Duyuru

***maturidi*** · 28 December 2021, 07:30

***maturidi*** · 28 December 2021, 07:33

Limon otu ( Cymbopogon citratus ) yağı: Sarcoptes scabiei'ye (AKARLAR, Uyuz Böceği) karşı umut verici bir mit öldürücü ve yumurta öldürücü ajan

Meilin Li , Resmi analiz , Yazma - orijinal taslak , ¹Buming Liu , Resmi analiz , ²Charlotte Bernigaud , Yazma - inceleme ve düzenleme , ^3,⁴Katja Fischer , Yazma - inceleme ve düzenleme , ⁵Jacques Guillot , Yazma - inceleme ve düzenleme , ³ ve Fang Fang , Finansman temini , Soruşturma , Proje yönetimi , Denetim , Yazma - orijinal taslak^1,^*
Ayşegül Taylan Özkan, Editör

İlişkili Veriler
Soyut
Arka plan
Uçucu yağlar, Sarcoptes scabiei türünden akar istilasının neden olduğu ihmal edilmiş bir tropikal hastalık olan uyuz kontrolü için alternatif bir stratejiyi temsil edebilir . Limon otu ( Cymbopogen citratus ) yağının antiparazit, antioksidan, antimikrobiyal ve antiinflamatuar gibi farmakolojik özelliklere sahip olduğu bildirilmektedir. Bu çalışmanın amacı, limon otu yağının Sarcoptes scabiei akarlarına ve yumurtalarına karşı potansiyel etkinliğini değerlendirmektir .

Metodoloji/Temel bulgular
Kütle spektrometrisi analizi, limon otu yağında sunulan ana bileşenin sitral olduğunu doğruladı. Limon otu yağı %10 ve %5 konsantrasyonlarındaki tüm Sarcoptes akarlarını sırasıyla 10 ve 25 dakika içinde öldürdü . Medyan öldürücü konsantrasyon değeri 1, 3, 6, 12 ve 24 saatte sırasıyla %1,37, %1,08, %0,91, %0,64 ve %0,48 idi. Limon otu yağı tüm konsantrasyonlarda (%10, %5, %1, %0,5, %0,1) Sarcoptes yumurtalarının kuluçka oranını önemli ölçüde azaltabilmiştir .

Sonuçlar/Önem
Limon otu yağı, uyuz kontrolü için umut verici bir mitisidal ve ovisidal ajan olarak düşünülmelidir.

Git: Yazar özeti
Uyuz, özellikle düşük gelirli tropik bölgelerde yüksek prevalansa sahip, yılda yaklaşık 455 milyon insanı etkileyen bir parazit istilasıdır. Hastalık sıklıkla bakteriyel enfeksiyonlarla komplike hale gelir. Halihazırda mevcut tedaviler, mitisitler, yumurta öldürücü, antibakteriyel ve anti-inflamatuar/antipruritik özellikleri içeren ideal profili karşılamamaktadır. Cymbopogon citratus , tropikal ve subtropikal bölgelerde yaygın olarak yetiştirilen bir bitkidir. Elde edilen uçucu yağ C . citratus , bildirilen antimikrobiyal ve anti-inflamatuar özelliklere sahip limon otu yağı olarak bilinir. Limon otu yağının Sarcoptes'e karşı mitisidal ve ovisidal etkinliğini değerlendirmek için deneyler yaptık.Çin'de doğal olarak enfekte olmuş tavşanlardan toplanan akarlar. Sonuçlar, limon otu yağının Sarcoptes akarlarının hareketli aşamalarını etkili bir şekilde öldürebildiğini ve önemli bir yumurta öldürücü aktivite sunduğunu gösterdi. Tüm bu özellikleri göz önüne alındığında, limon otu yağı, uyuza karşı umut vaat eden bir mitisit olarak kabul edilmelidir.

Git: Tanıtım
Uyuz, Sarcoptes scabiei akarlarının istilasından kaynaklanan bulaşıcı bir deri hastalığıdır . Klinik semptomlar, yoğun kaşıntı, eritem ve ikincil bakteriyel enfeksiyonlara bağlı daha ciddi komplikasyonları içerir [ 1 ]. Uyuz, özellikle düşük gelirli popülasyonlarda önemli küresel sağlık ve ekonomik yükü vurgulayan 2017 yılında WHO'nun ihmal edilen tropikal hastalıklar listesine eklendi [ 2 , 3 ].

Uyuz kontrolü ağırlıklı olarak topikal ajanlar (örn. permetrin, benzil benzoat, malathion ve krotamiton) ve oral ivermektin içeren sentetik mitisitlerin kullanımıyla gerçekleştirilir. Ne yazık ki, çoğu kimyasal mitisitler, orta ila şiddetli yan etkilerle ilişkili olduklarından ve/veya sınırlı yumurta öldürücü aktivite nedeniyle birden fazla tedavi gerektirdiğinden , optimal değildir [ 4 , 5 ]. Ayrıca en çok kullanılan mitisidlere karşı direnç ortaya çıkmıştır [ 6 ]. Yeni etki biçimlerine sahip yeni ilaç, mevcut ilaçlarla dönüşümlü olarak kullanıldığında direncin ortaya çıkışını yavaşlatabilir [ 7 ]. Araştırmalar, karanfil, çay ağacı ve palmorosa gibi uçucu yağların Sarcoptes akarlarının hareketli evrelerine karşı etkili olduğunu göstermiştir.8 – 10 ]. Topikal bir tedavi olarak, Avustralya'da uyuz tedavisi için %5 çay ağacı yağı önerilmiştir [ 11 ]. Bununla birlikte, bu çalışmaların hiçbiri bu yağların yumurta öldürücü aktivitesini test etmemiştir.

Cymbopogon citratus (DC.) Stapf 1906, tropikal ve subtropikal bölgelerde yaygın olarak yetiştirilen bir bitkidir. C. citratus'tan elde edilen uçucu yağ , ana bileşeni sitral olan limon otu yağı olarak bilinir [ 12 ]. Limon otu yağının antiparaziter [ 13 ], antioksidan [ 14 ], antimikrobiyal [ 12 ] ve antienflamatuar [ 15 ] dahil olmak üzere çeşitli farmakolojik özelliklere sahip olduğu bildirilmektedir . Limon otu yağının ayrıca bir bitki patojenine ( Tetranycchus urticae ) [ 16 ] ve ev tozu akarlarına [ 17 ] karşı mit öldürücü etki gösterdiği rapor edilmiştir . Ancak, LİMON OTU YAĞI'NIN S. scabiei'ye (UYUZ Böceği, Akarlar) karşı etkinliği şimdiye kadar anlatılmamış. Bu çalışmada, Güney Çin'de toplanan Cymbopogon citratus uçucu yağını çıkardık ve analiz ettik ve ayrıca tavşanlardan S. scabiei'ye karşı mitisidal ve yumurta öldürücü etkinliğini değerlendirdik .

Git: yöntemler
etik beyanı
Çalışmaya başlamadan önce çiftlik sahipleriyle iletişime geçtik ve enfekte tavşanların dahil edilmesi için izinlerini aldık. Çalışma protokolü Guangxi Üniversitesi etik kurulu tarafından onaylandı (onay no: GXU2019-019). Hayvanlar, bilimsel amaçlarla hayvanların bakımı ve kullanımına ilişkin Fransız ve Avrupa yönetmelikleri tarafından belirlenen yönergelere uygun olarak ele alındı.

Bitki materyali ve ekstraksiyon
Cymbopogon citratus bitkileri, Çin'in Guangxi eyaletinin Tianlin İlçesinden toplandı. Limon otu yağı, bitkiden taze yaprakların hidrodistilasyonu ile elde edildi ve susuz sodyum sülfat ile kurutuldu. Hidrodistilasyon için 250 g taze limon otu yaprağı küçük parçalar halinde kesildi ve 400 mL distile su içeren 1 L'lik bir şişeye yerleştirildi. Günther (1950)[ 18 ] tarafından açıklanan yönteme göre bir Clevenger tipi aparat kullanılarak 5 saat süreyle hidrodamıtıldılar . Uçucu yağ verimi aşağıdaki formül kullanılarak hesaplandı: Uçucu yağ verimi (%) = yağların net ağırlığı (g) / taze yaprakların toplam ağırlığı (g) x 100. Ekstraksiyon verimi %0.4 idi. Yağ koyu renkli cam şişelerde saklandı ve kullanılıncaya kadar 4°C'de tutuldu.

Uçucu yağ analizi
Limon otu yağı bileşenleri, bir Agilent 5977A Serisi GC/MSD Sistemi kullanılarak gaz kromatografisi/kütle spektrometrisi (GC/MS) ile analiz edildi. Analitler, bir HP-5MS kuvars kapiler kolonu (30 mx 0.25mm x 0.25um) ile ayrıldı. Analiz, aşağıdaki sıcaklık programı kullanılarak yapıldı: 60°C'de başlangıç sıcaklığı, 2 dakika tutuldu; ve 5°C/dk'lık bir oranda 90°C'ye yükseltilir, 2 dakika tutulur; ve 5°C/dakika oranında 130°C'ye yükseltildi; daha sonra 10°C/dakika hızında 150°C'ye yükseltilir, 1 dakika tutulur; ve 2 dakika boyunca tutularak 10°C/dk ila 200°C oranında artırıldı; sonunda 10°C/dk'dan 240°C'ye yükseltildi. Taşıyıcı gaz olarak (1 mL/dak) helyum, 200:1'lik bir bölünmüş oranda kullanıldı. İyon kaynağı sıcaklığı 250°C idi ve 70 eV elektron enerjisinde EI-tarama modunda kütle spektrumları elde edildi. Sektör kütle analizörü 35 ila 500 amu arasında tarama yapacak şekilde ayarlandı. Bileşiklerin tanımlanması, her pikin kütle spektrumlarının bir kütle spektrumu kitaplığındaki otantik numunelerinkilerle karşılaştırılmasına dayanıyordu. Bileşiklerin yüzdeleri alan normalleştirme yöntemiyle hesaplandı.

Akarların ve yumurtaların toplanması
Sarcoptes scabiei akarları ve yumurtaları, Çin'in Guangxi Eyaleti, Nanning'deki bir tavşan çiftliğinde doğal olarak istila edilmiş Yeni Zelanda beyaz tavşanlarının kabuklarından toplandı. Kabuklar Petri kaplarına yerleştirildi ve 1 saat içinde laboratuvara taşındı. Tüm evrelerdeki canlı akarlar (yetişkinler, nimfler ve larvalar) ve yumurtalar stereomikroskop altında test edilmek üzere tek tek bir iğne ile izole edildi.

Böcek öldürücü aktivitenin in vitro değerlendirilmesi
Limon otu yağı, parafin yağı ile beş konsantrasyona (%10, %5, %1, %0.5 ve %0.1) seyreltildi. Daha önce tarif edilen bir yönteme göre bir temas biyo-tahlili yapıldı [ 10]. Tüm hareketli aşamalardan (yetişkinler, nimfler ve larvalar) yirmi akar, plastik steril bir Petri kabına (3 cm çapında) yerleştirildi. Daha sonra her çözeltiden 0,5 mL Petri kaplarına eklendi. Negatif kontrol tabakları, 0.5mL parafin yağı ile muamele edildi ve pozitif kontrol tabakları, 0.5mL %25 benzil benzoat (Aladdin, Çin) ile muamele edildi. Tüm Petri kapları, oda sıcaklığında (25°C) ve %70 bağıl nemde tutuldu. Negatif ve pozitif kontrollerin yanı sıra her bir limon otu yağı konsantrasyonu için toplam beş tekrar gerçekleştirilmiştir. Akar ölümleri, 1 saat boyunca her on dakikada bir ve daha sonra tedaviye maruz kaldıktan 3 saat, 6 saat, 12 saat ve 24 saat sonra bir stereomikroskop altında izlendi ve değerlendirildi. Bir iğne ile tekrarlanan ajitasyondan sonra bile kalıcı hareketsizlik gösteren akarlar ölü olarak kabul edildi.

Ovisidal aktivitenin in vitro değerlendirilmesi
Sarcoptes'e karşı aktiviteyi test etmek için limon otu yağı beş konsantrasyonda (%10, %5, %1, %0.5 ve %0.1) kullanıldı. yumurtalar. Bir Petri kabının dibine bir filtre kağıdı yerleştirildi ve her bir çözelti (0.3 mL) ile emprenye edildi. Negatif kontrol filtre kağıtları 0,3 mL parafin yağı ile ve pozitif kontrol filtre kağıtları 0,3 mL %25 benzil benzoat (Aladdin, Çin) ile işlemden geçirildi. 10 dakika davlumbazda kurutulduktan sonra, gelişimin erken evrelerindeki 20 yumurta filtre kağıdına yerleştirildi. Tüm Petri kapları, 35°C'de bir nem odasına (≥%70 bağıl nem) yerleştirildi. Negatif ve pozitif kontrollerin yanı sıra her bir limon otu yağı konsantrasyonu için toplam üç tekrar yapılmıştır. Yumurtaların kuluçka randımanı, muamelelerden 5 gün sonra bir stereomikroskop altında belirlendi [ 5 ]. 5 gün sonra yumurtadan çıkamayan yumurtalar ölü olarak kabul edildi.

Veri analizleri
Yukarıdaki deneylerin verileri SPSS 20.0 yazılımı ile analiz edildi ve ortalama ± SD olarak ifade edildi. Veriler, tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ve ardından LSD (En Az Önemli Fark) ile analiz edildi. Probit regresyon analizi orta öldürücü konsantrasyon değeri (LC hesaplamak için kullanılmıştır ₅₀ ) ve medyan öldürücü zaman değerini (LT ₅₀ ).

Git: Sonuçlar

Uçucu yağ analizi
Limon otu yağının kimyasal bileşimi şu şekilde sunulmaktadır: tablo 1. GC-MS analizi, ana bileşiklerin geranial (trans-sitral, sitral A) (%37.40), neral (cis-citral, sitral B) (%31.97) ve mirsen (%15.65) olduğunu gösterdi. tablo 1

Çin'in Guangxi kentinde toplanan limon otu ( Cymbopogon citratus ) yağının kimyasal bileşimi .
Bileşenler, bir Agilent 5977A Serisi GC/MSD Sistemi ile gaz kromatografisi/kütle spektrometrisi (GC/MS) ile analiz edildi.

6-Metil-5-Hepten-2-Bir	5.9	0.76
Myrcene	6.0	15.65
limonen	6.9	0.65
oktatrien	7.1	0.61
β-oktatrien	7.4	0.36
piperitenon	8.7	0.12
Linalol	8.9	1.12
β-sitronellen	10.6	0.14
sitronelal	10.8	0.16
Cis-Carveol	11.7	0.15
Trans-Karveol	11.8	1. 55
sitronelol	12.3	1.10
Geraniol	13.4	1.55
sinir	13.9	31.97
nerol	14.3	2.66
Geranial	14.9	37.40
2-undekanon	15.5	0.67
karyofillen	19.0	0.30
α-Bergamoten	19.3	0.17
2-tridekanon	20.6	0.89
kadinen	21.0	0.10
aromadendren	21.2	0.13
izoaromadendren	22.8	0.11
Selina-6-tr-4-ol	23.0	0,54
kadinol	23.7	0.10
2-pentadekanon	24.2	0.17

Böcek öldürücü aktivitenin in vitro değerlendirilmesi
Parafin yağı (negatif kontrol) ile karşılaştırıldığında, limon otu yağı Sarcoptes akarlarına karşı doza ve zamana bağlı bir şekilde önemli bir etki göstermiştir . %10 ve %5 konsantrasyonunda, limon otu yağı tüm akarları sırasıyla 10 ve 25 dakika içinde öldürdü. Mitisidal etkinlik, ortalama ölüm oranı 66 dakika olan %25 benzil benzoatın pozitif kontrolünden önemli ölçüde daha iyiydi. 24 saatteki ortalama ölüm oranları %1, %0,5 ve %0,1 sırasıyla %100, %48,3 ve %12 idi (Tablo 2). Limon otu yağının tüm konsantrasyonları, negatif kontrollere kıyasla iyi bir mit öldürücü etkinlik gösterdi (P<0.01). Diğer analizler , limon otu yağının 1 saat, 3 saat, 6 saat, 12 saat ve 24 saatte LC ₅₀ değerinin sırasıyla %1,37, %1,08, %0,91, %0,64 ve %0,48 olduğunu göstermiştir (Tablo 3). Limon otu yağı için %10, %5, %1, %0,5 ve %0,1 konsantrasyonundaki LT ₅₀ değeri sırasıyla 4 dakika, 9 dakika, 4 saat, 25,5 saat ve 42,5 saattir (Tablo 4) Tablo 2

Limon otu ( Cymbopogon citratus ) yağının in vitro Sarcoptes scabiei'ye karşı öldürücü etkisi .

%10	100 ^bir	100 ^bir	100 ^bir	100 ^bir	100 ^bir
%5	100 ^bir	100 ^bir	100 ^bir	100 ^bir	100 ^bir
%1	11,9±7,9 ^c	37,5±20,7 ^b	63,9±13,5 ^b	100 ^bir	100 ^bir
%0.5	0 ^gün	3.4 ± 3.9 ^{° C}	3.4 ± 3.9 ^{° C}	18,3±6,4 ^b	48,3±11,4 ^b
%0.1	0 ^gün	0 ^gün	0 ^gün	0 ^gün	12.0±8.4 ^c
parafin yağı	0 ^gün	0 ^gün	0 ^gün	0 ^gün	0 ^gün
%25 benzil benzoat	78±8.4 ^b	100 ^bir	100 ^bir	100 ^bir	100 ^bir

^a,b,c,d Aynı sütunda farklı harflerle takip edilen değerler istatistiksel olarak anlamlıdır (P<0.01). Tablo 3

Limon otu ( Cymbopogon citratus ) yağının Sarcoptes scabiei'ye karşı in vitro toksisitesinin (LC ₅₀ ) probit regresyon analizi .

1 saat	Y = 3.107X-4.267	1.373 (1.144–73.927)	2.568
3 saat	Y = 2.908X-3.151	1.084 (0.970–1.295)	9.015
6h	Y = 3.736X-3.390	0,907 (0,830–1.002)	5.308
12 saat	Y = 6.845X-4.352	0,636 (0,581-0,727)	1.607
24 saat	Y = 3.347X-1.620	0,484 (0,410–0,564)	8.022

Tablo 4

Limon otu ( Cymbopogon citratus ) yağının Sarcoptes scabiei'ye karşı in vitro toksisitesinin (LT ₅₀ ) probit regresyon analizi .

%10	Y = 33.879x-2.107	4.040 dk ^#	7.230
%5	Y = 18.124x-2.614	8.926 dk ^#	4.980
%1	Y = 0.293x-1.186	4.047 sa (3.528–4.548)	32.604
%0.5	Y = 0.061x-1.566	25.512 sa (23.015–28.480)	13.350
%0.1	Y = 0.052x-2.224	42.478 sa#	0.480

*%95 güven sınırları

^# %95 güven sınırı yok Ovisidal aktivitenin in vitro değerlendirilmesi
Negatif kontrol gruplarındaki tüm Sarcoptes yumurtaları yumurtadan çıktı. Pozitif kontrol gruplarının yumurtadan çıkma oranı %8.3 idi (Şekil 1). Limon otu yağına %10, %5, %1, %0,5 ve %0,1 konsantrasyonunda maruz bırakılan Sarcoptes yumurtalarının kuluçka oranları sırasıyla %5, %20, %23,3, %55 ve %60 olmuştur. Limon otu yağı tüm konsantrasyonlarda Sarcoptes yumurtalarının kuluçkada negatif kontrole göre önemli ölçüde azalmasına neden olmuştur (P<0.01). %10 (p = 0.719), %5 (p = 0.220) ve %1 (p = 0.121) konsantrasyonlarında pozitif kontrol ve limon otu yağı arasında önemli bir fark yoktur.

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı pntd.0008225.g001.jpg

Ayrı bir pencerede aç
Şekil 1
Laboratuvar koşullarında (35°C ve ≥%70 bağıl nem) %10, %5, %1, %0,5 ve %0,1 konsantrasyonlarında limon otu ( Cymbopogon citratus ) yağına maruz bırakılan Sarcoptes yumurtalarının kuluçka oranları .
*Parafin yağına kıyasla limon otu yağının farklı konsantrasyonları (negatif kontrol) (p<0.01). ^# %25 benzil benzoat ile karşılaştırıldığında limon otu yağının farklı konsantrasyonları (pozitif kontrol) (p>0.05).

Git: Tartışma
Bu çalışmada limon otu yağı analizinin kimyasal profili, daha önce Kamerun'da toplanan bitkilerden açıklananla karşılaştırılabilir [ 19 ]. Sonuçlar, iki izomerik aldehitin, geranial (trans-citral, sitral A) ve neral (cis-citral, sitral B)'nin doğal bir karışımı olan sitralin büyük bir bölümünü ortaya çıkardı [ 20 ]. Önceki raporlar, sitralin Candida mayalarına karşı antifungal aktiviteye [ 21 ] ve Leishmania amazonensis'e karşı anti-protozoan aktiviteye [ 20 ] sahip olduğunu göstermiştir. Bir çalışma, sitralin Tetranycchus urticae'ye karşı en iyi osidal ve mitisidal aktiviteye sahip olduğunu göstermiştir., iki benekli örümcek akarı, 33 ticari uçucu yağ ve bileşikle karşılaştırıldığında [ 16 ].

Parafin yağı, biyo-tahlilde uçucu yağların çözülmesi için tatmin edici bir çözücü olarak kabul edilir. Mevcut çalışmada, tüm Sarcoptes akarları 24 saat parafin yağına daldırıldıktan sonra canlıydı ve tüm yumurtalar sadece parafin yağı ile muamele edildiğinde yumurtadan çıktı. Kulak akarına ( Otodectes cynotis ) karşı monoterpenler üzerine bir çalışmada , Olivier [ 22 ] üç solventi (aseton, parafin yağı ve %20 gliserol) test ederek parafin yağının sadece iyi çözünme kabiliyeti, iyi viskozite ve uçuculuk özellikleri sergilediğini değil, aynı zamanda akarların en uzun ortalama hayatta kalma süresini indüklemiştir.

Bu çalışma, limon otu yağının, S'nin tüm yaşam evrelerine karşı önemli bir konsantrasyona bağlı mit öldürücü etki gösterdiğini ortaya koydu . uyuz . %10 ve %5 konsantrasyondaki limon otu yağı, sırasıyla 10 dakika ve 25 dakika içinde tüm akarları öldürdü. Daha önceki bir çalışmada %10 ve %5 çay ağacı yağının öldürücü süresinin sırasıyla 30 ve 90 dakika olduğu bildirilmiştir [ 10 ]. Sonuçlar, mitisit olarak kullanıldığında limon otu yağının çay ağacı yağından daha iyi olmasa da karşılaştırılabilir olabileceğini gösterdi.

Tüm konsantrasyonlarda limon otu yağına maruz kalan Sarcoptes yumurtalarının kuluçka oranında önemli bir azalma olmuştur . Baş biti ( Pediculus humanus capitis ) [ 23 , 24 ] ve kırmızı kanatlı akarının ( Dermanyssus gallinae ) [ 25 ] yumurtalarına karşı farklı uçucu yağların yumurta öldürücü aktivitesi gösterilmiştir . Bir çalışma karşı limon yağı ovisidal aktivitesi değerlendirildi Haemonchus contortus bir AB sonuçlanan (geviş getiren hayvanlarda bir nematod parazit) yumurta ₅₀ 0.14 mg / mL değerine [ 26]. Yazarların bilgisine göre, bu çalışma bir uçucu yağın Sarcoptes yumurtalarına karşı ovisidal aktivitesinin araştırılmasını bildiren ilk çalışmadır . Sarcoptes akarlarına [ 5 ] karşı az sayıda mevcut akar öldürücü etkinliğe sahip olduğundan , limon otu yağı, yumurtadan yeni çıkmış larvaları öldürmek için birden fazla tedaviye olan ihtiyacı azaltacağından, uyuz kontrolünde özellikle faydalı olabilir.

Topikal bir tedavi olarak kullanıldığında, uçucu yağların potansiyel yan etkileri de dikkate alınmalıdır. Yama testleri üzerine yapılan bir inceleme, katılımcıların %1.8'inin limon otu yağının %2'sine karşı pozitif alerjik reaksiyonlara sahip olduğunu göstermiştir [ 27 ]. Limon otu yağı bir karışımdır (tablo 1), hiçbir çalışma, alerjik reaksiyonlardan hangi bileşiklerin sorumlu olduğunu açıkça göstermedi. Geraniol ve sitronelol gibi bileşikler, potansiyel cilt hassaslaştırıcıları olarak tanımlanmıştır. Bununla birlikte, hem geraniol hem de sitronelol, duyarlılık sıklığı [ 28 , 29 ] açısından daha az önemli veya zayıf duyarlılaştırıcı olarak kabul edildi ve her iki bileşik de bütün yağda çok küçük bir yüzdeye (%1.55 ve %1.10) karşılık geldi. Çalışmamızın sonuçlarına göre %5 konsantrasyonundaki limon otu yağı hem akarlara hem de yumurtalara karşı etkilidir. Sitral için eşik (bu çalışmada 69,37% için önemli bir bileşeni muhasebe) insan dermal hassasiyet indükleme göstermiştir daha kapsamlı bir özeti 1,4 mg / cm ² [ 30], bu amaç için limon otu yağının (1 mL %5 limon otu yağı yaklaşık 35 μg sitral içerir) güvenli kullanımını garanti eder.

Bir sınırlama, bu çalışmadaki tüm testlerin S kullanılarak yapılmış olmasıdır . uyuz var. var yerine cuniculi . hominis . Bununla birlikte, yaygın uyuzlu hastalardan in vitro testler yapmak için yeterli akar elde etmek mümkün değildir. Tavşan ve domuzun deneysel modelleri, çok sayıda akarın toplanması için uygundur ve araştırma amacı için oldukça kabul edilebilir modellerdir [ 10 ]. Yaratılan türler tek S . uyuz İnsanlar ve tavşanlar dahil olmak üzere 17 ailede ve 7 takımda farklı memeli konakçıları istila eder. Farklı konakçılardan gelen akarlar, morfolojileri ve konak tercihleri açısından çok az farklılıklar gösterebilirler ancak aynı biyolojiyi paylaşırlar [ 31 ]. Önceki çalışmalardan, test edilen koşullar altında tavşanlardan ve insanlardan akarların hayatta kalma oranlarında hiçbir fark olmadığı varsayılabilir.

Şu anda, topikal permetrin ve oral ivermektin, uyuz için en sık kullanılan iki tedavidir [ 32 ]. Bununla birlikte, her iki ilaç da dünyadaki sınırlı sayıda ülkede uyuz için mevcuttur ve her iki ilaç da pahalıdır [ 2 , 33 ]. Uyuz, aşırı kalabalık ve yoksulluğun yaygın olduğu ve tedaviye erişimin sınırlı olduğu tropik gelişmekte olan ülkelerde salgındır [ 34 ]. Tropik bölgelerde yaygın olarak yetiştirilen bir bitkiden elde edilen limon otu yağı, sınırlamaları ve olası yan etkileri hakkında eğitimle birlikte, her iki Sarcoptes'e karşı önemli aktiviteye sahip olduğu düşünüldüğünde, uyuza karşı umut verici bir mitisit olarak kabul edilmelidir.akarlar ve yumurtalar. Daha ileri çalışmalar, aktif bileşikleri belirlemek için izole edilmiş ana bileşenlerin Sarcoptes akarlarına ve yumurtalarına karşı etkinliğini test etmeyi düşünmelidir . Aktif bileşiklerin etki mekanizması da araştırmaya değerdir. Ayrıca, uyuz tedavisinde kullanımını hızlandırabilecek limon otu yağının etkinliğini ve güvenliğini doğrulamak için in vivo çalışmalar gereklidir.

Git: Teşekkür

Yazarlar, gözden geçirme ve düzeltme için Dr. Jair L. Siqueira-Neto'ya teşekkür eder.

Git: Finansman Beyanı

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (31902293) ve Guangxi Doğa Bilimleri Vakfı (2018JJB130197) tarafından kurulmuştur. Finansörlerin çalışma tasarımı, veri toplama ve analizi, yayınlama kararı veya makalenin hazırlanmasında hiçbir rolü yoktu.

Git: Veri kullanılabilirliği

İlgili tüm veriler el yazması ve Destekleyici Bilgi dosyalarındadır.

Git: Referanslar

1. Hoy WE, White AV, Dowling A, Sharma SK, Bloomfield H, Tipiloura BT, et al. Streptokok sonrası glomerülonefrit, sonraki yaşamda kronik böbrek hastalığı için güçlü bir risk faktörüdür . Böbrek İnt . 2012; 81 : 1026-1032. 10.1038/ki.2011.478 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
2. Engelman D, Cantey PT, Marks M, Solomon AW, Chang AY, Chosidow O, et al. Uyuzun halk sağlığı kontrolü: araştırma ve eylem için öncelikler . Lancet . 2019; 394 : 81-92. 10.1016/S0140-6736(19)31136-5 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
3. Chosidow O, Hay RJ. Uyuz ve ikincil impetigo kontrolü: endemik ortamlarda tedavi etkinliğini optimize etmek . Lancet Infect Dis . 2019; 19 : 454-456. 10.1016/S1473-3099(19)30068-4 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
4. Chosidow O. Uyuz . N Engl J Med . 2006; 354 : 1718-1727. 10.1056/NEJMcp052784 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
5. Bernigaud C, Fernando DD, Lu H, Taylor S, Hartel G, Guillot J, et al. Mevcut ve az gelişmiş uyuz öldürücülerin in vitro yumurta öldürücü aktivitesi-hangi tedaviler uyuz yumurtalarını öldürür? BrJ Dermatol . [ PubMed ] [ Google Akademik ]
6. Mounsey KE, Holt DC, McCarthy J, Currie BJ, Walton SF. Uyuz: ortaya çıkan ilaç direnci karşısında moleküler perspektifler ve terapötik uygulamalar . Geleceğin Mikrobiyol . 2008; 3 : 57-66. 10.2217/17460913.3.1.57 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
7. Bernigaud C, Samarawickrama G, Jones MK, Gasser RB, Fischer K. Uyuz için tek doz tedavi geliştirmenin zorluğu . Trendler Parazitol . 2019. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
8. Pasay C, Mounsey K, Stevenson G, Davis R, Arlian L, Morgan M, et al. Öjenol bazlı bileşiklerin uyuz akarlarına karşı akarisit aktivitesi. Munayco CV, editör. PLoS BİR . 2010; 5 : e12079 10.1371/journal.pone.0012079 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
9. Walton SF, McKinnon M, Pizzutto S, Dougall A, Williams E, Currie BJ. Melaleuca alternifolia (çay ağacı) yağının akarisit aktivitesi : sarcoptes scabiei var hominis'in terpinen-4- ol'e karşı in vitro duyarlılığı . Ark Dermatol . 2004; 140 : 563–566. 10.1001/archderm.140.5.563 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
10. Fang F, Candy K, Melloul E, Bernigaud C, Chai L, Darmon C, et al. On esansiyel yağın Sarcoptes scabiei'ye karşı in vitro aktivitesi . Parazit Vektörler . 2016; 9 10.1186/s13071-016-1889-3 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
11. Thomas J, Carson CF, Peterson GM, Walton SF, Hammer KA, Naunton M, et al. Çay ağacı yağının uyuz için terapötik potansiyeli . J Trop Med Hyg mıyım ? 2016; 94 : 258–266. 10.4269/ajtmh.14-0515 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
12. Saddiq AA, Khayyat SA. Monoterpenin kimyasal ve antimikrobiyal çalışmaları: Citral . Pestic Biochem Physiol . 2010; 98 : 89-93. 10.1016/j.pestbp.2010.05.004 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
13. Meabed EMH, Abou-Sreea AIB, Roby MHH. Kimyasal analiz ve sulu özütün giardicidal etkinliği Cymbopogon citratus Stapf . Parazitol Res . 2018; 117 : 1745-1755. 10.1007/s00436-018-5855-1 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
14. Cheel J, Theoduloz C, Rodriguez J, Schmeda-Hirschmann G. Limon otundan serbest radikal temizleyiciler ve antioksidanlar ( Cymbopogon citratus (DC.) Stapf.) . J Tarım Gıda Kimya . 2005; 53 : 2511–2517. 10.1021/jf0479766 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
15. Costa G, Ferreira JP, Vitorino C, Pina ME, Sousa JJ, Figueiredo IV, et al. Cymbopogon citratus'tan elde edilen polifenoller, topikal anti-inflamatuar ajanlar olarak bırakır . J Etnofarmakol . 2016; 178 : 222–228. 10.1016/j.jep.2015.12.016 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
16. Lim EG, Roh HS, Coudron TA, Park CG. Uçucu yağların iki benekli örümcek akarına (Acari: Tetranychidae) karşı sıcaklığa bağlı fumigant aktivitesi. J Econ Entomol . 2011; 104 : 414-419. 10.1603/ec10249 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
17. Hanifah AL, Awang SH, Ming HT, Abidin SZ, Omar MH. Cymbopogon citratus ve Azadirachta indica'nın ev tozu akarlarına karşı akarisidal aktivitesi . Asya Pac J Trop Biomed . 2011; 1 : 365–369. 10.1016/S2221-1691(11)60081-6 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
18. Günther E. Uçucu Yağlar , Cilt. IV Essent Yağları Cilt IV. 1950 [ Google Akademik ]
19. Akono Ntonga P Baldovini N, Mouray E Mambu L P Ait, Grellier S. Faaliyet Ocimum basilicum, Ocimum Canum ve Cymbopogon citratus karşı uçucu yağlar , Plasmodium falciparum ve Anopheles funestus ss olgun aşamalı larvaları . Parazit . 2014; 21 : 33 10.1051/parasite/2014033 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
20. Santin MR, dos Santos AO, Nakamura CV, Dias Filho BP, Ferreira ICP, Ueda-Nakamura T. Cymbopogon citratus uçucu yağının ve onun ana bileşeninin (citral) Leishmania amazonensis üzerindeki in vitro aktivitesi . Parazitol Res . 2009; 105 : 1489–1496. 10.1007/s00436-009-1578-7 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
21. Silva C de B da, Guterres SS, Weisheimer V, Schapoval EES. Limon otu yağı ve sitralin Candida spp'ye karşı antifungal aktivitesi . Braz J Infect Dis . 2008;12 10.1590/S1413-86702008000100014 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
22. Traina O, Cafarchia C, Capelli G, Iacobellis NS, Otranto D. Dört monoterpen ve çözücünün Otodectes cynotis'e (Acari: Psoroptidae) karşı in vitro akarisit aktivitesi . Exp Appl Acarol . 2005; 37 : 141–146. 10.1007/s10493-005-0359-y [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
23. Priestley CM, Burgess IF, Williamson EM. Uçucu yağ bileşenlerinin insan biti, Pediculus humanus ve yumurtalarına karşı öldürücülüğü . Fitoterapi . 2006; 77 : 303–309. 10.1016/j.fitote.2006.04.005 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
24. Soonwera M, Wongnet O, Sittichok S. Zingiberaceae bitkilerinden ve Eucalytus globulus'tan elde edilen uçucu yağların baş biti yumurtaları üzerindeki yumurta öldürücü etkisi , Pediculus humanus capitis De Geer . bitki tıbbı . 2018; 47 : 93–104. 10.1016/j.phymed.2018.04.050 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
25. George DR, Sparagano O a. E, Port G, Okello E, Shiel RS, Guy JH. Bitki esansiyel yağlarının kanatlı kırmızı akarı, Dermanyssus gallinae ve hedef olmayan omurgasızların farklı yaşam evrelerine toksisitesi . Med Veteriner Entomol . 2010; 24 : 9–15. 10.1111/j.1365-2915.2009.0856.x [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
26. Macedo ITF, Oliveira LMB de, Ribeiro WLC, Santos JML dos, Silva K das C, Araújo Filho JV de, et al. Cymbopogon citratus'un Haemonchus contortus'a karşı antelmintik aktivitesi . Rev Bras Parazitol Veterinerlik . 2015; 24 : 268-275. 10.1590/S1984-29612015059 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
27. Uter W, Schmidt E, Geier J, Lessmann H, Schnuch A, Frosch P. Uçucu yağlara karşı temas alerjisi: Dermatoloji Bölümleri Bilgi Ağı'ndan (IVDK) güncel yama testi sonuçları (2000–2008) . Kontakt dermatit . 2010; 63 : 277-283. 10.1111/j.1600-0536.2010.01768.x [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
28. Schnuch A, Geier J, Uter W, Frosch PJ. Koku alerjilerine başka bir bakış: koku karışımına ve bileşenlerine karşı duyarlılık sıklıkları . Exog Dermatol . 2002; 1 : 231–237. 10.1159/000068797 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
29. Hostınek JJ, Maibach HI. Sitronellolün duyarlılaştırma potansiyeli . Exog Dermatol . 2004; 3 : 307–312. 10.1159/000092445 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
30. Lalko J, API AM. Sitral: Dermal duyarlılığın indüklenmesi için bir eşiğin belirlenmesi . Regül Toksikol İlaç . 2008; 52 : 62-73. 10.1016/j.yrtph.2008.01.06 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
31. Arlian LG. Sarcoptes scabiei'nin biyolojisi, konukçu ilişkileri ve epidemiyolojisi . Annu Rev Entomol . 1989; 34 : 139-161. 10.1146/annurev.en.34.010189.001035 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
32. Chandler DJ, Fuller LC. Uyuz Hakkında Bir İnceleme: Derinin ötesinde bir istila . Dermatol Basel İsviçre . 2019; 235 : 79-90. 10.1159/000495290 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
33. Mounsey KE, Bernigaud C, Chosidow O, McCarthy JS. İnsan uyuzları için yeni bir oral tedavi olarak moksidektin beklentileri . PLoS Negl Trop Dis . 2016;10 10.1371/journal.pntd.0004389 [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
34. Hay RJ, Steer AC, Engelman D, Walton S. Gelişmekte olan dünyada uyuz - yaygınlığı, komplikasyonları ve yönetimi . Clin Mikrobiyol Enfeksiyonu . 2012; 18 : 313-323. 10.1111/j.1469-0691.2012.03798.x [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]

***maturidi*** · 20 April 2022, 15:41

Güçlü bir anti-inflamatuar ve antifungal ilaç olarak limon otu ( Cymbopogon citratus ) esansiyel yağı

Mohamed Nadjib Boukhatem , ^1,^*Mohamed Amine Ferhat , ²Abdelkrim Kameli , ³Fairouz Saidi , ¹ ve Hadjer Tchoketch Kebir ¹
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
Bu makale, PMC'deki diğer makaleler tarafından alıntılanmıştır .
Git: Soyut

Arka fon
Limon otundan elde edilen uçucu yağlar [ Cymbopogon citratus (DC.) Stapf, Poaceae familyası] geleneksel tıpta çeşitli hastalıkların tedavisi için ilaç olarak kullanılmaktadır.

Amaçları
Bu çalışmada, limon otu esansiyel yağı (LGEO), in vivo topikal ve oral anti-inflamatuar etkileri ve in vitro antifungal aktivitesi için hem sıvı hem de buhar fazları kullanılarak değerlendirilmiştir.

yöntemler
Gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi analizi ile belirlenen LGEO'nun kimyasal profili, iki ana bileşeni ortaya çıkardı: geranial (%42,2) ve neral (%31,5). LGEO'nun antifungal aktivitesi, disk difüzyon ve buhar difüzyon yöntemleri kullanılarak çeşitli patojenik mayalara ve filamentli mantarlara karşı değerlendirildi.

Sonuçlar
LGEO , farklı inhibisyon zon çapları (IZD'ler) (35-90 mm) ile Candida albicans , C.tropicalis ve Aspergillus niger'e karşı umut verici antifungal etki sergiledi . Artan yağ hacmi ile IZD arttı. Anlamlı bir şekilde, buhar fazında daha yüksek anti - Candida aktivitesi gözlendi. Anti-inflamatuar etkinin değerlendirilmesi için, LGEO (10 mg/kg, oral olarak uygulanır), pozitif olarak kullanılan oral diklofenak (50 mg/kg) için gözlemlenene benzer bir etki ile karagenan kaynaklı pençe ödemini önemli ölçüde azalttı. kontrol. LGEO'nun oral uygulaması, doza bağlı anti-inflamatuar aktivite gösterdi. Ek olarak, LGEO'nun in vivo topikal uygulamasıkroton yağının neden olduğu kulak ödeminin fare modeli kullanılarak gösterildiği gibi, güçlü bir anti-inflamatuar etki ile sonuçlandı. Bildiğimiz kadarıyla, bu türde yayınlanan ilk rapordur. LGEO'nun 5 ve 10 µL/kulak dozlarında topikal uygulaması, farelerin sırasıyla %62.5 ve %75'inde kroton yağının neden olduğu akut kulak ödemini önemli ölçüde azalttı. Ek olarak, histolojik analiz, LGEO'nun hayvan modellerinde cilt inflamatuar yanıtını inhibe ettiğini açıkça doğruladı.

Çözüm
Mevcut çalışmanın sonuçları, LGEO'nun gelecekteki çalışmalarda araştırılması gereken mantar enfeksiyonları ve cilt iltihabı tedavisi için ilaçların geliştirilmesi için kayda değer bir potansiyele sahip olduğunu göstermektedir.

Anahtar kelimeler: limon otu, uçucu yağ, mantar önleyici aktivite, iltihap önleyici etki, sitral, aromaterapi
Aromatik ve tıbbi bitkiler, gelişmekte olan ülkelerde hala alternatif ve geleneksel tıbbın önemli bir parçasıdır. Çok sayıda bitkisel tedavi şu anda tıpta yaygın olarak kullanılmaktadır ( 1 , 2 ). Şifalı bitkilerin anti-inflamatuar, antifungal ve analjezik ilaçlar olarak kullanımı Cezayir'de yaygındır. Çoğu durumda, bitkilerin aktif molekülleri bilinmemektedir. Tıbbi bitki ekstraktlarının biyolojik ve farmakolojik özelliklerini incelemek, yeni ilaç arayışımızda rasyonel bir yaklaşımdır ( 3 – 6 ).

Şifalı bitkilerin kullanımı, tıbbi yardıma erişimi olmayan veya mütevazı olan kişiler arasında daha yaygındır. Cezayir'de sırasıyla bakteriyel ve fungal enfeksiyonların tedavisinde gül kokulu sardunya ve limon otu, mide ağrısı ve diş ağrısı tedavisinde kullanılmaktadır. Bu nedenle, amacı bu bitkilerin organik veya sulu ekstraktlarının anti-inflamatuar aktivitesini in vitro olarak insan monositleri veya in vivo olarak kemirgenler üzerinde değerlendirmek olan bir dizi çalışma yayınlanmıştır ( 1 , 7 ).

Cymbopogon citratus (DC.) Halk arasında limon otu olarak bilinen Stapf (Poaceae familyası), ince, uzun yapraklı, çok yıllık bir tropikal çim olup, Cezayir'de yetiştirilen başlıca tıbbi ve aromatik bitkilerden biridir. Ayrıca Asya, Güney Amerika ve Afrika'nın tropikal ve subtropikal bölgelerinde çoğunlukla uçucu yağı (EO) için yetiştirilmektedir ( 8 ).

Cymbopogon türlerinin EO'su için büyük bir uluslararası talep vardır ( 8 ). Limon otu esansiyel yağı (LGEO), bitkinin kurutulmuş veya taze yapraklarından buhar damıtma ile elde edilir. Buhar distilasyonu, genellikle inflamatuar hastalıklara ve mikrobiyal bulaşıcılığa karşı kullanılan EO artı hidrosoller veya aromatik sular üretir ( 9 – 11 ). LGEO, koku, aroma, parfümeri, kozmetik, deterjan ve farmasötiklerin üretiminde kullanıldığı için önemli bir ticari öneme sahiptir ( 12 , 13 ). Biyolojik araştırmalar, EO'daki çeşitli kimyasal bileşiklerin antibakteriyel, antifungal, analjezik ve sivrisinek kovucu özelliklere sahip olduğunu göstermiştir ( 14 -17 ).

Asya ve Afrika'da LGEO, antiseptik, antitussif ve anti-romatizmal olarak ve sırt ağrısı, burkulma ve hemoptizi tedavisinde kullanılır. Yapraklarının infüzyonları alternatif tıpta yatıştırıcı, antimikrobiyal ve antienflamatuar olarak kullanılır. Bazı Afrika ülkelerinde diyabet tedavisinde kullanılır ( 8 ).

LGEO'nun farmasötik potansiyeli, kemirgenlerde, EO'nun önemli bir bileşeni olan sitralin, steroid olmayan anti-enflamatuar ilaç, naproksen ile birleştirildiği ve laboratuar farelerine oral yoldan uygulandığı iyi tasarlanmış bir çalışma ile gösterilmiştir. Tek başına naproksen ile karşılaştırıldığında, naproksen-sitral kombinasyonu benzer anti-inflamatuar etki üretti, ancak minimal gastrik yan etkiler gösterdi ( 18 ).

Geleneksel bitkisel tıbbın geliştiği Cezayir'in Mitidja bölgesi, tıbbi bitki örtüsü açısından zengindir ( 4 , 17 ). Kuzey Cezayir'deki çeşitli kabileler arasında şifalı bitkilere dayalı geleneksel uygulamalar mevcuttur ( 4 ). Literatür taraması, Cezayir'de yetiştirilen limon otu bitkisi üzerinde çok az çalışma yapıldığını göstermiştir. Sonuç olarak, LGEO'nun kimyasal bileşimini araştırmak ve uçucu bileşenlerinin terapötik potansiyelini değerlendirmek esastır.

LGEO'nun kimyasal bileşimi ve farmakolojik değerlendirmesi, yıllar boyunca çeşitli çalışmaların konusu olmuştur. Bununla birlikte, antifungal aktivitesi hakkında çok az sistematik çalışma vardır. Ayrıca, bildiğimiz kadarıyla, yayınlanmış literatürde LGEO'nun anti-inflamatuar etkisi ile ilgili herhangi bir veri bulunmamaktadır.

Bu çalışmanın amacı, LGEO'nun çeşitli patojenik mayalara ve filamentli mantarlara karşı antifungal aktivitesini disk difüzyon ve buhar difüzyon yöntemlerini kullanarak değerlendirmekti. Ayrıca, in vivo topikal ve akut anti-enflamatuar etkiler, farelerde sırasıyla kroton yağı kaynaklı kulak ödemi ve karagenan kaynaklı pençe ödemi kullanılarak değerlendirildi. Ek olarak, gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi (GC-MS) analizleri ile LGEO'nun kimyasal bileşenlerinin tanımlanmasını açıklıyoruz.

araç ve yöntemler
Bitki materyali
Limon otu, 'Extral Bio' Company'nin (Chiffa, Blida city, Cezayir) Tıbbi ve Aromatik Bitkilerinin tarla istasyonunda yetiştirildi. Yapraklar Mayıs 2013'te toplandı ve oda sıcaklığında gölgede kurutuldu. Türün kimliği, Ulusal Tarım Bilimleri Enstitüsü'ndeki (Cezayir, Cezayir) Botanik Laboratuvarı tarafından doğrulandı. Herbaryum örnekleri aynı bölümde depolanmıştır.

EO çıkarma
LGEO, yapraklardan buhar damıtma yoluyla damıtıldı. Kullanılan toplam taze bitki miktarı 550 kg'dır. Bitki materyali, damıtma cihazına yüklendi ve buharın uygun şekilde verilmesine izin vermek için katmanlar halinde istiflendi. Yöntem, aromatik bitkilerle dolu bir imbikten düşük basınçta buhar geçirmekten oluşur. Buhar, tesisteki uçucu bileşenleri yakalar ve daha sonra soğuk su soğutmalı serpantinden geçer. Distilat, bir Florentine vazosu kullanılarak ayrılan bir hidrosol buharı ve EO karışımı içerir. Bu yöntem, LGEO ve hidrosolün (çiçek suyu) toplanmasını ve ayrılmasını sağlar. LGEO daha sonra sodyum sülfat üzerinde kurutulur ve gerekli olana kadar kontrollü bir sıcaklık odasında temiz kahverengi cam şişelerde saklanır. C. citratus'taki yağ içeriğiyağın ağırlığının, onu çıkarmak için kullanılan limon otu yapraklarının ağırlığına oranının yüzdesi olarak belirlenen yüzde verim olarak hesaplanmıştır.

GC-MS analizi
GC analizi, alev iyonizasyon detektörü ve HP-5MS kapiler kolonu (30 mx0.32 mmi.d., 0.25 µm film kalınlığı) ile donatılmış bir Hewlett-Packard 6870 (Agilent Technologies, Palo Alto, California, ABD) gaz kromatografı kullanılarak gerçekleştirildi. . Fırın sıcaklığı 8 dakika 45°C'de tutuldu ve ardından 2°C/dakika hızında 250°C'ye yükseltildi ve 250°C'de 16 dakika tutuldu. Dedektör ve enjektör sıcaklıkları sırasıyla 280 ve 250°C idi. Taşıyıcı gaz, 1 µl LGEO enjeksiyon hacmi ile 1:20 bölünmüş modda 1.2 ml/dakika akış hızında nitrojendi. Kantitatif veriler, düzeltme faktörleri kullanılmadan alev iyonizasyon dedektörü alan yüzdesi verilerinden elektronik olarak elde edildi.

GC-MS analizi, bir HP-5MS kapiler kolonu (30 m x 0.32 mm, id 0.25 µm film kalınlıkları). Kolon sıcaklığı 8 dakika 45°C'de tutuldu ve ardından 2°C/dakika hızında 250°C'ye yükseltildi ve 250°C'de 16 dakika tutuldu. GC–MS tespiti için, 29-550 m/z tarama aralığında 70 eV iyonizasyon enerjisine sahip bir elektron iyonizasyon sistemi kullanıldı. Helyum, 1 µl LGEO enjeksiyon hacmi ile 1:20 bölünmüş modda 1 ml/dakika sabit akış hızında taşıyıcı gaz olarak kullanıldı. Dedektör ve enjektör sıcaklıkları sırasıyla 280 ve 250°C idi. İyon kaynağı sıcaklığı 175 °C idi.

Tanımlama ve nicel belirleme
EO bileşikleri, doğrusal tutma indeksi (RI) ve kütle spektrumlarının referans bileşiklerin MS verileriyle karşılaştırılması temelinde geçici olarak tanımlandı. Doğrusal RI'ler , HP-5MS kolonu üzerinde homolog n - _{alkan serilerini (}_C8 –C24 ) (Fluka, Buchs/sg, İsviçre) içeren bir çözelti ile numunelerin birlikte enjeksiyonu ile tüm bileşenler için belirlendi . Bileşenler, kayıtlı kütle spektrumlarını Mass Spectra veri bankası (Wiley 7N ve NIST 2002 kütüphaneleri) ile eşleştirerek tanımlandı ve literatürdeki değerlerle karşılaştırılarak daha da doğrulandı ( 19 ). LGEO'nun kimyasal bileşenlerinin nispi oranları, tepe alanı normalizasyonu ile elde edilen yüzdeler olarak ifade edildi.

Sıvı ve buhar fazlarında mantar önleyici faaliyetler
LGEO'nun sıvı ve buhar fazlarındaki farklı mayalara ve filamentli mantarlara karşı antifungal potansiyeli sırasıyla disk difüzyon ve disk buharlaştırma yöntemleri ( 13 ) ile belirlendi.

Maya ve filamentli mantar türleri
LGEO'nun in vitro antifungal aktivitesi, sekiz maya ve yedi filamentli mantar suşuna karşı değerlendirildi: Candida albicans , C. parapsilosis ve C.tropicalis'i içeren sekiz patojenik Candida suşu ; beş patojenik Aspergillus suşu ( A. niger , A. terreus , A. flavus ve A. fumigatus ); bir Penicillium sp. Gerginlik; ve bir Mucor sp. Gerginlik. İzolatlar, mukokutanöz ve yüzeyel mantar enfeksiyonu olan hastalardan elde edildi.

Candida suşları, Auxacolor© maya tanımlama sistemi (Sanofi Diagnostics Pasteur, Paris, Fransa) kullanılarak tanımlandı. Filamentli mantarlar, Sabouraud Dextrose Agar (SDA) besiyerinde alt kültürlemeden sonra makro ve mikroskobik özellikleri temelinde tanımlandı. Mantar izolatları standart mikrobiyolojik yöntemlerle tanımlandı ve 25°C'de SDA'da saklandı. Analizden önce, mantar türleri sporülasyona kadar 25°C'de SDA slantlarında kültürlendi. Duyarlılık testinden önce, optimum büyüme ve saflığı sağlamak için her suş, kloramfenikol ile SDA üzerinde aşılandı. İnokulum, 48 saatlik maya kültürlerinden steril salin içinde hazırlandı ve yaklaşık 108 CFU/ml ^içeren süspansiyonlar elde etmek için 2 McFarland Standard'a göre standardize edildi .

Disk difüzyon yöntemi
Agar disk difüzyon yöntemi (1A) LGEO'nun antifungal özelliklerinin belirlenmesi için kullanıldı ( 13 ). Tüm maya ve filamentli mantar türleri, 25°C'de eğimli bir agar üzerinde tutuldu. Test edilen suşların kültürü ve çoğaltılması için kullanılan mikrobiyal ortam, kloramfenikol ile SDA'dan oluşuyordu. Mikroorganizmalar steril %0.9 NaCl içinde süspanse edilerek ve Densimat (BioMérieux, Fransa) kullanılarak yoğunluk 2 McFarland standardına (10 ^{8 CFU/ml) ayarlanarak taze kültürlerden aşı hazırlandı.}Filtre kağıdı diskleri (9 mm çapında, Schleicher ve Schull GmbH, Dassel, Almanya) üç farklı hacimde (disk başına 20, 40 ve 60 ul) LGEO ile emprenye edildi ve aşılanmış SDA plakaları üzerine yerleştirildi. Plakalar 1 saat oda sıcaklığında bırakıldı ve ardından aerobik koşullar altında 25°C'de 72 saat süreyle inkübe edildi.

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı LJM-9-25431-g001.jpg'dir.

1
(A) disk difüzyon yöntemi ve (B) buhar difüzyon yöntemi ( 19 ) ile zon inhibisyon çapının belirlenmesi .

Antifungal aktivite, test suşları için milimetre cinsinden (9 mm'lik disk çapı dahil) büyüme inhibisyon bölgesinin (DGIZ) çapının kontrollerinkiyle karşılaştırılmasıyla değerlendirildi. Amfoterisin B (disk başına 100 µg) (Bio Rad Laboratories, Fransa) ve Hexomedine ^® solüsyonu (%1) (Sanofi Aventis, Fransa) antibiyotik diskleri referans pozitif kontroller olarak kullanıldı. Numune içermeyen diskler negatif kontrol olarak kullanıldı.

Buhar difüzyon yöntemi
EO'lar uçucu olduklarından, buhar fazlarında antimikrobiyal aktivitelerini test eden yöntemler özetlenmiş ve modifiye edilmiştir ( 20 ). Tyagi ve Malik ( 13 ) tarafından açıklanan standart bir deney düzeneği kullanıldı. LGEO'nun buhar fazındaki antifungal aktivitesi, disk buharlaştırma tekniği ile araştırıldı (1B) üç farklı dozda (disk başına 20, 40 ve 60 µl). Kısaca, katılaştırılmış SDA ortamının yüzeyi, 0.1 ml mantar suşları süspansiyonu ile aşılandı ve kurumaya bırakıldı. Üst kapağın iç yüzeyine bir kağıt disk (çap 9 mm, Schleicher ve Schull GmbH, Dassel, Almanya) serildi ve her diske 20, 40 veya 60 µl limon otu uçucu yağı yerleştirildi. Plaka daha sonra anında kapağın üzerine ters çevrildi ve LGEO buharının kaçmasını önlemek için parafilm ile kapatıldı. Plakalar, 25°C'de 72 saat süreyle inkübe edildi. LGEO'nun mantar önleyici etkinliğinin etkinliği, diskin üzerindeki DGIZ (milimetre cinsinden) ölçülerek hesaplandı. Boş diskler negatif kontrol işlevi gördü.

In vivo anti-inflamatuar aktivite testi
Hayvanlar
Toplamda 25-27 g ağırlığındaki 60 erkek ve dişi İsviçre albino faresi kullanıldı. Hayvanlar, Saidal Antibiyotik Şirketi'nin (Medea, Cezayir) Toksikoloji Laboratuvarından elde edildi.

Hayvanlar deneylerden önce gruplandırılmış ve standart koşullar altında tutulmuştur. Her grupta en az altı hayvan kullanıldı. Standart bir ticari diyete ve ad libitum suya ücretsiz erişimi olan standart kafeslerde barındırıldılar . Hayvanlar standart nem (%40-45), sıcaklık (23-28°C) ve 12 saatlik aydınlık/karanlık döngüsü altında tutuldu. Tüm hayvan deneyleri, Tıp Bilimleri Etik Kurulu yönergelerine göre yapıldı.

Farelerde karagenan kaynaklı pençe ödemi

LGEO'nun anti-inflamatuar potansiyeli, karagenan kaynaklı pençe ödemi testi ile değerlendirildi ( 21 ). Bu yöntem, sol arka patinin alt-plantar bölgesine fare başına 0.1 ml'lik bir dozda enjekte edilen izotonik tuzlu su (a/h) içinde %1 karagenan süspansiyonu tarafından indüklenen pençe ödemini kullanır.

LGEO, %0.1 Tween 80 içinde seyreltildi ve karagenan enjeksiyonundan 30 dakika önce uygulandı. Kontrol grubu, aracın eşdeğer bir hacmini aldı. 10, 40, 100 veya 200 mg/kg dozlarında EO ve araç (%0.9 NaCl solüsyonunda %0.1 Tween 80), ödematojenik ajanın uygulanmasından 30 dakika önce oral yoldan uygulandı. Pozitif kontrol grubu olarak diklofenak (50 mg/kg, oral yol) kullanıldı. Enflamatuar maddenin uygulanmasından önce ve akut inflamasyonu indükledikten sonra 4 saat boyunca her saatte bir pençe ödemi belirlendi. Ayak pedi kalınlığı bir mastar kaliperleri (Ozaki Co., Tokyo, Japonya) ile tahmin edilmiştir.

Tedavi edilen grupların ortalama değerleri, bir kontrol grubununkilerle karşılaştırıldı ve istatistiksel olarak analiz edildi. Sonuçlar, milimetre cinsinden ortalama±standart sapma (SD) olarak rapor edilir. Enflamatuar yanıtın yüzde inhibisyonu, her fare için negatif kontrolle karşılaştırılarak hesaplandı ve aşağıdaki formülle hesaplandı:
ben ( % ) = [ 1 -ΔPtΔPc] ×100

burada I (%)=ödem inhibisyonu yüzdesi, ΔPt ilaçla tedavi edilen gruptaki pençe kalınlığındaki fark ve ΔPc kontrol grubundaki pençe kalınlığındaki farktır.

Kroton yağına bağlı kulak ödemi
Topikal anti-inflamatuar aktivite, farelerde kroton yağının neden olduğu kulak ödeminin inhibisyonu olarak değerlendirildi ( 21 ). Bu test için her biri dört fareden oluşan dört grup kullanıldı. Sol kulakta ödem, her farenin sol kulağının dorsal ve ventral yönlerine %5 kroton yağı içeren 10 ul asetonun topikal uygulanmasıyla indüklendi. Sağ kulak tedavi edilmeden kaldı. Araç (10 ml/kg), farklı dozlarda LGEO (kulak başına 5−10 µl) veya Voltaren ^®% 1 emulgel (diklofenak sodyum topikal jel (Novartis, Fransa; kulak başına 5 mg)) kroton yağı tedavisinden yaklaşık 30 dakika önce sol kulağa topikal olarak uygulandı. Diklofenak sodyum referans olarak kullanılmıştır. Reaksiyon, zamanla kulak kalınlığındaki artış ölçülerek değerlendirildi. Maksimum ödematöz yanıtta, 4 saat sonra fareler öldürüldü ve hem tedavi edilen (sol) hem de tedavi edilmeyen (sağ) kulaklardan bir tıkaç (5 mm çapında) çıkarıldı. Ödem yanıtı, iki tıkaç arasındaki ağırlık farkı olarak ölçülmüştür.

LGEO anti-inflamatuar aktivite, kontrol grubuna kıyasla tedavi edilen farelerde ödem ağırlığındaki azalma yüzdesi olarak ifade edildi ve aşağıdaki formülle hesaplandı:
ben ( % ) = [ 1 -ΔWtΔWc] ×100

burada I (%)=ödem inhibisyonu yüzdesi, ΔWt tedavi edilen farelerde kulak dokusunun ağırlığındaki değişiklik ve ΔWc kontrol farelerinde kulak dokusunun ağırlığındaki değişikliktir.

Kulak dokusunun histopatolojisi
Ortaya çıkan inflamatuar reaksiyon, mikroskobik inceleme ile de değerlendirildi. Deri iltihabının morfolojik değerlendirmesi için, deneyin sonunda kontrol ve tedavi edilen fare kulaklarından biyopsiler toplandı. Numuneler %10 nötr tamponlu formalin içinde sabitlendi, rutin olarak işlendi, bir mikrotom (LEICA RM 2125RT, Nussloch, Almanya) kullanılarak 6 um'de kesildi ve Hematoksilen ve Eosin (H & E) ile boyandı. Dokular ışık mikroskobunda (Olympus CX41) incelendi ve inflamasyon hafif (+), orta (++) ve şiddetli (+++) olarak derecelendirildi. Sızma ve polimorfonükleer (PMN) hücre birikimi de incelendi.

istatistiksel analiz
Pençe ve kulak ödemi verileri ortalama±SD olarak rapor edilmiştir. Gruplar arası karşılaştırma, tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ve ardından Tukey'nin post hoc çoklu karşılaştırma testi ile yapıldı. P <0.05 olan gruplar arasındaki farklar istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. İstatistiksel analiz, XLStats 2013 yazılımı (Pros istatistik yazılımı, Addinsoft, Paris, Fransa) kullanılarak probit analizi yöntemiyle yapıldı.

sonuçlar ve tartışma
EO'nun kimyasal bileşimi
Aromaterapide yaygın olarak kullanılan aromatik bir bitki olan limon otundan elde edilen uçucu EO'yu değerlendirdik. LGEO, bu çalışmada yapıldığı gibi, bitkinin taze hava kısımlarından damıtıldığında açık sarı bir renge, bir limon kokusuna ve %0,6 (h/a) ekstraksiyon verimine sahiptir. Çim bitkilerinin, kimyasal bileşimlerine bağlı olarak tıbbi, endüstriyel ve parfümeri olarak gruplandırılabilen terpenoidal hidrokarbonlar ve EO'lar ürettiği iyi bilinmektedir.

GC-MS analizleri, toplam yağın %90.6'sını temsil eden 23 bileşiğin varlığını ortaya çıkardı. Ana bileşenler geranial (%42,2), neral (%31,5) ve β-mirsen (%7,5) idi. Geranil asetat (%4.3) ve izopulegol (%1.4) küçük fakat önemli bileşenlerdi (tablo 1). Limon otunun kalitesi genellikle sitral içeriği ile belirlenir. Sitral (3,7-dimetil-2,6-oktadiyen), cis - izomer geranialinden ve trans -izomer neralinden oluşur . Bu iki oksijenli monoterpen, LGEO'muzda yaklaşık %73.3 oranında mevcuttur. Ayrıca, LGEO yüksek oranda oksijenli monoterpen içeriğine ve düşük miktarlarda monoterpen hidrokarbonlara (%9,54), seskiterpen hidrokarbonlara (%0,79) ve oksijenli seskiterpenlere (%0,33) sahipti. Bu nedenle, buhar damıtma ile ekstrakte edilen LGEO, bir 'Sitral Kemotip' olarak sınıflandırılabilir. Bu LGEO'nun kimyasal bileşenleri yayınlanmış verilerle (15−17) karşılaştırıldığında, bileşimi, aynı neral ve sardunya içeriğine sahip Hint yağlarınınkine benzer görünürken, Afrika yağları yüksek düzeyde mirsen içerir. Bhattacharya et al. (22 ), birkaç limon otu türünden ( Cymbopogon flexuosus , C. pendulus , C. pendulus ) ekstrakte edilen EO'nun kimyasal bileşimini yayınladı . Analiz edilen türler arasında neral miktarı benzerdi (%33-36), geranial miktarı ise %45,0 ila %54,5 arasında değişiyordu. tablo 1

Cymbopogon citratus'tan buhar damıtma yoluyla ekstrakte edilen uçucu yağın kimyasal bileşimi

β-Mirsen	988	7,45
limonen	1.030	0.02
α-Okimen	1.043	0.45
β-Okimen	1.048	0.32
terpinolen	1.120	1.3
sitronelal	1.167	0.29
sinir	1.268	31.52
Geranial	1.284	42.16
karyofellen	1.421	0.23
trans -bergamoten	1.439	0.25
α-Humulen	1.450	0.04
α-Farnesen	1.459	0.05
β-Farnesen	1.508	0.15
β-bisabolen	1.511	0.03
δ-Cadinene	1.527	0.04
karvakrol	1.298	0.23
karyofilen oksit	1.578	0.1
izopulegol	1,168	1.39
2-undekanon	1.294	0.05
geranil format	1.303	0.07
neril asetat	1.351	0.07
geranil asetat	1.366	4.3
Geranil N -bütirat	1.559	0.04
Toplam tanımlanan		90.55
monoterpen hidrokarbonlar		9.54
oksijenli monoterpenler		73.97
seskiterpen hidrokarbonlar		0.79
oksijenli seskiterpenler		0.33
Diğer oksijenli bileşikler		5.92

Ayrı bir pencerede aç
^a Bileşikler, bir HP-5MS sütunundan elüsyon sırasına göre listelenmiştir. −=yok.
^b_C8 - C24n - _{alkanlara göre HP-}5MS kolonu üzerinde hesaplanan RI (tutma indeksi) .
Kozmetik ve kimya endüstrileri için özellikle sitral açısından zengin bitki klonları geliştirilmiştir. Akhila'ya göre ( 8 ), EO'nun nispi bileşimi temelinde bu aromatik bitki türünün iki türü veya klonu vardır - yüksek miktarlarda mirsen (% 38) ve düşük sitral (≈ 7) içeren Doğu Hint tipi ve çok az mirsen (%0-12) ve yüksek sitral içerik (%86'ya kadar) içeren Batı Hint tipi. Kimyasal bileşimdeki bu tür farklılıklar, coğrafi konum, iklim koşulları, hasat zamanı, bitkinin yaşı ve damıtma yöntemi gibi bir dizi faktöre bağlanmıştır ( 14 ).

antifungal aktivite
Disk difüzyon deneyi
Agar disk difüzyon yöntemi, antiseptik etkiler için doğal özlerin ve EO'nun hızlı taranması için yaygın olarak kullanılan standart bir tekniktir. Bildiğimiz kadarıyla, Cezayir bitkisinden elde edilen LGEO'nun antifungal aktivitesi bu çalışmadan önce hiç rapor edilmemiştir. LGEO'nun antifungal aktivitesini , üç farklı hacimde in vitro olarak 15 maya ve filamentli mantar suşu izolatına karşı değerlendirdik. Maya ve filamentli mantarlar için elde edilen DGIZ'de verilmiştir.Tablo 2. Negatif kontrol diskleri, test edilen mikroorganizmaların hiçbirine karşı antifungal inhibitör göstermedi. Amfoterisin B ve heksomedin çözeltisi ile karşılaştırıldığında, LGEO, Candida türlerine, özellikle C. albicans (Ca2) ve C. parapsilosis (Cp1)'e karşı güçlü bir inhibitör etki göstermiştir. Kalıplardan A. niger ve Penicillium sp. en duyarlı suşlardı: 20 µl LGEO uygulaması, 90 mm'lik bir DGIZ ile sonuçlandı. Büyüme inhibisyonu bölgesi, artan LGEO hacmi ile genişledi. 60 µl LGEO kullanıldığında, C. albicans (Ca4), A. niger (As2) ve A. fumigatus durumunda DGIZ 45, 59 ve 90 mm idi., sırasıyla. Öte yandan C. parapsilosis (Cp2) en dirençli suştu.

Tablo 2

Filamentli mantar ve mayaların Limon otu uçucu yağına ve klasik mantar önleyici ilaçlara duyarlılığı

Maya suşları
Candida albicans (Ca1)	33	38	80	60	90	90	25	29
C. albicans (Ca2)	65	90	90	90	90	90	15	33
C. albicans (Ca3)	60	90	90	55	90	90	20	20
C. albicans (Ca4)	35	41	45	47	80	90	21	22
C. parapsilosis (Cp1)	75	82	90	45	90	90	33	26
C. parapsilosis (Cp2)	^-	15	18	^-	15	25	26	15
C. tropikal (Ct1)	36	45	90	27	50	90	18	22
C. tropikalis (Ct21)	51	72	90	45	90	90	22	26
Filamentli mantarlar
Aspergillus niger (As1)	90	90	90	60	90	90	45	26
A. nijer (As2)	25	36	59	32	48	75	36	33
bir. flavus	60	90	90	60	90	90	22	19
A. terreus	65	90	90	50	90	90	19	33
A. fumigatus	50	90	90	90	90	90	20	35
Penicillium sp.	90	90	90	90	90	90	25	29
Mukor sp.	35	42	48	35	90	90	^-	12

Ayrı bir pencerede aç
^a Büyüme inhibisyon bölgesinin çapı (mm), 9 mm'lik disk çapını içerir.
^b µl cinsinden hacimler, LGEO hacimlerini ifade eder.
⁻ =aktivite yok; LGEO=limon otu esansiyel yağı; HEX=heksomedin solüsyonu (%1); AmB=amfoterisin B.
Birkaç rapor, bir EO'nun antimikrobiyal aktivitesinin kimyasal bileşimi ile ilgili olduğunu göstermektedir ( 23 ). Mevcut çalışmada, LGEO'nun antifungal özelliği, iki ana monoterpenik aldehitten (geranial ve neral) kaynaklanıyor olabilir. Bu oksijenli bileşiklerden zengin diğer ot yağlarının daha önce etkili mantar önleyici etkilere sahip olduğu bulunmuştur ( 14 , 15 , 17 ). Ayrıca, önceki çalışmalar, uçucu yağların mantar öldürücü etkisinin, yüksek miktarda oksijenli monoterpenlerin varlığı ile açıklanabileceğini de ileri sürmektedir ( 23 ).). Geranial ve neral, LGEO'nun en aktif bileşenleridir ve Gram-pozitif ve Gram-negatif bakteri ve mantarlara karşı geniş bir antimikrobiyal özellik yelpazesine sahiptir. Bununla birlikte, bir EO'nun karmaşık bir karışımındaki belirli bileşiklere antifungal aktiviteyi bağlamak zordur. Bazı yazarlar, LGEO'nun Candida türlerine karşı güçlü inhibitör etkisinin , monoterpenler ve EO'da bulunan simen, terpinen ve linalool gibi diğer önemli bileşikler arasındaki sinerjizmden kaynaklanabileceğini öne sürmektedir ( 2 , 16 , 24 ).

Buhar difüzyon deneyi
LGEO'nun mantar önleyici potansiyeli de buhar fazında değerlendirildi. LGEO buharları ile temastan kaynaklanan DGIZ şurada raporlanmıştır:Tablo 2. Sıvı fazda gözlemlendiği gibi, LGEO'nun artan miktarı ile LGEO'nun buharlarından kaynaklanan DGIZ artmıştır. Test edilen tüm mantar türleri için, LGEO buharlarına maruziyetten kaynaklanan DGIZ, sıvı fazda benzer miktarda LGEO'dan kaynaklanandan önemli ölçüde üstündü (İncir. 2). Bu özellikle daha yüksek dozlarda (disk başına 60 µl) belirgindi. Bu bulgular ışığında, LGEO'nun sıvı fazdaki mantar önleyici aktivitesi hakkında birkaç önemli makalenin yayınlanmasına rağmen, buhar fazının mantar önleyici potansiyelinin büyük ölçüde göz ardı edilmesi şaşırtıcıdır. C. albicans ve C. tropikalis mayaları , disk başına 60 µl'de LGEO buharları tarafından tamamen inhibe edildi. Sonuçlarımız, LGEO'nun buhar fazında üstün antifungal etkinliğini açıkça göstermektedir. Bu, buhar fazının daha uçucu bileşiklerden daha zengin olmasıyla, iki fazın bileşimlerindeki farklılıkla ilgili olabilir ( 13 ).

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı LJM-9-25431-g002.jpg

İncir. 2
Limon otu yağının mantar suşlarına karşı (A) disk difüzyon ve (B) buhar difüzyon yöntemleri ile inhibitör etkisi.

DGIZ: Büyüme inhibisyon bölgesinin çapı; LGEO: limon otu esansiyel yağı.

Buhar fazının kullanılması, uygulama kolaylığı ve yağ ile doğrudan temas ihtiyacını ortadan kaldırma gibi ek avantajlara sahiptir. Ayrıca, aynı seviyede inhibisyona ulaşmak için daha küçük bir LGEO hacmi gereklidir. Bulgularımız önceki yayınlarla uyumludur ( 25 ). Bir LGEO karışımının buharları bir koku üreteci tarafından 20 saat boyunca sürekli olarak dağıtıldığında havadaki mikroorganizmalarda %80'lik bir azalma elde edildi, bu da hastanelerde hava dekontaminantı olarak kullanım potansiyelini ortaya koydu. Abe ve ark. ( 12 ), LGEO'nun patojenik maya C. albicans'ın misel büyümesini önemli ölçüde azalttığını ortaya koydu., kutanöz kandidiyaz tedavisinde LGEO'nun potansiyel değerini düşündürür. LGEO buharlarının , mantar hücresel yapılarındaki toksik morfolojik değişikliklere ve hücre yüzeyi değişikliklerine ek olarak C. albicans büyümesine karşı güçlü bir inhibitör etkiye sahip olduğu gösterilebilir. Bu tür yüzey değişiklikleri ve deformiteleri, mantar hücrelerinin cilde yapışma kabiliyetini azaltır ve sonuç olarak bulaşıcılık ve virülansını azaltır ( 12 , 13 , 15 ).

In vivo anti-inflamatuar aktivite testi
Karagenan kaynaklı pençe ödemi
Karagenan kaynaklı fare pençe ödemi, bitki özleri ve EO gibi çeşitli biyoaktif bileşiklerin anti-inflamatuar aktivitesini belirlemek için sıklıkla kullanılır ( 3 , 7 ). Ayrıca proinflamatuar ajanların inflamasyonun akut fazı üzerindeki etkisini değerlendirmek için yeni ilaçların geliştirilmesinde de kullanılır. Oral olarak uygulanan LGEO'nun (10-200 mg/kg) anti-inflamatuar etkisi, aynı pençe ödemi modeli kullanılarak değerlendirildi. Da gösterildiği gibiTablo 3, LGEO önemli anti-inflamatuar aktivite gösterdi. LGEO'nun oral uygulamasından 90 dakika sonra, ödem inhibisyonunun derecesi 10 ve 100 mg/kg için benzerdi (sırasıyla %82.75 ve %86.2). Bu ödem inhibisyonu seviyesi, standart referans ilaç diklofenak'ın (%86.2) 50 mg/kg oral dozları kullanılarak gözlemlenen seviye ile karşılaştırılabilirdi. Bununla birlikte, 240 dakikada LGEO, referans ilaç diklofenak (50 mg/kg) kullanılarak elde edilen %88.9'a kıyasla, sırasıyla 10 ve 40 mg/kg'da %96.8 ve %95.2'lik inhibisyonla, karagenan kaynaklı pençe ödeminin daha güçlü inhibisyonu sergilemiştir. , ağızdan uygulanır).

Tablo 3

Farelerde karagenan kaynaklı pençe ödemi üzerine limon otu uçucu yağının etkisi

Kontrol		3,41±0,29 ^bir	2.916±0.03 ^bir	3,25±0,18 ^bir
Diklofenak (mg/kg, ağızdan)	50	3,1±0,19 ^b (86,20)	2,916±0,03 ^a (69,23)	2,96±0,04 ^b (88,88)
	10	2,88±0,09 ^b,c (66,66)	2,66±0,10 ^b (82,75)	2,75±0,13 ^b,c (96,82)
LGEO (mg/kg, oral yolla)	40	2,76±0,13 ^b,c (95,56)	2,68±0,16 ^b (87,17)	2,7±0,14 ^b,c (95,20)
	100	2,88±0,07 ^b,c (69,23)	2,68±0,14 ^b (86,20)	2,75±0,10 ^b,s (92,56)
	200	2,88±0,098 ^c (89,65)	2,68±0,11 ^b {69,23)	2,73±0,12 ^c (90,12)

Ayrı bir pencerede aç
Veriler ortalama (mm)±standart sapma (SD) ( n =6/grup) olarak sunulmuştur. Fare grupları , 10, 40, 100 ve 200'lük dozlarda araç (kontrol grubu, oral uygulama, n =6), diklofenak (50 mg/kg, oral uygulama) veya limon otu esansiyel yağı (LGEO) ile önceden tedavi edildi. mg/kg (oral uygulama, n =6/grup) karagenan kaynaklı pençe ödeminden 30 dakika önce. LHP: sol arka pençe; LGEO: limon otu esansiyel yağı. ANOVA tek yönlü analizine ve ardından Tukey'nin post hoc çoklu karşılaştırma testine göre , aynı sütun ve ardından farklı harf gelen ortalamalar önemli ölçüde farklıdır ( P <0.05).

LGEO'nun anti-inflamatuar etkisinin kesin mekanizması belirsizdir. Bununla birlikte, birkaç molekülün, enflamasyon aracı maddelerinin salınımının kısmi inhibisyonuna katkıda bulunduğu öne sürülmüştür. Bazı bitki bileşenlerinin, özellikle aldehit monoterpenlerin (geranial ve neral) inflamatuar süreçlerin yönetiminde faydalı olduğu bildirilmiştir ( 26 ). Bulgularımız, olağanüstü güçlü bir anti-ödemojenik özellik gösteren monoterpenik aldehitler açısından zengin diğer uçucu yağlar için literatürde yayınlananlarla uyumludur ( 7 ).

LGEO'nun önemli bir bileşeni olan sitralin, normal farelerin lipopolisakarit (LPS) ile uyarılan alveolar makrofajlarında IL-1β ve IL-6 üretimini inhibe ettiği gösterilmiştir ( 11 ). Ana bileşenleri sitral, geranial, neral ve karvonu içeren EO'ların, tümör nekroz faktörü alfa (TNF-a) gibi proinflamatuar sitokinlerin üretimini engellediği bulunmuştur. Maruyama ve iş arkadaşları ayrıca, EO'nun TNF-a ile indüklenen nötrofil yapışma tepkilerini baskılama yeteneğini de gösterdi ( 9 ). Başka bir çalışma ( 27 ), sitralin LPS tarafından uyarılan RAW 264.7 hücrelerinde TNF-a'yı inhibe ettiğini ileri sürdü. Verilerimizle uyumlu olarak, çeşitli fitokimyasal ekstraktlar, polifenolik fraksiyonlar ve diğer bazı uçucu yağlar için anti-inflamatuar ve analjezik etkiler de önerilmiştir.Cymbopogon türleri ( 8 ).

Sonuç olarak, mevcut araştırmanın sonuçları, farmasötik potansiyelini daha iyi değerlendirmek ve etki mekanizmasını anlamak için daha fazla çalışmaya ihtiyaç duyulmasına rağmen, LGEO'nun bir anti-inflamatuar ajan olarak geleneksel kullanımını desteklemektedir.

Kroton yağına bağlı kulak ödemi
Birçok şifalı bitki, topikal anti-inflamatuar özelliklere sahiptir. Bu etki, birçok oksijenli monoterpenin ortak bir özelliğidir ( 9 , 10 ). LGEO , izole hücre tahlilinde in vitro anti-enflamatuar aktivite gösterdiğinden , bu özellik farelerde kroton yağının neden olduğu kulak ödeminin inhibisyon derecesinin tahmin edilmesiyle ayrıca değerlendirildi. Kroton yağının farelerin sol kulaklarına topikal olarak uygulanması, araçla tedavi edilen sağ kulağa kıyasla sol kulağın kulak tıkacı ağırlığındaki artışın gösterdiği gibi gözle görülür ödeme neden oldu (veriler gösterilmemiştir). LGEO ile topikal ön tedavinin sonuçları, kroton yağının neden olduğu kulak ödeminde doza bağlı azalmaları ortaya çıkardı (Tablo 4). Diklofenak topikal jel ile karşılaştırıldığında LGEO, deneysel hayvan modelimizde daha güçlü ve daha etkili bir anti-inflamatuar aktivite üretti. LGEO'nun önceden topikal uygulaması, kulak başına 5 µl LGEO için ödem yanıtını %62,5 ve 10 µl için %75 azaltmıştır. Diklofenak sodyum (kulak başına 5 mg), kroton yağının neden olduğu iltihaplanmayı %56.2 oranında engelledi ve bu etki, maksimum LGEO dozu ile gözlemlenenlerden istatistiksel olarak farklı değildi (Tablo 4). Bildiğimiz kadarıyla, bu, LGEO'nun in vivo olarak önemli bir topikal anti-inflamatuar aktiviteye sahip olduğunu gösteren ilk rapordur . Bulgularımıza göre Abe ve ark. ( 9 ), topikal EO uygulamasının ödem ve nötrofil birikiminin enflamatuar semptomlarını sınırlayabildiğini bildirdi.

Tablo 4

Limon otu aromatik yağı , in vivo olarak kroton yağının neden olduğu kulak ödemini önler

Kontrol	-	0,40± ^0a	-
Diklofenak sodyum jeli (mg/kulak)	5	0.17±0 ^b	56.25
LGEO (µl/kulak)	5	0.15± ^0.5b	62.50
	10	0.10±0 ^b	75.00

Ayrı bir pencerede aç
ANOVA tek yönlü analizine ve ardından Tukey'nin post hoc çoklu karşılaştırma testine göre , aynı sütun ve ardından farklı harf gelen ortalamalar önemli ölçüde farklıdır ( P <0.05). Diklofenak sodyum: Voltaren Emulgel. Ödem ağırlığı verileri ortalama (mg)±standart sapma ( n =4/grup) olarak sunulmuştur. LGEO: limon otu esansiyel yağı.

Deri iltihabının, lökotrien, prostaglandinler ve sitokinler gibi çözünür pro-inflamatuar mediatörlerin salınımına yanıt olarak inflamasyon bölgesine göç eden çeşitli inflamatuar hücre popülasyonlarının etkileşimi tarafından tetiklendiği ve sürdürüldüğü iyi bilinmektedir ( 3 , 7 ) . . Aromaterapide, tüm vücut masajında veya vücudun sınırlı bölgelerine uçucu yağların cilde uygulanması oldukça arzu edilir. Birçok EO, lezyonel nötrofil birikimi olan inflamatuar semptomlar için iyileştirici bir tedavi olarak kullanılır: aftöz stomatit (aftlar), romatoid artrit ve lezyonel mantar veya bakteriyel bulaşmalar ( 1 ).

Fare kulak dokusu morfolojisi

Kroton yağının neden olduğu hayvanlardan H&E lekeli kulak bölümlerini araştırdık. Kroton yağı uygulaması, eşlik eden bağ dokusu bozulması ile birlikte dermiste ödem, epidermal hiperplazi ve önemli inflamatuar hücre infiltrasyonunun açık kanıtı ile kulak kalınlığında belirgin bir artışa neden oldu.Şekil 3C veve D).D). LGEO'nun topikal uygulaması, pozitif kontrol diklofenak ile karşılaştırılabilir bir ölçüde kulak kalınlığını ve ilişkili patolojik göstergeleri azalttı (Şekil 3bir veve B).B). Bu bulgular, LGEO'nun kroton yağının neden olduğu kulak ödemini ve kontakt dermatiti azalttığına dair doğrudan kanıt teşkil etmektedir.

Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı LJM-9-25431-g003.jpg

Şekil 3
Keratin, epidermal, dermal, kas ve kıkırdak katmanlarını gösteren fare kulak biyopsilerinin histopatoloji bölümleri.

Hematoksilen-eozin ile boyanmış kesitler, dermis inflamasyon fazında ödem ve önemli inflamatuar polimorfonükleer (PMN) hücre infiltrasyonu için hafif (+), orta (++) ve şiddetli (+++) olarak puanlandı. (A) Limon otu esansiyel yağı (LGEO) tedavisi (kulak başına 5 µl); (B) Pozitif kontrol (kulak başına 5 mg diklofenak sodyum %1 jel, Voltaren Emulgel (Novartis, Fransa)) tedavisi: ödem (±); inflamatuar hücre infiltrasyonu (+), inflamasyon fazı (±). (C) ve (D) kroton yağı: ödem (++); inflamatuar hücre infiltrasyonu (+++), inflamasyon fazı (++). Büyütme × 100.

Ke: keratin; Ep: epidermal tabaka; De: dermal tabaka; Mü: kas; Ca: kıkırdak tabakası; Od: ödem; Pc: PMN hücrelerinin infiltrasyonu.

Mikroskobik inceleme, LGEO ile topikal tedavinin yararlı anti-inflamatuar etkilerini doğruladı. Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, LGEO ile önceden uygulanan topikal tedavi ile ödem çarpıcı biçimde azaldı (Şekil 3C veve A).A). Bildiğimiz kadarıyla bu, LGEO'nun histopatoloji araştırması ile doğrulanan önemli bir topikal antiinflamatuar aktiviteye sahip olduğunu gösteren ilk rapordur.

Histopatoloji analizimizin verileri, karagenan ve kroton yağının neden olduğu ödem yöntemlerini kullanan daha önce bildirilen bulgularla uyumludur ( 7 , 10 , 21 ). Ayrıca, sonuçlarımız Boukhatem ve ark. ( 21 ) histolojik analizi, gül kokulu sardunya yağının in vivo cilt iltihabı sürecini inhibe ettiğini ortaya koydu .

Sonuçlar

Önceki çalışmalarla birlikte bulgularımız, akut inflamatuar cilt durumlarının önlenmesi ve tedavisi için potansiyel olarak değerli bir antifungal ve anti-inflamatuar ajan olarak LGEO'nun değerlendirilmesine güçlü destek vermektedir. Ayrıca, buhar fazındaki LGEO'nun, aynı etki için daha düşük dozlara ihtiyaç duyulabilmesi için daha yüksek potens gibi sıvı faza göre çeşitli avantajlara sahip etkili bir mantar önleyici sistem olduğuna dair artan kanıtlar vardır. Buhar fazı, LGEO'nun hastanelerde hava dekontaminantı olarak kullanılmasını mümkün kılar. Bu çalışma, LGEO'nun terapötik özelliklerinden sorumlu aktif kimyasal bileşenlerinin yanı sıra spesifik etki mekanizmalarını belirlemek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç olduğunu göstermektedir.

Git: Çıkar çatışması ve finansman

Yazarlar, bu çalışmayı yürütmek için endüstriden veya başka bir yerden herhangi bir fon veya fayda almamıştır.

Git: Referanslar
1. Edris AE. Uçucu yağların ve bunların bireysel uçucu bileşenlerinin farmasötik ve terapötik potansiyelleri: bir inceleme. Fitoter Araş. 2007; 21 :308–23. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
2. Bakkali F, Averbeck S, Averbeck D, Idaomar M. Uçucu yağların biyolojik etkileri – bir inceleme. Gıda Kimyasal Toksikol. 2008; 46 :446–75. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
3. Yuan G, Wahlqvist ML, He G, Yang M, Li D. Doğal ürünler ve anti-inflamatuar aktivite. Asya Pac J Clin Nutr. 2006; 15 :143. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
4. Boukhatem MN, Saidi F, Hamaidi MS, Hakim Y, Mekarnia M. Kültür ve sömürü industrielle du géranium rosat ( Pelargonium graveolens ) en Cezayir: etat des lieux ve perspektifler. Fitoterapi. 2011; 9 :304–9. [ Google Akademik ]
5. Tahir YA. Farelerde Mentha piperita yaprağı sulu ekstresinin antinosiseptif aktivitesi . Libya J Med. 2012; 7 :16205. doi: 10.3402/ljm.v7i0.16205. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
6. Dub AM, Dugani AM. Tavşanlarda yerel zeytin ( Olea europaea L.) yapraklarının etanolik ekstraktının tekrarlanan dozlarının antitrombotik etkisi. Libya J Med. 2013; 8 :20947. doi: 10.3402/ljm.v8i0.20947. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
7. Miguel MG. Uçucu yağların antioksidan ve antienflamatuar aktiviteleri: kısa bir inceleme. Moleküller. 2010; 15 :9252–87. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
8. Akhila A. Uçucu yağ içeren otlar: Cymbopogon cinsi . New York: CRC Basını; 2010. [ Google Akademik ]
9. Abe S, Maruyama N, Hayama K, Ishibashi H, Inoue S, Oshima H, Yamaguchi H. Uçucu yağlar tarafından tümör nekroz faktörü-alfa kaynaklı nötrofil yapışma tepkilerinin baskılanması. Med Inflamm. 2003; 12 :323–8. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
10. Alitonou GA, Avlessi F, Sohounhloue DK, Agnaniet H, Bessiere JM, Menut C. Anti-inflamatuar ajan olarak potansiyel kullanımı için Benin'den Cymbopogon giganteus uçucu yağı üzerine araştırmalar. Inter J Aromather. 2006; 16 :37–41. [ Google Akademik ]
11. Tiwari M, Dwivedi UN, Kakkar P. Cymbopogon citratus DC tarafından oksidatif stres ve proinflamatuar mediatörlerin baskılanması. Lipopolisakkaritte uyarılan murin alveolar makrofajlardaki stapf özü. Gıda Kimyasal Toksikol. 2010; 48 :2913–19. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
12. Abe S, Sato Y, Inoue S, Ishibashi H, Maruyama N, Takizawa T, et al. Limon otu ( Cymbopogon citratus ) yağı ve bileşeni Citral dahil olmak üzere uçucu yağların Anti- Candida albicans aktivitesi . Japon J Med Mycol. 2002; 44 :285–91. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
13. Tyagi AK, Malik A. Limon otu yağı ve buharı nedeniyle gıdaları bozan bakterilerde morfostrüel hasar: SEM, TEM ve AFM incelemeleri. Kanıta Dayalı Tamamlayıcı Alternatif Med. 2012; 2012 :692625. doi: 10.1155/2012/692625. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
14. Negrelle RRB, Gomes EC. Cymbopogon narenciye DC. Stapf: kimyasal bileşim ve biyolojik aktiviteler. Rev Bras Pl Med. 2007; 9 :80-92. [ Google Akademik ]
15. Silva CDBD, Guterres SS, Weisheimer V, Schapoval EE. Limon otu yağı ve sitralin Candida spp.'ye karşı antifungal aktivitesi . Braz J Infect Dis. 2008; 12 :63–6. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
16. Tyagi AK, Malik A. Seçilen uçucu yağların Candida albicans'a karşı sıvı ve buhar fazlı antifungal aktiviteleri : Cymbopogon citratus'un mikroskobik gözlemleri ve kimyasal karakterizasyonu . BMC Tamamlayıcı Alternatif Med. 2010; 10:65 . [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
17. Boukhatem MN, Kameli A, Ferhat MA, Saidi F, Tayebi K. Uçucu yağların gıda koruyucu potansiyeli: Cevap limon otu mu? J Verbr Lebensm. 2014; 9 :13–21. [ Google Akademik ]
18. Ortiz MI, Gonzales-Garcia MP, Ponce-Monte HA. Naproksen ve Citral arasındaki etkileşimin sıçanlarda iltihaplanma üzerindeki sinerjik etkisi. Bitkisel ilaç. 2010; 18 :74–9. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
19. Adams RP. Illinois: Cazip; 2007. Gaz Kromatografisi-dört kutuplu Kütle Spektroskopisi ile uçucu yağ bileşenlerinin tanımlanması. [ Google Akademik ]
20. Zaika LL. Baharatlar ve otlar: antimikrobiyal aktiviteleri ve belirlenmesi. J Gıda Saf. 1988; 9 :97-118. [ Google Akademik ]
21. Boukhatem MN, Kameli A, Ferhat MA, Saidi F, Mekarnia M. Yeni ve güvenli anti-inflamatuar ilaçların kaynağı olarak gül sardunya esansiyel yağı. Libya J Med. 2013; 8 :22520. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
22. Bhattacharya AK, Kaul PN, Rajeswara Rao BR, Mallavarapu GR, Ramesh SI. Limon otunun uçucu yağ profillerinde türler arası ve çeşitler arası varyasyonlar. J Essent Oil Res. 1997; 9 :361–4. [ Google Akademik ]
23. Dorman HJD, Dekanlar SG. Bitkilerden elde edilen antimikrobiyal ajanlar: bitkisel uçucu yağların antibakteriyel aktivitesi. J Appl Mikrobiyol. 2000; 88 :308-16. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
24. Inouye S, Takizawa T, Yamaguchi H. Uçucu yağların ve ana bileşenlerinin gaz temasıyla solunum yolu patojenlerine karşı antibakteriyel etkinliği. J Antimicrob Chemother. 2001; 47 :565-73. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
25. Laird K, Phillips C. Buhar fazı: uçucu yağlar için antimikrobiyaller olarak gelecekte potansiyel bir kullanım mı? Lett Appl Mikrobiyol. 2012; 54 :169-74. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
26. Pérez GS, Zavala SM, Arias GL, Ramos LM. Bazı uçucu yağların anti-inflamatuar aktivitesi. J Essent Oil Res. 2011; 23 :38-44. [ Google Akademik ]
27. Lin CT, Chen CJ, Lin TY, Tung JC, Wang SY. Cinnamomum insularimontanum Hayata'dan elde edilen meyve esansiyel yağının iltihaplanma önleyici aktivitesi . Bioresour Technol. 2008; 99 :8783–7. [ PubMed ] [ Google Akademik ]

***maturidi*** · 20 April 2022, 15:48

Cymbopogon citratus (DC.) Stapf mitigates ER-stress induced by streptozotocin in rats via down-regulation of GRP78 and up-regulation of Nrf2 signaling

Author links open overlay panelOlusola OlalekanElekofehinti^a Afolashade ToritsejuOnunkun^a^b Tolulope MaryOlaleye^c
Show more
Add to Mendeley
Share
Cite
https://doi.org/10.1016/j.jep.2020.113130 Get rights and content

Abstract
Ethnopharmacological relevance
Endoplasmic reticulum (ER) stress plays a role in the pathogenesis of diabetes mellitus, contributing to pancreatic dysfunction and insulin resistance. Ameliorating ER stress may be a viable therapeutic approach in the proper management of diabetes mellitus. Cymbopogon citratus (C.citratus) has been used in traditional medicine in the management of diabetes mellitus. Although well known for its anti-diabetic effect, the mechanism underlying this effect remains unclear.

Aim of the study
This study was designed to investigate the effect of C. citratus methanolic leaves extract on ER stress induced by streptozotocin (STZ) in wistar rats.

Materials and methods

Sıçanların pankreasında ER stresini indüklemek için STZ (60 mg/kg) kullanıldı. Sıçanlara iki hafta boyunca 100, 200 ve 400 mg/kg dozlarında gastrik gavaj yoluyla C. citratus metanolik yaprak ekstresi verilirken pozitif kontrol olarak metformin (100 mg/kg) kullanıldı. Açlık kan şekeri (FBG), ER stresi ile ilgili genlerin (GRP78, CHOP, ATF4, TRB3, PERK, IRE1), antioksidan (Nrf2 ve AhR) ve proinflamatuar (TNF-α) genlerinin ekspresyonu belirlendi. Bu etkiden sorumlu olası bileşikler de moleküler yerleştirme yoluyla tahmin edildi.

Sonuçlar

STZ kullanılarak ER stresinin uyarılması, AKŞ'yi önemli ölçüde artırırken, C. citratus metanolik özütünün uygulanması onu normal kontrol seviyesine geri getirdi (p < 0.05). ER stresi ile indüklenen sıçanların C. citratus metanolik özü ile muamele edilmesi üzerine, ER stresi ile tedavi edilmemiş sıçanlarla karşılaştırıldığında , ER stresi genlerinin önemli ölçüde aşağı regülasyonu gözlemlendi . Nrf2 ve AhR'yi kodlayan genlerin önemli yukarı regülasyonu (p < 0.05), ER stresi ile indüklenen sıçanların C. citratus metanolik özü ile işlenmesi üzerine de fark edildi . Moleküler yerleştirme, apigenin'in -9.3 kcal/mol bağlanma afinitesi ile GRP78'i hedeflediğini, kaempferol ve kersetin ise -9,5 kcal/mol bağlanma afinitesi ile Keap1'i hedeflediğini ve ER stresi üzerindeki bu iyileştirici etkiden sorumlu olabileceğini düşündürmektedir.

Çözüm

Bu gözlemler, C. citratus'un , GRP78 üzerindeki aşağı-düzenleyici etkisi ve NRF2 sinyali üzerindeki yukarı-düzenleyici etkisi aracılığıyla STZ tarafından indüklenen ER stresini azalttığını göstermektedir.

grafik soyut

Tanıtım

Bulaşıcı olmayan kronik hastalıklardan biri olan diabetes mellitus, önde gelen küresel bir sağlık sorunu olarak ortaya çıkmıştır. Dünya çapında yaklaşık 347 milyon insanı etkiler ve vücudun dolaşımdaki plazma glukozunu tüketip depolayamamasına neden olan ve hiperglisemi ile sonuçlanan yıkıcı bir metabolik hastalıktır (Abdalla ve diğerleri, 2018; Elekofehinti ve diğerleri, 2018). Gıda ve İlaç İdaresi (FDA) tarafından diyabet tedavisi için onaylanmış birkaç farklı ilaç sınıfı mevcuttur, ancak dikkate değer yan etkileri vardır (Sola ve diğerleri, 2015; Fatima ve diğerleri, 2018; Sarkar ve Donner, 2019). Henüz tam olarak tatmin edici ve etkili bir tedavinin bulunmaması gerçeği, bu bozukluğun yönetiminde diğer biyokimyasal yolların araştırılmasını teşvik etmiştir.

Çeşitli çalışmalarda, endoplazmik retikulum stres yanıtı (ERSR) yolu, diabetes mellitusun patogenezinde yer almıştır (Marre ve ark., 2015; Engin, 2016; Manalo ve Medina, 2018). Endoplazmik retikulum (ER), proteinlerin sentezi, katlanması ve taşınması ile ilgili önemli işlevleri yerine getiren ve ayrıca lipid sentezi ve kalsiyum homeostazında kritik bir rol oynayan bir organeldir. Artan protein sentezi, yanlış katlanmış proteinlerin birikmesi, iltihaplanma, redoks dengesizliği, kalsiyum dengesizliği vb. nedeniyle ER homeostazındaki değişiklik, bu organelde ER stresi olarak bilinen bir tür strese neden olur (Marre ve diğerleri, 2015; Salvado ve diğerleri, 2015). ; Ellulu ve diğerleri, 2017). ER stresini çözme girişiminde, katlanmamış protein yanıtı (UPR) olarak da bilinen ERSR yolu tetiklenir. UPR'nin ilk amacı, iki mekanizma yoluyla homeostazı yeniden kurmak ve ER stresini hafifletmektir; protein katlama şaperonlarının ekspresyonu yoluyla katlama kapasitesinin arttırılması ve genel protein translasyonunu inhibe ederek ve yanlış katlanmış proteinlerin bozulmasını teşvik ederek ER istemci protein yükünün aşağı regülasyonu. Bununla birlikte, UPR'nin bu hafifletici etkisi, sürekli aktivasyonu nedeniyle başarısız olduğunda (ER-stresi bağlantılı patolojik durumların çoğunda görüldüğü gibi, örneğin diabetes mellitus), programlanmış hücre ölümü başlatılır (Biden ve diğerleri, 2014; Afrin ve diğerleri, 2015). ; Chong ve diğerleri, 2017). Son bulgular, insüline duyarlı dokulardaki (pankreas, karaciğer, yağ, kas vb.) şiddetli ER stresinin, diyabetes mellitusun patogenezinde/ilerlemesinde kritik roller oynadığını, pankreas disfonksiyonuna ve insülin direncine katkıda bulunduğunu göstermektedir (Eizirik ve ark., 2008; Biden ve diğerleri, 2014; Marre ve diğerleri, 2015; Salvado ve diğerleri, 2015). Bu nedenle, ER stresinin hafifletilmesi, bu bozukluğun yönetiminde uygulanabilir bir terapötik yaklaşım olabilir.

Bitkiler, hipoglisemik ajanlar olarak olası etkilerine yönelik olarak bazı nedenlerden dolayı sürekli olarak araştırılmaktadır ve halen araştırılmaktadır; düşük maliyet, kolay bulunabilirlik ve daha az yan etki. Poaceae familyasına ait olan Cymbopogon citratus , Afrika'da yetiştirilen başlıca tıbbi bitkilerden biridir ve diyabetes mellitus dahil bir dizi hastalığın tedavisi için geleneksel tıpta yaygın olarak kullanılmaktadır (Boukhatem ve ark., 2014). Nijerya'da limon otu (İngilizce), tsauri (Hausa), achara ehi (Igbo) ve kooko oba (Yoruba) olarak bilinir (Jaide, 2012). Önceki çalışmalar, C. citratus'un antidiyabetik aktivitesini kanıtladı(Ademuyiwa ve diğerleri, 2015; Abbas ve diğerleri, 2018; Ugadu ve diğerleri, 2018). Anti-diyabetik etkisi iyi bilinmesine rağmen, bu etkinin altında yatan mekanizma belirsizliğini koruyor. Bu araştırma, wistar sıçanlarının pankreasında STZ tarafından indüklenen ER stresi üzerinde C. citratus yapraklarının metanolik ekstraktının etkisinde yer alan moleküler mekanizmayı ve etkiden sorumlu olası fitokimyasalları araştırmaktadır.

Bölüm snippet'leri
Bitki toplama

C. citratus'un taze yaprakları , Nijerya'nın Ekiti eyaleti, Ado Ekiti'deki yerel bir pazardan elde edildi. Yapraklar ayrılmış, distile su ile iyice yıkanmış ve gölgede 3 hafta oda sıcaklığında (28 ± 3 °C) kurutulmuştur. Kurutulan yapraklar, bir elektrikli karıştırıcı kullanılarak ince toz haline getirildi ve kullanımdan önce hava geçirmez polietilen torba içinde oda sıcaklığında saklandı.

Ekstrakt hazırlanması
Toz haline getirilmiş yaprak malzemenin iki yüz (200) gramı, bir gece boyunca maserasyon tekniği ile 1 L metanol ile özütlenmiştir.

C. citratus metanolik ekstraktının açlık kan şekeri üzerindeki etkisi

Diyabetik modelin doğrulanması ve tedavinin etkisi için AKŞ düzeyi periyodik olarak kontrol edildi. Tedaviden önce, diyabetik sıçanlarda FBG seviyesi kontrole göre anlamlı olarak daha yüksekti (Şekil 1, p < 0.05). Bununla birlikte, 2 haftalık tedavi süresi boyunca, C. citratus metanolik özütü, diyabetik sıçanların FBG seviyelerini önemli ölçüde azaltmıştır (Şekil 1, p < 0,05).

C. citratus metanolik ekstraktının ER stresi üzerindeki etkisi

Şekil 2A–F'de gösterildiği gibi, STZ kaynaklı ER stresi, ER stres belirteçlerinin yukarı regüle edilmiş bir gen ekspresyonuna neden oldu; GRP78 (Şekil 2A),

Tartışma

C. citratus'un hipoglisemik etkisi, ekstraksiyon için farklı çözücüler kullanılarak literatürde yaygın olarak bildirilmiştir (Ademuyiwa ve diğerleri, 2015; Abbas ve diğerleri, 2018; Ugadu ve diğerleri, 2018). Hipoglisemik etkisi iyi bilinmektedir ve yerleşiktir ancak etki şekli belirsizliğini korumaktadır. Bu çalışma, C. citratus'un ER homeostazını koruyarak glukoz homeostazını geri kazanmadaki etki mekanizmasını belirlemeyi amaçlamıştır. Bu çalışmadaki bulgular, C. citratus metanolik özütünün glikozu geri yüklediğini göstermektedir.

Çözüm

C. citratus , şeker hastalığı da dahil olmak üzere bir dizi hastalık için doğal bir çare olarak kabul edilir. Bu çalışma, C. citratus'un ER stres invivo'ya karşı terapötik potansiyelini göstermiştir . Bu çalışmanın sonuçları, C. citratus'un diyabetik wistar sıçanlarında Nrf2 sinyal yolu üzerindeki yukarı düzenleyici etkisi ve GRP78 üzerindeki aşağı düzenleyici etkisi yoluyla ER stresini azalttığını göstermektedir. Bu çalışma ayrıca apigenin, kuersetin ve kaempferolün iyileştirici etkiden sorumlu olabileceğini ortaya koydu.

Yazar katkıları

OOE ve OMT çalışmayı tasarladı. OOE ve OAT tüm deneyleri gerçekleştirdi ve veri toplama ve analizine katkıda bulundu. OOE ve OAT makaleyi yazdı.

Rekabetçi çıkar beyanı
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Research data for this article

Data not available / The authors do not have permission to share data
About research data Referanslar (45)

ME Matzinger ve ark. Nrf2 sinyalinin doğal ürünlerle aktivasyonu - diyabeti hafifletebilir mi?

Biyoteknoloji. reklam

(2018)
RVM Manalo ve ark. Hastalık patogenezi ve patofizyolojisinde endoplazmik retikulum stresi

Mısır. J. Med. Hımm. Gen.

(2018)
OO Elekofehinti et al. Acı limondan (Mormodica charantia) türetilen bileşiklerin antidiyabetik olarak potansiyel kullanımı: in silico ve in vivo çalışmalar

patofizyoloji

(2018)
EJ Calabrese Hormesis: ilkeler ve uygulamalar

J. Homeopati

(2015)
SMU Ahmed et al. Nrf2 sinyal yolu: inflamasyonda önemli roller

Biyokimya. Biyofiz. Acta

(2017)
N. Abbas ve ark. Limon otu (Cymbopogon citratus) sulu köklerinin ve çiçek özlerinin albino fareler üzerinde antidiyabetik etkisinin incelenmesi

Int. J. Pharma Sci. Araş.

(2018)
KO Abdalla ve ark. Tip 1 diyabetli hastalarda deve sütünün lipid metabolizmasına etkisi

Biyomedya. Araş. Rev.

(2018)
AJ Ademuyiwa ve ark. Cymbopogon citratus'un wistar albino sıçanlarının antioksidan profilleri üzerindeki etkileri.

Merit Res. J. Çevre. bilim Teknoloji

(2015)
AJ Ademuyiwa ve ark. Cymbopogon citratus'un (Limon otu) wistar albino sıçanların kan şekeri düzeyi, lipid profilleri ve hormonal profilleri üzerine etkileri

Merit Res. J. Med. Med. bilim

(2015)
R. Afrin et al. Kurkumin, diyabetik sıçanlarda endoplazmik retikulum stres aracılı apoptozun modülasyonu yoluyla streptozotosin kaynaklı karaciğer hasarını iyileştirir

Ücretsiz Radic. Araş.

(2015)

Daha fazla referans görüntüle (9) tarafından alıntılandı

Metformin ve gallik asidin birlikte uygulanması, fruktozla beslenen streptozotosin diyabetik Sıçanlarda JAK/STAT sinyal yolunu ve glutatyon metabolizmasını modüle eder

2022, Bitkisel İlaç Artı
Özeti göster
Momordica charantia nanopartikülleri, diyabetik kaynaklı sıçanların pankreasında mitokondri biyogenezini destekler: gen ekspresyonu çalışması

2021, Mısır Tıbbi İnsan Genetiği Dergisi
Chrysophyllum albidum meyve özü tozunun diyabetik olmayan ve tip 2 diyabetik sıçanlarda antioksidan ve proinflamatuar genler üzerindeki etkisi

2021, Diyabet ve Metabolik Bozukluklar Dergisi
Kobalt-krom nanoparçacıklarının insan aort endotel hücreleri üzerindeki in vitro etkisi

2021, Uygulamalı Toksikoloji Dergisi
Bitkisel çayların hücresel homeostazı ve otofajiyi düzenlemedeki rolü ve bunların genel sağlığı düzenlemedeki etkileri

2021, Besinler
Momordica charantia gümüş nanoparçacıkları, streptozotosin kaynaklı diyabetik sıçanların böbreklerinde SOCS/JAK/STAT ve P13K/Akt/PTEN sinyal yollarını modüle eder

2021, Diyabet ve Metabolik Bozukluklar Dergisi

Scopus ile ilgili tüm alıntı makaleleri görüntüleyinÖnerilen makaleler (6)

Araştırma makalesi Nrf2 sinyal kaskadı yoluyla pankreas beta hücrelerinin immün aracılı tahribatını azaltmada pterostilbenin rolü

The Journal of Nutritional Biochemistry, Cilt 44, 2017, pp. 11-21
Özeti göster
Araştırma makalesi Dacryodes edulis (G. Don) HJ Lam, diyabetik sıçanlarda oksidatif stresi ve dislipidemiyi baskılarken glukoz metabolizmasını, kolinerjik aktiviteleri ve Nrf2 ekspresyonunu modüle eder.

Etnofarmakoloji Dergisi, Cilt 255, 2020, Makale 112744
Özeti göster
Araştırma makalesi Streptozotosin ile indüklenen diyabetik sıçanlarda N -adamantil-4-metiltiazol-2-aminin hiperglisemi, hiperlipidemi ve oksidatif stres üzerindeki etkileri

European Journal of Pharmacology, Cilt 736, 2014, s. 26-34
Özeti göster
Araştırma makalesi Sphagneticola trilobata (L.) Pruski çiçeğinin etanolik ekstraktının sıçanlarda toksisitesi ve antidiyabetik aktivitesi

Etnofarmakoloji Dergisi, Cilt 262, 2020, Makale 113128
Özeti göster
Araştırma makalesi Limon Çayı Tüketiminin Tahmini Glomerüler Filtrasyon Hızı ve Kreatinin Klirens Hızına Etkisi

Journal of Renal Nutrition, Cilt 25, Sayı 1, 2015, s. 57-66
Özeti göster
Araştırma makalesi Diyet nar takviyesi, Nrf2-p21 etkileşimini modüle ederek ve apoptozu hayatta kalma anahtarına kontrol ederek murin pankreatitini hafifletir

The Journal of Nutritional Biochemistry, Cilt 66, 2019, s. 17-28

Duyuru

Limon Otu, Lemon Grass, Cymbopogon citratus

Limon Otu, Lemon Grass, Cymbopogon citratus

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap