Duyuru

***maturidi*** · 30 September 2022, 16:49

Isatis tinctoria'nın Köklerinden Nitrik Oksit Engelleyici Aktivitelere Sahip Alkaloidler

Dongdong Zhang , ^1,^†Yanhong Shi , ^2,^†Jingyi Li , ¹Deqing Ruan , ¹Qi Jia , ^{1 Weiliang}Zhu , ³Kaixian Chen , ^1,³Yiming Li , ^1,^* ve Rui Wang ^1,^*
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
¹ Eczacılık Fakültesi, Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Şanghay 201203, Çin; moc.361@dorptangnahz (DZ); moc.361@auhsirboj (JL); moc.621@321gniqednaur (DR); moc.621@aij_q (QJ); nc.ca.cnchs.liam@nehcxk (KC)
² Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi TCM Uluslararası Standardizasyon Enstitüsü, Şanghay 201203, Çin; nc.ude.mctuhs@mcthyihs
³ Şanghay Materia Medica Enstitüsü, Çin Bilim Akademisi, Şanghay 201203, Çin; nc.ca.mmis@uhzlw
^* Yazışma: moc.361@suilmy (YL); nc.ude.mctuhs@rw (RW); Tel.: +86-21-5132-2191 (YL); +86-21-5132-2181 (RW); Faks: +86-21-5132-2193 (YL & RW)
^† Bu yazarlar bu çalışmaya eşit katkıda bulunur. İlişkili Veriler

Ek Malzemeler
Git: Soyut

Ban Lan Gen ( Isatis tinctoria kökleri) üzerinde devam eden araştırma projemiz olarak toplam 23 alkaloid elde edildi. Bileşik 1 ve 2 , sırasıyla 2( 1H )-kinolinon kısmı ile fenol kısmı arasında ve 2( 1H )-kinolinon kısmı ile 1H -indol kısmı arasında alışılmadık bir C–C bağı içerir . Bileşik 3 , alışılmadık bir karbon iskeletine sahiptir ve bunun varsayılan biyosentetik yolu tartışılmıştır ve Bileşik 23 , yeni bir indol alkaloid glikozit olarak çıkarılmıştır. Bileşikler 4-7kapsamlı spektroskopik deneylerle dört yeni doğal ürün olarak tanımlandı. Ek olarak, anti-enflamatuar aktivite, Lipopolisakkarit ile uyarılan RAW264.7 makrofajları kullanılarak nitrik oksit (NO) üretimine dayalı olarak değerlendirildi. Bileşikler 9 , 15 ve 17 , 1.2, 5.0 ve 74.4 uM IC50 değerleri _ile inhibitör etkiler gösterdi .

Anahtar Kelimeler: Isatis tinctoria kökleri, alkaloidler, yapı tanımlama, antiinflamatuar aktivite
Git: 1. Giriş

Çin Farmakopesinde Ban Lan Gen olarak adlandırılan Isatis tinctoria L. (eşanlamlı, Isatis indigotica Fort.), Çin'in Yangtze Nehri'nin kuzeyinde yaygın olarak dağıtılan ve yetiştirilen Isatis (Brassicaceae familyası) genine aittir [ 1 , 2 , 3 , 4 ]. Alkaloidler, anti-inflamatuar, antiviral, antibakteriyel, antitümör ve antioksidan aktiviteler gibi çeşitli biyoaktivitelere sahip olan bu bitkinin karakteristik bileşenlerinden biri olarak kabul edildi [ 5 , 6 , 7 ]. Şimdiye kadar I. tinctoria'dan 100'den fazla alkaloid izole edilmiştir .indol alkaloidleri, kinazolon alkaloidleri, kinolin alkaloidleri ve benzeri gibi [ 1 , 2 , 3 , 4 , 5 ]. Bu bitki üzerinde devam etmekte olan fitokimyasal ve farmakolojik araştırma projemiz [ 8 , 9 , 10 , 11 , 12 ] olarak dört yeni alkaloit ve dört yeni doğal ürün ile bilinen 15 analogu elde edilmiş ve bunların yapıları ve mutlak konfigürasyonları aşağıdakiler tarafından belirlenmiştir. tek boyutlu ve iki boyutlu NMR, HRESIMS ve IR, spesifik rotasyon verileri ve elektronik dairesel dikroizm (ECD) deneyleri dahil olmak üzere kapsamlı spektroskopik veri analizi. Bilinen bileşikler ( 4– 22 ,Şekil 1) spektroskopik ve optik rotasyon verilerinin 4- p -hidroksifenil-2( 1H )-kinolinon ( 4 ) [ 13 ], 2-( 1H -indol-2-yl ) olarak rapor edilen literatürdeki verilerle karşılaştırılmasıyla tanımlandı. )-6-metoksi-4( 3H )-kinazolinon ( 5 ) [ 14 ], 2-(2-hidroksifenil)-4( 3H )-kinazolinon ( 6 ) [ 15 ], 2-(but-3-en -1-il)-4( 3H )-kinazolinon ( 7 ) [ 16 ], 2-( 1H -indol-2-il)-4( 3H )-kinolinon ( 8 ) [ 17], triptantrin ( 9 ) [ 18 ], 3-(2,4-diokso-1,2-dihidrokinazolin-3( 4H )-il)propanoik asit ( 10 ) [ 19 ], indiforin C ( 11 ) [ 3 ] , 4-(2,4-diokso-1,2-dihidrokinazolin-3( 4H )-il)bütanoik asit ( 12 ) [ 20 ], metil 4-(2,4-diokso-1,2-dihidrokinazolin-3 ( 4H )-il)bütanoat ( 13 ) [ 21 ], 3-(2-hidroksifenil)-4( 3H )-kinazolinon ( 14 ) [ 22 ], 3-(2-karboksifenil)-4( 3H ) -kinazolinon ( 15 ) [ 23], 4-metil-1,2-dihidro-2-oksokinazolin ( 16 ) [ 24 ], 2-metil-4( 3H )-kinazolinon ( 17 ) [ 25 ], 4-hidroksi-3-metil-2( 1H )-kinolinon ( 18 ) [ 26 ], 2-amino-4-kinolinkarboksilik asit ( 19 ) [ 27 ], 4(1 H )-kinolinon ( 20 ) [ 28 ], 4(1 H ) -kinolon -3 - karboksilik asit ( 21 ) [ 29 ] ve 1,2,3,4-tetrahidro-4-hidroksi-kinolinkarboksilik asit ( 22 ) [ 30 ]. İzolatların NO inhibitör aktiviteleri (1 – 23 ) ayrıca LPS ile uyarılan RAW264.7 makrofajlarına karşı da değerlendirildi. Bu yazıda, bu alkaloitlerin izolasyon ve yapı tayini, varsayılan biyosentetik yol ve NO inhibitör aktivitelerini rapor ediyoruz.

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı moleküller-24-04033-g001.jpg

Şekil 1
Bileşiklerin Yapıları 1 – 23 .

Git: 2. Sonuçlar ve Tartışma

Isatisindigoticanine E ( 1 ), sarı amorf bir toz halinde elde edildi. Moleküler formül, m/z _252.0666 [M − H] − ⁽_252.0666 [ M − H] ⁻ ) 'deki negatif iyon _HRESIMS zirvesi temelinde, tek boyutlu- NMR verileri (tablo 1). ^1H -NMR spektrumu , [ δH 7.20 (1H, d, _J= 2.2 Hz, H-5), 6.63 (1H, dd, J = 8.3, 2.2 Hz, H-7) ve 6.66 (1H, d, J = 8.3 Hz, _{H -}8 )], [ δH 7.57 (2H, d, J = 8.5 Hz, H-2',6') ve 6.90 (2H, d, J = 8.5 Hz, H-3', 5') ve ayrıca δH 7.48'de ( _1H , s, H-3 ) üç ikameli bir çift bağ [ 9 ] gösterdi. ) ve δ _{H'de üç değiştirilebilir proton}10.19 (1H, brs, NH-1), 10.12 (1H, brs, OH-6) ve 8.96 (1H, brs, OH-4'). ^13C -NMR spektrumu 15 karbon sinyali gösterdi; bunların arasında δC'de 7 x C ( _169.5 , 159.6, 152.2, 135.4, 126.1, 125.4, 122.5) ve 8 x CH karbonu δC'de ( 136.7, 132.1, 132.1 _, 116.5, 116.1, 116.1, 110.7, 110.1) DEPT 135 deneyine göre bulunmuştur. İki boyutlu-NMR spektroskopik özellikleri, yukarıdaki çıkarımı doğruladı. 1'in NMR spektrumundaki proton ve protonlanmış karbon rezonansları , HSQC deneyleri tarafından açık bir şekilde tayin edildi [ 32 , 33 ]. 1 H- ¹ H COSY korelasyonları ⁽şekil 2) H-2',6'/H-3',5' ile birlikte HMBC korelasyonları (şekil 2) H-2'/C-4' ve H-3'/C-1', 1 [ 31 ]'de bir fenol yarımı gösterdi; NH-1/C-2, C-8 ve C-8a, H-3/C-2 ve C-4'ün HMBC'leri ile birlikte H-7/H-8'in ¹ H- ^{1 H COSY korelasyonları ve H-5/C-4 ve C-7,}1 [ 34 ] 'te bir 6-hidroksi-2( 1H )-kinolinon parçası gösterdi ; H-3/C-1' ve H-2',6'/C-4'ün HMBC'leri, bir C-4-C-1 aracılığıyla fenol parçasına bağlanan 6-hidroksi-2( 1H )-kinolinon parçasını doğruladı ' bağlamak. 1'in yapısı daha sonra aşağıdaki şekilde gösterildiği gibi belirlendi.Şekil 1.

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı moleküller-24-04033-g002.jpg

şekil 2
Anahtar ¹ H - ^{1 H COSY ve Bileşikler}1 – 3 ve 23'ün HMBC korelasyonları . tablo 1

^{' H-NMR (DMSO-}d6'da 600 MHz ) ve 1 _–3'e ait ^13C -NMR verileri (DMSO-d6'da ₁₅₀ MHz ) .

1	10.19, sn		12.06, brs
2		169,5		168.3		156.8
3	7.48, s	136.7	8.63, s	130.6
4		126.1		118.8		160.5
4a		122.5		116.8		120.3
5	7.20, g (2.2)	110.1		155.0	8.13, gün (8.0)	126.3
6		152.2	6,67, gün (7,5)	102.6	7.47, gg (8.0, 7.2)	126.0
7	6.63, gg (8.3, 2.2)	110.7	7.15, örtüşme	123.9	7.82, gg (8.1, 7.2)	134.9
8	6.66, g (8.3)	116.5	6.85, g (7.3)	106.2	7.72, g (8.1)	126.2
8a		135.4		138.0		148.8
1'		125.4	10.51, s		11.98, brs
2'	7,57, gün (8.5)	132.1		112.5	7.84, d (2.2)	128.3
3'	6.90, g (8.5)	116.1	9.45, sn	133.5		112.5
3 A				126.3		127.4
4'		159.6	7,50, gün (7,5)	117.9	7.87, g (7.5)	118.5
5'	6.90, g (8.5)	116.1	7.15, örtüşme	121.1	7.22, gg (8.1, 7.5)	120,9
6'	7,57, gün (8.5)	132.1	7.00, gg (7.5, 7.4)	127.0	7.25, gg (8.1, 7.5)	123.0
7'			7.14, örtüşme	109.5	7,50, gün (7,5)	112.6
7'a				139.4		136.4
1''					8.13, s	122.6
2''						125.6
3''					3.17, 2H, m	26.2
4''					4.25, 2H, t (7.0)	44.7
OMe			4.04, s	55.9
6-OH	10.12, sn
4'-OH	8,96, s

Ayrı bir pencerede aç
Isatisindigoticanine F ( 2 ), sarı amorf bir toz halinde elde edildi. Moleküler formül, tek boyutlu NMR verileri ve m/z'de HRESIMS pozitif iyon zirvesi ile _C18H14N202olarak atandı _291.1125_[ M ₊ H ] ⁺₍ hesaplanan 291.1128 [M + H _]⁺ ). ^1H -NMR spektrumu (tablo 12'nin )' si, [ δH 6.67 (1H, d, _J= 7.5 Hz, H-6), 7.15 (1H, örtüşme, H-7) ve 6.85'te (1H) 1,2,3-trisübstitüe benzen halkasının sinyallerini gösterdi. , d, J = 7.3 Hz, H-8)], _[δH 7.50 (1H, d, J = 7.5 Hz, H-4'), 7.15 (1H, örtüşme, H-5'te bir orto - disübstitüe benzen halkası '), 7.00 (1H, dd, J = 7.5, 7.4 Hz, H-6') ve 7.14 (1H, örtüşme, H-7')] [ 35 ]; _{δH 8.63 (1H, s, H -3) ve}9.54'te (1H, s, H-3') _iki üç ikameli çift bağ ve ayrıca δH'de iki değiştirilebilir proton12.06 (1H, brs, NH-1) ve 10.51 (1H, brs, NH-1') ve _8H4.04'te (3H, s, 5-OMe) bir metoksi grubu. ¹³ C-NMR, DEPT 135 ve HSQC verilerinin analizinden sonra (tablo 1), bir 1H -indol-2-il kısmı (112.5, C; 133.5, CH; 126.3, C; 117.9, CH; 121.1, CH; 127.0, CH; 109.5, CH; 139.4, C) [ 8 , 10 ] ve bir 5-metoksi-2( 1H )-kinolinon kısmı (168.3, C; 130.6, CH; 118.8, C; 116.8, C; 155.0, C; 102.6, CH; 123.9, CH; 106.2, CH; 138.0, C ; 55.9, CH ₃ ) gözlendi [ 34 ]. H-3/C-2' ve H-3'/C-4'ün HMBC'leri, bir C-4 aracılığıyla 5-metoksi-2( 1H )-kinolinon parçasına bağlanan 1H -indol-2-il parçasını gösterdi. -C-2' bağı. Bu çıkarımlar, HSQC, HMBC dahil olmak üzere iki boyutlu NMR verilerinin ayrıntılı analiziyle doğrulandı (şekil 2) ve ¹ H– ¹ H RAHAT (şekil 2) deneyler. Şekilde gösterildiği gibi 2'nin yapısı böylece çıkarılmıştır.Şekil 1.

_{Sarı amorf bir toz olan isatisindigoticanine} G ( ₃) , m/z'de pozitif HRESIMS iyonuna dayalı olarak C20H15N30 moleküler formülüne sahipti _314.1297 [ M + H ] ⁺_{( 314.1288 [M + H]}⁺ olarak hesaplanmıştır) ) ve tek boyutlu-NMR verileri. ^1H -NMR spektrumu (tablo 13'ün )' si, [δH 8.13 ( 1H , d, J = 8.0 Hz, H-5), 7.47 (1H, dd, J = 8.0, 7.2 Hz, H-6)' _{da iki}orto -disübstitüe benzen halkasının sinyallerini gösterdi. 7.82 (1H, dd, J = 8.1, 7.2 Hz, H-7) ve 7.72 (1H, d, J = 8.1 Hz, H-8)] ve [ δ _H 7.87 (1H, d, J = 7.5 Hz, H -4'),7.22 (1H, dd, J = 8.1, 7.5 Hz, H-5'), 7.25 (1H, dd, J = 8.1, 7.5 Hz, H-6') ve 7.50 (1H, d, J = 7.5 Hz, H-7')], δH 7.84'te ( _1H , d, J ) iki üç ikameli çift bağ_{= 2.2 Hz, H-2') ve 8.13 (1H, s, H -1'') ve ayrıca δH 11.98 (}1H , brs, NH-1')' de değiştirilebilir bir proton [ 35 ]. ¹³ C-NMR ve DEPT 135 spektrumları (tablo 1) δ _C'de 8 × C karbon (160.5, 156.8, 148.8, 136.4, 127.4, 125.6, 120.3, 112.5), δ _C'de 10 × CH karbon (134,9, 128.3, 126.3, 126.2, 126.0, 123.0, 122.6, 120.9) gösterdi. , 118.5, 112.6) ve δ _C'de₂ x CH2 karbon (44.7, 26.2). İki boyutlu-NMR spektrumları (şekil 2) 3'ü , H-5/H-6/H-7/H-8, H-3''/H-4'' ve H-5/C-4'ten HMBC'lerin ¹ H - ¹ H COSY korelasyonlarını gösterdi bir 8H - pirido[2,1-b]-11(9) belirten H-1''/C-2 ve C-3'' ve H-4''/C-2 ve C-4'ten 3 [ 36 ] 'da H )-kinazolinon parçası ; ¹ H- ¹ H H-4'/H-5'/H-6'/H-7' ve NH-1'/C-2', C-3', C-3' HMBC'lerinin COSY korelasyonları a ve C-7'a, 3 [ 10 ] 'de bir 1H -indol-3-il parçası gösterdi . NH-1'/C-9 ve C-6'dan ve H-2'/C-2'' ve H-1''/C-3'den gelen HMBC'ler 8H- pirido [2,1-b'yi belirledi ]-11(9 Saat)-kinazolinon parçası , bir C-2''-C-3' bağı yoluyla 1H -indol-3-il parçasına bağlanır. Şekilde gösterildiği gibi 3'ün yapısı böylece belirlendi.Şekil 1.

Isatindigoside D ( 23 ), [α] ile kırmızı amorf bir toz olarak izole edildi.20D+ 12.1° ( c 0.19, MeOH). C23H22N207 ₍₁₄ IHD) moleküler formülü , NMR verilerinden ve m / z'de HRESIMS pozitif iyon zirvesinden çıkarılmıştır _490.1592 [M + Na ] ⁺ , (490.1585 [M + Na] ₊ olarak ^{hesaplanmıştır} ) . Tek boyutluyu karşılaştırırken (Tablo 2) ve iki boyutlu-NMR verileri (şekil 2) isatindigobisindolosit C'nin rapor edilen bisindolositi ile [ 35 ], C-2 (C-2', C-3' ve C-3'' alt alanı, C üst alanı) arasındaki farklar dışında hemen hemen aynı NMR spektroskopik özellikleri gösterdiler. -2''). Bu farklılıklar, optik dönme verileriyle birlikte ([α]20D+ 12.1, MeOH içinde c 0.19) destekli Bileşik 23, isatindigobisindolosit C'nin ([α] C2-epimeri olacaktır.20D− 33.9, MeOH içinde c 0.11) [ 35 ]. (2 S )- 23'ün deneysel ve hesaplanmış ECD eğrileri (Figür 323 [ 35 , 37 ] 'nin S mutlak konfigürasyonunu doğrulayan ), hesaplama detayları Destekleyici Bilgilerde (Şekil S33 ve S34) listelenmiştir . 23'ün asit hidrolizi, 23'ün hidrolizatının asetilasyon türevinin GC analizi ile doğrulanan d -glukoz ürünü ile sonuçlandı ve gerçek şekerler ( tRd - _glukoz 45.23 dakika, _{tRl -}glukoz 45.38 dakika ) [ 8 , 9 ]. Glc-H1'in büyük birleştirme sabiti ( J = 7.8 Hz), 23 [ 38 , 39 ] 'da β-glukopiranozil bağlantısını ortaya çıkardı . Buna göre isatindigoside D'nin ( 23 ) yapısı gösterildiği gibi açıklanmıştır (Şekil 1).

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı moleküller-24-04033-g003.jpg

Figür 3
23'ün deneysel ve hesaplanmış ECD spektrumları . Tablo 2

^{23'ün 1H -NMR (DMSO-}d6 içinde 600 MHz ) ve ^{13C -NMR verileri}_{( DMSO-}_d6 içinde 150 MHz ) .

1 A	7.45, brs	172.9	3''		112.1
1b	7.14, brs	3 A		126.7
2	5.68, s	38.7	4''	7,56, gün (8.0)	118.4
1'	10.35, brs		5''	6.93, gg (8.0, 7.1)	118.9
2'		126.8	6''	7.04, gg (8.1, 7.1)	120,5
3'		133.0	7''	7.32, g (8.1)	111.4
3 A		121.2	7''a		136.0
4'	7.77, g (8.0)	118.1	glc-1	4.63, gün (7.8)	106.6
5'	6.92, gg (8.0, 7.2)	118.4	2	3.38, örtüşme	74.1
6'	6.97, gg (8.1, 7.2)	120,8	3	3.26, m	76.8
7'	7.26, g (8.1)	111.6	4	3.28, m	69.8
7'a		133.3	5	3.14, m	77,2
1''	10.94, brs		6a	3.56, gg (10.8, 5.6)	61.0
2''	7.38, s	123.9	6b	3.67, gg (10.8, 1.8)

Ayrı bir pencerede aç
NO, hücrelerde yaygın olarak bulunan ve çeşitli fizyolojik ve patolojik süreçleri etkileyebilen bir haberci moleküldür. NO üretimi doku hasarına neden olur ve çeşitli inflamatuar hastalıkları tetikleyebilir. LPS, bileşiklerin [ 2 , 10 , 40 ] anti-inflamatuar etkilerini araştırmak için yaygın olarak kullanılan NO salınımını saptayarak RAW264.7 hücrelerinden NO salınımını indükler . Devam eden fitokimyasal ve farmakolojik araştırma projemiz olarak I. tinctoria [ 8 , 9 , 10 , 11 , 12 ], Bileşikler 1 – 23elde edildi ve LPS ile aktive olan RAW 264.7 hücrelerinde NO inhibitör etkilerine dayalı olarak anti-inflamatuar aktiviteleri açısından değerlendirildi [ 40 ]. Bileşik 1 – 23'ün sitotoksisitesi üç farklı konsantrasyonda (25, 50 ve 100 uM) test edildi ve sonuçlar sadece Bileşik 9'un 25 uM'nin üzerinde sitotoksisite gösterdiğini, diğer bileşiklerin ise 100 uM'nin üzerinde olduğunu gösterdi. NO üretiminin sonuçları, Bileşik 9 , 15 ve 17'nin 1.2, 5.0 ve 74.4 uM IC50 değerleri _ile inhibitör aktiviteler sergilediğini gösterdi (Tablo 3). Tablo 3

RAW 264.7 hücre hattında Bileşik 1 – 23'ün HİÇBİR inhibitör aktivitesi .

1	>100	>100	1 3	>100	>100
2	>100	>100	1 4	>100	>100
3	>100	>100	1 5	5.0 ± 1.3	>100
4	>100	>100	16	>100	>100
5	>100	>100	17	74.4 ± 3.8	>100
6	>100	>100	18	>100	>100
7	>100	>100	19	>100	>100
8	>100	>100	2 0	>100	>100
9	1,2 ± 0,9	>25	2 1	>100	>100
10	>100	>100	2 2	>100	>100
11	>100	>100	23	>100	>100
12	>100	>100	AG ^b	22,7 ± 0,4	>100

Ayrı bir pencerede aç
^a IC50 _değerleri ortalama ± SD ( n = 3) olarak ifade edildi. ^bAG = aminoguanidin hidroklorür pozitif kontrol olarak kullanıldı.

Isatisindigoticanine G ( 3 ), bir C–C bağı yoluyla bir 1H -indol-3-il parçası ile bağlanan bir 8H -pirido[2,1-b]-11( 9H )-kinazolinon parçasının ilk örneğidir . C-2''–C-3'. Olağandışı yapısal özellikleri için, makul bir biyosentetik yol, şurada tartışılmaktadır:Şekil 4. İlk olarak, mirosinaz, progoitrin ve epiprogoitrinin hidrolizini katalize ederek 3a [ 1 ] verdi. 3a , 3b'yi [ 10 ] vermek üzere dehidrasyon aşamaları ile 2-aminobenzoik asit kısmı ile birleştirildi ve daha sonra 3b'nin [ 2 , 11 ] bir siklizasyon reaksiyonu yoluyla 3c elde edildi. 3c , 3d [ 5 ] verecek şekilde enzim katalizli reaksiyonla 1H -indol kısmı ile birleştirildi ve daha sonra 3 [ 9 , 10 , 11 ] verecek şekilde bir dehidrasyon reaksiyonu ile değiştirildi .

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı moleküller-24-04033-g004.jpg

Şekil 4
3'ün varsayılan biyosentetik yolu .

Git: 3. Deneysel Bölüm

Genel Deneysel Prosedürler, Ekstraksiyon ve İzolasyon, Bitki Materyalleri, NO Üretiminin İnhibitör Testi ve EÇG Hesaplama bölümleri Destekleyici Bilgilerde listelenmiştir.

3.1. Isatisindigoticanines E–G ve Isatindigoside D'nin Fiziksel ve Spektroskopik Verileri
Isatisindigoticanine E ( 1 ), sarı amorf bir toz; IR (KBr) vmaks : ₃₄₀₆ , 2923, 1647, 1609, 1556, 1517, 1466, 1383, 1273, 1093, 745 cm- ¹ ; m/z 356.1398 [M + H] ⁺ (hesaplanan 356.1394 [M + H] ⁺ ); ^' H-NMR (DMSO- d6 , 600 MHz) ve13C-NMR (DMSO-d6 ^,₁₅₀ MHz ₎ ; görmektablo 1.

Isatisindigoticanine F ( 2 ), sarı amorf bir toz; IR (KBr) vmaks : ₃₄₅₆ , 1679, 1621, 1516, 1461, 1319, 1206, 1135, 1021, 952, 749 cm- ¹ ; m/z 291.1125 [M - Y] ^- (291.1128 [M + H] ⁺ olarak hesaplanmıştır ); ^' H-NMR (DMSO- d6 , 600 MHz) ve13C-NMR (DMSO-d6 ^,₁₅₀ MHz ₎ ; görmektablo 1.

Isatisindigoticanine G ( 3 ), sarı amorf bir toz; IR (KBr) vmaks : ₃₄₀₄ , 2919, 1708, 1601, 1468, 1400, 1384, 1092, 745 cm- ¹ ; m/z 314.1297 [M + H] ⁺ (hesaplanan 314.1288 [M + H] ⁺ ); ^' H-NMR (DMSO- d6 , 600 MHz) ve13C-NMR (DMSO-d6 ^,₁₅₀ MHz ₎ ; görmektablo 1.

Isatindigoside D ( 23 ), kırmızı amorf bir toz; [α]20D+ 12.1 ( c 0.19, MeOH); IR (KBr) vmaks : ₃₄₂₀ , 2939, 1722, 1598, 1514, 1461, 1261, 1069, 1025, 859, 813 cm- ¹ ; HRESIMS: m / z 490.1592 [M+Na] ⁺ , (hesaplanan 490.1585 [M+Na] ⁺ ); ^1H ve13C -NMR ^{( DMSO-}d6 içinde 600 ve 150 MHz ₎ ; görmekTablo 2. 3.2. Şekerin Mutlak Konfigürasyon Tayini

Bileşik 23 (2 mg), 2 saat boyunca 80 °C'de 2 M hidroklorik asit (4 mL) içerisinde hidrolize edildi. Soğutulduktan sonra çözelti, vakum altında konsantre edildi, su ile çözüldü ve iki kez diklorometan (CH2CI2 ₎_ile özü çıkarıldı . Tortu, damıtılmış su içinde çözündürüldü ve oda sıcaklığında 3 saat boyunca _{NaBH4 ile indirgendi.}AcOH ile nötralize edildikten ve kuruyana kadar buharlaştırıldıktan sonra tortu, Ac2 ile asetillendi _.O 100 °C'de 1 saat süreyle. Elde edilen alditol asetat, aşağıdaki koşullar altında GC analizine tabi tutuldu: kapiler kolon, HP-5ms (60 m x 0.25 mm x 0.25 um); dedektör, FID; dedektör sıcaklığı, 280 °C; enjeksiyon sıcaklığı, 280 °C; ilk sıcaklık 140 °C, daha sonra 5 °C/dakika hızında 240 °C'ye ve ardından 1 dakika sonra 260 °C'ye yükselir, son olarak, ardından 2 °C/dakika hızında 280 °C'ye yükselir ; taşıyıcı, N2 _gazı [ 8 , 9 ]. 23'teki _D glikoz kısmı , alıkonma sürelerinin ( tR ) gerçek şekerlerinkilerle ( tRd - _glukoz 45.23 dakika, tRl ₎karşılaştırılmasıyla doğrulandı . -glikoz 45.38 dk).

Git: 4. Sonuçlar

Bu yazıda, dört yenisi dahil olmak üzere toplam 23 alkaloid rapor edilmiştir: isatisindigoticanines E–G ( 1 – 3 ) ve isatindigoside D ( 23 ). Ban Lan Gen.'den dört yeni doğal ürün ve bilinen 15 analog izole edildi. Isatisindigoticanine G, 1H - ile bağlı bir 8H -pirido[2,1-b]-11( 9H )-kinazolinon parçasının olağandışı bir karbon iskeletine sahiptir. indol kısmı, C-2''–C-3' C–C bağı yoluyla. Bileşikler 9 , 15 ve 17 , _IC50 ile NO inhibe edici etkiler gösterdiLPS ile uyarılan RAW264.7 makrofajlarında 1.2, 5.0 ve 74.4 μM değerleri. Bu çalışma, Ban Lan Gen'in kimyasal ve biyolojik çeşitliliğini açıkladığı için önemlidir. Ayrıca, yeni yapıların daha anlamlı kullanımlarını keşfetmek için daha fazla biyokatiflik deneylerine ihtiyaç vardır, bu da bizi bu bileşikleri daha iyi geliştirmeye ve kullanmaya teşvik edebilir.

Git: Ek Malzemeler

Aşağıdakiler çevrimiçi olarak mevcuttur https://www.mdpi.com/1420-3049/24/22/4033/s1 , IR, HREIMS, ^1H -NMR, ¹³ C-NMR, DEPT 135, HSQC, HMBC, ve ¹ H- ¹ H COSYY 1 – 3 ve 23 . 23'ün deneysel ve hesaplanmış ECD spektrumları .
Ek veri dosyası için buraya tıklayın. ^{(2,7M, pdf)}
Git: Yazar Katkıları

RW, YL ve KC deneyleri gerçekleştirdi; DR ve JL, anti-inflamatuar aktivite deneylerini gerçekleştirdi; YS, QJ ve WZ, MS, ECD ve NMR verilerini analiz etti; DZ izolasyonu yaptı, yapıları onayladı ve makaleyi yazdı; RW araştırma projesini denetledi ve makaleyi hazırladı.

Git: Finansman

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81573571, 81673570), Şanghay Mükemmel Akademik Liderler Programı (16XD1403500), Üst Düzey Üniversite Yenilik Ekibi programları, Geleneksel Biyoaktif Bileşenler Şanghay E-Araştırma Enstitüsü tarafından desteklenmiştir. Çin Tıbbı ve Şanghay Bilimsel ve Teknolojik Yenilik Programı (18401931100).

Git: Çıkar çatışmaları

Yazarlar hiçbir rakip finansal çıkar beyan etmemiştir.

Git: Dipnotlar

Örnek Bulunabilirliği : 1–23 arasındaki Bileşiklerin örnekleri yazarlardan temin edilebilir.

Git: Referanslar

1. Chen MH, Lin S., Li L., Zhu CG, Wang XL, Wang YA, Jiang BY, Wang SJ, Li YH, Jiang JD, ve diğerleri. Isatis indigotica kökünden alışılmadık dihidrotiopiran ve 1,2,4-thiadiazol halkaları içeren bir indol alkaloidinin enantiyomerleri . Org. Lett. 2015; 45 :1523–7052. doi: 10.1021/ol302660t. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
2. Yang LG, Wang G., Wang M., Jiang HM, Chen LX, Zhao F., Qiu F. Isatis indigotica köklerinden indol alkaloidleri ve nitrik oksit üretimi üzerindeki engelleyici etkileri. Fitoterapi. 2014; 95 :175–181. doi: 10.1016/j.fitote.2014.03.019. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
3. Liu SF, Zhang YY, Zhou L., Lin B., Huang XX, Wang XB, Song SJ Çin'in Anhui Eyaletinde toplanan Isatis indigotica yapraklarından nöroprotektif etkileri olan alkaloidler . Fitokimya. 2018; 149 :132-139. doi: 10.1016/j.phytochem.2018.02.016. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
4. Chen MH, Gan LS, Lin S., Wang XL, Li L., Li YH, Zhu CG, Wang YA, Jiang BY, Jiang JD, ve diğerleri. Isatis indigotica kökünden gelen alkaloidler . J. Nat. Ürün 2012; 75 :1167–1176. doi: 10.1021/np3002833. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
5. Meng LJ, Guo QL, Chen MH, Jiang JD, Li YH, Shi JG Isatindolignanoside A, Isatis indigotica köklerinin sulu bir ekstraktından elde edilen bir glukozidik indol-lignan konjugatı . Çene. Kimya Lett. 2018; 29 :1257-1260. doi: 10.1016/j.cclet.2017.12.001. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
6. Meng LJ, Guo QL, Liu YF, Shi JG 8,4′-Oxyneolignane "ban lan gen" ( Isatis indigotica kökü) sulu ekstraktından elde edilen glukozitler ve bunların mutlak konfigürasyonları. Acta Ecz. Günah. B.2017 ; 7 :638-646. doi: 10.1016/j.apsb.2017.09.006. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
7. Huang QS, Yoshihiro K., Natori S. "Banlangen" Isatis indigotica kökünden 2-hidroksi-3-butenil tiyosiyanat, epigoitrin ve adenosinin izolasyonu. Planta Medica. 1981; 42 :08–310. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
8. Zhang DD, Shi YH, Xu R., Du K., Guo FJ, Chen KX, Li YM, Wang R. Isatis indigotica Köklerinden Alkaloid Enantiyomerleri . Moleküller. 2019; 24 :3140. doi: 10.3390/moleküller24173140. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
9. Zhang DD, Du K., Zhao YT, Shi SS, Wu YC, Jia Q., Chen KX, Li YM, Wang R. Isatis tinctoria köklerinden indol alkaloid glikozitler. Nat. Ürün Araş. 2019 doi: 10.1080/14786419.2019.1624960. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
10. Isatis indigotica köklerinden Zhang DD, Li JY, Ruan DQ, Chen ZQ, Zhu WL, Shi YH, Chen KX, Li YM, Wang R. Lignans ve nitrik oksit üretimi üzerindeki engelleyici etkileri. Fitoterapi. 2019; 137 :104189. doi: 10.1016/j.fitote.2019.104189. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
11. Zhang DD, Shi YH, Shi SS, Wu XM, Zhang LQ, Chen KX, Li YM, Wang R. Isatisindigoticanine A, Isatis tinctoria'nın köklerinden gelen, sunulmamış bir karbon iskeletine sahip yeni bir indol alkaloid . Nat. Ürün Araş. 2019 doi: 10.1080/14786419.2019.16444632. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
12. Zhang DD, Li JY, Shi YH, Chen KX, Li YM, Wang R. Isatis indigotica köklerinden elde edilen glikozitler . Çene. gelenek. bitki. İlaçlar. 2019; 50 :3575–3580. [ Google Akademik ]
13. Shimokawa Y., Nakakoshi M., Saito S., Suzuki H., Yokoyama Y., Ishigami A., Nishioka H., Tsubuki M. Güçlü olarak 4-aril-2( 1H )-kinolinonların sentezi ve değerlendirilmesi amiloid β fibrillogenez inhibitörleri. heterosikller. 2012; 85 :1933–1940. doi: 10.1002/chin.201249156. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
14. Huang ZS, Rao Y., Xu Z., Hu YT, Yu H., Gao L. Antiobezite Ajanları Olarak Heterosikllerin Hazırlanması. CN 107.721.982. 23 Şubat 2018;
15. Javaid K., Saad SM, Rasheed S., Moin ST, Syed N., Fatima I., Salar U., Khan KM, Perveen S., Choudhary MI 2-Arylquinazolin-4( 3H )-onlar: A a-glukozidaz inhibitörlerinin yeni sınıfı. Bioorg. Med. Kimya 2015; 23 :7417–7421. doi: 10.1016/j.bmc.2015.10.038. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
16. Hamasharif MS, Smith OEP, Curran CJ, Hemming K. 2-azidobenzensülfonamidin N-alkilasyonu ve aminohidroksilasyonu bir pirolobenzotiadiazepin öncüsünü verirken, 2-azidobenzamidin N-alkilasyonuna teşebbüs edilmesi benzotriazinonları ve kinazolinonları verir. ACS Omega. 2017; 3 :1222–1231. doi: 10.1021/acsomega.7b00211. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
17. Kornsakulkarn J., Saepua S., Srijomthong K., Rachtawee P., Thongpanchang C. actinomycete Streptomyces sp. BCC 21795. Phytochem. Lett. 2015; 12 :6–8. doi: 10.1016/j.phytol.2015.02.007. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
18. Ruan JL, Zou JH, Cai YL Isatis indigotica yaprağındaki kimyasal bileşenler üzerine çalışmalar . Çin J. Chin. Anne. Med. 2005; 30 :1525–1526. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
19. Yamaya N., Chau N., Iwakura Y. 2-karbometoksifenil izosiyanat ve amino asitlerden kinazolindion türevlerinin sentezi. Seikei Daigaku Kogakubu Kogaku Hokoku. 1982; 33 :2239–2240. [ Google Akademik ]
20. Ökaryotik Organizmaların Ömrünü Değiştirmek İçin Ömrü Değiştiren Bileşiklerin Kullanıldığı Goldfarb DS Yöntemi ve Bu Bileşiklerin Taranması. ABD 20.090.163.545. 25 Haziran 2008;
21. Suesse M., Cleve D., Johne S. 1,2,3,4-Tetrahidro-1-metil-2,4-diokso-3-kinazolinalkanoatların Hazırlanması için İşlem. GG 291,085. 1991 Haziran 20;
22. Feng QT, Zhu GY, Gao WN, Yang ZF, Zhong NS, Wang JR, Jiang ZH Baphicacanthus cusia'nın köklerinden iki yeni alkaloid . Kimya Eczacılık Boğa. 2016; 64 :1505–1508. doi: 10.1248/cpb.c16-00315. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
23. Mohn T., Plitzko I., Hamburger M. Isatis tinctoria yaprak özlerinin kapsamlı bir metabolit profili . Fitokimya. 2009; 70 :924-934. doi: 10.1016/j.phytochem.2009.04.019. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
24. Bandurco VT, Wong EM, Levine SD, Hajos ZG Antihipertansif pirolo[1,2-c]kinazolinler ve pirolo[1,2-c]kinazolinonlar. J. Med. Kimya 1981; 24 :1455–1460. doi: 10.1021/jm00144a017. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
25. Bingi C., Kola KY, Kale A., Nanubolu JB, Atmakur K. Yeni trisiklik kinazolinonların basit bir kap sentezi. Dörtyüzlü Lett. 2017; 58 :1071-1074. doi: 10.1016/j.tetlet.2017.01.106. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
26. Ikuro A., Tsuyoshi A., Kiyofumi W., Hiroshi N. Bir bitki tipi III poliketid sentaz ile kinolon alkaloitlerinin enzimatik oluşumu. Org. Lett. 2006; 8 :6063–6065. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
27. Anilkumar GN, Rosenblum SB, Venkatraman S., Njoroge FG, Kozlowski JA Viral Enfeksiyonların Tedavisi için 2,3-ikameli Azaindol Türevleri. ABD 8.404.845. 2010 7 Mayıs;
28. Li YC, Kuo PC, Yang ML, Chen TY, Hwang TL, Chiang CC, Thang TD, Tuan NN, Tzen JTC Peltophorum pterocarpum Yapraklarının Kimyasal Bileşenleri ve Biyoaktiviteleri. Moleküller. 2019; 24 :240. doi: 10.3390/moleküller24020240. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
29. Fuhr U., Strobl G., Manaut F., Anders E., Soergel F., Lopez-de-Binas E., Chu DTW, Pernet AG, Mahr G. Kinolon antibakteriyel ajanlar: Yapı ve in vitro inhibisyon arasındaki ilişki insan sitokrom P450 izoformu CYP1A2. Mol. farmakol. 1993; 43 :191–19. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
30. Feng C., Shi L., Chen DZ, Zhang HC, Zhao RQ Chemical, homostatik tedavisi için Celosia cristata'da etkili kısmı oluşturur . Çene. gelenek. bitki. İlaçlar. 2017; 48 :653–656. [ Google Akademik ]
31. Wang D., Wu XM, Zhang DD, Zhu BR, Jia Q., Li YM Cinnamomi Ramulus'taki karboksilik asit ve türevlerinin kimyasal bileşenleri . Çene. gelenek. bitki. İlaçlar. 2019; 50 :8–12. [ Google Akademik ]
32. Cui YW, Yang XJ, Zhang DD, Li YZ, Zhang L., Song B., Yue ZG, Song XM, Tang HF Smilacina japonica'nın köklerinden ve rizomlarından steroidal bileşenler . Moleküller. 2018; 23 :798. doi: 10.3390/moleküller23040798. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
33. Li YZ, Wang X., He H., Zhang DD, Jiang Y., Yang XJ, Wang F., Tang ZS, Song XM, Yue ZG Tupistra chinensis'in köklerinden ve rizomlarından steroidal saponinler . Moleküller. 2015; 20 :13659–13669. doi: 10.3390/moleküller200813659. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
34. Tashima T., Kodama H., Murata H. Hidroksamik Asit Türevlerinin Histon Deasetilaz (HDAC) İnhibitörleri Olarak Hazırlanması. WO 2.014.196.328. 2014 11 Aralık;
35. Liu YF, Chen MH, Guo QL, Lin S., Xu CB, Jiang YP, Li YH, Jiang JD, Shi JG Isatis indigotica'nın köklerinden elde edilen antiviral glikozidik bisindol alkaloidleri . J. Asyalı. Nat. Ürün Araş. 2015; 17 :689-704. doi: 10.1080/10286020.2015.1055729. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
36. Chen Z., Hu GY, Li D., Chen J., Li YJ, Zhou HY, Xie Y. Geçici reseptör potansiyel vanilloid alt ailesi ile ilgili olabilecek rutaekarpin analoglarının sentezi ve vazodilatör etkileri, üye 1 (TRPV1) Bioorg. Med. Kimya 2009; 17 :2351–2359. doi: 10.1016/j.bmc.2009.02.015. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
37. Chen XY, Zhang T., Wang X., Hamann MT, Kang J., Yu DQ, Chen RY Morus alba L. Moleküllerinin yapraklarının kimyasal bir araştırması . 2018; 23 :1018. doi: 10.3390/moleküller23051018. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
38. Song XM, Zhang DD, He H., Li YZ, Yang XJ, Deng C., Tang ZS, Cui JC, Yue ZG Reineckia carnea'dan steroidal glikozitler . Fitoterapi. 2015; 105 :240–245. doi: 10.1016/j.fitote.2015.07.008. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
39. Zhang DD, Wang W., Li YZ, Li Z., Jiang Y., Tang ZS, Song XM, Yue ZG Reineckia carnea'dan iki yeni pregnan glikozit . Bitki kimyası. Lett. 2016; 15 :142–146. doi: 10.1016/j.phytol.2015.12.005. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
40. Scrophularia umbrosa kaynaklı Han MF, Zhang X., Zhang LQ, Li YM İridoid ve nitrik oksit üretimi üzerinde engelleyici aktiviteye sahip feniletanol glikozitler. Bitki kimyası. Lett. 2018; 28 :37-41. doi: 10.1016/j.phytol.2018.09.011. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]

***maturidi*** · 30 September 2022, 17:00

Meğer kansere kök söktürüyormuş

Çivit; Kafkas kökenli çivit otundan veya indigo ağacının yapraklarından elde edilen mavi renkli tozdur
turpgiller ailesine bağlı bir bitki türüdür. Ağacı “indigo” ise tropik bölgelerin ağacıdır. Ve biliyor musunuz şimdi çivitin brokoliden 65 kat daha kanser önleyici olduğu anlaşıldı. Ta asırlar öncesinden bilinen yüzdeyüz doğal bir maddedir çivit.. Çamaşırların sarılığını gidermek için çamaşırları yıkadıktan sonra son durulama suyuna katılır. Sarı, kırmızı, yeşil olanlarından ise kumaşları boyamakta istifade edilir. Gökmavi renklisi çamaşırlarda kullanılır. Aslında buna “çivit mavisi” denir. Çivit nedir, bilinmez hale geldiği için, renk de bilinmez olmuştur. Bazı maddelerin içine karıştırılarak kumaş boyanır. Hava ile temasta rengini kaybetmez ve suda erimez. Çamaşır aklaması ile bilinirdi eskiden ama artık şifalı özelliği de biliniyor. Tanen, A vitamini, eterli yağ asitleri, bitkisel özler ve etken maddeler glucobrassicin ihtiva ediyor çivit, Kanseri önleyici özelliği ile öne çıkmaktadır. Brokoliden 65 kat daha fazla kanseri önleyen etken madde içermektedir.

Özetlersek:

-Kuvvetli bir antioksidandır.

-Kanseri önleyici niteliktedir.

-Vücuttan zehirli maddelerin atılmasında etkili olmaktadır.

-Boğaz ağrılarına iyi gelmektedir.

-Hepatit A’yı engellemektedir.

-Menenjiti önlemektedir.

-Grip olmaya karşı bağışıklık sistemini kuvvetlendirmektedir.

-Kızamığı, kabakulağı engellemektedir.

-Faranjite ve ishale iyi gelmektedir.

NOT: SAKIN KALKIP DA ÇAMAŞIRDA, BOYADA KULLANILAN ÇİVİTİ İLAÇ DİYE KULLANMAYIN. FAYDALI OLAN ÇİVİT OTU’NUN KENDİSİDİR..

***maturidi*** · 30 September 2022, 17:06

Geleneksel Çin tıbbı bitkisi Northern Ban Lan'ın (Isatis tinctoria) anti-mikrotübül aktivitesi, glukobrasisine yol açar.

pingyin guan¹, Jianning Zhou¹, Sergey Girel², Xin Zhu¹, Marian Schwab¹, Kunxi Zhang¹, Qiyan Wang-Müller³, Laurent Daha Büyük², Peter Nick¹
Bağlantılar yıkılmak Bağlantılar
¹Moleküler Hücre Biyolojisi, Botanik Enstitüsü, Karlsruhe Teknoloji Enstitüsü, Fritz-Haber-Weg 4, Karlsruhe, 76131, Almanya.

²Kimya Bölümü, Zürih Üniversitesi, Winterthurerstr.190, CH-8057, Zürih, İsviçre.
³Organik Tarım Araştırma Enstitüsü FiBL, Ackerstrasse 113, CH-5070, Frick, İsviçre.

PMID: 34636476
DOI: 10.1111/jipb.13177

Ücretsiz makaleSoyut

Geleneksel Çin tıbbı (TCM), bitki bazlı şifanın en ayrıntılı ve kapsamlı sistemlerine aittir. Northern Ban Lan (Isatis tinctoria) bitkisi, antiviral ve anti-inflamatuar aktivitesi ile ünlüdür. I. tinctoria'dan izole edilen çok sayıda bileşen şimdiye kadar karakterize edilmiş olmasına rağmen, bunların etki biçimleri belirsizliğini korumuştur. Burada, I. tinctoria'dan elde edilen ekstraktların anti-mikrotübüler aktivite sergilediğini gösteriyoruz. Yeşil flüoresan protein-tübülini ifade eden canlı tütün BY-2 (Nicotiana tabacum L. cv Bright Yellow 2) hücrelerinde hızlandırılmış mikroskopi kullanarak, I. tinctoria'nın biyolojik olarak aktif bileşiklerini taramak için aktivite rehberli fraksiyonlama kullanıyoruz. I. tinctoria'nın yapraklarından veya köklerinden metanol ile elde edilen 54 fraksiyon arasında (MeOH/ _H208:2) veya etil asetat ekstraksiyonu, mikrotübülleri verimli ve hızlı bir şekilde ortadan kaldırdığı için spesifik bir metanolik kök fraksiyonu seçildi. Ultra yüksek performanslı sıvı kromatografisi ve yüksek çözünürlüklü tandem kütle spektrometrisi ile daha fazla saflaştırma kombinasyonu ile biyoaktivitenin çoğu glukozinolat bileşiği glukobrasisine atanabilir. Glukobrasisin ayrıca mikrotübülleri etkileyebilir ve HeLa hücrelerinde apoptozu indükleyebilir. Bu bulguların ışığında, Northern Ban Lan'ın antiviral aktivitesi, hücreden hücreye yayılma için birçok viral patojen tarafından kaçırılan mikrotübüller bağlamında tartışılmaktadır.

Anahtar Kelimeler: Isatis tinctoria; Kuzey Ban Lan; anti-mikrotübül aktivitesi; hücre iskeleti; glukobrasisin; yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC); yüksek çözünürlüklü tandem kütle spektrometrisi (HRMS/MS); geleneksel Çin tıbbı (TCM).

© 2021 Yazarlar. Çin Bilimler Akademisi Botanik Enstitüsü adına John Wiley & Sons Australia, Ltd tarafından yayınlanan Bütünleştirici Bitki Biyolojisi Dergisi.

**igokcek** · 01 October 2022, 11:40

Isatis tinctoria L. Yaprak Özü, mTOR-NF-κB-SASP Sinyalini Düzenleyerek Dermal Fibroblastlarda Replikatif Yaşlanmayı Engeller

Jieun Woo , ¹Seoungwoo Shin , ¹Hyanggi Ji , ¹Dehun Ryu , ¹Eunae Cho , ¹Youngseok Kim , ²Junoh Kim , ²Deokhoon Park , ¹ ve Eunsun Jung ^1,^*
Rosane Marina Peralta, Akademik Editör
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
¹ BioSpectrum Yaşam Bilimleri Enstitüsü, 767, Sinsu-ro, Yongin-si 16827, Kore; moc.murtcepsoib@wtoib (JW); moc.murtcepsoib@tsoib (SS); moc.murtcepsoib@rcoib (HJ); moc.murtcepsoib@csoib (DR); moc.murtcepsoib@rzoib (EC); moc.murtcepsoib@hdp (DP)
² Shinsegae Uluslararası Teknoloji İnovasyon Merkezi, 449, Dosan-daero, Seul 06015, Kore; rk.oc.aerokis@32miksy (YK); rk.oc.aerokis@mikhonuj (JK)
^* Yazışma: moc.murtcepsoib@osoib İlişkili Veriler

Veri Kullanılabilirlik Bildirimi
Git: Soyut

Yaşlanmış fibroblastlar, cilt dokusunun fonksiyonel özelliklerini aşamalı olarak bozar. Yaşlanan hücreler, çevredeki yaşlanmayan hücrelerin yaşlanmasına neden olan ve bireylerde yaşlanmayı hızlandıran yaşlanma ile ilişkili salgı fenotipi (SASP) faktörünü salgılar. Son bulgular, SASP düzenlemesinin yeni nesil etkili terapötikler olarak senomorfik hedeflemesini önerdi. Isatis tinctoria L. yaprak özütünün (ITE) yaşlanma biyobelirteçleri p53 , p21 ^CDKN1A ve p16 ^INK4A'yı inhibe edip etmediğini araştırdık.gen ekspresyonu ve SASP salgıları, replikatif yaşlanan insan dermal fibroblastında (RS-HDF) hücresel yaşlanmayı inhibe ederek. ITE'nin, mTOR üzerindeki inhibitör etkisi yoluyla MAPK/NF-KB yolunu düzenleyerek çeşitli senomorfik tiplerde SASP faktörlerinin salgılanmasını engellediği gösterilmiştir. ITE, mTOR, MAPK ve IκBa fosforilasyonunu inhibe ederek ve NF-KB'nin nükleer translokasyonunu bloke ederek inflamatuar yanıtı bastırdı. Ek olarak, otofaji yolunun, ITE'nin hücresel yaşlanma üzerindeki inhibitör etkisi ile ilişkili olduğunu gözlemledik. Bu sonuçlardan, ITE'nin, RS-HDF'lerden üretilen yaşlanma ile ilgili faktörlerin aktivasyonunu ve salgılanmasını mTOR-NF-κB düzenlemesi yoluyla bloke ederek yaşlanmayı önleyebileceği ve geri yükleyebileceği sonucuna vardık.

Anahtar Kelimeler: Isatis tinctoria L., senomorfikler, replikatif senesens, senesens ile ilişkili sekretuar fenotip (SASP), anti-aging, mTOR yolu
Git: 1. Giriş

Hücresel yaşlanmanın bir özelliği olarak, hücre bölünmesinin durması olgusu, oksidatif stres, ışınlama, telomer disfonksiyonu ve onkojenik stres gibi çeşitli zararlı uyaranlardan kaynaklanır. Yaşlanan hücreleri tanımlamaya yönelik bir yöntem olarak, yaşlanmayla ilişkili β-galaktosidaz (SA-β-gal) aktivitesinde bir artış, temsili bir standart olarak kabul edilir. Artan SA-β-gal aktivitesi dışında, yaşlanan hücrelerin özellikleri arasında genişlemiş, düzleştirilmiş ve düzensiz hücre morfolojisi, p16 ^INK4A ekspresyonunun aktivasyonu, azaltılmış lamin B1 ekspresyonu, sitoplazmaya yer değiştiren yüksek mobilite grup kutusu 1 (HMGB1) ve hücre dışı salınır ve enflamatuar sitokinler ve metalloproteinazlar gibi yaşlanma ile ilişkili salgı fenotipi (SASP) faktörlerinin salgılanması [1 ].

Çeşitli yaşlanma modellerinde tekrarlanan pasajlarla kültürlenmiş hücrelerde replikatif yaşlanmayı indükleyerek kronik yaşlanma ortamındaki değişiklikleri doğruladık. Kronik yaşlanma, uzun vadeli beklenmedik hasarlardan kaynaklanabilir ve genellikle yaşlanma gibi zararlı süreçlerle ilişkilendirilir. Kronik yaşlanmada, yaşlanan hücreler organlarda birikir ve SASP salınımı yoluyla hücresel işlev bozukluğuna aracılık eder. Son raporlar, yaşlanan hücrelerin in vivo işlevinin, SASP'nin çevredeki çevre üzerindeki etkilerinden ve ilişkili bağışıklık tepkilerinden önemli ölçüde etkilendiğini göstermiştir [ 2]. Çevreleyen hücrelerin ikincil yaşlanmasını artıran ve indükleyen SASP faktörleri, yaşlanmaya ve doku dejenerasyonuna katkıda bulunur, onları otokrin ve parakrin bir şekilde etkiler. Yaşlanma ve yaşa bağlı hastalıkların tedavisi için SASP faktörlerinin düzenlenmesi veya SASP aracılı zararlı döngünün inhibisyonu önemli stratejilerdir [ 3 ].

SASP blokajı yoluyla tüm veya bazı yaşlanan hücre özelliklerini inhibe etmeyi amaçlayan küçük moleküller, senomorfikler olarak adlandırılır ve hücre ölümü olmaksızın SASP inhibitörleri olarak hareket ederek yaşlanma fenomenine dolaylı olarak müdahale eder [ 4 ]. Serbest radikal süpürücüler ve Janus kinaz (JAK), IκB kinaz (IKK) ve nükleer faktör (NF)-κB dahil olmak üzere çeşitli inhibitörler, birkaç sınıfın senomorfikleri olarak rapor edilmiştir. Ayrıca, rapamisinin memeli hedefini (mTOR) inhibe eden rapamisin, yaşlanmayı bastırmak için SASP'yi azaltarak bir senomorfik olarak hareket eder [ 5 ].

mTOR yolu, beslenme ve büyüme faktörlerine yanıt olarak metabolizmayı ve yaşlanmayı düzenler ve ayrıca yaşlanma fenotipinin kazanılmasında rol oynar [ 6 ]. SASP dahil olmak üzere yaşlanma ile ilişkili fenotipleri indüklemede mTOR'un rolü kapsamlı bir şekilde belirlenmiştir ve fibroz ve hücresel transformasyon gibi doku değişiklikleri SASP'nin aracılık ettiği inflamatuar ortam ile yakından ilişkilendirilmiştir. mTOR ayrıca otofajinin negatif düzenleyicisi olarak görev yapar ve rapamisin, mTOR'un inhibisyonu yoluyla otofajiyi indükler [ 7 ]. Yaşlanan fenotipleri modüle etmeyi amaçlayan terapötik yaklaşımlar, yaşlanan hücrelerin zararlı etkilerini in vitro olarak daha güvenli bir şekilde azaltabilir. Bu çalışmada Isatis tinctoria'nın rolünü değerlendirdik.Cilt yaşlanmasının tedavisinde senomorfik bir ajan olarak L. yaprak özütü (ITE).

Yaygın olarak woad olarak bilinen Isatis tinctoria L., Orta Asya'ya özgü iki yılda bir veya kısa ömürlü çok yıllık bir bitkidir. Anti-inflamatuar etkileri için takdir edilmiştir, geleneksel Çin tıbbında (TCM) tıbbi amaçlar için yaygın olarak kullanılmaktadır ve son on yılda Avrupa'da bir farmakope bitkisi olarak kabul edilmiştir [ 8 ]. İtalya'da Sicilya halkı, çiçek tomurcuklarını salata ve omletlerde bir bileşen olarak tüketirken, Çin'de kökleri ve yaprakları boğaz ağrısı ve hepatiti önlemek için bitki çayı olarak tüketilir. Kore'de genç yapraklar yiyecek olarak kullanılmıştır. Kore geleneksel tıp kitabı Donguibogam'a göre, I. tinctoria , yüksek ateş ve stomatit tedavisi için bitkisel bir ilaç olarak kaydedilmiştir. biyoaktiviteleriAnti-oksidan, anti-inflamatuar [ 10 ], anti-viral ve anti-tümör etkilerinde I. tinctoria yakın zamanda bildirilmiştir [ 9 ] ve klinik çalışma, sodyum lauril sülfat (SLS) nedeniyle dermatit üzerinde ITE'nin koruyucu etkisini göstermiştir. ) UVB ışınlamasının neden olduğu temas ve kızarıklık [ 11 ]. Bununla birlikte, Isatis tinctoria L.'nin cilt yaşlanması üzerindeki etkisi ve bu yolun yaşlanma düzenlemesindeki rolü henüz araştırılmamıştır. Bu nedenle, ITE'nin replikatif yaşlanan insan dermal fibroblastlarında (RS-HDF'ler) SASP salgılarını indükleyen, böylece otofajiyi güçlendiren ve güçlendiren mTOR/MAPK/NF-κB aktivasyonunun dinamik dalgalanmasını baskılayıp baskılamadığını araştırdık.

Git: 2. Malzemeler ve Yöntemler

2.1. Bitki Hazırlama ve Ekstraksiyon

Isatis tinctoria L.'nin kurutulmuş yaprakları yerel bir bitki dükkanından (Samhong geonjae yag-eobsa, Seul, Kore) satın alındı. Etanol özütünü hazırlamak için, 2,46 kg kurutulmuş yaprak 40 L %70 etanol ( a / a ) ile 80 °C'de 3 saat özümlendi ve yapraklar filtre kağıdı (Advantec, No. 131 kalitatif filtre) kullanılarak çıkarıldı. kağıt (3 μm)). Ekstre, alkollü kısmın çıkarılması için döner bir vakumlu buharlaştırıcı (EYELA, Tokyo, Japonya) yoluyla buharlaştırıldı ve liyofilize edildi. Koyu kahverengi toz (0.672 kg) elde edildi ve sonraki deneyler için DMSO içinde çözüldü. 2.2. Hücre kültürü

Dulbecco'nun değiştirilmiş Eagle ortamında (DMEM) %10 fetal sığır serumu (FBS; Welgene, Daegu, Kore) ve 100 IU/50 μg/mL penisilin/streptomisin içeren insan dermal fibroblastları (HDF'ler; PCS-201-010™) 37 °C'de % ₅ CO2 içeren nemlendirilmiş atmosfer . 8 ila 10. pasajlardan deneyler için genç HDF'ler kullanıldı. RS-HDF'ler, 40 geçişten sonra yaşlanma fenotipini elde etmek için hücrelerin doku kültüründe sürekli geçişi ile indüklendi. 2.3. Laktat Dehidrojenaz Testi

LDH tahlili, sitotoksisiteyi belirlemek için hasarlı hücrelerden salınan laktat dehidrojenazı (LDH) ölçmüştür. HDF'ler (2 x 104 ^hücre /24 oyuklu plaka), 72 saat boyunca ITE ile işlendi. İnkübasyondan sonra tahlil, bir LDH Sitotoksisite WST Tahlili kiti (Enzo Life Sciences, Farmingdale, NY, ABD) kullanılarak yapıldı. Toplam hücresel LDH ölçümü için lizis tamponu kullanıldı [ 12 ]. 2.4. SA-β-Gal Boyama Testi

HDF'ler (1 x 105 hücre/ ⁶ oyuklu plaka), 72 saat boyunca ITE ile işlendi. Akış sitometrisi için hücreler bir SPIDER-βGal (Dojindo, Kumamoto, Japonya) ile boyandı. SA-β-gal, hücresel yaşlanmanın bir göstergesi olarak kullanıldı. Hücreler, ilave edildikten ve akış sitometrisi ile analiz edildikten sonra, boyama solüsyonu ile 37 °C'de 15 dakika inkübe edildi. 2.5. Luminex Sitokin Testi

Tedaviden 72 saat sonra süpernatanlar toplandı ve insan interlökin (IL)-la, IL-6, IL-8 ve tümör nekroz faktörü (TNF)-a, Luminex kiti (R&D system Inc., Minneapolis, MN, ABD) üreticinin protokolüne göre. Plakalar MAGPIX® kullanılarak ^okundu . Protein konsantrasyonları, Luminex xPONENT® yazılımı (ver. 4.2; Luminex Corporation, Austin, TX, ABD) kullanılarak analiz edildi. 2.6. İmmünofloresan Boyama

24 saat boyunca ITE ile işleme tabi tutulan HDF'ler (2 x 104 ^hücre /24 oyuklu plaka). İnkübasyondan sonra hücreler, 15 dakika boyunca oda sıcaklığında %4 formaldehit ile sabitlendi, ardından fosfat tamponlu salin (PBS) içinde %0.3 Triton X-100 (Biosesang, Seongnam, Kore) içeren %5 bovin serum albümini (BSA) ile bloke edildi. ) 1 saat süreyle. PBS içinde %0.3 Triton X-100 içeren %5 BSA'lı anti-p65 antikorları (1:50 seyreltme; Invitrogen, Carlsbad, CA, ABD) her kuyuya ilave edildi, ardından gece boyunca 4 °C'de inkübasyon yapıldı. Hücreler iki kez PBS ile yıkandı ve nükleik asit Hoechst 33342 (1:10,000 seyreltme; Invitrogen, Carlsbad, CA, ABD) ile oda sıcaklığında 10 dakika boyunca boyandı. Daha sonra floresan, floresan mikroskobu (Life Technologies GmbH, Darmstadt, Almanya) ile analiz edildi. 2.7. Kantitatif Polimeraz Zincir Reaksiyonu (qRT-PCR)

HDF'lerin mRNA'sı, üreticinin protokolüne göre TRIzol™ (Invitrogen, CA, ABD) kullanılarak ekstre edildi. mRNA örneği (1 mg), amfiRivert cDNA Synthesis Platinum master Mix (GenDEPOT, Barker, TX, ABD) kullanılarak cDNA'ya ters kopyalandı. Göreceli gen ekspresyonu, 7500 Real-Time PCR sistemi (Applied Biosystems, Foster City, CA, ABD) ile analiz edildi. Her bir primer (Bioneer, Daejeon, Kore) ve AMPIGENE ^® qPCR Green Mix (Enzo Life Sciences, Farmingdale, NY, ABD) ile reaksiyon karışımı, 40 döngü RT-PCR'ye (15 s için 95 °C, 15 s için 60 °C) uygulandı. 60 s ve 10 dakika için 95 °C). GAPDH genine karşı nispi gen ekspresyonu , karşılaştırmalı veya ΔΔCt yöntemine göre değerlendirildi.tablo 1bu çalışmada kullanılan primer dizilerini listeler. tablo 1

Primer dizileri gerçek zamanlı PCR kullandı.

p16 ^INK4A	CTCGTGCTGATGCTACTGAGGA	GGTCGGCGCAGTTGGGCTCC
p21 ^CDKN1A	AGGTGGACCTGGAGACTCTCAG	TCCCTTGGAGAAGATCAGCCG
p53	CCTCAGCATCTTATCCGAGTGG	TGGATGGTGGTACAGTCAGAGC
GAPDH	CATCAAGAAGGTGGTGAAGCAGG	AGTGGTCGTTGAGGGCAATGC

Ayrı bir pencerede aç 2.8. Batı Lekeleri

Toplam proteinler bir Bio-rad elektroforez sistemi (Bio-rad, Hercules, CA, ABD) ile ayrıldı ve poliviniliden diflorür (PVDF) membranlarına aktarıldı. İmmünoblotlama, birincil antikorlar, anti-mTOR (Novus Biologicals, Littleton, CO, ABD), anti-histon H3 asimetrik di-metil R17 (Abcam, Cambridge, UK) ve anti-insan SIRT1 (LSBio, Seattle, WA) kullanılarak yapıldı. , AMERİKA BİRLEŞİK DEVLETLERİ). Fosfo-IκBa (Ser32), IκBa, fosfo-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204), fosfo-SAPK/JNK (Thr183/Tyr185), fosfo-mTOR (Ser2448) ve fosfo-S6 ribozomal protein (Ser235/236) antikorları ayrıca Cell Signaling Technology'den (Beverly, MA, ABD) elde edildi. MMP-1 ve GAPDH kullanılmış ve Santa Cruz Biotechnology, Inc.'den (Dallas, TX, ABD) satın alınmıştır. Birincil antikorlar, %0.1 Tween 20 (TBS/T) ile tris-tamponlu tuzlu suyun %5 BSA'sında 1:500-1000 oranında seyreltilerek kullanıldı. 2.9. Tandem Kütle Spektrometrisi ile Sıvı Kromatografisi (LC-MS/MS)

Profil analizi, bir Ultimate 3000 (Thermo Scientific, Waltham, MA, ABD) ve bir Triple TOF™ 5600'den (AB SCIEX, Framingham, MA, ABD) oluşan LC-MS/MS sistemi üzerinde gerçekleştirilmiştir. Kromatografik ayırma, 45 °C'de su (A) içinde %0.1 formik asit ve asetonitril (B) içinde %0.1 formik asitten oluşan bir mobil faza sahip bir Waters Cortex C18 kolonu (2.1 mm x 150 mm, 1.6 um) ile gerçekleştirildi. mobil faz gradyanı aşağıdaki gibidir: 0 ila 1 dakika, %5 B; 1 ila 30 dakika, %5 ila %30 B; 30 ila 50 dakika ve %30 ila %100 B. Akış hızı 0.3 mL/dakika idi. Kütle spektrometrisi, negatif ve pozitif iyon modlarında elektrosprey iyonizasyon (ESI) ile bilgiye bağlı edinim (IDA) taramasına dayalı olarak yapıldı. MS/MS sistemi için, 500 °C ve 50 psi'de parçalanmada nitrojen gazı kullanıldı ve pozitif modun durumu aşağıdaki gibiydi: iyon püskürtme voltajı, 5.5 kV; küme ayrıştırma potansiyeli (DP), 60 V; çarpışma enerjisi (CE), 10 eV ve negatif moddaki durum aşağıdaki gibidir: iyon püskürtme voltajı, 4.5 kV; DP, -60 V; CE, -10 eV. Kütle tarama aralığı 100 ila 2000 m/z arasındaydı. 2.10. İstatistiksel analiz

Tüm değerler ortalama ± SD (standart sapma) olarak ifade edilir. Tüm deneyler üç kopya halinde yapıldı ve tüm verilerin istatistiksel önemi, Statview yazılımı (ver. 5.0; Abacus Concepts, Berkeley, CA, ABD) kullanılarak Student t-testi ile değerlendirildi. <0.05'lik bir p -değeri istatistiksel anlamlılığı gösterdi.

Git: 3. Sonuçlar

3.1. ITE, Replikatif Yaşlanmayı ve Oksidatif Stresi Engeller

Hücresel yaşlanma, replikatif yaşlanma, onkogen kaynaklı yaşlanma ve stres kaynaklı yaşlanma gibi birçok yolla gerçekleşir. Bunlar arasında replikatif yaşlanan insan fibroblastı, insan yaşlanması için yaygın olarak kullanılan bir hücresel modeldir. Telomer erozyonunun replikatif yaşlanmanın gelişimine katkıda bulunduğu bildirildi [ 13 ]. Replikatif yaşlanmayı indüklemek için, HDF hücrelerinin 40'tan fazla geçiş boyunca büyümesine izin verildi. Hücre proliferasyonu hızla azaldı ve yaşlanma göstergeleri arttı. ITE'nin RS-HDF'ler üzerindeki yaşlanma karşıtı rolünü araştırmak için, sitotoksik olmayan bir konsantrasyonda SA-β-gal boyaması yapıldı (Şekil 1A). Da gösterildiği gibiŞekil 1B'de, SA-β-gal-pozitif RS-HDF'lerin sayısı genç HDF'lere (%25.7) kıyasla önemli ölçüde arttı (%59.3). Ancak ITE, boyanmış SA-β-gal pozitif hücreleri 200 μg/mL'de %40.7 oranında azalttı. Epigallocatechin gallate (EGCG) bir pozitif kontrol yaşlanma karşıtı ajandır ve ayrıca SA-β-gal-pozitif hücreleri %34.3 oranında azaltmıştır. Reaktif oksijen türleri (ROS), replikatif yaşlanmanın ana indükleyicisidir ve replikatif yaşlanan hücrelerde artar [ 14 , 15 ]. RS-HDF'lerde artan oksidatif stresin ITE tedavisi ile baskılandığını gözlemledik (Şekil 1C). p53/p21 ^WAF1 ve p16 ^INK4A dahil tümör baskılayıcıların aktivasyonu, yaşlanmanın bir özelliği olarak kabul edilir [ 16 ]. SA-β-gal ve ROS sonuçlarıyla uyumlu olarak, p53 , p21 ^CDKN1A ve p16 ^INK4A'nın mRNA ekspresyonu, ITE ile tedavi edilen RS-HDF'lerde doza bağlı olarak azaldı (sırasıyla 0,30, 0,58 ve 0,45 kat azalma, bir 200 μg/mL konsantrasyon) (şekil 2). Bu veriler, ITE'nin, ROS'un aracılık ettiği yaşlanmada azalmaları ve RS-HDF'lerde p53-p21 ^CIP1 yolunun yanı sıra p16 ^{INK4A'nın aktivasyonunu indüklediğini göstermektedir.}

Bir resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı besinlerdir-14-01979-g001.jpg

Şekil 1
ITE'nin RS-HDF'lerde SA-β-gal aktivitesi ve oksidatif stres üzerindeki inhibitör etkisi. ( A ) HDF'lerde ITE'nin sitotoksisitesi, LDH deneyleri ile belirlendi. Pozitif kontrol olarak lizis tamponu kullanıldı. ( B ) Temsili akış sitometrisi grafikleri gösterilir. Grafiklerin içindeki değerler, akış sitometrisi tarafından tespit edilen pozitif boyanmış hücrelerin (SA-β-gal FITC-pozitif) yüzdesini nicelleştirdi. ( C ) ROS tarafından indüklenen HDF floresansının görüntüleri, yeşil floresan yayan DCF floresan olarak gösterilir. Temsili immünofloresan görüntüleri ve floresan yoğunluğu analizi. Veriler, üç bağımsız deneyin ortalamasının (SEM) ortalama ± standart hatası olarak sunulur. ## p < 0.01 veya § p < 0.01 genç HDF kontrollerine kıyasla, **RS-HDF kontrollerine kıyasla p < 0.01. YC, genç hücre kontrolleri.

Bir resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı besinlerdir-14-01979-g002.jpg

şekil 2
ITE'nin RS-HDF'lerde tümör baskılayıcılar üzerindeki inhibitör etkisi. p53 ( A ), p21 ^CDKN1A ( B ), p16 ^INK4A ( C ) mRNA ifadesi için qRT–PCR . Veriler, üç bağımsız tahlilin ortalama ± SEM'si olarak sunulur. * p < 0.05; ** RS-HDF kontrolüne kıyasla p < 0.01. 3.2. ITE, Yaşlanmış Fibroblastlarda Yaşlanma İlişkili Salgı Fenotipi (SASP) Faktör Üretimini Engelleyerek Senomorfik Bir Etki Gösteriyor

Bilindiği gibi, yaşlanan hücrelerde inflamatuar sitokinler ve metalloproteinazlar (MMP'ler) gibi SASP ekspresyon ve salgılarının arttığı bilinmektedir. Bu bulgu, gösterildiği gibi Luminex tarafından doğrulandı.Figür 3RS-HDF SASP salgıları, TNF-α, IL-1α, IL-6 ve IL-8'deki artışın ITE tedavisini takiben daha düşük olduğu A–D. IL-6 ve IL-8, genç HDF'lere kıyasla RS-HDF'lerde sırasıyla 40 kat ve 600 kat önemli ölçüde arttı. 200 μg/mL ITE ile tedaviden sonra, kontrol RS-HDF'lere kıyasla %70'den fazla azaldılar. Benzer şekilde, bir SASP belirteci olan matriks metalloproteinaz (MMP)-1 ekspresyonu Western blot ile analiz edildiğinde, hücresel yaşlanmaya bağlı olarak artan ekspresyon seviyesi ITE tedavisi ile azalmıştır (Figür 3E, F). Bu sonuçlar, ITE'nin replikatif yaşlanmayı bastırdığını ve RS-HDF'lerde SASP salgılarını azaltma etkisiyle senomorfik olarak kabul edilebileceğini göstermektedir.

Bir resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı besinlerdir-14-01979-g003.jpg

Figür 3
ITE'nin RS-HDF'lerde SASP ifadesi üzerindeki inhibitör etkisi. Kültür süpernatantında TNF-a ( A ), IL-6 ( B ), IL-la ( C ) ve IL-8 ( D ) salgılanması, bir Luminex kiti kullanılarak ölçüldü. MMP-1'in ekspresyon seviyesi Western blot'larla belirlendi. ( E ) MMP-1/GAPDH'nin dansitometrik oran grafiği ( F ). Veriler, üç bağımsız tahlilin ortalama ± SEM'si olarak sunulur. § p < 0.01 genç HDF kontrollerine kıyasla, * p < 0.05; ** RS-HDF kontrollerine kıyasla p < 0.01. 3.3. ITE, RS-HDF'lerde MAPK (JNK ve ERK), IκB ve NF-KB'nin Aktivasyonunu Bastırır

Önceki çalışmalar ayrıca MAPK'nın aktive olduğunu ve yaşlanmış hücrelerde NF-κB sinyali yoluyla SASP'yi etkilediğini bildirmiştir [ 5 ]. İnflamatuar uyaranlara yanıt olarak, IkBa fosforile edilir ve NF-kB'den salınır. NF-κB daha sonra çekirdeğe yer değiştirir ve inflamatuar sitokinler gibi inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonunu yukarı regüle eder [ 17 ]. MAPK'daki değişikliği Western blot analizi ile doğruladığımızda, RS-HDF'lerde JNK ve ERK'nin aktivasyonu, EGCG ve ITE tedavisi ile önemli ölçüde azaldı ve IκB'nin fosforilasyonu da azaldı (Şekil 4A). ITE tarafından önemli ölçüde azaltılan IL-6 ve -8'in NF-κB tarafından düzenlendiği bilinmektedir [ 18 ]. Bu nedenle, IL-6 ve IL-8 gibi SASP'yi düzenleyen MAPK-NF-KB sinyallerini belirlemek için ITE tedavisi ile NF-KB'deki doğrudan değişiklikler araştırıldı. RS-HDF'lerde NF-κB translokasyonu immünofloresan (IF) boyama ile karşılaştırıldığında, NF-κB'nin RS-HDF'lerde çekirdeğe translokasyonu, genç HDF'lere kıyasla EGCG ve ITE tedavisi ile azaldı (Şekil 4B). Bu sonuçlar, ITE'nin replikatif yaşlanmada NF-κB yoluyla inflamatuar yanıtı iptal ettiğini gösterdi.

Bir resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı besinlerdir-14-01979-g004.jpg

Şekil 4
ITE'nin RS-HDF'lerde IκBa, JNK ve ERK ve NF-kB'nin çekirdeğe translokasyonunun ekspresyonu üzerindeki inhibitör etkisi. ( A ) Protein ekspresyon seviyelerini belirlemek için Western blot kullanıldı. Şekillerin her biri 3 bağımsız deneyi temsil etmektedir. GAPDH, eşit protein yüklemesini doğrulamak için bir kontrol olarak kullanıldı. ( B ) Temsili immünofloresan görüntü ve nükleer floresan yoğunluk analizi. Hücreler, p65 (yeşil) ve 4',6-diamidino-2-fenilindol (DAPI; mavi) antikorları ile boyandı ve x200'de yakalandı. Veriler, üç bağımsız tahlilin ortalama ± SEM'si olarak sunulur. § genç HDF kontrolleriyle karşılaştırıldığında p < 0.01, ** RS -HDF kontrolleriyle karşılaştırıldığında p < 0.01. YC, genç hücre kontrolleri. 3.4. ITE, RS-HDF'lerde SIRT1-mTOR-MAPK-NF-κB Sinyalini Modüle ederek SASP Salgılarını ve Hücresel Yaşlanmayı Bastırıyor

Yaşlanma sırasında aktive olan mTOR sinyali ile MAPK yolu arasındaki etkileşim, fosforilasyon kaskadı üyelerinin senomorfik hedefler olarak düşünülmesine yol açmıştır [ 5 ]. MAPK'yı etkileyen mTOR ölçümü, MAPK ile tutarlı RS-HDF'lerde artan ekspresyon seviyesinin ITE tedavisi ile doza bağlı bir şekilde azaldığını doğruladı. EGCG tedavisi de benzer bir sonuç gösterdi. mTORC1, p70 ribozomal S6 kinaz1 (p70S6K1) ve S6 ribozomal protein gibi akış aşağı hedef proteinleri fosforile ederek RNA translasyonunu uyarır [ 19 ]. Aşağı akış substrat proteini S6'nın fosforilasyon durumu, mTOR sinyalleme yanıtına göre azaldı. SIRT1'in ayrıca mTOR yolu yoluyla işlev gördüğü bildirilmiştir [ 20 ]] ve SIRT1 ekspresyonu, normal büyüme koşullarına kıyasla yaşlanma koşulları altında azaldı [ 21 ]. SIRT1 ekspresyonu, genç HDF'lere kıyasla yaşlanmış HDF'lerde azaldı, ancak ITE tedavisi SIRT1 ekspresyonunu önemli ölçüde destekledi (Şekil 5A). Bu sonuçlar, ITE'nin SASP salgılarını azaltabilen bir SIRT1/mTOR/MAPK/NF-kB sinyalleme modülatörü olarak kabul edilebileceğini göstermektedir.

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı besinlerdir-14-01979-g005.jpg

Şekil 5
ITE'nin RS-HDF'lerde SIRT1 ve mTOR ifadesi üzerindeki düzenleyici etkisi. ( A ) Protein ekspresyon seviyelerini belirlemek için Western blot kullanıldı. Şekillerin her biri 3 bağımsız deneyi temsil etmektedir. GAPDH, eşit protein yüklemesini doğrulamak için bir kontrol olarak kullanıldı. ( B ) ITE ve 2 mM 3MA ile eşzamanlı tedavinin RS-HDF'lerde SA-p-gal aktivitesi üzerindeki etkisi. Veriler, üç bağımsız tahlilin ortalama ± SEM'si olarak sunulur. § genç HDF kontrollerine kıyasla p < 0.01, * RS-HDF kontrollerine kıyasla p < 0.05. YC, genç hücre kontrolleri.

ITE'nin yaşlanma karşıtı etkisinin mTOR inhibisyonundan kaynaklandığını doğrulamak için RS-HDF'ler, bir otofaji inhibitörü olan 2 mM 3-metiladenin (3MA) ile ITE veya rapamisin ile tedavi edildi ve değişiklikler gözlemlendi. Da gösterildiği gibiŞekil 5B, SA-β-gal aktivitesi, 200 μg/mL ITE ile tedavi edilen hücrelerde %55'e kadar, rapamisin tedavisiyle, bir mTOR inhibitörü ile %26 ve EGCG tedavisi ile %58'e kadar azaldı. Bununla birlikte, yaşlanma karşıtı etkinlik, 3MA ortak tedavisi ile zayıfladı, bu sayede SA-β-gal inhibisyonu 200 μg/mL ITE ile tedavi edilen hücrelerde %55'ten %22'ye düştü. Ayrıca, RS-HDF'ler rapamisin ve 3MA ile birlikte tedavi edildiğinde hücresel yaşlanma önleyici etki ortadan kaldırıldı, ancak bu, EGCG'nin etkinliğinde önemli bir değişiklik olmaksızın sürdürüldü. Bu sonuçlar, ITE'nin yaşlanma karşıtı etkilerinin mTOR inhibisyonu ve otofajiden kaynaklandığını göstermektedir.

Git: 4. Tartışma

Yaşlanma, moleküllerde, hücresel fonksiyonlarda ve organlarda kümülatif hasara neden olarak biyolojik, fiziksel ve biyokimyasal süreçleri bozan karmaşık biyolojik etkileşimlerin sonucudur.

Yaşlanmış hücrelerin birikmesi, doku onarımı ve rejenerasyonu için gerekli kök ve progenitör hücre bölmelerini tüketebilir. Ek olarak, cilt yaşlanması, dermal fibroblastların hücresel yaşlanması ile yakından ilişkilidir. Fibroblastlar, hücresel yaşlanma ilerledikçe spesifik inflamatuar sitokinler ve yaşlanma faktörleri gibi SASP faktörlerini serbest bırakır [ 21 ]. Yaşlanmış hücreler, doğrudan hücre-hücre teması, hücre füzyonu, sitoplazmik köprü oluşumu, hücre dışı vezikül (EV) sinyali ve SASP yoluyla iletişim kurarak mikro ortamlarını değiştirir ve yaşlanan hücrelerin otonom olmayan etkilerinin çoğu SASP ile ilgilidir. Bu nedenle, senomorfikler, hücresel yaşlanma kontrolü açısından önemli olan, yaşlanan hücrelerin zararlı etkilerinin birincil aracısı olan SASP'nin modüle edilmesinde rol oynar.22 ]. Senolitikler, SASP inhibitörleri (veya senomorfikler) gibi yaşlanmayı bastırmak için çeşitli yöntemler ve bağışıklık sistemi fonksiyonunu [ 23 ] ve otofajiyi iyileştirdiği bildirilmiştir [ 24 ]. Bunlar arasında, mTOR ve NF-κB'nin düzenlenmesi dahil olmak üzere SASP'yi otofaji yoluyla zayıflatmak için yaşlanma ile ilgili sinyal ağlarını (senomorfikler) modüle etmenin bir yöntemi olan ITE tedavisi ile SASP salgılarını azaltarak yaşlanmanın inhibisyonu ile ilgilendik [ 6 ].

Fizyolojik etkileri arasında, Isatis tinctoria L.'nin, TNF-α ve IL-1β sitokinlerini inhibe etme dahil anti-inflamatuar etkilere sahip olduğu bilinmektedir [ 25 ]. LC-MS/MS sistemi üzerinde yapılan profil analizinde 4-hidroksibenzoik asit, antranilik asit, kinurenik asit ve linarin gibi bileşikler tespit edildi (Şekil 6). 4-Hidroksibenzoik asit ve linarin'in TNF-a ve IL-6 dahil SASP salgılarını engellediği [ 26 , 27 ] ve antranilik asit ve kinurenik asidin antioksidan etkileri olduğu bildirilmiştir [ 28 , 29 ]. Bununla birlikte, Isatis tinctoria L.'nin anti-inflamatuar etkisinin mekanizması , özellikle replikatif yaşlanma modelinde açıklanmamıştır. Bu çalışmada, ITE'nin yaşlanmanın ana belirteci olan SA-β-gal'i, strese hücresel tepkileri ( p53 , p21 ^CDKN1A ve p16 ^INK4a ) ve SASP salgılarını azalttığını gösterdik (Şekil 1,şekil 2veFigür 3). SASP'yi mTOR inhibe edici sinyaller yoluyla düzenleyerek hücresel ortamı etkileyen senomorfikler de tanımlanmıştır [ 6 , 30 ]. Bu çalışmadaki Western blot analizi, genç hücrelere kıyasla RS-HDF'lerde mTOR ekspresyonunun arttığını gösterdi, ancak ITE tedavisi mTOR ekspresyonunu ve dolayısıyla S6 ribozomal protein gibi aşağı akış sinyallerinin fosforilasyonunu azalttı (Şekil 5A). Ek olarak, MAPK (JNK ve ERK) ve IκB fosforilasyonu, RS-HDF'lerde önemli ölçüde artmış, bu da aktive formda bir artışa işaret etmektedir. Bununla birlikte, fosfo-MAPK ve fosfo-IκB, kontrol RS-HDF'lere kıyasla ITE tedavisi ile önemli ölçüde azaldı (Şekil 4A). Ayrıca, ITE, NF-κB düzenlemesi yoluyla senomorfik etkinlik gösterdi. NF-kB, hücresel yaşlanma sırasında çekirdeğe yer değiştirir ve ITE tedavisi ile azalır. Bu sonuçlar, EGCG ve ITE'nin, NF-κB yolu yoluyla RS-HDF'lerde inflamatuar yanıtı düzenlediğini gösterdi (Şekil 4B). Ayrıca, rapamisin gibi ITE'nin yaşlanma karşıtı etkisinin otofajiye bağlı olması bekleniyordu çünkü bu etkiler bir fosfatidilinositol 3-kinaz (PI3K) inhibitörü olan 3MA tedavisi ile ortadan kalktı. PI3K, otofajinin önemli bir düzenleyicisi olan mTOR'un aktivasyonunun kontrol edilmesi de dahil olmak üzere birçok sinyal yolunda önemli bir rol oynar (Şekil 5B) [ 31 ]. Önceki çalışmalar, SIRT1'in mTOR'u negatif olarak kontrol ettiğini [ 32 ] ve SIRT1'in spesifik aktivatörünün HDF yaşlanması üzerindeki koruyucu etkisinin otofaji/inflamatuar sitokin/hücresel yaşlanma yolu [ 21 ] tarafından düzenlendiğini öne sürmüştü. RS-HDF'lerde bozulmuş hücresel metabolizma nedeniyle SIRT1 ekspresyonunun genç HDF'lere kıyasla azaldığını ve ITE tedavisi ile arttığını gösteren Western blot analizi yaptık (Şekil 5A). Kanıtlanmış doğal SIRT1 aktivatörlerinin mTOR yolunu modüle edebildiği ve onunla etkileşime girebildiği bildirilmiştir [ 14 ].

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı besinlerdir-14-01979-g006.jpg

Şekil 6
ITE'nin toplam iyon kromatogramının (TIC) baz tepe kromatogramı (BPC).

Git: 5. Sonuçlar

Toplamda, bu sonuçlar, SIRT1/mTOR/MAPK/NF-κB sinyal yolu yoluyla senoterapötik ajan ITE için potansiyeli gösterdi. Da gösterildiği gibiŞekil 7ITE, SIRT1 ekspresyonunun yukarı regülasyonu yoluyla mTOR fosforilasyonunu azaltarak otofajiyi indükledi ve MAPK fosforilasyonunu ve NF-κB'nin nükleer translokasyonunu bloke etti. Bu sayede ITE, SA-β-gal aktivitesi ve SASP salgıları dahil yaşlanma ile ilgili göstergeleri modüle etti, bu da replikatif yaşlanma modelinde hücresel fonksiyonun geri kazanılmasıyla sonuçlandı. Bu nedenle ITE, hücresel yaşlanmayı iyileştirerek cildi yenileyen bir madde olarak önerilebilir.

Bir resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı besinlerdir-14-01979-g007.jpg

Şekil 7
ITE'nin RS-HDF'lerde SIRT1/mTOR/MAPK/NF-κB sinyal yolu yoluyla senomorfik etkilerdeki rolü.

Git: Finansman Beyanı

Bu araştırma hiçbir dış finansman almamıştır.

Git: Yazar Katkıları

Kavramsallaştırma, JW, SS, EJ ve JK; metodoloji, JW ve SS; yazılım, JW, HJ ve SS; doğrulama, JW ve SS; biçimsel analiz, JW, HJ ve SS; soruşturma, JW ve DR; kaynaklar, AT ve DP; veri iyileştirme, JW ve SS; yazma—orijinal taslak hazırlama, JW; yazma—inceleme ve düzenleme, SS, EJ ve YK; görselleştirme, JW ve SS; süpervizyon, SS ve EJ; proje yönetimi, EJ ve DP; fon alımı, DP Tüm yazarlar, makalenin yayınlanan versiyonunu okudu ve kabul etti.

Git: Kurumsal İnceleme Kurulu Açıklaması

Uygulanamaz.

Git: Bilgilendirilmiş Onam Beyanı

Uygulanamaz.

Git: Veri Kullanılabilirlik Bildirimi

Veriler istek üzerine sağlanacaktır.

Git: Çıkar çatışmaları

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Git: Dipnotlar

Yayıncının Notu: MDPI, yayınlanmış haritalarda ve kurumsal bağlantılarda yargı yetkisi iddiaları konusunda tarafsız kalır.

Git: Referanslar

1. Wang AS, Dreesen O. Hücresel Yaşlanma ve Cilt Yaşlanmasının Biyobelirteçleri. Ön. Genet. 2018; 9 :247. doi: 10.3389/fgene.2018.00247. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
2. Herranz N., Gil J. Hücresel Yaşlanmanın Mekanizmaları ve İşlevleri. J. Clin. Araştırın. 2018; 128 :1238–1246. doi: 10.1172/JCI95148. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
3. Han X., Zhang T., Zhang X., Zhang R., Lao K., Mi Y., Gou X. AMPK, NF-ΚB/STAT3 Eksen Aracılı Pozitif Geri Beslemenin İnhibisyonu Yoluyla Oksidatif Strese Bağlı Erken Yaşlanmayı Hafifletir Döngü. Makine Yaşlanma Dev. 2020; 191 :111347. doi: 10.1016/j.mad.2020.111347. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
4. Lagoumtzi SM, Chondrogianni N. Senolitikler ve Senomorfikler: Yaşlanma ve Kronik Hastalıkların Tedavisinde Doğal ve Sentetik Terapötikler. Ücretsiz Radic. Biol. Med. 2021; 171 :169–190. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2021.05.003. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
5. Lim JS, Lee DY, Kim HS, Park SC, Park JT, Kim HS, Oh WK, Cho KA Senesans ile İlişkili Salgı Fenotipinin Bastırılması Yoluyla Yeni Bir Senomorfik Ajan, Avenanthramide C'nin Tanımlanması. Makine Yaşlanma Dev. 2020; 192 :111355. doi: 10.1016/j.mad.2020.111355. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
6. Lee KS, Lin S., Copland DA, Dick AD, Liu J. Yaşlanma Retinasında Hücresel Yaşlanma ve Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonu için Senoterapilerin Gelişmeleri. J. Nöroinflamasyon. 2021; 18:32 . doi: 10.1186/s12974-021-02088-0. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
7. Kucheryavenko O., Nelson G., von Zglinicki T., Korolchuk VI, Carroll B. MTORC1-Autophagy Pathway, Yaşlanmış Hücre Eliminasyonu için bir Hedeftir. Biyogerontoloji. 2019; 20 :331–335. doi: 10.1007/s10522-019-09802-9. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
8. Avrupa İlaç Kalitesi Müdürlüğü . Avrupa Farmakopesi. 7. baskı. ek 7.3. Avrupa İlaç Kalitesi Müdürlüğü; Strasburg, Almanya: 2011. Isatis kökü ( Isatidis radix ) s. 3866–3867. [ Google Akademik ]
9. Speranza J., Miceli N., Taviano MF, Ragusa S., Kwiecień I., Szopa A., Ekiert H. Isatis tinctoria L. (Woad): A Review of Its Botany, Etnobotanical Uses, Phytochemistry, Biological Activity, ve Biyoteknolojik Çalışmalar. Bitkiler. 2020; 9 :298. doi: 10.3390/bitkiler9030298. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
10. Kim JH, Gao D., Jeong WS, Kim CT, Cho CW, Kim HM, Kang JS Isatis indigotica Yaprağı Ekstresinin Kırışıklık Karşıtı Etkisi : Antioksidan, Anti-Inflamasyon ve Klinik Aktivitenin Değerlendirilmesi. Antioksidanlar. 2021; 10 :1339. doi: 10.3390/antiox10091339. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
11. Heinemann C., Schliemann-Willers S., Oberthür C., Hamburger M., Elsner P. Isatis tinctoria ekstraktları ile deneysel olarak indüklenen tahriş edici kontakt dermatitin saf triptantrin ve UVB ile indüklenen eritem üzerindeki etkisi ile karşılaştırıldığında önlenmesi. Bitki Med. 2004; 70 :385–390. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
12. Kumar P., Nagarajan A., Uchil PD Laktat Dehidrojenaz Testi ile Hücre Canlılığının Analizi. Soğuk Bahar Harb. Protokol 2018; 2018

db-prot095497. doi: 10.1101/pdb.prot095497. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
13. Hütter E., Unterluggauer H., Überall F., Schramek H., Jansen-Dürr P. İnsan Fibroblastlarının Replikatif Yaşlanma: Ras-Bağımlı Sinyalleşme ve Oksidatif Stresin Rolü. Tecrübe. Gerontol. 2002; 37 :1165-1174. doi: 10.1016/S0531-5565(02)00136-5. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
14. Giovannini L., Bianchi S. AMPK ve MTOR Yolunda Nutrasötik SIRT1 Modülatörlerinin Rolü: Bir Sinerjistik Etkinin Kanıtı. Beslenme. 2017; 34 :82-96. doi: 10.1016/j.nut.2016.09.008. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
15. Young MC, Seung BL, Hyung JK, Seon HP, Jung JK, Jin SC, Romo1-Türevli Reaktif Oksijen Türleri Tarafından İndüklenen Young DY Replikatif Senesans. J. Biol. Kimya 2008; 283 :33763-33771. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
16. Schosserer M., Grillari J., Breitenbach M. Hücresel Yaşlanmanın Tümör Geliştirmedeki İkili Rolü ve Kanser Tedavisine Yanıtları. Ön. Onkol. 2017; 7 :278. doi: 10.3389/fonc.2017.00278. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
17. Gasparrini M., Giampieri F., Forbes-Hernandez TY, Afrin S., Cianciosi D., Reboredo-Rodriguez P., Varela-Lopez A., Zhang JJ, Quiles JL, Mezzetti B., et al. Çilek Özleri, İnsan Dermal Fibroblastında Endotoksin Lipopolisakkarit Tarafından İndüklenen İnflamatuar Strese Etkili Bir Şekilde Karşı koyar. Gıda Kimyası Toksikol. 2018; 114 :128–140. doi: 10.1016/j.fct.2018.02.038. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
18. Zhu Y., Tchkonia T., Fuhrmann-Stroissnigg H., Dai HM, Ling YY, Stout MB, Pirtskhalava T., Giorgadze N., Johnson KO, Giles CB, et al. Anti-Apoptotik Faktörlerin Bcl-2 Ailesini Hedefleyen Yeni Bir Senolitik Ajan Navitoclax'ın Belirlenmesi. Yaşlanma Hücresi. 2016; 15 :428–435. doi: 10.1111/acel.12445. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
19. Bahrami BF, Ataie-Kachoie P., Pourgholami MH, Morris DL P70 Ribozomal Protein S6 Kinaz (Rps6kb1): Bir Güncelleme. J. Clin. Patol. 2014; 67 :1019–1025. doi: 10.1136/jclinpath-2014-202560. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
20. Liu Z., Gan L., Liu G., Chen Y., Wu T., Feng F., Sun C. Sirt1 Farelerde Akt2 ile Etkileşime Girerek ve MTOR/S6K1 Yolunu Engelleyerek Yağ Enflamasyonunu Azalttı. J. Lipid Res. 2016; 57 :1373-1381. doi: 10.1194/jlr.M063537. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
21. Sung JY, Kim SG, Kim JR, Choi HC SIRT1, NF-ΚB Deasetilasyonunu Teşvik Ederek ve Otofajiyi Aktive Ederek İnsan Dermal Fibroblastlarında Hücresel Yaşlanmayı ve İnflamatuar Sitokin Salınımını Bastırır. Tecrübe. Gerontol. 2021; 150 :111394. doi: 10.1016/j.exger.2021.111394. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
22. Birch J., Gil J. Senescence ve SASP: Birçok Terapötik Yol. Genler Dev. 2020; 34 :1565–1576. doi: 10.1101/gad.343129.120. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
23. von Kobbe C. Yaşlanmış Hücreleri Hedefleme: Yaklaşımlar, Fırsatlar, Zorluklar. yaşlanma 2019; 1 :12844–12861. doi: 10.18632/yaşlanma.102557. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
24. Barbosa MC, Grosso RA, Fader CM Yaşlanmanın İşaretleri: Otofajik Bir Perspektif. Ön. endokrinol. 2019; 9 :790. doi: 10.3389/fendo.2018.00790. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
25. Recio MC, Cerdá-Nicolás M., Hamburger M., Ríos JL Lipofilik Bir Woad ( Isatis tinctoria ) Ekstraktının Anti-Artritik Aktivitesi. Bitki Med. 2006; 72 :715–720. doi: 10.1055/s-2006-941507. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
26. Xu X., Luo A., Lu X., Liu M., Wang H., Song H., Wei C., Wang Y., Duan X. P-Hidroksibenzoik Asit, DSS'de İnflamatuar Tepkileri ve Bağırsak Mukozal Hasarını Hafifletir -ERβ Sinyalini Aktive Ederek Kolitin İndüklenmesi. J. Fonksiyon. yiyecekler. 2021; 87 :104835. doi: 10.1016/j.jff.2021.104835. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
27. Han X., Wu YC, Meng M., Sun QS, Gao SM, Sun H. Linarin, TXNIP/NLRP3 ve NF-ΚB Yollarının İnhibisyonu Yoluyla Oksidatif Stresi ve Enflamasyonu Bastırarak LPS'ye Bağlı Akut Akciğer Hasarını Önler. Int. J. Mol. Med. 2018; 42 :1460-1472. doi: 10.3892/ijmm.2018.3710. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
28. Francisco-Marquez M., Aguilar-Fernández M., Galano A. İkincil Antioksidan Olarak Antranilik Asit: ·OH Üretiminin İnhibisyonuna Etkileri ve İlişkili Oksidatif Stres. Bilgisayar. Teori. Kimya 2016; 1077 :18–24. doi: 10.1016/j.comptc.2015.09.025. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
29. Lugo-Huitrón R., Blanco-Ayala T., Ugalde-Muñiz P., Carrillo-Mora P., Pedraza-Chaverrí J., Silva-Adaya D., Maldonado PD, Torres I., Pinzón E., Ortiz -Islas E., et al. Kinurenik Asitin Antioksidan Özellikleri Üzerine: Serbest Radikal Temizleme Aktivitesi ve Oksidatif Stresin İnhibisyonu. Nörotoksikol. Teratol. 2011; 33 :538-547. doi: 10.1016/j.ntt.2011.07.002. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
30. Yaşlanma Karşıtı Terapötikler olarak Lamming DW, Ye L., Sabatini DM, Baur JA Rapalogs ve MTOR İnhibitörleri. J. Clin. Araştırın. 2013; 123 :980-989. doi: 10.1172/JCI64099. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
31. Wu YT, Tan HL, Shui G., Bauvy C., Huang Q., Wenk MR, Ong CN, Codogno P., Shen HM Sınıfta Farklı Zamansal İnhibisyon Modelleri ile Otofaji Modülasyonunda 3-Metiladeninin İkili Rolü I ve III Fosfoinositid 3-Kinaz. J. Biol. Kimya 2010; 285 :10850–10861. doi: 10.1074/jbc.M109.080796. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
32. Wang Y., Bi Y., Chen X., Li C., Li Y., Zhang Z., Wang J., Lu Y., Yu Q., Su H., et al. Histon Deasetilaz SIRT1, İnterlökin-9 Üreten CD4+ T Hücrelerinin Farklılaşmasını Negatif Olarak Düzenler. bağışıklık. 2016; 44 :1337-1349. doi: 10.1016/j.immuni.2016.05.009. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]

***maturidi*** · 02 October 2022, 16:18

H2O2 ile İndüklenen SH-SY5Y Hücre Hasarına Karşı Nöroprotektif Etkileri Olan Isatis tinctoria'dan Alkaloid Enantiyomerleri

Yu Fei Xi¹, Li Li Lou¹, Zhi Yong Xu¹, Zi Lin Hou¹, Xiao-Bo Wang², Xiao-Xiao Huang^{1 2}, Shao-Jiang Şarkısı¹
Bağlantılar yıkılmak Bağlantılar

¹Geleneksel Çin Materia Medica Okulu, Yapıya Dayalı İlaç Tasarımı ve Keşfinin Ana Laboratuvarı, Eğitim Bakanlığı, Shenyang Eczacılık Üniversitesi, Shenyang, Çin Halk Cumhuriyeti.
²Çin Halk Kurtuluş Ordusu Lojistik Destek Gücü 967 Nolu Hastane, Dalian, Çin Halk Cumhuriyeti.

PMID: 31801158
DOI: 10.1055/a-1023-8940

Soyut

Isatis tinctoria'nın yapraklarından 11 yeni alkaloid (1A: /1B: -5A: /5B, 6A: ) içeren altı çift alkaloid enantiyomer izole edildi . Yapıları kapsamlı spektroskopik analizlerle belirlendi. Enantiyomerler, kiral kromatografik kolon ile başarılı bir şekilde ayrıldı ve tüm izolatların mutlak konfigürasyonları, deneysel ve hesaplanmış elektronik dairesel dikroizm spektrumlarının karşılaştırılmasıyla belirlendi. İzole edilen alkaloidler, insan nöroblastom SH- SY5Y hücrelerinde H202 _ile indüklenen hücre hasarına karşı nöroprotektif aktiviteleri açısından değerlendirildi _.Sonuçlar, 5A/5B: ve 6A/6B:'nin H202 ile karşılaştırıldığında 50 uM'de güçlü nöroprotektif aktiviteler _{sergilediğini}_gösterdi .- tedavi edilen grup.

Georg Thieme Verlag KG Stuttgart · New York.

***maturidi*** · 02 October 2022, 16:20

Isatis tinctoria L. (Woad): Botaniği, Etnobotanik Kullanımları, Fitokimyası, Biyolojik Aktiviteleri ve Biyoteknolojik Çalışmaları Üzerine Bir İnceleme

Yasemin Speranza^{1 2}, Natalizia Miceli², Maria Fernanda Taviano², Salvatore Ragusa³, Inga Kwiecien⁴, Agnieszka Szopa⁴, Halina Ekiert⁴
Bağlantılar yıkılmak Bağlantılar

¹Vakıf "Prof. Antonio Imbesi", Messina Üniversitesi, Piazza Pugliatti 1, 98122 Messina, İtalya.
²Kimya, Biyoloji, Farmasötik ve Çevre Bilimleri Bölümü, Messina Üniversitesi, Viale Palatucci, 98168 Messina, İtalya.
³Sağlık Bilimleri Bölümü, Catanzaro Üniversitesi 'Magna Graecia', V. Europa, IT-88100 Catanzaro, İtalya.
⁴Farmasötik Botanik Bölüm Başkanı ve Bölümü, Jagiellonian Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Medyczna 9, 30-688 Kraków, Polonya.

PMID: 32121532
PMCID: PMC7154893
DOI: 10.3390/bitkiler9030298

Ücretsiz PMC makalesiSoyut

Halk arasında woad olarak bilinen Isatis tinctoria L. (Brassicaceae), çivit boyası ve şifalı bitki olarak çok eski ve iyi belgelenmiş bir geçmişi olan bir türdür. Şu anda, I. tinctoria daha sık tıbbi ilaç olarak ve ayrıca kozmetik bir bileşen olarak kullanılmaktadır. 2011 yılında I. tinctoria kökü, monografı Avrupa Farmakopesinde tanıtılarak resmi Avrupa fitoterapisinde kabul edilmiştir. Hammaddenin biyolojik özellikleri, Geleneksel Çin Tıbbından (TCM) bilinmektedir. Son yıllarda, I. tinctoriaHem fitokimyasal hem de biyolojik açıdan araştırılmıştır. Modern in vitro ve in vivo bilimsel çalışmalar, anti-inflamatuar, anti-tümör, antimikrobiyal, antiviral, analjezik ve antioksidan aktiviteleri kanıtlamıştır. I. tinctoria'nın fitokimyasal bileşimikapsamlı bir şekilde araştırılmış ve bitkinin, aralarında triptantrin, indirubin, indolinon, fenolik bileşikler ve polisakkaritlerin yanı sıra glukozinolatlar, karotenoidler, uçucu bileşenler ve yağ asitleri gibi çeşitli alkaloidler de dahil olmak üzere birçok değerli biyolojik olarak aktif bileşik içerdiği kanıtlanmıştır. Bu makale, terapötik potansiyelini desteklemek için bu değerli bitkinin fitokimyası ve biyolojik özellikleri hakkındaki güncel bilgileri özetleyen genel bir botanik ve etnobotanik genel bakış sunmaktadır. Ayrıca I. tinctoria üzerinde yapılan biyoteknolojik çalışmalarağırlıklı olarak flavonoidlerin ve alkaloidlerin gelişmiş üretimi için kıllı kök kültürlerine ve ayrıca sürgün kültürleri ve mikro çoğaltma protokollerinin oluşturulmasına odaklanan . Gelecekteki araştırma beklentileri için girdi sağlarlar.

Anahtar Kelimeler: Brassicaceae; alkaloidler ve flavonoidler; antienflamatuvar; anti-tümör; antioksidan; antiviral; kıllı kökler; vay.

***maturidi*** · 02 October 2022, 16:30

Çivit Otu Nedir? Nasıl Kullanılır? Faydaları ve Yan Etkileri Nelerdir?

Çok eski çağlardan bu yana hem tıpta hem de boyama sanayinde kullanılan çivit otu, taşıdığı özellikler itibariyle diğer şifalı otlardan ayrı bir yerdedir. Çok yıllık bir bitki olan çivit otu, halk arasında çivit mavisi rengiyle ünlenmiştir. Peki çivit otu nedir, nasıl ve hangi alanlarda kullanılır, en önemli faydaları nelerdir? Şimdi gelin hep birlikte bu soruların yanıtlarını öğrenelim. Tıbbi alanda yeri çok eski yıllardan beri var olan çivit otu, Hippokrates’in hastalıklar için sıkça yararlandığı bitkilerden biridir. Sadece ilaç yapımında değil, hamur mayalamada, peynir ve alkol yapımında da çivit otundan faydalanılmıştır. Eski dönemlerde bu bitkinin boyama özelliğinden de yararlanılarak, düşmanı korkutmak ve püskürtmek için çivit otu ile askerler mavi renge boyanmıştır.

Avrupa ülkelerinde 12. yüzyıldan itibaren getirisi yüksek olan çivit otunun ticareti ve üretimi yapılmıştır. Tıbbi içerik olarak anti bakteriyel nitelikte olması, birçok hastalıktan korunma ve bağışıklığın güçlenmesi konusunda insan sağlığına destek nitelikte bir bitki olmasına neden olmaktadır. "Tarhana (Çörtük) Otu Nedir? Nasıl Kullanılır? Faydaları ve Yan Etkileri Nelerdir? Çok yıllık bir bitki olan çivit otu, killi ve kireçli topraklardan hoşlanmaktadır. Yaprakları 30-40 santimetre uzunluğundadır ve şekli rozet gibidir. Yemek için tadı hoş değildir ancak kendine özgü hoş bir kokusu bulunmaktadır. Verimli bir bitki olarak bir ekimden birkaç sefer ürün elde etmek mümkündür.

Çivit Otu Nedir?

Yetiştiği iklim ve özelliklerine göre tam bir dağ bitkisi olan çivit otu (Isatis tinctoria), yetiştirilmesi kolay bir bitkidir. Turpgiller familyasından olan bitkiyi halk arasında daha çok "çivit mavisi" ifadesiyle duyarız. Anavatanı Batı Asya, Avrupa, Kafkasya ve Avrasya'dır. Zeytin yapraklarını andıran yaprakları ve biber çekirdekleri büyüklüğünde meyvesi bulunmaktadır. Faydaları oldukça kapsamlı olmakla birlikte, birden çok kullanım şekli vardır.

Yaprakları, çekirdeği ve çiçekleri insan sağlığının birçok noktasına oldukça faydalıdır. Çivit otu ile saç ve cilt bakımı yapmak da mümkündür. Koyu yeşil ve mızrak şeklinde yaprakları ile, parlak sarı çiçekleri vardır. Bu yapraklar mavimtırak bir yeşil renge dönüştüğünde, toplanma zamanı gelmiş demektir. Eğer köklerine zarar vermeden toplanırsa, kesilen yerlerden yeniden yaprak filizlenecektir.

Çivit Otu Nasıl Kullanılır?
Vücudun birden çok bölgesi için faydalı olan çivit otunun kullanım şekilleri de farklılık göstermektedir. Çivit otu ile saç bakımı yapmak için; bir miktar kınanın içerisine çivit tozu karıştırılarak saçlara sürülmelidir. Böylelikle saç dökülmesi ve yıpranması gibi saç sorunlarının ortadan kalkması olasıdır. Cilt bakımı yapılmak istendiğinde ise; elde edilen çivit suyu ile bakımı yapılmak istenen cildin temizlenmesi gerekir. Vücutta bulunan yaralar için de çivit ununa ihtiyaç vardır. İyileşmesi ya da kapanması istenen yara ve iltihabın üzerine çivit unu serpilmesi gerekmektedir. Etkili bir antibakteriyel özelliğinde olması nedeniyle yara ve iltihabın hızlı ve kolay bir şekilde iyileşmesini sağlar.

Çivit Otunun Kullanım Alanları Nelerdir?
Askeriyeden çamaşır yıkamaya kadar kullanım alan bir hayli geniş olan çivit otunun insanlığa en önemli faydaları sağlık için olanıdır. Eski zamanlarda düşmanı korkutmak için askerler çivit mavisine boyanırmış. Birçok alanda mavi renginden yararlanılırken, antioksidan özelliği ile de kanser ve zararlı toksinlerden arınmak mümkündür. Ancak kullanım alanı ya da şekli ne olursa olsun, çivit otu kullanımında bilinçli olmak en önemlisidir.

Çivit Otu Çayı Nasıl Hazırlanır?
Bitkilerin pek çoğunda olduğu gibi, çivit otu da genellikle çay olarak tüketilmektedir. Vücuttan zehirli toksinlerin atılması ve bazı hastalıkların iyileşmesi için çay olarak içmek en uygun olan tüketim şeklidir. Bitkilerin içeriğindeki faydalı özelliklerin kaybolmaması adına çivit otu gibi bitkileri kaynatmak yerine kaynar suyun içinde demlendirme yöntemi en doğru olanıdır. Bir tutam kurutulmuş çivit otu ile bir bardak kadar kaynamış su ile hazırlanması oldukça kolay olan bitki çayı için 10 dakika demlenme süresi yeterlidir. Demlendikten sonra sıcak şekilde tüketmek ve her seferinde yeniden hazırlamak hastalıklara karşı çivit otunun oldukça etkili olmasını sağlayacaktır.

Çivit Otu ile Saç Boyanır mı?
Kimyasal içerikli saç boyalarının yerini alan birçok bitki gibi çivit otu ile de saçların göz alıcı renklerde olmasını sağlamak mümkündür. Özellikle çivit otunun köklerinden elde edilen mavi su, kına ile karıştırılarak saçlara sürüldüğünde doğal bir renk elde edilebilir. Bu karışım saçları doğal yoldan boyamayı sağlarken, daha güçlü ve parlak saçlara sahip olmayı da mümkün kılar. Çok eski yıllardan beri kumaşların boyanmasında yararlanılan çivit otu, günümüzde kadınların saç boyamak için tercih ettiği en zararsız yollardan biridir.

Çivit Otunun Faydaları Nelerdir?
Birçok hastalık için evde bulundurulması gereken şifalı bitkilerden biri olan çivit otu, kanserden farenjite kadar pek çok sağlık sorununa iyi gelmektedir. İçeriğindeki bileşenlerin antibakteriyel bir bitki olmasını sağlamalarından dolayı çivit otu ile vücuttan toksinleri atmak mümkündür. Kızamık ve kabakulak gibi bulaşıcı hastalıklara karşı güçlü bir bağışıklık sistemine sahip olmayı sağlar. Grip ve boğaz enfeksiyonlarına karşı koruyucu etki gösterir. Menenjit ve Hepatit A hastalıklarından korur. Çivit otu; merhem, çay ve banyo gibi yöntemlerle hastalıkların türlerine göre farklı seçeneklerle kullanılabilmektedir. En çok bilinen faydası ise egzama ve çıban gibi deri hastalıklarının tedavisine yardımcı olmasıdır. Mevcut hastalıklara karşı fayda elde edebilmek için mutlaka önerilen şekilde kullanılması gerekir.

Çivit Otunun Yan Etkileri Nelerdir?
Özellikleri bakımından bilinen bir bitki olan çivit otu, kullanımı sırasında yan etkiye maruz bırakacak özellikte değildir. Ancak bağırsak yapısı üzerinde oldukça etkili olmasından dolayı uzun süreli ve aşırı tüketimden kaçınmak gerekir. Ayrıca hamile ve emziren annelerin çivit otu kullanımları da henüz aydınlatılmış konulardan biri değildir. Herhangi bir hastalığın tedavisi için çay olarak günde 2- 3 fincan rahatlıkla tüketilebilir. Fazlası için gerektiğinde uzman görüşüne başvurulmalıdır. Düzenli ilaç kullananların, yüksek tansiyon ve şeker hastalarının çivit otu kullanmadan önce mutlaka doktorları ile görüşmeleri gerekir.

***maturidi*** · 02 October 2022, 16:34

Bazı Çivit Otu (Isatis tinctoria L., Isatis constricta Davis) Türleri ile Yün Hali İpliklerinin Boyanmas ı ve Elde Edilen Renklerin Bazı Haslık Değerlerinin Belirlenmesi Üzerine Bir Araştırma

Süleyman KIZIL Neşet ARSLAN

Özet: Bu çalışmada iki farklı çivit otu türü ile toplam 54 adet boyama yapılmıştır. Isatis türleri ile yapılan boyamalarda; lsatis tinctoria türünde, ışık haslığı değ erleri 2-5, sürtünme hasl ığı değerleri 3-4 ile 4-5, su damlas ı hasl ığı değerleri yaş 4-5 ile 5, kuru 5, y ı kama hasl ığı değerleri sı ras ı ile akma (pamuklu ve yünlü beze) 3-4 ile 5, solma 1 ile 3 aras ı nda değ işmiştir. Isatis constricta türünde ışı k hasl ığı değerleri 2-5, sürtünme hasl ığı değerleri 2-4, su damlas ı hasl ığı değerleri kuru 3-4, yaş 5 ve y ı kama hasl ığı değ erleri s ı ras ı ile akma (pamuklu ve yünlü beze) 3 ile 4-5 ve 3-4 ile 5, solman ı n ise 1- 3 aras ı nda değiştiği saptanm ışt ı r. Anahtar Kelimeler: çivit otu, Isatis tinctoria L., Isatis constricta Davis, boyama

Türkiye'de boyarmadde içeren ve boyama özelli ğ ine sahip çok say ı da boya bitkisi bulunmaktad ı r. Bu bitkilerin çeş itli kı s ı mlar ı (çiçek, yaprak, kabuk, kök) boya maddesi içermekte ve boyamada kullan ı lmaktad ı r. Boya bitkilerinden elde edilen boyalar ı n g ı da renklendirici, tekstil, kozmetik ve eczac ı l ı k preperatlar ı nda kullan ı lmaktad ı r (Piccaglia ve Venturi 1998). Doğ al boyamac ı l ı kta kullan ı lan bitkilerin içerdikleri boyarmaddeler bak ı mı ndan nadir olarak bulunan renklerden biri de mavidir. Mavi renk, çivit otu (Isatis tinctoria) ve indigo bitkisi (Indigofera tinctoria) olmak üzere baş l ı ca iki temel kaynaktan elde edilmektedir. Cruciferae familyas ı ndan lsatis crymbosa ve lsatis tomentella da mavi renk veren boyarmaddeler içermekte, bu türlerin Anadolu'nun do ğusunda ve güney k ı yı ları nda, Isatis tinctoria ise Orta-Bat ı Anadolu'da yeti şmektedir (Dölen 1992, Tezcan ve Suyunu 1995, Dölen 1992).

Çivit otu Eski Mısır'da asalet simgesi alarak Imparator elbiselerinin boyanmasinda kullanılmıştır. Çivit otu boyama pigmenti için yeti ştirilen ilk bitkilerden biri olup, Ortaçağ da Avrupa'da geni ş ölçüde tar ı m ı yap ı lm ış ve 1600'Iü y ı llarda Hindistan'dan indigonun getirilmesine kadar yoğ un bir şekilde devam etmi ştir. indigo da, sentetik indigonun elde edilmesi ile 1878 y ı l ı ndan sonra gözden dü şmeye ba şlamıştı r. Günümüzde do ğ al boyalar ve do ğ al ürünlere dönü ş ün popülaritesinin artmas ı ile dünya genelinde az da olsa tar ı m ı yap ı lmaktad ı r (Dolan 1992). 19. yüzy ı l ı n sonuna kadar boyama için sadece bitki orijinii boyalar (hayvansal boyar madde ve mineral pigmentlerle birlikte) kullan ı lm ış ; sentetik boyaları n keşfedilmesiyle doğal boyalar önemini kaybetmi ş ve eski geleneksel boya metotlar ı unutulmaya yüz tutmu ştur. Bununla birlikte boyama uygulamalar ı da son yüzy ı lda değ i şmiştir. Amaç sadece eski teknikleri canland ı rmak değil ayn ı zamanda tekstil endüstrisi için uygun metotlar ortaya ç ı karmakt ı r. Eğ er doğal boyalar kalite bak ı m ı ndan KIZIL, S. ve N. ARSLAN, "Baz ı çivit otu (Isatis tinctoria L., lsatis constricta Davis) türleri ile yün hali ipliklerinin boyanmas ı ve elde edilen renklerin baz ı hasl ı k değerlerinin belirlenmesi üzerine bir ara ştı rma" şu anda kullan ı lan sentetik boyalarla rekabet edebilecek duruma getirilebilirse, do ğ al boyalar tekstil endüstrisi tarafı ndan kabul görecektir (Anonymous 1997).

Türkiye'de boya bitkileri yeti ştiriciliğ ini ve boya bitkilerinin endüstriyel düzeyde boyama amaçl ı kullan ı mlar ı n ı n teşvik edilmesi gerekmektedir. Bu durum ekolojik ve ekonomik olarak doğru ve uygun yeti ştiricilik yöntemlerini, etkin ve düş ük maliyetle boya elde etme metotlar ı n ı içermektedir. Bitkisel boyarmaddelerin ülke içinde yeti ştirilmesi tekstil, g ı da, kozmetik, eczac ı l ı k sanayi ve el sanatlar ı , hal ı -kilim yünlerinin boyanmas ı gibi çok yönlü kullan ı mları ndan dolay ı üzerinde durulmas ı ve yeniden canland ı rı lmas ı ile ülke ekonomisine ve turizmine katk ı sağ layacakt ı r. Bu çal ışma ile; boyac ı l ı k tarihinde önemli bir yere sahip olan çivit otunun lsatis tinctoria türü ile Güneydo ğ u Anadolu Bölgesi'nde endemik, (M ı s ı rdal ı 1985) baş ka bir çivit otu türü olan ve boyac ı l ı kta kullan ı ld ığı na dair bir bilgi bulunamayan lsatis constricta'dan boyama sonucu elde edilen renklerin ışı k, sürtünme, su damlas ı ve y ı kama haslıklarının incelenmesi amaçlanmıştır.

Materyal ve Yöntem
Boyamalarda kullan ı lan çivit otu türlerine ait yaprak örnekleri Dicle Üniversitesi Ziraat Fakültesi Tarla Bitkileri Bölümü denemelerinden temin edilmi ş, boyama çal ışmaları ise D. Ü. Fen-Edebiyat Fakültesi Biyoloji Bölümü laboratuvarlar ı nda yap ı lm ıştı r, Yün ipliklerinin boyanmas ı - na, lsatis türlerine ait yapraklar ı n en iyi gelişme gösterdi ği haziran ay ı baş ları nda başlanm ış olup temmuz ay ı ortalar ı na kadar devam edilmi ştir. Boyamalarda kullan ı lan 2,5 numara beyaz, (boyas ı z) ilmelik hal ı ipliği Sümerhal ı A. Ş. Isparta Satış Fabrikas ı ndan temin edilmi ştir. Boyamalar için yaprak hasad ı sabah 8.30-9.00 saatlerinde yap ı lm ıştı r. Boyama çal ışmaları nda 250 g yaş bitki aksamı ile 25 g yün esas al ı nmıştı r. Boyamalarda indirgeyici olarak kullan ı lan sodyum hidrosülfit (Na2S2O4) (Merc) oran ı yün ağı rl ığı üzerinden % 1 (0.25 g), % 3 (0.75g) ve % 5 (1.25g), ortam ı n pH's ı 7, 9 ve 11 olacak ş ekilde amonyak (Merc) ile ayarlanm ış olup, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerine göre uygulanan i şlemler aşağı da verilmiştir.

Boyama çalışmaları Derry ve Williams (1979), Hurry (1930), Anonymous (1986) ve Anonymous (1999)'dan yararlan ı larak yapı lm ıştı r. Buna göre uygulanan i ş lemler s ı ras ı ile şu şekildedir. - Cam bir kavanoza su kondu, - Çivit otu yapraklar ı 1 cm2genişliğinde parçalar halinde kesildi, - Kesilen bitki aksam ı su dolu cam kavanozun içine kondu ve bitki aksam ı n ı n tamamen su içinde kalmas ı na dikkat edildi, - Cam kavanoz ağz ı na kadar su ile dolduruldu ve kapa ğı yavaşça kapatı ld ı , - Haz ı rlanan materyal bir gece (24 saat) bekletilmeye b ı rak ı ld ı , - Bu süre sonunda yaprakları süzüldükten sonra kavanozun içindeki s ı vı boya çözeltisi süzgeç vas ı tas ı ile geniş a ğı zl ı bir kaba süzüldü, - Sı vı n ı n pH's ı yaklaşı k (7, 9, 11) olacak ş ekilde alkali (amonyak) ilave edildi, - 5 dakika içinde kar ışı mdan hava kabarc ı klar ı ç ı kmaya baş lad ı , - Çözeltiye bir miktar (yün a ğı rl ığı üzerinden % 1, % 3, %5) sodyum hidrosülfit (Na2S204) ilave edildi, - Karışı m 60 °C'ye kadar ı s ı t ı ld ı , - Boyanacak materyal soğ uk su ile ı slat ı ld ı , - Boyanacak materyal boya banyosuna b ı rakı ld ı ve bir süre (5, 10, 15 dakika) bekletildi, - Materyal ç ı kar ı ld ı ve musluk suyu ile iyice y ı kand ı ve daha sonra kurumaya b ı rakı ld ı

Işık haslığı tayini
Elde edilen renklerin ışı k hasl ığı tayini Türk Standartlar ı Enstitüsü tarafı ndan haz ı rlanan TS 867, Gün I şığı na Karşı Renk Tayini Metodu (Anonymous 1984a) ve DIN 5033, Farbmessung Begriff der Farbmetrik (Anonymous 1970) metotlar ı esas al ı narak yap ı lm ıştı r.

Sürtünme haslığı tayini
Boyal ı yün ipliklere sürtünme hasl ığı tayini Türk Standartlar ı Enstitüsü taraf ı ndan hazı rlanan TS 717, Sürtünmeye Karşı Renk Hasl ığı Tayini (Anonim 1978a)'ya ve TS 423, Tekstil Mamullerinin Renk Hasl ığı Tayinlerinde Lekelerinin (boya akmas ı ) ve Solman ı n (renk değ i şmesi) Değ erlendirilmesi, Yün Gri Skalalar ı n Kullanma Metotlar ı (Anonim 1984b)'ye göre yap ı lm ıştı r.

Su damlası haslığı tayini
Boyal ı yün ipliklerinin su damlas ı hasl ığı tayini Türk Standartlar ı Enstitüsü tarafı ndan haz ı rlanan TS 399, Su Damlas ı na Karşı Renk Hasl ığı Tayini (Anonim 1978b) ve TS 423, Tekstil Mamullerinin Renk Hasl ığı Tayinlerinde Lekelerinin (boya akmas ı ) ve Solman ı n (renk deği ş mesi) Değ erlendirilmesi, Yün Gri Skalalar ı n Kullanma Metotlar ı (Anonim 1984b)'ye göre yap ı lm ıştı r.

Yıkama haslığı tayini
Elde edilen renklerin y ı kama hasl ığı tayini Türk Standartlar ı Enstitüsü taraf ı ndan haz ı rlanan TS 716, Yı kamaya Karşı Renk Tayini Metodu (Anonim 1981) ve TS 423, Tekstil Mamullerinin Renk Hasl ığı Tayinlerinde Lekelerinin (boya akmas ı ) ve Solman ı n (renk değ i şmesi) Değ erlendirilmesi, Yün Gri Skalalar ı n Kullanma Metotlar ı (Anonim 1984b)'ye göre yap ı lmıştı r.

Elde edilen renklerin adlandırılması
Çivit otu bitkisinden 250 g (yaş yaprak) ve 25 g yün hal ı ipliğinin ağı rl ığı na göre % 1, % 3 ve % 5 oranlar ı nda mordan kullan ı larak değ i ş ik pH ortamlar ı nda (pH 7, pH 9 ve pH 11) yap ı lan boyamalardan elde edilen renkler sübjektif olarak değerlendirilmiştir. Bunun için bir komisyon oluşturulmuştur. Doğal ayd ı nlatmal ı bir mekanda boyal ı yün ipliği örnekleri beyaz zemin üzerine konulmu ştur. Benzer renkler bir arada grupland ı r ı lm ış ve aç ı ktan koyuya doğ ru renk adları verilmiştir.

Bulgular ve Tartışma
Isatis tinctoria türü ile pH 7, 9, 11 ortamlar ı nda, % 1, 3, 5 oranları nda indirgeyici (sodyum hidrosülfit) kullanarak 5, 10, 15 dakikal ı k boyama sürelerinde elde edilen renkler ve bu renklerin ışı k, sürtünme, su damlas ı ve yı kama haslığı değerleri Çizelgel'de verilmi ştir.

Isatis tinctoria türü ile yap ı lan boyamalardan; pH 7, % 1 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde s ı ras ı ile aç ı k yeş ilimsi kahve, koyu nil yeş ili ve yeş ilimsi kahverengi, pH 7 % 3 ve % 5 sodyum hidrosülfit kullan ı larak 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde elde edilen renkler kirli sar ı , pH 9, % 1 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde s ı ras ı ile aç ı k yeş ilimsi kahve, aç ı k sütlü kahve ve sütlü kahve, pH 9, % 3 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde yeş ilimsi sarı , aç ı k yeş ilimsi kahve, yeş ilimsi sarı , pH 9, % 5 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde kirli sar ı ve yeş ilimsi sarı , pH 11, % 1 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde aç ı k sütlü kahve, koyu sütlü kahve ve kirli gül kurusu, pH 11, % 3 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde nil yeş ili, yeş ilimsi kahve ve kurşuni kahve, pH 11, % 5 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde ise koyu ye ş ilimsi kahve, aç ı k kurş uni kahve ve koyu yeş ilimsi sarı renkler elde edilmi ştir (Çizelge1). Isatis tinctoria türünden elde edilen renklerin ışı k hasl ığı değerleri 2-5 aras ı nda değ i şmiştir. En yüksek (5) ışı k haslığı değ erleri pH 7 ortam ı nda % 1, 3, 5 sodyum hidrosülfit ve 5, 10, 15 dakikal ı k boyama şartları ndan elde edilmiştir. En düş ük (2-3) ışı k hasl ığı değerleri pH 11 ortamı nda % 1 oran ı nda sodyum hidrosülfit kullanarak 15 dakikal ı k boyama süresinden elde edilmi ştir (Çizelge1).

Isatis tinctoria türünden elde edilen renklerin sürtünme haslığı değ erleri 2-3 ile 4-5 aras ı nda değ i şmştir. pH 11 ortamı nda, % 1 oran ı nda sodyum hidrosülfit, 15 dakikal ı k banyo süresinde yap ı lan boyamalardan elde edilen renklerin sürtünme hasl ı kları 2-3 olup diğer uygulamalardan daha dü ş ük bulunmuştur. pH'n ı n artmas ı ile sürtünme hasl ığı değerlerinde dü ş üş görülmektedir (Çizelge1). Isatis tinctoria türü ile yap ı lan boyamalarda elde edilen renklerin ya ş su damlas ı hasl ığı değ erleri 4 ile 4-5 aras ı nda değ i şmiş , kuru su damlas ı hasl ı k değerleri ise 5 olmuştur. pH değerleri, sodyum hidrosülfit oran ı ve banyo sürelerinin değ i şmesi su damlas ı yaş ve kuru hasl ı k değerleri üzerinde önemli derecede farkl ı l ı k oluşturmam ışt ı r (Çizelge1) Y ı kama hasl ı k değerleri solma ve akma (yünlü ve pamuklu beze) olmak üzere iki grup altı nda incelenmiştir. Çizelge 1'de Isatis tinctoria türü ile yap ı lan boyamalardan elde edilen renklerin y ı kama hasl ığı solma değ eri 1-2 ile 2- 3 aras ı nda değ iştiği, en düşük solma hasl ığı değ erlerinin pH 11 ortamı nda %1 sodyum hidrosülfit kullan ı larak 15 dakikal ı k banyo süresinden elde edildiği görülmektedir. Akma değerleri bakı mı ndan boyan ı n yüne akma hasl ı klar ı 3-4 ile 5 aras ı nda, pamuğ a akma hasl ığı ise 3-4 ile 4-5 aras ı nda değ işmiştir. Yı kama hasl ığı akma değerleri pamuklu ve yünlü bezde birbirine benzer olmu ştur. Yı kama hasl ığı nda yüne akma bak ı mı ndan en yüksek akma değerleri pH 7 ortam ı nda % 3 ve % 5 oran ı nda

KIZIL,S. ve N.ARSLAN, "Bazı çivit otu (Isatis tinctoria L., Isatis constricta Davis) türleri ile yün hali ipliklerinin boyanmas ı ve elde edilen renklerin bazı haslık değerlerinin belirlenmesi üzerine bir ara ştı rma" 45 sodyum hidrosülfit kullan ı larak 5, 10 ve 15 dakikal ı k banyo süreleri ile pH 9 ortam ı nda % 5 oran ı nda sodyum hidrosülfit kullan ı larak 5 ve 10 dakikal ı k boyama sürelerinden elde edilmi ştir. Isatis constricta türü ile pH 7, 9, 11 ortamlar ı nda, % 1, 3, 5 oranlar ı nda indirgeyici (sodyum hidrosülfit) kullanarak 5, 10, 15 dakikal ı k boyama sürelerinde elde edilen renkler ve bu renklerin ışı k, sürtünme, su damlas ı ve y ı kama hasl ığı değ erleri Çizelge 2'de verilmi ştir. Isatis constricta türü ile yap ı lan boyamalardan elde edilen renkler; pH 7, % 1 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde eflatuni ye ş il ve yeş ilimsi mor, pH 7 % 3 ve % 5 sodyum hidrosülfit kullan ı larak 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde elde edilen renkler aç ı k eflatuni yeş il ile eflatuni yeş il, pH 9, % 1 ve % 3 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde aç ı k ve koyu su yeş ili renkleri ile su ye şili, pH 9, % 5 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde aç ı k petrol yeş ili ve aç ı k su yeş ili, pH 11, % 1 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde füme, kirli petrol mavisi ve koyu füme, pH 11, % 3 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde koyu ispirto mavisi, aç ı k füme ve petrol mavisi, pH 11, % 5 sodyum hidrosülfit, 5, 10 ve 15 dakikal ı k boyama sürelerinde ise petrol mavisi, aç ı k petrol mavisi ve aç ı k füme renkleri elde edilmi ştir. Isatis constricta türünden elde edilen renklerin ışı k hasl ığı değ erleri 2-5 aras ı nda değ i şmiştir. En yüksek ışı k hasl ığı değerleri pH 7 ortam ı nda % 1, 3, 5 oranlar ı nda sodyum hidrosülfit ve 5, 10, 15 dakikal ı k boyama ş artlar ı ile pH 9 % 1 sodyum hidrosülfit, 5, 10, 15 dakikal ı k boyama şartları ndan elde edilmi ştir. En dü ş ük ışı k hasl ığı değerleri pH 11 ortamlar ı nda elde edilmi ştir. pH düzeylerinin artmas ı ile birlikte ışı k hasl ığı değ erlerinde azalma oldu ğ u görülmektedir (Çizelge 2). Isatis constricta türü ile yap ı lan boyamalardan elde edilen renkierin sürtünme hasl ığı değ erleri 2 ile 4 aras ı nda değ i şmi ştir. pH 11 ortam ı nda sürtünme hasl ığı değ erlerinin diğer pH 7 ve 9 adamlar ı na göre daha dü ş ük bulunmu ştur. pH değ erinin artmas ı yla boya çözeltisi bazik karakterli olduğ undan, elde edilen renklerin de sürtünme hasl ı klar ı değ erlerinde azalma gözlenmi ştir (Çizelge 2). Isatis constricta türünde ya ş su damlas ı hasl ı klar ı 3-4 ile 5 aras ı nda değ i şmiş , kuru su damlas ı hasl ı kları ise 5 olmuştur. Isatis tinctoria türünde olduğu gibi Isatis constricta türünde de pH değ eri, sodyum hidrosülfit ve banyo sürelerinin değ i şmesi ile elde edilen renklerin, ya ş ve kuru su damlas ı hasl ı kları üzerinde önemli farkl ı l ı k oluşturmad ığı görülmektedir (Çizelge 2). Isatis constricta türünden elde edilen renklerin y ı kama hasl ığı solma değeri 1 ile 3, akma değ erleri bak ı m ı ndan bayan ı n yüne akma değerleri 3 ile 5, pamu ğ a akma değerleri ise 3 ile 4-5 aras ı nda değ i şmektedir. Çizelge 2'de y ı kama hasl ığı ndaki akma değ erlerinin pamuklu ve yünlü bezde birbirine benzer oldu ğ u görülmektedir. Y ı kama hasl ığı ndaki en yüksek yüne akma değ erlerinin pH 7 ortam ı nda % 1 oran ı nda sodyum hidrosülfit kullan ı larak 5, 10 ve 15 dakikal ı k banyo sürelerinden elde edilmi ştir. En yüksek pamu ğa akma değ erleri ise pH 7 ortam ı nda % 1, 3 ve % 5 oran ı nda sodyum hidrosülfit kullan ı larak 5, 10 ve 15 dakikal ı k banyo süreleri ile pH 9 ortam ı nda % 5 oran ı nda sodyum hidrosülfit kullan ı larak 5 ve 10 dakikal ı k banyo sürelerinden elde edilmi ştir. En düşük pamuğa akma değerleri pH 11 ortamlar ı nda elde edilmi ştir. Yı kama hasl ığı akma değerlerinin yün ve pamukta pH de ğ erlerinin artmas ı ile azalma gösterdi ğ i görülmektedir (Çizelge 2). Her iki çivit otu türünde de ışı k hasl ı klar ı 2-5, sürtünme hasl ı klar ı 2-3 ile 4, su damlas ı hasl ı kları s ı ras ı yla yaş 4-5 ile 5, kuru 5, y ı kama hasl ı klar ı solma değ erleri 1-3, akma değ erleri s ı ras ı yla yüne 4-5 ile 5, pamu ğ a 3-5 aras ı nda değ i şmiş ve birbirine benzer sonuçlar elde edilmi ştir. lsatis constricta'n ı n, literatürde boyamada kullan ı ld ığı na dair herhangi bir bilgiye rastlanamam ıştı r. Yap ı lan boyama sonuçlar ı na göre, Isatis constricta'n ı n mavi renk kayna ğı olarak kullan ı labileceğ i anlaşı lm ıştı r. lsatis türleri aras ı nda, lsatis constricta türünden Isatis tinctoria türüne göre mavinin de ğ i şik tonlar ı nda boyamalar elde edildi ğ i görülmektedir. Boyamalar sonucunda elde edilen renklerin farkl ı l ı k göstermesi, özellikle Isatis tinctoria ile ön boyama çal ışmaları nda mavi ve değ i ş ik tonları n ı n saptanmas ı , sonradan yap ı lan boyamalarda ise do ğ rudan mavi rengin elde edilememesi, boyamalar ı n yap ı ld ığı dönemde bitki bünyesinde boyarmadde içeri ğ inin azalmas ı ndan veya kimyasal olarak farkl ı laşmas ı ndan (ontogenetik varyabilite) kaynakland ığı düş ünülmektedir. Grierson ve ark. (1985), Privet berries ile mordan olarak ş ap ve demir kullanarak mavi renk elde ettikleri boyamalardan, ışı k hasl ığı n ı n 3, indigo ile yapt ı klar ı boyamalarda y ı kama hasl ı kları n ı n 5-6 olduğ unu bildirmektedirler. Tezcan ve Suyunu (1991), lsatis tinctoria ile yapt ı kları boyamalarda ışı k hasl ığı değ erlerinin 6-7 aras ı nda değ i şti ğ ini bildirmektedirler. Harmanc ı oğ lu (1951), Isatis tinctoria ile çeşitli mordanlar kullanarak yapm ış olduğ u boyamalarda ışı k hasl ığı n ı 1, 3 ve 4-5 aras ı nda değ i ştiğini bildirmektedir. Bu çal ışmada Isatis tinctoria ve Isatis constricta türlerinden elde edilen ışı k hasl ığı değ erleri 2-5 aras ı nda değ i şmekte ve Harmanc ı oğ lu (1951)'in belirtti ğ i s ı n ı rlar içinde kalmaktad r. Öztürk (1997), indigo ile yap ı lan boyamalarda, mordan olarak, bak ı r sülfat kullan ı ld ığı nda ışı k hasl ığı n ı n 4-5, demir sülfat ile mordanlanan renklerin ışı k hasl ı kları n ı n 3-4 aras ı nda değ i ştiğini, mordans ı z olarak elde edilen renklerin ışı k hasl ığı n ı n ise 4 olduğ unu bildirmektedir. Harmanc ı oğ lu (1951), lsatis tinctoria'da bak ı r sülfat ile mordanlanm ış boyamalarda sürtünme hasl ığı n ı 3-5 olarak bildirmektedir. Bu çal ış madan elde edilen sürtünme hasl ığı değ erleri (3-4) bu sonuçlar ile benzerlik göstermektedir.

Harmancıoğlu (1951), Isatis tinctoria'da bakır sülfat ile mordanlanm ış boyamalarda su damlası haslığını 3 ile 5 arasında değiştiğini bildirmekte, bu çalış madan elde edilen su damlası yaş ve kuru haslık değerleri sırası ile 4-5 ile 5 ve 5 olup araştı rı cı n ı n bulgular ı ile uyum içindedir. Grierson ve ark. (1985), Privet berries ile mordan olarak ş ap ve demir kullanarak mavi renk elde ettikleri boyamalardan, y ı kama hasl ı klar ı n ı n 2-3, indigo ile yapt ı klar ı boyamalarda ise y ı kama hasl ı kları n ı n 4-5 olduğ unu bildirmektedirler. Harmanc ı oğ lu (1951), lsatis tinctoria'da mordan kullanarak yapm ış olduğ u boyamalarda y ı kama hasl ığı n ı n ı n 4 ile 5 aras ı nda değ i ştiğ ini bildirmektedir. Öztürk (1997), indigo ile yap ı lan boyamalarda, bak ı r sülfat ile mordanlanm ış renklerin y ı kama hasl ı klar ı n ı n 5 olduğ unu bildirmektedir. Bu çal ış mada lsatis türleri ile yap ı lan boyamalardan elde edilen renklerin akma (yüne ve pamu ğ a) değerleri (3-4 ile 5) Grierson ve ark. (1985), Harmanc ı oğ lu (1951) ve Öztürk (1997)'nin bulgular ı na benzerlik göstermektetir. Sonuç olarak, ülkemiz, doğ al boyamac ı l ı k bak ı m ı ndan oldukça eski bir tarihsel gelene ğ e ve doğ al boyamac ı l ı kta kullan ı lan bitkiler aç ı s ı ndan zengin bir potansiyele sahiptir. Günümüzde, bu zenginlik boyamac ı l ı kta kullan ı lan bitki say ı s ı na yans ı tı lamamaktad ı r. Ülkemizde boya bitkilerinin kültürü yap ı lmamakta, boyama için gerekli materyal do ğadan toplamalar yolu ile sağ lanmaktad ı r. Bu ş ekilde yap ı lan tüketim hem do ğ al floray ı tahrip etmekte ve hem de standartlara uygun boyama materyalinin teminini güçle ştirmektedir. Ekonomik aç ı dan önemli boya bitkilerinin tespit edilerek, bu bitkilerin kültüre alınması ve belirli standartlarda üretilmesi ile unutulmaya yüz tutmuş eski bir tarımsal faaliyet alan ı yeniden güncelleş ecek, yöresel olarak yap ı lan el sanatlar ı ve özellikle ihraç değeri yüksek olan hah ve kilimlerin boyanmalar ı için hammadde temin edilmiş olacaktır. Bu durum, turistik aç ı dan önemli bir potansiyele sahip olan doğ al boyalarla boyanmış halı , kilim ve diğer çeşitli el sanat ı ürünlerimizin uluslararası ticarette yeniden önem kazanmas ı n ı ve ülke ekonomisine daha fazla döviz girdisi sağlayacaktır. Çivit otu ile bundan sonra yürütülecek çalışmalarda, standart bir mavi renk ve yüksek haslık değerleri elde edebilmek için farklı boyama metotlarının denenmesi yanında, değişik dönemlerde yapılacak bitki hasadının, boyama metodu ve boyarmadde oran ı üzerine olan etkisinin belirlenmesinin daha ayrıntılı fikir vermesi açısından yararlı olacağı düşünülmektedir.

Teşekkür
Bu araştırmada elde edilen renklerin ışı k, sürtünme ve su hamlası haslık tayinlerinde yardımlarını esirgemeyen Ankara Üniversitesi Ev Ekonomisi Meslek Yüksek Okulu Köy El Sanatlar ı Anabilim Dal ı Öğretim üyelerinden say ı n Doç. Dr. Nuran Kayabaşı'na teşekkür ederiz.

***maturidi*** · 02 October 2022, 16:48

Isatisindigoticanine A, Isatis tinctoria'nın köklerinden sunulmamış bir karbon iskeletine sahip yeni bir indol alkaloidi

Dongdong Zhang¹, Yanhong Shi², Songshan Shi³, Ximin Wu¹, Liuqiang Zhang¹, Kaixian Chen^{1 4}, Yiming Li¹, Rui Wang¹
Bağlantılar yıkılmak Bağlantılar

¹Eczacılık Fakültesi, Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Şanghay, Çin.
²TCM Uluslararası Standardizasyon Enstitüsü, Şanghay, Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Şanghay, Çin.
³Çin Materia Medica Enstitüsü, Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Şanghay, Çin.
⁴Şanghay Materia Medica Enstitüsü, Çin Bilim Akademisi, Şanghay, Çin.

PMID: 31328551
DOI: 10.1080/14786419.2019.1644632

Soyut

Isatisindigoticanine A ( 1 ), bir 1H -indol-3-il birimi ve bir 4-(1,2-dihidroksietil)-6-oksa ile bağlantılı bir benzofuran-3-on biriminin olağandışı bir karbon iskeletine sahip yeni bir indol alkaloidi Isatis tinctoria'nın köklerinden bir C-3－C-8'' bağı ve bir C-4'－C-8'' bağı yoluyla -3-azabisiklo[3.1.0]heksan-2-on birimi elde edildi . Yapısı, 1 D, 2 D NMR, IR, HRESIMS verilerini içeren fizikokimyasal özellikler ve spektroskopik yöntemlerle belirlendi. Mutlak konfigürasyonlar, deneysel CD'sinin ve hesaplanan ECD spektrumlarının karşılaştırılmasıyla çıkarıldı. İsatisindigoticanin A'nın nitrik oksit (NO) inhibitör aktiviteleri de LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde değerlendirildi, ancak hiçbir inhibitör etki gösterilmedi.

Anahtar Kelimeler: Antiinflamatuar aktivite; Isatis tinctoria; indol alkaloid; isatisindigoticanin A.

Duyuru

Çivit otu, indigo, Isatis tinctoria

Çivit otu, indigo, Isatis tinctoria

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap