Gyeongnam vilayetindeki olgunluk aşamalarına dayalı olarak çeşitli kültür türlerinin büzücü hurmalarının ( Diospyros kaki Thunb.) Saplarının anti-enflamatuar aktiviteleri
Jieun Choi , 1, 2 Mi Jeong Kim , 3 Richard Komakech , 1, 2, 4 Haiyoung Jung , 3 ve Youngmin Kang 1, 2
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk reddi
Bu makale PMC'deki diğer makaleler tarafından alıntılanmıştır .
İlişkili Veriler
Veri Kullanılabilirliği Beyanı
Öz
Arka fon
Doğal ürünler, enflamatuar durumların önlenmesi ve tedavisi ile ilgili olarak insan sağlığında önemli bir rol oynar. Büyük tıbbi potansiyele sahip bitkilerden biri , ağırlıklı olarak Kore, Japonya ve Çin gibi Asya ülkelerinde yetiştirilen Diospyros kaki'dir . Sıkılaştırıcı D. kaki , Ripene d olana kadar buruk bir tada sahip yabani bir türdür . kaki kaliks, büzücü D. kaki'nin saplarından yapılan geleneksel bir Kore tıbbıdır (TKM) ve yatak ıslatma, kusma ve hıçkırık tedavisinde kullanılır. Bu çalışma, kültivar türleri ve olgunluk aşamalarına dayalı olarak büzücü D. kaki saplarının potansiyel anti-enflamatuar aktivitelerini araştırmak için tasarlanmıştır .
Yöntemler
Lokal büzücü D. kaki kültivar türlerinin sap ekstraktlarının anti-enflamatuar etkileri RAW 264.7 hücreleri üzerinde değerlendirildi. Hücre canlılığı, bir Hücre Sayım Kiti-8 ( CCK8) yöntemi kullanılarak ölçüldü . Anti-enflamatuar etkiler, süpernatanın nitrik oksit (NO) konsantrasyonu ölçülerek belirlendi. Hücresel sinyal yolakları, indüklenebilir nitrik oksit sentazın (iNOS) kantitatif polimeraz zincir reaksiyonları ile belirlendi . İNOS ve fosfo-p65'in protein ekspresyonu, western blot kullanılarak belirlendi ve p65'in nükleer lokalizasyonu, RAW 264.7 hücrelerinde eş odaklı görüntüleme kullanılarak belirlendi.
Sonuçlar
Aşama 1 (8-9 ay) numunelerinin hepsinin yüksek oranda tanik asit içeriği gösterdiğini ve Gojongsi (Hamyang) saplarının en yüksek içeriğe sahip olduğunu bulduk. Aşama 1 numuneleri aynı zamanda en yüksek NO üretimi inhibisyonunu göstermiştir. İNOS ve fosforile p65 ekspresyonundaki ve p65'in nükleer lokalizasyonundaki azalmalar doza bağımlıydı. Tüm ekstreler 100 ug / ml konsantrasyonun altında toksik değildir.
Sonuç
Bu çalışma, büzücü D. kaki'deki tanik asit içeriğindeki değişikliklere ve bunların olgunluk aşamalarıyla ilişkili olarak anti-enflamatuar etkilerine ilişkin fikir vermektedir . Bu sonuçların, doğu tıbbının etkinliğinin doğrulanmasında ve tıbbi kullanım için uygun hasat zamanlamasında yararlı olması beklenmektedir.
Anahtar Kelimeler: Antiinflamatuar, Sıkılaştırıcı D. kaki , Çeşitler, Kore geleneksel tıbbı
Arka fon
Enflamasyon, diyabet, kardiyovasküler hastalıklar, kanser, artrit, obezite, otoimmün hastalıklar ve ayrıca inflamatuar bağırsak hastalığı dahil olmak üzere çok sayıda kronik hastalık ve bozukluğun ilerlemesinde ana faktörlerden biridir [ 1 ]. Etkilenen bölgedeki hasarı sınırlandırarak enfeksiyondan veya doku hasarından sonra bir ilk savunma sağlayan çeşitli hücreleri ve sitokinleri içerir [ 2 ]. Makrofajların, edinilmiş bağışıklık ve doğuştan gelen bağışıklık gibi çeşitli konakçı yanıtlarında rol oynadığı ve aynı zamanda homeostaza dahil olduğu bilinmektedir [ 3 ]. Enfeksiyonun erken evrelerinde inflamatuar reaksiyon sırasında nitrik oksit (NO) ve sitokin üretilir ve biyolojik savunma mekanizmalarında önemli bir rol oynar [ 4]. İnflamasyon sentetik ilaçlar kullanılarak tedavi edilebilmesine rağmen, antisitokin gibi bazı antiinflamatuvar ilaçların çeşitli kinazların aktivitesini bloke etme gibi bazı olumsuz etkileri vardır, bu nedenle enfeksiyonlara karşı konak savunmasında önemli bir azalma ile sonuçlanır [ 1 ]. Bu yan etkilerden bazıları ve mevcut antiinflamatuvar tedavilerin sağlık sorunları nedeniyle, doğal antiinflamatuvar takviyelerin kullanımı daha popüler hale gelmektedir [ 1 ]. Gerçekten de, doğal ürünler enflamatuar durumlar [önlenmesi ve tedavisi ile ilgili olarak, insan sağlığında önemli bir rol oynar 5 - 7]. Sonuç olarak, güvenli ve etkili terapötik ajanlar olarak hizmet etmek için doğal etkili antiinflamatuvar ajanlara olan talep artan bir ilgi çekmiştir [ 8 ]. Bitkilerin antiinflamatuvar potansiyeli, saponinler, glikozitler gibi ikincil metabolitlerin ve tanenler ve flavonoidler dahil fenolik bileşiklerin varlığına bağlanmaktadır [ 9 ]. Ek olarak, bir fenol bileşiği olan tanin gibi bu fitokimyasallar, anti-mutajenik ve anti-kanser etkileri gibi çeşitli fizyolojik fonksiyonlara sahiptir [ 10 , 11 ]. Tanik asit özellikle yüksek bir moleküler ağırlığa sahiptir ve acı tadına neden olan birçok fenolik hidroksil grubu içerir [ 12]. Aslında tat, dil yüzeyindeki tanen ve proteinler arasındaki etkileşimin neden olduğu dehidrasyondan kaynaklanmaktadır [ 13 ]. Robbins ve arkadaşları [ 14 ] tarafından yapılan bir çalışmada , tanenlerin bitkilerin büyük otçullara karşı savunma mekanizmalarında kullandıkları ikincil metabolitlerden biri olduğu bildirilmiştir.
Trabzon hurması ( Diospyros kaki Başparmak) Ailesi Ebenaceae, serbest radikalleri süpürme kabiliyeti nedeniyle inflamatuar tepkileri iyileştirme potansiyeline sahip bitkilerden biridir [ 15 ]. Bu önemli bitki uzun yıllardır Asya ülkelerinde, özellikle Kore, Çin ve Japonya'da yetiştirilmektedir [ 16 ]. Güney Kore'de, D. kaki'nin çoğu, Gapyeong (Gyeonggi), Byeonghwa (Gyeongbuk) ve Jecheon (Chungbuk) iç bölgelerinde ve kuzey ve doğu kıyılarında [ 17 ] dağılmıştır . Bansi (Chungdo), Danseongsi ve Wolhasi gibi D. kaki çeşitleri, yerel sıcaklık ve toprak koşullarında ekime daha uygun hale getirilmiştir [18 ]. Aslında araştırmalar, D. kaki'nin soğuğa karşı diğer meyve ağaçlarından daha düşük bir toleransa sahip olduğunu göstermiştir [ 19 ]. D. kaki , tatlı çeşitler ve büzücü çeşitler olarak sınıflandırılabilir [ 20 ]. Sıkılaştırıcı D. kaki , suda çözünebilen yüksek tanen içeriğini olgunlaştırarak veya yapay olarak çıkararak burukluğunu azalttıktan sonra yenilebilir [ 21 , 22 ]. D. kaki eti yüzyıllardır yenilmekte ve son zamanlarda meyveler reçel ve sirke haline getirilmektedir [ 23 - 25 ]. Kurutulmuş yapraklar birçok toplulukta yeşil çay olarak da kullanılmaktadır [ 26]. D. kaki'nin tıbbi potansiyeli, içinde bulunan tanenler, flavonoidler, terpenoidler, steroidler, karotenoidler, gallik asit ve protokatekuik asit gibi çeşitli biyoaktif bileşiklere atfedilir [ 27 ]. Birçok fenolik bileşiğin antioksidatif, antiinflamatuvar, anti-kanserojen, anti-mutajenik ve kardiyoprotektif olduğu bilinmektedir [ 28 , 29 ]. D. kaki'nin klinik farmakokinetiği ve saplarının etkinliği eski literatürde iyi bildirilmiştir [ 30 ]. Kaki kaliks, D. kaki'nin meyvesine yapıştırılmış kaliksten yapılan geleneksel bir Kore tıbbıdır (TKM) [ 31]. Korean Herbal Pharmacopoeia'nın 4. baskısında Kaki kaliks, D. kaki'nin olgunlaşmış veya olgunlaşmış meyvesine bağlı kaliks olarak tanımlanmaktadır . Çalışmalar, D. kaki'nin kan damarları üzerinde olumlu etkileri, akciğer güçlenmesi ve ayrıca bronşiyal hastalıkların hafifletilmesi için önemli olduğunu göstermiştir [ 32 , 33 ]. TKM'de, büzücü D. kaki'nin sapları grip, ateroskleroz ve kalp hastalıklarının tedavisinde kullanılmıştır [ 32 , 34 ]. Ek olarak, D. kaki sapları da hıçkırık tedavisi için TKM'de kullanılmıştır [ 32 , 34]; inflamasyonun nedenlerinden biri olduğu bilinen bir durum [ 35 ].
Çeşitli kronik inflamasyonlarla ilişkili hastalıkların baskılanması için doğal kaynaklardan terapötik hedefler geliştirmek için bir dizi çalışma yapılmış olmasına rağmen [ 1 ], büzücü D. kaki saplarının anti-inflamatuar aktiviteleri üzerine hiçbir çalışma yapılmamıştır. Gyeongnam eyaletindeki olgunluk aşamalarına göre çeşitli kültür türleri. Bu nedenle bu çalışma , çeşitli bölgelerden seçilmiş birkaç büzücü D. kaki çeşidinin, tanik asit içeriği ve anti-enflamatuar etkileri de dahil olmak üzere bitkisel ilaçlar olarak etkinliklerine dayalı olarak optimum hasat zamanını belirlemek için gerçekleştirildi . Ek olarak, tanik asit konsantrasyonu ve antiinflamatuar potansiyelindeki varyasyonları anlamakD. kaki , endüstri ve geleneksel doğu tıbbının gelişimi için önemli olabilir.
Yöntemler
Büzücü D. kaki koleksiyonu
Bu çalışmada, sırasıyla Hamyang, Hamyang ve Miryang bölgelerinden üç yerel büzücü D. kaki çeşidi (Gojongsi, Danseongsi ve Bansi) toplanmıştır (aşama 1, 19 Ağustos; aşama 2, 14 Ekim; ve aşama 3, 20 Ocak). Örnekler Kore'nin Gyeongsangnam kentindeki Kore Orman Çevre Araştırma Enstitüsünde tanımlandı ve Kore Doğu Tıbbı Enstitüsü'ndeki halka açık bir herbaryuma bırakıldı ve KIOM201501015023- KIOM201501015025 numaralı fişlerle verildi. Büzücü D. kaki örnekler bölgesel özelliklere ve olgunluğa göre toplanmış ve saplar kesilip olgunlaşmamış (Ağustos'tan Eylül'e kadar toplanmış), olgun aşama (Ekim'den Kasım'a kadar toplanmış) ve kurutulmuş aşama (Aralık'tan Ocak'a kadar toplanmış) olarak sınıflandırılmıştır.
Büzücü D. kaki'nin saplarından ekstraksiyon
Bu deneyde kullanılan 9 örnek, Hamyang Gojongsi, Hamyang Danseongsi ve Miryang Bansi'den elde edilen 3 olgunlaşmamış sap örneği, 3 olgun sap örneği ve 3 kuru sap örneğidir. Ekstraksiyon işlemi için kullanılan etanol ve metanol reaktifleri, yüksek performanslı sıvı kromatografi (HPLC) dereceli (JT Baker Inc., Phillipsburg, NJ, ABD) olarak satın alındı. Çözücüler ve numuneler, kullanılmadan önce 0.2 um'lik bir membran filtre (PALL Corporation, Ann Arbor, MI, ABD) ile filtre edildi. 9 örneğin her biri için, 10 g kurutulmuş öğütülmüş örnek 72 saat 250 mL% 70 etanol ile maserasyon yöntemi kullanılarak ekstrakte edildi. Ekstreler filtre kağıdı (ADVANTEC, 110 mm, Toyo Robni kaisha, Japonya) kullanılarak süzüldü ve EYELA N-1200B (Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Japonya) verimli döner buharlaştırıcı. Konsantre ekstrakt daha sonra vakumla kurutuldu. Daha sonra 50 mg / mL çözelti, farklı numunelerden her bir özün ayrı ayrı% 80 metanol içerisinde çözündürülmesiyle elde edildi. HPLC analizi için numuneler, enjeksiyon ve analizden önce 0.45 um membran filtre (PALL Corporation, Ann Arbor, MI, ABD) kullanılarak filtre edildi.
HPLC kullanılarak tanik asit içeriklerinin analizi
Bu çalışmada bir HPLC sistemi (Alliance® HPLC, Waters Corporation, Manchester, UK) kullanılmıştır. Kolon bir Phenomenex Luna C18 (2) (250 × 4.6 mm, 5 μm), kolon sıcaklığı 40 ° C ve numune sıcaklığı 25 ° C idi. % 0.1 asitli HPLC dereceli su ve% 0.1 asitli HPLC dereceli Metanolden oluşan mobil faz kullanıldı. Kalibrasyon eğrileri 5 konsantrasyon (25, 50, 100, 150 ve 200 ug / mL) tanik asit standardı (Sigma-Aldrich Co., Inc. FLUKA, Trace SELECT, ABD) kullanılarak analiz edildi. Mobil fazın akış hızı 1.0 mL / dk'ya ayarlandı, standart ürünün enjeksiyon miktarı 10 μL'ye ayarlandı ve 9 örneğin enjeksiyon miktarı 20 μL'ye ayarlandı. Tüm numuneler için analiz süresi toplamda 30 dakikaya ayarlandı. Analitik dalga boyu 190 ila 400 nm'de ölçüldü ve 220 nm'de analiz edildi. Her bileşenin UV spektrumu ölçüldü. HPLC ile ilgili tüm deneyler üç kez tekrarlandı ve içerik analizi ortalama bir değerle tamamlandı.
RAW 264.7 hücrelerinin ve hücre canlılığı analizinin hazırlanması (CCK-8 testi)
RAW 264.7 makrofajlar% 5 CO, 37 ° C 'de, RPMI,% 10 cenin sığır serumu (FBS) ve% 1 antibiyotik içeren 1640 ortamında (WelGENE Daegu, Kore) içinde kültürlenmiştir 2 atmosfer. RAW 264.7 makrofajları, 24 saat boyunca farklı olgunluklarda çeşitli sap ekstresi konsantrasyonları (0, 10, 50, 100, 200, 500 ve 1000 μg / ml) ile muamele edildi. RAW 264.7 makrofaj hücrelerinin substratlar üzerindeki proliferasyonu, hücre sayma kiti analizi (CCK-8, Dojindo, Kumamoto, Japonya) ile belirlendi. Bütün örnekler, 5 x 10 bir yoğunluğa sahip 96 oyuklu bir plaka içerisine yerleştirildi ve tohumlanmıştır 4 de / hücreleri. Absorbans, bir ELISA plaka okuyucu kullanılarak 450 nm'de ölçüldü.
Western analizi kullanılarak NO tahlili ve immünoblotlama
RAW 264.7 hücre hatlarından üretilen NO seviyesi, ticari olarak temin edilebilen bir NO saptama kiti (iNtRON, Inc., Seoul, Kore) kullanılarak belirlendi. RAW 264.7 hücreleri, 1 saat süreyle sap özleri (0, 10, 20, 50 ve 100 ug / ml'de) ile ön işleme tabi tutuldu, ardından lipopolisakkaritlerle (LPS, 1 ug / ml) 24 saat süreyle inkübe edildi. Bütün örnekler, 1 x 10 bir yoğunluğa sahip 48 oyuklu bir plaka içerisine yerleştirildi ve tohumlanmıştır 5hücreler / kuyu. 24 saat inkübe edildikten sonra, 100 uL süpernatan toplandı ve üç kopya halinde oyuklara eklendi; Her kuyuya 50 uL N1 tamponu ilave edildi ve plaka, oda sıcaklığında 10 dakika inkübe edildi. Daha sonra 50 ul N2 tamponu ilave edildi ve nihai reaksiyon, oda sıcaklığında 10 dakika inkübe edildi. Absorbans, çok plakalı bir okuyucu (Lambda Bio-20; Beckman Coulter, Inc., Brea, CA, ABD) kullanılarak 540 nm'de ölçüldü.
Süpernatanın nitrit konsantrasyonu, bir nitrit standart eğrisi kullanılarak belirlendi. Western blot analizi için RAW 264.7 hücreleri, 1 saat süreyle sap ekstraktları (0, 10, 20, 50 ve 100 ug / ml'de) ile ön işleme tabi tutuldu, ardından 24 saat süreyle LPS (1 ug / ml) ile inkübasyon yapıldı. Bütün örnekler, 1 x 10 bir yoğunluğa sahip bir 6-yuvalı plaka içine yerleştirilmiş ve tohumlanmıştır 6hücreler / kuyu. Hücreler buzla soğutulmuş fosfat tamponlu salin (PBS) ile hasat edildi ve liziz tamponunda (50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl,% 1 v / v IGEPAL® CA-630, 1 mM PMSF, 1) lize edildi mM sodyum florür ve 10 ug / ml aprotinin ve leupeptin). Hücre lizatları, 4 ° C'de 15 dakika 13,000 rpm'de santrifüjlenerek toplandı. Toplanan süpernatanların protein konsantrasyonu, bir BCA ™ protein deney kiti (Pierce, Rockford, IL, ABD) kullanılarak belirlendi. Tüm lizatlar, SDS-PAGE jeli üzerine aynı miktarda protein ile yüklendi. Proteinler daha sonra bir PVDF membranına (Millipore, Bedford, MA, ABD) aktarıldı. 27 ° C'de 40 dakika boyunca 1xPBST'de% 5 w / v yağsız süt ile bloke edildikten sonra,
RNA izolasyonu ve kantitatif gerçek zamanlı PCR
Toplam RNA, üreticinin talimatlarına göre bir RNeasy Mini Kit (Qiagen, Gaithersburg, MD, ABD) kullanılarak RAW 264.7 hücre hatlarından ekstrakte edildi. Hücreler 1 x 10 bir yoğunlukta plakalandı 66 kuyucuklu bir plakada hücre / oyuk ve 1 saat boyunca 0, 10, 50 ve 100 ug / ml konsantrasyonlarda sap özleri ile ön işleme tabi tutuldu. Daha sonra hücreler, 24 saat boyunca LPS (1 ug / ml) ile uyarıldı. 24 saat inkübasyondan sonra hücreler soğuk PBS ile yıkandı ve toplandı. Toplam RNA'lar, bir ReverTra Ace® qPCR RT Kiti (Toyobo Co, Osaka, Japonya) kullanılarak birinci sarmal cDNA'lara ters transkripsiyona tabi tutuldu ve bir SYBR Green PCR Ana Karışımı kullanılarak gerçek zamanlı PCR (Takara Bio Inc., Shiga, Japonya) ile analiz edildi ( Takara Bio Inc., Shiga, Japonya) özel primerler ile. MRNA ekspresyon seviyesi, kontrol olarak GAPDH kullanılarak hesaplandı. Primer sekansları aşağıdaki gibiydi: indüklenebilir nitrik oksit sentaz (iNOS), ileri 5p- GGCAGCCTGTGAGACCTTTG-3 've geri 5p- GCATTGGAAGTGAAGCGTTTC-3'; GAPDH, ileri 5′-ATGCCTCCTGCACCACCA-3 ′ ve geri 5′- CCATCACGCCACAGTTTCC-3 ′.
P65 lokalizasyonu için konfokal mikroskopi
Sap ekstraktlarının nükleer faktör κB (NF-κB) p65'in nükleer translokasyonu üzerindeki etkisi immünofloresans ile değerlendirildi. Bu deneyler için RAW 264.7 hücreleri, 1 saat süreyle 100 ug / ml sap ekstraktları ile ön işlemden geçirildi ve 30 dakika süreyle LPS (1 ug / ml) ile işlenerek hasat edildi. Hücreler, 10 dakika süreyle 12 oyuklu plakalarda yuvarlak cam kapak fişleri üzerine kaplandı. Örnekler daha sonra soğuk PBS ile yıkandı ve oda sıcaklığında 15 dakika% 4 formaldehit içinde sabitlendi, ardından 4 ° C'de 15 dakika PBS içinde% 0.2 Triton X-100 ile geçirgenleştirildi. Hücreler, PBS içinde% 5 BSA ile 1 saat süreyle bloke edildi ve gece boyunca 4 ° C'de anti-p65 birincil antikoru ile inkübe edildi. PBS ile üç yıkamadan sonra hücreler Alexa Fluor 546-konjuge keçi-anti tavşan IgG'si (Invitrogen, Carlsbad, California, ABD) ile 1 saat oda sıcaklığında inkübe edildi ve sonra tekrar PBS ile yıkandı.
istatistiksel analiz
Her gruptan (deneysel ve kontrol) toplanan veriler ortalama ± SD olarak ifade edildi. Eşleştirilmemiş t-testleri (Prism programında, Graph Pad Software, San Diego, CA; iki kuyruklu, P <0.05) deney ve kontrol grupları arasındaki farkları analiz etmek için kullanıldı.
Sonuçlar
HPLC kullanılarak tanik asit içeriklerinin analizi
Farklı saplardan elde edilen özler (Şek. 1) tanik asit içeriklerini belirlemek için HPLC ile analiz edildi. Tüm örneklerin ve standart tanik asidin tutulma süresinin 6 dakika olduğu bulundu. Olgunluğa göre tanik asit içeriklerinin HPLC analizi, tanik asit içeriğinin olgunlaşmamış büzücü D. kaki'de olgun veya kurutulmuş olanlardan daha yüksek olduğunu gösterdi (Şek. 2). Şekil 1'de gösterildiği gibi. 2Hamyang Gojongsi'den kurutulmuş olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin sapları en yüksek tanik asit içeriğine (2.597 mg / g), ardından Hamyang Danseongsi (2.350 mg / g) ve ardından Miryang Bansi'ye (2.217 mg / g) sahipti. Tanik asit içeriği, olgunlaşmamış D. kaki saplarının en yüksek tanik asit konsantrasyonuna sahip olması ve en az kurutulmuş saplarda bulunması ile olgunluk derecesine göre azalma eğilimi göstermiştir . Miryang Bansi saplarındaki tanik asit içeriği, Hamyang Gojongsi ve Hamyang Danseongsi saplarına kıyasla, olgunlaşmamış ve olgun aşama arasında (2,217 mg / ml'den 0,615 mg / ml'ye) daha hızlı azaldı.
Şekil 1
Hamyang'daki Gojongsi, Hamyang'daki Danseongsi ve Miryang'daki Bansi'nin üç farklı bölgesinden büzücü D. kaki'nin görünümü farklı mevsimlerde elde edildi. 1: Hamyang (Gojongsi), Hamyang (Danseongsi) ve Miryang'da (Bansi) kurutulmamış olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin (SUIAP) sapı. 2: Hamyang (Gojongsi), Hamyang (Danseongsi) ve Miryang'da (Bansi) kurutulmamış olgun büzücü D. kaki'nin (SUMAP) sapı. 3: Hamyang (Gojongsi), Hamyang (Danseongsi) ve Miryang'da (Bansi) kurutulmuş büzücü D. kaki (SDAP) sapı
İncir. 2
Tanik asit içeriklerinin analizi. Büzücü D. kaki'de farklı olgunluk aşamalarından sapların tanik asit içeriği . Özetlenmiş veriler, daha önce yayınlanmış olan Choi ve ark. (2017) JALS 51 (3): 49–60
Sap ekstraktlarının hücre canlılığı üzerindeki etkileri
Sonuçlar, 10, 50 ve 100 μg / ml'lik konsantrasyonlarda kurutulmamış olgunlaşmamış büzücü D. kaki sapı ekstresinin, kontrol hücrelerine kıyasla RAW 264.7 hücrelerinin canlılığını artırdığını ve daha yüksek konsantrasyonların (200, 500, 1000 μg / ml) olduğunu göstermektedir. ) hücrelerin canlılığı üzerinde önemli olumsuz etkilere sahipti (Şek. 3).
Şekil 3
RAW 264.7 makrofaj hücrelerinde çeşitli sap ekstraktlarının hücre canlılığı üzerindeki etkileri. Hücreler, 24 saat boyunca çeşitli sap ekstraktlarının konsantrasyonları (0, 10, 50, 100, 200, 500, 1000 ug / ml) ile muamele edildi. Hücre canlılığı, CCK-8 deneyi kullanılarak ölçüldü. Sonuçlar, en az üç bağımsız deneyin ortalama ± SD'si olarak sunulur. * P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001, **** P <0.0001
Sap ekstraktlarının LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde NO üretimi üzerindeki etkileri
Tüm numune özütleri, LPS ile aktive edilmiş RAW 264.7 makrofajlarında NO üretimi üzerinde önleyici etkiler gösterdi. Olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarından elde edilen ekstreler ile muamele edilen hücreler , daha olgun sap ekstreleri ile muamele edilenlere kıyasla NO üretiminde daha büyük bir azalma gösterdi (Şek. 4).
Şekil 4
LPS ile indüklenen RAW 264.7 hücrelerinde NO üretimi üzerindeki çeşitli sap ekstraktlarının inhibe edici etkileri. Hücreler, 1 saat süreyle çeşitli konsantrasyonlarda (0, 10, 20, 50, 100 ug / ml) sap ekstraktları ile ön işleme tabi tutuldu ve ardından LPS (1 ug / ml) ilave edildi ve 24 saat inkübe edildi. 24 saat sonra ortamdaki nitrit konsantrasyonları NO Saptama Kiti ile belirlendi. Sonuçlar, en az üç bağımsız deneyin ortalama ± SD'si olarak sunulur. * P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001, **** P <0.0001
Sap ekstraktlarının LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde iNOS ekspresyonu üzerindeki etkileri
İNOS ekspresyonu, 100 μg / ml'de özüt muameleleri ile güçlü bir şekilde inhibe edildi (Şekil. 5a). Olgunlaşmamış büzücü D. kaki'den elde edilen sap ekstraktları, doza bağlı bir şekilde iNOS'un protein ekspresyonunu azaltmıştır (Şek.(Şekil 5b).5b). Bu sonuçlar, ekstraktların protein seviyesinde olduğu kadar mRNA'da iNOS enziminin ekspresyonunu düzenlediğinden, ekstrelerin LPS ile indüklenen NO üretimi üzerindeki inhibitör etkilerinin iNOS ekspresyonunun bastırılmasından kaynaklandığını kuvvetle göstermektedir.
Şekil 5
Sap ekstraktlarının RAW 264.7 makrofajlarında iNOS ekspresyonunun LPS ile uyarılan yukarı regülasyonu üzerindeki inhibe edici etkisi. Hücreler, 1 saat süreyle farklı konsantrasyonlarda (0, 10, 50, 100 ug / ml) sap ekstraktları ile ön işleme tabi tutulmuş ve ardından 24 saat boyunca LPS (1 ug / ml) ile uyarılmıştır. a iNOS seviyeleri RT-qPCR ile ölçüldü ve GAPDH'ye normalize edildi. b Hücreler, LPS (1 ug / ml) ile 24 saat inkübasyondan önce 1 saat boyunca belirtilen konsantrasyonlarda sap özleri ile ön işleme tabi tutuldu. İNOS ve-aktin protein ekspresyonu western blot analizi ile değerlendirildi. Sonuçlar, en az üç bağımsız deneyin ortalama ± SD'si olarak sunulur. * P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001
Sap ekstraktlarının LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde NF-κB'nin aktivasyonu üzerindeki etkileri
Şekil 1'de gösterildiği gibi. 6a, fosforile p65, ekstraktların konsantrasyonunun artırılmasıyla önemli ölçüde inhibe edildi. Pozitif kontrol, LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücreleri, p65'in çekirdeğe translokasyonunda dramatik artışlar gösterdi, ancak LPS ile uyarılmış NF-κB nükleer translokasyonu, sap ekstraktında ön işlemden sonra belirgin şekilde bastırıldı (Şek.(Şekil 6b).6b). Bu sonuçlar, sap ekstraktının p65'in fosforilasyonunu ve nükleer translokasyonunu inhibe ederek NF-κB'nin aktivasyonunu inhibe ettiğini göstermektedir.
Şekil 6
Sap ekstraktlarının LPS kaynaklı NF-kB aktivasyonu üzerindeki inhibe edici etkileri. a Sap ekstraktlarının RAW 264.7 makrofajlarda LPS ile indüklenen p65 fosforilasyonu üzerindeki inhibe edici etkisi. Hücreler, 1 saat süreyle LPS (1 ug / ml) ile inkübasyondan önce, belirtilen konsantrasyonlarda 1 saat süreyle sap özleri ile ön işleme tabi tutuldu. P-p65 ve p-aktinin protein ekspresyonu, western blot analizi ile değerlendirildi. b Sap ekstraktlarının RAW 264.7 makrofajlarda LPS ile indüklenen p65 nükleer translokasyonu üzerindeki inhibe edici etkisi. Hücreler, 1 saat süreyle sap ekstraktları (100 ug / ml) ile ön işleme tabi tutuldu, ardından 30 dakika süreyle LPS (1 ug / ml) ile uyarıldı. Örnekler, anti-p65 antikoru, Alexa Fluor 546 keçi anti-tavşan antikoru ve DAPI ile boyandı, ardından konfokal mikroskopi analizi ile belirlendi
Tartışma
D. kaki , karotenoidler, tanenler, flavonoidler, şekerler, hidrokarbonlar, lipidler, hidrokarbonlar, aromatikler, terpenoidler ve steroidler gibi çeşitli tıbbi biyoaktif bileşiklere sahiptir. Büzücü D. kaki , vahşi bir türdür ve tamamen olgunlaşana kadar buruk bir tada sahiptir, bu aşamada tanen içeriği tamamen çözünmez bir yapıya dönüşür. Suda çözünür tanen bileşenleri içeren sıkıcı D. kaki'nin acı bir tadı vardır ve tanik asidin yaşlanmayı geciktirici, kanser önleyici ve otçul savunma etkilerine sahip olduğu gösterilmiştir [ 13 , 20 , 25 ]. Büzücü D. kaki'nin saplarından ekstrakt elde ettik .ve olgunluk seviyelerine göre tanik asit içeriğini analiz etti. Farklı olgunluk aşamalarında üç tür büzücü D. kaki'nin tanik asit içerikleri, tüm olgunlaşmamış sapların, olgun ve kurutulmuş saplardan daha yüksek tanik asit içeriğine sahip olduğunu gösterdi. Bu çalışmanın sonuçları Jeong [ 18 , 34 ] tarafından yapılan bir araştırmanın sonuçlarıyla tutarlıdır ve kuruma işlemi sırasında burukluk giderildikçe D. kaki'deki tanik asit konsantrasyonunun azaldığını göstermektedir. D. kaki , üç aşamalı S şeklinde bir büyüme eğrisi gösterir ve şeker içeriğinin, özellikle Ekim ayından sonra güneş ışığından önemli ölçüde etkilendiği bildirilmiştir [ 36]. Bu çalışmada, yararlı bileşen içeriği D. kaki'nin büyüme aşamasına bağlı olarak önemli ölçüde farklıydı . Del Bubba vd. [ 37 ], ekili Rojo Brillante ve Kaki Topo'daki çözünür tanik asit içeriğinin Temmuz'dan Kasım'a arttığını, ancak Aralık'ta hızla azaldığını, şeker içeriğinin ise Eylül'den itibaren arttığını buldu. Ek olarak, sıcaklık, aylık yağış, güneşlenme süresi ve günlük aralık gibi çeşitli hava faktörlerinin D. kaki meyve ağırlığını ve kalitesini etkilediği gözlenmiştir [ 17 ]. Analiz edilen dokuz numuneden, olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarıHamyang Gojongsi'den en yüksek tanik asit içeriği (2.597 mg / g) vardı. Myrang Bansi örneklerinden elde edilen tanik asit içeriği, sırasıyla, olgunlaşmamış ve olgun aşamalarda 2.217 mg / g'dan 0.615 mg / g'ye önemli ölçüde azalmıştır. Lee [ 38 ] ayrıca Cheongdo Bansi meyvelerinin fenol içeriklerinin Temmuz ve Ağustos aylarında ve Eylül ve Ekim aylarında hızla azaldığını bildirdi. Bu çalışmada, üç farklı bölgeden büzücü D. kaki saplarının tanik asit içerikleri, olgun aşamada tanik asit içeriğinde önemli farklılıklar göstermiştir. Büzücü D. kaki'nin tanik asit içeriğinin önceki analiziüç farklı bölgeden (Sancheong Gojongsi, Sancheong Danseongsi ve Miryang Bansi), tanik asit içeriğinin kurutulmuş D. kaki'de kurutulmuş olanlara göre % 30 daha yüksek olduğunu gösterdi [ 39 ]. 2015 ve 2016 yıllarında Gyeongsangnam-do eyaletindeki üç çeşitte tanik asit içeriklerindeki değişim benzer eğilimler gösterdi. Büzücü D. kaki'nin kullanımını artırmak için , olgunluğa göre tanik asit içeriğini araştırdık ve büzücü D. kaki hasat etmenin önemli olduğunu belirledik .tamamen olgunlaştıklarında; tanik asidin en düşük olduğu bir zamanda. Bununla birlikte, kapsamlı sonuçlar için çeşitli mevsimlerde daha fazla analiz yapılması gerekir. Çevre koşullarındaki varyasyondan kaynaklanan etkilere ek olarak, D. kaki'nin burukluğu da genetik faktörlere bağlanabilir [ 40 ]. Diospyros kaki'nin meyvesinde büyük miktarda proantosiyanidin biriktirdiği ve bunun da buruk tadı verdiği bilinmektedir [ 41 ]. Proantosiyanidin biyosentez yollarının transkripsiyonel düzenlenmesi, farklı hurma meyveleri çeşitlerindeki değişen burukluk seviyelerine atfedilen birçok faktörden biri olabilir [ 40 , 42]. Proantosiyanidinlerin regülasyonu için birbirleriyle bir protein kompleksi oluşturan Myb transkripsiyon faktörü (DkMYB4) ve bHLH transkripsiyon faktörü (DkMYC1), farklı D. kaki çeşitlerinde proantosiyanidinlerin farklı ekspresyonunda [ 41 ] ve dolayısıyla varyasyonda merkezi bir role sahip olabilir. içlerinde burukluk düzeyinde. Ayrıca, hurmadan elde edilen WD40-tekrar proteininin, meyvelerde proantosiyanidin birikimini düzenlemek için persimmon'da MYB-bHLH-WD40 kompleksleri oluşturmak üzere proantosiyanidin biyosentezi DkMYB2 ve DkMYB4 düzenleyicileri ile etkileşime girdiği gözlenmiştir [ 42 ].
Sıkılaştırıcı D. kaki'nin sapları Kore'de geleneksel ilaç olarak (Kaki kaliks olarak bilinir) ve yatak ıslatma, kusma ve hıçkırık tedavisinde kullanılmaktadır. Çalışmalar ayrıca D. kaki'nin anti-enflamatuar etkileri olduğunu da göstermiştir . Makrofajlar, çeşitli preinflamatuar aracılar ürettikleri için enflamatuar reaksiyonların gelişimi için kritiktir. NO biyolojik savunma mekanizmalarında önemli bir rol oynar [ 4 ] ancak aşırı NO üretimi, romatoid artrit ve otoimmün bozukluklar gibi inflamatuar hastalıkların gelişmesine neden olur [ 43 ]. Bu nedenle, NO üretimini engellemek, anti-enflamatuar tedaviler için ana hedeftir. Bu nedenle, büzücü saplarından elde edilen ekstrelerin olup olmadığını araştırdık.D. kaki , LPS ile uyarılan iltihaplı bir durumda NO üretimini ve iNOS protein ifadesini bloke etti. Olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin en etkili olduğu ve doza bağlı olarak hareket ettiği bulundu (Şek.(Şekil 4).4). Şekil 1'de gösterildiği gibi.Şekil 5,5Olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarından elde edilen özler, doza bağlı bir şekilde iNOS'un protein ekspresyonunu azaltmıştır. Çoğu hücre tipinde NF-B, iltihaplanma ile ilgili önemli bir transkripsiyonel faktördür. NF-κB, pro- ve anti-inflamatuar özelliklere sahip bir dimerik molekül ailesidir. Memelilerde, NF-κB ailesi beş proteinden oluşur: NF-κB1 (p50 / 105), NF-κB2 (p52 / 100), Rel A (p65), Rel B ve c-Rel [ 34 , 44 ]. Bunlardan p65 / p50 heterodimer, en baskın proinflamatuar kompleks ve p65 nükleer translokasyondur ve DNA bağlanması tipik olarak NF-κB yolağının aktivasyonu olarak tanımlanır [ 45]. LPS gibi harici uyaranlarla aktivasyon üzerine, IκB proteini fosforile edilir, bozulur ve çekirdeğe yer değiştirir. Bu nedenle, IκB'nin degradasyonu, NF-κB'nin gen transkripsiyonunu düzenlediği çekirdeğe translokasyonunu serbest hale getirir. NF-κB aktivasyonu, proinflamatuvar mediyatörlerin ve iNOS, COX-2 ve NO gibi sitokinlerin transkripsiyonuna yol açar [ 46]. Sap özlerinin NO üretimini baskıladığını ve transkripsiyonel ve transkripsiyon sonrası seviyelerde iNOS ekspresyonunu düşürdüğünü ve ayrıca LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde p65 nükleer translokasyonunu azalttığını bulduk. Bu sonuçlar, sap özlerinin, p65 fosforilasyonunu azaltarak NF-KB'nin inaktivasyonu yoluyla iNOS ekspresyonunu inhibe ettiğini gösterir. RAW 264.7 makrofajlarında NF-KB yolağının inhibisyonu, pro-enflamatuar mediyatörleri aşağı regüle etti ve dolayısıyla olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarının anti-enflamatuar etkilerini sergiledi . Sapların yanı sıra, önceki çalışma, D. kaki'nin meyvelerinin, serbest radikalleri süpürme kabiliyeti nedeniyle inflamatuar tepkileri iyileştirme potansiyeline sahip olduğunu da göstermiştir [ 15, 34 ]. Sonuç olarak, olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarının anti-enflamatuar potansiyeli , hastalık durumlarının tedavisinde kullanılmak üzere kullanılabilir.
Sonuç
Bu çalışma , Gyeongnam eyaletindeki büzücü D. kaki ( Diospyros kaki Thunb.) Saplarının tanik asit içeriğini ve anti-enflamatuar aktivitelerini , kültür türlerine ve olgunluk aşamalarına göre araştırdı ve etkinliklerine göre optimum hasat süresini önermek için: bitkisel bir ilaç. Analiz edilen tüm numunelerin tanik asit içerdiği bulundu ve evre 1 (8-9 aylık) numuneler, özellikle Gojongsi'den (Hamyang) olanlar olmak üzere en yüksek tanik asit içeriği yüzdesine sahipti. Ayrıca sap ekstraktlarının antienflamatuvar etkileri doğrulanmış ve etkilerinin olgunluğa göre azaldığı görülmüştür. Bu çalışma, büzücü D. kaki'nin tanik asit içeriğinin nasıl olduğuna dair temel bilgiler sağlar.farklı olgunluk düzeylerinde saplar değişir. Bu özütlerin anti-enflamatuar etkilerinin, doğu tıbbının etkinliğinin doğrulanmasında yardımcı olması beklenmektedir. Büzücü D. kaki'nin tıbbi ve tıbbi olmayan kullanımı için optimum hasat sürelerinin 8-9 ay olduğunu öne sürüyoruz , ancak bu bulguların işbirliği için daha fazla araştırma yapılması gerekiyor.
Teşekkürler
Bu çalışmada kullanılan D. kaki örneklerini özel olarak tanımlayan Kore, Gyeongsangnam-do'daki Kore Orman Çevre Araştırma Enstitüsü'nden Dr. SM Kang'a özellikle teşekkür ederiz .
Kısaltmalar
Yazar katkıları
JC deneyi gerçekleştirdi, MK biyoaktif kimyasal analizi gerçekleştirdi, HJ & RK makaleyi eleştirel bir şekilde revize etti ve YK tüm örnekleri topladı ve çalışma tasarımını ve makalenin tartışma bölümünü yazdı. Tüm yazarlar, makalenin son bilimsel yazısını tartıştı ve üzerinde anlaştı.
Yazarların bilgileri
Jieun Choi (MS): Bilim ve teknoloji Üniversitesi, Kore Oryantal Tıp enstitüsü kampüsünde yüksek lisans öğrencisi. Mi Jeong Kim (PhD): Kore Biyobilim ve Biyoteknoloji Araştırma Enstitüsü, İmmünoterapi Araştırma Merkezi'nde doktora sonrası araştırmacı. Richard Komakech: Bilim ve teknoloji Üniversitesi, Kore Doğu Tıbbı enstitüsü kampüsünde doktora öğrencisi ve Uganda, Sağlık Bakanlığı Doğal Kemoterapötik Araştırma Enstitüsü'nde araştırmacı. Haiyoung Jung (PhD): Kore Biyobilim ve Biyoteknoloji Araştırma Enstitüsü, İmmünoterapi Araştırma Merkezi'nde baş araştırmacı. Sorumlu yazar Youngmin Kang (Ph.D): Kore Oryantal Tıp Enstitüsü'nde baş araştırmacı ve Kore Bilim ve Teknoloji Üniversitesi Profesörü.
Finansman
Bu çalışma, Kore Bitkisel Tıbbı ile İlişkili Yeni Maya Suşu [KIOM G15050 onaylı ] kullanılarak Anti fungisitin Geliştirilmesi ; Diospyros kaki Calyx [hibe sayısı K17690]; Endüstrinin talebine dayalı olarak Kore Bitkisel Tıbbı İle İlgili Patent Mayası kullanılarak Kozmetik Korumanın Geliştirilmesi [hibe numarası K18720]; Standardize Edilmiş Bitkisel Kaynakların Uygulamalı Geliştirilmesi [hibe numarası KSN1911420]; Kore Oryantal Tıp Enstitüsü'nden (KIOM), Kore Cumhuriyeti Bilim ve BİT Bakanlığı aracılığıyla.
Veri ve materyallerin mevcudiyeti
Ham veriler, Kore Oryantal Tıp Enstitüsü'nün Standart Bitkisel Kaynaklar Merkezi'ndeki halka açık bir depoda saklanmıştır ve yazarların makul talebi üzerine kullanılabilir.
Etik onay ve katılma izni
Uygulanamaz. Yayın izni
Uygulanamaz. Çıkar çatışması
Yazarlar, rakip çıkarları olmadığını beyan ederler.
Dipnotlar
Yayıncının Notu
Springer Nature, yayınlanan haritalardaki ve kurumsal bağlantılardaki yargı yetkisi iddiaları konusunda tarafsız kalır.
Katılımcı Bilgileri
Jieun Choi, E-posta: rk.er.moik@iohcej .
Mi Jeong Kim, E-posta: rk.er.moik@600otit .
Richard Komakech, E-posta: rk.er.moik@drahcir .
Haiyoung Jung, E-posta: rk.er.bbirk@gnuoyiah .
Youngmin Kang, E-posta: rk.er.moik@gnakmy .
Referanslar
1. Arulselvan P, Fard TM, Tan SW, Gothai S, Fakurazi S, Norhaizan EM, Kumar SS. Enflamasyonda antioksidanların ve doğal ürünlerin rolü. Oxidative Med Cell Longev. 2016; 2016 : 5276130. doi: 10.1155 / 2016/5276130. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
2. Huang BP, Lin CH, Chen YC, Kao SH. Perilla frutescens yaprak özütünün lipopolisakkarit ile uyarılan RAW 264. 7 hücreleri üzerindeki anti-enflamatuar etkileri. Mol Med Rep. 2014; 10 (2): 1077–1083. doi: 10.3892 / mmr.2014.2298. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
3. Kim EO, Lee H, Cho CH, Kim YJ, Kim DO. Kurutulmuş hurmaların etil asetat fraksiyonunun (Diospyros kaki thumb.) THP-1 insan akut monositik lösemi hücre hattı üzerindeki antioksidan kapasitesi ve anti-enflamatuar etkisi. J Korean Soc Appl Biol Chem. 2011; 54 (4): 606–611. doi: 10.3839 / jksabc.2011.087. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
4. Matsuda H, Morikawa T, Ando S, Toguchida I, Yoshikawa M. Nitrik oksit üretimini inhibe edici aktivite ve etki mekanizması için flavonoidlerin yapısal gereksinimleri. Bioorg Med Chem. 2003; 11 (9): 1995–2000. doi: 10.1016 / S0968-0896 (03) 00067-1. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
5. Yuan G, Wahlqvist ML, He G, Yang M, Li D. Doğal ürünler ve anti-enflamatuar aktivite. Asia Pac J Clin Nutr. 2006; 15 (2): 143–152. [ PubMed ] [ Google Scholar ]
6. Javadi B, Sahebkar A. Otoimmün miyokardite karşı anti-inflamatuar ve immünomodülatör aktivitelere sahip doğal ürünler. Pharmacol Res. 2017; 124 : 34–42. doi: 10.1016 / j.phrs.2017.07.022. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
7. Azab Abdullatif, Nassar Ahmad, Azab Abed. Doğal Ürünlerin Anti-Enflamatuar Aktivitesi. Moleküller. 2016; 21 (10): 1321. doi: 10.3390 / molecules21101321. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
8. Gosslau A, Li S, Ho CT, Chen KY, Rawson NE. Antiinflamatuar aktivitelerine ilişkin çalışmalarda doğal ürün karakterizasyonunun önemi. Mol Nutr Food Res. 2011; 55 (1): 74–82. doi: 10.1002 / mnfr.201000455. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
9. Boudet AM. Fenolik bileşiklerdeki araştırmanın gelişimi ve güncel durumu. Fitokimya. 2007; 68 (22): 2722–2735. doi: 10.1016 / j.phytochem.2007.06.012. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
10. Minussi RC, Rossi M, Bologna L, Cordi L, Rotilio D, Pastore GM, Durán N. Ticari şarapların fenolik bileşikleri ve toplam antioksidan potansiyeli. Food Chem. 2003; 82 (3): 409–416. doi: 10.1016 / S0308-8146 (02) 00590-3. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
11. Veberic R, Jurhar J, Mikulic-Petkovsek M, Stampar F, Schmitzer V. 11 hurma meyvesi (Diospyros kaki L.) çeşidinde birincil ve ikincil metabolitlerin karşılaştırmalı çalışması Food Chem. 2010; 119 (2): 477–483. doi: 10.1016 / j.foodchem.2009.06.044. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
12. Hagerman AE, Riedl KM, Jones GA, Sovik KN, Ritchard NT, Hartzfeld PW, Riechel TL. Biyolojik antioksidanlar olarak yüksek moleküler ağırlıklı bitki polifenolikleri (tanenler). J Agric Food Chem. 1998; 46 (5): 1887–1892. doi: 10.1021 / jf970975b. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
13. Parfitt DE, Yonemori K, Honsho C, Nozaka M, Kanzaki S, Sato A, Yamada M. Asya hurması çeşitleri, buruk ve büzücü olmayan türler arasındaki ilişkiler. Ağaç Genet Genomları. 2015; 11 (2): 1–9. doi: 10.1007 / s11295-015-0848-z. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
14. Robbins CT, Hanley TA, Hagerman AE, Hjeljord O, Baker DL, Schwartz CC. MautzWW. Bitkileri geviş getirenlere karşı korumada tanenlerin rolü: protein bulunabilirliğinde azalma. Ekoloji. 1987; 68 (1): 98–107. doi: 10.2307 / 1938809. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
15. Butt SM, Sultan TM, Aziz M, Naz A, Ahmed W, Kumar N, Imran M. Persimmons (Diospyros kaki) meyve: gizli fitokimyasallar ve sağlık iddiaları. EXCLI J. 2015; 14 : 542–561. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
16. Hidalgo C, Mateo E, Mas A, Torija MJ. Hurmaların fermentasyonu ve asetifikasyonundan izole edilen maya ve asetik asit bakterilerinin tanımlanması (Diospyros kaki) Gıda Mikrobiyolü. 2012; 30 (1): 98–104. doi: 10.1016 / j.fm.2011.12.017. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
17. Park Y, Kim MJ, Park SB, Oh SI. Hava koşullarının meyve özellikleri ve Sangju, Gyeongsangbuk-do'daki 'Sangjudungsi' hurma çeşidinin verimi üzerindeki etkisi. Meteorol için Korece J Agric. 2015; 17 (4): 340–347. doi: 10.5532 / KJAFM.2015.17.4.340. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
18. Jeong CH, Kwak JH, Kim JH, Choi GN, Jeong HR, Kim DO, Heo HJ. Olgunlaşma sırasında Daebong-gam'ın (Diospyros kaki) besin bileşenlerindeki değişiklikler. Kore J Gıda Koruyucusu. 2010; 17 (4): 526–532. [ Google Scholar ]
19. Kang SK, Ahn KH, Choi ST, Do KR, Cho KS. Çevre dostu meyve bahçelerinden gelen hurma (Diospyros kaki'Fuyu ') meyvelerinde dikim yeri ve meyve verme yönünün meyve donu zararına etkisi. KJ Org Agric. 2014; 22 (4): 789–799. doi: 10.11625 / KJOA.2014.22.4.789. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
20. Park CG, Lee KC, Lee DW, Choo HY, Albert PJ. Saflaştırılmış Hurma tanen ve tanik asidin fasulye böceği Riptortus clavatus'un hayatta kalması ve üremesi üzerindeki etkileri. J Chem Ecol. 2004; 30 (11): 2269–2283. doi: 10.1023 / B: JOEC.0000048788.35693.23. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
21. Arnal L, Rio MA. Hurma meyvelerinde karbondioksit ve nitrojenle zenginleştirilmiş atmosferler ile burukluğun giderilmesi “Rojo brillante” J Food Sci. 2003; 68 (4): 1516–1518. doi: 10.1111 / j.1365-2621.2003.tb09676.x. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
22. Li PM, Du GR, Ma FW. Sıkılaştırıcı olmayan hurmaya karşı büzücü farklı meyve dokularının fenolik konsantrasyonu ve antioksidan kapasitesi. Sci Hortic. 2011; 129 (4): 710–714. doi: 10.1016 / j.scienta.2011.05.024. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
23. Igual M, Castelló ML, Ortolá MD, Andrés A. Isıl işlem görmeden ozmotik dehidrasyon ile üretilen hurma reçelinin bazı kalite özellikleri. Int J Gıda Müh. 2011; 7 (5): 1–15. [ Google Scholar ]
24. Jeong YJ, Lee GD, Kim KS. Tepki yüzeyi metodolojisi kullanılarak hurma sirkesinin fermantasyon durumu için optimizasyon. Korece J Food Sci Technol. 1998; 30 (5): 1203–1208. [ Google Scholar ]
25. Kim JK, Kang WW, Oh SL, Kim JH, Han JH, Moon HK, aChoi JU. Çeşitli bölgelerden gelen geleneksel kuru hurmaların kalite özelliklerinin karşılaştırılması. J Korean Soc Food Sci Nutr. 2004; 33 (1): 140–145. doi: 10.3746 / jkfn.2004.33.1.140. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
26. Oh HM, Kim MK. Kuru yaprak tozu, hurma ve yeşil çay yapraklarının su ve etanol ekstraktlarının 12 aylık sıçanlarda lipit metabolizması ve antioksidatif kapasite üzerine etkileri. Korece J Nutr. 2001; 34 : 285–298. [ Google Scholar ]
27. Kawase M, Motohashi N, Satoh K, Sakagami H, Nakashima H, Tani S, Molnár J. Hurma (Diospyros kaki) soyma ekstraktlarının biyolojik aktivitesi. Phytother Res. 2003; 17 (5): 495–500. doi: 10.1002 / ptr.1183. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
28. Chen XN, Fan JF, Yue X, Wu XR, Li LT. Hurmada radikal süpürme aktivitesi ve fenolik bileşikler (Diospyros kaki L. cv. Mopan) J Food Sci. 2008; 73 (1): 24–28. doi: 10.1111 / j.1750-3841.2007.00587.x. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
29. Young AL, Cho EJ, Tanaka T, aYokozawa T. Hurma kaynaklı proantosiyanidinlerin oksidatif strese ve diyabete bağlı sindirim enzimlerine karşı inhibe edici aktiviteleri. J Nutr Sci Vitaminol. 2007; 53 (3): 287-292. doi: 10.3177 / jnsv.53.287. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
30. Jeong SI, Cho JK, Mok JY, Kim SJ, Park JM, Jeon IH, Jang S. I. Hurma yapraklarının büyüme sırasında antioksidan aktivitesi. Korece J Farmakognozi. 2010; 41 (4): 255-63.
31. Zhang H, Zheng X, Su D. Mikrodalga muamelesi ve Cryptococcus laurentii ile armutun mavi küf çürümesinin hasat sonrası kontrolü . J Gıda Müh. 2006; 77 (3): 539–544. doi: 10.1016 / j.jfoodeng.2005.06.066. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
32. Kore Tıp Okulları Herbology Yayın Kurulu. Herbology [Boncho-hak] Seoul: Young-Lim Press; 2004. [ Google Scholar ]
33. Çin Farmakopesi Komisyonu. Çin Halk Cumhuriyeti'nin Farmakopesi hacmi Ι. Pekin: Çin Tıbbi Eczacılık Bilimi ve Teknolojisi Yayınevi; 2010. [ Google Scholar ]
34. Choi J. Gyeongnam eyaletindeki kültivar türleri ve olgunluk aşamalarına göre büzücü hurmaların (Diospyros kaki Thunb) saplarının mikrobiyal tanımlama, tanik asit içerikleri ve anti-enflamatuar aktiviteleri. Yüksek lisans tezi. Teknoloji ve Bilim Üniversitesi; 2017.
35. Chang F, Lu C. Hiccup: gizem, doğa ve tedavi. J Neurogastroenterol Motil. 2012; 18 (2): 123–130. doi: 10.5056 / jnm.2012.18.2.123. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
36. Sugiura A, Zheng GH, Yonemori K. Büyüme aşaması III sırasında kontrollü sıcaklıklarda hurma meyvesinin büyümesi ve olgunlaşması. HortScience. 1991; 26 (5): 574–576. doi: 10.21273 / HORTSCI.26.5.574. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
37. Del Bubba M, Giordani E, Pippucci L, Cincinelli A, Checchini L, Galvan P. Ağaç üzerinde büyüme ve olgunlaşma sırasında ve farklı hasat sonrası muamelelere yanıt olarak buruk hurmalarda tanenlerde, askorbik asit ve şeker içeriğindeki değişiklikler. J Gıda Besteleri Anal. 2009; 22 (7): 668–677. doi: 10.1016 / j.jfca.2009.02.015. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
38. Lee YR, Chung HS, Moon KD. Cheongdobansi'nin polifenol içeriğindeki değişiklik, gelişme sırasında meyveyi hurmaya çevirir. Kore J Gıda Koruyucusu. 2011; 18 (1): 13–17. doi: 10.11002 / kjfp.2011.18.1.013. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
39. Choi JE, Lee GY, Moon BC, Kang MS, Kim YJ, Kang MY. Kore'nin Geongnam eyaletinde geleneksel Kore tıbbı (kaki Calxy) olarak büzücü hurmalardan ( Dispyros kaki Thunb.) Tanik asit içeriklerinin analizi . Kor Herb Med Inform. 2016; 4 (1): 35–42. [ Google Scholar ]
40. Nishiyama S, Onoue N, Kono A, Yonemori K, vd. Hortic J. 2018; 87 (3). 10.2503 / hortj.OKD-140.
41. Nishiyama Soichiro, Onoue Noriyuki, Kono Atsushi, Sato Akihiko, Yonemori Keizo, Tao Ryutaro. Trabzon hurması meyvesindeki burukluk kaybının altında yatan bir gen düzenleyici ağın karakterizasyonu. Planta. 2017; 247 (3): 733–743. doi: 10.1007 / s00425-017-2819-0. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
42. Naval M, Muñoz GF, Lloret A, Besada C, Salvador A, Badenes LM, Rios G. Trabzon hurmasından elde edilen bir WD40-tekrar proteini, proantosiyanidin biyosentezi DkMYB2 ve DkMYB4 düzenleyicileri ile etkileşime girer. Ağaç Genet Genomları. 2016; 12 (1). 10.1007 / s11295-016-0969-z.
43. Yoon SB, Lee YJ, Park SK, Kim HC, Bae H, Kim HM, Park W. Scutellaria baicalensis su özütünün LPS ile aktive edilmiş RAW 264.7 makrofajları üzerindeki anti-enflamatuar etkileri. J Ethnopharmacol. 2009; 125 (2): 286–290. doi: 10.1016 / j.jep.2009.06.027. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
44. Verma IM, Stevenson JK, Schwarz EM, Van Antwerp D, Miyamoto S. Rel / NF-kappa B / I kappa B ailesi: samimi birliktelik ve ayrışma öyküleri. Genes Dev. 1995; 9 (22): 2723–2735. doi: 10.1101 / gad.9.22.2723. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
45. Paul FG, Michael HP, Mukundan A, Nada M. Enflamasyonun çözünürlüğü: prostaglandin E2, uyarılmış romatoid sinovyal fibroblastlarda bireysel NF-kappaB alt birimlerinin (P65, P50) nükleer trafiğini ayırır. J Immunol. 2005; 175 (10): 6924–6930. doi: 10.4049 / jimmunol.175.10.6924. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
46. Kim Kyoung-Su, Lee Dong-Sung, Kim Dong-Cheol, Yoon Chi-Su, Ko Wonmin, Oh Hyuncheol, Kim Youn-Chul. Lipopolisakkaritle Uyarılmış RAW 264.7 Makrofajlarda Diospyros kaki'den İzole Edilen Koussarik ve Betulinik Asitlerin Anti-Enflamatuar Etkileri ve Etki Mekanizmaları. Moleküller. 2016; 21 (9): 1206. doi: 10.3390 / molecules21091206. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Anti aging etkili meyve
Görüntü olarak domatesi andıran, olgunlaşınca lezzeti artan ve sayısız faydası olan bir meyve Trabzon hurması diğer adıyla cennet meyvesi. Tropikal bir meyve olarak uzak doğudan ülkemize getirilmiş ve karadeniz ikliminin uygun olmasıyla üretimi artmış.
Peki severek tükettiğimiz bu meyvenin faydalarını biliyor muyuz?
Yüksek oranda antioksidan ve fitokimyasal maddeler içerir. Bu nedenle vücudumuzda oluşan serbest radikallerin etkisini hatta serbest radikal oluşumunu dahi azaltır. Serbest radikaller ilerleyen yaşla birlikte hastalıkların oluşumunu tetikler, kanser riskini artırır, görme fonksiyonlarını olumsuz etkiler.
Lif içeriği oldukça zengindir. Ara öğün olarak tüketildiğinde tokluk hissini artırır, sindirim sistemini düzenler, kabızlık sorunu yaşayanlarda faydalıdır.
Toksik maddelerin atımını sağlar, vücudun süpürgesidir adeta.
Göz sağlığını koruyucu multi vitamin etkisi vardır. İçeriğinde A vitamini, K vitamini, C vitamini, zeakzantin, lutein bulunur ve gözde katarakt oluşumundan makula dejenerasyonuna kadar korucu etkisi bulunmaktadır.
İçeriğinde yüksek oranda bulunan fito kimyasallar kansere karşı koruyu bir besin olma özelliğini artırıyor. Trabzon hurması bağışıklık sistemini güçlendirip dna hasarını da önleyerek kanser hücrelerinin artmasını önleyebilmekte. Özellikle meme kanserinden koruyan fisetin adlı maddeyi içeren ender besinlerdendir.
Serbest radikal oluşumu malesef cilt sağlığını da olumsuz etkilemekte. Cilt elastikiyetini kaybedip, kırışıklıklar ve lekelenme de görülmekte. Sağlıklı bir beslenme programı içerisinde Trabzon hurmasının yaşlanmaya karşı hücre yenileyici anti aging özelliği bulunmakta.Diyetisyen Özlem Sert Aydın
Faydalarının yanı sıra fazla tüketildiğinde ishal yapıcı, tansiyon düşürücü ve şekeri yükseltici etkileri de bulunmakta. Uygun miktarda ve ara öğün olarak tüketmek en sağlıklısı.
Kaynak: Milliyet.com.tr
Jieun Choi , 1, 2 Mi Jeong Kim , 3 Richard Komakech , 1, 2, 4 Haiyoung Jung , 3 ve Youngmin Kang 1, 2
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk reddi
Bu makale PMC'deki diğer makaleler tarafından alıntılanmıştır .
İlişkili Veriler
Veri Kullanılabilirliği Beyanı
Öz
Arka fon
Doğal ürünler, enflamatuar durumların önlenmesi ve tedavisi ile ilgili olarak insan sağlığında önemli bir rol oynar. Büyük tıbbi potansiyele sahip bitkilerden biri , ağırlıklı olarak Kore, Japonya ve Çin gibi Asya ülkelerinde yetiştirilen Diospyros kaki'dir . Sıkılaştırıcı D. kaki , Ripene d olana kadar buruk bir tada sahip yabani bir türdür . kaki kaliks, büzücü D. kaki'nin saplarından yapılan geleneksel bir Kore tıbbıdır (TKM) ve yatak ıslatma, kusma ve hıçkırık tedavisinde kullanılır. Bu çalışma, kültivar türleri ve olgunluk aşamalarına dayalı olarak büzücü D. kaki saplarının potansiyel anti-enflamatuar aktivitelerini araştırmak için tasarlanmıştır .
Yöntemler
Lokal büzücü D. kaki kültivar türlerinin sap ekstraktlarının anti-enflamatuar etkileri RAW 264.7 hücreleri üzerinde değerlendirildi. Hücre canlılığı, bir Hücre Sayım Kiti-8 ( CCK8) yöntemi kullanılarak ölçüldü . Anti-enflamatuar etkiler, süpernatanın nitrik oksit (NO) konsantrasyonu ölçülerek belirlendi. Hücresel sinyal yolakları, indüklenebilir nitrik oksit sentazın (iNOS) kantitatif polimeraz zincir reaksiyonları ile belirlendi . İNOS ve fosfo-p65'in protein ekspresyonu, western blot kullanılarak belirlendi ve p65'in nükleer lokalizasyonu, RAW 264.7 hücrelerinde eş odaklı görüntüleme kullanılarak belirlendi.
Sonuçlar
Aşama 1 (8-9 ay) numunelerinin hepsinin yüksek oranda tanik asit içeriği gösterdiğini ve Gojongsi (Hamyang) saplarının en yüksek içeriğe sahip olduğunu bulduk. Aşama 1 numuneleri aynı zamanda en yüksek NO üretimi inhibisyonunu göstermiştir. İNOS ve fosforile p65 ekspresyonundaki ve p65'in nükleer lokalizasyonundaki azalmalar doza bağımlıydı. Tüm ekstreler 100 ug / ml konsantrasyonun altında toksik değildir.
Sonuç
Bu çalışma, büzücü D. kaki'deki tanik asit içeriğindeki değişikliklere ve bunların olgunluk aşamalarıyla ilişkili olarak anti-enflamatuar etkilerine ilişkin fikir vermektedir . Bu sonuçların, doğu tıbbının etkinliğinin doğrulanmasında ve tıbbi kullanım için uygun hasat zamanlamasında yararlı olması beklenmektedir.
Anahtar Kelimeler: Antiinflamatuar, Sıkılaştırıcı D. kaki , Çeşitler, Kore geleneksel tıbbı
Arka fon
Enflamasyon, diyabet, kardiyovasküler hastalıklar, kanser, artrit, obezite, otoimmün hastalıklar ve ayrıca inflamatuar bağırsak hastalığı dahil olmak üzere çok sayıda kronik hastalık ve bozukluğun ilerlemesinde ana faktörlerden biridir [ 1 ]. Etkilenen bölgedeki hasarı sınırlandırarak enfeksiyondan veya doku hasarından sonra bir ilk savunma sağlayan çeşitli hücreleri ve sitokinleri içerir [ 2 ]. Makrofajların, edinilmiş bağışıklık ve doğuştan gelen bağışıklık gibi çeşitli konakçı yanıtlarında rol oynadığı ve aynı zamanda homeostaza dahil olduğu bilinmektedir [ 3 ]. Enfeksiyonun erken evrelerinde inflamatuar reaksiyon sırasında nitrik oksit (NO) ve sitokin üretilir ve biyolojik savunma mekanizmalarında önemli bir rol oynar [ 4]. İnflamasyon sentetik ilaçlar kullanılarak tedavi edilebilmesine rağmen, antisitokin gibi bazı antiinflamatuvar ilaçların çeşitli kinazların aktivitesini bloke etme gibi bazı olumsuz etkileri vardır, bu nedenle enfeksiyonlara karşı konak savunmasında önemli bir azalma ile sonuçlanır [ 1 ]. Bu yan etkilerden bazıları ve mevcut antiinflamatuvar tedavilerin sağlık sorunları nedeniyle, doğal antiinflamatuvar takviyelerin kullanımı daha popüler hale gelmektedir [ 1 ]. Gerçekten de, doğal ürünler enflamatuar durumlar [önlenmesi ve tedavisi ile ilgili olarak, insan sağlığında önemli bir rol oynar 5 - 7]. Sonuç olarak, güvenli ve etkili terapötik ajanlar olarak hizmet etmek için doğal etkili antiinflamatuvar ajanlara olan talep artan bir ilgi çekmiştir [ 8 ]. Bitkilerin antiinflamatuvar potansiyeli, saponinler, glikozitler gibi ikincil metabolitlerin ve tanenler ve flavonoidler dahil fenolik bileşiklerin varlığına bağlanmaktadır [ 9 ]. Ek olarak, bir fenol bileşiği olan tanin gibi bu fitokimyasallar, anti-mutajenik ve anti-kanser etkileri gibi çeşitli fizyolojik fonksiyonlara sahiptir [ 10 , 11 ]. Tanik asit özellikle yüksek bir moleküler ağırlığa sahiptir ve acı tadına neden olan birçok fenolik hidroksil grubu içerir [ 12]. Aslında tat, dil yüzeyindeki tanen ve proteinler arasındaki etkileşimin neden olduğu dehidrasyondan kaynaklanmaktadır [ 13 ]. Robbins ve arkadaşları [ 14 ] tarafından yapılan bir çalışmada , tanenlerin bitkilerin büyük otçullara karşı savunma mekanizmalarında kullandıkları ikincil metabolitlerden biri olduğu bildirilmiştir.
Trabzon hurması ( Diospyros kaki Başparmak) Ailesi Ebenaceae, serbest radikalleri süpürme kabiliyeti nedeniyle inflamatuar tepkileri iyileştirme potansiyeline sahip bitkilerden biridir [ 15 ]. Bu önemli bitki uzun yıllardır Asya ülkelerinde, özellikle Kore, Çin ve Japonya'da yetiştirilmektedir [ 16 ]. Güney Kore'de, D. kaki'nin çoğu, Gapyeong (Gyeonggi), Byeonghwa (Gyeongbuk) ve Jecheon (Chungbuk) iç bölgelerinde ve kuzey ve doğu kıyılarında [ 17 ] dağılmıştır . Bansi (Chungdo), Danseongsi ve Wolhasi gibi D. kaki çeşitleri, yerel sıcaklık ve toprak koşullarında ekime daha uygun hale getirilmiştir [18 ]. Aslında araştırmalar, D. kaki'nin soğuğa karşı diğer meyve ağaçlarından daha düşük bir toleransa sahip olduğunu göstermiştir [ 19 ]. D. kaki , tatlı çeşitler ve büzücü çeşitler olarak sınıflandırılabilir [ 20 ]. Sıkılaştırıcı D. kaki , suda çözünebilen yüksek tanen içeriğini olgunlaştırarak veya yapay olarak çıkararak burukluğunu azalttıktan sonra yenilebilir [ 21 , 22 ]. D. kaki eti yüzyıllardır yenilmekte ve son zamanlarda meyveler reçel ve sirke haline getirilmektedir [ 23 - 25 ]. Kurutulmuş yapraklar birçok toplulukta yeşil çay olarak da kullanılmaktadır [ 26]. D. kaki'nin tıbbi potansiyeli, içinde bulunan tanenler, flavonoidler, terpenoidler, steroidler, karotenoidler, gallik asit ve protokatekuik asit gibi çeşitli biyoaktif bileşiklere atfedilir [ 27 ]. Birçok fenolik bileşiğin antioksidatif, antiinflamatuvar, anti-kanserojen, anti-mutajenik ve kardiyoprotektif olduğu bilinmektedir [ 28 , 29 ]. D. kaki'nin klinik farmakokinetiği ve saplarının etkinliği eski literatürde iyi bildirilmiştir [ 30 ]. Kaki kaliks, D. kaki'nin meyvesine yapıştırılmış kaliksten yapılan geleneksel bir Kore tıbbıdır (TKM) [ 31]. Korean Herbal Pharmacopoeia'nın 4. baskısında Kaki kaliks, D. kaki'nin olgunlaşmış veya olgunlaşmış meyvesine bağlı kaliks olarak tanımlanmaktadır . Çalışmalar, D. kaki'nin kan damarları üzerinde olumlu etkileri, akciğer güçlenmesi ve ayrıca bronşiyal hastalıkların hafifletilmesi için önemli olduğunu göstermiştir [ 32 , 33 ]. TKM'de, büzücü D. kaki'nin sapları grip, ateroskleroz ve kalp hastalıklarının tedavisinde kullanılmıştır [ 32 , 34 ]. Ek olarak, D. kaki sapları da hıçkırık tedavisi için TKM'de kullanılmıştır [ 32 , 34]; inflamasyonun nedenlerinden biri olduğu bilinen bir durum [ 35 ].
Çeşitli kronik inflamasyonlarla ilişkili hastalıkların baskılanması için doğal kaynaklardan terapötik hedefler geliştirmek için bir dizi çalışma yapılmış olmasına rağmen [ 1 ], büzücü D. kaki saplarının anti-inflamatuar aktiviteleri üzerine hiçbir çalışma yapılmamıştır. Gyeongnam eyaletindeki olgunluk aşamalarına göre çeşitli kültür türleri. Bu nedenle bu çalışma , çeşitli bölgelerden seçilmiş birkaç büzücü D. kaki çeşidinin, tanik asit içeriği ve anti-enflamatuar etkileri de dahil olmak üzere bitkisel ilaçlar olarak etkinliklerine dayalı olarak optimum hasat zamanını belirlemek için gerçekleştirildi . Ek olarak, tanik asit konsantrasyonu ve antiinflamatuar potansiyelindeki varyasyonları anlamakD. kaki , endüstri ve geleneksel doğu tıbbının gelişimi için önemli olabilir.
Yöntemler
Büzücü D. kaki koleksiyonu
Bu çalışmada, sırasıyla Hamyang, Hamyang ve Miryang bölgelerinden üç yerel büzücü D. kaki çeşidi (Gojongsi, Danseongsi ve Bansi) toplanmıştır (aşama 1, 19 Ağustos; aşama 2, 14 Ekim; ve aşama 3, 20 Ocak). Örnekler Kore'nin Gyeongsangnam kentindeki Kore Orman Çevre Araştırma Enstitüsünde tanımlandı ve Kore Doğu Tıbbı Enstitüsü'ndeki halka açık bir herbaryuma bırakıldı ve KIOM201501015023- KIOM201501015025 numaralı fişlerle verildi. Büzücü D. kaki örnekler bölgesel özelliklere ve olgunluğa göre toplanmış ve saplar kesilip olgunlaşmamış (Ağustos'tan Eylül'e kadar toplanmış), olgun aşama (Ekim'den Kasım'a kadar toplanmış) ve kurutulmuş aşama (Aralık'tan Ocak'a kadar toplanmış) olarak sınıflandırılmıştır.
Büzücü D. kaki'nin saplarından ekstraksiyon
Bu deneyde kullanılan 9 örnek, Hamyang Gojongsi, Hamyang Danseongsi ve Miryang Bansi'den elde edilen 3 olgunlaşmamış sap örneği, 3 olgun sap örneği ve 3 kuru sap örneğidir. Ekstraksiyon işlemi için kullanılan etanol ve metanol reaktifleri, yüksek performanslı sıvı kromatografi (HPLC) dereceli (JT Baker Inc., Phillipsburg, NJ, ABD) olarak satın alındı. Çözücüler ve numuneler, kullanılmadan önce 0.2 um'lik bir membran filtre (PALL Corporation, Ann Arbor, MI, ABD) ile filtre edildi. 9 örneğin her biri için, 10 g kurutulmuş öğütülmüş örnek 72 saat 250 mL% 70 etanol ile maserasyon yöntemi kullanılarak ekstrakte edildi. Ekstreler filtre kağıdı (ADVANTEC, 110 mm, Toyo Robni kaisha, Japonya) kullanılarak süzüldü ve EYELA N-1200B (Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Japonya) verimli döner buharlaştırıcı. Konsantre ekstrakt daha sonra vakumla kurutuldu. Daha sonra 50 mg / mL çözelti, farklı numunelerden her bir özün ayrı ayrı% 80 metanol içerisinde çözündürülmesiyle elde edildi. HPLC analizi için numuneler, enjeksiyon ve analizden önce 0.45 um membran filtre (PALL Corporation, Ann Arbor, MI, ABD) kullanılarak filtre edildi.
HPLC kullanılarak tanik asit içeriklerinin analizi
Bu çalışmada bir HPLC sistemi (Alliance® HPLC, Waters Corporation, Manchester, UK) kullanılmıştır. Kolon bir Phenomenex Luna C18 (2) (250 × 4.6 mm, 5 μm), kolon sıcaklığı 40 ° C ve numune sıcaklığı 25 ° C idi. % 0.1 asitli HPLC dereceli su ve% 0.1 asitli HPLC dereceli Metanolden oluşan mobil faz kullanıldı. Kalibrasyon eğrileri 5 konsantrasyon (25, 50, 100, 150 ve 200 ug / mL) tanik asit standardı (Sigma-Aldrich Co., Inc. FLUKA, Trace SELECT, ABD) kullanılarak analiz edildi. Mobil fazın akış hızı 1.0 mL / dk'ya ayarlandı, standart ürünün enjeksiyon miktarı 10 μL'ye ayarlandı ve 9 örneğin enjeksiyon miktarı 20 μL'ye ayarlandı. Tüm numuneler için analiz süresi toplamda 30 dakikaya ayarlandı. Analitik dalga boyu 190 ila 400 nm'de ölçüldü ve 220 nm'de analiz edildi. Her bileşenin UV spektrumu ölçüldü. HPLC ile ilgili tüm deneyler üç kez tekrarlandı ve içerik analizi ortalama bir değerle tamamlandı.
RAW 264.7 hücrelerinin ve hücre canlılığı analizinin hazırlanması (CCK-8 testi)
RAW 264.7 makrofajlar% 5 CO, 37 ° C 'de, RPMI,% 10 cenin sığır serumu (FBS) ve% 1 antibiyotik içeren 1640 ortamında (WelGENE Daegu, Kore) içinde kültürlenmiştir 2 atmosfer. RAW 264.7 makrofajları, 24 saat boyunca farklı olgunluklarda çeşitli sap ekstresi konsantrasyonları (0, 10, 50, 100, 200, 500 ve 1000 μg / ml) ile muamele edildi. RAW 264.7 makrofaj hücrelerinin substratlar üzerindeki proliferasyonu, hücre sayma kiti analizi (CCK-8, Dojindo, Kumamoto, Japonya) ile belirlendi. Bütün örnekler, 5 x 10 bir yoğunluğa sahip 96 oyuklu bir plaka içerisine yerleştirildi ve tohumlanmıştır 4 de / hücreleri. Absorbans, bir ELISA plaka okuyucu kullanılarak 450 nm'de ölçüldü.
Western analizi kullanılarak NO tahlili ve immünoblotlama
RAW 264.7 hücre hatlarından üretilen NO seviyesi, ticari olarak temin edilebilen bir NO saptama kiti (iNtRON, Inc., Seoul, Kore) kullanılarak belirlendi. RAW 264.7 hücreleri, 1 saat süreyle sap özleri (0, 10, 20, 50 ve 100 ug / ml'de) ile ön işleme tabi tutuldu, ardından lipopolisakkaritlerle (LPS, 1 ug / ml) 24 saat süreyle inkübe edildi. Bütün örnekler, 1 x 10 bir yoğunluğa sahip 48 oyuklu bir plaka içerisine yerleştirildi ve tohumlanmıştır 5hücreler / kuyu. 24 saat inkübe edildikten sonra, 100 uL süpernatan toplandı ve üç kopya halinde oyuklara eklendi; Her kuyuya 50 uL N1 tamponu ilave edildi ve plaka, oda sıcaklığında 10 dakika inkübe edildi. Daha sonra 50 ul N2 tamponu ilave edildi ve nihai reaksiyon, oda sıcaklığında 10 dakika inkübe edildi. Absorbans, çok plakalı bir okuyucu (Lambda Bio-20; Beckman Coulter, Inc., Brea, CA, ABD) kullanılarak 540 nm'de ölçüldü.
Süpernatanın nitrit konsantrasyonu, bir nitrit standart eğrisi kullanılarak belirlendi. Western blot analizi için RAW 264.7 hücreleri, 1 saat süreyle sap ekstraktları (0, 10, 20, 50 ve 100 ug / ml'de) ile ön işleme tabi tutuldu, ardından 24 saat süreyle LPS (1 ug / ml) ile inkübasyon yapıldı. Bütün örnekler, 1 x 10 bir yoğunluğa sahip bir 6-yuvalı plaka içine yerleştirilmiş ve tohumlanmıştır 6hücreler / kuyu. Hücreler buzla soğutulmuş fosfat tamponlu salin (PBS) ile hasat edildi ve liziz tamponunda (50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl,% 1 v / v IGEPAL® CA-630, 1 mM PMSF, 1) lize edildi mM sodyum florür ve 10 ug / ml aprotinin ve leupeptin). Hücre lizatları, 4 ° C'de 15 dakika 13,000 rpm'de santrifüjlenerek toplandı. Toplanan süpernatanların protein konsantrasyonu, bir BCA ™ protein deney kiti (Pierce, Rockford, IL, ABD) kullanılarak belirlendi. Tüm lizatlar, SDS-PAGE jeli üzerine aynı miktarda protein ile yüklendi. Proteinler daha sonra bir PVDF membranına (Millipore, Bedford, MA, ABD) aktarıldı. 27 ° C'de 40 dakika boyunca 1xPBST'de% 5 w / v yağsız süt ile bloke edildikten sonra,
RNA izolasyonu ve kantitatif gerçek zamanlı PCR
Toplam RNA, üreticinin talimatlarına göre bir RNeasy Mini Kit (Qiagen, Gaithersburg, MD, ABD) kullanılarak RAW 264.7 hücre hatlarından ekstrakte edildi. Hücreler 1 x 10 bir yoğunlukta plakalandı 66 kuyucuklu bir plakada hücre / oyuk ve 1 saat boyunca 0, 10, 50 ve 100 ug / ml konsantrasyonlarda sap özleri ile ön işleme tabi tutuldu. Daha sonra hücreler, 24 saat boyunca LPS (1 ug / ml) ile uyarıldı. 24 saat inkübasyondan sonra hücreler soğuk PBS ile yıkandı ve toplandı. Toplam RNA'lar, bir ReverTra Ace® qPCR RT Kiti (Toyobo Co, Osaka, Japonya) kullanılarak birinci sarmal cDNA'lara ters transkripsiyona tabi tutuldu ve bir SYBR Green PCR Ana Karışımı kullanılarak gerçek zamanlı PCR (Takara Bio Inc., Shiga, Japonya) ile analiz edildi ( Takara Bio Inc., Shiga, Japonya) özel primerler ile. MRNA ekspresyon seviyesi, kontrol olarak GAPDH kullanılarak hesaplandı. Primer sekansları aşağıdaki gibiydi: indüklenebilir nitrik oksit sentaz (iNOS), ileri 5p- GGCAGCCTGTGAGACCTTTG-3 've geri 5p- GCATTGGAAGTGAAGCGTTTC-3'; GAPDH, ileri 5′-ATGCCTCCTGCACCACCA-3 ′ ve geri 5′- CCATCACGCCACAGTTTCC-3 ′.
P65 lokalizasyonu için konfokal mikroskopi
Sap ekstraktlarının nükleer faktör κB (NF-κB) p65'in nükleer translokasyonu üzerindeki etkisi immünofloresans ile değerlendirildi. Bu deneyler için RAW 264.7 hücreleri, 1 saat süreyle 100 ug / ml sap ekstraktları ile ön işlemden geçirildi ve 30 dakika süreyle LPS (1 ug / ml) ile işlenerek hasat edildi. Hücreler, 10 dakika süreyle 12 oyuklu plakalarda yuvarlak cam kapak fişleri üzerine kaplandı. Örnekler daha sonra soğuk PBS ile yıkandı ve oda sıcaklığında 15 dakika% 4 formaldehit içinde sabitlendi, ardından 4 ° C'de 15 dakika PBS içinde% 0.2 Triton X-100 ile geçirgenleştirildi. Hücreler, PBS içinde% 5 BSA ile 1 saat süreyle bloke edildi ve gece boyunca 4 ° C'de anti-p65 birincil antikoru ile inkübe edildi. PBS ile üç yıkamadan sonra hücreler Alexa Fluor 546-konjuge keçi-anti tavşan IgG'si (Invitrogen, Carlsbad, California, ABD) ile 1 saat oda sıcaklığında inkübe edildi ve sonra tekrar PBS ile yıkandı.
istatistiksel analiz
Her gruptan (deneysel ve kontrol) toplanan veriler ortalama ± SD olarak ifade edildi. Eşleştirilmemiş t-testleri (Prism programında, Graph Pad Software, San Diego, CA; iki kuyruklu, P <0.05) deney ve kontrol grupları arasındaki farkları analiz etmek için kullanıldı.
Sonuçlar
HPLC kullanılarak tanik asit içeriklerinin analizi
Farklı saplardan elde edilen özler (Şek. 1) tanik asit içeriklerini belirlemek için HPLC ile analiz edildi. Tüm örneklerin ve standart tanik asidin tutulma süresinin 6 dakika olduğu bulundu. Olgunluğa göre tanik asit içeriklerinin HPLC analizi, tanik asit içeriğinin olgunlaşmamış büzücü D. kaki'de olgun veya kurutulmuş olanlardan daha yüksek olduğunu gösterdi (Şek. 2). Şekil 1'de gösterildiği gibi. 2Hamyang Gojongsi'den kurutulmuş olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin sapları en yüksek tanik asit içeriğine (2.597 mg / g), ardından Hamyang Danseongsi (2.350 mg / g) ve ardından Miryang Bansi'ye (2.217 mg / g) sahipti. Tanik asit içeriği, olgunlaşmamış D. kaki saplarının en yüksek tanik asit konsantrasyonuna sahip olması ve en az kurutulmuş saplarda bulunması ile olgunluk derecesine göre azalma eğilimi göstermiştir . Miryang Bansi saplarındaki tanik asit içeriği, Hamyang Gojongsi ve Hamyang Danseongsi saplarına kıyasla, olgunlaşmamış ve olgun aşama arasında (2,217 mg / ml'den 0,615 mg / ml'ye) daha hızlı azaldı.
Şekil 1
Hamyang'daki Gojongsi, Hamyang'daki Danseongsi ve Miryang'daki Bansi'nin üç farklı bölgesinden büzücü D. kaki'nin görünümü farklı mevsimlerde elde edildi. 1: Hamyang (Gojongsi), Hamyang (Danseongsi) ve Miryang'da (Bansi) kurutulmamış olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin (SUIAP) sapı. 2: Hamyang (Gojongsi), Hamyang (Danseongsi) ve Miryang'da (Bansi) kurutulmamış olgun büzücü D. kaki'nin (SUMAP) sapı. 3: Hamyang (Gojongsi), Hamyang (Danseongsi) ve Miryang'da (Bansi) kurutulmuş büzücü D. kaki (SDAP) sapı
İncir. 2
Tanik asit içeriklerinin analizi. Büzücü D. kaki'de farklı olgunluk aşamalarından sapların tanik asit içeriği . Özetlenmiş veriler, daha önce yayınlanmış olan Choi ve ark. (2017) JALS 51 (3): 49–60
Sap ekstraktlarının hücre canlılığı üzerindeki etkileri
Sonuçlar, 10, 50 ve 100 μg / ml'lik konsantrasyonlarda kurutulmamış olgunlaşmamış büzücü D. kaki sapı ekstresinin, kontrol hücrelerine kıyasla RAW 264.7 hücrelerinin canlılığını artırdığını ve daha yüksek konsantrasyonların (200, 500, 1000 μg / ml) olduğunu göstermektedir. ) hücrelerin canlılığı üzerinde önemli olumsuz etkilere sahipti (Şek. 3).
Şekil 3
RAW 264.7 makrofaj hücrelerinde çeşitli sap ekstraktlarının hücre canlılığı üzerindeki etkileri. Hücreler, 24 saat boyunca çeşitli sap ekstraktlarının konsantrasyonları (0, 10, 50, 100, 200, 500, 1000 ug / ml) ile muamele edildi. Hücre canlılığı, CCK-8 deneyi kullanılarak ölçüldü. Sonuçlar, en az üç bağımsız deneyin ortalama ± SD'si olarak sunulur. * P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001, **** P <0.0001
Sap ekstraktlarının LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde NO üretimi üzerindeki etkileri
Tüm numune özütleri, LPS ile aktive edilmiş RAW 264.7 makrofajlarında NO üretimi üzerinde önleyici etkiler gösterdi. Olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarından elde edilen ekstreler ile muamele edilen hücreler , daha olgun sap ekstreleri ile muamele edilenlere kıyasla NO üretiminde daha büyük bir azalma gösterdi (Şek. 4).
Şekil 4
LPS ile indüklenen RAW 264.7 hücrelerinde NO üretimi üzerindeki çeşitli sap ekstraktlarının inhibe edici etkileri. Hücreler, 1 saat süreyle çeşitli konsantrasyonlarda (0, 10, 20, 50, 100 ug / ml) sap ekstraktları ile ön işleme tabi tutuldu ve ardından LPS (1 ug / ml) ilave edildi ve 24 saat inkübe edildi. 24 saat sonra ortamdaki nitrit konsantrasyonları NO Saptama Kiti ile belirlendi. Sonuçlar, en az üç bağımsız deneyin ortalama ± SD'si olarak sunulur. * P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001, **** P <0.0001
Sap ekstraktlarının LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde iNOS ekspresyonu üzerindeki etkileri
İNOS ekspresyonu, 100 μg / ml'de özüt muameleleri ile güçlü bir şekilde inhibe edildi (Şekil. 5a). Olgunlaşmamış büzücü D. kaki'den elde edilen sap ekstraktları, doza bağlı bir şekilde iNOS'un protein ekspresyonunu azaltmıştır (Şek.(Şekil 5b).5b). Bu sonuçlar, ekstraktların protein seviyesinde olduğu kadar mRNA'da iNOS enziminin ekspresyonunu düzenlediğinden, ekstrelerin LPS ile indüklenen NO üretimi üzerindeki inhibitör etkilerinin iNOS ekspresyonunun bastırılmasından kaynaklandığını kuvvetle göstermektedir.
Şekil 5
Sap ekstraktlarının RAW 264.7 makrofajlarında iNOS ekspresyonunun LPS ile uyarılan yukarı regülasyonu üzerindeki inhibe edici etkisi. Hücreler, 1 saat süreyle farklı konsantrasyonlarda (0, 10, 50, 100 ug / ml) sap ekstraktları ile ön işleme tabi tutulmuş ve ardından 24 saat boyunca LPS (1 ug / ml) ile uyarılmıştır. a iNOS seviyeleri RT-qPCR ile ölçüldü ve GAPDH'ye normalize edildi. b Hücreler, LPS (1 ug / ml) ile 24 saat inkübasyondan önce 1 saat boyunca belirtilen konsantrasyonlarda sap özleri ile ön işleme tabi tutuldu. İNOS ve-aktin protein ekspresyonu western blot analizi ile değerlendirildi. Sonuçlar, en az üç bağımsız deneyin ortalama ± SD'si olarak sunulur. * P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001
Sap ekstraktlarının LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde NF-κB'nin aktivasyonu üzerindeki etkileri
Şekil 1'de gösterildiği gibi. 6a, fosforile p65, ekstraktların konsantrasyonunun artırılmasıyla önemli ölçüde inhibe edildi. Pozitif kontrol, LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücreleri, p65'in çekirdeğe translokasyonunda dramatik artışlar gösterdi, ancak LPS ile uyarılmış NF-κB nükleer translokasyonu, sap ekstraktında ön işlemden sonra belirgin şekilde bastırıldı (Şek.(Şekil 6b).6b). Bu sonuçlar, sap ekstraktının p65'in fosforilasyonunu ve nükleer translokasyonunu inhibe ederek NF-κB'nin aktivasyonunu inhibe ettiğini göstermektedir.
Şekil 6
Sap ekstraktlarının LPS kaynaklı NF-kB aktivasyonu üzerindeki inhibe edici etkileri. a Sap ekstraktlarının RAW 264.7 makrofajlarda LPS ile indüklenen p65 fosforilasyonu üzerindeki inhibe edici etkisi. Hücreler, 1 saat süreyle LPS (1 ug / ml) ile inkübasyondan önce, belirtilen konsantrasyonlarda 1 saat süreyle sap özleri ile ön işleme tabi tutuldu. P-p65 ve p-aktinin protein ekspresyonu, western blot analizi ile değerlendirildi. b Sap ekstraktlarının RAW 264.7 makrofajlarda LPS ile indüklenen p65 nükleer translokasyonu üzerindeki inhibe edici etkisi. Hücreler, 1 saat süreyle sap ekstraktları (100 ug / ml) ile ön işleme tabi tutuldu, ardından 30 dakika süreyle LPS (1 ug / ml) ile uyarıldı. Örnekler, anti-p65 antikoru, Alexa Fluor 546 keçi anti-tavşan antikoru ve DAPI ile boyandı, ardından konfokal mikroskopi analizi ile belirlendi
Tartışma
D. kaki , karotenoidler, tanenler, flavonoidler, şekerler, hidrokarbonlar, lipidler, hidrokarbonlar, aromatikler, terpenoidler ve steroidler gibi çeşitli tıbbi biyoaktif bileşiklere sahiptir. Büzücü D. kaki , vahşi bir türdür ve tamamen olgunlaşana kadar buruk bir tada sahiptir, bu aşamada tanen içeriği tamamen çözünmez bir yapıya dönüşür. Suda çözünür tanen bileşenleri içeren sıkıcı D. kaki'nin acı bir tadı vardır ve tanik asidin yaşlanmayı geciktirici, kanser önleyici ve otçul savunma etkilerine sahip olduğu gösterilmiştir [ 13 , 20 , 25 ]. Büzücü D. kaki'nin saplarından ekstrakt elde ettik .ve olgunluk seviyelerine göre tanik asit içeriğini analiz etti. Farklı olgunluk aşamalarında üç tür büzücü D. kaki'nin tanik asit içerikleri, tüm olgunlaşmamış sapların, olgun ve kurutulmuş saplardan daha yüksek tanik asit içeriğine sahip olduğunu gösterdi. Bu çalışmanın sonuçları Jeong [ 18 , 34 ] tarafından yapılan bir araştırmanın sonuçlarıyla tutarlıdır ve kuruma işlemi sırasında burukluk giderildikçe D. kaki'deki tanik asit konsantrasyonunun azaldığını göstermektedir. D. kaki , üç aşamalı S şeklinde bir büyüme eğrisi gösterir ve şeker içeriğinin, özellikle Ekim ayından sonra güneş ışığından önemli ölçüde etkilendiği bildirilmiştir [ 36]. Bu çalışmada, yararlı bileşen içeriği D. kaki'nin büyüme aşamasına bağlı olarak önemli ölçüde farklıydı . Del Bubba vd. [ 37 ], ekili Rojo Brillante ve Kaki Topo'daki çözünür tanik asit içeriğinin Temmuz'dan Kasım'a arttığını, ancak Aralık'ta hızla azaldığını, şeker içeriğinin ise Eylül'den itibaren arttığını buldu. Ek olarak, sıcaklık, aylık yağış, güneşlenme süresi ve günlük aralık gibi çeşitli hava faktörlerinin D. kaki meyve ağırlığını ve kalitesini etkilediği gözlenmiştir [ 17 ]. Analiz edilen dokuz numuneden, olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarıHamyang Gojongsi'den en yüksek tanik asit içeriği (2.597 mg / g) vardı. Myrang Bansi örneklerinden elde edilen tanik asit içeriği, sırasıyla, olgunlaşmamış ve olgun aşamalarda 2.217 mg / g'dan 0.615 mg / g'ye önemli ölçüde azalmıştır. Lee [ 38 ] ayrıca Cheongdo Bansi meyvelerinin fenol içeriklerinin Temmuz ve Ağustos aylarında ve Eylül ve Ekim aylarında hızla azaldığını bildirdi. Bu çalışmada, üç farklı bölgeden büzücü D. kaki saplarının tanik asit içerikleri, olgun aşamada tanik asit içeriğinde önemli farklılıklar göstermiştir. Büzücü D. kaki'nin tanik asit içeriğinin önceki analiziüç farklı bölgeden (Sancheong Gojongsi, Sancheong Danseongsi ve Miryang Bansi), tanik asit içeriğinin kurutulmuş D. kaki'de kurutulmuş olanlara göre % 30 daha yüksek olduğunu gösterdi [ 39 ]. 2015 ve 2016 yıllarında Gyeongsangnam-do eyaletindeki üç çeşitte tanik asit içeriklerindeki değişim benzer eğilimler gösterdi. Büzücü D. kaki'nin kullanımını artırmak için , olgunluğa göre tanik asit içeriğini araştırdık ve büzücü D. kaki hasat etmenin önemli olduğunu belirledik .tamamen olgunlaştıklarında; tanik asidin en düşük olduğu bir zamanda. Bununla birlikte, kapsamlı sonuçlar için çeşitli mevsimlerde daha fazla analiz yapılması gerekir. Çevre koşullarındaki varyasyondan kaynaklanan etkilere ek olarak, D. kaki'nin burukluğu da genetik faktörlere bağlanabilir [ 40 ]. Diospyros kaki'nin meyvesinde büyük miktarda proantosiyanidin biriktirdiği ve bunun da buruk tadı verdiği bilinmektedir [ 41 ]. Proantosiyanidin biyosentez yollarının transkripsiyonel düzenlenmesi, farklı hurma meyveleri çeşitlerindeki değişen burukluk seviyelerine atfedilen birçok faktörden biri olabilir [ 40 , 42]. Proantosiyanidinlerin regülasyonu için birbirleriyle bir protein kompleksi oluşturan Myb transkripsiyon faktörü (DkMYB4) ve bHLH transkripsiyon faktörü (DkMYC1), farklı D. kaki çeşitlerinde proantosiyanidinlerin farklı ekspresyonunda [ 41 ] ve dolayısıyla varyasyonda merkezi bir role sahip olabilir. içlerinde burukluk düzeyinde. Ayrıca, hurmadan elde edilen WD40-tekrar proteininin, meyvelerde proantosiyanidin birikimini düzenlemek için persimmon'da MYB-bHLH-WD40 kompleksleri oluşturmak üzere proantosiyanidin biyosentezi DkMYB2 ve DkMYB4 düzenleyicileri ile etkileşime girdiği gözlenmiştir [ 42 ].
Sıkılaştırıcı D. kaki'nin sapları Kore'de geleneksel ilaç olarak (Kaki kaliks olarak bilinir) ve yatak ıslatma, kusma ve hıçkırık tedavisinde kullanılmaktadır. Çalışmalar ayrıca D. kaki'nin anti-enflamatuar etkileri olduğunu da göstermiştir . Makrofajlar, çeşitli preinflamatuar aracılar ürettikleri için enflamatuar reaksiyonların gelişimi için kritiktir. NO biyolojik savunma mekanizmalarında önemli bir rol oynar [ 4 ] ancak aşırı NO üretimi, romatoid artrit ve otoimmün bozukluklar gibi inflamatuar hastalıkların gelişmesine neden olur [ 43 ]. Bu nedenle, NO üretimini engellemek, anti-enflamatuar tedaviler için ana hedeftir. Bu nedenle, büzücü saplarından elde edilen ekstrelerin olup olmadığını araştırdık.D. kaki , LPS ile uyarılan iltihaplı bir durumda NO üretimini ve iNOS protein ifadesini bloke etti. Olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin en etkili olduğu ve doza bağlı olarak hareket ettiği bulundu (Şek.(Şekil 4).4). Şekil 1'de gösterildiği gibi.Şekil 5,5Olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarından elde edilen özler, doza bağlı bir şekilde iNOS'un protein ekspresyonunu azaltmıştır. Çoğu hücre tipinde NF-B, iltihaplanma ile ilgili önemli bir transkripsiyonel faktördür. NF-κB, pro- ve anti-inflamatuar özelliklere sahip bir dimerik molekül ailesidir. Memelilerde, NF-κB ailesi beş proteinden oluşur: NF-κB1 (p50 / 105), NF-κB2 (p52 / 100), Rel A (p65), Rel B ve c-Rel [ 34 , 44 ]. Bunlardan p65 / p50 heterodimer, en baskın proinflamatuar kompleks ve p65 nükleer translokasyondur ve DNA bağlanması tipik olarak NF-κB yolağının aktivasyonu olarak tanımlanır [ 45]. LPS gibi harici uyaranlarla aktivasyon üzerine, IκB proteini fosforile edilir, bozulur ve çekirdeğe yer değiştirir. Bu nedenle, IκB'nin degradasyonu, NF-κB'nin gen transkripsiyonunu düzenlediği çekirdeğe translokasyonunu serbest hale getirir. NF-κB aktivasyonu, proinflamatuvar mediyatörlerin ve iNOS, COX-2 ve NO gibi sitokinlerin transkripsiyonuna yol açar [ 46]. Sap özlerinin NO üretimini baskıladığını ve transkripsiyonel ve transkripsiyon sonrası seviyelerde iNOS ekspresyonunu düşürdüğünü ve ayrıca LPS ile uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde p65 nükleer translokasyonunu azalttığını bulduk. Bu sonuçlar, sap özlerinin, p65 fosforilasyonunu azaltarak NF-KB'nin inaktivasyonu yoluyla iNOS ekspresyonunu inhibe ettiğini gösterir. RAW 264.7 makrofajlarında NF-KB yolağının inhibisyonu, pro-enflamatuar mediyatörleri aşağı regüle etti ve dolayısıyla olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarının anti-enflamatuar etkilerini sergiledi . Sapların yanı sıra, önceki çalışma, D. kaki'nin meyvelerinin, serbest radikalleri süpürme kabiliyeti nedeniyle inflamatuar tepkileri iyileştirme potansiyeline sahip olduğunu da göstermiştir [ 15, 34 ]. Sonuç olarak, olgunlaşmamış büzücü D. kaki'nin saplarının anti-enflamatuar potansiyeli , hastalık durumlarının tedavisinde kullanılmak üzere kullanılabilir.
Sonuç
Bu çalışma , Gyeongnam eyaletindeki büzücü D. kaki ( Diospyros kaki Thunb.) Saplarının tanik asit içeriğini ve anti-enflamatuar aktivitelerini , kültür türlerine ve olgunluk aşamalarına göre araştırdı ve etkinliklerine göre optimum hasat süresini önermek için: bitkisel bir ilaç. Analiz edilen tüm numunelerin tanik asit içerdiği bulundu ve evre 1 (8-9 aylık) numuneler, özellikle Gojongsi'den (Hamyang) olanlar olmak üzere en yüksek tanik asit içeriği yüzdesine sahipti. Ayrıca sap ekstraktlarının antienflamatuvar etkileri doğrulanmış ve etkilerinin olgunluğa göre azaldığı görülmüştür. Bu çalışma, büzücü D. kaki'nin tanik asit içeriğinin nasıl olduğuna dair temel bilgiler sağlar.farklı olgunluk düzeylerinde saplar değişir. Bu özütlerin anti-enflamatuar etkilerinin, doğu tıbbının etkinliğinin doğrulanmasında yardımcı olması beklenmektedir. Büzücü D. kaki'nin tıbbi ve tıbbi olmayan kullanımı için optimum hasat sürelerinin 8-9 ay olduğunu öne sürüyoruz , ancak bu bulguların işbirliği için daha fazla araştırma yapılması gerekiyor.
Teşekkürler
Bu çalışmada kullanılan D. kaki örneklerini özel olarak tanımlayan Kore, Gyeongsangnam-do'daki Kore Orman Çevre Araştırma Enstitüsü'nden Dr. SM Kang'a özellikle teşekkür ederiz .
Kısaltmalar
| CCK8 | Hücre Sayma Kiti-8 |
| COX-2 | Siklooksijenaz-2 |
| DNA | Deoksiribonükleik asit |
| HPLC | Yüksek performanslı sıvı kromatografisi |
| INOS | Uyarılabilir nitrik oksit sentaz |
| LPS | Lipopolisakkarit |
| NF-Κb | Nükleer faktör-kappa B |
| HAYIR | Nitrik oksit |
| PCR | Polimeraz zincirleme reaksiyonu |
| RNA | Ribonükleik asit |
| TKM | Geleneksel Kore tıbbı |
JC deneyi gerçekleştirdi, MK biyoaktif kimyasal analizi gerçekleştirdi, HJ & RK makaleyi eleştirel bir şekilde revize etti ve YK tüm örnekleri topladı ve çalışma tasarımını ve makalenin tartışma bölümünü yazdı. Tüm yazarlar, makalenin son bilimsel yazısını tartıştı ve üzerinde anlaştı.
Yazarların bilgileri
Jieun Choi (MS): Bilim ve teknoloji Üniversitesi, Kore Oryantal Tıp enstitüsü kampüsünde yüksek lisans öğrencisi. Mi Jeong Kim (PhD): Kore Biyobilim ve Biyoteknoloji Araştırma Enstitüsü, İmmünoterapi Araştırma Merkezi'nde doktora sonrası araştırmacı. Richard Komakech: Bilim ve teknoloji Üniversitesi, Kore Doğu Tıbbı enstitüsü kampüsünde doktora öğrencisi ve Uganda, Sağlık Bakanlığı Doğal Kemoterapötik Araştırma Enstitüsü'nde araştırmacı. Haiyoung Jung (PhD): Kore Biyobilim ve Biyoteknoloji Araştırma Enstitüsü, İmmünoterapi Araştırma Merkezi'nde baş araştırmacı. Sorumlu yazar Youngmin Kang (Ph.D): Kore Oryantal Tıp Enstitüsü'nde baş araştırmacı ve Kore Bilim ve Teknoloji Üniversitesi Profesörü.
Finansman
Bu çalışma, Kore Bitkisel Tıbbı ile İlişkili Yeni Maya Suşu [KIOM G15050 onaylı ] kullanılarak Anti fungisitin Geliştirilmesi ; Diospyros kaki Calyx [hibe sayısı K17690]; Endüstrinin talebine dayalı olarak Kore Bitkisel Tıbbı İle İlgili Patent Mayası kullanılarak Kozmetik Korumanın Geliştirilmesi [hibe numarası K18720]; Standardize Edilmiş Bitkisel Kaynakların Uygulamalı Geliştirilmesi [hibe numarası KSN1911420]; Kore Oryantal Tıp Enstitüsü'nden (KIOM), Kore Cumhuriyeti Bilim ve BİT Bakanlığı aracılığıyla.
Veri ve materyallerin mevcudiyeti
Ham veriler, Kore Oryantal Tıp Enstitüsü'nün Standart Bitkisel Kaynaklar Merkezi'ndeki halka açık bir depoda saklanmıştır ve yazarların makul talebi üzerine kullanılabilir.
Etik onay ve katılma izni
Uygulanamaz. Yayın izni
Uygulanamaz. Çıkar çatışması
Yazarlar, rakip çıkarları olmadığını beyan ederler.
Dipnotlar
Yayıncının Notu
Springer Nature, yayınlanan haritalardaki ve kurumsal bağlantılardaki yargı yetkisi iddiaları konusunda tarafsız kalır.
Katılımcı Bilgileri
Jieun Choi, E-posta: rk.er.moik@iohcej .
Mi Jeong Kim, E-posta: rk.er.moik@600otit .
Richard Komakech, E-posta: rk.er.moik@drahcir .
Haiyoung Jung, E-posta: rk.er.bbirk@gnuoyiah .
Youngmin Kang, E-posta: rk.er.moik@gnakmy .
Referanslar
1. Arulselvan P, Fard TM, Tan SW, Gothai S, Fakurazi S, Norhaizan EM, Kumar SS. Enflamasyonda antioksidanların ve doğal ürünlerin rolü. Oxidative Med Cell Longev. 2016; 2016 : 5276130. doi: 10.1155 / 2016/5276130. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
2. Huang BP, Lin CH, Chen YC, Kao SH. Perilla frutescens yaprak özütünün lipopolisakkarit ile uyarılan RAW 264. 7 hücreleri üzerindeki anti-enflamatuar etkileri. Mol Med Rep. 2014; 10 (2): 1077–1083. doi: 10.3892 / mmr.2014.2298. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
3. Kim EO, Lee H, Cho CH, Kim YJ, Kim DO. Kurutulmuş hurmaların etil asetat fraksiyonunun (Diospyros kaki thumb.) THP-1 insan akut monositik lösemi hücre hattı üzerindeki antioksidan kapasitesi ve anti-enflamatuar etkisi. J Korean Soc Appl Biol Chem. 2011; 54 (4): 606–611. doi: 10.3839 / jksabc.2011.087. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
4. Matsuda H, Morikawa T, Ando S, Toguchida I, Yoshikawa M. Nitrik oksit üretimini inhibe edici aktivite ve etki mekanizması için flavonoidlerin yapısal gereksinimleri. Bioorg Med Chem. 2003; 11 (9): 1995–2000. doi: 10.1016 / S0968-0896 (03) 00067-1. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
5. Yuan G, Wahlqvist ML, He G, Yang M, Li D. Doğal ürünler ve anti-enflamatuar aktivite. Asia Pac J Clin Nutr. 2006; 15 (2): 143–152. [ PubMed ] [ Google Scholar ]
6. Javadi B, Sahebkar A. Otoimmün miyokardite karşı anti-inflamatuar ve immünomodülatör aktivitelere sahip doğal ürünler. Pharmacol Res. 2017; 124 : 34–42. doi: 10.1016 / j.phrs.2017.07.022. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
7. Azab Abdullatif, Nassar Ahmad, Azab Abed. Doğal Ürünlerin Anti-Enflamatuar Aktivitesi. Moleküller. 2016; 21 (10): 1321. doi: 10.3390 / molecules21101321. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
8. Gosslau A, Li S, Ho CT, Chen KY, Rawson NE. Antiinflamatuar aktivitelerine ilişkin çalışmalarda doğal ürün karakterizasyonunun önemi. Mol Nutr Food Res. 2011; 55 (1): 74–82. doi: 10.1002 / mnfr.201000455. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
9. Boudet AM. Fenolik bileşiklerdeki araştırmanın gelişimi ve güncel durumu. Fitokimya. 2007; 68 (22): 2722–2735. doi: 10.1016 / j.phytochem.2007.06.012. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
10. Minussi RC, Rossi M, Bologna L, Cordi L, Rotilio D, Pastore GM, Durán N. Ticari şarapların fenolik bileşikleri ve toplam antioksidan potansiyeli. Food Chem. 2003; 82 (3): 409–416. doi: 10.1016 / S0308-8146 (02) 00590-3. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
11. Veberic R, Jurhar J, Mikulic-Petkovsek M, Stampar F, Schmitzer V. 11 hurma meyvesi (Diospyros kaki L.) çeşidinde birincil ve ikincil metabolitlerin karşılaştırmalı çalışması Food Chem. 2010; 119 (2): 477–483. doi: 10.1016 / j.foodchem.2009.06.044. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
12. Hagerman AE, Riedl KM, Jones GA, Sovik KN, Ritchard NT, Hartzfeld PW, Riechel TL. Biyolojik antioksidanlar olarak yüksek moleküler ağırlıklı bitki polifenolikleri (tanenler). J Agric Food Chem. 1998; 46 (5): 1887–1892. doi: 10.1021 / jf970975b. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
13. Parfitt DE, Yonemori K, Honsho C, Nozaka M, Kanzaki S, Sato A, Yamada M. Asya hurması çeşitleri, buruk ve büzücü olmayan türler arasındaki ilişkiler. Ağaç Genet Genomları. 2015; 11 (2): 1–9. doi: 10.1007 / s11295-015-0848-z. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
14. Robbins CT, Hanley TA, Hagerman AE, Hjeljord O, Baker DL, Schwartz CC. MautzWW. Bitkileri geviş getirenlere karşı korumada tanenlerin rolü: protein bulunabilirliğinde azalma. Ekoloji. 1987; 68 (1): 98–107. doi: 10.2307 / 1938809. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
15. Butt SM, Sultan TM, Aziz M, Naz A, Ahmed W, Kumar N, Imran M. Persimmons (Diospyros kaki) meyve: gizli fitokimyasallar ve sağlık iddiaları. EXCLI J. 2015; 14 : 542–561. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
16. Hidalgo C, Mateo E, Mas A, Torija MJ. Hurmaların fermentasyonu ve asetifikasyonundan izole edilen maya ve asetik asit bakterilerinin tanımlanması (Diospyros kaki) Gıda Mikrobiyolü. 2012; 30 (1): 98–104. doi: 10.1016 / j.fm.2011.12.017. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
17. Park Y, Kim MJ, Park SB, Oh SI. Hava koşullarının meyve özellikleri ve Sangju, Gyeongsangbuk-do'daki 'Sangjudungsi' hurma çeşidinin verimi üzerindeki etkisi. Meteorol için Korece J Agric. 2015; 17 (4): 340–347. doi: 10.5532 / KJAFM.2015.17.4.340. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
18. Jeong CH, Kwak JH, Kim JH, Choi GN, Jeong HR, Kim DO, Heo HJ. Olgunlaşma sırasında Daebong-gam'ın (Diospyros kaki) besin bileşenlerindeki değişiklikler. Kore J Gıda Koruyucusu. 2010; 17 (4): 526–532. [ Google Scholar ]
19. Kang SK, Ahn KH, Choi ST, Do KR, Cho KS. Çevre dostu meyve bahçelerinden gelen hurma (Diospyros kaki'Fuyu ') meyvelerinde dikim yeri ve meyve verme yönünün meyve donu zararına etkisi. KJ Org Agric. 2014; 22 (4): 789–799. doi: 10.11625 / KJOA.2014.22.4.789. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
20. Park CG, Lee KC, Lee DW, Choo HY, Albert PJ. Saflaştırılmış Hurma tanen ve tanik asidin fasulye böceği Riptortus clavatus'un hayatta kalması ve üremesi üzerindeki etkileri. J Chem Ecol. 2004; 30 (11): 2269–2283. doi: 10.1023 / B: JOEC.0000048788.35693.23. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
21. Arnal L, Rio MA. Hurma meyvelerinde karbondioksit ve nitrojenle zenginleştirilmiş atmosferler ile burukluğun giderilmesi “Rojo brillante” J Food Sci. 2003; 68 (4): 1516–1518. doi: 10.1111 / j.1365-2621.2003.tb09676.x. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
22. Li PM, Du GR, Ma FW. Sıkılaştırıcı olmayan hurmaya karşı büzücü farklı meyve dokularının fenolik konsantrasyonu ve antioksidan kapasitesi. Sci Hortic. 2011; 129 (4): 710–714. doi: 10.1016 / j.scienta.2011.05.024. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
23. Igual M, Castelló ML, Ortolá MD, Andrés A. Isıl işlem görmeden ozmotik dehidrasyon ile üretilen hurma reçelinin bazı kalite özellikleri. Int J Gıda Müh. 2011; 7 (5): 1–15. [ Google Scholar ]
24. Jeong YJ, Lee GD, Kim KS. Tepki yüzeyi metodolojisi kullanılarak hurma sirkesinin fermantasyon durumu için optimizasyon. Korece J Food Sci Technol. 1998; 30 (5): 1203–1208. [ Google Scholar ]
25. Kim JK, Kang WW, Oh SL, Kim JH, Han JH, Moon HK, aChoi JU. Çeşitli bölgelerden gelen geleneksel kuru hurmaların kalite özelliklerinin karşılaştırılması. J Korean Soc Food Sci Nutr. 2004; 33 (1): 140–145. doi: 10.3746 / jkfn.2004.33.1.140. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
26. Oh HM, Kim MK. Kuru yaprak tozu, hurma ve yeşil çay yapraklarının su ve etanol ekstraktlarının 12 aylık sıçanlarda lipit metabolizması ve antioksidatif kapasite üzerine etkileri. Korece J Nutr. 2001; 34 : 285–298. [ Google Scholar ]
27. Kawase M, Motohashi N, Satoh K, Sakagami H, Nakashima H, Tani S, Molnár J. Hurma (Diospyros kaki) soyma ekstraktlarının biyolojik aktivitesi. Phytother Res. 2003; 17 (5): 495–500. doi: 10.1002 / ptr.1183. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
28. Chen XN, Fan JF, Yue X, Wu XR, Li LT. Hurmada radikal süpürme aktivitesi ve fenolik bileşikler (Diospyros kaki L. cv. Mopan) J Food Sci. 2008; 73 (1): 24–28. doi: 10.1111 / j.1750-3841.2007.00587.x. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
29. Young AL, Cho EJ, Tanaka T, aYokozawa T. Hurma kaynaklı proantosiyanidinlerin oksidatif strese ve diyabete bağlı sindirim enzimlerine karşı inhibe edici aktiviteleri. J Nutr Sci Vitaminol. 2007; 53 (3): 287-292. doi: 10.3177 / jnsv.53.287. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
30. Jeong SI, Cho JK, Mok JY, Kim SJ, Park JM, Jeon IH, Jang S. I. Hurma yapraklarının büyüme sırasında antioksidan aktivitesi. Korece J Farmakognozi. 2010; 41 (4): 255-63.
31. Zhang H, Zheng X, Su D. Mikrodalga muamelesi ve Cryptococcus laurentii ile armutun mavi küf çürümesinin hasat sonrası kontrolü . J Gıda Müh. 2006; 77 (3): 539–544. doi: 10.1016 / j.jfoodeng.2005.06.066. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
32. Kore Tıp Okulları Herbology Yayın Kurulu. Herbology [Boncho-hak] Seoul: Young-Lim Press; 2004. [ Google Scholar ]
33. Çin Farmakopesi Komisyonu. Çin Halk Cumhuriyeti'nin Farmakopesi hacmi Ι. Pekin: Çin Tıbbi Eczacılık Bilimi ve Teknolojisi Yayınevi; 2010. [ Google Scholar ]
34. Choi J. Gyeongnam eyaletindeki kültivar türleri ve olgunluk aşamalarına göre büzücü hurmaların (Diospyros kaki Thunb) saplarının mikrobiyal tanımlama, tanik asit içerikleri ve anti-enflamatuar aktiviteleri. Yüksek lisans tezi. Teknoloji ve Bilim Üniversitesi; 2017.
35. Chang F, Lu C. Hiccup: gizem, doğa ve tedavi. J Neurogastroenterol Motil. 2012; 18 (2): 123–130. doi: 10.5056 / jnm.2012.18.2.123. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
36. Sugiura A, Zheng GH, Yonemori K. Büyüme aşaması III sırasında kontrollü sıcaklıklarda hurma meyvesinin büyümesi ve olgunlaşması. HortScience. 1991; 26 (5): 574–576. doi: 10.21273 / HORTSCI.26.5.574. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
37. Del Bubba M, Giordani E, Pippucci L, Cincinelli A, Checchini L, Galvan P. Ağaç üzerinde büyüme ve olgunlaşma sırasında ve farklı hasat sonrası muamelelere yanıt olarak buruk hurmalarda tanenlerde, askorbik asit ve şeker içeriğindeki değişiklikler. J Gıda Besteleri Anal. 2009; 22 (7): 668–677. doi: 10.1016 / j.jfca.2009.02.015. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
38. Lee YR, Chung HS, Moon KD. Cheongdobansi'nin polifenol içeriğindeki değişiklik, gelişme sırasında meyveyi hurmaya çevirir. Kore J Gıda Koruyucusu. 2011; 18 (1): 13–17. doi: 10.11002 / kjfp.2011.18.1.013. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
39. Choi JE, Lee GY, Moon BC, Kang MS, Kim YJ, Kang MY. Kore'nin Geongnam eyaletinde geleneksel Kore tıbbı (kaki Calxy) olarak büzücü hurmalardan ( Dispyros kaki Thunb.) Tanik asit içeriklerinin analizi . Kor Herb Med Inform. 2016; 4 (1): 35–42. [ Google Scholar ]
40. Nishiyama S, Onoue N, Kono A, Yonemori K, vd. Hortic J. 2018; 87 (3). 10.2503 / hortj.OKD-140.
41. Nishiyama Soichiro, Onoue Noriyuki, Kono Atsushi, Sato Akihiko, Yonemori Keizo, Tao Ryutaro. Trabzon hurması meyvesindeki burukluk kaybının altında yatan bir gen düzenleyici ağın karakterizasyonu. Planta. 2017; 247 (3): 733–743. doi: 10.1007 / s00425-017-2819-0. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
42. Naval M, Muñoz GF, Lloret A, Besada C, Salvador A, Badenes LM, Rios G. Trabzon hurmasından elde edilen bir WD40-tekrar proteini, proantosiyanidin biyosentezi DkMYB2 ve DkMYB4 düzenleyicileri ile etkileşime girer. Ağaç Genet Genomları. 2016; 12 (1). 10.1007 / s11295-016-0969-z.
43. Yoon SB, Lee YJ, Park SK, Kim HC, Bae H, Kim HM, Park W. Scutellaria baicalensis su özütünün LPS ile aktive edilmiş RAW 264.7 makrofajları üzerindeki anti-enflamatuar etkileri. J Ethnopharmacol. 2009; 125 (2): 286–290. doi: 10.1016 / j.jep.2009.06.027. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
44. Verma IM, Stevenson JK, Schwarz EM, Van Antwerp D, Miyamoto S. Rel / NF-kappa B / I kappa B ailesi: samimi birliktelik ve ayrışma öyküleri. Genes Dev. 1995; 9 (22): 2723–2735. doi: 10.1101 / gad.9.22.2723. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
45. Paul FG, Michael HP, Mukundan A, Nada M. Enflamasyonun çözünürlüğü: prostaglandin E2, uyarılmış romatoid sinovyal fibroblastlarda bireysel NF-kappaB alt birimlerinin (P65, P50) nükleer trafiğini ayırır. J Immunol. 2005; 175 (10): 6924–6930. doi: 10.4049 / jimmunol.175.10.6924. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
46. Kim Kyoung-Su, Lee Dong-Sung, Kim Dong-Cheol, Yoon Chi-Su, Ko Wonmin, Oh Hyuncheol, Kim Youn-Chul. Lipopolisakkaritle Uyarılmış RAW 264.7 Makrofajlarda Diospyros kaki'den İzole Edilen Koussarik ve Betulinik Asitlerin Anti-Enflamatuar Etkileri ve Etki Mekanizmaları. Moleküller. 2016; 21 (9): 1206. doi: 10.3390 / molecules21091206. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Anti aging etkili meyve
Görüntü olarak domatesi andıran, olgunlaşınca lezzeti artan ve sayısız faydası olan bir meyve Trabzon hurması diğer adıyla cennet meyvesi. Tropikal bir meyve olarak uzak doğudan ülkemize getirilmiş ve karadeniz ikliminin uygun olmasıyla üretimi artmış.
Peki severek tükettiğimiz bu meyvenin faydalarını biliyor muyuz?
Yüksek oranda antioksidan ve fitokimyasal maddeler içerir. Bu nedenle vücudumuzda oluşan serbest radikallerin etkisini hatta serbest radikal oluşumunu dahi azaltır. Serbest radikaller ilerleyen yaşla birlikte hastalıkların oluşumunu tetikler, kanser riskini artırır, görme fonksiyonlarını olumsuz etkiler.
Lif içeriği oldukça zengindir. Ara öğün olarak tüketildiğinde tokluk hissini artırır, sindirim sistemini düzenler, kabızlık sorunu yaşayanlarda faydalıdır.
Toksik maddelerin atımını sağlar, vücudun süpürgesidir adeta.
Göz sağlığını koruyucu multi vitamin etkisi vardır. İçeriğinde A vitamini, K vitamini, C vitamini, zeakzantin, lutein bulunur ve gözde katarakt oluşumundan makula dejenerasyonuna kadar korucu etkisi bulunmaktadır.
İçeriğinde yüksek oranda bulunan fito kimyasallar kansere karşı koruyu bir besin olma özelliğini artırıyor. Trabzon hurması bağışıklık sistemini güçlendirip dna hasarını da önleyerek kanser hücrelerinin artmasını önleyebilmekte. Özellikle meme kanserinden koruyan fisetin adlı maddeyi içeren ender besinlerdendir.
Serbest radikal oluşumu malesef cilt sağlığını da olumsuz etkilemekte. Cilt elastikiyetini kaybedip, kırışıklıklar ve lekelenme de görülmekte. Sağlıklı bir beslenme programı içerisinde Trabzon hurmasının yaşlanmaya karşı hücre yenileyici anti aging özelliği bulunmakta.Diyetisyen Özlem Sert Aydın
Faydalarının yanı sıra fazla tüketildiğinde ishal yapıcı, tansiyon düşürücü ve şekeri yükseltici etkileri de bulunmakta. Uygun miktarda ve ara öğün olarak tüketmek en sağlıklısı.
Kaynak: Milliyet.com.tr
otent inhibitors of hydroperoxide production and tumor promotion in mouse skin treated with 12-O-tetradecanoylphobol-13-acetate in vivo. Int J Cancer. 1992;51:425–32. [
Yorum yap