Duyuru

***maturidi*** · 27 January 2022, 16:00

Phellinus linteus , AKT sinyalinin inhibisyonu yoluyla meme kanseri hücrelerinin büyümesini, anjiyogenezini ve istilacı davranışını baskılar

İngiliz Kanser Dergisi Ses 98 , sayfalar1348-1356 ( 2008 ) Bu makaleden alıntı yapın

Soyut
Bir tıbbi mantar Phellinus linteus'un (PL) bağışıklık sisteminin uyarılması veya apoptozun indüklenmesi yoluyla antitümör aktivitesi yakın zamanda tarif edilmiştir. Bununla birlikte, kanser hücrelerinin istilacı davranışının inhibisyonundan sorumlu moleküler mekanizmalar ele alınmayı beklemektedir. Bu çalışmada, PL'nin, yüksek oranda istilacı insan meme kanseri hücrelerinin koloni oluşumunu (bağlamadan bağımsız büyüme) yanı sıra proliferasyonunu (bağlanmaya bağlı büyüme) inhibe ettiğini gösterdik. ^{MDA-MB-231 hücrelerinin büyüme inhibisyonuna, p27 Kip1} ekspresyonunun yukarı regülasyonu yoluyla S fazında hücre döngüsü durması aracılık eder. Phellinus linteusayrıca meme kanseri hücrelerinden ürokinaz-plazminojen aktivatörünün salgılanmasının baskılanması yoluyla hücre yapışması, hücre göçü ve hücre istilasının inhibisyonu yoluyla MDA-MB-231 hücrelerinin istilacı davranışını bastırdı. Ek olarak, PL, MDA-MB-231 hücrelerinden vasküler endotelyal büyüme faktörünün salgılanmasının aşağı regülasyonu yoluyla, insan aortik endotel hücrelerinin kılcal morfogenezi olan anjiyogenezdeki erken olayı belirgin şekilde inhibe etti. Bu etkilere, serin-treonin kinaz AKT sinyalinin inhibisyonu aracılık eder, çünkü PL , meme kanseri hücrelerinde Thr ³⁰⁸ ve Ser ^{473'te AKT'nin fosforilasyonunu baskılamıştır.}Birlikte ele alındığında, çalışmamız PL'nin invaziv meme kanserine karşı potansiyel terapötik etkisini önermektedir.

Ana
Meme kanserine bağlı meme kanseri mortalitesi 1991'den 2003'e %22.9 azalmasına rağmen, meme kanseri, 2007'de tahminen 40 460 yeni ölümle 20-59 yaşındaki ABD'li kadınlar arasında kansere bağlı ölümlerin önde gelen nedeni olmaya devam etmektedir ( Jemal ve ark . al, 2007 ). Bu kadar yüksek bir ölüm oranının nedenlerinden biri, meme kanseri metastazı ile sonuçlanan kanser hücrelerinin istilacı davranışıdır. Kanser metastazı, kontrolsüz hücre çoğalması, çevre dokulardan istila, insan vücudunun uzak bölgelerine göç ve diğer organ ve dokuların yapışması, istilası ve kolonizasyonu dahil olmak üzere birbirine bağlı birkaç süreçten oluşur ( Price ve diğerleri, 1997).). Tümör büyümesi ve metastaz ayrıca, önceden var olan damarlardan filizlenen kılcal damarlar tarafından kan damarlarının oluşumu olan anjiyogenezi gerektirir ( Folkman, 1995 ). Bu nedenle, büyümenin inhibisyonu, istilacı davranış ve kanser hücresi aracılı anjiyogenez, kanser metastazının baskılanmasına yol açacak ve meme kanseri hastalarının sağkalımını daha da artıracaktır.

Phellinus linteus (PL), esas olarak tropikal Amerika, Afrika ve Asya'da bulunan ve geleneksel Doğu tıbbında tıbbi mantar olarak önemli bir kabul gördüğü bir basidiomycete mantarıdır ( Dai ve Xu, 1998 ). PL'den izole edilen biyolojik olarak aktif bileşikler, polisakaritler ( Song ve diğerleri, 1995 ), karışık a- ve p -bağları olan asidik proteo -heteroglikanlar ve bir (1 → 6)-dallı tip (1 → 3)-glikandır ( Kim ve diğerleri , al, 2003b ). Bu karmaşık polisakkaritler, çeşitli mantar türlerinde tespit edilmiş ve immün sistemi uyarıcı ve antitümör aktiviteleriyle bağlantılıdır ( Wasser, 2002 ).). Bu nedenle, PL, T lenfositlerinin ve aktive B hücrelerinin proliferasyonunu uyardı ( Kim ve diğerleri, 1996 , 2003c ) ve kemik iliğinden türetilen dendritik hücrelerin olgunlaşmasını indükledi ( Park ve diğerleri, 2003 ) ve makrofaj tepkisi ( Kim ve diğerleri, 2003a ) . Öte yandan, PL, lipopolisakarit ile uyarılan makrofajlarda anti-inflamatuar etkiler gösterdi ( Kim ve diğerleri, 2006 ). PL'nin doğrudan antikanser etkisi, ürokinaz-plazminojen aktivatörünün (uPA) mRNA seviyesinin aşağı regülasyonu yoluyla istilacı melanom B16BL6 hücrelerinin inhibisyonu ve farelerde pulmoner metastazın inhibisyonu ile gösterilmiştir ( Lee ve diğerleri, 2005 ). Phellinus linteussikline bağımlı kinazlar cdk2, 4 ve 6'nın inhibisyonu ile proliferasyonu bastırdı ve akciğer kanseri hücrelerinde kaspaz 3'ün aktivasyonu yoluyla apoptozu indükledi ( Guo ve diğerleri, 2007 ) ve prostat kanseri hücrelerinin apoptozu ( Collins ve diğerleri, 2006 ; Zhu ve diğerleri, 2007 ).

Bu çalışmada, PL'nin oldukça invaziv ve metastatik insan meme kanseri hücreleri üzerindeki etkisini değerlendirdik. Burada, PL'nin yüksek oranda istilacı insan meme kanseri hücrelerinin çoğalmasını (bağlanmaya bağlı büyüme) ve ayrıca koloni oluşumunu (bağlamadan bağımsız büyüme) engellediğini gösteriyoruz. Ayrıca PL, hücre yapışmasını, hücre göçünü ve hücre istilasını inhibe ederek MDA-MB-231 hücrelerinin istilacı davranışını da bastırır. Son olarak, PL, endotel hücrelerinin meme kanseri hücre aracılı anjiyogenezini in vitro olarak bastırdı . Toplu olarak, çalışmamız, tıbbi mantar PL'den bir ekstrakt ile istilacı meme kanseri hücrelerinin proliferasyonunun, istilacı davranışının ve anjiyogenezinin inhibisyonu için kullanılan mekanizmayı/mekanizmaları önermektedir.

Malzemeler ve yöntemler
Hücre kültürü ve reaktifler
İnsan meme kanseri hücreleri (MCF-7, MDA-MB-231) ve insan prostat kanseri hücreleri (PC-3, LNCaP) ATCC'den (Manassas, VA, ABD) elde edildi. MCF-7 ve MDA-MB-231 hücreleri DMEM ortamında, PC-3 hücreleri F-12 ortamında ve LNCaP hücreleri RPMI 1640 ortamında tutuldu. Tüm ortamlar penisilin (50 U ml ^-1 ), streptomisin (50 U ml ^-1 ) ve %10 fetal sığır serumu (FBS) içeriyordu. Medya ve takviyeler GIBCO BRL'den (Grand Island, NY, ABD) geldi. Fetal sığır serumu Hyclone'dan (Logan, UT, ABD) elde edildi. PL'nin sulu özü, Maitake Products Inc. (Paramus, NJ, ABD) tarafından sağlandı. ^{PL, 50 mg ml -1} konsantrasyonda steril su içinde çözülerek stok çözelti hazırlandı.ve 4°C'de saklandı. AKT inhibitörleri LY294002 ve AKT inhibitörü III, Calbiochem'den (San Diego, CA, ABD) elde edildi.

Hücre proliferasyonu tahlili
Hücre proliferasyonu, üreticinin talimatlarına göre (Promega, Madison, WI, ABD) tetrazolyum tuzu yöntemiyle belirlendi. Kısaca, kanser hücreleri 96 oyuklu bir plakada kültürlendi ve belirtilen zamanlarda PL (0-1.0 mg ml- ¹ ) ile tedavi edildi. İnkübasyon süresinin sonunda hücreler toplandı ve absorpsiyon, tarif edildiği gibi 570 nm'de bir ELISA plaka okuyucusu ile belirlendi ( Jiang ve diğerleri, 2004b ). Veri noktaları, üçlü belirlemelerin temsili deneyinde ortalama ± sd'yi temsil eder. İki bağımsız deneyde benzer sonuçlar elde edildi.

hücre canlılığı
MCF-7 ve MDA-MB-231 hücrelerinin hücre canlılığı, PL (0-1.0 mg ml- ¹ ) ile 24, 48 ve 72 saat inkübasyondan sonra, tarif edildiği gibi Trypan Blue ile boyanarak belirlendi ( Sliva ve diğerleri, 2002a ).

Ankrajdan bağımsız büyüme
MDA-MB-231 hücreleri toplandı ve %1 agaroz ile kaplanmış altı oyuklu plakalara ekildi. Ankrajdan bağımsız büyüme, her 4 günde bir değiştirilen PL'li veya PL'siz (0-1.0 mg ml- ^{1 ) kültür ortamı ile 10-14 gün süreyle inkübasyondan sonra değerlendirildi.}Plakalar %0.005 kristal menekşe ile boyandı ve koloniler mikroskop altında manuel olarak sayıldı ve fotoğraflandı ( Slivova ve diğerleri, 2004 ).

Hücre döngüsü analizi
MDA-MB-231 hücreleri (0.75 x 106 ⁾ tohumlandı ve 24 saat sonra belirtilen süre boyunca (0-48 saat) PL (0,5 mg ml- ^{1 ) ile işlendi.}İnkübasyondan sonra hücreler tripsinizasyonla toplandı, Dulbecco'nun %2 FBS içeren fosfat tamponlu salini ile yıkandı ve propidium iyodin (50 µg ml - ¹ ) içinde yeniden süspanse edildi. Hücre döngüsü analizi, daha önce tarif edildiği gibi ( Sliva ve diğerleri, 2001 ) bir FACStar ^PLUS akış sitometresinde (Becton-Dickinson, San Jose, CA, ABD ) yapıldı . Veriler, üç bağımsız deneyden elde edilen ortalama ± sd'dir.

Hücre yapışması, göçü ve istila deneyleri
Hücre yapışması, insan vitronektin (Chemicon International, Temecula, CA, ABD) ile kaplanmış Cytomatrix Adhesion Strips ile gerçekleştirilmiştir. Kısaca, MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca PL (0-0.5 mg ml- ^{1 ) ile işlendi, toplandı ve sayıldı.}Hücre yapışması, 37°C'de 1.5 saatlik inkübasyondan sonra belirlendi ( Lloyd ve diğerleri, 2003 ). ^{PL (0-1.0 mg ml- 1} ) ile tedavi edilen MDA-MB-231 hücrelerinin hücre göçü, %10 FBS içeren DMEM ortamında Transwell odalarında değerlendirildi ( Slivova ve diğerleri, 2004 ). ^{PL (0-1.0 mg ml- 1} ) ile tedavi edilen MDA-MB-231 hücrelerinin istilası, DMEM ile 1:4 seyreltilmiş 100 ul Matrigel™ (BD Biosciences, Bedford, MA, ABD) ile kaplanmış Transwell odalarında değerlendirildi , 72 saatlik inkübasyondan sonra (Slivova ve diğerleri, 2004 ).

In vitro endotel hücre morfogenezi testi (kılcal morfogenez)
İnsan aortik endotel hücresinin (HAEC) 'kılcal damar benzeri' yapılara farklılaşması, daha önce tarif ettiğimiz gibi iki boyutlu Matrigel bazlı bir tahlil kullanılarak gözlendi ( Harvey ve diğerleri, 2002 ). Başlangıçta, Engelbreth–Holm–Swarm tümöründen türetilen hücre dışı bir matris preparasyonu olan 200 ul buz gibi büyüme faktörü azaltılmış Matrigel (Becton Dickinson Labware, Bedford, MA, ABD), 24 kuyucuklu bir kuyucuğa yerleştirildi . doku kültürü ile tedavi edilen plaka. İnsan aortik endotel hücreleri toplandı, serumsuz EBM ortamında yeniden süspanse edildi ve Matrigel ile kaplanmış her bir kuyucuk için 3.5 x 104 hücre olacak şekilde kaplandı ^.İnsan aort endotel hücreleri ayrıca PL (0-0.5 mg ml ^{-1 ) ile inkübe edildi.}) veya 24 saat boyunca PL (0-0.5 mg ml- ¹ ) varlığında MDA-MB-231 hücrelerinin inkübasyonu ile hazırlanan MDA-MB-231 hücrelerinden şartlandırılmış ortam ile . Endotelyal HAE hücreleri, %5 CO2 varlığında 37°C'de inkübasyonun 16 saat içinde kılcal benzeri yapılara _{farklılaştı}. Bu yapılar, ters çevrilmiş bir Olympus CK40 mikroskobu kullanılarak mikroskobik olarak ( x 40) incelendi. Yapıların analizini kolaylaştırmak için, fazla ortam içine dahil edilen yapışmayan hücreler, kantitatif analizden önce her bir oyuktan çıkarıldı. Kılcal damar benzeri yapısal oluşumun boyutunu değerlendirmek için fotomikrograflar çekildi. Kılcal benzeri yapıların miktar tayini, bir düğümün en az üç hücrenin kesişimi olarak tanımlandığı, alan başına düğüm sayısı sayılarak yapıldı. Her numune üç kopya halinde test edildi ve en az iki ek deneyde yeniden üretildi. Western blot analizi

MDA-MB-231 hücreleri , metinde belirtildiği gibi 24-72 saat boyunca PL (0-1.0 mg ml- ^{1 ) ve daha önce tarif edildiği gibi hazırlanan tam hücre özleri ile işlendi (}Sliva ve diğerleri, 2002a , 2002b ). NuPAGE %4-12 Bis-Tris jeli (Invitrogen, Carlsbad, CA, ABD) üzerinde eşit miktarda protein (şerit başına 20 μg ) ayrıldı ve bir PVDF zarına (Millipore, Bedford, MA, ABD) aktarıldı. Protein ekspresyonu, karşılık gelen birincil antikorlarla tespit edildi: anti-siklin-D1, anti-siklin-E, anti-siklin-A, anti-cdk2, anti-cdk4, anti-p21, anti-p27, anti- p -aktin , (Santa, Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, ABD), anti-AKT, anti-fosfo-AKT (Thr ³⁰⁸ ) ve anti-fosfo-AKT (Ser ^{473 )}) (Sırasıyla Hücre Sinyali, Beverly, MA, ABD). Protein ekspresyonu, ECL Western Blot Detection System (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, UK) kullanılarak görselleştirildi.

Ürokinaz-plazminojen aktivatör salgısı
^{24 saat boyunca PL (0-1.0 mg ml- 1} ) ile işleme tabi tutulan MDA-MB-231 hücrelerinden DMEM ortamı toplandı ve konsantre edildi ve uPA salgılanması, anti-uPA antikoru (Oncogene Research Products, Oncogene Research Products, Cambridge, MA, ABD), tarif edildiği gibi ( Sliva ve diğerleri, 2002b ).

dansitometrik analiz
Western blotların otoradyogramları, HP scanjet 5470c tarayıcı ile tarandı. Filmlerdeki p27, fosfo-AKT (Thr ³⁰⁸ ), fosfo-AKT (Ser ⁴⁷³ ), AKT, β -aktin ve uPA proteinlerinin optik yoğunlukları UN-SCAN-IT yazılımı (Silk Scientific, Orem) ile ölçüldü ve analiz edildi. , UT, ABD). p27/ β -aktin ve fosfoAkt/Akt oranları, her kontrolün oranlarının birim değere standardize edilmesiyle hesaplandı.

Vasküler endotelyal büyüme faktörü salgılanması
^{MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca PL (0-0.5 mg ml- 1} ) ile tedavi edildi , hücre ortamı toplandı ve vasküler endotelyal büyüme faktörünün (VEGF) salgılanması, ilgili bir Quantikine ELISA kiti (R&D Systems, Minneapolis, MN, ABD) üreticinin talimatlarına göre.

istatistiksel analiz
Veriler ortalama±sd olarak sunulmuştur. Kontrol grubu (0 μg ml - ¹ PL) ile farklı PL dozlarına sahip gruplar arasındaki istatistiksel karşılaştırma, iki taraflı Student t -testleri kullanılarak gerçekleştirilmiştir . P <0.05 değeri anlamlı kabul edildi.

Sonuçlar
Phellinus linteus , oldukça invaziv meme kanseri hücrelerinin çoğalmasını ve koloni oluşumunu baskılar
Kanser hücrelerinin istilacı davranışı, yüksek kanser mortalitesi ile sonuçlanan metastatik potansiyelleriyle doğrudan bağlantılıdır. Bu nedenle, PL'nin yüksek oranda invaziv (MDA-MB-231) ve zayıf invaziv (MCF-7) meme kanseri hücrelerinin büyümesini inhibe edip etmediğini değerlendirdik. Şekil 1'de görüldüğü gibi , artan PL konsantrasyonu (0-1.0 mg ml - ¹ ), doza ve zamana bağlı bir şekilde MDA-MB-231'in yanı sıra MCF-7 hücrelerinin proliferasyonunu belirgin şekilde bastırdı. Bununla birlikte, PL'nin zayıf invaziv hücreler üzerindeki etkisi daha belirgindi, çünkü 0.25, 0.5 ve 1.0 mg ml - ¹ PL konsantrasyonu, MCF-7 hücrelerinin proliferasyonunu sırasıyla %60,2, %70.1 ve %78,0 oranında bastırdı ( Şekil 1B ).), aynı konsantrasyon , 24 saatlik inkübasyondan sonra MDA-MB-231 hücrelerinin proliferasyonunu sırasıyla %15.5, %21.5 ve %43.1 oranında bastırdı ( Şekil 1A ). MCF-7 hücrelerinin aynı duyarlılığı, yalnızca en yüksek PL konsantrasyonunun (1.0 mg ml - ¹ ) aynı potens ile zayıf invaziv ve yüksek oranda invaziv meme kanseri hücrelerinin proliferasyonunu baskıladığı ek 48 ve 72 saatlik inkübasyondan sonra da belirgindi ( Şekil 1 ). PL'nin kanser hücreleri üzerindeki etkisinin sitotoksik mi yoksa sitostatik mi olduğunu belirlemek için 24, 48 ve 72 saatlik PL tedavisinden sonra hücre canlılığını değerlendirdik. PL, MDA-MB-231 ve MCF-7 hücrelerinin canlılığını azaltmasına rağmen, kullanılan en yüksek PL konsantrasyonunda (1.0 mg ml- ^{1 ) hücre canlılığının en güçlü inhibisyonu}) 72 saat sonra MDA-MB-231 hücreleri için sadece %13.5 ( Şekil 1C ) ve MCF-7 hücreleri için %10.6 idi ( Şekil İD ), oysa aynı konsantrasyon MDA-MB-231 hücrelerinin proliferasyonunu %86,6 oranında bastırdı ( Şekil 1D). 1A ) ve MCF-7 hücrelerini %90.6 ( Şekil 1B ). Bu nedenle, bu veriler PL'nin meme kanseri hücrelerinin büyümesini ağırlıklı olarak sitostatik etkisi yoluyla engellediğini göstermektedir. İlginç bir şekilde, PL aynı zamanda zayıf invaziv prostat (LNCaP) ve yüksek oranda invaziv prostat (PC-3) kanser hücrelerinin proliferasyonunu doza ve zamana bağlı bir şekilde bastırdı ve LNCaP hücreleri PL tedavisine daha duyarlıydı (gösterilmemiştir).

Şekil 1

PL'nin meme kanseri hücrelerinin proliferasyonu üzerindeki etkisi. Proliferasyon: ( A ) MDA-MB-231, ( B ) MCF-7 hücreleri, 24, 48 ve 72 saat boyunca PL (0-1.0 mg ml- ^{1 ) ile işlendi.}Hücre proliferasyonu, Malzemeler ve Yöntemlerde tarif edildiği gibi belirlendi. Veriler, üçlü belirlemelerin ortalama ± sd'sidir. En az iki ek deneyde benzer sonuçlar elde edildi. ^*P <0,05. Canlılık: ( C ) MDA-MB-231, ( D ) MCF-7 hücreleri PL (0-1.0 mg ml ^{-1 ) ile tedavi edildi.}) 24, 48 ve 72 saat. Hücre canlılığı, Malzemeler ve Yöntemler'de açıklandığı gibi Tripan mavisi boyaması ile belirlendi. Veriler, üçlü belirlemelerin ortalama ± sd'sidir. En az bir ek deneyde benzer sonuçlar elde edildi. ^*P <0,05.

Tam boyutlu resim
Hücre proliferasyonuna (bağlama bağımlı büyüme) ek olarak, koloni oluşumu (bağlamadan bağımsız büyüme), kanser hücrelerinin in vitro metastatik potansiyelinin tipik özelliklerinden biridir ve in vivo tümör oluşumu ile güçlü bir şekilde ilişkilidir ( Freedman ve Shin, 1974 ). PL'nin oldukça istilacı meme kanseri hücrelerinin koloni oluşumunu baskılayıp baskılamadığını belirlemek için MDA-MB-231 hücrelerinin ankrajdan bağımsız büyümesini değerlendirdik. Şekil 2'de görüldüğü gibi , MDA-MB-231 hücreleri, 14 günlük inkübasyondan sonra agar üzerinde koloniler oluşturdu ve artan PL konsantrasyonunun (0-1.0 mg ml - ¹ ) varlığı, koloni sayısının önemli ölçüde baskılanmasıyla sonuçlandı ( Şekil 2E). Bu nedenle, PL, oldukça agresif meme kanseri hücrelerinin ankrajdan bağımsız büyümesinin yanı sıra ankraj bağımlı büyümesini de engeller.

şekil 2

PL'nin MDA-MB-231 hücrelerinin koloni oluşumu üzerindeki etkisi. MDA-MB-231 hücrelerinin ankrajdan bağımsız büyümesi (koloni oluşumu), aşağıdakileri içeren kültür ortamı ile 14 gün boyunca inkübasyondan sonra %1 agaroz üzerinde değerlendirildi: ( A ) 0 mg ml ^-1 PL, ( B ) 0.25 mg ml ^-1 PL , ( C ) 0,5 mg ml ^-1 PL, ( D ) 1.0 mg ml ^-1 Malzemeler ve Yöntemler bölümünde açıklandığı gibi. ( E ) Koloni sayısı Malzemeler ve Yöntemler bölümünde açıklandığı gibi belirlendi. Veriler, üç deneyden elde edilen ortalama ± sd'dir. ^*P <0,05.

Tam boyutlu resim

Phellinus linteus , S fazında hücre döngüsü durmasını indükler
Hücre proliferasyonunun inhibisyonunun hücre döngüsü durması ile ilişkili olup olmadığını belirlemek için MDA-MB-231 hücreleri, 24 ve 48 saat boyunca PL (0.5 mg ml - ¹ ) ile işleme tabi tutuldu ve akış sitometrisi ile analiz edildi. Hücre döngüsü analizi, PL'nin hücre döngüsünün S fazında hücre döngüsü durmasına neden olduğunu gösterdi ( Tablo 1 ), burada S fazındaki hücre miktarı önemli ölçüde %27'den (kontrol - 0 saat) %34'e (24 saat) ve %44'e yükseldi (48 saat). Ek olarak, PL tedavisi alt G0/G1 fazındaki hücre miktarını indüklememiştir, bu da PL'nin MDA-MB-231 hücreleri üzerindeki sitostatik etkisini düşündürür ( Tablo 1). S fazında hücre döngüsü durmasından sorumlu mekanizmayı incelemek için, G1 fazından S fazına ilerlemede yer alan hücre döngüsü düzenleyici proteinlerin (siklinler) ve cdk'lerin ekspresyonunu değerlendirdik ( Sherr ve Roberts, 1999 ; Ekholm ve Reed, 2000) . ). Bu nedenle, MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca PL (0-1.0 mg ml- ¹ ) ile işlendi ve hücre özütlerinde siklin D1, E, A, cdk4, cdk2, p21 ve p27'nin ifadesi western blot ile değerlendirildi. ilgili antikor ile analiz. G1 düzenleyici proteinlerin hiçbiri siklin-D1, cdk4 veya p21, G1-geç faz veya G1/S-fazı düzenleyici proteinler siklin E, A ve cdk2, PL ile tedaviden sonra ifadelerinde değişiklik göstermedi ( Şekil 3A ). Bununla birlikte, PL (0,5 ve 1,0 mg ml^-1 ) bir sikline bağımlı kinaz inhibitörü p27'nin belirgin şekilde indüklenmiş ifadesi ( Şekil 3B ). Bu nedenle PL, p27'nin yukarı regülasyonu yoluyla meme kanseri hücrelerinin çoğalmasını engeller ve bu da S-fazı hücre döngüsü durmasına neden olur. Tablo 1 PL'nin hücre döngüsü dağılımı üzerindeki etkisiTam boy masa

Figür 3

PL'nin hücre döngüsü düzenleyici proteinlerin ekspresyonu üzerindeki etkisi. MDA-MB-231 hücreleri, ( A ) 24 saat veya ( B ) 24-48 saat boyunca PL (0-1.0 mg ml- ¹ ) ile işlendi ve tam hücre özleri, Western blot analizine tabi tutuldu. Siklin D1, siklin E, siklin A, cdk2, cdk4, p21 ve p27'nin ekspresyonu, ilgili antikorları ile western blot analizi ile değerlendirildi. Eşit protein yüklemesi, anti- β -aktin antikoru ile doğrulandı . Sonuçlar, üç ayrı deneyi temsil etmektedir. p27'nin ekspresyon seviyesi (oran p27/ β -aktin), Malzemeler ve Yöntemler'de açıklandığı gibi dansitometri ile ölçülmüştür.

Tam boyutlu resim Phellinus linteus , meme kanseri hücrelerinin istilacı davranışını bastırır
Kanserlerin metastaz yapma yeteneği, hücre yapışması, göçü ve istilası ile doğrudan ilişkilidir. İntegrin reseptörü aVp3 , hücre dışı matris ₍ ECM) proteini vitronektin ile etkileşimi yoluyla göğüs kanseri hücrelerinin yapışmasında rol oynar ( _Wongve diğerleri, 1998 ). PL'nin invaziv meme kanseri hücrelerinin yapışmasını etkileyip etkilemediğini araştırmak için MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca PL (0-0.5 mg ml- ¹ ) ile ön işleme tabi tutuldu ve bunların vitronektine yapışmaları belirlendi. Şekil 4A'da görüldüğü gibi , MDA-MB-231 hücrelerinin yapışması, PL tedavisi ile belirgin şekilde bastırılmıştır. Daha sonra, PL'nin hücre göçünü de engelleyip engellemediğini değerlendirdik. MDA-MB-231 hücreleri PL (0-1.0 mg ml ^{-1 ) ile ön işleme tabi tutulmuştur.}) 1 saat süreyle ve hücre göçü 5 saat daha inkübasyondan sonra belirlendi. Şekil 4B'de görüldüğü gibi , PL ayrıca göğüs kanseri hücrelerinin göçünü doza bağlı bir şekilde belirgin şekilde bastırdı. Son olarak, PL'nin hücre invazivliği üzerindeki etkisi değerlendirildi. ^{MDA-MB-231 hücreleri, PL (0-1.0 mg ml- 1} ) varlığında Matrigel kaplı filtreler üzerine kaplandı ve 48 saatlik inkübasyondan sonra Matrigel yoluyla istila edilen hücre miktarı sayıldı. Şekil 4C'de görüldüğü gibi , PL, MDA-MB-231 hücrelerinin istilasını bir doz-yanıt şeklinde inhibe eder. Kanser metastazı ve istilası, uPA-uPA reseptör (uPAR) sistemi ile ilişkili olduğundan, PL'nin kanser hücrelerinden uPA salgılanmasını etkileyip etkilemediğini değerlendirdik. MDA-MB-231 hücreleri PL (0-1.0 mg ml ^{-1 ) ile tedavi edildi.}) 24 saat boyunca ve şartlandırılmış ortamda western blot analizi ile değerlendirilen uPA salgılaması. Hücre yapışmasının, göçünün ve istilasının inhibisyonunu gösteren verilerle uyumlu olarak PL, MDA-MB-231 hücrelerinden uPA salgılanmasını önemli ölçüde azalttı ( Şekil 4D ).

Şekil 4

PL'nin MDA-MB-231 hücrelerinin istilacı davranışı üzerindeki etkisi. ( A ) Hücre yapışması. MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca PL (0-0.5 mg ml- ¹ ) ile işlendi ve vitronektine hücre yapışması Malzemeler ve Yöntemler'de açıklandığı gibi belirlendi. Her çubuk, üç deneyin ortalama ± sd'sini temsil eder. ^*P <0,05. ( B ) Hücre göçü. Hücre, Malzemeler ve Yöntemler'de açıklandığı gibi Boyden Chambers'da PL (0-1.0 mg ml- ¹ ) varlığında 5 saatlik inkübasyondan sonra belirlendi . Her çubuk, üç deneyin ortalama ± sd'sini temsil eder. ^*P <0,05. ( C ) Hücre istilası. ^{Hücre istilası, PL (0-1.0 mg ml -1} ) varlığında 24 saatlik inkübasyondan sonra belirlendi.) Malzemeler ve Yöntemlerde açıklandığı gibi Matrigel ile kaplanmış Boyden Odalarında. Her çubuk, üç deneyin ortalama ± sd'sini temsil eder. ^*P <0,05. ( D ) uPA salgılanması. MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca PL (0-1.0 mg ml- ¹ ) ile işleme tabi tutuldu ve uPA'nın ifadesi, Malzemeler ve Yöntemler'de açıklandığı gibi western blot analizi ile anti-uPA antikoru ile koşullandırılmış ortamda tespit edildi. uPA'nın salgılanması, Malzemeler ve Yöntemler'de açıklandığı gibi dansitometri ile ölçülmüştür. Sonuçlar, üç ayrı deneyi temsil etmektedir.

Tam boyutlu resim Phellinus linteus , VEGF sekresyonunun baskılanması yoluyla endotel hücrelerinin kılcal morfogenezini inhibe eder
İnsan endotel hücrelerinin kılcal morfogenezi (tüp oluşumu), kanser ilerlemesi ve metastaz ile ilişkili anjiyogenezdeki ilk önemli adımlardan biridir. Kanser mikroçevresi çeşitli hücreler içerdiğinden, endotel hücrelerinin kılcal morfogenezinin inhibisyonunun meme kanseri hücreleri aracılığıyla sağlanıp sağlanamayacağını da değerlendirdik. Bu nedenle, PL'nin kendisinin mi yoksa PL'ye maruz kalan meme kanseri hücrelerinden koşullandırılmış ortamın HAEC'lerin kılcal morfogenezini baskılayıp baskılamadığını belirledik. Matrigel üzerinde büyütülen insan aortik endotel hücreleri, doğrudan PL (0-0.5 mg ml - ^{1 ) veya PL (0-0.5 mg ml-}¹ , PL-CM) ile muamele edilmiş MDA-MB-231 hücrelerinden elde edilen şartlandırılmış ortam ile tedavi edildi . 24 saat ve tüp oluşumu değerlendirildi. Şekil 5A'da görüldüğü gibi, PL, HAEC'lerin kılcal morfogenezini önemli ölçüde bastırdı. Ayrıca, PL içermeyen MDA-MB-231 hücrelerinden elde edilen şartlandırılmış ortam, HAEC'lerin kılcal morfojenezini indükledi ( 0 PL'de PL'ye karşı PL-CM) ve PL'ye (PL-CM) maruz kalan hücrelerden gelen şartlandırılmış ortam da HAEC'lerin kapiler morfogenezini bastırdı. doz-yanıt şekli ( Şekil 5A–C ). MDA-MB-231 hücreleri pro-anjiyojenik VEGF'yi eksprese ettiğinden ( Basu ve diğerleri, 2005 ), bu hücrelerden salgılanan VEGF'nin, PL tarafından inhibe edilebilen endotelyal hücrelerin kılcal morfogenezini indüklediğini varsaydık. ^{Bu nedenle, PL'nin PL (0-0.5 mg ml- 1} ) ile tedavi edilen MDA-MB-231 hücrelerinden VEGF salgılanmasını inhibe edip etmediğini değerlendirdik . Şekil 5D'de görüldüğü gibi, MDA-MB-231 hücrelerinden VEGF'nin salgılanması, doz-yanıt şeklinde PL tarafından belirgin şekilde azaldı. Toplu olarak, verilerimiz PL'nin endotel hücrelerinin kılcal morfogenezini doğrudan ve dolaylı olarak meme kanseri hücrelerinden VEGF salgılanmasının

baskılanması yoluyla inhibe ettiğini göstermektedir.

Şekil 5

Phellinus linteus , aort endotel hücrelerinin kılcal morfogenezini inhibe eder. ( A ) HAEC'ler Matrigel'e ekildi ve hücreler PL (0-0.5 mg ml ^-1 ) (siyah çubuklar) veya PL (0-0.5 mg ml) ile muamele edilmiş MDA-MB-231 hücrelerinden gelen şartlandırılmış ortam ile muamele edildi. ^-1 , PL-CM) (gölgeli çubuklar) 24 saat ve kapiler morfogenez Malzemeler ve Yöntemler bölümünde açıklandığı gibi belirlendi. 0 mg ml - ¹ PL-CM'de ( B ) ve 0.5 mg ml - ¹ PL-CM'de ( C ) kılcal morfogenez. Nodüllerin sayısı, veri noktası başına üç alandan sayılarak ölçülmüştür ve her çubuk, üç deneyin ortalama ± sd'sini temsil eder. İstatistiksel analiz: siyah çizgi P<0,05 PL (siyah çubuklar) ve PL - CM (taralı çubuklar) aynı PL konsantrasyonunda, ^#P <0,05 PL (siyah çubuklar) PL konsantrasyonunda (0–0,5 mg ml ^-1 ), ^*P <0,05 PL -CM (taralı çubuklar) PL konsantrasyonunda (0-0.5 mg ml ^-1 ). ( D ) MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca PL (0-0.5 mg ml- ¹ ) ile işlendi, ortam toplandı ve VEGF salgılanması Malzemeler ve Yöntemler'de açıklandığı gibi belirlendi. Her çubuk, iki kez tekrarlanan minimum üç deneyin ortalama±sd'sini (salgılanan VEGF'nin ml'si başına pg) temsil eder. ^*P <0,05.

Tam boyutlu resim
Phellinus linteus , AKT kinazın aktivitesini inhibe eder
AKT serin-treonin kinaz (protein kinaz B), geniş bir akış aşağı substrat spektrumunun fosforilasyonu yoluyla çeşitli hücresel süreçleri düzenler ve nihayetinde diğerleri arasında hücre çoğalması, istilası ve anjiyogenez ile ilgili proteinlerin ekspresyonu ile sonuçlanır ( Woodgett, 2005 ; Dillon et al . al, 2007 ). PL'nin meme kanseri hücrelerinde AKT aktivitesini modüle edip etmediğini belirlemek için, MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca PL (0-1.0 mg ml- ¹ ) ile tedavi edildi ve AKT'nin fosforilasyon durumu, western blot analizi ile tam hücre özütlerinde değerlendirildi. . Şekil 6A'da görüldüğü gibi , PL, Thr ^308'de AKT'nin fosforilasyonunu inhibe ederdoz-yanıt şeklinde. ^{Ek olarak, PL tedavisi, AKT'nin Ser 473'te} fosforilasyonunu da belirgin şekilde azalttı ( Şekil 6B ).

Şekil 6

PL'nin AKT aktivitesi üzerindeki etkisi. MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca PL (0-1.0 mg ml- ^{1 ) ile işleme tabi tutuldu ve tam hücre özleri, (}A ) anti-p-AKT-Thr ³⁰⁸ veya ( B ) anti ile western blot analizine tabi tutuldu. -p-AKT-Ser ⁴⁷³ antikorları. Eşit protein yüklemesi, anti-AKT antikoru ile doğrulandı. pAKT seviyesi (pAKT/AKT oranı), Malzemeler ve Yöntemler'de açıklandığı gibi dansitometri ile ölçülmüştür. Sonuçlar, üç ayrı deneyi temsil etmektedir.

Tam boyutlu resim
AKT aktivitesi PL'nin baskılanmasının, MDA-MB-231 hücrelerinde VEGF ekspresyonunun aşağı regülasyonu yoluyla kılcal morfogenezin inhibisyonundan doğrudan sorumlu olup olmadığını değerlendirmek için, spesifik AKT inhibitörleri ile farmakolojik bir yaklaşım kullandık. Bu nedenle, MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca LY294002 (10 μ M ) veya AKT inhibitörü III (10 μ M ) ile tedavi edildi ve VEGF salgılanması değerlendirildi. Şekil 7A'da görüldüğü gibi , AKT inhibitörleri meme kanseri hücrelerinden VEGF salgılanmasını belirgin şekilde bastırdı. Ayrıca, LY294002 ve AKT inhibitörü III ile tedavi edilen MDA-MB-231 hücrelerinden elde edilen şartlandırılmış ortam, endotel hücrelerinin kılcal morfogenezini de inhibe etti ( Şekil 7B ).). Bu nedenle, bu veriler, PL tarafından in vitro anjiyogenezin inhibisyonunun , bir dereceye kadar, meme kanseri hücrelerinden VEGF salgılanmasının baskılanmasıyla sonuçlanan AKT aktivitesinin

baskılanması yoluyla aracılık ettiğini göstermektedir.

Şekil 7

AKT inhibisyonu, VEGF sekresyonunu ve kılcal morfogenezi baskılar. MDA-MB-231 hücreleri, 24 saat boyunca araç, LY294002 (10 uM) veya AKT inhibitörü III (10 uM) ile işlendi VE şartlandırılmış ORTAM toplandı . ( A ) MDA-MB-231 hücrelerinden vasküler endotelyal büyüme faktörü salgılanması ve ( B ) HEAC'nin kapiler morfogenezi, Malzemeler ve Yöntemler'de tarif edildiği gibi belirlendi. Her çubuk, iki kez tekrarlanan minimum üç deneyin ortalama ± sd'sini temsil eder. ^*P <0,05.

Tam boyutlu resim

Tartışma
Meme kanseri biyolojisinin farklı teorilerinden bağımsız olarak (i) zaman içinde yayılan ve uzak metastazlar geliştiren lokal bir hastalık; (ii) tanıdan çok önce uzak metastazların olduğu, başlangıçtan itibaren sistemik bir hastalık (iii) veya her ikisinin heterojen bir hastalık olarak kombinasyonu olan kanser metastazı, meme kanseri hastalarındaki en önemli tıbbi sorunlardan biridir ( Punglia ve diğerleri, 2007 ) . Birkaç kemoterapötik ajan veya bunların kombinasyonları (örn. taksanlar, trastumazab, gemsitabin veya kapesitabin) metastatik meme kanseri ortamında aktivite gösterse de ( Tripathy, 2007 ), doğal antiproliferatif ve anti-metastatik toksik olmayan ajanların azlığı vardır.

Pratik olarak kırk yıl önce gösterildiği gibi, basidiomycete mantarı PL'den elde edilen polisakarit ekstreleri, in vivo tümör büyümesini baskıladı ( Chihara ve diğerleri, 1969 ). Ek olarak PL, toksik etkiler olmaksızın tümör büyümesini ve pulmoner metastaz sıklığını da azalttı ( Han ve diğerleri, 1999 ). Son çalışmalar, akciğer ve prostat kanseri hücrelerinde hücre döngüsü durması ve apoptozun indüklenmesi yoluyla büyümenin inhibisyonundan sorumlu moleküler mekanizma(lar)dan bazılarını aydınlattı ( Collins ve diğerleri, 2006 ; Guo ve diğerleri, 2007 ; Zhu ve diğerleri, 2007 ) . Bununla birlikte, istilacı davranış ve anjiyogenezin inhibisyonundan sorumlu moleküler mekanizma(lar) tam olarak ele alınmamıştır.

Bu çalışmada, PL'nin, ekspresyonunun yukarı regülasyonunun aracılık ettiği S-fazı hücre döngüsü durması yoluyla yüksek oranda istilacı meme kanseri hücrelerinin koloni oluşumunu (bağlamadan bağımsız büyüme) olduğu kadar hücre proliferasyonunu da (bağlanmaya bağlı büyüme) inhibe ettiğini gösterdik. s27. Hücre döngüsünün ilerlemesinin bir yansıması olan hücre büyümesi, kanserlerin çoğunda anormal bir şekilde düzenlenir. Hücre döngüsü, siklinler, cdkler ve cdk inhibitörleri kullanan bir dizi kontrol noktası tarafından düzenlenir ( Sherr, 1966 ).). p27, S-fazı siklin-cdk komplekslerine bağlanan ve hücre döngüsü uyarıcı aktivitelerini inhibe eden cdk inhibitörlerinden biridir. p27 ekspresyonunun kaybı, meme kanseri dahil olmak üzere çeşitli insan epitelyal tümörlerindeki agresif davranışla bağlantılı olduğundan, p27 ekspresyonunun indüklenmesi, hücre döngüsü durmasına ve tümör büyümesinin inhibisyonuna yol açabilir ( Tan ve diğerleri, 1997 ; Lloyd ve diğerleri ). , 1999 ; Macri ve Loda, 1999 ). Verilerimiz, p27 ekspresyonunun yukarı regülasyonu yoluyla S-fazı hücre döngüsü durması yoluyla prostat kanseri ve lösemi hücrelerinin büyümesinin inhibisyonunu da gösteren son makalelerle uyumludur ( Zhang ve diğerleri, 2006 ; Shishodia ve diğerleri, 2007 ). Son günlerde,Guo ve diğerleri (2007) , PL'nin, cdk2, 4 ve 6 aktivitelerinin inhibisyonunun aracılık ettiği G1 fazlı hücre döngüsü durması yoluyla akciğer kanseri hücrelerinin büyümesini baskıladığını göstermiştir. Sonuçlarımız, p27'nin yukarı regülasyonu yoluyla meme kanseri hücrelerinde S fazında hücre döngüsünün durduğunu göstermektedir. Bununla birlikte, G1 fazından S fazına geçiş, cdk inhibitörü p27 tarafından kontrol edilen cdk2, 4 ve 6'nın aktiviteleri tarafından düzenlendiği için verilerimiz Guo ve diğerleri ile aynı fikirde değildir ( Slingerlan ve Pagano, 2000 ). Ayrıca, hücrelerin çoğu G0/G1 ve S'de olduğundan ancak G2 fazında olmadığı için S fazında hücre döngüsü durması G1-S'de tutuklama olarak da yorumlanabilir ( Tablo 1 ). En önemlisi, PL, hücre döngüsünü durdurarak kanser hücrelerinin büyümesini baskılar.

Burada, PL'nin, oldukça invaziv meme kanseri hücrelerinden uPA salgılanmasını baskılayarak yapışmayı, göçü ve istilayı engellediğini gösteriyoruz. Verilerimiz, fare melanom hücrelerinde uPA'nın yapışma, istila ve ekspresyonunun inhibisyonunu gösteren Lee ve arkadaşlarının (2005) çalışmasıyla uyumludur. Ayrıca, verilerimiz PL tarafından istilacılığın inhibisyon mekanizmasını önermektedir. Bu nedenle, meme kanseri hücrelerinden salgılanan uPA, uPAR ile etkileşime girer ve plazminojeni plazmine dönüştürür ( Blasi ve Carmeliet, 2002 ). Plazmin, ECM bileşenlerini bozar ve ECM'nin bozunması yoluyla hücre istilasına katkıda bulunan diğer proteolitik enzimleri (MMP'ler) uyarır ( Blasi ve Carmeliet, 2002).). Salgılanan uPA, uPAR'a bağlanabilir ve vitronektin ile etkileşimi yoluyla göğüs kanseri hücrelerinin yapışması ve göçüne katılan integrin reseptörü aVp3 ile bir kompleks oluşturur ( Slivova ve _diğerleri_,2005 ). _{uPA sekresyonunun inhibisyonu, uPA –}_{uPAR –}αVβ3 - vitronektin kompleksinin oluşumunu azaltacak ve bunun sonucunda invaziv meme kanseri hücrelerinin yapışmasını ve göçünü baskılayacaktır. Alternatif olarak, PL meme kanseri hücrelerinin istilacı davranışında yer alan diğer proteinlerin aktivitelerini de modüle edebilir (örn. matris metalloproteinazlar, β ₁ ve β ₄integrinler, epidermal büyüme faktörü reseptörleri ve diğerleri ( Carraway ve Sweeney, 2006 ; Bissell, 2007 )). Bununla birlikte, bu çalışmada, PL'nin uPA sekresyonunun inhibisyonu yoluyla istilacılığı baskıladığını öneriyoruz. Son olarak, biz ve diğerleri, uPA'nın inhibisyonunun meme kanseri hücrelerinin istilasını baskıladığını daha önce göstermiştik ( Sliva ve diğerleri, 2002b ; Das ve diğerleri, 2003 : Mi ve diğerleri, 2006 ).

Son zamanlarda, Song ve diğerleri (2003)koryoallantoik membran (CAM) civciv embriyo analizinde PL'nin anti-anjiyojenik aktivitesini gösterdi. Bununla birlikte, kanserle ilgili olarak PL tarafından anjiyogenezin inhibisyonunun mekanizması daha önce ele alınmamıştı. Bu çalışmada, PL'nin endotel hücrelerinin anjiyogenez - tüp oluşumundaki ilk adımlardan birini inhibe ettiğini gösterdik. PL, endotel hücrelerinin kılcal morfogenezini doğrudan bastırırken, verilerimiz ayrıca bu etkinin, meme kanseri hücrelerinden VEGF salgılanmasının inhibisyonunun aracılık edebileceğini göstermektedir. Deneysel koşullarımızda PL'yi meme kanseri hücrelerinden (PL-CM) koşullandırılmış ortamdan çıkarmak imkansız olsa da ve bu nedenle HEAC'lerin kılcal morfogenezi üzerindeki inhibe edici etkileri, PL'nin HEAC'ler üzerindeki doğrudan bir etkisi olarak kabul edilebilir, verilerimiz hem (doğrudan ve dolaylı) etkilerin söz konusu olduğunu göstermektedir. Bu nedenle, (i) PL'siz meme kanseri hücrelerinden koşullandırılmış ortam, endotel hücrelerinin kılcal morfogenezini önemli ölçüde arttırdı, bu da proanjiyojenik faktörün meme kanseri hücrelerinden salındığını düşündürdü, (ii) PL'nin kendisinin yanı sıra PL ile baskılanmış kılcal morfogenez içeren şartlandırılmış ortam ve (iii) ) meme kanseri hücrelerinden VEGF salgılanması PL tarafından inhibe edilmiştir. Gözlemimizle uyumlu olarak, son zamanlarda çeşitli kanser hücrelerinden salgılanan VEGF'nin inhibisyonu yoluyla endotelyal kapiller morfogenezin baskılanması tarif edilmiştir ( (ii) PL'nin kendisi ve ayrıca PL'yi baskılayan kılcal morfogenezi içeren şartlandırılmış ortam ve (iii) VEGF'nin meme kanseri hücrelerinden salgılanması PL tarafından inhibe edildi. Gözlemimizle uyumlu olarak, son zamanlarda çeşitli kanser hücrelerinden salgılanan VEGF'nin inhibisyonu yoluyla endotelyal kapiller morfogenezin baskılanması tarif edilmiştir ( (ii) PL'nin kendisi ve ayrıca PL'yi baskılayan kılcal morfogenezi içeren şartlandırılmış ortam ve (iii) VEGF'nin meme kanseri hücrelerinden salgılanması PL tarafından inhibe edildi. Gözlemimizle uyumlu olarak, son zamanlarda çeşitli kanser hücrelerinden salgılanan VEGF'nin inhibisyonu yoluyla endotelyal kapiller morfogenezin baskılanması tarif edilmiştir (Fukumoto ve diğerleri, 2005 ; Stanley ve diğerleri, 2005 ; Jang ve diğerleri, 2007 ; Kong ve diğerleri, 2007 ). Bu nedenle, kanser hücreleri içinde spesifik pro-anjiyogenik proteinin inhibisyonu, tüm kanser mikro-ortamını (farklı hücreler içeren) etkileyecek ve nihayetinde tümör anjiyogenezinin baskılanması ile sonuçlanacaktır.

Uygun moleküler kanser hedeflerinden biri, meme kanseri hücrelerindeki inhibisyonun hücre döngüsü durması, büyüme ve koloni oluşumunun inhibisyonu, göçün inhibisyonu, istila ve anjiyogenezin baskılanması ile sonuçlanan AKT kinazdır ( Das ve diğerleri, 2003 ; Yacoub ve diğerleri, 2003 ; Jiang ve diğerleri, 2004a ; Basu ve diğerleri, 2005 ; Fukumoto ve diğerleri, 2005 ; Jallal ve diğerleri, 2007 ). ^{Verilerimiz, PL'nin, Thr 308} ve Ser ^473'te AKT fosforilasyonunun inhibisyonu yoluyla AKT aktivitesini baskıladığını açıkça göstermektedir.yüksek düzeyde yapısal olarak aktif AKT sergileyen MDA-MB-231 hücrelerinde. Ayrıca, AKT'nin LY294002 ve daha spesifik AKT inhibitörü III ile inhibisyonu, meme kanseri hücrelerinden VEGF salgılanmasını baskılayarak endotelyal hücrelerin kılcal morfogenezinin azalmasına neden oldu. Gözlemimiz, AKT'ye karşı siRNA kullanarak yumurtalık kanseri hücrelerinde VEGF ekspresyonunun aşağı regülasyonunu ve CAM civciv embriyo deneyinde anjiyogenezin inhibisyonunu gösteren Xia ve diğerleri (2006) ile uyumludur .

Sonuç olarak, çalışmamız PL'nin invaziv meme kanserlerinin tedavisi için düşünülebilecek, antiproliferatif, antimetastatik ve anti-anjiyojenik etkilere sahip doğal bir bileşik olduğunu düşündürmektedir. Bununla birlikte, bu antikanser etkilerini in vivo doğrulamak ve değerlendirmek için daha fazla çalışma gereklidir .Tarihi değiştir

16 Kasım 2011

Bu belge, ilk yayından 12 ay sonra, yayında belirtildiği gibi Creative Commons lisans koşullarına geçmek için değiştirilmiştir.

Referanslar

Basu GD, Pathangey LB, Tinder TL, Gendler SJ, Mukherjee P (2005) Siklo-oksijenaz-2 inhibitörü selekoksibin insan meme kanseri hücrelerinde büyüme engelleyici etkilerinin altında yatan mekanizmalar. Meme Kanseri Res 7 : R422–R435

CAS Madde Google Akademik
Bissell MJ (2007) Meme kanseri ve istilasının moleküler mekanizmalarının modellenmesi: normal bezden alınan dersler. Biochem Soc Trans 35 : 18–22

CAS Madde Google Akademik
Blasi F, Carmeliet P (2002) uPAR: çok yönlü bir sinyal düzenleyici. Nat Rev Mol Hücre Biol 3 : 932–943

CAS Madde Google Akademik
Carraway III KL, Sweeney C (2006) ErbB2'nin neden olduğu meme tümörü ilerlemesinde birlikte seçilen integrin sinyali. Kanser Hücresi 10 : 93-95

CAS Madde Google Akademik
Chihara G, Maeda Y, Hamuro J, Sasaki T, Fukuoka F (1969) Lentinus edodes (Berk.) kaynaklı polisakkaritler tarafından fare sarkomunun engellenmesi 180. Doğa 222 : 687–688

CAS Madde Google Akademik
Collins L, Zhu T, Guo J, Xiao ZJ, Chen CY (2006) Phellinus linteus , prostat kanserinde doksorubisinin neden olduğu apoptozu hassaslaştırır. Br J Kanser 95 : 282–288

CAS Madde Google Akademik
Dai YC, Xu MQ (1998) Tıbbi polipor, Phellinus baumii ve akrabası P. linteus . Mikotakson 67 : 191–200

Google Akademik
Das R, Mahabeleshwar GH, Kundu GC (2003) Osteopontin, meme kanseri hücrelerinde fosfatidilinositol 3-kinaz/Akt sinyal yolakları yoluyla ürokinaz tipi plazminojen aktivatörünün hücre hareketliliğini ve nükleer faktör kappaB aracılı salgılanmasını uyarır. J Biol Chem 278 : 28593–28606

CAS Madde Google Akademik
Dillon RL, White DE, Muller WJ (2007) Fosfatidil inositol 3-kinaz sinyal ağı: insan meme kanseri için çıkarımlar. Onkogen 26 : 1338-1345

CAS Madde Google Akademik
Ekholm SV, Reed SI (2000) Memeli hücre döngüsünde G(1) sikline bağımlı kinazların düzenlenmesi. Curr Opin Cell Biol 12 : 676–684

CAS Madde Google Akademik
Folkman J (1995) Kanser, vasküler, romatoid ve diğer hastalıklarda anjiyogenez. Nat Med 1 : 27–31

CAS Madde Google Akademik
Freedman VH, Shin SI (1974) Çıplak farelerde hücresel tümörijenite: yarı katı ortamda hücre büyümesi ile korelasyon. Hücre 3 : 355–359

CAS Madde Google Akademik
Fukumoto S, Morifuji M, Katakura Y, Ohishi M, Nakamura S (2005) Endostatin, tümör hücrelerinde vasküler endotelyal büyüme faktörü C ekspresyonunun aşağı regülasyonu yoluyla lenf nodu metastazını inhibe eder. Clin Exp Metastaz 22 : 31–38

CAS Madde Google Akademik
Guo J, Zhu T, Collins L, Xiao ZX, Kim SH, Chen CY (2007) Phellinus Linteus tarafından akciğer kanseri büyüme durması ve apoptoz modülasyonu . Mol Kanserojen 46 : 144–154

CAS Madde Google Akademik
Han SB, Lee CW, Jeon YJ, Hong ND, Yoo ID, Yang KH, Kim HM (1999) Phellinus linteus'tan izole edilen polisakkaritlerin tümör büyümesi ve metastaz üzerindeki inhibitör etkisi. İmmünofarmakoloji 41 : 157-164

CAS Madde Google Akademik
Harvey K, Siddiqui RA, Sliva D, Garcia JGN, English D (2002) İnsan mikrovasküler endotelyal hücre morfogenezinde yer alan serum faktörleri. J Lab Clin Med 140 : 188–198

CAS Madde Google Akademik
Jallal H, Valentino ML, Chen G, Boschelli F, Ali S, Rabbani SA (2007) Bir Src/Abl kinaz inhibitörü, SKI-606, in vitro ve in vivo meme kanseri istilasını, büyümesini ve metastazı bloke eder . Yengeç Res 67 : 1580–1588

CAS Madde Google Akademik
Jang YJ, Kim DS, Jeon OH, Kim DS (2007) Saxatilin, NCI-H460 insan akciğer kanseri hücrelerinde VEGF ekspresyonunu düzenleyerek tümör kaynaklı anjiyogenezi baskılar. J Biochem Mol Biol 40 : 439–443

CAS PubMed Google Akademik
Jemal A, Siegel R, Ward E, Murray T, Xu J, Thun MJ (2007) Kanser istatistikleri, 2007. CA Cancer J Clin 57 : 43–66

Madde Google Akademik
Jiang J, Slivova V, Harvey K, Valachovicova T, Sliva D (2004a) Ganoderma lucidum , Akt/NF-kappaB sinyalinin inhibisyonu yoluyla meme kanseri hücrelerinin büyümesini bastırır. Nutr Kanser 49 : 209-416

CAS Madde Google Akademik
Jiang J, Slivova V, Valachovicova T, Harvey K, Sliva D (2004b) Ganoderma lucidum , insan prostat kanseri hücrelerinde PC-3 proliferasyonu inhibe eder ve apoptozu indükler. Int J Oncol 24 : 1093–1099

CAS PubMed Google Akademik
Kong D, Li Y, Wang Z, Banerjee S, Sarkar FH (2007) 3,3′-diindolilmetan tarafından anjiyogenez ve istilanın engellenmesine, vasküler biyoyararlanımı düzenleyen nükleer faktör-kappaB aşağı akış hedef genleri MMP-9 ve uPA aracılık eder. prostat kanserinde endotel büyüme faktörü. Yengeç Res 67 : 3310–3319

CAS Madde Google Akademik
Kim BC, Choi JW, Hong HY, Lee SA, Hong S, Park EH, Kim SJ, Lim CJ (2006) Heme oksijenaz-1 , LPS ile uyarılan RAW264.7 makrofajlarında mantar Phellinus linteus'un anti-inflamatuar etkisine aracılık eder . J Ethnopharmacol 106 : 364-371

Madde Google Akademik
Kim HM, Han SB, Oh GT, Kim YH, Hong DH, Hong ND, Yoo ID (1996) Mantar Phellinus linteus'tan polisakkarit ile hümoral ve hücre aracılı bağışıklığın uyarılması . Int J Immunopharmac 18 : 295–303

CAS Madde Google Akademik
Kim GY, Oh YH, Park YM (2003a) Phellinus linteus'tan izole edilen asidik polisakkarit , protein tirozin kinaz ve protein kinaz C yoluyla makrofajların nitrik oksit aracılı tümör öldürücü aktivitesini indükler. Biochem Biophys Res Commun 309 : 399–407

CAS Madde Google Akademik
Kim GY, Park HS, Nam BH, Lee SJ, Lee JD (2003b) Phellinus linteus (Berk. & MA Curtis) Teng'in meyve veren gövdesinden asidik proteo-heteroglikanın saflaştırılması ve karakterizasyonu . Bioresour Technol 89 : 81–87

CAS Madde Google Akademik
Kim GY, Park SK, Lee MK, Lee SH, Oh YH, Kwak JY, Yoon S, Lee JD, Park YM (2003c) Phellinus linteus'tan izole edilen proteoglikan , protein kinaz C ve protein tirozin kinaz yoluyla murin B lenfositlerini aktive eder. Int Immunopharmacol 3 : 1281–1292

CAS Madde Google Akademik
Lee HJ, Lee HJ, Lim ES, Ahn KS, Shim BS, Kim HM, Gong SJ, Kim DK, Kim SH (2005) Kamboçyalı Phellinus linteus , ürokinaz tipi plazminojen aktivatörünün düzenlenmesi yoluyla farelerde melanom hücrelerinin deneysel metastazını engeller. Biol Ecz Boğa 28 : 27–31

CAS Madde Google Akademik
Lloyd Jr FP, Slivova V, Valachovicova T, Sliva D (2003) Aspirin oldukça invaziv prostat kanseri hücrelerini inhibe eder. Int J Oncol 23 : 1277–1283

CAS PubMed Google Akademik
Lloyd RV, Erickson LA, Jin L, Kulig E, Qian X, Cheville JC, Scheithauer BW (1999) p27kip1: insan kanserlerinde prognostik önemi olan çok işlevli bir sikline bağımlı kinaz inhibitörü. Ben J Pathol 154 : 313-323

CAS Madde Google Akademik
Macri E, Loda M (1999) Prostat karsinogenezinde p27'nin rolü. Kanser Metastazı Rev 17 : 337-344

CAS Madde Google Akademik
Mi Z, Guo H, Wai PY, Gao C, Kuo PC (2006) İntegrin bağlantılı kinaz, murin meme epitelyal kanser hücrelerinde metastatik fonksiyonu iletmek için osteopontine bağımlı MMP-2 ve uPA ekspresyonunu düzenler. Karsinojenez 27 : 1134-1145

CAS Madde Google Akademik
Park SK, Kim GY, Lim JY, Kwak JY, Bae YS, Lee JD, Oh YH, Ahn SC, Park YM (2003) Phellinus linteus'tan izole edilen asidik polisakkaritler , murin dendritik hücrelerinin fenotipik ve fonksiyonel olgunlaşmasını indükler. Biochem Biophys Res Commun 312 : 449–458

CAS Madde Google Akademik
Price JT, Bonovich MT, Kohn EC (1997) Kanser yayılımının biyokimyası. Crit Rev Biochem Mol Biol 32 : 175–253

CAS Madde Google Akademik
Punglia RS, Morrow M, Winer EP, Harris JR (2007) Meme kanserinde lokal tedavi ve sağkalım. N Engl J Med 356 : 2399–2405

CAS Madde Google Akademik
Sherr CJ (1966) Kanser hücre döngüleri. Bilim 274 : 1672-1677

Madde Google Akademik
Sherr CJ, Roberts JM (1999) CDK inhibitörleri: G1-faz ilerlemesinin pozitif ve negatif düzenleyicileri. Genler Dev 13 : 1501–1512

CAS Madde Google Akademik
Shishodia S, Sethi G, Ahn KS, Aggarwal BB (2007) Guggulsterone, tümör hücresi proliferasyonunu inhibe eder, S-fazı durmasını indükler ve c-Jun N-terminal kinazın aktivasyonu, Akt yolunun baskılanması ve antiapoptotik genin aşağı regülasyonu yoluyla apoptozu teşvik eder. Ürün:% s. Biochem Pharmacol 74 : 118–130

CAS Madde Google Akademik
Slingerlan J, Pagano M (2000) Cdk inhibitörünün düzenlenmesi ve kanserde deregülasyonu. J Cell Physiol 183 : 10–17

Madde Google Akademik
Sliva D, Harvey K, Mason R, Lloyd Jr F, English D (2001) Fosfatidik asidin doksorubisine maruz kalan insan meme kanseri hücreleri üzerindeki etkisi. Cancer Invest 19 : 781–788

Madde Google Akademik
Sliva D, Labarrere C, Slivova V, Sedlak M, Lloyd Jr FP, Ho NWY (2002a) Ganoderma lucidum , oldukça invaziv meme ve prostat kanseri hücrelerinin hareketliliğini bastırır. Biochem Biophys Res Commun 298 : 603-612

CAS Madde Google Akademik
Sliva D, Rizzo MT, English D (2002b) Phosphatidylinositol 3-kinaz ve NF- κ B, ürokinaz tipi plazminojen aktivatörünün (uPA) salgılanmasıyla invaziv MDA-MB-231 insan meme kanseri hücrelerinin hareketliliğini düzenler. J Biol Kimya 277 : 3150–3157

CAS Madde Google Akademik
Slivova V, Valachovicova T, Jiang J, Sliva D (2004) Ganoderma lucidum meme kanseri hücresinin istilasını engeller. J Cancer Integr Med 2 : 25–30

Google Akademik
Slivova V, Zaloga G, DeMichele SJ, Mukerji P, Huang YS, Siddiqui R, Harvey K, Valachovicova T, Sliva D (2005) Yeşil çay polifenolleri, ürokinaz plazminojen aktivatörünün (uPA) salgılanmasını modüle eder ve meme kanseri hücrelerinin istilacı davranışını engeller. Nutr Kanser 52 : 65-72

Madde Google Akademik
Song KS, Cho SM, Lee JH, Kim HM, Han SB, Ko KS, Yoo ID (1995) Mantar Phellinus linteus'tan B-lenfosit uyarıcı polisakkarit . Kimya Eczacı Boğası (Tokyo) 43 : 2105–2108

CAS Madde Google Akademik
Song YS, Kim SH, Sa JH, Jin C, Lim CJ, Park EH (2003) Mantar Phellinus linteus'un anti-anjiyojenik, antioksidan ve ksantin oksidaz inhibisyon aktiviteleri . J Ethnopharmacol 88 : 113–116

Madde Google Akademik
Stanley G, Harvey K, Slivova V, Jiang J, Sliva D (2005) Ganoderma lucidum , prostat kanseri hücrelerinden VEGF ve TGF-beta1 salgılanmasının inhibisyonu yoluyla anjiyogenezi baskılar. Biochem Biophys Res İletişimi 330 : 46–52

CAS Madde Google Akademik
Tan P, Cady B, Wanner M, Worland P, Cukor B, Magi-Galluzzi C, Lavin P, Draetta G, Pagano M, Loda M (1997) Hücre döngüsü inhibitörü p27, küçük (T1a,b) bağımsız bir prognostik belirteçtir. ) invaziv meme karsinomları. Yengeç Res 57 : 1259–1263

CAS PubMed Google Akademik
Tripathy D (2007) Kapesitabin, metastatik meme kanseri tedavisinde yeni hedeflenen ajanlarla kombinasyon halinde: altında yatan mantık ve klinik çalışmaların sonuçları. Onkolog 12 : 375–389

CAS Madde Google Akademik
Wasser SP (2002) Antitümör ve immünomodülatör polisakkaritlerin kaynağı olarak tıbbi mantarlar. Appl Microbiol Biotechnol 60 : 258–274

CAS Madde Google Akademik
Wong NC, Mueller BM, Barbas CF, Ruminski P, Quaranta V, Lin EC, Smith JW (1998) Alphav integrinleri meme karsinomu hücre hatlarının yapışmasına ve göçüne aracılık eder. Clin Exp Metastaz 16 : 50–61

CAS Madde Google Akademik
Woodgett JR (2005) Protein kinaz B sinyal yolundaki son gelişmeler. Curr Opin Cell Biol 17 : 150–157

CAS Madde Google Akademik
Yacoub A, Han SI, Caron R, Gilfor D, Mooberry S, Grant S, Dent P (2003) Meme karsinomu hücrelerinin Taxotere ve MEK1/2 inhibitörü U0126'ya diziye bağlı olarak maruz kalması, in vitro hücre ölümünün artmasına neden olur . Yengeç Biol Ther 2 : 670–676

CAS PubMed Google Akademik
Xia C, Meng Q, Cao Z, Shi X, Jiang BH (2006) VEGF ekspresyonu yoluyla p110 alfa ve AKT1 ile anjiyogenez ve tümör büyümesinin düzenlenmesi. J Cell Physiol 209 : 56-66

CAS Madde Google Akademik
Zhang Y, Wang Z, Ahmed F, Banerjee S, Li Y, Sarkar FH (2006) Jagged-1'in aşağı regülasyonu, prostat kanseri hücrelerinde hücre büyümesinin inhibisyonuna ve S fazı durmasına neden olur. Int J Kanser 119 : 2071–2077

CAS Madde Google Akademik
Zhu T, Guo J, Collins L, Kelly J, Xiao ZJ, Kim SH, Chen CY (2007) Phellinus linteus , prostat kanseri hücrelerinde apoptozu indüklemek için farklı yolları aktive eder. Br J Kanser 96 : 583–590

CAS Madde Google Akademik

Referansları indirTeşekkür

Bu çalışma, Metodist Sağlık Vakfı, Ordu Tıbbi Araştırma ve Malzeme Komutanlığı, Meme Kanseri Araştırma Eğitim Programı Departmanı ve Maitake Products Inc. tarafından desteklenmiştir.Yazar bilgileri

Bağlantılar

Kanser Araştırma Laboratuvarı, Metodist Araştırma Enstitüsü, 1800 N Capitol Ave, E504, Indianapolis, 46202, IN, ABD

D Sliva, A Jedinak, J Kawasaki, K Harvey & V Slivova
Tıp Departmanı, Indiana Üniversitesi, Indianapolis, IN, ABD

D Silva
Indiana Üniversitesi Simon Kanser Merkezi, Tıp Fakültesi, Indiana Üniversitesi, Indianapolis, IN, ABD

D Silva

Sorumlu yazar

D Sliva'nın fotoğrafı .Haklar ve izinler

Orijinal yayımlanmasından on iki ay sonra, bu çalışma Creative Commons Atıf-GayriTicari-Benzer Paylaşım 3.0 Aktarılmamış Lisansı altında lisanslanmıştır. Bu lisansın bir kopyasını görüntülemek için http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ adresini ziyaret edin.

Yeniden Baskılar ve İzinlerBu makale hakkında

Bu makaleden alıntı yap
Sliva, D., Jedinak, A., Kawasaki, J. et al. Phellinus linteus , AKT sinyalinin inhibisyonu yoluyla meme kanseri hücrelerinin büyümesini, anjiyogenezisini ve istilacı davranışını baskılar. Br J Cancer 98, 1348-1356 (2008). https://doi.org/10.1038/sj.bjc.6604319

Alıntıyı indir

revize21 Şubat 2008
Kabul edilmiş27 Şubat 2008
Yayınlanan25 Mart 2008
Düzenleme tarihi22 Nisan 2008
DOIhttps://doi.org/10.1038/sj.bjc.6604319

Bu makaleyi paylaş

Aşağıdaki bağlantıyı paylaştığınız herkes bu içeriği okuyabilir:
Paylaşılabilir bağlantı alın
Springer Nature SharedIt içerik paylaşım girişimi tarafından sağlanmıştır anahtar kelimeler

Phellinus linteus
istilacılık
damarlanma
AKT

daha fazla okuma

Phellinus linteus polisakkaritinin tiroid karsinomunda anti-tümör etkisinin in vitro olarak sistematik olarak değerlendirilmesi
- Kun Yu
- Zhuo Tan
- Ying Xin
Moleküler Biyoloji Raporları (2022)
Sanghuangporus sanghuang mantarı ile fermente edilmiş yedi tip tahılın besin profilleri, fonksiyonel bileşimleri ve antioksidan aktiviteleri
- çınlayan şarkı
- Zuofa Zhang
- Weiming Cai
Gıda Bilimi ve Teknolojisi Dergisi (2021)
Phelligridin LA'nın Inonotus baumii tarafından entegre bir fermantasyon-ayırma süreci ile yüksek verimli üretimi
- Tianwen Wang
- hui li
- Hu Zhu
Biyoproses ve Biyosistem Mühendisliği (2020)
Inonotus baumii'nin fermantasyon suyundan makro gözenekli reçine ile antioksidan Phelligridin LA'nın etkili izolasyonu
- Tianwen Wang
- Shiwei Güneşi
- Hu Zhu
Biyoproses ve Biyosistem Mühendisliği (2020)
BreastDefend, in vitro ve in vivo olarak östrojen reseptörü pozitif insan meme kanserinde tamoksifenin etkisini artırır
- Shujie Cheng
- Victor Castillo
- Daniel Sliva
BMC Tamamlayıcı ve Alternatif Tıp (2017)

PDF İndir

Bölümler
rakamlar
Referanslar

Reklamcılık
İngiliz Kanser Dergisi ( Br J Cancer )

***maturidi*** · 27 January 2022, 16:40

Tıbbi bir mantar: Phellinus linteus

Tongbo Zhu¹, Sung Hoon Kim , Chang-Yan Chen
Bağlantılar genişletmek

PMID: 18537612
DOI: 10.2174/092986708784534929

Soyut

Phellinus Linteus (Berkeley & MA Curtis) Teng (PL), doğu ülkelerinde gastroenterik disfonksiyon, ishal, kanama ve kanser gibi çeşitli rahatsızlıkları önlemek için yüzyıllardır uygulanan tıbbi bir mantardır. Asya geleneksel ilaçlarını batı tarafından kabul edilen tedavilere dönüştürmek için bilim adamları, meyve gövdelerinden veya PL miselyumlarından elde edilen ekstraktların sadece hormonal ve hücre aracılı bağışıklık fonksiyonunu uyarmakla kalmadığını ve çeşitli hastalıkların neden olduğu inflamatuar reaksiyonları bastırdığını göstermiştir. uyaranlara değil, aynı zamanda tümör büyümesini ve metastazı da baskılar. Farklı araştırma gruplarından elde edilen artan kanıtlar, PL'nin bir dizi murin ve insan karsinomunda normal muadillerine karşı ölçülebilir toksik etkilere neden olmadan apoptozu indüklediğini göstermiştir. Son günlerde, araştırmalar, PL'nin anti-tümör etkisine ve özellikle bazı geleneksel kemoterapötik ilaçları geliştirme kabiliyetine odaklanmıştır. Bu çalışmalar, PL'nin alternatif bir antikanser ajanı veya mevcut antitümör ilaçlar için bir sinerjer olarak umut verici bir aday olduğunu göstermektedir. Bundan sonra, PL'nin potensinin ve onun anti-tümör fonksiyonunun altında yatan mekanizmaların aydınlatılmasındaki mevcut ilerlemeyi özetleyeceğiz. PL'den biyolojik olarak aktif bileşenlerin fraksiyonlanması ve tanımlanması da kısaca tanıtılmaktadır. PL'nin potensinin ve onun anti-tümör fonksiyonunun altında yatan mekanizmaların aydınlatılmasındaki mevcut ilerlemeyi özetliyoruz. PL'den biyolojik olarak aktif bileşenlerin fraksiyonlanması ve tanımlanması da kısaca tanıtılmaktadır. PL'nin potensinin ve onun anti-tümör fonksiyonunun altında yatan mekanizmaların aydınlatılmasındaki mevcut ilerlemeyi özetliyoruz. PL'den biyolojik olarak aktif bileşenlerin fraksiyonlanması ve tanımlanması da kısaca tanıtılmaktadır.

***maturidi*** · 27 January 2022, 16:53

hellinus linteus Sang Hwang

tarafından Sara | 2 Nis 2016 | Alternatif Tıp , Sağlık Desteği , Takviyeler | 0 Yorum

PHELLİNUS LİNTEUS SANG HWANG

TIBBİ MANTAR

İkinci bir şans verilmeyen tüm hareketsiz köpeklerin anılarında

Ana Sayfa | Phellinus linteus Sang Hwang PHELLİNUS LİNTEUS SANG HWANG

Phellinus linteus (Japonca "meshimakobu", Çince "song gen", Korece "sanghwang", İngilizce "Meshima", Amerikan İngilizcesi "siyah tırnak mantarı") Japonya, Kore ve Çin'de çok çeşitli hastalıkları önlemek için yüzyıllardır kullanılan tıbbi bir mantardır. Gastroenterik disfonksiyon, ishal, kanama ve kanserler gibi. Toynak şeklindedir, acı bir tada sahiptir ve vahşi doğada dut ağaçlarında yetişir. Sapın rengi koyu kahverengiden siyaha kadar değişir. Kore geleneksel tıbbında mantar, sıcak çay şeklinde tüketilir.

Erken araştırmalar, Phellinus linteus'un meme kanseri karşıtı aktiviteye sahip olduğunu ileri sürdü.

Harvard Tıp Okulu tarafından yayınlanan bir makale, Phellinus linteus'un umut verici bir kanser önleyici ajan olduğunu, ancak kanser karşıtı etkinliğinin arkasındaki mekanizmaları anlamak için daha fazla araştırmaya ihtiyaç olduğunu bildirdi.

Dokuz bileşik, meyve veren gövdenin aktif etilasetat fraksiyonundan izole edildi ve protokateşik asit, protokatekuldehit, kafeik asit, ellagik asit, hispidin, davallialakton, hipolomin B, interfunginler A ve inoscavin A olarak tanımlandı ve bunların interfungins A, protein glikasyonunun güçlü bir inhibitörüdür. .

Phellinus linteus'un meyve gövdelerinden veya miselyumundan elde edilen özler, hormonal ve hücre aracılı bağışıklık fonksiyonunu uyarır; çeşitli uyaranların neden olduğu inflamatuar reaksiyonları söndürür ve tümör büyümesini ve metastazı bastırır. PHELLİNUS LİNTEUS SANG HWANG

ALTERNATİF BİR KANSER TEDAVİSİ

Batı ülkelerinde çok çeşitli bitkisel ürünler içeren beslenme/diyet takviyeleri ile alternatif kanser tedavisi yükselişte. Son epidemiyolojik araştırmalar, mantarların farklı kanser türlerine karşı koruyucu olabileceğini öne sürdü. Phellinus linteus, immünomodülatör veya doğrudan antitümör aktiviteleri dahil olmak üzere çeşitli biyolojik aktivitelere sahip, iyi bilinen bir Doğu tıbbi mantarıdır. P. linteus ve özütlerinin aktivitesi, polisakkaritlerin, bunların peptit/protein komplekslerinin ve diğer düşük moleküler ağırlıklı komplekslerin varlığı ile ilişkilidir.

P. linteus'tan izole edilen polisakkarit fraksiyonlarının, makrofajlar ve B-hücreleri tarafından sitokin üretimi veya doğal öldürücü hücrelerin artan sitotoksik aktivitesi gibi bağışıklık hücrelerinin artan aktivitesi ile ilişkili olduğu bulundu. Ayrıca, P. linteus'un hücre proliferasyonu, apoptoz, anjiyogenez, istilacı davranış ve kemoprevention ile ilgili çeşitli genlerin ekspresyonunu veya aktivitesini modüle ettiği bulundu. Son olarak, P. linteus özütleri, üç bağımsız vaka raporunda tümör gerilemesi gösterdi; bu, P. linteus'tan bir özütün veya P. linteus'tan özütü temel alan bir diyet takviyesinin, kanserin alternatif tedavisi için potansiyel kullanıma sahip olabileceğini düşündürmektedir.

1. GİRİŞ

Tamamlayıcı ve alternatif tıbbın (CAM) popülaritesi kanser hastaları arasında giderek artmaktadır ve TAT ABD'de en hızlı büyüyen tedavi yöntemlerinden birini temsil etmektedir. En yaygın olarak kullanılan TAT, akupunktur, zihin-beden yaklaşımları ve diyet takviyelerini içerir. Spesifik olarak, kanser hastaları arasında TAT kullanımı dünya çapında %30 ile %75 arasında değişmektedir ve diyet yaklaşımlarını, bitkisel ve diğer biyolojik temelli tedavileri içermektedir. Örneğin, bitkisel tedaviler her yıl ABD nüfusunun %12'sinden fazlası tarafından kullanılmaktadır ve bu da yıllık 5 milyar doların üzerinde cepten harcama yapılmasına neden olmaktadır. Hastalar arasında beslenme/diyet takviyeleri ile alternatif kanser tedavilerinin popülaritesine rağmen, bazen anekdotik kanıtlara dayanarak, CAM tedavileri birçok durumda 'sahte bilim' olarak etiketlenir. Öyleyse,

Popüler, yaygın olarak kullanılan bazı diyet takviyeleri, kurutulmuş mantarlara veya mantar özlerine dayanmaktadır. Özellikle, Asya'dan yakın zamanda yapılan üç epidemiyolojik çalışma, mantar alımı ile sırasıyla mide, gastrointestinal ve meme kanseri arasında ters bir ilişki olduğunu göstermiştir. Mantarların antikanser aktiviteleri, genellikle, ağırlıklı olarak β-glukanlar olmak üzere polisakkaritler tarafından bağışıklık sisteminin uyarılmasıyla ilişkilendirilmiştir. Öte yandan mantarlar mineraller, vitaminler (örneğin, tiamin, riboflavin, askorbik asit ve D vitamini), amino asitler ve diğer organik bileşikleri içerir. 2. PHELLİNUS LİNTEUS

Tıbbi mantar Phellinus linteus (Berk. et Curt.) Aoshima (Japonca 'meshimakobu'), Japonya, Çin ve Kore'de geleneksel Doğu tıbbında kullanılmıştır. Turuncu/sarı renkli mantar P. linteus (PL), çoğunlukla tropikal bölgelerde yetişen bilinen 220 Phellinus türünden oluşan Hymenochaetaceae basidiomycetes'e ait, dut ağacı (Morus) üzerinde seçici olarak parazit olan çok yıllık bir mantardır. 40 yıldan fazla bir süre önce, Japonya'da yapılan orijinal bir çalışma, PL'nin diğer mantarlara kıyasla en güçlü antitümör etkilerine sahip olduğunu gösterdi. Daha önce bildirildiği gibi, PL ayrıca immünomodülatör, anti-inflamatuar, anti-alerjik, anti-anjiyojenik ve anti-oksidan etkiler gösterir. Bu biyolojik etkilerin izole polisakkaritler, proteoglikanlar ve hispolon gibi diğer organik bileşiklerle ilişkili olduğu bulundu. kafeik asit, davallialakton, interfungins A ve inoscavin A . Bu nedenle, PL'den izole edilmiş bileşikler veya kompleks ekstreler, çeşitli kanser hücrelerinde sinyal yollarının spesifik inhibisyonunu gösterir. 3. İZOLE EDİLMİŞ BİLEŞİKLERİN ANTİKANSER AKTİVİTESİ

P. linteus'tan (PLP) izole edilen polisakaritler , implante edilmiş B16F10 melanom hücreleri bulunan farelerin hayatta kalma süresini önemli ölçüde uzatmıştır. Ayrıca, PLP tümör büyümesini inhibe etti ve pulmoner metastaz sıklığını azalttı. Özellikle, PLP kanser hücreleri için doğrudan toksik değildi ve mekanizmasının bağışıklık tepkisinin uyarılması yoluyla olduğu öne sürüldü. Bu nedenle PLP, toksisitesi olmayan doğal bir immünoterapötik ajan olarak hastalara önerilmiştir. P. linteus'tan izole edilen asit polisakaritinin immünomodülatör etkileri(APPL), murin peritoneal makrofajlarında artan nitrik oksit (NO) üretimi ve tümör öldürücü aktivite ile ilişkilendirilmiştir. Ek olarak genistein ve staurosporin, makrofajlarda APPL'ye yanıt olarak NO üretimini ve tümör öldürücü aktiviteyi bloke etti, bu da APPL'nin makrofajlarda protein tirozin kinaz (PTK) ve/veya protein kinaz C (PKC) sinyalini etkinleştirdiğini düşündürdü. Başka bir çalışmada APPL, hücre yapışması ve istilasının doğrudan inhibisyonu yoluyla farelerde melanom hücrelerinin metastazını belirgin şekilde bastırdı. Bununla birlikte, APPL hücre büyümesini etkilemedi, bu, APPL'nin antimetastatik özelliklerinin, immünomodülasyon ve hücre yapışmasının doğrudan inhibisyonu yoluyla aracılık ettiğini öne sürdü.

%39.3 polisakkarit ve %49.4 proteinden oluşan P. linteus mycelia'dan izole edilen protein-glukan kompleksinin (PGC) oral uygulaması farelerde S-180 sarkomlarının büyümesini baskılasa da, PGC aktivitesinin mekanizması belirlenmemiştir. P. linteus'tan ekstrakte edilen polisakkarit-protein kompleksi (PPC) , murin splenositlerinde B hücrelerinin proliferasyonunun uyarılması ve interlökin (IL)-1β, IL-6 ve tümör nekroz faktörü- üretiminin indüklenmesi yoluyla immünomodülatör etkiler göstermiştir. α (TNF-α) peritoneal makrofajlarda. Ayrıca, PPC, NO salgılanmasıyla makrofaj aracılı tümör öldürücü aktiviteyi yukarı regüle etti ve doğal öldürücü (NK) hücre sitotoksisitesini arttırdı. Öte yandan, izole edilen proteine bağlı polisakkarit (PBP)P. linteus , kanser hücreleri üzerinde doğrudan bir etki göstermiştir. Böylece PBP, SW480 insan kolon kanseri hücrelerinin çoğalmasını ve koloni oluşumunu bastırdı. PBP tarafından hücre büyümesinin inhibisyonuna, G2/M fazında hücre döngüsü durması aracılık etti ve hücre döngüsü düzenleyici protein siklin B1'in ekspresyonunun aşağı regülasyonu ile ilişkilendirildi. Ayrıca PBP, kolon kanseri hücrelerinin apoptozunu indükledi ve bu etki, Bcl-2'de bir azalma ve sitokrom c salınımında bir artışla ilişkilendirildi.

Polisakkaritlerin ve bunların komplekslerinin antikanser aktivitelerine ek olarak, izole edilmiş düşük moleküler ağırlıklı bileşikler, çeşitli kanser hücreleri üzerinde spesifik etkiler sergilemiştir. P. linteus'tan izole edilen hispoloninsan epidermoid KB hücre proliferasyonunun doza bağlı inhibisyonunu göstermiştir. Ayrıca, KB hücrelerinin hispolon kaynaklı apoptozu, karakteristik DNA merdivenlenmesi ve hücre döngüsünün alt G1 fazında tutuklanan hücrelerin artan miktarı ile ilişkilendirildi. Bu apoptotik olaylara mitokondriyal membran potansiyelinin çökmesi, sitokrom c'nin salınması ve kaspaz-3'ün aktivasyonu eşlik etti, bu da hispolonun mitokondri aracılı apoptotik yol yoluyla epidermoid hücrelerin hücre ölümünü spesifik olarak indüklediğini düşündürdü. Yakın zamanda gösterildiği gibi, hispolon, bu hücrelerdeki tümör baskılayıcı p53 durumundan bağımsız olarak meme ve mesane kanseri hücrelerinin proliferasyonunu inhibe etti ve apoptozunu indükledi. Hücre büyümesinin inhibisyonuna, sikline bağımlı kinaz inhibitörü p21'in ekspresyonunun yukarı regülasyonu yoluyla G2/M fazında hücre döngüsü durması aracılık etti, oysa apoptoz ERK1 / 2'ye bağlı kaspaz-7 ve PARP indüksiyonuna bağlandı. meme ve mesane kanseri hücrelerinde. Özellikle, hispolon, MDM2 proto-onkogeninin ekspresyonunu, kanser tedavisi için hispolon kullanımını düşündüren ERK1 / 2 aracılı MDM2 ubiquitination yoluyla aşağı regüle etti. Son zamanlarda, izole edilmiş phelifuropyranone A ve meshimakobnol A ve B, fare melanomu ve insan akciğer kanseri hücrelerine karşı antiproliferatif aktivite göstermiştir. hispolon, MDM2 proto-onkogeninin ekspresyonunu ERK1 / 2 aracılı MDM2 ubiquitination yoluyla aşağı regüle etti ve bu da hispolonun kanser tedavisi için kullanıldığını düşündürdü. Son zamanlarda, izole edilmiş phelifuropyranone A ve meshimakobnol A ve B, fare melanomu ve insan akciğer kanseri hücrelerine karşı antiproliferatif aktivite göstermiştir. hispolon, MDM2 proto-onkogeninin ekspresyonunu ERK1 / 2 aracılı MDM2 ubiquitination yoluyla aşağı regüle etti ve bu da hispolonun kanser tedavisi için kullanıldığını düşündürdü. Son zamanlarda, izole edilmiş phelifuropyranone A ve meshimakobnol A ve B, fare melanomu ve insan akciğer kanseri hücrelerine karşı antiproliferatif aktivite göstermiştir.in vitro , sırasıyla, aktivitelerinden sorumlu moleküler mekanizma ele alınmamış olsa da.

Duyuru

Phellinus Mantarı, Phellinus linteus, meshimakobu, mesima

Phellinus Mantarı, Phellinus linteus, meshimakobu, mesima

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap