerin biyoyararlanımı. J. Agric. Gıda Kimyası 2009; 57 :7104–7111. doi: 10.1021/jf9011642. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
41. Luca SV, Makovei I., Bujor A., Miron A., Skalicka-Wozniak K., Aprotosoaie AC, Trifan A. Diyet polifenollerinin biyoaktivitesi: Metabolitlerin rolü. kritik Rev. Gıda Bilimi Nutr. 2020; 60 :626–659. doi: 10.1080/10408398.2018.1546669. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
42. De Santis S., Cavalcanti E., Mastronardi M., Jirillo E., Chieppa M. Nutritional Keys for Intestinal Barrier Modulation. Ön. immünol. 2015; 6 :612. doi: 10.3389/fimmu.2015.00612. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
43. Gil-Cardoso K., Gines I., Pinent M., Ardevol A., Blay M., Terra X. Diyet kaynaklı obezite sırasında flavonoidlerin bağırsak iltihabı, bariyer bütünlüğü ve bağırsak mikrobiyotasındaki değişiklikler üzerindeki etkileri. Nutr. Res. Rev. 2016; 29 :234–248. doi: 10.1017/S0954422416000159. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
44. Uyanga VA, Amevor FK, Liu M., Cui Z., Zhao X., Lin H. Citrulline ve Quercetin'in Monogastrik Hayvanların ve İnsanların Bağırsak İşlevleri Üzerindeki Potansiyel Etkileri: Kapsamlı Bir İnceleme. Besinler. 2021; 13 :3782. doi: 10.3390/nu13113782. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
45. Bhattarai Y., Williams BB, Battaglioli EJ, Whitaker WR, Till L., Grover M., Linden DR, Akiba Y., Kandimalla KK, Zachos NC, et al. Bağırsak Mikrobiyotası Tarafından Üretilen Triptamin, Kolon Salgısını Artırmak için Epitelyal G-Proteini Eşli Bir Reseptörü Aktive Eder. Hücre Konağı Mikrop. 2018; 23 :775–785.e5. doi: 10.1016/j.chom.2018.05.004. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
46. Broadley KJ, Akhtar Anwar M., Herbert AA, Fehler M., Jones EM, Davies WE, Kidd EJ, Ford WR Diyet aminlerinin bağırsak ve damar sistemi üzerindeki etkileri. Br. J. Nutr. 2009; 101 :1645–1652. doi: 10.1017/S0007114508123431. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
47. Oliphant K., Allen-Vercoe E. İnsan bağırsağı mikrobiyomu tarafından makrobesin metabolizması: Başlıca fermantasyon yan ürünleri ve bunların konukçu sağlığı üzerindeki etkileri. Mikrobiyom. 2019; 7:91 . doi: 10.1186/s40168-019-0704-8. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
48. Williams BB, Van Benschoten AH, Cimermancic P., Donia MS, Zimmermann M., Taketani M., Ishihara A., Kashyap PC, Fraser JS, Fischbach MA Nörotransmitter triptamin üretebilen bağırsak mikrobiyota dekarboksilazlarının keşfi ve karakterizasyonu. Hücre Konağı Mikrop. 2014; 16 :495–503. doi: 10.1016/j.chom.2014.09.001. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
49. Yano JM, Yu K., Donaldson GP, Shastri GG, Ann P., Ma L., Nagler CR, Ismagilov RF, Mazmanian SK, Hsiao EY Bağırsak mikrobiyotasından gelen yerli bakteriler, konakçı serotonin biyosentezini düzenler. Hücre. 2015; 161 :264–276. doi: 10.1016/j.cell.2015.02.047. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
50. Jacobs JP, Goudarzi M., Singh N., Tong M., McHardy IH, Ruegger P., Asadourian M., Moon BH, Ayson A., Borneman J., et al. Pediatrik İnflamatuvar Bağırsak Hastalarının Akrabalarında Hastalıkla İlişkili Mikrobiyal ve Metabolomik Durum. Hücre. Mol. Gastroenterol. Hepatol. 2016; 2 :750–766. doi: 10.1016/j.jcmgh.2016.06.004. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
51. Ponnusamy K., Choi JN, Kim J., Lee SY, Lee CH Mikrobiyal topluluk ve irritabl bağırsak sendromu dışkısının metabolomik karşılaştırması. J.Med. Mikrobiyoloji. 2011; 60 :817–827. doi: 10.1099/jmm.0.028126-0. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
52. Santoru ML, Piras C., Murgia A., Palmas V., Camboni T., Liggi S., Ibba I., Lai MA, Orru S., Blois S., et al. İtalyan bir IBD hastası kohortunda bağırsak mikrobiyom metabolom ekseninin kesitsel değerlendirmesi. bilim 2017 ; 7 :9523. doi: 10.1038/s41598-017-10034-5. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
53. Holtmann G., Shah A., Morrison M. Fonksiyonel Gastrointestinal Bozuklukların Patofizyolojisi: Bütünsel Bir Bakış. kazmak Dis. 2017; 35 ((Ek S1)):5–13. doi: 10.1159/000485409. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
54. Lazaridis N., Germanidis G. İrritabl bağırsak sendromunda doğuştan gelen bağışıklık sistemi işlev bozukluğuna ilişkin güncel görüşler. Ann. Gastroenterol. 2018; 31 :171–187. doi: 10.20524/aog.2018.0229. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
55. Bernardi S., Del Bo C., Marino M., Gargari G., Cherubini A., Andres-Lacueva C., Hidalgo-Liberona N., Peron G., Gonzalez-Dominguez R., Kroon P., et al. Polifenoller ve Bağırsak Geçirgenliği: Mantık ve Gelecek Perspektifleri. J. Agric. Gıda Kimyası 2020; 68 :1816–1829. doi: 10.1021/acs.jafc.9b02283. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
56. Samodien S., Kock M., Joubert E., Swanevelder S., Gelderblom WCA Rooibos ve Yeşil Çay Ekstraktlarının Birincil Sıçan Hepatositleri ve İnsan Karaciğer ve Kolon Kanseri Hücrelerine Karşı Diferansiyel Sitotoksisitesi — Başlıca Flavonoidlerin Nedensel Rolü. Nutr. Kanser. 2021; 73 :2050–2064. doi: 10.1080/01635581.2020.1820054. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
57. Bustos V., Nolan AM, Nijhuis A., Harvey H., Parker A., Poulsom R., McBryan J., Thomas W., Silver A., Harvey BJ GPER, östrojenin kolon kanseri hücre proliferasyonu üzerindeki farklı etkilerine aracılık eder ve normoksik ve hipoksik koşullar altında göç. Oncotarget. 2017; 8 :84258–84275. doi: 10.18632/oncotarget.20653. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
58. Jacenik D., Zielinska M., Mokrowiecka A., Michlewska S., Malecka-Panas E., Kordek R., Fichna J., Krajewska WM G protein-bağlı östrojen reseptörü, Crohn hastalığında anti-inflamatuar etkiye aracılık eder. bilim 2019 ; 9 :6749. doi: 10.1038/s41598-019-43233-3. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
59. Wada-Hiraike O., Imamov O., Hiraike H., Hultenby K., Schwend T., Omoto Y., Warner M., Gustafsson JA Role of östrojen reseptörü beta in kolon epiteli. Proc. Natl. Acad. bilim AMERİKA BİRLEŞİK DEVLETLERİ. 2006; 103 :2959–2964. doi: 10.1073/pnas.0511271103. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
60. Kim YS, Kim N. İrritabl Bağırsak Sendromunda Cinsiyet-Cinsiyet Farklılıkları. J. Nörogastroenterol. Hareketli. 2018; 24 :544–558. doi: 10.5056/jnm18082. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
61. Akinrinmade O., Omoruyi S., Dietrich D., Ekpo O. Fermente rooibos bitki çayının uzun süreli tüketimi, sıçanlarda iskemik beyin hasarına karşı nöro koruma sağlar. Açta Neurobiol. Tecrübe. 2017; 77 :94–105. doi: 10.21307/ane-2017-040. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
62. Fisher D., Thomas KA, Abdul-Rasool S. Alkol-Antioksidan Tedavinin Kan-Beyin Bariyeri Endotel Hücreleri Üzerindeki Sinerjistik ve Nöroprotektif Etkileri. Alkol. klinik Tecrübe. Res. 2020; 44 :1997–2007. doi: 10.1111/acer.14433. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
63. Bowles S., Joubert E., de Beer D., Louw J., Brunschwig C., Njoroge M., Lawrence N., Wiesner L., Chibale K., Muller C. Intestinal Transport Characteristics and Metabolism of C- Glukozil Dihidrokalkon, Aspalathin. moleküller. 2017; 22 :554. doi: 10.3390/moleküller22040554. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
64. Kelly JR, Kennedy PJ, Cryan JF, Dinan TG, Clarke G., Hyland NP Engelleri yıkmak: Bağırsak mikrobiyomu, bağırsak geçirgenliği ve strese bağlı psikiyatrik bozukluklar. Ön. Hücre. Nörobilim. 2015; 9 :392. doi: 10.3389/fncel.2015.00392. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
65. Srivastava V., Dey I., Leung P., Chadee K. Prostaglandin E2, insan kolonik epitel hücrelerinde bir multiprotein enhansozom oluşumu yoluyla IL-8 ekspresyonunu modüle eder. Avro. J. Immunol. 2012; 42 :912–923. doi: 10.1002/eji.201141965. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
66. Del Rio B., Redruello B., Ladero V., Cal S., Obaya AJ, Alvarez MA Tiramine maruz kalan bağırsak hücre kültürlerinde değiştirilmiş bir gen ekspresyon profili, bu biyojenik aminin diyet konsantrasyonlarında genotoksisitesini destekler. bilim 2018 ; 8 :17038. doi: 10.1038/s41598-018-35125-9. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
67. Luqman A., Nega M., Nguyen MT, Ebner P., Gotz F. İnsan Bağırsağında SadA-Expressing Staphylococci Show Artan Hücre Adherence and Internalization. Hücre Temsilcisi 2018; 22 :535–545. doi: 10.1016/j.celrep.2017.12.058. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
68. Pugin B., Barcik W., Westermann P., Heider A., Wawrzyniak M., Hellings P., Akdis CA, O'Mahony L. İnsan bağırsağından çok çeşitli bakteri üretir ve biyojenik aminleri bozar. Mikrob. ekol. Sağlık Dis. 2017; 28 :1353881. doi: 10.1080/16512235.2017.1353881. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
69. Barbieri F., Montanari C., Gardini F., Tabanelli G. Laktik Asit Bakterileri ile Biyojenik Amin Üretimi: Bir Gözden Geçirme. yiyecekler. 2019; 8:17 . doi: 10.3390/foods8010017. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
70. Reddick LE, Alto NM Bakteriler savaşıyor: Patojenler, konağın doğuştan gelen bağışıklık sistemini nasıl hedef alır ve bozar. Mol. Hücre. 2014; 54 :321–328. doi: 10.1016/j.molcel.2014.03.010. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
71. Yu M., Yang S., Qiu Y., Chen G., Wang W., Xu C., Cai W., Sun L., Xiao W., Yang H. Par-3, bağırsak epitel bariyer fonksiyonunu modüle eder. okludin ve miyozin hafif zincir fosforilasyonunun hücre içi trafiğini düzenler. J. Gastroenterol. 2015; 50 :1103–1113. doi: 10.1007/s00535-015-1066-z. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
72. de Almeida CJG Caveolin-1 ve Caveolin-2 Enflamasyon ve Ötesinde Antagonistik Ortaklar Olabilir. Ön. immünol. 2017; 8 :1530. doi: 10.3389/fimmu.2017.01530. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
73. Feng H., Guo W., Han J., Li XA Endotoksemi ve sepsiste caveolin-1 ve caveolae sinyalinin rolü. Hayat Bilimi 2013; 93 :1–6. doi: 10.1016/j.lfs.2013.05.016. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
74. Marchiando AM, Shen L., Graham WV, Weber CR, Schwarz BT, Austin JR, II, Raleigh DR, Guan Y., Watson AJ, Montrose MH, et al. Caveolin-1'e bağlı okludin endositoz, in vivo olarak TNF'nin neden olduğu sıkı bağlantı düzenlemesi için gereklidir. J. Hücre Biol. 2010; 189 :111–126. doi: 10.1083/jcb.200902153. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
75. Lei MG, Tan X., Qureshi N., Morrison DC Fare makrofajlarında mikrobiyal ürünler tarafından hücresel caveolin-1 protein ekspresyonunun düzenlenmesi. bulaştırmak. Bağışıklık. 2005; 73 :8136–8143. doi: 10.1128/IAI.73.12.8136-8143.2005. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
76. Machado FS, Rodriguez NE, Adesse D., Garzoni LR, Esper L., Lisanti MP, Burk RD, Albanese C., Van Doorslaer K., Weiss LM, et al. Caveolin ve patojenler arasındaki etkileşimlerdeki son gelişmeler. Av. Tecrübe. Med. Biol. 2012; 729 :65–82. doi: 10.1007/978-1-4614-1222-9_5. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
77. Lim JS, Na HS, Lee HC, Choy HE, Park SC, Han JM, Cho KA Bir insan M-hücresi modelinde Salmonella typhimurium'un Caveolae-aracılı girişi. biyokimya biyografiler. Res. komün. 2009; 390 :1322–1327. doi: 10.1016/j.bbrc.2009.10.145. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
78. Tipton KF 90 yıllık monoamin oksidaz: Biraz ilerleme ve biraz kafa karışıklığı. J. Sinir İletimi. 2018; 125 :1519–1551. doi: 10.1007/s00702-018-1881-5. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
79. Seregi A., Hertting G. Sıçan Beyin Homojenatlarında Monoamin Metabolizması Sırasında Siklooksijenaz Aktivitesi ve Prostaglandin Profillerindeki Değişiklikler. Prostaglandinler Lökot. Med. 1984; 14 :113–121. doi: 10.1016/0262-1746(84)90029-5. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
80. Rodriguez-Lagunas MJ, Martin-Venegas R., Moreno JJ, Ferrer R. PGE2, Caco-2 hücre tek tabakalarında EP1 ve EP4 reseptörleri yoluyla Ca2 ^{+ -aracılı epitelyal bariyer bozulmasını destekler.} Am. J. Physiol. Hücre Fizyol. 2010; 299 :C324–C334. doi: 10.1152/ajpcell.00397.2009. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
81. Harnish DC, Albert LM, Leathurby Y., Eckert AM, Ciarletta A., Kasaian M., Keith JC Enflamatuvar bağırsak hastalığının HLA-B27 transgenik sıçan modelinde östrojen tedavisinin faydalı etkileri. Am. J. Physiol. Gastrointestinal. Karaciğer Fizyol. 2004; 286 :G118–G125. doi: 10.1152/ajpgi.00024.2003. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
82. Harris HA Östrojen reseptörü-beta: in vivo çalışmalardan son dersler. Mol. endokrinol. 2007; 21 :1–13. doi: 10.1210/me.2005-0459. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
83. Looijer-van Langen M., Hotte N., Dieleman LA, Albert E., Mulder C., Madsen KL Estrojen reseptörü-beta sinyali, epitel bariyer fonksiyonunu modüle eder. Am. J. Physiol. Gastrointestinal. Karaciğer Fizyol. 2011; 300 :G621–G626. doi: 10.1152/ajpgi.00274.2010. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
84. Farruggio S., Raina G., Cocomazzi G., Librasi C., Mary D., Gentilli S., Grossini E. Genistein, fizyolojik ve peroksidatif koşullarda kültürlenmiş kardiyomiyoblastların canlılığını, çoğalmasını ve mitokondriyal işlevini geliştirir. Int. J. Mol. Med. 2019; 44 :2298–2310. doi: 10.3892/ijmm.2019.4365. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
85. Giddabasappa A., Bauler M., Yepuru M., Chaum E., Dalton JT, Eswaraka J. 17-beta estradiol, ARPE-19 hücrelerini östrojen reseptörü-beta aracılığıyla oksidatif stresten korur. Araştırmak oftalmol. Vis. bilim 2010; 51 :5278–5287. doi: 10.1167/iovs.10-5316. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
86. Khan I., Saeed K., Jo MG, Kim MO 17-beta Estradiol, Nrf2/HO-1 ve MAP-Kinase Sinyal Yolunu Düzenleyerek Glutamat Kaynaklı Oksidatif Stres ve Nörodejenerasyona Karşı Olgunlaşmamış Sıçan Beynini Kurtardı. antioksidanlar. 2021; 10 :892. doi: 10.3390/antiox10060892. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
87. Ruan Y., Wu S., Zhang L., Chen G., Lai W. Hidrojen peroksit tarafından indüklenen insan vasküler endotel hücrelerinin yaşlanmasını geciktirmek: 17beta-estradiol (E2) aracılı mitokondri korumasının etkileri. Biyogerontoloji. 2014; 15 :367–375. doi: 10.1007/s10522-014-9507-2. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
88. Diebel ME, Diebel LN, Manke CW, Liberati DM Östrojen, bağırsak mukusunun fizyokimyasal özelliklerini modüle eder ve oksidan hasarına karşı korur. J. Travma Akut Bakım Cerrahı. 2015; 78 :94–99. doi: 10.1097/TA.0000000000000499. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
89. Xu D., Hu MJ, Wang YQ, Cui YL Tıbbi Uygulama için Kuersetin ve Komplekslerinin Antioksidan Aktiviteleri. moleküller. 2019; 24 :1123. doi: 10.3390/moleküller24061123. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
90. Ahn SS, Kim SH, Lee JE, Ahn KJ, Kim DJ, Choi HS, Kim J., Shin NY, Lee SK Bir sıçan geçici serebral iskemi modelinde permeabilite MRI ile değerlendirilen kan-beyin bariyeri stabilizasyonu üzerindeki agmatinin etkileri . AJNR Am. J. Nöroradiol. 2015; 36 :283–288. doi: 10.3174/ajnr.A4113. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
91. Mayeur C., Veuillet G., Michaud M., Raul F., Blottiere HM, Blachier F. İnsan kolon karsinoma hücrelerinde agmatin birikiminin poliamin metabolizması, DNA sentezi ve hücre döngüsü üzerindeki etkileri. Biyokimya. biyografiler. Açta. 2005; 1745 :111–123. doi: 10.1016/j.bbamcr.2004.12.004. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
92. Martinis P., Grancara S., Kanamori Y., Garcia-Argaez AN, Pacella E., Dalla Via L., Toninello A., Agostinelli E. Biyojenik aktif amin agmatinin mitokondriyal membran permeabilizasyonuna katılımı ve pro salınımı -apoptotik faktörler. Amino asitler. 2020; 52 :161–169. doi: 10.1007/s00726-019-02791-6. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
93. Mironczuk-Chodakowska I., Witkowska AM, Zujko ME İnsan vücudunda endojen enzimatik olmayan antioksidanlar. Av. Med. bilim 2018; 63 :68–78. doi: 10.1016/j.advms.2017.05.005. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
94. Rider JE, Hacker A., Mackintosh CA, Pegg AE, Woster PM, Casero RA, Jr. Spermin ve spermidin, hidrojen peroksidin neden olduğu oksidatif hasara karşı korumaya aracılık eder. Amino asitler. 2007; 33 :231–240. doi: 10.1007/s00726-007-0513-4. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
95. Guo X., Rao JN, Liu L., Zou T., Keledjian KM, Boneva D., Marasa BS, Wang JY Poliaminler, bağırsak epitel hücrelerinde oklüdin proteininin sentezi ve stabilitesi için gereklidir. Am. J. Physiol. Gastrointestinal. Karaciğer. Fizyol. 2005; 288 :G1159–G1169. doi: 10.1152/ajpgi.00407.2004. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
96. Rao JN, Rathor N., Zhuang R., Zou T., Liu L., Xiao L., Turner DJ, Wang JY Poliaminler, STIM1 ve STIM2'yi diferansiyel olarak modüle ederek TRPC1 aracılı Ca2+ sinyali aracılığıyla bağırsak epitelyal yeniden yapılanmasını düzenler ^. Am. J. Physiol. Hücre Fizyol. 2012; 303 :C308–C317. doi: 10.1152/ajpcell.00120.2012. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
97. Fujisawa S., Kadoma Y. Radikal Süpürücü Olarak Poliaminlerin Kinetik Değerlendirmesi. Antikanser Res. 2005; 25 :965–970. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
98. Dludla PV, Muller CJF, Louw J., Mazibuko-Mbeje SE, Tiano L., Silvestri S., Orlando P., Marcheggiani F., Cirilli I., Chellan N., et al. Rooibos'tan Aspalathin ve Fenilpirüvik Asit-2-O-beta-D-glukozitin Hiperglisemi Kaynaklı Kardiyak Hasara Karşı Kombinasyon Etkisi: Bir In Vitro Çalışması. Besinler. 2020; 12 :1151. doi: 10.3390/nu12041151. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
99. Moussa Z., Judeh ZMA, Ahmed SA Enzimatik Olmayan Eksojen ve Endojen Antioksidanlar. İçinde: Das K., Das S., Biradar MS, Bobbarala V., Ata SS, editörler. Serbest Radikal Tıp ve Biyoloji. IntechAçık; Londra, Birleşik Krallık: 2019. [ Google Scholar ]
100. Stander MA, Van Wyk BE, Taylor MJC, Uzun HS Rooibos Çayındaki ( Aspalathus linearis ) Fenolik Bileşiklerin Analizi ve Farklı Bölgelerden Bitkilerin Doğal Popülasyonlarındaki Flavonoid Esaslı Bileşiklerin Karşılaştırması. J. Agric. Gıda Kimyası 2017; 65 :10270–10281. doi: 10.1021/acs.jafc.7b03942. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
101. Joubert E., Beelders T., de Beer D., Malherbe CJ, de Villiers AJ, Sigge GO Fermente rooibos bitkisel çay infüzyonlarının fenolik içeriği ve antioksidan aktivitesinde değişiklik: Üretim sezonunun ve kalite derecesinin rolü. J. Agric. Gıda Kimyası 2012; 60 :9171–9179. doi: 10.1021/jf302583r. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
102. Damiani E., Carloni P., Rocchetti G., Senizza B., Tiano L., Joubert E., de Beer D., Lucini L. Rooibos'un Fenolik Profili ve Antioksidan Kapasitesi Üzerinde Soğuk ve Sıcak Bira Üretiminin Etkisi ( Aspalathus linearis ) Bitki Çayı. antioksidanlar. 2019; 8 :499. doi: 10.3390/antiox8100499. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
103. Bir F., Yang G., Tian J., Wang S. D-galaktoz yaşlı farelerde Trollius chinensis Bunge'de orientin ve vitexin'in antioksidan etkileri. Nöral Regen. Res. 2012; 7 :2565–2575. doi: 10.3969/j.issn.1673-5374.2012.33.001. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
104. Nayak V., Uma P. Ocimum Flavonoids Orientin ve Vicenin'in Escherichia coli'de Antioksidan ve Radyoprotektif Etkileri. Def. bilim J.2006 ; 56 :179–187. doi: 10.14429/dsj.56.1881. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
105. Praveena R., Sadasivam K., Deepha V., Sivakumar R. Orientin'in antioksidan potansiyeli: Birleştirilmiş deneysel ve DFT yaklaşımı. J. Mol. Yapı. 2014; 1061 :114–123. doi: 10.1016/j.molstruc.2014.01.002. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
106. Cheel J., Theoduloz C., Rodriguez J., Schmeda-Hirschmann G. Lemongrass'tan (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf.) Serbest Radikal Süpürücüler ve Antioksidanlar J. Agric. Gıda Kimyası 2005; 53 :2511–2517. doi: 10.1021/jf0479766. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
107. Sarıkahya NB, Pekmez M., Arda N., Kayce P., Yavaşoğlu N.Ü.K., Kırmızıgül S. Anadolu'daki endemik Cephalaria türlerinden biyolojik olarak aktif glikozitlerin izolasyonu ve karakterizasyonu. fitokimya Letonya 2011; 4 :415–420. doi: 10.1016/j.phytol.2011.05.006. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
108. Yuan L., Li X., He S., Gao C., Wang C., Shao Y. Doğal Flavonoid İzoorientinin Büyüme Performansı ve Farelerin Bağırsak Mikrobiyotası Üzerindeki Etkileri. J. Agric. Gıda Kimyası 2018; 66 :9777–9784. doi: 10.1021/acs.jafc.8b03568. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
109. Park CM, Song YS Luteolin ve luteolin-7-O-glucoside, GalN/LPS ile indüklenen hepatik ICR farelerinde inflamatuar mediatörlerin ve antioksidatif enzimlerin düzenlenmesi yoluyla akut karaciğer hasarına karşı koruma sağlar. Nutr. Res. Pratik 2019; 13 :473–479. doi: 10.4162/nrp.2019.13.6.473. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
110. Rehfeldt SCH, Silva J., Alves C., Pinteus S., Pedrosa R., Laufer S., Goettert MI Luteolin-7-O-Glucoside'ın Farklılaşmamış ve RA-Farklılaşmışta 6-OHDA-İndüklenmiş Hasara Karşı Nöroprotektif Etkisi SH-SY5Y Hücreleri. Int. J. Mol. bilim 2022; 23 :2914. doi: 10.3390/ijms23062914. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
111. Song YS, Park CM Luteolin ve luteolin-7-O-glucoside, RAW 264.7 hücrelerinde Nrf2/MAPK aracılı HO-1 sinyal kaskadının modülasyonu yoluyla antioksidan potansiyeli güçlendirir. Gıda Kimyası Toksikol. 2014; 65 :70–75. doi: 10.1016/j.fct.2013.12.017. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
112. Novaes P., Torres PB, Cornu TA, Lopes JdC, Ferreira MJP, dos Santos DYAC Annona coriacea kaynaklı flavonollerin antioksidan aktivitelerinin dört yaklaşımla karşılaştırılması. Afr. J.Bot. 2019; 123 :253–258. doi: 10.1016/j.sajb.2019.03.011. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
113. Zheng YZ, Deng G., Liang Q., Chen DF, Guo R., Lai RC Quercetin'in Antioksidan Aktivitesi ve Propolis'teki Glukozitleri: Teorik Bir Çalışma. bilim 2017 ; 7 :7543. doi: 10.1038/s41598-017-08024-8. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
114. Duan X., Wu T., Liu T., Yang H., Ding X., Chen Y., Mu Y. Vicenin-2, UVB radyasyonuna maruz kalan insan derisinde MAPK'lerin ve MMP'lerin modülasyonu yoluyla oksidatif hasarı ve fotoyaşlanmayı iyileştirir hücreler. J. Fotokim. Fotobiyol. B.2019 ; 190 :76–85. doi: 10.1016/j.jphotobiol.2018.11.018. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
115. Lee B.-S., Yang S., Lee C., Ku S.-K., Bae J.-S. Bir fare sepsis modelinde Vicenin-2 ve skolimozidin renal koruyucu etkileri. Braz. J. Ecz. bilim 2020; 56 :e18636. doi: 10.1590/s2175-97902019000418636. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
116. Li Y., Zheng Y., Wang H. Vicenin-2'nin hamsterlerde 7,12 dimetilbenz[a]antrasen kaynaklı bukkal kese karsinomasına karşı antikanser aktivitesi. J. Biochem. Mol. Toksikol. 2021; 35 :e22673. doi: 10.1002/jbt.22673. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
117. Himpe E., Cunha DA, Song I., Bugliani M., Marchetti P., Cnop M., Bouwens L. Rooibos'tan Fenilpropenoik Asit Glukozit Pankreatik Beta Hücrelerini Akut Yaralanmanın Neden Olduğu Hücre Ölümüne Karşı Korur. PLoS BİR. 2016; 11 :e0157604. doi: 10.1371/journal.pone.0157604. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
118. Iswaldi I., Arraez-Roman D., Rodriguez-Medina I., Beltran-Debon R., Joven J., Segura-Carretero A., Fernandez-Gutierrez A. Sulu ve etanolik rooibos ekstraktlarında fenolik bileşiklerin tanımlanması ( Aspalathus linearis ) HPLC-ESI-MS (TOF/IT) Anal. Biyoanal. kimya 2011; 400 :3643–3654. doi: 10.1007/s00216-011-4998-z. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
119. Marnewick JL Systems Serbest Radikallerin ve Antioksidanların Biyolojisi. Baharcı; Berlin/Heidelberg, Almanya: 2014. Rooibos'un ( Aspalathus linearis ) Antioksidan Özellikleri—In Vitro ve in Vivo Evidence; sayfa 4083–4108. [ Google Akademik ]
120. Joubert E., Winterton P., Britz TJ, Gelderblom WCA Rooibos'un ( Aspalathus linearis ) Sulu Ekstraktlarının ve Ham Polifenolik Fraksiyonlarının Antioksidan ve Prooksidan Aktiviteleri J. Agric. Gıda Kimyası 2005; 53 :10260–10267. doi: 10.1021/jf051355a. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]

[maturidi]

Aspalathus linearis (Rooibos) - kardiyovasküler hastalığı hedefleyen fonksiyonel bir gıda

Carine Smith ¹, Amanda Swart
üyelikler Fizyolojik Bilimler Bölümü, Fen Fakültesi, Stellenbosch Üniversitesi, Stellenbosch, Güney Afrika. csmith@sun.ac.za.

• PMID: 30183052
• DOI: 10.1039/c8fo01010b

Soyut


Doğal ürünlere yönelik artan tüketici önyargısı ve yerli bilginin önemli zenginliği, potansiyel olarak yararlı tıbbi bitkilere yönelik pazar odaklı araştırmalarda bir yükselişi hızlandırdı. Bu bağlamda, Aspalathus linearis'in (Rooibos), modern zamanların en çok çalışılan kronik hastalıklarından biri olan kardiyovasküler hastalığı (KVH) etkileyebilecek umut verici bir aday olduğu tespit edilmiştir. Bu çabalara rağmen, iskemik kalp hastalığı, dünya çapında bir numaralı ölüm nedeni olmaya devam ediyor. Belirli CVD tiplerine özgü genetik yatkınlık ve diğer etiyolojik mekanizmaların dışında, birbirine bağlı sistemlerden gelen yardımcı faktörler, hastalığın gelişimine ve klinik tezahürünün ciddiyetine önemli ölçüde katkıda bulunur. Rooibos'un biyoaktivitesi, çoklu terapötik hedeflere yöneliktir. Bugüne kadarki deneysel veriler, antioksidan, anti-enflamatuar ve anti-diyabetik etkilerin yanı sıra bağışıklık sistemi, adrenal steroidogenez ve lipid metabolizması açısından modülatör etkileri içerir. Bu derleme, şu anda bulaşıcı olmayan hastalıkların en yaygını olan KVH bağlamında Rooibos'un terapötik potansiyeli hakkındaki ilgili literatürü bir araya getirmektedir. Tüm bitki özlerinin izole edilmiş aktif bileşenlere karşı terapötik değeri, aşırı doz veya bitki-ilaç etkileşimi potansiyeli ile birlikte ele alınmaktadır. Bugüne kadar yapılan araştırmalar, Rooibos'un CVD bağlamında hem önleyici hem de tamamlayıcı terapötik fonksiyonel gıda olarak faydalarının altını açıkça çizmektedir. adrenal steroidogenez ve lipid metabolizması. Bu derleme, şu anda bulaşıcı olmayan hastalıkların en yaygını olan KVH bağlamında Rooibos'un terapötik potansiyeli hakkındaki ilgili literatürü bir araya getirmektedir. Tüm bitki özlerinin izole edilmiş aktif bileşenlere karşı terapötik değeri, aşırı doz veya bitki-ilaç etkileşimi potansiyeli ile birlikte ele alınmaktadır. Bugüne kadar yapılan araştırmalar, Rooibos'un CVD bağlamında hem önleyici hem de tamamlayıcı terapötik fonksiyonel gıda olarak faydalarının altını açıkça çizmektedir. adrenal steroidogenez ve lipid metabolizması. Bu derleme, şu anda bulaşıcı olmayan hastalıkların en yaygını olan KVH bağlamında Rooibos'un terapötik potansiyeli hakkındaki ilgili literatürü bir araya getirmektedir. Tüm bitki özlerinin izole edilmiş aktif bileşenlere karşı terapötik değeri, aşırı doz veya bitki-ilaç etkileşimi potansiyeli ile birlikte ele alınmaktadır. Bugüne kadar yapılan araştırmalar, Rooibos'un CVD bağlamında hem önleyici hem de tamamlayıcı terapötik fonksiyonel gıda olarak faydalarının altını açıkça çizmektedir. doz aşımı veya bitki-ilaç etkileşimi potansiyeli ile birlikte. Bugüne kadar yapılan araştırmalar, Rooibos'un CVD bağlamında hem önleyici hem de tamamlayıcı terapötik fonksiyonel gıda olarak faydalarının altını açıkça çizmektedir. doz aşımı veya bitki-ilaç etkileşimi potansiyeli ile birlikte. Bugüne kadar yapılan araştırmalar, Rooibos'un CVD bağlamında hem önleyici hem de tamamlayıcı terapötik fonksiyonel gıda olarak faydalarının altını açıkça çizmektedir.

[maturidi]

Aspalathus linearis ekstraktlarının farmakolojik aktivitesi : prospektif nöroproteksiyon açısından klinik öncesi araştırma

Justyna Pyrzanowska ¹
üyelikler Deneysel ve Klinik Farmakoloji Bölümü, Varşova Tıp Üniversitesi, Klinik Öncesi Araştırma ve Teknoloji Merkezi CePT, Varşova, Polonya.

• PMID: 35311618
• DOI: 10.1080/1028415X.2022.2051955

Soyut

Amaç: Aspalathus linearis bitki materyalinden yapılan ve çok sayıda polifenolik bileşik içeren çok popüler bir günlük içecek olan Rooibos çayı, polifenol bakımından zengin diğer gıda ürünlerinin tüketiminde olduğu gibi nörodejeneratif hastalıkların patogenezinde gözlemlenen çeşitli süreçleri olumlu yönde etkileme beklentisini ortaya koymaktadır. .

Yöntemler: Bu inceleme, klinik öncesi in vitro ve in vivo çalışmalardan elde edilen mevcut verilere dayanmaktadır ve nörodejeneratif hastalıklarla ilgili A. linearis ekstraktlarının farmakolojik aktivitesi hakkında geniş bir rapor sunmaktadır .

Bulgular: Bitki infüzyonlarında bulunan flavonoidler mide-bağırsak sisteminden emilir ve merkezi sinir sistemini etkileyebilir. Deneysel araştırmalar, A. linearis'in , öncelikle anti-oksidatif ve anti-enflamatuar özellikleri, anti-hiperglisemik ve anti-hiperlipidemik etkileri ve ayrıca aşağıdaki bilişsel ile nörotransmisyon üzerindeki olumlu etkisi nedeniyle nörodejenerasyonun önlenmesindeki destekleyici rolünü gösteren sonuçlar vermektedir. ve davranışsal sonrası matematik.

Tartışma: Aspalathus linearis ekstraktlarının çoklu farmakolojik aktiviteleri ve güvenliği el yazmasında yorumlanmıştır. Sürekli rooibos çayı tüketimi güvenli görünüyor (karaciğer tahrişine rağmen); ancak bitkisel ilaç etkileşimleri riski vardır.

Anahtar Kelimeler: Aspalathus linearis; antioksidanlar; aspalatin; beyin; nörodejenerasyon; nörotransmisyon; polifenoller; kemirgenler

[maturidi]

Aspalathus linearis, c-Myc'nin inhibisyonu ve androjen reseptörünün stabilitesi yoluyla hücre sağkalımını ve enzalutamide dirençli prostat kanseri hücrelerinin çoğalmasını baskılar

Bi-Juan Wang , Veri iyileştirme , Araştırma , Doğrulama , ^{# 1} Shih-Han Huang , Veri iyileştirme , Araştırma , Doğrulama , ^{# 1 , 2} Cheng-Li Kao , Finansman sağlama , Araştırma , Doğrulama , ^{# 3 , 4} Christo JF Muller , Kavramsallaştırma , Finansman sağlama , Metodoloji , Kaynaklar , Görselleştirme, Yazma - gözden geçirme ve düzenleme , ^{5 , 6 , 7} Ya-Pei Wang , Araştırma , Görselleştirme , ¹ Kai-Hsiung Chang , Metodoloji , Kaynaklar , ¹ Hui-Chin Wen , Soruşturma , Metodoloji , ¹ Chien-Chih Yeh , Finansman sağlama , Metodoloji , Doğrulama , ^{8 , 9} Li-Jane Shih , Finansman sağlama , Metodoloji ,Doğrulama , ^{8 , 10} Yung-Hsi Kao , Kavramsallaştırma , Yazma - inceleme ve düzenleme , ² Shu-Pin Huang , Kavramsallaştırma , Yazma - inceleme ve düzenleme , ^{11 , 12 , 13 , 17} Chia-Yang Li , Kavramsallaştırma , Yazma - inceleme ve düzenleme , ¹⁴ ve Chih-Pin Chuu , Kavramsallaştırma , Veri düzenleme , Biçimsel analiz , Finansman sağlama ,Proje yönetimi , Kaynaklar , Denetim , Yazma – orijinal taslak , Yazma – inceleme ve düzenleme ^{1 , 2 , 15 , 16 , *}
Salvatore V. Pizzo, Editör
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
¹ Hücresel ve Sistem Tıbbı Enstitüsü, Ulusal Sağlık Araştırma Enstitüleri, Miaoli İlçesi, Tayvan
² Yaşam Bilimleri Bölümü, Ulusal Merkez Üniversitesi, Taoyuan Şehri, Tayvan
³ Üroloji Bölümü, Cerrahi Bölümler, Tri-Service Genel Hastanesi, Ulusal Savunma Tıp Merkezi, Taipei, Tayvan
⁴ Üroloji Bölümü, Cerrahi Bölümü, Taoyuan Silahlı Kuvvetler Genel Hastanesi, Taoyuan, Tayvan
⁵ Biyomedikal Araştırma ve Yenilik Platformu (BRIP), Güney Afrika Tıbbi Araştırma Konseyi, Tygerberg, Güney Afrika
⁶ Tıbbi Fizyoloji Anabilim Dalı, Sağlık Bilimleri Fakültesi, Stellenbosch Üniversitesi, Tygerberg, Güney Afrika
⁷ Biyokimya ve Mikrobiyoloji Bölümü, Zululand Üniversitesi, KwaDlangezwa, Güney Afrika
⁸ Eğitim ve Tıbbi Araştırma Departmanı, Taoyuan Silahlı Kuvvetler Genel Hastanesi, Taoyuan, Tayvan
⁹ Kolon ve Rektal Cerrahi Bölümü, Cerrahi Bölümü, Tri-Service Genel Hastanesi, Ulusal Savunma Tıp Merkezi, Taipei, Tayvan
¹⁰ Tıp Bilimleri Enstitüsü, Ulusal Savunma Tıp Merkezi, Taipei, Tayvan
¹¹ Üroloji Bölümü, Tıp Fakültesi, Tıp Fakültesi, Kaohsiung Tıp Üniversitesi, Kaohsiung Tayvan
¹² Üroloji Bölümü, Kaohsiung Tıp Üniversitesi Hastanesi, Kaohsiung Tıp Üniversitesi, Kaohsiung, Tayvan
¹³ Klinik Tıp Enstitüsü, Tıp Fakültesi, Kaohsiung Tıp Üniversitesi, Kaohsiung, Tayvan
¹⁴ Tıp Enstitüsü, Tıp Fakültesi, Kaohsiung Tıp Üniversitesi, Kaohsiung, Tayvan
¹⁵ Yaşlanma Doktora Programı ve Temel Tıp Bilimleri Enstitüsü, Çin Tıp Üniversitesi, Taichung Şehri, Tayvan
¹⁶ Biyoteknoloji Merkezi, Ulusal Chung Hsing Üniversitesi, Taichung Şehri, Tayvan
¹⁷ Biyomedikal Bilim Enstitüsü, Ulusal Sun Yat-sen Üniversitesi, Kaohsiung Şehri, Tayvan
Duke Üniversitesi Tıp Fakültesi, AMERİKA BİRLEŞİK DEVLETLERİ
Sorumlu yazar.
^# Eşit katkıda bulundu.
Çakışan Çıkarlar: Yazarlar, çatışan çıkarların olmadığını beyan etmişlerdir.
* E-posta: wt.gro.irhn@uuhcpc İlişkili Veriler

Tamamlayıcı Malzemeler Veri Kullanılabilirliği Bildirimi
Git: Soyut


Steroid olmayan bir antiandrojen olan enzalutamid, metastatik kastrasyona dirençli prostat kanseri (CRPC) olan hastaların sağkalımını önemli ölçüde uzatmıştır. Bununla birlikte, enzalutamid alan hastalarda sıklıkla ilaç direnci gelişir. Rooibos ( Aspalathus linearis), Güney Afrika'daki Cedarberg Dağları bölgesine özgü çalı benzeri bir baklagil fynbos bitkisidir. Enzalutamide dirençli prostat kanseri (PCa) hücrelerinin çoğalmasını ve hayatta kalmasını baskılamak için farmasötik dereceli bir yeşil rooibos özütü (%12.78 aspalatin içeren GRT) kullanma olasılığını değerlendirdik. GRT ile tedavi doza bağlı olarak enzalutamide dirençli C4-2 MDV3100r hücrelerinin ve PC-3 hücrelerinin çoğalmasını, hayatta kalmasını ve koloni oluşumunu baskılamıştır. Kanserli olmayan insan hücreleri, GRT tedavisine daha dirençliydi. GRT, fosfoinositid 3-kinaz (PI3K)-Akt sinyali, androjen reseptörü (AR), fosfo-AR (Ser81), sikline bağımlı kinaz 1 (Cdk1), c-Myc ve Bcl-2'de yer alan proteinlerin ekspresyonunu baskıladı, ancak arttı apoptotik proteinlerin ekspresyonu. C-Myc'nin aşırı ifadesi, GRT'nin baskılayıcı etkilerini antagonize etti, c-Myc'nin yıkılması PCa hücrelerinin GRT tedavisine duyarlılığını arttırırken. c-Myc'nin ekspresyon seviyesi, PCa hücrelerinin GRT tedavisine karşı direnci ile ilişkilidir. Ek olarak, immünofloresan mikroskopi, GRT'nin hem çekirdekte hem de sitoplazmada AR proteinlerinin bolluğunu azalttığını gösterdi. Sikloheksimit ile tedavi, GRT'nin AR stabilitesini azalttığını ortaya çıkardı. GRT, C4-2 MDV3100r hücrelerinde AR ve AR'nin akış aşağı hedef prostat spesifik antijeninin (PSA) protein ekspresyonunu bastırdı. İlginç bir şekilde, AR proteinlerinin çekirdekte biriktiğini ve androjen yokluğunda bile AR-pozitif enzalutamide dirençli PCa hücrelerinde PSA ekspresyonunun aktive olduğunu gözlemledik. Sonuçlarımız, GRT tedavisinin, c-Myc inhibisyonu, apoptoz indüksiyonu yoluyla enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin hücre proliferasyonunu ve hayatta kalmasını baskıladığını gösterdi. AR'nin ifadesinin, sinyalinin ve kararlılığının bastırılmasının yanı sıra. GRT, enzalutamide dirençli PCa için potansiyel bir adjuvan terapötik ajandır.

Git: giriiş


Prostat kanseri (PCa), erkeklerde en sık teşhis edilen ikinci kanser ve dünya çapında en yaygın beşinci kanserdir. Dünyada her yıl yaklaşık 1.200.000 yeni vaka teşhis edilmektedir. PCa'dan ölen hastaların %80'den fazlasında kemik metastazı gelişmiştir. Lokalize PCa ile karşılaştırıldığında, metastatik PCa daha kötü bir prognoza ve daha yüksek mortalite oranına sahiptir ve 5 yıllık sağkalım %30'dan azdır. Androjen yoksunluğu tedavisi (ADT), metastatik prostat kanseri (PCa) için standart tedavidir. Bununla birlikte, ADT alan hastaların çoğu, 1-3 yıl içinde sonunda kastrasyona dirençli prostat kanseri (CRPC) geliştirir. Enzalutamide (eski adıyla MDV3100), metastatik CRPC'nin tedavisi için 2012'de piyasaya sürülen nonsteroidal bir antiandrojendir. Enzalutamid, metastatik CRPC'li hastaların sağkalımını önemli ölçüde uzatmıştır.1 ]. Ancak, enzalutamid tedavisi alan çoğu hasta ortalama 18 ay sonra ilaç direnci geliştirir [ 2 ]. Bu nedenle yeni terapötik ajanlara ihtiyaç vardır.

Rooibos ( Aspalathus linearis ), Güney Afrika'nın Western Cape Eyaletindeki Cedarberg Dağları bölgesine özgü çalı benzeri bir baklagil fynbos bitkisidir. Rooibos giderek daha popüler hale geliyor ve dünya çapında günlük içecek olarak tüketiliyor [ 3 , 4 ]. Geleneksel rooibos çay ürünü, yaprak rengi yeşilden kırmızı-kahverengiye değişen kıyılmış öğütülmüş bitki materyalinin fermantasyonu (oksidasyonu) ile üretilir. Son zamanlarda, rooibosun içindeki antioksidan bileşenin korunmasına giderek daha fazla dikkat edilmektedir. "Fermente edilmemiş" veya sözde yeşil rooibos, işleme sırasında polifenollerin oksidasyonunun sınırlandırılmasıyla üretilir [ 3 , 4]. Rooibos çayı kafein içermez, ancak çeşitli polifenol türleri içerir. Rooibosun başlıca bileşikleri arasında dihidrokalkon, aspalatin, orientin ve izoorientin bulunur [ 5 ]. Bu bileşikler, zayıf bir şekilde emilen ancak güçlü anti-oksidatif aktivite sergileyen C -glukozitlerdir [ 6 ]. Daha önce farmasötik dereceli bir yeşil rooibos ekstresi (GRT, %12.78 aspalatin içeren) ile tedavinin Akt sinyalini baskıladığını ve bu nedenle CRPC hücre hattı LNCaP-104-R1'de hücre proliferasyonunu, hücre sağkalımını ve tümör büyümesini inhibe ettiğini bildirmiştik [7 ] . Ek olarak, GRT tedavisinin YAP sinyali ve paxillin inhibisyonu yoluyla CRPC hücrelerinin göçünü ve istilasını baskıladığını gözlemledik [ 8]. PI3K/AKT sinyalinin, enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin proliferasyonu ve hayatta kalmasında önemli bir rol oynadığı bildirilmiştir [ 9 ], bu nedenle GRT ile tedavinin, enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin proliferasyonunu ve hayatta kalmasını inhibe edip edemeyeceğini araştırdık.

Git: Malzemeler ve yöntemler

Rooibos özü GRT


Tüm deneysel çalışmalarda, daha önce tarif edilen [ 7 ] ile aynı gruptan farmasötik dereceli bir aspalathin açısından zengin yeşil rooibos özütü (GRT ^TM ) kullanıldı . Fenolik bileşen daha önce yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) [ 7 ] ( S1 Şekil). Ekstraktın ana flavonoidleri (%20.63 ekstrakttan oluşur) aspalathin (%12.78), nothofagin (%1.97), isoorientin (%1.47), orientin (%1.26) ve bioquercetin (quercetin-3-O-robinobioside; 1.04) içerir. %). %1'den az olan bileşikler arasında luteolosid, vitexin, isovitexin rutin, hypersoide, isoquercitrin ve fenolik öncü Z-2-(β-D-glukopiranosiloksi)-3-fenilpropenoik asit yer alır. Ekstraktın pinitol ve glikoz içeriği sırasıyla %1.92 ve %0.50 idi (Central Analytical Facility, Stellenbosch Üniversitesi, Stellenbosch, Güney Afrika tarafından GC-MS ile niceleme). Hücre kültürü


LNCaP C4-2 MDV3100r hücreleri, ana androjenden bağımsız LNCaP C4-2 hücrelerinden (ATCC CRL-3314) türetildi. LNCaP C4-2 ve LNCaP C4-2 MDV3100r hücreleri, %10 hormon yoksunluğu FBS (Corning, Corning, NY, ABD), penisilin ( 100 U/ml) ve streptomisin (100 μg/ml) (Merck Millipore, Burlington, MA, ABD). C4-2 MDV3100r ortamı, 10 uM enzalutamid artı 20 nM DHEA (dehidroepiandrosteron) içeriyordu. PC-3 hücreleri, %10 FBS, penisilin (100 U/ml) ve streptomisin (100 ug/ml) içeren HyClone DMEM ortamında tutuldu. Hücre proliferasyonu testi ve kimyasallar


LNCaP C4-2, LNCaP C4-2 MDV3100r, PC-3 hücreleri, ^% 10 FBS ve artan konsantrasyon (0, 10, 96 saat boyunca 25, 50, 75, 100 μg/ml) GRT. Bağıl hücre sayısı, daha önce tarif edildiği gibi Hoechst boya 33258 bazlı 96 oyuklu proliferasyon testi (Sigma, St. Louis, MO, ABD) ile hücre lizatlarının DNA içeriği ölçülerek analiz edildi [10 ] . Tüm okumalar, her bir deneyde kontrol koşulunun ortalamasına göre normalleştirildi. Deney en az üç kez tekrarlandı. Her koşul için sekiz kuyucuk kullanıldı. immünofloresan boyama


İmmünofloresan boyama analizi daha önce tarif edilmiştir [ 11 ]. Kısaca, LNCaP C4-2 MDV3100r hücreleri, gece boyunca hazne slaydına ekildi. Hücreler, 96 saat süreyle GRT ile işlendi, soğuk PBS ile yıkandı, ardından oda sıcaklığında 15 dakika süreyle %4 paraformaldehit içinde sabitlendi, ardından üç kez 5 dakika süreyle soğuk PBS ile yıkandı. Hücreler bloklama tamponunda (%5 BSA, PBS içinde %0.1 triton X-100) oda sıcaklığında bir saat süreyle inkübe edildi, ardından üç kez 5 dakika süreyle PBS ile yıkandı. Hücreler primer antikorlarla gece boyunca 4°C'de inkübe edildi. Üç kez 5 dakika soğuk PBS yıkamasının ardından hücreler, oda sıcaklığında bir saat ikincil antikor (FITC) ile inkübe edildi. Birkaç yıkamanın ardından hücreler, 4',6-diamidino-2-fenilindol ( DAPI) kullanılarak boyandı.) (5 mg/ml) 15 dakika oda sıcaklığında. Boyamadan sonra hücreler yıkandı, monte edildi ve kapatıldı. Hücrelerin görüntüleri, floresan sekonder antikorlarla 1000x floresan mikroskobu büyütmesinde yakalandı: keçi anti fare 488 (yeşil) ve keçi anti tavşan 594 (kırmızı) (Sigma). Yumuşak agar koloni oluşumu deneyi


Toplam 8.000 LNCaP C4-2 MDV3100r hücresi, DMEM ortamında %10 FBS ile %0.3 düşük erime noktalı agaroz (Lonza) içinde süspanse edildi ve ardından 3 ml %0.5 düşük erime noktalı agaroz artı DMEM ortamında %10 FBS üzerine katmanlandı. 6 cm'lik tabaklar. Hücrelerin 14 gün boyunca %5 C02 ile 37°C'de büyümesine izin verildi. Plakalar, 6 saat boyunca %30 etanol içinde %0.005 kristal menekşe ile lekelendi. Western blot analizi


GRT işleminin C4-2 MDV3100r hücrelerinde protein ekspresyonu üzerindeki etkisini belirlemek için hücreler, 50 mM Tris-HCl pH 8.0, %0.5 NP-40, 150 mM NaCl, 5 mM EDTA içeren MCLB'de (Memeli Hücre Parçalama Tamponu) parçalandı. Na3VO4, DTT, proteaz inhibitörleri ve fosfataz inhibitörleri kokteyli ile. Sinyal tespiti, kemilüminesans (ECL) ve Prime Western Blotlama kullanılarak yapıldı.tespit reaktifi (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA, ABD). Kaspaz 3, Akt, fosfo-Akt (T308), fosfo-Akt (S473), CDK1, PDK1, fosfo-PDK1 (S241), siklin D1, PARP'ye karşı antikorlar, Cell Signaling'den (Dancers, MA, ABD) satın alınmıştır. PI3K α, PI3K β, PI3K γ'yı tespit eden antikorlar Millipore'dan (Burlington, MA, ABD), Skp2'ye karşı antikor ise Santa Cruz'dan (Dallas, TX, ABD) satın alındı. BCL-2'yi tespit eden antikor, BD'den (Franklin Lakes, NJ, ABD) satın alınırken, Novus (Littleton, CO, ABD) GAPDH ve β-aktini tespit eden antikor sağladı. AR ve Myc'ye karşı antikorlar Abcam'dan (Cambridge, MA, ABD) satın alınırken, fosfo-AR'yi tespit eden antikor (S81) Millipore'dandı. Proteinlerin nispi ekspresyon seviyesi, ImageQuant LAS4000 (GE Healthcare-Biosciences, Pittsburgh, PA) ile ölçüldü. Kuyruklu yıldız tahlili


^{LNCaP C4-2 MDV3100r hücreleri, gece boyunca 1 x 105} yoğunlukta 6 cm'lik bir tabağa ekildi.5 ml kültür ortamı içinde oyuk başına hücreler. Hücreler, 2. günde 48 saat boyunca artan konsantrasyonlarda (0, 50, 75, 100 μg/mL) GRT (%60 etanol içinde çözünmüş) ile muamele edildi. Hücreler toplandı ve Mg2+ ve Ca2+ içermeyen buz gibi soğuk PBS ile yeniden süspanse edildi, ardından agaroz (1:10) ile karıştırıldı ve üreticinin talimatı izlenerek hemen Comet Slides'a aktarıldı. Comet Slaytları, ışıktan korunarak 15 dakika 4°C'de tutuldu ve karanlıkta 30-60 dakika süreyle 4°C'deki buz gibi soğuk lizis tamponuna (Trevigen, Gaithersburg, MD, ABD) dikkatlice aktarıldı. Lizis tamponu daha sonra atıldı ve ışıktan korunarak 30 dakika süreyle 4°C'de buz gibi alkalin çözelti ile yeniden dolduruldu. Alkali çözelti daha sonra kaptan boşaltıldı ve buz gibi TBE tamponu ile değiştirildi ve Comet Slides, 5 dakika boyunca iki kez daldırıldı. Comet Slaytları, Comet Slaytlarını yaklaşık olarak kaplamak için buz gibi soğuk TBE tamponu ile dikkatlice bir elektroforez odasına aktarıldı ve ardından 15 dakika süreyle 35 V uygulandı. Comet Slaytları dikkatli bir şekilde hazneden buz gibi deiyonize suya aktarıldı ve 2 dakika boyunca üç kez daldırıldı. Buz gibi deiyonize su daha sonra aspire edildi ve 5 dakika boyunca buz gibi soğuk %70 etanol ile değiştirildi. Kurutma işleminden sonra lam üzerindeki agaroza 100 µl Vista Green DNA Dye ilave edildi ve görüntüler floresan mikroskopi ile kaydedildi. Buz gibi deiyonize su daha sonra aspire edildi ve 5 dakika boyunca buz gibi soğuk %70 etanol ile değiştirildi. Kurutma işleminden sonra lam üzerindeki agaroza 100 µl Vista Green DNA Dye ilave edildi ve görüntüler floresan mikroskopi ile kaydedildi. Buz gibi deiyonize su daha sonra aspire edildi ve 5 dakika boyunca buz gibi soğuk %70 etanol ile değiştirildi. Kurutma işleminden sonra lam üzerindeki agaroza 100 µl Vista Green DNA Dye ilave edildi ve görüntüler floresan mikroskopi ile kaydedildi. siRNA ve c-Myc aşırı ekspresyonu ile demonte c-Myc


İnsan c-Myc siRNA (Human c-Myc ON-TARGET artı SMART havuzu) ve rastgele karıştırılmış sekans kontrolü, Dharmacon'dan (Lafayette, CO, ABD) satın alınmıştır. Transfeksiyon prosedürü, üreticinin tavsiye ettiği protokole göre lipofektamin RNAiMAX (Invitrogen, Carlsbad, CA, ABD) kullanılarak gerçekleştirildi. Hücreler , gece boyunca 6 oyuklu plakalarda 2.5 ml tam ortam içinde ^3x105 hücre/oyuk yoğunlukta tohumlandı . Karıştırma veya c-Myc yıkımı için 40 nM siRNA kullanıldı. c-Myc'nin aşırı ekspresyonu için, PC-3 hücreleri, daha önce tarif edildiği gibi Shutsung Liao'nun Chicago Üniversitesi'ndeki laboratuvarından cömert bir hediye olan c-Myc plazmidi ile transfekte edildi [12 ] . PLNCX2 plazmidi, c-Myc aşırı ekspresyonu için kontroller olarak kullanıldı. PolyJet™ in vitroTransfeksiyon için DNA transfeksiyon reaktifi kullanıldı (SL100688, SigmaGen Laboratories, Rockville, MD, ABD). Western blot, c-Myc'nin devrildiğini veya aşırı ifadesini doğrulamak için kullanıldı. istatistiksel analiz


Veriler, üç bağımsız deneyden elde edilen ortalama ± SD olarak temsil edilir. İstatistiksel anlamlılığı test etmek için Student T-testi yapıldı. P < 0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

Git: Sonuçlar

GRT tedavisi, enzalutamide dirençli C4-2 MDV3100r ve PC-3 PCa hücrelerinin çoğalmasını bastırdı


C4-2 hücrelerini 10 uM enzalutamid ve 20 nM dihidroepiandrosteron (DHEA) içeren ortamda 3 aydan uzun süre kültürleyerek LNCaP C4-2'den türetilen bir enzalutamide (MDV3100) dirençli prostat kanseri (PCa) hücre dizisi oluşturduk. Türetilmiş hücre çizgisi LNCaP C4-2 MDV3100r, ana hücre çizgisine kıyasla enzalutamid tedavisine çok daha dirençliydi (Şekil 1A ve 1B). C4-2 MDV3100r hücreleri, aşağıdaki deneylerin tümü için 10 uM enzalutamid içeren ortamda tutuldu. Yaygın olarak kullanılan başka bir androjen reseptörü (AR)-negatif PCa hücre dizisi olan PC-3 de enzalutamid tedavisine karşı çok dirençliydi.Şekil 1C). C4-2 MDV 3100r hücrelerinin morfolojisi, C4-2 hücrelerininkinden biraz farklıydı (Şekil 1D ve 1E). C4-2 MDV 3100r hücreleri, C4-2 kadar uzun değildi.

Şekil 1
Enzalutamide dirençli C4-2 MDV3100r ve PC-3 hücre dizilerinin GRT ve DHEA tedavisine tepkisinin karakterize edilmesi.
Enzalutamide dirençli C4-2 MDV3100r hücre hatları, hücrenin 10 uM enzalutamid ve 20 nM DHEA içeren ortamda en az 3 ay kültürlenmesiyle ebeveyn LNCaP C4-2'den türetildi. DHEA'nın varlığında veya yokluğunda enzalutamid (MDV-3100) tedavisinin 96 saat boyunca C4-2 (A) ve C4-2 MDV3100r (B) proliferasyonu üzerindeki etkisi Hoechst 33258 proliferasyon testi ile incelenmiştir. (C) C4-2, C4-2 MDV3100r ve PC-3'ün 0 veya 10 uM MDV altında 96 saat çoğalması, çoğalma deneyi ile incelenmiştir. C4-2 ve C4-2 MDV3100r'nin morfolojisi, ışık mikroskobu altında (D) ve (E)'de gösterildi. Mikroskobun büyütmesi 1.000X'tir ve sarı ölçek çubuğu 100 μm'yi temsil eder.

Daha sonra, GRT ile tedavinin C4-2 MDV3100r ve PC-3 hücrelerinin çoğalmasını baskılayıp baskılayamayacağını inceledik. GRT ile tedavi doza bağlı olarak C4-2 MDV3100r hücrelerinin proliferasyonunu azalttı (Şekil 2A) ve PC-3 hücreleri (Şekil 2B). _{GRT'nin C4-2 MDV3100r ve PC -} 3 hücrelerinin proliferasyonunu bastırmaya yönelik IC50'si sırasıyla 98.5 ve 226.6 (ug/ml) idi. GRT tedavisi, C4-2 MDV3100r hücrelerinin morfolojisini değiştirdi, C4-2 3100r hücreleri, GRT tedavisi altında yuvarlak şekil aldı (Şekil 2C). Karşılaştırma için, GRT'nin kanserli olmayan hücreler üzerinde baskılayıcı etkiler gösterip göstermediğini inceledik. HUVEC (insan göbek damarı endotel hücreleri) ve HEK293'ü (insan embriyonik böbrek hücreleri 293) artan GRT konsantrasyonuyla tedavi ettik (Şekil 2D). HUVEC hücrelerinin çoğalması, 10–75 μg/ml GRT'den etkilenmedi ve 100 μg/ml GRT'ye nispeten dirençliyken, HEK293, GRT'den hiç etkilenmedi. Bu gözlem, enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin, kanserli olmayan insan hücre dizilerine göre GRT tedavisine daha duyarlı olduğunu gösterdi.

İncir. 2
GRT'nin enzalutamide dirençli C4-2 MDV3100r, PC-3 ve kanserli olmayan insan hücre dizilerinin çoğalması üzerindeki etkileri.
Artan GRT konsantrasyonu (C4-2 MDV3100r hücreleri için 0–100 μg/ml ve PC-3 hücreleri için 0–200 μg/ml) ile tedavi edilen LNCaP C4-2 MDV3100r (A) ve PC-3 (B) çoğalması 96 saat boyunca Hoechst 33258 proliferasyon deneyi ile belirlendi. (C) Farklı konsantrasyonlarda GRT (0, 50, 75, 100 μg/ml) tedavisi altındaki C4-2 MDV3100r hücrelerinin morfolojisi mikroskopla incelenmiştir. Mikroskobun büyütmesi 100X'tir ve sarı ölçek çubuğu 100 μm'yi temsil etmektedir. (D) Artan konsantrasyonda GRT (0–100 μg/ml) ile tedavi edilen HUVEC ve HEK293 hücrelerinin çoğalması, Hoechst 33258 çoğalma tahlili ile belirlendi. Yıldız işareti *, ** ve *** istatistiksel olarak anlamlı farkı temsil eder p < 0,05, p < 0,01 ve pKarşılaştırılan iki hücre grubu arasında sırasıyla < 0.001. GRT tedavisi, enzalutamide dirençli C4-2 MDV3100r PCa hücrelerinde apoptozu indükledi


GRT'nin enzalutamide dirençli PCa hücreleri üzerindeki anti-kanser aktivitesini doğrulamak için yumuşak agar koloni oluşumu deneyi yaptık. GRT (0, 50, 75, 100 μg/ml) ile tedavi, yumuşak agar plakalarındaki C4-2 MDV3100r hücrelerinin kolonilerinin sayısını ve boyutunu doza bağlı olarak azalttı (Şekil 3A). Daha sonra GRT'nin C4-2 MDV3100r hücrelerinde apoptozu indükleyip indüklemediğini araştırdık. Comet tahlili, GRT ile tedavinin doza bağlı olarak C4-2 MDV3100r hücrelerinde DNA iplikçik kırılmasını arttırdığını ortaya çıkardı (Şekil 3B ve 3C), GRT'nin C4-2 MDV3100r hücrelerinde apoptozu indüklediğini gösterir.

Şek. 3
GRT tedavisi, C4-2 MDV3100r hücrelerinin yumuşak agar koloni oluşumunu ve indüklenmiş apoptozu azalttı.
(A) GRT'nin C4-2 MDV3100r hücreleri üzerindeki antikanser aktivitesi, GRT ile tedavi edilen C4-2 MDV3100r hücreleri için yumuşak agar üzerinde koloni oluşumu ölçülerek doğrulandı (0, 50, 75 ve 100 μg/mL, orta). Kültür ortamı, dört hafta boyunca haftada iki kez değiştirildi. (B) C4-2 MDV3100r hücrelerinde GRT işleminin neden olduğu DNA hasarı, Comet tahlili kullanılarak belirlendi. Yeşil flüoresan, artan GRT konsantrasyonuyla (0, 50, 75, 100 μg/ml) tedavi edilen C4-2 MDV3100r hücrelerinde kırık DNA parçalarını gösterdi. (C) Comet tahlilinde C4-2 MDV3100r hücrelerinin kuyruk uzatma momenti ölçüldü. Veriler, üçlü deneylerde ortalama ± SD olarak sunuldu. Yıldız işareti ** ve ***, karşılaştırılan iki hücre grubu arasında sırasıyla p < 0.01 ve p < 0.001 istatistiksel olarak anlamlı farkı temsil eder. GRT tedavisi, c-Myc, AR, PI3K-AKT sinyal proteinlerini ve hücre döngüsü düzenleyici proteinleri bastırdı


GRT'nin enzalutamide dirençli hücrelerin çoğalmasını ve hayatta kalmasını nasıl baskıladığını belirlemek için, GRT'nin hücre döngüsü, apoptoz, hücre sağkalımı ve androjen reseptörü (AR) sinyalinin düzenlenmesinde yer alan sinyal proteinlerinin ekspresyonu üzerindeki etkilerini inceledik.Şekil 4). GRT tedavisi doza bağlı olarak Akt, PI3K p110α, PI3K p110γ, fosfoinositide bağımlı kinaz 1 (PDK1), fosfo-PDK1 (S241), S fazı kinaza bağlı protein 2 (Skp2), siklin D1, AR'nin protein ekspresyon seviyesini bastırdı , fosfo-AR (S81), sikline bağımlı kinaz 1 (Cdk1), pro-PARP, c-Myc ve Bcl-2, ancak C4-2 MDV3100r hücrelerinde kaspaz 3 ve bölünmüş PARP'nin artan protein bolluğu (Şekil 4).

Şekil 4
C4-2 MDV3100r hücrelerinde GRT işleminden etkilenen sinyal proteinlerinin Western blot analizi.
C4-2 MDV3100r hücreleri, 48 saat boyunca artan GRT konsantrasyonları (0, 50, 75 ve 100 μg/mL) ile işlendi. Akt, PI3K p110α, PI3K p110β, PI3K p110γ, PDK1, fosfo-PDK1 (S241), Skp2, siklin D1, AR, fosfo-AR (S81), Cdk1, Myc, Bcl-2, kaspaz 3 ve PARP proteinlerinin ifadesi Western blot ile belirlendi. GAPDH ve β-Actin'in ekspresyon seviyesi, yükleme kontrolü olarak kullanıldı. GRT, c-Myc'nin inhibisyonu yoluyla enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin proliferasyonunu baskıladı


c-Myc proteini, PCa hücrelerinin tümör büyümesini, metastazını, hastalık ilerlemesini ve metabolizmasını düzenlemede esastır. GRT tedavisi, c-Myc'nin protein ifadesini önemli ölçüde bastırdığından, c-Myc'nin GRT'nin ana hedeflerinden biri olup olmadığını araştırdık. C4-2 MDV3100r hücrelerinde c-Myc'yi aşırı ifade ettik (Şekil 5A). Aşırı c-Myc ekspresyonuna sahip C4-2 MDV3100r hücreleri, GRT tedavisine daha dirençliydi (Şekil 5B). Kontrol vektörü ile C4-2 MDV3100r hücrelerinin proliferasyonunu bastırmak için GRT için IC50 ve c-Myc hücrelerini aşırı eksprese _{eden C4-2 MDV3100r sırasıyla 105.3 ve 141.1 (ug/ml) idi.} Öte yandan, PC-3 hücrelerinde c-Myc'nin siRNA ile yıkılması, PC-3 hücrelerinin GRT tedavisine duyarlılığını arttırdı (Şekil 6A ve 6B). C4-2 MDV3100r ve PC-3'teki c-Myc protein seviyesini karşılaştırdık. GRT tedavisine daha dirençli olan PC-3, C4-2 MDV3100r ile karşılaştırıldığında daha yüksek düzeyde c-Myc proteini ifade etti (Şekil 6C). GRT tedavisi, PC-3 hücrelerine kıyasla C4-2 MDV3100r hücrelerinde c-Myc'de daha dramatik bir düşüşe neden oldu (Şekil 6C). Bu gözlemler, c-Myc'nin enzalutamide dirençli PCa hücrelerinde GRT'nin ana hedeflerinden biri olduğunu gösterdi.

Şekil 5
C-Myc'nin aşırı ekspresyonu, C4-2 MDV3100r hücrelerinin GRT tedavisine karşı direncini arttırmıştır.
(A) LNCaP C4-2 MDV3100r hücrelerinde c-Myc'nin aşırı ekspresyonu, Western lekeleme ile doğrulandı. (B) Sahte vektör veya c-Myc aşırı ekspresyonu olan LNCaP C4-2 3100r hücreleri, artan GRT konsantrasyonu (0, 10, 25, 50, 75, 100 ug/ml) ile tedavi edildi ve hücre proliferasyonu, proliferasyon tahlili ile incelendi. Yıldız işareti ** ve ***, kontrol grubuyla veya karşılaştırılan belirtilen iki grupla karşılaştırıldığında grup arasında sırasıyla p < 0.01 ve p < 0.001 istatistiksel olarak anlamlı farkı temsil eder.


Şekil 6
C-Myc'nin yıkılması, PC-3 hücrelerinin GRT tedavisine duyarlılığını arttırdı.
(A) PC-3 hücrelerinde c-Myc'nin yıkılması, Western lekeleme ile doğrulandı. (B) Kontrol karıştırmalı veya c-Myc yıkımına sahip PC-3 hücreleri, artan GRT konsantrasyonuyla (0, 10, 25, 50, 75, 100 ug/ml) tedavi edildi ve hücre çoğalması, çoğalma deneyi ile incelendi. Yıldız işareti * ve *** , kontrol grubuyla veya karşılaştırılan belirtilen iki grupla karşılaştırıldığında grup arasında sırasıyla p < 0.05 ve p < 0.001 istatistiksel olarak anlamlı farkı temsil eder . (C) C4-2 MDV3100r veya PC-3 hücrelerinde 100 μg/ml ile veya onsuz tedavi edilen c-Myc protein ekspresyonu Western lekeleme ile incelenmiştir. β-Aktin, yükleme kontrolü olarak kullanıldı. GRT, C4-2 MDV3100r hücrelerinde AR'nin kararlılığını, ifadesini ve aşağı akış sinyalini bastırdı


GRT'nin AR protein ekspresyonunu baskıladığını ve fosfo-AR (S81) ve AR'nin PCa ilerlemesi sırasında önemli bir rol oynadığını gözlemlediğimiz için, GRT'nin AR proteininin C4-'deki dağılımı ve bolluğu üzerindeki etkilerini incelemek için immünofloresan mikroskopi kullandık. 2 MDV3100r hücresi. PC-3 hücreleri AR-negatif olduğu için PC-3'ü incelemedik. AR'nin LNCaP C4-2 MDV3100r hücrelerinde dağılımı esas olarak çekirdekte yer alıyordu (Şekil 7A). GRT tedavisi doza bağlı olarak C4-2 MDV3100r hücrelerinde AR proteinlerinin bolluğunu azalttı (Şekil 6A) yanı sıra AR mRNA'nın (Şekil 7B) C4-2 MDV3100r hücrelerinde. GRT ile tedavinin AR stabilitesini azaltıp azaltmadığını belirlemek için, LNCaP C4-2 MDV3100r hücrelerini GRT'nin varlığında veya yokluğunda sikloheksimit ile tedavi ettik. GRT tedavisi AR'nin bozulmasını hızlandırdı (Şekil 7C). Ek olarak, GRT tedavisi, AR ve AR'nin hedef gen prostat spesifik antijeninin (PSA) protein ekspresyonunu androjen varlığında veya yokluğunda (PSA) bastırdı (Şekil 7D). İlginç bir şekilde, androjen yokluğunda bile enzalutamide dirençli PCa hücrelerinde çekirdekte AR proteinlerinin biriktiğini ve PSA ekspresyonunun bol olduğunu gözlemledik (Şekil 7D). AR ve PSA'nın androjenden bağımsız aktivasyonu, enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin çoğalması ve hayatta kalması için önemli olabilir.

Şekil 7
GRT tedavisi, C4-2 MDV3100r hücrelerinde AR'nin protein ekspresyonunu, stabilitesini ve aşağı akış sinyalini bastırır.
(A) 48 saat boyunca 1 nM DHT veya artan GRT konsantrasyonu (0, 50, 100 μg/ml) ile veya onsuz tedavi edilen C4-2 MDV3100r hücreleri, immünofloresan mikroskopi ile gözlendi. Soldan sağa sütun, DAPI (mavi), F-aktin (yeşil) ve AR (androjen reseptörü) (kırmızı) görüntülerini gösterir. Mikroskobun büyütmesi 100X'tir ve sarı ölçek çubuğu 100 μm'yi temsil etmektedir. (B) 0, 50, 100 μg/ml ile tedavi edilen C4-2 MDV3100r hücrelerinde AR mRNA'nın ifadesi, qRT-PCR ile incelenmiştir. Yıldız işareti * ve *** istatistiksel olarak anlamlı farkı temsil eder p < 0,05 ve pKarşılaştırılan iki hücre grubu arasında sırasıyla < 0.001. (C) C4-2 MDV3100r hücreleri, 0, 4, 8, 24, 48 saat boyunca 100 ug/ml GRT içeren veya içermeyen 10 ug/ml sikloheksimit ile işlendi. AR proteininin ifadesi, Western lekeleme ile incelendi ve β-aktin, yükleme kontrolü olarak kullanıldı. (D) LNCaP C4-2 MDV3100r hücreleri, 96 saat boyunca artan GRT konsantrasyonu (0, 50, 100 μg/ml) ile birlikte 1 nM DHT ile veya onsuz tedavi edildi. AR ve PSA proteininin bolluğu, Western lekeleme ile belirlendi. β-aktin, yükleme kontrolü olarak kullanıldı.

Git: Tartışma


Androjen ablasyon tedavisi alan prostat kanseri (PCa) hastaları genellikle 2-3 yıl içinde kastrasyona dirençli prostat kanseri (CRPC) geliştirir. Steroid olmayan bir antiandrojen olan enzalutamid, metastatik CRPC'nin tedavisi için ABD FDA onaylı bir ilaçtır. Ancak başlangıçta enzalutamid tedavisine yanıt veren PCa hastalarının büyük bir kısmında birkaç ay sonra ilaç direnci gelişir [ 13 ]. Enzalutamid direncinin mekanizmaları arasında AR amplifikasyonu ve aşırı ekspresyonu, AR mutasyonu, değiştirilmiş steroidogenez, AR ek varyantları, otofaji aracılı direnç ve Wnt sinyalinin aktivasyonu yer alır [ 14]. Enzalutamide dirençli PCa için yeni tedaviye şüphesiz ihtiyaç vardır. Bu çalışmada, majör flavonoid olarak %12.78 aspalatin içeren aspalatin açısından zengin bir yeşil rooibos özütü olan GRT'nin enzalutamide dirençli C4-2 MDV3100r ve PC-3 hücreleri üzerindeki baskılayıcı etkilerini inceledik. GRT'nin enzalutamide dirençli C4-2 MDV3100r hücrelerinin ve PC-3 hücrelerinin çoğalmasını, hayatta kalmasını ve yumuşak agar koloni oluşumunu etkili bir şekilde baskıladığını gözlemledik. GRT tedavisi, 48 saat içinde C4-2 MDV3100r hücrelerinde apoptoza neden oldu.

Fosfataz ve tensin homologu (PTEN), fosfoinositid 3-kinaz (PI3K)-Akt sinyal yolu için negatif bir düzenleyicidir [ 15 ]. PCa hastalarının %40-70'inde PTEN'in silinmesi gözlendi ve bu da PI3K-Akt sinyalinin yukarı regülasyonu ile sonuçlandı. PI3K-Akt sinyali, PCa hücrelerinin hayatta kalmasında önemli bir rol oynar [ 16 ]. Akt'ın fosforilasyonu, PDK1 ve mTOR kinaz tarafından aktive edilir. GRT tedavisinin, C4-2 MDV3100r hücrelerinde Akt, PI3K a, PI3K y, PDK1, fosfo-PDK1 (S241) dahil olmak üzere Akt sinyal yolunda yer alan proteinlerin ekspresyon seviyesini doza bağlı olarak baskıladığını gözlemledik.

Onkoprotein c-Myc genellikle PCa'da aşırı eksprese edilir [ 17 ]. c-Myc proteininin ekspresyonu, CRPC'de yükselir [ 17 ] ve CRPC hücrelerinin androjenden bağımsız proliferasyonunu teşvik eder [ 18 ]. PCa hastalarında c-Myc'nin aşırı ekspresyonu, tümörlerin biyokimyasal nüksünü öngörür [ 19 ]. c-Myc proteini, ribozom biyogenezini düzenlemenin yanı sıra, metastatik CRPC hücrelerinin hayatta kalmasını teşvik etmek için PI3K/AKT/mTOR yolu ile işbirliği yapar [ 17 ]. AR ek varyantı AR-V7'nin yüksek ekspresyonu, enzalutamid ve abiraterona direnç geliştirmek için önemli bir mekanizmadır [ 13 ]. c-Myc, AR gen transkripsiyonunu teşvik eder ve tam uzunluktaki AR ve AR-V7'nin stabilitesini artırır [ 20]. c-Myc'nin baskılanması, enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin enzalutamid tedavisine duyarlılığını geri kazandırmıştır [ 20 ]. c-Myc'nin farmasötik inhibisyonu, enzalutamide dirençli PCa hücrelerinde apoptozu indükler [ 21 , 22]. Bu gözlemler, c-Myc'nin enzalutamide dirençli PCa hücreleri için gerekli olduğunu gösterdi. Çalışmamız, GRT tedavisinin, enzalutamide dirençli PCa hücrelerinde c-Myc'nin protein bolluğunu önemli ölçüde bastırdığını öne sürdü. C-Myc'nin aşırı ekspresyonunun, GRT tedavisi altında C4-2 MDV3100r hücrelerinin direncini arttırdığını, PC-3'te c-Myc'nin devrilmesinin PC-3 hücrelerinin GRT tedavisine duyarlılığını arttırdığını gözlemledik. Ayrıca c-Myc protein ekspresyon seviyesinin PCa hücrelerinin GRT tedavisine direnci ile ilişkili olduğunu gözlemledik. Bu bulgular, c-Myc'nin enzalutamide dirençli PCa hücrelerinde GRT tedavisinin ana hedeflerinden biri olduğunu gösterdi. Enzalutamide dirençli prostat tümörlerinde c-Myc ekspresyon seviyesi farklı hastalarda değişebilir ve c-Myc ekspresyon seviyesi düşük olan bu enzalutamide dirençli prostat tümörlerinin GRT tedavisine daha duyarlı olacağını tahmin ediyoruz. Ayrıca GRT'nin c-Myc'yi hedef alan farmasötik inhibitör ile kombine tedavisinin tümörlerin gerilemesini artıracağını tahmin ediyoruz.

Ek olarak, GRT tedavisi, Skp2, siklin D1 ve Cdk1 gibi hücre döngüsü düzenlemesinde ve hücre sağkalımında yer alan proteinlerin ekspresyonunu bastırdı. Cdk1-siklin kompleksleri, hücre döngüsü sırasında hücre girişinin ve S ve G2/M fazlarına ilerlemenin düzenlenmesinde önemlidir [ 23 ]. Skp2, her yerde bulunma ve bozunma için T187'de p27 ^Kip1'i fosforile ederek p27 ^Kip1'i hedefler [ 24 ]. Skp2, siklin A-Cdk2 [ 25 ] ile kararlı bir kompleks oluşturur. c-Myc, Akt sinyal proteinleri, Skp2, Cdk1 ve siklin D1'in azalması, enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin çoğalmasının ve hayatta kalmasının GRT tarafından baskılanmasını açıklayabilir.

AR'nin fosforilasyonunun, AR fonksiyonunu ve AR stabilitesini düzenlemede kritik roller oynadığı bildirilmiştir. AR üzerindeki Ser81'deki fosforilasyonun AR'yi stabilize ettiği ve AR'nin protein ekspresyonunu arttırdığı bildirilmiştir, Ser81 üzerindeki fosforilasyon Cdk1 [ 26 ] ve Cdk5 [ 27 ] tarafından düzenlenir. Bazı CRPC hücreleri için, CDK1 aktivitesinin yükselmesi, androjen yoksunluğu tedavisinde düşük androjen seviyelerine yanıt olarak AR ekspresyonunu ve stabiliteyi arttırma mekanizmasıdır [ 26 ]. S81A'nın AR üzerindeki mutasyonu, CDK5 ile etkileşimini bloke eder, AR'nin nükleer lokalizasyonunu azaltır, AR'nin protein seviyesini dengesizleştirir ve PCa hücrelerinin proliferasyonunu azaltır [ 27]. Mevcut çalışmamızda, GRT tedavisinin AR-pozitif C4-2 MDV3100r hücrelerinde AR, fosfo-AR (S81), Cdk1'in protein ekspresyonunu ve ayrıca AR'nin hedef geni PSA'nın protein ekspresyonunu baskıladığını gözlemledik. İmmünofloresan mikroskopi, GRT tedavisinin C4-2 MDV3100r hücrelerinin hem çekirdeğinde hem de sitoplazmasında AR proteinlerinin bolluğunu doza bağlı olarak azalttığını ortaya çıkardı. Sikloheksimid ile tedavi, GRT tedavisinin AR stabilitesini azalttığını doğruladı. AR'nin ekspresyonunun, aşağı akış sinyalinin ve stabilitesinin GRT tarafından azaltılması, C4-2 MDV3100r hücrelerinin hayatta kalmasını ve çoğalmasını bozacaktır. Bu gözlemlere göre, AR eksprese eden enzalutamide dirençli prostat tümörlerinin AR-negatif enzalutamide dirençli prostat tümörlerine kıyasla GRT tedavisine daha duyarlı olacağını tahmin ediyoruz. İlginç, androjen yokluğunda bile enzalutamide dirençli PCa hücrelerinde AR proteinlerinin çekirdekte biriktiğini ve PSA ekspresyonunun nispeten yüksek olduğunu gözlemledik. AR ve PSA'nın androjenden bağımsız aktivasyonu, enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin çoğalması ve hayatta kalması için önemli bir mekanizma olabilir.

Sonuç olarak, çalışmamız, yeşil rooibos özü GRT'nin, c-Myc, PI3K-Akt sinyallemesinin inhibisyonu yoluyla enzalutamide dirençli PCa hücrelerinin hücre çoğalmasını ve hayatta kalmasını baskıladığını ve ayrıca ekspresyonu, stabiliteyi ve aşağı akım sinyalini baskıladığını ileri sürdü. . GRT, enzalutamide dirençli PCa hastaları için potansiyel bir adjuvan tedavi olabilir.


Git: Destek Bilgisi

S1 Şekil

GRT'deki bileşenlerin HPLC analizi.
GRT, önceki çalışmamızda [ 7 ] kullanılan aynı üretim parti partisidir ve bu rakam,Şekil 1[ 7 ] içinde GRT'nin bileşenleri (A) 288 ve (B) 350 nm'de analiz edildi. Numaralandırılmış bileşiklerin (1, PPAG; 2, isoorientin; 3, orientin; 4, aspalathin; 5, bioquercetin; 6, vitexin; 7, hyperoside; 8, rutin; 9, isovitexin; 10, isoquercitrin; 11, luteoloside; 12, nothofagin) kromatogramlardaki sayıdan sonra parantez içinde gösterilir. Bileşen, g/100 g GRT olarak ifade edilir.

(TIF)
Ek veri dosyası için buraya tıklayın. ^{(141K, tif)} S1 Dosyası


(DOCX)
Ek veri dosyası için buraya tıklayın. ^{(19K, docx)} S1 Ham görüntüler


(PPTX)
Ek veri dosyası için buraya tıklayın. ^{(7.0M, pptx)} S1 Veri Kümesi


(DOCX)
Ek veri dosyası için buraya tıklayın. ^{(27K, docx)}
Git: teşekkürler


Yazarlar, anlayışlı tartışma ve deneysel yardım için Prof. Elizabeth Joubert ve Prof. Der-San Chuu'ya teşekkür eder. Doktorlara teşekkür ederiz. Cheng-Yuan Kao ve Ya-Wen Chen, insan hücre hatlarını paylaştıkları için. Ayrıca NHRI'nin Micro-Western Array çekirdek tesisinden gelen desteğe teşekkür ediyoruz.

Git: Kısaltmalar

ADT	Androjen yoksunluğu tedavisi
AR	androjen reseptörü
Cdk1	sikline bağımlı kinaz 1
CRPC	kastrasyona dirençli prostat kanseri
DHEA	dihidroepiandrosteron
GRT	yeşil rooibos özü
HPLC	yüksek performanslı sıvı kromatografisi
PCa	prostat kanseri
PSA	prostat spesifik antijen
PI3K	fosfoinositid 3-kinaz
PTEN	fosfataz ve tensin homologu
SKP2	S fazı kinaz ile ilişkili protein 2

Git: Finansman Tablosu


Bu araştırma, Tayvan'daki Bilim ve Teknoloji Bakanlığı (MOST 109-2923-B-400-002-MY3), Ulusal Sağlık Araştırma Enstitülerinden okul içi hibe (CS-110/111-PP-03), Ulusal ve uluslararası işbirliği hibesi tarafından finanse edilmiştir. Sağlık Araştırma Enstitüleri ve Kaohsiung Tıp Üniversitesi (NHRIKMU-111-I002) ve Güney Afrika Ulusal Araştırma Vakfı (NRF) (IRG-Tayvan/Güney Afrika Araştırma İşbirliği Programı; Hibe Numarası 98854). Finansörlerin çalışma tasarımında, veri toplama ve analizinde, yayınlama kararında veya taslağın hazırlanmasında hiçbir rolü yoktu.

Git: Veri kullanılabilirliği


İlgili tüm veriler makale ve Destekleyici Bilgi dosyaları içindedir.

Git: Referanslar

1. Scher HI, Fizazi K, Saad F, Taplin ME, Sternberg CN, Miller K, et al. Kemoterapi sonrası prostat kanserinde enzalutamid ile artan sağkalım . N İngilizce J Med . 2012; 367 ( 13 ):1187–97. doi: 10.1056/NEJMoa1207506 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
2. Attard G, Borre M, Gurney H, Loriot Y, Andresen-Daniil C, Kalleda R, et al. Enzalutamid Tedavisi Sırasında Yükselen Prostat Spesifik Antijenli Metastatik Kastrasyona Dirençli Prostat Kanserinde Abirateron Tek Başına veya Enzalutamid İle Kombinasyon . J Clin Oncol . 2018; 36 ( 25 ):2639–46. doi: 10.1200/JCO.2018.77.9827 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
3. Joubert E, de Beer D. Rooibos ( Aspalathus linearis ) çiftlik kapısının ötesinde: Bitki çayından potansiyel bitkisel ilaçlara . S Afr J Bot . 2011; 77 ( 4 ):869–86. [ Google Akademik ]
4. Elizabeth Joubert HS. Rooibos çayı ve ilgili ürünlerin üretim ve kalite yönleri . Bir inceleme. Uygulamalı Botanik ve Gıda Kalitesi Dergisi . 2006; 80 :138–44. [ Google Akademik ]
5. Joubert E, Gelderblom WC, De Beer D. Güney Afrika bitkisel çaylarının sağlıklı bir diyete fenolik katkısı . Nat Ürün Kom . 2009; 4 ( 5 ):701–18. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
6. Van der Merwe JD, de Beer D, Joubert E, Gelderblom WC. Aspalathin Açısından Zenginleştirilmiş Yeşil Rooibos (Aspalathus linearis) Ekstresine Kısa Süreli ve Kronik Altı Diyet Maruz Kalma Sıçan Karaciğer Fonksiyonunu ve Antioksidan Durumunu Etkiler . moleküller _ 2015; 20 ( 12 ):22674–90. doi: 10.3390/molecules201219868 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
7. Huang SH, Tseng JC, Lin CY, Kuo YY, Wang BJ, Kao YH ve diğerleri. Rooibos, Akt sinyalinin inhibisyonu yoluyla kastrasyona dirençli prostat kanseri hücrelerinin çoğalmasını baskılar . Bitki ilacı 2019; 64 :153068. doi: 10.1016/j.phymed.2019.153068 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
8. Huang SH, Kao YH, Muller CJF, Joubert E, Chuu CPD. Aspalathin açısından zengin yeşil Aspalathus linearis özü, YAP sinyalinin inhibisyonu yoluyla insan kastrasyona dirençli prostat kanseri hücrelerinin göçünü ve istilasını bastırır . Bitki ilacı 2020; 69 :153210. doi: 10.1016/j.phymed.2020.153210 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
9. Adelaiye-Ogala R, Gryder BE, Nguyen YTM, Alilin AN, Grayson AR, Bajwa W, et al. PI3K/AKT Yolunun Hedeflenmesi, Glukokortikoid Reseptörünün İndüksiyonunu Engelleyerek Enzalutamid Direncinin Aşılmasını Sağlar . Mol Kanseri Ter . 2020; 19 ( 7 ):1436–47. doi: 10.1158/1535-7163.MCT-19-0936 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
10. Chuu CP, Chen RY, Kokontis JM, Hiipakka RA, Liao S. LNCaP prostat kanseri hücrelerinin farklı ilerleme aşamalarında (-)-epigallocatechin-3-gallate tarafından androjen reseptör sinyalinin ve prostata özgü antijen ekspresyonunun baskılanması . Yengeç Lett . 2009; 275 ( 1 ):86–92. doi: 10.1016/j.canlet.2008.10.001 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
11. Huo C, Kao YH, Chuu CP. Androjen reseptörü, PC-3 prostat kanseri hücrelerinin epitelyal-mezenkimal geçişini, göçünü ve istilasını inhibe eder . Yengeç Lett . 2015; 369 ( 1 ):103–11. doi: 10.1016/j.canlet.2015.08.001 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
12. Chuu CP, Lin HP, Ciaccio MF, Kokontis JM, Hause RJ Jr., Hiipakka RA, et al. Kafeik asit fenetil ester, p70S6K ve Akt sinyal ağlarının inhibisyonu yoluyla insan prostat kanseri hücrelerinin çoğalmasını bastırır . Kanser Önleyici Res (Phila) . 2012; 5 ( 5 ):788–97. doi: 10.1158/1940-6207.CAPR-12-0004-T [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
13. Antonarakis ES, Lu C, Wang H, Luber B, Nakazawa M, Roeser JC, et al. AR-V7 ve prostat kanserinde enzalutamide ve abirateron direnci . N İngilizce J Med . 2014; 371 ( 11 ):1028–38. doi: 10.1056/NEJMoa1315815 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
14. Tucci M, Zichi C, Buttigliero C, Vignani F, Scagliotti GV, Di Maio M. Enzalutamide dirençli kastrasyona dirençli prostat kanseri: zorluklar ve çözümler . Onco Ther'ı Hedefliyor . 2018; 11 :7353–68. doi: 10.2147/OTT.S153764 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
15. Cantley LC, Neel BG. Tümör baskılanmasına ilişkin yeni görüşler: PTEN, fosfoinositid 3-kinaz/AKT yolunu kısıtlayarak tümör oluşumunu baskılar . Proc Natl Acad Sci ABD . 1999; 96 ( 8 ):4240–5. Epub 1999/04/14. doi: 10.1073/pnas.96.8.4240 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
16. Sarker D, Reid AH, Yap TA, de Bono JS. Prostat kanserinin tedavisi için PI3K/AKT yolunu hedefleme . Klinik Kanser Arş . 2009; 15 ( 15 ):4799–805. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-08-0125 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
17. Rebello RJ, Pearson RB, Hannan RD, Furic L. MYC-Driven Prostat Kanserini Hedefleyen Terapötik Yaklaşımlar . Genler (Basel) . 2017; 8 ( 2 ). doi: 10.3390/genes8020071 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
18. Bernard D, Pourtier-Manzanedo A, Gil J, Sahil DH. Myc, androjenden bağımsız prostat kanseri hücresi büyümesi sağlar . J Clin Invest . 2003; 112 ( 11 ):1724–31. Epub 2003/12/09. doi: 10.1172/JCI19035 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
19. Hawksworth D, Ravindranath L, Chen Y, Furusato B, Sesterhenn IA, McLeod DG, et al. Prostat kanserinde C-MYC onkogeninin aşırı ekspresyonu, biyokimyasal nüksü öngörür . Prostat Kanseri Prostat Dis . 2010; 13 ( 4 ):311–5. Epub 2010/09/08. doi: 10.1038/pcan.2010.31 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
20. Bai S, Cao S, Jin L, Kobelski M, Schouest B, Wang X, et al. Prostat kanserinde androjen reseptörü ve ek varyantlarının düzenlenmesinde c-Myc'nin olumlu bir rolü . onkojen . 2019; 38 ( 25 ):4977–89. doi: 10.1038/s41388-019-0768-8 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
21. Monga J, Subramani D, Bharathan A, Ghosh J. 5-lipoksijenazın farmakolojik ve genetik hedeflemesi, c-Myc onkojenik sinyallemeyi kesintiye uğratır ve enzalutamide dirençli prostat kanseri hücrelerini apoptoz yoluyla öldürür . Bilim Temsilcisi 2020; 10 ( 1 ):6649. doi: 10.1038/s41598-020-62845-8 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
22. Sarveswaran S, Ghosh R, Parikh R, Ghosh J. Wedelolactone, bir Antiinflamatuar Botanik, Keser c-Myc Onkojenik Sinyalleme ve Prostat Kanseri Hücrelerinde Apoptozu İndüklemek için Enzalutamide ile Sinerji Oluşturur . Mol Kanseri Ter . 2016; 15 ( 11 ):2791–801. doi: 10.1158/1535-7163.MCT-15-0861 [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
23. Enserink JM, Kolodner RD. Cdk1 tarafından kontrol edilen hedeflere ve süreçlere genel bakış . Hücre Böl . 2010; 5:11 . doi: 10.1186/1747-1028-5-11 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
24. Lu L, Schulz H, Kurt DA. F-box proteini SKP2, LNCaP insan prostat kanseri hücrelerinde p27 stabilitesinin androjen kontrolüne aracılık eder . BMC Hücre Biol . 2002; 3:22 . doi: 10.1186/1471-2121-3-22 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
25. Rodier G, Coulombe P, Tanguay PL, Boutonnet C, Meloche S. Skp2'nin CDK2 ve Cdc14B tarafından düzenlenen fosforilasyonu, onu G1 fazında APC(Cdh1) tarafından bozulmadan korur . EMB J . 2008; 27 ( 4 ):679–91. doi: 10.1038/emboj.2008.6 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
26. Chen S, Xu Y, Yuan X, Bubley GJ, Balk SP. Sikline bağımlı kinaz 1 ile prostat kanserinde androjen reseptörü fosforilasyonu ve stabilizasyonu . Proc Natl Acad Sci ABD . 2006; 103 ( 43 ):15969–74. doi: 10.1073/pnas.0604193103 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
27. Hsu FN, Chen MC, Chiang MC, Lin E, Lee YT, Huang PH, et al. Sikline bağımlı kinaz 5 tarafından androjen reseptörü ve prostat kanseri büyümesinin düzenlenmesi . J Biol Kimya . 2011; 286 ( 38 ):33141–9. doi: 10.1074/jbc.M111.252080 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]