Duyuru

***maturidi*** · 03 February 2023, 17:07

Sığla MSM Mix Yağı; Candida Mantarı, Hastane Enfeksiyonu ve Mide Hastalıklarına Karşı Etkilidir

Mide ve Ülserojenik Rahatsızlıklara Karşı Doğal Çözümler

Afr J Geleneksel Tamamlayıcı Altern Med. 2014; 11(5): 28–32.
23 Ağustos 2014 tarihinde çevrimiçi yayınlandı. doi: 10.4314/ajtcam.v11i5.4
PMCID: PMC4202513
PMID: 25395700 Liquidambar Orientalis Mill'in Antimikrobiyal Etkinliği. Yaprak Ekstraktlarının Gıda Patojenlerine ve Antioksidan Kapasitesine Karşı

Gök Okmen , O Türkcan , O Ceylan ve Gök Görk
Yazar bilgileri Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi, Fen Fakültesi, Biyoloji Bölümü, TÜRKİYE
Sorumlu yazar.
Sorumlu yazar: moc.liamg@nemkonetlug
Git: Soyut

Arka plan

Tıbbi bitkiler, antimikrobiyal, antimutajenik ve antioksidan etkilere neden olduğu iddia edilen önemli bir madde kaynağıdır. Antimikrobiyal tedavileri nedeniyle birçok bitki kullanılmıştır. L. orientalis'in antimikrobiyal ve antioksidan aktiviteleri günümüze kadar bildirilmemiştir. Bu çalışmanın amacı, L. orientalis'ten elde edilen farklı ekstraktların antimikrobiyal ve antioksidan potansiyellerini araştırmaktı .

Malzemeler ve yöntemler
Ekstreler, farklı gıda patojenlerine karşı antimikrobiyal aktivite açısından tarandı. Bu bakteriler 4 Gram pozitif ve 3 Gram negatif bakteri ve bir mantar içerir. Bitkinin yaprak özleri, disk difüzyon deneyi ile test edildi. MIC, bitki özleri üzerinde antimikrobiyal aktivite olarak değerlendirildi. Ek olarak bitki özleri, kararlı DPPH (2,2-difenil-1-pikril-hidrazilhidrat) serbest radikaline karşı test edildi.

Sonuçlar
L. orientalis'in aseton, etanol ve metanol ekstraktları, Yersinia enterocolitica, Listeria monocytogenes ve Staphylococcus aureus'a karşı 12 mm'lik maksimum inhibisyon bölgesi göstermiştir . Buna ek olarak, metanol ekstraktı güçlü bir antioksidan aktivite sergiledi (trolox eşdeğeri = 2.23 mM).

Çözüm
L. orientalis özleri, antimikrobiyal ve antioksidan potansiyele sahiptir. Sonuçlarımız, bu bitkinin geleneksel tıpta kullanımını desteklemekte ve bazı bitki ekstraktlarının, yeni ilaç araştırmalarında antibakteriyel maddeler olarak kullanılabilecek iyi antibakteriyel özelliklere sahip bileşiklere sahip olduğunu öne sürmektedir.

Anahtar Kelimeler: Antimikrobiyal aktivite, Antioksidan aktivite, L. orientalis.
Git: giriiş

Şifalı bitkiler, çeşitli rahatsızlıkların tedavisinde sıklıkla kullanılan değerli bitkisel ürünler veren doğal kaynaklardır ( Grabley ve Thiericke, 1999 ). Liquidambar türleri, Hamamelidacea familyasına aittir . Liquidambar orientalis ağacı Türkiye'de yaygın olarak 'Sığla ağacı' veya 'Günlük ağacı' olarak bilinir ( Hill, 1952 ; Davis, 1965; Tyler ve diğerleri , 1981 ; Baytop, 1984 ). L. orientalis , tıbbi ve kozmetik özelliklere sahip olduğu bilinen ve Akdeniz bölgesinde fitoterapide yaygın olarak kullanılan otsu bir bitkidir. L. orientalis'i yaralayarak üretilen storax , iyi antiseptik özelliklere sahiptir (Fernandez, 2005 ; Lee ve ark. , 2009 ). Ayrıca Türk halk hekimliğinde topikal parazit öldürücü, balgam söktürücü ve bazı deri hastalıklarının tedavisinde kullanılmaktadır. Storax kozmetikte geniş bir uygulama alanına sahiptir ( Hafizoğlu, 1982 ). Yayınlanan çalışmaların çoğu, storaksın uçucu yağ bileşimi üzerine yapılmıştır ( Berkel ve Huş, 1944 ; Hafizoğlu ve diğerleri , 1996 ; Duru ve diğerleri , 2002 ). L. orientalis'in uçucu yağı Hafizoğlu ve ark. (1996) ve Duru ve ark. (2002). Birçok bileşen karakterize edildi, ancak başlıcaları terpinen-4-ol, a-terpinol, sabinen ve y-terpinen idi. Bugüne kadar birçok araştırmacı storaksın birçok bakteri türü, fitopatojen funguslar ve nematod üzerinde de koruyucu aktiviteye sahip olduğunu bildirmiştir ( Sagdic ve ark. , 2005 ; Oskay ve Sarı, 2007 ; Kim ve Seo, 2008 ; Lee ve ark. , 2009 ; Bayramoğlu ). , 2010 ).

Tıbbi bitkiler zengin bir antimikrobiyal ajan kaynağıdır. Bu bitkiler, farklı ülkelerde tıbbi olarak kullanılmaktadır ve birçok etkili ve güçlü ilacın kaynağıdır ( Srivastava ve diğerleri , 1996 ). Dünya Sağlık Örgütü'ne göre, şifalı bitkiler çeşitli ilaçları elde etmek için en iyi kaynak olacaktır. Bu nedenle, bu tür bitkiler, özelliklerini, güvenliklerini ve etkinliklerini daha iyi anlamak için araştırılmalıdır ( Nascimento, 2000 ). Birçok bitki, bitkinin sekonder metabolizmasında sentezlenen bileşiklerden kaynaklanan antimikrobiyal özelliklerinden dolayı kullanılmıştır. L. orientalis yaprak ekstraktlarının gıda patojenlerine karşı antimikrobiyal aktivitesi araştırılmamıştır, in vitroMuğla'da yetişen bitkinin yaprak kısımlarının antimikrobiyal aktivitesi disk difüzyon yöntemi kullanılarak değerlendirilmiştir. Ek olarak, L. orientalis yaprak ekstraktlarının antioksidan aktiviteleri bildirilmemiştir. Bu çalışmada, farklı bitki yaprakları ekstraktlarının antimikrobiyal ve antioksidan aktiviteleri araştırılmıştır. Bu çalışma, L. orientalis yaprak özlerinin antimikrobiyal ve antioksidan etkileri hakkındaki bu bilgi eksikliğine katkıda bulunmaya çalışmaktadır .

Git: Araç ve yöntemler

Bitki materyali
Liquidambar orientalis yaprakları Mayıs 2012'de Muğla'nın Köyceğiz ilçesinden toplanmıştır. Deniz seviyesinden 10–15m yükseklik. K 36° 59'37,00'', K 28° 38'50,00'', Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi Biyoloji Bölümü Öğretim Üyesi Olcay Ceylan tarafından kimliği doğrulandı. Kupon örnekleri (Herbaryum No: 398) Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi Biyoloji Anabilim Dalı Herbaryumunda muhafaza edilmiştir. Bu örneklerin teşhisi Flora of Turkey (Davis, 1965) kullanılarak yapılmıştır.

bitki çıkarma
Yapraklar 2-3 kez akan su ve bir kez de steril distile su ile iyice yıkandı. Taze bitki materyali havada kurutuldu ve ardından kurutulmuş yapraklar bir karıştırıcıda toz haline getirildi. Tüm numuneler, ilk numune hazırlığına kadar ortam sıcaklığında saklandı, ardından analiz için gerekli olana kadar 4 °C'de saklandı.

Bitki örneklerinin havayla kurutulmuş ve toz haline getirilmiş yaprakları, Soxhlet aparatı kullanılarak aseton, etanol ve metanol (40 mg/mL) gibi farklı çözücülerle ekstre edildi. Tüm deneyler 4 saat sürdürüldü. Ekstraktların tamamı buharlaştırıldı ve daha sonra ekstraktlar çözücüleri içinde çözüldü ve daha sonra küçük steril opak şişelerde kullanılana kadar soğutulmuş koşullar altında tutuldu. Tüm deneylere 2 gün devam edildi.

Mikroorganizmalar ve yetiştirme
Yaprak özleri, Bacillus subtilis RSKK245, Staphylococcus aureus RSKK2392, Salmonella Typhimurium RSKK19, Enterococcus faecalis ATCC8093, Escherichia coli ATCC11229, Listeria monocytogenes ATCC7644, Yersinia enterocolitica NCTC11174 ve Candida albicans RSKK02029 gibi gıda patojenik suşlarına karşı ayrı ayrı test edilmiştir . Bakteriler, Mueller-Hinton Broth (Merck) içinde 37°C'de 24 saat büyütüldü. C. albicans , Sabouraud Dextrose Broth (Merck) içinde 30°C'de 24-48 saat büyütüldü. Bu bakteri suşları ve C. albicansATCC (Amerikan Tip Kültür Koleksiyonu, ABD), RSKK (Refik Saydam Ulusal Tip Kültür Koleksiyonu, Türkiye) veya NCTC'den (Ulusal Tip Kültür Koleksiyonu) temin edildi.

Antimikrobiyal aktivite testi
Antimikrobiyal aktivite için uygulanan Kirby-Bauer yöntemi. Bitkinin yaprak özleri, disk difüzyon deneyi ile test edildi. Ekstraktların konsantrasyonu ve miktarı 40 µL 40 mg/mL olarak kullanıldı. Bu çalışmada organik çözücüler aseton, etanol ve metanol olarak kullanılmıştır. Bakteriler, 37°C'de Mueller-Hinton agar plakalarında (MHA, Merck) tutuldu ve mantarlar, Sabouraud Dextrose agar plakalarında (SDA, Merck) tutuldu ( Bauer, 1966 ). Bakteriler ve C. albicans RSKK02029 kültürleri 0,5 McFarland'a ayarlandı. Deneyler, üç kopya halinde yapıldı. Bakteriler 37°C'de 24 saatte inkübe edildi. C. albicansRSKK02029, 24 saat 30°C'de inkübe edildi. İnkübasyon sonrası inhibisyon zonları oluştu ve zon değerleri ölçüldü. Negatif kontrol olarak aseton, etanol ve metanol kullanıldı. Pozitif kontrol olarak tetrasiklin (30µg), kloramfenikol (30µg), nistatin (100µg) ve penisilin (10µg) antibiyotikler kullanıldı.

Minimum inhibitör konsantrasyonun (MIC) belirlenmesi
MIC, bitki özleri üzerinde antimikrobiyal aktivite olarak değerlendirildi. MIC, inkübasyondan sonra büyümeyi engelleyen en düşük konsantrasyon olarak alındı. Seri seyreltme deneyi, CLSI standartlarında ( CLSI, 2003 ; CLSI, 2006 ) açıklandığı gibi yapıldı . Bu test, her ekstraktın nihai konsantrasyonlarında (6500; 3250; 1625; 812.5; ve 406.25 ug/mL) yapıldı.

İn vitro Antioksidan Aktivite
Bitki ekstraktlarının antioksidan aktiviteleri DPPH yöntemi ile belirlendi. Antioksidan aktiviteler, serbest radikal olarak DPPH kullanılarak belirlendi. Ekstraktın her biri (0.1 mL), 3.9 mL 0.1 mM metanolik DPPH çözeltisine ayrı ayrı ilave edildi. 30 dakika inkübasyonun ardından ekstraktın absorbansı 515 nm'de spektrofotometre kullanılarak belirlendi. Kontrol olarak metanolik DPPH kullanıldı ( Brand ve diğerleri , 1995 ). Trolox standart antioksidan olarak kullanılır. DPPH radikal yakalama aktivitesi aşağıdaki formülle belirlendi.

DPPH radikal süpürme aktivitesi (%) = [Abs (kontrol) — Abs (ekstrakt)] × 100

Git: Sonuçlar

L. orientalis'in farklı ekstraktlarının antimikrobiyal aktivitesi, gıdalarda bazı hastalıklara neden olduğu bilinen 8 test mikroorganizmasına karşı in vitro olarak değerlendirilmiştir . Antimikrobiyal aktivitelerin sonuçları,tablo 1. Ayrıca referans antibiyotiklerin test mikroorganizmalarına karşı inhibisyon zon çapları da gösterilmiştir.Tablo 2. Kullanılan tüm materyaller için antibakteriyel aktivite sonuçları mm cinsinden inhibisyon zonu olarak aşağıdaki şekilde kaydedildi. tablo 1

L. orientalis yaprak özlerinin antimikrobiyal aktivitesi (40 mg/mL)L. orientalis yaprak özlerinin antimikrobiyal aktivitesi (40 mg/mL)

mikroorganizmalar	İnhibisyon bölgesi (mm)
aseton	etanol	Metanol
Basil subtilis RSKK245	8	10	11
Staphylococcus aureus RSKK2392	9	12	10
Listeria monocytogenes ATCC7644	-	11	12
Enterococcus faecalis ATCC8093	7	9	10
Escherichia coli ATCC1122	-	8	9
Yersinia enterocolitica NCTC11174	12	10	11
Salmonella Typhimurium RSKK19	8	10	10
Candida albicans RSKK02029	-	-	7

Ayrı bir pencerede aç Tablo 2

Referans antibiyotiklerin test mikroorganizmalarına karşı inhibisyon bölge çapları

mikroorganizmalar	Antibiyotikler (inhibisyon bölgesi- mm)
TE	C	NS	P
Basil subtilis RSKK245	(nt)	(nt)	(nt)	10
Staphylococcus aureus RSKK2392	(nt)	(nt)	(nt)	(nt)
Listeria monocytogenes ATCC7644	(nt)	(nt)	(nt)	10
Enterococcus faecalis ATCC8093	(nt)	(nt)	(nt)	(-)
Escherichia coli ATCC11229	14	20	(nt)	10
Yersinia enterocolitica NCTC11174	20	30	(nt)	(nt)
Salmonella Typhimurium RSKK19	14	21	(nt)	(nt)
Candida albicans RSKK02029	(nt)	(nt)	7	(nt)

Ayrı bir pencerede aç
TE: Tetrasiklin (30ug); C: Kloramfenikol (30ug); NS: Nistatin (100ug); P: Penisilin (10ug); (-) : bölge oluşmadı; (nt): test edilmedi

Sonuçlar, L. orientalis'in metanol ekstraktlarının sekiz bakterinin büyümesini inhibe ettiğini ve inhibisyon bölgelerinin 7 ila 12 mm arasında değiştiğini göstermektedir. Ayrıca bu bitki yaprağının aseton ve etanol ekstraktları kullanılmış mayaya karşı herhangi bir antikandidal etki belirlememiştir. Ayrıca, L. orientalis'in aseton özü, kullanılan Escherichia coli ATCC1122'ye karşı herhangi bir antibakteriyel etki göstermedi . Sonuçlar ayrıca L. orientalis'in aseton ekstraktlarının 3 Gram pozitif ve 2 Gram negatif bakterinin büyümesini engellediğini göstermektedir. Yaprağın etanol ekstraktının Candida albicans RSKK02029 hariç tüm Gram pozitif ve negatif bakterilere karşı oldukça etkili olduğu bulundu (tablo 1).

Yaprakların metanol ekstraktının tüm test mikroorganizmalarına karşı oldukça etkili olduğu bulundu (tablo 1). Maksimum inhibisyon bölgesi, Listeria monocytogenes ATCC7644'e (12 mm) karşı metanol ekstraktı tarafından üretildi . Etanol özü, Staphylococcus aureus RSKK2392'ye (12 mm) karşı maksimum inhibisyon göstermiştir. Ayrıca, aseton ekstraktı Yersinia enterocolitica NCTC11174'e (12mm) karşı maksimum inhibisyon göstermiştir. Oysa inhibisyon bölgesi, Candida albicans RSKK02029'a karşı aseton ve etanol ekstraktı tarafından üretilmemiştir . C. albicans RSKK02029 bu ekstraktlara dirençli bulunmuştur. Tüm ekstraktların Yersinia enterocolitica NCTC 11174, Staphylococcus aureus RSKK2392 ve Listeria monocytogenes'in büyümesini engellemede eşit derecede etkili olduğu bulundu.ATCC7644 (12 mm) (tablo 1).

Bu çalışmada pozitif kontrol olarak 4 referans antibiyotik kullanıldı. Bunlara tetrasiklin (30ug), kloramfenikol (30ug), nistatin (100ug) ve penisilin (10ug) dahildir. Tetrasiklin ve kloramfenikol, Yersinia enterocolitica NCTC11174'ün büyümesini çok güçlü bir şekilde inhibe ederken, kloramfenikol, Salmonella Typhimurium ve E. coli ATCC11229'a karşı çok büyük bir inhibisyon bölgesi sergiledi . Nistatin, Candida albicans RSKK02029'un büyümesini zayıf bir şekilde inhibe etti (Tablo 2).

Tablo 3sıvı seri seyreltme yöntemiyle elde edilen L. orientalis farklı ekstraktlarının MIC'lerini gösterir . Bacillus subtilis RSKK245, tüm ekstraktların 1625 µg/mL konsantrasyonuna en düşük hassasiyeti göstermiştir. Staphylococcus aureus RSKK2392, 1625 µg/mL konsantrasyonda etanol ve metanol ekstraktları ile inhibe edilmiştir. Listeria monocytogenes ATCC7644, tüm ekstraktların en yüksek konsantrasyonuna (3250 µg/mL) duyarlılık gösterdi. Enterococcus faecalis ATCC8093, 1625 µg/mL konsantrasyonda aseton ve etanol ekstreleri ile inhibe edilmiştir. Üç bakteri, tüm bitki özlerinin en yüksek konsantrasyonuna (3250 µg/mL) duyarlılık gösterdi. Bunlar arasında Escherichia coli ATCC11229,Yersinia enterocolitica NCTC11174 ve Salmonella Typhimurium RSKK19. Candida albicans RSKK02029 ise aseton ve metanol ekstraktları ile 1625 µg/mL konsantrasyonda (Tablo 3). Tablo 3

L. orientalis yaprak ekstraktlarının minimum inhibe edici konsantrasyonları (µg/mL)

mikroorganizmalar	aseton	etanol	Metanol
Basil subtilis RSKK245	1625	1625	1625
Staphylococcus aureus RSKK2392	3250	1625	1625
Listeria monocytogenes ATCC7644	3250	3250	3250
Enterococcus faecalis ATCC8093	1625	1625	3250
Escherichia coli ATCC11229	3250	3250	3250
Yersinia enterocolitica NCTC11174	3250	3250	3250
Salmonella Typhimurium RSKK19	3250	3250	3250
Candida albicans RSKK02029	1625	3250	1625

Ayrı bir pencerede aç
Bitki özlerinin antioksidan aktiviteleri, DPPH radikal yakalama kapasitesi ile değerlendirildi.Tablo 4referans olarak troloks ile DPPH radikal yakalama kapasitesinin yüzdesini gösterir. Metanol ekstresi, 40 mg/mL konsantrasyonda %86 inhibisyon gösterdi (Tablo 4). Oysa etanol ekstraktı %82 inhibisyon göstermiştir. Aseton ekstresi en düşük inhibisyona (%35) sahiptir. Tablo 4

L. orientalis yaprak özlerinin DPPH radikal yakalama kapasitesi (40 mg/mL)

	aseton	etanol	Metanol
% DPPH	35	82	86
Troloks (mM/g)	0,90 ± 0	2,13 ± 0,003	2,23 ± 0,0007

Ayrı bir pencerede aç
Git: Tartışma

Şifalı bitkiler dünya çapında geleneksel olarak çeşitli insan hastalıklarının tedavisi için kullanılmaktadır ( Chitme ve diğerleri , 2004 ). Birçoğu yeni farmasötikler geliştirmek için bileşikler olarak kullanılmış olan bol miktarda biyolojik olarak aktif bileşik kaynakları olduklarını kanıtladılar ( Palombo, 2011 ). L. orientalis Mill. ilgili etnomedikal kullanımlarına göre seçilmiştir ( Hafizoğlu, 1982 ; Duru ve diğerleri , 2002 ; Fernandez, 2005 ; Lee ve diğerleri , 2009 ).

Bu çalışmada bitki yapraklarından farklı çözücülerde elde edilen ekstraktlar 8 mikroorganizmaya karşı test edilmiştir. Antimikrobiyal aktivite, standart antibiyotiklerle karşılaştırıldı (tablo 1ve 2). L. orientalis'in metanol ekstraktları, sekiz bakterinin büyümesini inhibe etti ve inhibisyon bölgeleri 7 ila 12 mm arasında değişti (tablo 1). Zhong ve ark. (2007) , Liquidambar formosana Hance'in yaprağının S. aureus, S. epidermidis, S. flexneri, Salmonella Typhi ve P. aeruginosa'ya karşı antimikrobiyal aktiviteye sahip olduğunu , bakteriyostatik dairenin çapının 13 ila 25 milimetre arasında olduğunu bildirdi.

Pek çok bitki türünden elde edilen uçucu yağların antibakteriyel aktiviteleri kapsamlı bir şekilde araştırılmış olmasına rağmen, bu bitkinin antimikrobiyal mekanizması ayrıntılı olarak rapor edilmemiştir. Esansiyel yağların aktif antimikrobiyal bileşikleri doğaları gereği fenolikler ve terpenler olduğundan ( Jansen ve diğerleri , 1987 ; Saxena ve diğerleri , 1994 ), bunların etki biçimlerinin diğer fenolik bileşiklerinkine benzer olması makul görünmektedir. Flavonoidler ve fenolik bileşikler bitkilerde halihazırda rapor edilmiştir ( Chopra ve diğerleri , 1956 ). Bu bileşikler antibakteriyel ve antifungal aktivitelere sahiptir.

Bu çalışmada bitki yaprak ekstraktlarının tamamının Gram negatif bakterilere karşı oldukça etkili olduğu bulunmuştur. Bu çalışmanın sonuçları gösterilditablo 1. Varthemia iphionoides'in sulu ekstraktının yüksek oranda fenolik bileşik ve flavonoid içeriğine sahip olduğu başka bir yerde bildirilmiştir ( Al-Dabbas ve diğerleri , 2006 ). Bu, antibakteriyel aktivitesini açıklayabilir ve enfeksiyonların tedavisinde daha önceki kullanımlarını vurgulayabilir ( Jabour, 1983 ; Karim ve Quraan, 1986 ). Yaprakların fitokimyasal değerlendirmesi flavonoidler, tanenler, saponinler, fenol lektinler, triterpenler ve karotenoidlerin varlığını göstermiştir ( Geidam ve diğerleri , 2007 ). Yaprak ekstraktının biyolojik ve antimikrobiyal aktivitesi, büyük ölçüde flavonoidlere ve diğer iki kimyasal olan guajaverin ve psidiolik asit ( Berdy ) ile ilişkilendirilmiştir.et al. 1982 ; Jaiarj ve ark. , 1999 ). Etanol ve metanol ekstraktlarının, Salmonella Typhimurium RSKK 19 (10 mm)büyümesini önlemede eşit derecede etkili olduğu bulundutablo 1). Rahta ve ark. (2012) , Hemidesmus sp. ve Vetiveria sp. Salmonella Typhi'nin büyümesi üzerinde en yüksek antibakteriyel aktiviteyi sergiledi .

Bu çalışmanın sonuçları, test edilen bitki özlerinin Gram pozitif bakterilere karşı oldukça etkili olduğunu göstermektedir. Yaprakların etanol ekstraktlarının Staphylococcus aureus RSKK 2392'ye karşı etkili olduğu bulundu (tablo 1). Oskay ve ark. (2009) , en duyarlı organizmanın, metanol ve etanol ekstraktlarına duyarlı olan metisiline dirençli S. aureus (MRSA) olduğunu göstermiştir. Aliyu ve ark. (2008) , MRSA'ya karşı Vernonia blumeoides ve Phyllanthus amarus'un sulu ekstraktının sırasıyla 11 mm ve 13 mm olan maksimum inhibisyon bölgesini gözlemlediğini bildirdi. Bu sonuç bizim çalışmamızla benzerlik göstermektedir. Liquidambar orientalis Mill'in uçucu yağı . Hafızoğlu ve ark. (1996) ve Duru ve ark. (2002)GC-MS kullanarak. Birçok bileşen karakterize edildi, ancak başlıcaları terpinen-4-ol, a-terpinol, sabinen ve γ-terpinen idi.

DPPH serbest radikal yöntemi kullanılarak bitki ekstraktlarının taranmasının, antioksidan aktiviteye sahip olabileceklerin seçiminde etkili olduğu kanıtlanmıştır. Bu özler, antioksidanlar olarak bilinen flavonoidler gibi radikal temizleyiciler açısından zengin olabilir. Birçok şifalı bitkinin serbest radikal süpürücü ve antioksidan aktivitesinin kansere, doku inflamatuarına, kardiyovasküler hastalığa karşı terapötik etkilerinden sorumlu olduğu bildirilmiştir ( Cai ve diğerleri , 2004 ). Bu çalışmada, metanol ekstresi 40 mg/mL konsantrasyonda %86 serbest radikal inhibisyonu göstermiştir (Tablo 4). Liu ve ark. (2009) , L. formosana esansiyel yağının yüksek konsantrasyonunun güçlü bir antioksidan etkiye sahip olduğunu bildirmiştir. Diğer araştırmalar, bu metanol özü aynı zamanda yüksek fenolik içeriğe sahip olduğunda, guarana tohumu metanol özünün yüksek antibakteriyel aktiviteye sahip olduğunu bulmuştur ( Majhenic ve diğerleri , 2007 ).

L. orientalis'in metanolik ekstraktlarının Gram pozitif ve negatif bakteri suşlarına karşı oldukça etkili olduğu ve doğal antimikrobiyal ajan kaynağı olarak kullanılabileceği sonucuna varılmıştır. Metanol ekstresi, gıda patojenlerine karşı maksimum inhibisyon göstermiştir. Ayrıca doğal antimikrobiyallerin geliştirilmesi sentetik ilaçların olumsuz etkilerinin azaltılmasına yardımcı olacaktır. Sonuçlarımız, bu bitkinin geleneksel tıpta kullanımını desteklemekte ve bazı bitki ekstraktlarının, yeni ilaç araştırmalarında antibakteriyel maddeler olarak kullanılabilecek iyi antibakteriyel özelliklere sahip bileşiklere sahip olduğunu öne sürmektedir. L. orientalis yaprak özleri , in vitro değişen derecelerde antioksidan aktivite sergiledi.. Metanol, antioksidanların en etkili ekstraksiyon çözücüsü olduğunu kanıtladı. Ekstraktlar, özellikle L. orientalis yaprağının metanolik ekstraktı, insan vücudu için oksidatif hasara karşı bir antioksidan koruma sistemi olarak faydalı olmalıdır. Bununla birlikte, bu seçilmiş şifalı bitkilerdeki biyoaktif bileşikleri keşfetmek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır. Kuşkusuz L. orientalis'in antimikrobiyal ve antioksidan etkisi daha fazla araştırılmalıdır. Aktif bileşiklerin fraksiyonlanması ve karakterizasyonunun araştırılması için ileri çalışmalar yapılmalıdır.

Git: Referanslar

1. Al-Dabbas MM, Suganuma T, Kitahara K, Hou DX, Fujii M. Varthemia iphionoides'in sitotoksik, antioksidan ve antibakteriyel aktiviteleri . Boiss, J Ethnopharmacol'ü özütler. 2006; 108 :287–293. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
2. Aliyu AB, Musa AM, Abdullahi MS, Oyewale AO, Gwarzo US. Kuzey Nijerya Geleneksel Tıbbında Kullanılan Bitki Ekstraktlarının Metisiline Dirençli Staphylococcus Aureus'a (MRSA) Karşı Etkinliği Nig Journ Pharm Sci. 2008; 7 (1):1–8. [ Google Akademik ]
3. Bauer AW, Kirby WM, Sherris JC, Turck M. Standart tek disk yöntemiyle antibiyotik duyarlılık testi. Ben J Clin Yolu. 1966; 45 :493–496. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
4. Bayramoğlu EE. Storax ile ıslatma-Islatma şamandırasında bakterisit olarak sigla ağacı ( Liquidambar orientalis Mill. var. orientalis ) storax kullanma imkanı. Jalca. 2010; 105 :62–67. [ Google Akademik ]
5. Baytop T. Türkiye'de Şifalı Bitkilerle Tedavi (Geçmişten Günümüze) Cilt. 1. İstanbul: İstanbul Üniversitesi Yayını; 1984. s. 305. [ Google Akademik ]
6. Berdy J, Aszlos A, Bostian M, Mcnitt KL. Antibiyotik bileşiklerin el kitabı. New York: CRC Basın; 1982. s. 410. [ Google Akademik ]
7. Berkel A, Huş S. Sığla ağacı ormanları ve Sığla yağı üzerine araştırmalar. Ankara Tarım Enstitüsü J. 1944; 1 (5):9–28. [ Google Akademik ]
8. Brand WW, Cuvelier ME, Berset C. Antioksidan aktiviteyi değerlendirmek için bir serbest radikal yönteminin kullanılması. Gıda Bilimi Teknolojisi 1995; 28 :25–30. [ Google Akademik ]
9. Cai Y, Luo Q, Sun M, Corke H. Antikanserle ilişkili 112 geleneksel Çin şifalı bitkisinin antioksidan aktivitesi ve fenolik bileşikleri. Hayat Bilimi 2004; 74 :2157–2184. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
10. Chitme HR, Chandra R, Kaushik S. Calotropis gigantea R. Br'nin anti-ishal aktivitesi üzerine çalışmalar. deney hayvanlarında. J Ecz Ecz. Sci. 2004; 7 (1):70–75. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
11. Chopra RN, Nayar SL, Chopra LC. Hint şifalı bitkiler sözlüğü. Yeni Delhi: Bilimsel ve Endüstriyel Araştırma Konseyi; 1956–92. P. 329. 1956–92. [ Google Akademik ]
12. CLSI (Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü), yazar Metotlar Seyreltme için Aerobik Olarak Büyüyen Bakteriler için Antimikrobiyal Duyarlılık Testi. Wayne, Philadelphia: Ulusal Klinik Laboratuvar Standartları Komitesi; 2003. Onaylı Standart M7-A 6. baskı. [ Google Akademik ]
13. CLSI (Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü), Antimikrobiyal Duyarlılık Testi için Performans Standartlarının yazarı . Wayne, Philadelphia: Ulusal Klinik Laboratuvar Standartları Komitesi; 2006. 16. Bilgi Eki M100-S16. [ Google Akademik ]
14. Davıs PH. Türkiye ve Doğu Ege Adaları Florası. cilt 5. Edinburg: Edinburgh University Press; 1975. sayfa 228–251. [ Google Akademik ]
15. Duru ME, Çakır A, Harmandar M. Liquidambar orientalis Mill. Yapraklarından İzole Edilen Uçucu Yağların Bileşimi . var. orientalis ve L.orientalis var. Türkiye'den integriloba . Lezzet Kokusu J. 2002; 17 (2):95–98. [ Google Akademik ]
16. Fernandez X. Türkiye ve Honduras Styrax'tan elde edilen uçucu yağların kimyasal bileşimi. Lezzet Kokusu J. 2005; 20 :70–73. [ Google Akademik ]
17. Geidam YA, Usman H, Abubaker MB, Ibrahim B, Carnat AP. Psidium guajava'nın sulu yaprak özlerinin günlük civcivlerin novalından izole edilen bakteriler üzerindeki etkileri. Res J Microbiol. 2007; 2 :960–965. [ Google Akademik ]
18. Grabley S, Thiericke R. Doğadan ilaç keşfi. cilt 3. Berlin: Springer; 1999. Doğal ürünlerin ilaç keşfine etkisi; s. 51–55. [ Google Akademik ]
19. Hafızoğlu H, Reunanen M, İstek A. Levant storax'ın kimyasal bileşimi. Holzforschung. 1996; 50 :116–117. [ Google Akademik ]
20. Hafızoğlu H. Liquidambar orientalis Mill. gaz kromatografisi ve kütle spektrometresi ile. Holzforschung. 1982; 36 :311–313. [ Google Akademik ]
21. Tepe AF. Ekonomik Botanik: Yararlı Bitkiler ve Ürünler Ders Kitabı. cilt 2. New York: McGraw Tepesi; 1952. s. 560. [ Google Akademik ]
22. İbn Sina tıbbında Jabour J. Al-kanoon. Beyrut: Al-Maaref Kütüphanesi; 1983.s. 285. [ Google Akademik ]
23. Jaiarj P, Khoohaswan P, Wongkrajang Y, Peungvicha P, Suriyawong P, Saraya ML, Ruangsomboon O. Psidium guajava Linn'in öksürük önleyici ve antimikrobiyal aktiviteleri . yaprak özü. J Etnofarmakol. 1999; 67 :203–212. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
24. Janssen AM, Scheffer JJC, Svendsen AB. Uçucu yağların antimikrobiyal aktivitesi: 1976–1986 tarihli bir literatür taraması. Test yöntemlerinin yönleri. Bitki Med. 1987; 53 :395–398. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
25. Karim FM, Quraan SA. Tıbbi bitki Ürdün. Irbid-Ürdün: Yarmuk Üniversitesi; 1986. s. 61. [ Google Akademik ]
26. Kim J, Seo SM. Çam ağacı nematoduna ( Bursaphelenchus xylophilus ) karşı kişniş ( Coriandrum sativum ), doğu sığla ( Liquidambar orientalis ) ve kediotu ( Valeriana wallichii ) uçucu yağlarından elde edilen bitki esansiyel yağlarının ve bileşenlerinin nematisit aktivitesi J Agric Food Chem. 2008; 56 (16):7316–7320. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
27. Lee YS, Kim J, Lee SG, Oh E, Shin SC, Park K. Bitki esansiyel yağlarının ve Doğuya özgü sığla ( Liquidambar orientalis ) bileşenlerinin üç fitopatojenik mantarın büyümesi ve morfogenezi üzerindeki etkileri. Pestik Biochem Physiol. 2009; 93 :138–143. [ Google Akademik ]
28. Liu Y, Liu Y, Li P. Liquidambar formosana Hance Yapraklarından Elde Edilen Uçucu Yağın Antimikrobiyal Aktiviteleri ve Antioksidan Aktivitesi Üzerine Çalışma . Gıda Bilimi 2009:11. [ Google Akademik ]
29. Majhenic L, Skerget M, Knez Z. Guarana tohumu ekstraktının antioksidan ve antimikrobiyal aktivitesi. Gıda Kimyası 2007; 104 :1258–1268. [ Google Akademik ]
30. Nascimento GGF, Lacatelli J, Freitas PC, Silva GL. Bitki özlerinin ve fitokimyasalların antibiyotiğe dirençli bakteriler üzerindeki antibakteriyel aktivitesi. Braz J Mikrobiol. 2000; 31 :886–891. [ Google Akademik ]
31. Oskay M, Oskay D, Kalyoncu F. Bazı Bitki Ekstraktlarının Çoklu İlaca Dirençli İnsan Patojenlerine Karşı Etkinliği. İran J Pharm Res. 2009; 8 (4):293–300. [ Google Akademik ]
32. Oskay M, Sarı D. Bazı Türk şifalı bitkilerinin antimikrobiyal taraması. Eczacı Biol. 2007; 45 (3):176–181. [ Google Akademik ]
33. Palombo EA. Ağız Bakterilerine Karşı Etkinliği Olan Geleneksel Şifalı Bitki Özleri ve Doğal Ürünler: Ağız Hastalıklarının Önlenmesinde ve Tedavisinde Potansiyel Uygulama. Kanıta Dayalı Tamamlayıcı Alternatif Med. 2011 doi: 10.1093/ecam/nep067. [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
34. Ratha M, Subha K, Senthilkumar G, Panneerselvam A. Hemidesmus indicus (L.) ve Vetiveria zizanoides (L.) Eur J Exp Biol. 2012; 2 (2):363–368. [ Google Akademik ]
35. Sağdıç O, Özkan G, Özcan M, Özçelik S. Sığla Ağacı ( Liquidambar orientalis Mill. var. orientalis ) Storax'ın Çeşitli Bakterilere Karşı İnhibitör Etkileri Üzerine Bir Araştırma . Fitoterapi Arş. 2005; 19 :549–551. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
36. Saxena G, McCutcheon AR, Çiftçi S, Towers GHN. Hancock REW: Rhus glabra'nın antimikrobiyal bileşenleri . J Ethnopharm. 1994; 42 :95–100. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
37. Srivastava J, Lambert J, Vietmeyer N. Geliştirmede genişleyen bir rol. cilt 320. Washington: 1996. Şifalı bitkiler. Dünya Bankası Teknik Belgesi. [ Google Akademik ]
38. Tyler VE, Brady LR, Robbens JE. Farmakognozi. cilt 8. Philadelphia: Lae & Febiger Yayınevi; 1981.s. 160. [ Google Akademik ]
39. You-tian Zhong, Xiao-li Wang, Lian-lan MA. Liquidambar formosana Hance's Leaf'in Antimikrobiyal Aktivitesi Üzerine Araştırmalar . Li Shizhen Med Mater Med Arş. 2007:2007–3007. [ Google Akademik ]

***maturidi*** · 03 February 2023, 17:08

Liquidambar orientalis Mill. sakız özü, prostat kanseri hücrelerinde PI3K/Akt/mTOR sinyal yolu aracılığıyla otofajiye neden olur

Harika Atmaca¹, Cisil Çamlı Pulat², Mustafa Çittan³
üyelikler yıkılmak üyelikler

¹Moleküler Biyoloji Anabilim Dalı, Biyoloji Bölümü, Fen-Edebiyat Fakültesi, Manisa Celal Bayar Üniversitesi, Muradiye, Türkiye.
²Uygulamalı Bilimler Araştırma Merkezi, Manisa Celal Bayar Üniversitesi, Muradiye, Türkiye.
³Analitik Kimya Anabilim Dalı, Kimya Bölümü, Fen-Edebiyat Fakültesi, Manisa Celal Bayar Üniversitesi, Muradiye, Türkiye.

PMID: 32909456
DOI: 10.1080/09603123.2020.1818187

Soyut

Liquidambar orientalisMill (LOM), Türkiye'nin güneybatı kıyı bölgesinde yerel yayılış gösteren endemik bir türdür. Styrax liquidus sakızı (SLG), LOM'un gövdesinin yaralanmasına tepki olarak dışarı çıkan sakız benzeri bir reçinedir. Çalışmanın amacı, insan prostat kanseri hücrelerinde etanolik SLG ekstraktının sitotoksik etkilerini ve moleküler mekanizmalarını araştırmaktı. Uçucu bileşik bileşimini belirlemek için GC-MS analizi yapıldı. Sitotoksisite, XTT analizi ile belirlendi. Apoptoz ve nekroz, ELISA testi ile değerlendirildi. Otofajik hücre ölümü, monodansylcadaverine (MDC) boyama yoluyla ve LC3I ve LC3II seviyeleri ölçülerek saptandı. p-PI3K, p-Akt ve p-mTOR'un protein seviyeleri western blot analizi ile değerlendirildi. Bu çalışmada,

***maturidi*** · 03 February 2023, 17:09

Liquidambar orientalis Mill.'in Fitokimyasal Profili ve Biyolojik Aktivitesi . var. İnsan Kolorektal Kanserinde NF-κB ve Apoptotik Yolaklar Yoluyla orientalis

Sümeyra Çetinkaya¹, İlknur Çınar Ayan², İpek Suntar³, Hatice Gül Dursun²
üyelikler yıkılmak üyelikler

¹Tarım ve Orman Bakanlığı Biyoteknoloji Araştırma Merkezi, Yenimahalle, Ankara, Türkiye.
²Necmettin Erbakan Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Biyoloji Anabilim Dalı, Meram, Konya, Türkiye.
³Gazi Üniversitesi Eczacılık Fakültesi Farmakognozi Anabilim Dalı, Etiler, Ankara, Türkiye.

PMID: 34291706
DOI: 10.1080/01635581.2021.1952455

Soyut

Liquidambar orientalis Mill. var. orientalis (Hammamelidaceae), yaygın olarak oryantal sığla olarak bilinen Türkiye'ye özgü, ülser, gastrit ve deri hastalıkları gibi yaraların tedavisinde kullanılan tıbbi bir bitkidir. Ancak bu bitkinin antikanser özellikleri ile ilgili sınırlı sayıda çalışma bulunmaktadır. Bu çalışmanın amacı, L. orientalis'in kolorektal kanser hücre dizilerindeki hücresel ve moleküler mekanizmalarını araştırmak ve aktif terapötik bileşenlerini ortaya çıkarmaktır. Biyolojik aktiviteleri belirlemek için antioksidan, anti-proliferatif, anti-invaziv ve apoptotik etkiler araştırıldı. Fitokimyasal profil ve kantitasyon deneyleri, HPLC-ESI-Q-TOF-MS kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Sonuçlar, yaprak metanol ekstraktının (LM)L. orientalis , test edilen diğer ekstraktlarla karşılaştırıldığında HCT-116 (IC 50 27,80 μg/mL) ve HT-29 (IC 50 43,13 μg/mL) hücre hatlarında _en yüksek _sitotoksik aktiviteye sahiptir . Kimyasal bileşim ile ilgili olarak, quercetin 3-glucoside (61.005 ± 1.527 mg/g ekstrakt), klorojenik asit (31.627 ± 0.970 mg/g ekstrakt), pirogallol (9.950 ± 0.001 mg/g ekstrakt), epigallocatechin gallate (9.671 ± 0.004 mg/g) özü), apigenin 7-O-glucoside (2,687 ± 0,027 mg/g özü), gallik asit (2,137 ± 0,012 mg/g özü), genistin (1,270 ± 0,027 mg/g özü), luteolin (0,055 ± 0,0005 mg/g) özü) ve kaempferol (0.506 ± 0.007 mg/g özü) başlıca fitokimyasal bileşikler olarak tanımlandı. Sonuçlarımız, LM ekstraktının In Vitro sitotoksik ve apoptotik özellikler sergilediğini gösterdi.

***maturidi*** · 03 February 2023, 17:10

Siğla ağacı (Liquidambar orientalis Mill. var. orientalis) storax'ın çeşitli bakterilere karşı inhibitör etkileri üzerine bir araştırma

Osman Sağdiç¹, Gülcan Özkan Musa Özcan , Sami Özçelik
üyelikler yıkılmak üyelik

¹Gıda Mühendisliği Bölümü, Mühendislik Fakültesi, Erciyes Üniversitesi, 38039 Kayseri, Türkiye. osagdic@erciyes.edu.tr

PMID: 16114094
DOI: 10.1002/ptr.1654

Soyut

Bu çalışmada Siğla (Liquidambar orientalis Mill.) storax (styrax)'ın Aeromonas hydrophila, Bacillus amyloliquefaciens, B. brevis, B. cereus, B. megaterium, B. subtilis, Corynebacterium xerosis, Enterobacter aerogenes, Enterococcus'a karşı antibakteriyel etkinliği araştırılmıştır. faecalis, Escherichia coli, E. coli O157:H7, Klebsiella pneumoniae, Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus, Mycobacterium smegmatis, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, P. fluorescens, Staphylococcus aureus ve Yersinia enterocolitica. Storax mutlak etanol içinde çözüldü ve %10.0, %1.0, %0.4, %0.2 ve %0.1 konsantrasyonlarında test edildi. Kontrol için saf etanol kullanıldı. Siğla storaksının antibakteriyel aktivitesi agar difüzyon yöntemi kullanılarak belirlendi. A. hydrophila, B. amyloliquefaciens, B. megaterium'un büyümeleri, E. coli, E. coli O157:H7, L. monocytogenes ve Y. enterocolitica Siğla storax konsantrasyonlarının hiçbiri tarafından inhibe edilmemiştir. Sonuçlar, Siğla storaksının %10.0 konsantrasyonlarda birçok bakteriye karşı, %1.0, %0.4 ve %0.2 konsantrasyonlarda bazı bakterilere karşı antibakteriyel aktiviteye sahip olduğunu göstermiştir.

Telif hakkı (c) 2005 John Wiley & Sons, Ltd.

***maturidi*** · 03 February 2023, 17:11

Sıçanlarda karbon tetraklorür kaynaklı hepatotoksisite ve oksidatif strese karşı sığla (Liquidambar orientalis) yağının koruyucu etkisi ve antioksidan rolü

Hüseyin Süzek¹, İsmail Çelik², Abdulahad Doğan³, Serkan Yıldırım⁴
üyelikler yıkılmak üyelikler

¹a Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi Sağlık Yüksek Okulu Hemşirelik Bölümü , Muğla , Türkiye .
²b Yüzüncü Yıl Üniversitesi Fen Fakültesi Moleküler Biyoloji ve Genetik Bölümü , Van , Türkiye .
³c Biyoloji Bölümü, Fen Fakültesi, Yüzüncü Yıl Üniversitesi, Van, Türkiye, ve.
⁴d Yüzüncü Yıl Üniversitesi Veteriner Fakültesi Patoloji Anabilim Dalı , Van , Türkiye.

PMID: 26079853
DOI: 10.3109/13880209.2015.1045086

Soyut

Bağlam: Liquidambar orientalis Mill (Hamamelidaceae) ağacından elde edilen sığla yağı (SO), Türk halk hekimliğinde yüzyıllardır antiülserojenik olarak kullanılmaktadır. Bazı çalışmalar, SO'nun antibakteriyel ve antioksidan aktivitelerini bildirmiştir; ancak hepatik ve oksidatif stres komplikasyonları üzerindeki etkisi henüz keşfedilmemiştir.

Amaç: Bu çalışma, karbon tetraklorür (CCl4) toksisitesine karşı SO'nun hepatoprotektif etkisini ve antioksidan rolünü araştırmaktadır.

Gereç ve yöntemler: Deney, kontrol, CCl4, SO ve CCl4+SO tedavi gruplarını içermektedir. Kontrol ve SO grubu sıçanlar CCl4 içermeyen bir diyetle beslendi. CCl4 ve CCl4 + SO tedavi gruplarına haftada iki kez intraperitonal olarak zeytinyağında seyreltilmiş (1:1 dilüsyon) 0.5 mL/kg CCl4 verildi. CCl4 + SO grubu ayrıca 50 gün boyunca 1000 mg/kg SO katkılı yem aldı. Hepatik hasar serum biyobelirteçleri (HDSB'ler) düzeylerinin, antioksidan savunma sistemi bileşenlerinin (ADSC'ler) ve malondialdehit (MDA) içeriklerinin belirlenmesi için kan ve doku örnekleri kullanıldı. Ek olarak, karaciğer histopatolojik değişiklikler açısından değerlendirildi.

Bulgular: Sonuçlara göre, CCl4 grubunun HDSB seviyeleri kontrole göre anlamlı olarak (p < 0.05) artarken, CCl4 + SO grubunun HDSB seviyeleri CCl4 grubuna göre belirgin düşüşler (p < 0.05) ile sonuçlandı. grup. Ek olarak, sonuçlar SO2 takviyeli diyetin CCl4 kaynaklı MDA ve ADS'yi kontrole doğru geri getirdiğini gösterdi. SO'nun hepatokorunması, CCl4 + SO grubundaki neredeyse normal histolojik bulgular ile CCl4 grubundaki dejeneratif değişikliklere karşı kanıtlanmıştır.

Tartışma ve sonuç: SO'nun hepatoprotektif etkiye ve CCl4 toksisitesine karşı antioksidan kapasiteye sahip olduğu sonucuna varıldı.

***maturidi*** · 03 February 2023, 17:13

Türk sığla balsamının (Styrax liquidus) uçucu ve anti-ülserojenik etkisinin karakterizasyonu

İlhan Gürbüz¹, Erdem Yeşilada , Betül Demirci Ekrem Sezik , Fatih Demirci , Kemal Başer
üyelikler yıkılmak üyelik

¹Eczacılık Fakültesi, Farmakognozi Anabilim Dalı, Gazi Üniversitesi, 06300 Ankara, Türkiye.

PMID: 23588094
DOI: 10.1016/j.jep.2013.03.071

Soyut

Etnofarmakolojik önemi: Sığla, Styrax liquidus (Türk sığlası), Altingiaceae (Hamamelidaceae) familyasına ait Liquidambar orientalis Miller ağacının yaralı kabuklarından elde edilen reçinemsi bir eksüdadır. Bitki materyali Türk halk hekimliğinde yüzyıllardan beri peptik ülser semptomlarının tedavisinde kullanılmaktadır. Talep edilen aktiviteyi değerlendirmek için, Styrax liquidus'un anti-ülserojenik etkisini in vivo bir anti-ülserojenik aktivite modeli kullanarak ve balsamın kimyasal bileşimini belirlemek için inceledik.

Gereç ve Yöntemler: Sıçanlarda etanolün neden olduğu peptik ülser modeline karşı, kloroform ve n-butanol ile art arda çözücü ekstraksiyonları ile elde edilen "Styrax liquidus" balsamının kendisinin ve fraksiyonlarının anti-ülserojenik etkileri araştırıldı. Kloroform ekstresi, istatistiksel olarak anlamlı bir gastroprotektif etki göstermiştir. Ayrıca balsam ve alt ekstraktlardan mikrodistilasyon tekniği ile elde edilen uçucuların kimyasal karakterizasyonları sırasıyla gaz kromatografisi (GC) ve gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi (GC-MS) ile analiz edilmiştir.

Bulgular: Farmakolojik deneyler, sıçanlara ağızdan verilen 150 ve 300 mg/kg dozlarında Styrax liquidus'un önemli mide koruması gösterdiğini açıkça göstermiştir. Reçinenin GC-MS analizinde, genel olarak, toplam yağın %99,8'ini temsil eden 31 bileşik tanımlandı ve burada ana bileşenler olarak stiren (%81,9), sinamil alkol (%6,9) ve a-pinen (%3,5) belirlendi.

Sonuç: Bu çalışma, Türkiye'de Styrax liquidus'un yerel etnobotanik kullanımının anti-ülserojenik aktivitesini doğrulamıştır.

***maturidi*** · 03 February 2023, 17:14

Farelerde oral ve intranazal uygulamadan sonra styrax'ın sedatif ve antikonvülsan aktiviteleri

Jianming Guo¹, Jin Ao Duan , Yuping Tang , yawen li
üyelikler yıkılmak üyelik

¹TCM formülleri Araştırması için Jiangsu Anahtar laboratuvarı, Nanjing Çin Tıbbı Üniversitesi, Nanjing, Çin Halk Cumhuriyeti.

PMID: 21428734
DOI: 10.3109/13880209.2011.561438

Soyut

İçerik: Styrax, Liquidambar orientalis Mill reçinesi. (NO Hamamelaceae), geleneksel Çin tıbbında resüsitasyona neden olan aromatik bitkilere aittir ve resüsitasyona neden olma ve vicdanlılığı geri kazanma işlevlerine sahiptir.

Amaç: Styrax'ın CNS üzerindeki olası sedatif ve antikonvülsan aktiviteleri araştırıldı. İki farklı yolun (oral ve intranazal uygulama) etki başlangıçları karşılaştırıldı.

Gereçler ve yöntemler: Styrax, sırasıyla lokomotor aktivite değerlendirmesi, pentobarbital kaynaklı uyku süresi ve pentilentetrazol (PTZ) kaynaklı konvülsiyon kullanılarak sedatif, hipnotik ve antikonvülsan etkiler açısından test edildi.

Sonuçlar: Oral uygulamadan sonra (25, 50, 100 mg/kg), styrax, sodyum pentobarbital kaynaklı uyku süresini uzattı. Oral uygulamaya kıyasla intranazal uygulama (12.5, 25, 50 mg/kg) daha düşük dozlarda uyku süresini uzatmıştır. Ayrıca, styrax (100 ve 200 mg/kg), oral uygulamadan 30 dakika sonra PTZ'nin neden olduğu nöbetlere ve ölüme karşı önemli bir koruma sağladı. Bunun tersine, intranazal uygulamadan 5 dakika sonra, styrax daha düşük dozlarda (25 ve 50 mg/kg) önemli ölçüde koruma sağlamıştır. Bu veriler, styrax'ın intragastrik yolla karşılaştırıldığında intranazal yolla daha hızlı etki başlangıcına (5'e karşı 30 dakika) ve daha iyi antikonvülsan etkinliğe (25, 50'ye karşı 100, 200 mg/kg) sahip olduğunu göstermektedir. Styrax, oral uygulamadan sonra 5-60 dakikalık aralıklarla 100 mg/kg'da spontan hareket hareketlerini azaltmıştır.

Tartışma ve sonuç: Styrax'ın sedatif ve antikonvülsan aktiviteleri vardır. Ayrıca, styrax, intragastrik yoldan daha düşük dozda intranazal uygulamadan sonra daha hızlı etki başlangıcına ve daha güçlü etkinliğe sahiptir. Bu sonuç, intranazal uygulamanın geleneksel uygulama yollarına umut verici bir alternatif olarak hareket edebileceğini göstermektedir.

***maturidi*** · 06 April 2023, 09:30

Sığla Balsam (Styrax Liquidus) Uçucu Yağının Biyolojik Aktiviteleri ve Kimyasal Bileşimi

10.14235/bas.galenos.2022.30602

Betül BÜYÜKKILIÇ ALTINBAŞAK
Ghassan ISSA
Belma ZENGİN KURT
Betül DEMİRCİ

Teslim Tarihi: 17.12.2021Kabul Tarihi: 05.03.2022Bezmialem İlim 2022;10(6):709-715

giriiş

Styrax liquidus, Liquidambar orientalis Mill'in yaralı gövdesinden elde edilen reçineli bir eksüdadır (sığla balzamı) . Altingiaceae familyasından. Tür sadece güneybatı Türkiye'de ve Rodos adasında bulunur. L. orientalis nesli tükenmekte olan bir relikt türdür (1,2). Tarihte Styrax liquidus'un esansiyel yağı Mısır Kraliçesi Kleopatra'nın “aşk iksiri” olarak bilinmiş ve parfüm yağı olarak kullanılmıştır. Hipokrat döneminden beri ilaç olarak kullanılmaktadır. Eski Mısırlılar bu yağı mumyalama sırasında kullandılar. Batık Fenike gemilerinden çıkarılan balzamla dolu amforalar, Styrax liquidus'un geçmişte Akdeniz ticaretinde önemli bir yer tuttuğunu göstermektedir (3).

Styrax liquidus, Türk halk hekimliğinde çeşitli rahatsızlıkların tedavisinde kullanılmıştır. Yaralarda, astımda, bronşitte, üst solunum yolu hastalıklarında, uyuz gibi deri hastalıklarında balgam söktürücü ve antifungal olarak kullanılır. Fümigasyon olarak toz ve pastil, pomat ve alçı şeklinde kullanılır (4-7). Styrax liquidus'un uçucu yağı, başta parfümeri olmak üzere ilaç ve kozmetik endüstrisinde kullanılmaktadır. Uçucu yağ, balzamın %0,5-1'ini oluşturur (8).

Literatür taramasında balzamın antibakteriyel, antioksidan ve antiülserojenik etkilerinin olduğu belirlenmiştir (9-11). Styrax liquidus esansiyel yağının antimikrobiyal aktiviteye sahip olmasının yanı sıra merkezi sinir sistemi üzerinde inhibitör olduğu bildirilmiştir (12,13).

Bu çalışma, Styrax liquidus esansiyel yağının antimikrobiyal, antioksidan, antikolinesteraz ve a-glukosidaz inhibitör aktivitelerini değerlendirmek ve kimyasal bileşimini araştırmak için yapılmıştır.
Yöntemler

Uçucu Yağların Ekstraksiyonu

Styrax liquidus Muğla Marmaris'te yöre halkından temin edilmiştir. Styrax liquidus'un uçucu yağı, Clevenger aparatında 3 saat hidrodistilasyonla elde edildi. Bu şekilde elde edilen uçucu yağ, analiz ve test edilene kadar +4 °C'de kapalı şişelerde saklandı.

Gaz Kromatografisi (GC) ve Gaz Kromatografisi-kütle Spektrometresi Analizi (GC/MS)

Uçucu yağın bileşimi, gaz kromatografisi (GC) ve GC/kütle spektrometresi (GC/MS) kullanılarak belirlendi.

GC analizi, 300 °C'lik bir FID dedektör sıcaklığında Agilent 6890N GC sistemi üzerinde gerçekleştirilmiştir. GC/MS ile aynı elüsyon sırasını elde etmek için, aynı çalışma koşulları uygulanarak aynı sütunun bir kopyası üzerinde eş zamanlı otomatik enjeksiyon gerçekleştirildi. Ayrılan bileşiklerin nispi yüzde miktarları, FID kromatogramlarından hesaplandı. Analiz sonuçları Tablo 1'de verilmiştir .

GC/MS analizi, taşıyıcı gaz olarak helyum (0.8 mL/dk) kullanılarak bir Innowax FSC kolonu (60 mx 0.25 mm, 0.25 um film kalınlığı) üzerinde bir Agilent 5975 GC/MSD sisteminde yapıldı. GC fırın sıcaklığı 60 °C'de 10 dakika tutuldu ve 220 °C'de 4 °C/dk'da programlandı ve 220 °C'de 10 dakika sabit tutuldu, ardından 1 °C/dk'da 240 °C'ye programlandı. Bölünme oranı 40:1'e ayarlandı ve enjektör sıcaklığı 250 °C'ye ayarlandı. Kütle spektrumları 70 eV'de kaydedildi. Kütle aralığı m/z 35 ila 450 idi.

Esansiyel yağ bileşenlerinin tanımlanması, bunların nispi alıkonma sürelerinin otantik numunelerinkilerle karşılaştırılmasıyla veya nispi alıkonma indekslerinin bir dizi n-alkanla karşılaştırılmasıyla gerçekleştirildi. Ticari (Wiley GC/MS Library, MassFinder Software 4.0) (14,15) ve şirket içi (Başer Library of Essential Oil Constituents) gerçek bileşikler ve bilinen yağların bileşenleri tarafından oluşturulmuş kütle spektral kitaplıkları kullanılmıştır.

Antimikrobiyal Faaliyetler

The essential oil was screened for their antimicrobial activities against Streptococcus pneumoniae ATCC 49619, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 29213, Staphylococcus epidermidis ATCC 49461, Acinetobacter lwoffii ATCC 19002, Acinetobacter baumannii ATCC 19606, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Pseudomonas aeuroginosa ATCC 27853, Disk difüzyon ve resazurin mikroplaka yöntemleri ile Escherichia coli ATCC 25922, Candida albicans ATCC 66027 ve Candida glabrata ATCC 2001 mikroorganizmaları.

Disk Difüzyon Testi

Çalışmamızda öncelikle Disk Difüzyon Testleri kullanılarak test edilmek üzere mikroorganizmalardan taze pasajlar alınmıştır. ^{Ertesi gün, McFarland 0.5 (10 8} mikroorganizma/mL) bulanıklık düzeyine sahip tuzlu sudaki standart suşlardan süspansiyonlar elde edildi . Mueller Hinton Agar plağına steril bir bez kullanılarak bu süspansiyonlardan alınan bir numune ekildi.

Sığla balsamının uçucu yağı sterilizasyon için ilk önce 0.22 µm filtreden geçirildi. Daha sonra hazırlayacağımız Whatman kağıdından elde edilen kağıt diskler plakaların üzerine sığla balzam esansiyel yağı ile emprenye edildi. Ayrıca duyarlılığı bilinen çeşitli antibiyotik diskleri de karşılaştırma için Petri kutularına yerleştirilmiştir. Bu işlem sırasında diskler arasında 22 mm boşluk ve Petri kabının kenarından 14 mm mesafe bırakarak oluşan bölgelerin üst üste gelmemesine özen gösterildi. İnhibisyon bölgeleri daha sonra ortamın 37 °C'de 18-24 saat inkübe edilmesiyle ölçüldü.

Resazurin Mikroplaka Testi (REMA)

Resazurin (7-hidroksi-3H-fenoksazin-3-on-10-oksit) mikroplaka yöntemi Sığla balsamının uçucu yağının Streptococcus pneumoniae'nın standart orijinlerine karşı in vitro antibakteriyel aktivitelerini ve minimum inhibitör konsantrasyonlarını (MİK) belirlemek için kullanıldı . ATCC 49619, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 29213, S. epidermidis ATCC 49461, Acinetobacter lwoffii ATCC 19002, Acinetobacter baumannii ATCC 19606 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 , Pseudomonas aeuroginosa ATCC 2785a3 Candida albicans ATCC 66027 ve C. glabrata ATCC 2001. Aktivite tayini iki tekerrürlü olarak planlandı. Standart ilaç olarak streptomisin ve flukonazol kullanıldı. Çalışılan maddelerin stok çözeltileri DMSO ile 1,024 µg/mL konsantrasyonda hazırlandı ve 0,22 µg membran filtreden geçirilerek sterilize edildi. Başlamak için, her kuyucuğa 100 uL Muller Hinton Broth ortamı doldurulmuştur. Hazırlanan çözeltilerin seri dilüsyonları, 96 oyuklu mikroplakaların ilk kuyusuna 1,000 ug/mL eklenerek yapıldı (MIC kimyasal aralığı 0,3-1,000 ug/mL). Standart ilaç streptomisin son konsantrasyonu 83 µg/mL ve diğer standart ilaç flukonazol 30 µg/mL olarak ayarlandı ve birinci kuyucuğa 50 µL eklenerek seri dilüsyonlar yapıldı. Plakanın bir sütununa negatif kontrol olarak sadece DMSO yerleştirildi, ve diğer kolonda pozitif kontrol olarak her ikisi de 50 µL olan sadece standart bakteri ve seri dilüsyonlar yapıldı. 1-2 günlük mikroorganizma kolonilerinden bir McFarland 0.5 bulanıklık süspansiyonu hazırlandı ve ardından 1:100 oranında seyreltildi. Bu nihai süspansiyonların 10 uL'si plaka kuyucuklarına ilave edildi. Plakalar parafilm ile kaplandı ve 37 °C'de 24 saat normal atmosferde inkübe edildi. İnkübasyon sonrası tüm kuyucuklara 10 µL 33.75 mg resazurin ve 5 mL distile suda çözülmüş %20 Tween 80 eklendi ve plaklar 2-4 saat inkübasyona bırakıldı ve sonuçlar görsel olarak değerlendirildi. . MİK değeri mordan pembeye renk değişimini engelleyen en düşük konsantrasyon değeri olarak belirlendi. 1-2 günlük mikroorganizma kolonilerinden 5 bulanıklık hazırlandı ve ardından 1:100 oranında seyreltildi. Bu nihai süspansiyonların 10 uL'si plaka kuyucuklarına ilave edildi. Plakalar parafilm ile kaplandı ve 37 °C'de 24 saat normal atmosferde inkübe edildi. İnkübasyon sonrası tüm kuyucuklara 10 µL 33.75 mg resazurin ve 5 mL distile suda çözülmüş %20 Tween 80 eklendi ve plaklar 2-4 saat inkübasyona bırakıldı ve sonuçlar görsel olarak değerlendirildi. . MİK değeri mordan pembeye renk değişimini engelleyen en düşük konsantrasyon değeri olarak belirlendi. 1-2 günlük mikroorganizma kolonilerinden 5 bulanıklık hazırlandı ve ardından 1:100 oranında seyreltildi. Bu nihai süspansiyonların 10 uL'si plaka kuyucuklarına ilave edildi. Plakalar parafilm ile kaplandı ve 37 °C'de 24 saat normal atmosferde inkübe edildi. İnkübasyon sonrası tüm kuyucuklara 10 µL 33.75 mg resazurin ve 5 mL distile suda çözülmüş %20 Tween 80 eklendi ve plaklar 2-4 saat inkübasyona bırakıldı ve sonuçlar görsel olarak değerlendirildi. . MİK değeri mordan pembeye renk değişimini engelleyen en düşük konsantrasyon değeri olarak belirlendi. Tüm kuyucuklara 10'ar uL 33.75 mg resazurin ve %20 Tween 80, 5 mL distile suda eritildi ve plaklar 2-4 saat inkübasyona bırakıldı ve sonuçlar görsel olarak değerlendirildi. MİK değeri mordan pembeye renk değişimini engelleyen en düşük konsantrasyon değeri olarak belirlendi. Tüm kuyucuklara 10'ar uL 33.75 mg resazurin ve %20 Tween 80, 5 mL distile suda eritildi ve plaklar 2-4 saat inkübasyona bırakıldı ve sonuçlar görsel olarak değerlendirildi. MİK değeri mordan pembeye renk değişimini engelleyen en düşük konsantrasyon değeri olarak belirlendi.

AChE ve BChE'ye Karşı İnhibe Edici Faaliyetler

Uçucu yağın antikolinesteraz aktivitesi, in vitro AChE ve BChE enzimleri inhibisyon deneyleri kullanılarak belirlendi . AChE ve BChE inhibisyon aktiviteleri, Ellman ve ark. (16). Galantamin referans bileşik olarak kullanılır. IC ₅₀bir absorbans ve/veya inhibisyon (%) eğrisi oluşturularak ve yedi farklı konsantrasyonun etkisi incelenerek belirlendi. Reaksiyonda substrat olarak asetiltiyokolin iyodür ve butiriltiokolin iyodür, reaktif olarak 5,5'-ditio-bis(2-nitrobenzoik) asit (DTNB) kullanıldı. Uçucu yağlar ve galantamin stok çözeltileri, 4.000 µg/mL konsantrasyonda metanol ile hazırlandı. 7.085 mM konsantrasyonda asetiltiyokolin iyodür ve 0.785 mM konsantrasyonda butiriltiyokolin iyodür hazırlandı. Yüz elli µL 100 mM fosfat tamponu (pH 8.0), 10 µL numune solüsyonu ve 20 µL AChE (2.476x10-4 U/µL) (veya 3.1813x10-4 U/µL BChE) solüsyonu karıştırıldı . ^{25 o'da} inkübe edildiC'de 15 dakika. 5 mM konsantrasyonda on uL DTNB solüsyonu eklendi. Reaksiyon, 10 uL asetiltiyokolin iyodür (veya butiriltiokolin iyodür) ilave edilerek başlatıldı. Bu yöntemde substratın DTNB ile enzimatik hidrolizi ile oluşan tiyo anyonunun varlığı sonucu oluşan sarı renk takip edilerek aktivite ölçülmüştür. Ayrıca kontrol solventi olarak metanol kullanıldı. Substratların hidrolizi, 412 nm'de (17) bir BioTek Power Wave XS kullanılarak izlendi. Tüm deneyler üç kopya halinde yapıldı ve inhibisyon aktivitesi şu şekilde hesaplandı;

İnhibisyon (%) = (Absorbans _Kontrolü - Absorbans _Örneği) /Absorbans _Kontrolü x100

ICso değerleri _, Graphpad Yazılımı kullanılarak hesaplandı.

α-Glukosidaz İnhibisyon Testi

Saccharomyces cerevisiae'den (Sigma, G5003) ticari olarak temin edilebilen a-glukosidaz, substrat olarak p-nitrofenil-a-D-glukopiranosid (pNGP, Sigma, N1377) kullanılarak hedef protein olarak seçildi. Uçucu yağ ve genistein, DMSO'da çözüldü ve enzim ve substrat, potasyum fosfat tamponunda (0.05 M, pH 6.8) çözüldü. α-glukosidaz (0,02 U, 20 μL), substrat (1,25 mM, 30 μL), esansiyel yağ solüsyonu (10 μL) ve potasyum fosfat tamponundan (140 μL) oluşan enzimatik reaksiyon karışımı 37 °C'de 30 dakika inkübe edildi. dakika. Daha sonra, p-nitrofenol oluşumu nedeniyle üretilen sarı rengin absorbansı, bir Synergy H1 (BioTek, ABD) 96 oyuklu mikroplaka okuyucu (18) kullanılarak 405 nm'de ölçülmüştür. Tüm deneyler üç kopya halinde yapıldı. a-glukosidaz inhibisyon aktivitesi şu şekilde hesaplandı;

İnhibisyon (%) = (Absorbans _Kontrolü - Absorbans _Örneği) /Absorbans _Kontrolü x100

ICso değerleri _, Graphpad Yazılımı kullanılarak hesaplandı.
Antioksidan Aktivite Testi

ABTS Katyon Radikal Atma Deneyi

Uçucu yağın ABTS katyonu radikal yakalama aktiviteleri 2,2'-azino-bis (3-etilbenzotiazolin-6-sülfonik asit) kullanılarak belirlenmiştir (19). 1.000 µg/mL esans yağı stok solüsyonu hazırlandı. Bu stok solüsyondan 2, 5, 10 ve 20 µL alınarak etanol ile hacimleri 40 µL'ye tamamlandı ve üzerlerine 160 µL 7 mM ABTS katyon radikal solüsyonu eklendi. Reaksiyon 6 dakika karanlıkta tutulduktan sonra 734 nm'de absorbans ölçüldü. ABTS katyonu radikal yakalama aktivitesi, uçucu yağ örneğinin absorbans değerlerinin kontrole karşı değerlendirilmesiyle hesaplandı. Yüzde inhibisyon aşağıdaki denklemden hesaplandı;

İnhibisyon (%) = (Absorbans _Kontrolü - Absorbans _Örneği) /Absorbans _Kontrolü x100

ICso değerleri _, Graphpad Yazılımı kullanılarak hesaplandı.

CUPRAC Testi

Uçucu yağda antioksidan bileşiklerin varlığında Cu(II)-Neokuproin (Nc) kompleksi renkli Cu(I)-Nc şelatına indirgenmiş ve bu şelatın absorbansı 450 nm'de ölçülmüştür. Bütillenmiş hidroksitoluen (BHT) standart olarak kullanıldı. Uçucu yağ ve BHT'ye 10, 25, 50, 100 µg/mL nihai konsantrasyonlarla CuCl2, neokuproin ve NH4OAc tamponu eklendi ve 1 saat sonra 450 nm'de absorbans ölçüldü ₍ 20 ) _.Uçucu yağ numunesinin absorbans değerleri standarda göre değerlendirildi. Çalışma üç tekerrürlü olarak gerçekleştirilmiştir.
Sonuçlar

Uçucu Yağların Bileşimi

Hidrodistilasyon yöntemi ile elde edilen uçucu yağın analizi GC/FD ve GC/MS sistemleri ile gerçekleştirilmiştir. Karşılaştırmalı analiz sonuçları Tablo 1'de verilmiştir .

Antimikrobiyal Faaliyetler

The essential oil was screened for its antimicrobial activities against Streptococcus pneumoniae ATCC 49619, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 29213, Staphylococcus epidermidis ATCC 49461, Acinetobacter lwoffii ATCC 19002, Acinetobacter baumannii ATCC 19606, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Pseudomonas aeuroginosa ATCC 27853, Escherichia coli ATCC 25922, Candida albicans ATCC 66027 ve Candida glabrata ATCC 2001disk difüzyon yöntemi ve resazurin mikroplaka yöntemleri ile mikroorganizmalar. Sonuçlarımıza göre; uçucu yağ, K. pneumoniae ve S. epidermidis'e karşı zayıf antimikrobiyal aktivite, ancak A. baumannii ve C. glabrata'ya karşı güçlü antimikrobiyal aktivite gösterdi ( Tablo 2 ).

AChE ve BChE İnhibisyonu

Uçucu yağ, kolinesteraz enzimlerini orta derecede inhibe etti. Standart madde olarak galantamin kullanılmıştır. Hesaplanan ICso _değerleriTablo 3'te verilmiştir .

α-Glukosidaz İnhibisyonu

Styrax liquidus esansiyel yağı, a-glukosidaza karşı güçlü inhibitör özelliklere sahip olan genistein ile karşılaştırıldığında düşük oranda a-glukosidaz inhibisyonu göstermiştir. Hesaplanan ICso _değerleriTablo 4'te verilmiştir .

Antioksidan Aktivite

Antioksidan etki CUPRAC ve ABTS yöntemleri ile incelenmiştir. Etkinlik sonuçları standart BHT ile karşılaştırılarak değerlendirildi. Uçucu yağın standarda göre çok düşük antioksidan etkiye sahip olduğu görüldü ( Tablo 5 ).

Tartışma
Styrax Liquidus'un halk hekimliğinde ve bilimsel araştırmalarda kullanılmasından dolayı çeşitli biyolojik etkilere sahip olduğu bilinmektedir. Sınırlı sayıda çalışma Styrax liquidus esansiyel yağının biyolojik etkilerini bildirmiştir. Uçucu yağın GC-GC/MS analizinde, toplam yağın %99.19'unu temsil eden 26 bileşik tanımlandı ve ana bileşenler olarak stiren (%92.59) ve a-pinen (%2.2) belirlendi (Tablo 1 ) .

Literatürde Styrax liquidus'un kimyasal içeriği ile ilgili farklı sonuçlara sahip daha önce yayınlanmış birkaç yayın vardır. GC-MS ile yapılan analiz, sinamil sinamat (%21,5), fenil propil sinamat (%7,5), sinnamik asit (%4,0), sinamil alkol (%2,0), stiren (%0,5) ve fenil propil alkol (%0,5) ile sonuçlandı. Ancak bu çalışmada içeriğin yaklaşık %60'ı analiz edilmiş ve farklı sonuçların bundan kaynaklandığı düşünülmüştür (21). Başka bir çalışmada uçucu yağın ana bileşenlerinin stiren (%89,5), a - pinen (%7,2) ve b-pinen (%1,1) olduğu bildirilmiştir (22). Bu sonuçlar bizim bulgularımıza çok yakındır. Farklı bir çalışmada uçucu yağın %99,4'ten fazlasını temsil eden 58 bileşenden, stiren (%70,4), a-pinen (%19,4) ve b-pinen (%4,3) ana bileşenler olarak belirlenmiştir (23).

Styrax liquidus'un faydaları özellikle yöre halkı tarafından yıllardır bilinmektedir. Cilt problemlerini, peptik ülserleri, parazit enfeksiyonlarını tedavi etmek için kullanılmıştır (4,7,24). Styrax'ın antibakteriyel, antiülserojenik, antioksidan ve sitotoksik etkileri araştırmacılar tarafından araştırılmıştır (10,25,26). Bu çalışmadaki amacımız sığla balzamının uçucu yağının antioksidan, antidiyabetik, antikolinesteraz ve antimikrobiyal etkilerinin potansiyelini ortaya çıkarmaktır.

Anti-a-glukosidaz bileşikleri, diyabet tedavisinde potansiyel kullanımlarından dolayı büyük ilgi görmüştür (27). Çalışmamız, Styrax liquidus esansiyel yağının antikolinesteraz ve a-glukosidaz aktiviteleri ile ilgili ilk rapordur. AChE ve BChE'ye karşı IC50 değerleri sırasıyla 36.5 ug _/ mL ve 69.5 ug/mL idi. Galantaminin enzim inhibisyon sonuçlarının IC50 değerleri sırasıyla AChE =0.55 ug/mL ve BChE =3.56 ug/mL _idi . Elde edilen uçucu yağın kolinesteraz enzimlerini orta düzeyde inhibe ettiği görülmüştür. CUPRAC ve ABTS yönteminde düşük oranda a-glukosidaz inhibisyonu (IC ₅₀ değeri 637.2 µg/mL, Genistein = IC _{50 değeri 12.279 µg/mL) ve benzer antioksidan etki gösterdi (A}_0.5değeri 637,2 µg/mL, BHT 3,275 µg/mL ve IC50 _değeri 632,2 µg/mL, BHT 1,242 µg/mL idi).

Önceki bir çalışma, agar difüzyon yöntemini kullanarak Styrax liquidus'un çeşitli bakteri suşlarına karşı antibakteriyel potansiyelini araştırmıştır. Balsamın farklı konsantrasyonları bazı bakteri suşları üzerinde etkilidir. En kapsamlı çalışmalardan birinde antibakteriyel aktivitesi incelenmiştir. %10 balsam konsantrasyonu Bacillus brevis, B. cereus, B. subtilis, Corynebacterium xerosis, Enterobacter aerogenes, Enterococcus faecalis, Klebsiella pneumoniae, Micrococcus luteus, Mycobacterium smegmatis, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonasfluoresan ve Staphylococcus aureus'a karşı etkili olmuştur . . %0.4 balsam konsantrasyonu E. aerogenes, P. vulgaris'e karşı etkili olmuştur . % 0.2 balsam konsantrasyonu karşı etkili olmuştur.E. aerogenes ve P. vulgaris . Ayrıca %0,1'lik konsantrasyonun herhangi bir antibakteriyel etki göstermediği bildirilmiştir (11). Çalışmamızda Styrax liquidus esansiyel yağı, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus epidermidis'e karşı zayıf antimikrobiyal aktivite , ancak Acinetobacter baumannii, Candida glabrata'ya karşı güçlü antimikrobiyal aktivite gösterdi ( Tablo 2 ).

Güçlü antimikrobiyal aktiviteleri nedeniyle bitki kaynaklı sekonder metabolitlerin çeşitli hastalıkların tedavisinde önemli olduğu bilinmektedir (28). Styrax liquidus ile kaplı cerrahi ipek sütürlerin yaygın oral patojenik mikroorganizmalara karşı antiadeziv etkinliğini araştıran bir çalışmada, en yüksek antiadezif etkinlik S. aureus'a karşı gözlenmiştir (29).

Styrax liquidus, L. orientalis'ten elde edilir . Bu tür, tarımsal faaliyetler, yangınlar, kirlilik, kirli sular, yoğun turizm yatırımları ve aşırı otlatma gibi tehditler nedeniyle tehlike altında kabul edilmektedir. Bu nedenle 2017 Avrupa Kırmızı Listesine (30) “Kritik Tehlike Altında” olarak kaydedilmiştir.

Farmasötik araştırmalarda doğal ürün arzında sürekliliğin sağlanması için tıbbi bitkilerin korunması ve yetiştirilmesi gerekmektedir.

Çalışma Sınırlamaları

Styrax liquidus uçucu yağının güçlü antimikrobiyal etkileri belirlendi. Ancak sitotoksik etkileri ile ilgili çalışmalar yapılamadığından antimikrobiyal ajan olarak kullanımının değerlendirilmesi sınırlı kalmıştır.
Çözüm

Tüm balzamlarda olduğu gibi Styrax liquidus'un içeriğinde reçine, uçucu yağ ve serbest sinnamik asit bulunur. Balsamın %30-40'ını ve uçucu yağın %20-25'ini “cytorezinol” içeren reçine oluşturur. Balsamın çeşitli hastalıklarda geleneksel tıbbi kullanımı ve tek başına uçucu yağın düşük biyolojik aktivitesi, balsamdaki bileşenlerin sinerjistik bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir. Bu çalışmada uçucu yağın en etkili biyolojik aktivitesi antimikrobiyal etki olarak bulunmuştur. Mevcut antimikrobiyal ilaçlara karşı zamanla direnç oluşması nedeniyle alternatif antimikrobiyal ajanların araştırılması önemlidir. Styrax liquidus esansiyel yağı, A. baumannii ve C. glabrata suşlarına karşı güçlü antimikrobiyal aktivitesi nedeniyle doğal bir antimikrobiyal ajan olarak kabul edilebilir .

etik

Etik Kurul Onayı: Çalışmamız etik kurul onayı gerektirmez.

Akran değerlendirmesi: Harici olarak akran tarafından gözden geçirilir.

Yazarlık Katkıları

Konsept: BBA, GI, BD, Tasarım: BBA, Veri Toplama veya İşleme: BBA, Analiz veya Yorumlama: BBA, GI, BZK, BD, Literatür Arama: BBA, Yazma: BBA, GI, BZK, BD

Çıkar Çatışması: Yazarlar tarafından herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmemiştir.

Finansal Destek: Yazarlar bu çalışma için herhangi bir finansal destek almadıklarını beyan etmişlerdir.

***maturidi*** · 08 April 2023, 12:33

Storax Korumalı Oksijen-Glikoz Yoksunluğu/Yeniden Oksijenasyon İn vitro NF-κB Aktivasyonunu Engelleyerek İndüklenen Primer Astrosit Hasarı

Meng Zhang , ^{1 ,}²Yan Ma , ³Lijuan Chai , ^{1 ,}⁴Haoping Mao , ^{1 ,}⁴Junhua Zhang , ^{1 ,}⁴ve Xiang Fan ^{1 ,}^{4 ,}^*
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
¹ Tianjin Eyaleti Modern Çin Tıbbı Anahtar Laboratuvarı, Tianjin Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Tianjin, Çin
² Çin Materia Medica Okulu, Tianjin Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Tianjin, Çin
Tianjin Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi ^{3. İkinci Bağlı Hastanesi, Tianjin, Çin}
⁴ Geleneksel Çin Tıbbı Enstitüsü, Tianjin Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Tianjin, Çin
Düzenleyen: Anna Rita Bilia, Università degli Studi di Firenze, İtalya
İnceleyen: Min-Yu Sun, Washington Üniversitesi, St. Louis, Amerika Birleşik Devletleri; Kevin Donald Broad, University College London, Birleşik Krallık
*Yazışma: Xiang Fan, moc.liamtoh@87_gnaixnaf
Bu makale Frontiers in Pharmacology dergisinin bir bölümü olan Neuropharmacology'ye gönderilmiştir.
Git: Soyut

İnme, dünyada ikinci önde gelen ölüm nedeni ve uzun süreli sakatlığın önde gelen nedenidir. Felçten sonraki saatler ve günlerde meydana gelen hasarı dizginlemek için bir dizi nöroprotektif strateji geliştirmeye yönelik karşılanmamış acil bir ihtiyaç vardır. Liquidambar orientalis'i yaralamaktan elde edilen doğal bir reçine olan StoraxMill, geleneksel Çin tıbbında yüzyıllardır akut felç tedavisinde kullanılmaktadır. Storax serebrovasküler hastalıklarda nöroprotektif etkiler göstermiştir. Bununla birlikte, iskemi/reperfüzyonla zarar görmüş astrositlerde storaks tarafından aktive edilen nöroprotektif mekanizmalar açıklanamamıştır. Bu çalışmada, storax'ın OGD/R kaynaklı astrosit hasarı ve potansiyel mekanizmalar üzerindeki etkilerini araştırmak için oksijen-glukoz yoksunluğu/reoksijenasyon (OGD/R) kaynaklı astrosit yaralanma modeli oluşturduk. Deneysel sonuçlar, storax'ın enflamatuar sitokinlerin ekspresyonunu hafiflettiğini ve OGD/R tarafından yaralanan primer kortikal astrositleri koruduğunu gösterdi. Ayrıca, storax, yaralı astrositlerde OGD/R tarafından NF-κB aktivasyonunu inhibe edebilir ve NF-κB'nin Bay-11-7082 ile inhibisyonu, storax'ın nöroprotektif etkilerini gizledi. Sonuç olarak,

Anahtar Kelimeler: storaks, astrosit, iskemi/reperfüzyon, NF-κB, iskemik inme
Git: giriiş

İnme, dünyada ikinci önde gelen ölüm nedeni ve uzun süreli sakatlığın önde gelen nedenidir. İnme ilaçlı iskemi/reperfüzyon hasarının patogenezi, anormal ve kademeli olayların karmaşık bir etkileşimidir: eksitotoksisite, peri-infarkt depolarizasyon, inflamasyon, oksidatif stres ve apoptoz, iskemi/reperfüzyon kaynaklı hasarın ana mekanizmaları olarak yer alır (Lo et diğerleri, 2003 ; Moskowitz ve diğerleri, 2010). Son on yılda, inme terapötiklerinin araştırılması ve geliştirilmesine çok büyük miktarda para harcanmasına ve inme sonrası yaralanma ve iyileşme mekanizmalarını anlama açısından bilgimiz büyük ölçüde zenginleşmesine rağmen, temel araştırma tezgahları arasında kalan bir öteleme engeli vardır. ve pratik klinik kullanım. İntravenöz rekombinant doku plazminojen aktivatörü (tPA) trombolitik tedavisi, akut iskemik felç için hâlâ tek FDA onaylı acil tedavi yöntemidir ( Hacke ve ark., 2008 ). Bununla birlikte, düşük reperfüzyon oranı, yüksek intraserebral kanama riski ve kısa tedavi süresi penceresi, tPA'nın klinik uygulamasındaki başlıca sınırlamaları oluşturur ( Kaur ve diğerleri, 2004 ; Yepes ve diğerleri, 2009).). İnme tedavisi için farklı türde bilinen ilaçlar (antiplatelet ilaçlar, antikoagülanlar, serbest radikal temizleyiciler ve nöroprotektif ajanlar gibi) pazarlansa da, bu ilaçların yan etkileri ve bilinmeyen etkileşim mekanizmaları klinikte hala büyük bir sorundur (Sacco ve ark . , 2007 ; Ginsberg, 2008 ). Nöroprotektif tıbbın geliştirilmesinin, özellikle inme sonrası akut dönemdeki tedavi için klinik ve son derece önemli olduğuna şüphe yok.

Bu arada, geleneksel Çin tıbbı klinik uygulama açısından zengindir ve inme için yeni tedavilerin geliştirilmesini kolaylaştırma potansiyeline sahip olan yüzyıllardır etkili olduğu kanıtlanmıştır. Şu anda Çin Ulusal İlaç İdaresi tarafından inme tedavisi ve önlenmesi için Çin'de klinik olarak kullanılan 100'den fazla geleneksel Çin patentli ilaç bulunmaktadır (Wu ve ark., 2007 ). çeşitli geleneksel Çin ilaçları ve storax'ın bu reçetedeki herhangi bir fizyolojik etkide önemli rol oynadığı düşünülmektedir. Liquidambar orientalis'in yaralanmasının bir sonucu olarak üretilen balsam (storaks)Mill, geleneksel Çin tıbbında yüzyıllardır akut felç tedavisinde kullanılmaktadır. Gaz kromatografisi ve kütle spektrometrisi analizi kullanılarak, storax'ın ana bileşenlerinin serbest sinnamik asit, styracin (cinnamil sinamat), fenilpropil sinnamat, triterpenik asitlerden (oleanolik ve 3-epioleanolik asitler) oluşan bir reçine (storesin) ve bunların sinamik asit olduğu bulunmuştur. esterler ve uçucu bir yağ ( Duru ve diğerleri, 2002 ; Fernandez ve diğerleri, 2004 ; Kim ve diğerleri, 2008 ; Lee ve diğerleri, 2009 ).

Önceki çalışmalar, storax'ın sıçanlarda akut fokal serebral iskemide beyin hasarını azaltabileceğini ve pıhtılaşma fonksiyonunu düzenleyebileceğini göstermiştir. Storax, enfarktüs hacimlerini, hemisferik şişme oranlarını ve nörolojik kusurları önemli ölçüde azalttı; fibrinojen içeriğini azalttı; protrombin süresini uzattı; ve kısmi tromboplastin zamanını ve fokal iskemik felçli sıçanlarda serumdaki nitrik oksit içeriğini aktive etti ( Ni ve diğerleri, 2011a ; Zhou ve diğerleri, 2015 ). Storax, inme sonrası iskemi-reperfüzyon hasarında astrositler ve kan beyin bariyeri üzerinde koruyucu etkiler gösterir ( Ni ve ark., 2011b).). Ayrıca storax, oksijen-glukoz yoksunluğu/reoksijenasyon (OGD/R) tarafından indüklenen beyin mikrovasküler endotel hücre hasarı üzerinde koruyucu etkiler göstermiştir ve mekanizma, enflamatuar sitokinlerin ekspresyonunu azaltmakla ilişkili olabilir (Zhao ve diğerleri, 2016 ) .

Storax, serebrovasküler hastalıklarda önemli nöroprotektif etkiler göstermiştir. Bununla birlikte, storax'ın iskemi/reperfüzyonla zarar görmüş astrositler üzerindeki nöroprotektif mekanizmaları açıklanmamıştır. Bu çalışmada, storax'ın OGD/R kaynaklı astrosit hasarı üzerindeki koruyucu etkilerini ve potansiyel mekanizmalarını araştırmak için OGD/R kaynaklı astrosit yaralanma modelini kuracağız.

Git: Malzemeler ve yöntemler

Malzemeler

Rafine storax yağı, Share Ltd Darentang Pharmaceutical Factory tarafından Tianjin ZHONGXIN Pharmaceutical Group Limited'den satın alınmıştır ve China Pharmacopeia (2010 versiyonu) standardına uygundur. Dulbecco'nun değiştirilmiş Eagle ortamı/F12 (DMEM/F12), glukozsuz DMEM, fetal sığır serumu (FBS), HBSS ve %0.25 Tripsin-EDTA, Gibco'dan (Grand Island, NY, ABD) temin edildi. CytoTox-ONETM Homojen Membran Bütünlük Testi ve Hücre Sayma Kiti-8 (CCK-8) sırasıyla Promega (Madison, WI, ABD) ve Dojindo'dan (Kumamoto, Japonya) satın alınmıştır. DCFH-DA ve Trizol, Invitrogen'den (Eugene, ABD) elde edildi. Penisilin ve streptomisin Beyotime'den (Şanghay, Çin) satın alınmıştır. Anti-NF-κB p65, anti-p-IκBa antikoru, anti-p-IKK antikoru ve anti-β-aktin antikoru, Cell Signaling Technology'den (Danvers, MA, ABD) elde edildi. Anti-LaminB1 antikoru, anti-iNOS antikoru, anti-IL-1p antikoru, anti-ICAM-1 antikoru ve anti-VCAM-1 antikoru Abcam Technology'den (Cambridge, MA, ABD) satın alınmıştır. SYBR® Select Master Mix ve Yüksek Kapasiteli cDNA Ters Transkripsiyon Kitleri, Applied Biosystems'den (Foster City, ABD) temin edildi. Birincil Kortikal Astrositlerin İzolasyonu ve Kültürü

Birincil astrositler, önceki yöntemlere göre ( McCarthy ve de Vellis, 1980 ; Fan ve diğerleri, 2015 ) yeni doğan Wistar farelerinin korteksinden (24 saatten az) hazırlandı . Tüm prosedürler, mevcut uluslararası yasaların hayvan refahı düzenlemelerine uygun olarak gerçekleştirildi. Kısaca korteksler meninkslerden arındırıldı ve homojenleştirildi, ardından 10 dakika 37°C'de Ca2 ⁺ /Mg2 ^{+ içermeyen PBS içinde %0.25 tripsin içinde sindirildi.}%10 FBS ile sindirimi sonlandırdıktan sonra kalan doku parçalarını filtreleyin. Hücreler, 10 dakika boyunca dakikada 1.000 devirde santrifüjlendi ve DMEM/F12 artı %1 penisilin/streptomisin ve %1 L-glutamin ile seyreltildi, ardından 75 cm2'ye kaplandı ^.^{2.0 x 105} /cm2 ^yoğunlukta ve %5 _C02 ve %95 hava içeren bir inkübatör atmosferinde 37°C'de muhafaza edilen şişeler. Ortam her 3 günde bir değiştirildi. Hücreler %90 konfluent ile dibe sıkıca bağlandığında, mikroglia ve oligodendrositler 260 rpm'de 37°C'de 20 saat çalkalanarak şişelerden ayrıldı. Hücreler pasajlandı ve GFAP ile immünofloresan boyama ile doğrulandı. Bu koşullar altında, kültürlenmiş hücrelerin %95'inden fazlası GFAP pozitifti. Astrositlerin OGD/R Kaynaklı Yaralanmasının Kurulması

Astrositlerin in vivo iskemik yaralanmadaki bozulmasını taklit etmek için, daha önce açıklandığı gibi in vitro OGD/R modelini oluşturduk ( Ma ve ark., 2016 ). _{Basitçe, astrositler önceden ısıtılmış HBSS ile iki kez yıkandı ve kültür ortamı glikozsuz bir DMEM ile değiştirildi ve astrositler % 95} N2'lik bir gaz karışımıyla yıkanan hipoksik nemlendirilmiş bir inkübatör odasına (Stem Cell, Kanada) yerleştirildi. ve %5 _CO2 . 4 saatlik OGD'den sonra ortam, %95 hava ve %5 CO içeren nemli bir atmosferde yüksek glukoz artı storaks (sırasıyla 0.1, 1 ve 10 ug/ml) içeren DMEM/F12 veya Bay-11-7082 ile değiştirildi. ₂20 saat reoksijenasyon ve glikoz restorasyonu için 37°C'de. Kontroller, 24 saat normal atmosferde yüksek glukozlu DMEM/F12 ile inkübe edildi. Astrositler, OGD/R'den 24 saat sonra toplandı. Hücre Canlılığı ve Nörotoksisite

Hücre canlılığı, üreticinin talimatları izlenerek ticari hücre sayma kiti-8 (CCK-8) kullanılarak ölçüldü. Kısaca, storax ile yapılan işlemlerden sonra, 96 oyuklu plakaya toplam 10 ul/oyuk CCK-8 reaktifi eklendi. İnkübasyondan sonra, mikroplaka okuyucu kullanılarak 450 nm'de absorbans ölçüldü. Laktat dehidrojenaz (LDH) salımı, plazma zarı hasarının bir göstergesidir ve üreticinin talimatları izlenerek nörotoksisitenin ölçümü için ticari bir LDH tahlil kiti kullanılmıştır. Hücre İçi Reaktif Oksijen Türleri (ROS) Seviyesinin Ölçümü

Hücre içi ROS seviyesi, daha önce tarif edildiği gibi belirlendi ( Ma ve diğerleri, 2016 ). Astrositler, 37°C'de 30 dakika boyunca 5 uM DCFH-DA ile yüklendi ve ardından kalıntı probu çıkarmak için üç kez D-hank's ile yıkandı. Hücresel flüoresan, 488/525 nm'lik bir ex/em dalga boyunda bir flüoresan mikroplaka okuyucu ile ölçülmüştür. Sonuçlar kontrol grubunun yüzdesi olarak ifade edildi. Kantitatif Gerçek Zamanlı Polimeraz Zincir Reaksiyonu Analizi

Astrositlerden toplam ribonükleik asit, Trizol kullanılarak ekstre edildi ve üreticinin talimatlarına göre TaqMan ters transkripsiyon reaktifleri ile ters kopyalandı. Tüm primerler Sangon Biotech (Shanghai, China) tarafından sentezlendi; iNOS, IL-1β, IL-6, TNF-α ve NF-κB için ileri ve geri primerler Tablo'da açıklanmıştır.Tablo 1.1. Amplifikasyon, bir ABI 7500 Real-Time PCR Sisteminde (Applied Biosystems, Foster City, ABD) gerçekleştirildi. Hedef gen ekspresyonu 2-ΔΔCT yöntemi ile incelenmiştir. Analiz üç kopya halinde gerçekleştirildi. tablo 1

Sense ve antisens primerleri.

iNOS	İleri primer Ters primer	5'-GCTACACTTCCAACGCAACA-3' 5'-ACAATCCACAACTCGCTCCA-3'
IL-1β	İleri primer Ters primer	5'-GAAGAGACGAGAGATCGA-3' 5'-CACACAGATCTCCTCAAGGCA-3'
IL-6	İleri primer Ters primer	5'-ATCACGAACTAGAGCAGCAG-3' 5'-TCATACACAGCCACAGTCACCAC-3'
TNF-α	İleri primer Ters primer	5'-GAGTGAGAGATGTAGAGG-3' 5'-ATACATTAGGGAGAACAACGA-3'
NF-κB	İleri primer Ters primer	5'-GATAAAATCCTCGGGGTCCTAC-3' 5'-GCTGCTAGTGTAGAGGTGTCG-3'

Ayrı bir pencerede aç NF-κB Deoksiribonükleik Asit Bağlanma Aktivitesinin Ölçümü

NF-κB DNA bağlanma aktivitesi, daha önce tarif edildiği gibi ( Lee ve diğerleri, 2008 ) elektroforetik jel mobilite kaydırma deneyi (EMSA) ile belirlendi . Kısaca, 5 ug toplam nükleer protein, NF-κB için konsensüs bağlama dizileri içeren çift sarmallı γ [32P] adenosin trifosfat uç etiketli oligonükleotidlerle karıştırıldı (duyu sarmalı 5′-AGGGACTTTCCGCTGGGGACTTTCC-3 ′), sonra inkübe edildi. Oda sıcaklığında 30 dakika ve denatüre olmayan poliakrilamid jelden geçirin. Kodak X-ışını filmine maruz bırakıldıktan sonra, sinyal algılandı ve bilgisayar destekli dansitometri ile miktarı belirlendi. NF-κB Nükleer Translokasyonun Ölçümü

İmmünohistokimya, daha önce tarif edildiği gibi NF-KB nükleer translokasyonu saptamak için standart bir yöntem izlenerek gerçekleştirildi ( Wei ve diğerleri, 2000 ). Astrositler paraformaldehit ile sabitlendi ve ardından ikinci bir antikor olan Alexa Fluor® 488 nm'yi (1:1000, Life Technology, ABD) takiben tavşan anti-NF-κBp65 (1:200, CST, ABD) antikoru ile gece boyunca 4°C'de inkübe edildi. Western Blot Analizi

Buz soğukluğundaki D-hank'lerle yıkandıktan sonra astrositler, RIPA tamponunda parçalandı. Protein konsantrasyonu, BCA Bradford protein tahlil kiti kullanılarak belirlendi ve protein numuneleri, SDS-PAGE yükleme tamponu ile karıştırıldı. 100°C'de 8 dakika ısıtıldıktan sonra, proteinler %10-12 SDS-PAGE jeline tabi tutuldu ve elektroforetik olarak poliviniliden diflorür membranlara (Millipore, ABD) aktarıldı ve ardından %5 yağsız süt ve %0.1 içeren Tris tamponlu salin ile bloke edildi. Oda sıcaklığında 2 saat Tween-20. NF-κBp65 (1:1000, CST, ABD), p-IκBa antikoru (1:1000, CST, ABD), p-IKK (1:1000, CST, ABD), iNOS (1:1000)'e karşı birincil antikor ile inkübasyon , Abcam, ABD), IL-1β (1:1000, Abcam, ABD), ICAM-1 (1:1000, Abcam, ABD), VCAM-1 (1:1000, Abcam, ABD), β-aktin (1 :4.000, CST, ABD) ve LaminB1 (1:1000, Abcam, USA) gece boyunca 4°C'de ve ardından HRP-konjuge sekonder antikor (1:2000) ile yapıldı. Geliştirilmiş bir kemilüminesans ajanı (Millipore, ABD) ile antikor pozitif bantları saptandı. Bantların kantifikasyonu, taranmış densitometrik analiz ve Quantity one analiz sistemi ile yapıldı. İstatistiksel analiz

Veriler, ortalama ± SEM olarak ifade edildi. Çoklu gruplar arasındaki karşılaştırmalar, tek yönlü bir varyans analizi (ANOVA) ile yapıldı. p < 0,05 anlamlı kabul edildi. En az üç tekrarlı deneyden elde edilen tüm veriler ve istatistiksel analizler, IBM SPSS Version 21.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, ABD) kullanılarak yapıldı.

Git: Sonuçlar

OGD/R Tarafından Yaralanan Storax Korumalı Primer Kortikal Astrositler

OGD/R, hücre canlılığında %34,83 ± 4,66 azalmaya neden oldu. 0.1, 1 ve 10 μg/ml storax ile tedavi, OGD/R grubuna kıyasla hücre canlılığını iyileştirdi (Şekil(Şekil1A).1 A). OGD/R'den sonra LDH salınımı artarken, OGD/R grubuna kıyasla 0.1, 1 ve 10 μg/ml storaks astrositlerden kültür ortamına LDH salınımını baskıladı (Şekil(Şekil1B).1B). OGD/R, kontrol grubuyla karşılaştırıldığında hücre içi ROS oluşumunda %63.67 ± 8.0'e önemli bir artış sağladı; 0.1, 1 ve 10 μg/ml storaks ile tedavi, OGD/R grubuna kıyasla hücre içi ROS oluşumunu önemli ölçüde azalttı (Şekiller(Şekil1C1C,,DD).

Resim, çizim vb. tutan harici bir dosya. Nesne adı fphar-09-01527-g001.jpg'dir.

Şekil 1
Storax'ın astrositlerde OGD / R kaynaklı yaralanma üzerindeki nöroprotektif etkileri. (A) Hücre canlılığı CCK-8 tahlili ile ölçüldü ( n = 18). (B) LDH salınımı ( n = 18). (C) Hücre içi ROS üretimi, DCFDA floresansı ile gösterildi. Ölçek çubuğu, 100 mikron. (D) Astrositlerde hücre içi ROS üretiminin kantitatif veri analizi ( n = 10). Veriler, kontrol ile karşılaştırıldığında ortalama + SEM # p < 0.05 olarak ifade edilir ; ^∗ OGD/R ile karşılaştırıldığında p < 0.05. OGD/R-Yaralanmış Astrositlerde Enflamatuar Sitokinlerin Storax ile Hafifletilmiş İfadesi

OGD/R hasarı inflamasyonu tetikleyebilir ve astrositlerde iNOS, IL-1β, IL-6 ve TNF-α'nın mRNA ekspresyonunu artırabilirken, 0.1, 1 ve 10 μg/ml storaks iNOS, IL-1β, IL- 6 ve OGD/R grubu ile karşılaştırıldığında TNF-α mRNA ifadesi (Şekiller(Şekil2A2A,,D).D). Western blot analizi, OGD/R'nin astrositlerde iNOS ve IL-1β ekspresyonunu arttırdığını doğrularken, storax'ın OGD/R grubuna kıyasla iNOS ve IL-1β ekspresyonunu azalttığını doğruladı (Şekiller(Şekil2E2Ç,,F).F). Ek olarak, storax, astrositlerde ICAM-1 ve VCAM-1 ekspresyonunun artışına neden olan OGD/R'yi azaltabilir (Şekiller(Şekiller2G2G,,HH).

İçinde resim, çizim vb. bulunan harici bir dosya. Nesne adı fphar-09-01527-g002.jpg'dir.

şekil 2
Storax'ın, OGD / R kaynaklı hasarın ardından astrositlerde enflamatuar sitokinler ve adezyon molekülleri ekspresyonu üzerindeki etkileri. (A) gerçek zamanlı PCR ile saptanan iNOS mRNA ifadesi ( n = 10). (B) Gerçek zamanlı PCR ile tespit edilen IL-1β mRNA ifadesi ( n = 10). (C) Gerçek zamanlı PCR ile tespit edilen IL-6 mRNA ifadesi ( n = 10). (D) Gerçek zamanlı PCR ile saptanan TNF-a mRNA ifadesi ( n = 10). (E) Western blot tarafından saptanan iNOS ifadesi ( n = 3). (F) Western blot tarafından tespit edilen IL-1β ifadesi ( n = 3). (G)Western blot tarafından tespit edilen ICAM-1 ifadesi ( n = 3). (H) Western blot tarafından tespit edilen VCAM-1 ifadesi ( n = 3). Veriler, kontrol ile karşılaştırıldığında ortalama + SEM # p < 0.05 olarak ifade edilir ; ^∗ OGD/R ile karşılaştırıldığında p < 0.05. Storax, OGD/R Tarafından Yaralanmış Astrositlerde NF-κB Aktivasyonunu Engelledi

Storax'ın OGD/R tarafından indüklenen astrositlerde NF-κB aktivasyonu üzerindeki etkisi, immünofloresan kullanılarak belirlendi. OGD/R, astrositlerde NF-κB p65 nükleer translokasyonunu arttırdı ve storax ile tedavi, OGD/R grubu ile karşılaştırıldığında NF-κB p65'in nükleer translokasyonunu azalttı. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, OGD/R grubunda NF-κB p65 nükleer translokasyon yüzdesi önemli ölçüde arttı (693.77 ± %40.43, p < 0.05). Bu artış, storax tarafından önemli ölçüde engellendi (Şekiller(Şekil3A3 A,,B).B). OGD/R, astrositlerde NF-κB p65 mRNA ekspresyonunu önemli ölçüde artırırken, storax ile tedavi, OGD/R grubuna kıyasla NF-κB p65 mRNA ekspresyonunu azalttı (Şekil(Şekil3C).3C). Storax tedavisi, OGD/R'den sonra EMSA tarafından tespit edilen NF-κB'nin DNA bağlanma aktivitesini azaltmıştır (Şekil(Şekil3D);3 boyutlu); ayrıca storax tedavisi, western blot tarafından tespit edilen IκB, NF-κB p65 ve IKK'nın OGD/R aracılı fosforilasyonunu inhibe etti (Şekiller(Şekil3E3Ç,,GG).

İçinde resim, çizim vb. bulunan harici bir dosya. Nesne adı fphar-09-01527-g003.jpg'dir.

Figür 3
Storax'ın OGD/R tarafından yaralanmış astrositlerde NF-κB aktivasyonu üzerindeki etkileri. (A) Astrositlerde NF-κB p65 nükleer translokasyonunun temsili görüntüleri. Ölçek çubuğu, 50 mikron. (B) Astrositlerde NF-κB p65 nükleer translokasyonunun nicel verileri. (C) NF-κB p65 mRNA ifadesi, RT-PCR'yi saptadı ( n = 10). (D) EMSA tarafından tespit edilen NF-κB'nin DNA bağlama aktivitesi. (E) Western blot ( n = 3) tarafından tespit edilen NF-κB p65 ifadesinin fosforilasyonu . (F) Western blot tarafından tespit edilen IκB ifadesinin fosforilasyonu ( n = 3). (G) Western blot tarafından tespit edilen IKK ifadesinin fosforilasyonu ( n = 3). Veriler, kontrol ile karşılaştırıldığında ortalama + SEM # p < 0.05 olarak ifade edilir ; ^∗ OGD/R ile karşılaştırıldığında p < 0.05. Bay-11-7082'nin OGD/R Hasarlı Astrositlerde Hücre Canlılığı ve Nörotoksisite Üzerindeki Etkileri

NF-κB inhibitörü olarak Bay-11-7082, NF-κB p65 ve p-IκBa proteininin aktivasyonunu önemli ölçüde inhibe etti (Şekiller(Şekil4A4A,,B)B) ve OGD/R hasarından korunan astrositler (Şekiller(Şekiller4C4C,,D).D). Bay-11-7082 gizlenmiş storax ile ön tedavi NF-κB p65 ve p-IκBa proteininin aktivasyonunu azaltırken (Şekiller(Şekil4A4A,,B),B) ve tek başına storax tedavisine kıyasla storax kaynaklı hücre canlılığı artışı ve nörotoksisitenin azalması (Şekiller(Şekiller4C4C,,DD).

Resim, illüstrasyon vb. tutan harici bir dosya. Nesne adı fphar-09-01527-g004.jpg'dir.

Şekil 4
Bay-11-7082'nin OGD/R ile zarar görmüş astrositlerde hücre canlılığı ve nörotoksisite üzerindeki etkileri. (A) Western blot tarafından tespit edilen NF-κB p65 ifadesi ( n = 3). (B) Western blot tarafından tespit edilen IκB ifadesinin fosforilasyonu ( n = 3). (C) Hücre canlılığı, CCK-8 tahlili ile ölçüldü ( n = 16). (D) LDH salınımı ( n = 16). Veriler, kontrol ile karşılaştırıldığında ortalama + SEM # p < 0.05 olarak ifade edilir ; ^{∗ OGD/R ile karşılaştırıldığında}p < 0.05 ve storaks tedavisiyle karşılaştırıldığında p < 0.05.

Git: Tartışma

Deneysel sonuçlar, storax'ın, OGD/R'yi takiben yaralı primer kortikal astrositler üzerinde bir dizi enflamatuar sitokinlerin ekspresyonunu azaltarak önemli nöroprotektif etkiler uyguladığını göstermektedir. Bu koruyucu etkilere bir NF-κB inhibisyonu aracılık eder ve Bay-11-7082 ile ön işlemle kısmen tersine çevrilebilir.

İskemik inme, beyinde eksitotoksisite, asidoz, enflamasyon, oksidatif stres, peri-infarktüs depolarizasyonu ve apoptoz dahil olmak üzere karmaşık bir patofizyolojik olaylar dizisini tetikler (Dirnagl ve diğerleri, 1999; Lo ve diğerleri, 2003 ; Moskowitz ve diğerleri , 2010 ), sonuçta hücre ölümü ve enfarktüsüne yol açan enflamasyon ve apoptozun özellikle zararlı etkileri ile ( Dirnagl ve diğerleri, 1999)). Yukarıda belirtilen süreçler birbirleriyle etkileşime girer ve serebral iskemiyi takiben karmaşık patoloji modelleri uygular. Glial hücrelerin, özellikle astrositlerin serebral iskeminin patofizyolojisinde önemli bir rol oynadığına dair kanıtlar artık birikmektedir. Astrositler, merkezi sinir sisteminde en bol bulunan nöronal olmayan hücre tipidir; nöronlar, astrositlerle yakın bir etkileşim olmadan beyinde yaşayamazlar. Buna göre astrosit fonksiyonu, iskemiyi takiben nöronal sağkalımı kritik bir şekilde etkileyebilir ( Swanson ve arkadaşları, 2004 ). Bu nedenle, astrositlerin yaralanma ve ölümden korunması, iskemi ve reperfüzyon yaralanmasının ardından beyni korumak için önemli bir terapötik potansiyel göstermektedir ( Zhan ve diğerleri, 2010).). İskemi ve reperfüzyon yaralanmasını taklit ederek, in vitro OGD/R kaynaklı astrosit yaralanma modeli oluşturduk . Bu çalışmada storax, hücre canlılığını iyileştirerek ve LDH salınımını azaltarak OGD/R kaynaklı astrosit hasarına karşı koruyucu etkiler göstermiştir (Şekiller(Şekil1A1 A,,B).B). Memelilerde olduğu gibi, hücre içi [Ca2 ₊ ], serebral iskemi-reperfüzyon hasarı için kritik gibi görünen ROS seviyelerinin yükselmesinden önce gelir ve önceki çalışmalar, ROS'un iskemi-reperfüzyon sırasında mitokondriyal geçirgenlik geçiş gözenek açıklığını artırabileceğini öne sürdü ( Brookes ve Darley -Usmar, 2004 ). Şekilde gösterildiği gibiŞekil1C,1C, OGD / R, hücre içi ROS oluşumunda önemli bir artışa neden olurken, storax, hücre içi ROS oluşumunu önemli ölçüde azalttı. Bu veriler, storax'ın astrositleri OGD/R hasarından koruyabildiğini göstermektedir.

Enflamasyon, serebral iskemik hasarın patolojisinde anahtar rollerden birini oynar. Serebral iskemi, beyin hasarını şiddetlendiren adezyon moleküllerinin, kemokinlerin ve sitokinlerin salınması ve aktivasyonu ile karakterize edilen belirgin bir inflamatuar yanıtı tetikler ( Lo ve diğerleri, 2003 ; Moskowitz ve diğerleri, 2010 ). Ortaya çıkan kanıtlar, IL-6, IL-1β ve TNF-a gibi proinflamatuar sitokinlerin, serebral iskemik hasarın akut fazında reaktif astrositlerin ilk tetikleyicileri olduğunu göstermektedir (Aranguez ve diğerleri, 1995; Lin ve diğerleri ) . al., 2006). Ayrıca, reaktif astrositler, ICAM-1, VCAM-1, IL-6, IL-1β ve TNF-α gibi farklı proinflamatuar sitokinlerin ve adezyon moleküllerinin salgılanmasına neden olur ve bu sürekli döngüsel bir süreçte yer alabilir. aktivasyon ( Cui ve diğerleri, 2011 ; Jeong ve diğerleri, 2012 ). Bu nedenle, aktive astrositler tarafından indüklenen inflamatuar yanıtı azaltmak, serebral iskemi sonrası nöroinflamasyonu önleyebilir. Çalışmamız, OGD/R hasarının enflamasyonu tetikleyebileceğini ve astrositlerde ICAM-1, VCAM-1, IL-6, IL-1β ve TNF-α gibi adezyon moleküllerinin ve proinflamatuar sitokinlerin ekspresyonunu artırabileceğini göstermektedir. storax, bu adezyon moleküllerini ve proinflamatuar sitokin ekspresyonunu baskıladı (Şekil(Şekil 2).2). Bu veriler, storax'ın, enflamatuar sitokinleri ve OGD/R hasarlı astrositlerden adezyon molekülü salınımını azaltabileceğini göstermektedir; ayrıca adezyon molekülleri ve proinflamatuar sitokinler tarafından indüklenen gizlenmiş astrosit aktivasyonu.

Bir transkripsiyon faktörü olarak NF-κB, astrositlerin enflamatuar tepkilerinde önemlidir ve NF-κB aktivasyonu, pro-enflamatuar sitokinleri kodlayan gen transkripsiyonu için gereklidir (Yasuda ve diğerleri, 2011 ) . NF-κB ailesi, p50, p52, p65, c-Rel ve Rel-B gibi beş farklı üyeden oluşur. p65'in fosforilasyonu, sinir sistemindeki gen ekspresyonu için çekirdekteki NF-KB kompleksini stabilize etmeye yardımcı olan, çılgınca araştırılan NF-KB aktivasyon formudur (Schmitz ve Baeuerle, 1991 ) . NF-κB'nin aktivasyonu, daha sonra serbest NF-κB'nin proinflamatuar genlerin ekspresyonunu teşvik ettiği sitoplazmadan çekirdeğe translokasyonuna neden olan κB (IκB) inhibitörünün fosforilasyonu ve müteakip degradasyonu ile başlar.Iadecola ve Anrather, 2011 ). Aslında, astrosit NF-κB sinyalinin etkisizleştirilmesi, sitokin üretimini azaltır ve iskemik yaralanmadan sonra nöronları korur ( Dvoriantchikova ve diğerleri, 2009 ; Barreto ve diğerleri, 2011 ). Bu çalışmada OGD/R'nin astrositlerde IκBa yıkımını, NF-κB fosforilasyonunu ve aktif NF-κBp65'in sitoplazmadan çekirdeğe translokasyonunu arttırdığını, oysa storaksın bu NF-κB değişikliklerini azalttığını gözlemledik (Şekil(Figür 3).3). Storax aracılı aktivite, storax'ın hem hücre canlılığı hem de nörotoksisite üzerindeki etkilerini kısmen önleyen NF-κB'ye özgü inhibitör BAY11-7082'nin kullanımıyla doğrulanan NF-κB aktivasyonuna dayanıyordu (Şekil(Şekil 4),4), NF-κB aktivasyonunun, OGD/R-hasarlı astrositlerde storax aracılı korumada önemli bir role sahip olduğunu gösterir.

Bu çalışmada çeşitli uyarılar ve sınırlamalar vardır. İlk olarak, storax bileşenleri çok karmaşıktır ve ana bileşenler arasında serbest sinnamik asit, styracin (cinnamyl cinnamate), fenilpropil sinamat, triterpenik asitlerden (oleanolik ve 3-epioleanolik asitler) oluşan bir reçine (storesin) ve bunların sinnamik asit esterleri bulunur. ve uçucu bir yağ. Storax'ın nöroprotektif bileşenlerini doğrulamak için daha fazla deney klinik olarak önemli olacaktır. İkincisi, astrosit işlevi, storax'ın nöronu astrositler aracılığıyla koruyup koruyamayacağı ve nöron ile astrositler arasındaki etkileşimin yanı sıra altta yatan moleküler patolojik mekanizmaların daha fazla tanımlanması gerekip gerekmediği, iskemi sırasında nöronal sağkalımı kritik bir şekilde etkileyebilir .

Toplu olarak, çalışmamız storax'ın enflamatuar sitokinlerin ekspresyonunu hafiflettiğini ve NF-κB sinyal yolu aktivasyonunun aracılık ettiği OGD / R tarafından yaralanan primer kortikal astrositleri koruduğunu gösterdi. Gelecekteki araştırmalarda storax'ın nöroprotektif anahtar bileşenlerinin ve NF-κB ile nasıl çalıştığı mekanizmasının belirlenmesinin çok önemli olacağının farkındayız.

Git: Etik Bildirimi

Bu çalışma, Tianjin Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Rehberi'nin tavsiyelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Protokol, Tianjin Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Laboratuvar Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı.

Git: Yazar Katkıları

MZ ve XF, çalışmanın tasarımına katkıda bulunmuştur. Verilerin toplanmasından MZ, YM, LC ve HM sorumluydu. MZ, YM ve LC verileri analiz etti. MZ ve XF verileri yorumladı. MZ ve XF taslağı hazırladı. JZ el yazması içeriğini revize etti. XF, taslağın son halini onayladı. Çıkar Çatışması Beyanı

Yazarlar, araştırmanın potansiyel bir çıkar çatışması olarak yorumlanabilecek herhangi bir ticari veya finansal ilişki olmaksızın yürütüldüğünü beyan eder.

Git: Dipnotlar

Finansman. Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81622051, 81273815) ve Tianjin Şehri Doğa Bilimleri Vakfı (15JCYBJC54800) tarafından desteklenmiştir.

Git: Referanslar

Arangez I., Torres C., Rubio N. (1995). Fare astrositlerinde tümör nekroz faktörü reseptörü: karakterizasyon, hücre içi bozunma ve sitokinler ve Theiler's murin ensefalomiyelit virüsü ile düzenleme . Glia 13 , 185–194. 10.1002/glia.440130305, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Barreto G., Beyaz RE, Ouyang Y., Xu L., Giffard RG (2011). Astrositler: felçte nöroproteksiyon için hedefler . Cent. sinir Sist. Ajan Med. kimya 11 , 164–173. 10.2174/187152411796011303, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Brookes PS, Darley-Usmar VM (2004). Kalsiyum ve süperoksit dismutazın mitokondriyi peroksinitritin neden olduğu geçirgenlik geçişine duyarlı hale getirmedeki rolü . Am. J. Physiol. Kalp Sirk. Fizyol. 286 , H39–H46. 10.1152/ajpheart.00742.2003, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Cui M., Huang Y., Tian C., Zhao Y., Zheng J. (2011). FOXO3a, TNF-alfa- ve IL-1beta kaynaklı astrosit proliferasyonunu inhibe eder: reaktif astrogliosis için ima . Glia 59 , 641–654. 10.1002/glia.21134, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Dirnagl U., Iadecola C., Moskowitz MA (1999). İskemik inmenin patobiyolojisi: entegre bir görünüm . Trendler Nörobilim. 22 , 391–397. 10.1016/S0166-2236(99)01401-0, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Duru M., Çakır A., Harmandar M. (2002). Liquidambar orientalis Mill.'in yapraklarından izole edilen uçucu yağların bileşimi . var. orientalis ve L. orientalis var. Türkiye'den integriloba _ Lezzet Parçası. J.17 , 95–98 . 10.1002/ffj.1050 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Dvoriantchikova G., Barakat D., Brambilla R., Agudelo C., Hernandez E., Bethea JR, et al.. (2009). Astroglial NF-kappa B'nin etkisizleştirilmesi, iskemik yaralanmanın ardından retinal nöronların hayatta kalmasını destekler . Avro. J. Neurosci. 30 , 175–185. 10.1111/j.1460-9568.2009.06814.x, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Fan X., Chai L., Zhang H., Wang Y., Zhang B., Gao X. (2015). Borneol, bir kan beyin bariyeri in vitro modelinde bir NF-kappaB sinyal aracılı mekanizma ile P-glikoprotein fonksiyonunu bastırır . Int. J. Mol. bilim 16 , 27576–27588. 10.3390/ijms161126051, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Fernandez X., Cuvelier L., Loiseau A., Perichet C., Delbecque C., Arnaudo J. (2004). Türk ve Honduras Styrax'tan elde edilen uçucu yağların kimyasal bileşimi . Flav. Fragl. J.20 , 70–73 . 10.1002/ffj.1370 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Ginsberg MD (2008). İskemik inme için nöroproteksiyon: geçmiş, şimdiki zaman ve gelecek . Nörofarmakoloji 55 , 363–389. 10.1016/j.neuropharm.2007.12.007, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Hacke W., Kaste M., Bluhmki E., Brozman M., Davalos A., Guidetti D., et al.. (2008). Akut iskemik inmeden 3 ila 4.5 saat sonra alteplaz ile tromboliz . İngilizce J.Med. 359 , 1317–1329. 10.1056/NEJMoa0804656, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Iadecola C., Anrather J. (2011). İnmenin immünolojisi: mekanizmalardan çeviriye . Nat. Med. 17 , 796–808. 10.1038/nm.2399, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Jeong SR, Kwon MJ, Lee HG, Joe EH, Lee JH, Kim SS ve diğerleri.. (2012). Hepatosit büyüme faktörü, astrositik skar oluşumunu azaltır ve omurilik yaralanmasından sonra glial skarların ötesinde aksonal büyümeyi destekler . Tecrübe. Nörol. 233 , 312–322. 10.1016/j.expneurol.2011.10.021, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Kaur J., Zhao Z., Klein GM, Lo EH, Buchan AM (2004). Doku plazminojen aktivatörünün nörotoksisitesi? J. Cereb. Kan Akışı Metab. 24 , 945–963. 10.1097/01.WCB.0000137868.50767.E8 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Kim J., Seo SM, Lee SG, Shin SC, Park IK (2008). Çam ağacı nematoduna ( Bursaphelenchus xylophilus ) karşı kişniş ( Coriandrum sativum ), sığla ( Liquidambar orientalis ) ve kediotu ( Valeriana wallichii ) esansiyel yağlarından elde edilen bileşenlerin ve bitki esansiyel yağlarının nematisit aktivitesi . J. Agric. Gıda Kimyası 56 , 7316–7320. 10.1021/jf800780f, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Lee SG, Su ZZ, Emdad L., Gupta P., Sarkar D., Borjabad A., ve diğerleri.. (2008). Primer insan astrositlerinde uyarıcı amino asit taşıyıcı-2 ekspresyonunun ve glutamat alımının seftriakson indüksiyon mekanizması . J. Biol. kimya 283 , 13116–13123. 10.1074/jbc.M707697200, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Lee Y., Kim J., Lee S., Oh E., Shin S., Park I. (2009). Bitki esansiyel yağlarının ve Doğu sığlasından ( Liquidambar orientalis ) elde edilen bileşenlerin üç fitopatojenik mantarın büyümesi ve morfogenezi üzerindeki etkileri . haşere. biyokimya Fizyol. 93 , 138–143. 10.1016/j.pestbp.2009.02.002 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Lin HW, Basu A., Druckman C., Cicchese M., Krady JK, Levison SW (2006). Astrogliosis, delici bir beyin hasarının ardından tip 1 interlökin-1 reseptörü olmayan farelerde gecikir . J. Nöroinflamm. 3:15 . 10.1186/1742-2094-3-15, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Lo EH, Dalkara T., Moskowitz MA (2003). İnmede mekanizmalar, zorluklar ve fırsatlar . Nat. Rahip Neurosci. 4 , 399–415. 10.1038/nrn1106, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Ma Y., Zhao P., Zhu J., Yan C., Li L., Zhang H., ve diğerleri.. (2016). Naoxintong, birincil nöronları PI3K-Akt sinyal yolu yoluyla oksijen-glikoz yoksunluğu / yeniden oksijenasyon kaynaklı yaralanmalardan korur . bariz. Bazlı Tamamlayıcı. Alternatif. Med. 2016 :5815946. 10.1155/2016/5815946, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
McCarthy KD, de Vellis J. (1980). Sıçan serebral dokusundan ayrı astroglial ve oligodendroglial hücre kültürlerinin hazırlanması . J. Hücre Biol. 85 , 890–902. 10.1083/jcb.85.3.890, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Moskowitz MA, Lo EH, Iadecola C. (2010). İnme bilimi: tedavi arayışındaki mekanizmalar . Nöron 67 , 181–198. 10.1016/j.neuron.2010.07.002, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Ni C., Zeng N., Gou L., Liu J., He L., Huang X., et al. (2011a). Serebral iskemi-reperfüzyon yaralanma modeli sıçanlarda aromatik resüsitasyon ilaçlarının koruyucu mekanizması . Eczane. klinik Çene. Materia Medica. 27 , 65–68. 10.13412/j.cnki.zyyl.2011.05.023 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Ni C., Zeng N., Xu F., Gou L., Liu J., Wang J., et al. (2011b). Aromatik resüsitasyon ilaçlarının serebral iskemi-reperfüzyon yaralanma modeli sıçanlarda kan beyin bariyeri üzerindeki etkileri . Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 36 , 2562–2566. 10.4268/cjcmm20111824 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Sacco RL, Chong JY, Prabhakaran S., Elkind MS (2007). Akut iskemik inme için deneysel tedaviler . Lancet 369 , 331–341. 10.1016/S0140-6736(07)60155-X, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Schmitz ML, Baeuerle PA (1991). p65 alt birimi, NF-kappa B'nin güçlü transkripsiyon aktive edici potansiyelinden sorumludur . EMBO J.10 , 3805–3817. 10.1002/j.1460-2075.1991.tb04950.x, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Swanson RA, Ying W., KauppinenTM (2004). Astrosit iskemik nöronal ölüm üzerindeki etkileri . Curr. Mol. Med. 4 , 193–205. 10.2174/1566524043479185, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Wei H., Leeds P., Chen RW, Wei W., Leng Y., Bredesen DE, ve diğerleri.. (2000). 3-hidroksikinürenin farmakolojik konsantrasyonlarının neden olduğu nöronal apoptoz: dantrolen ve Bcl-2 aşırı ekspresyonu ile karakterizasyon ve koruma . J. Neurochem. 75 , 81–90. 10.1046/j.1471-4159.2000.0750081.x, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Wu B., Liu M., Liu H., Li W., Tan S., Zhang S., et al.. (2007). İskemik inme için geleneksel Çin patent tıbbının meta-analizi . İnme 38 , 1973–1979. 10.1161/STROKEAHA.106.473165, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Yasuda Y., Shimoda T., Uno K., Tateishi N., Furuya S., Tsuchihashi Y., et al.. (2011). Sıçanlarda geçici global iskemiden sonra nöronal dejenerasyon sırasında glial hücrelerin ve sitokin ekspresyonunun geçici ve sıralı değişiklikleri . J. Nöroinflamm. 8:70 . 10.1186/1742-2094-8-70, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Yepes M., Roussel BD, Ali C., Vivien D. (2009). İskemik beyindeki doku tipi plazminojen aktivatörü: bir trombolitikten daha fazlası . Trendler Nörobilim. 32 , 48–55. 10.1016/j.tins.2008.09.006, PMID: [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Zhan X., Ander BP, Liao IH, Hansen JE, Kim C., Clements D., ve diğerleri.. (2010). Rekombinant Fv-Hsp70 proteini, sıçanlarda fokal serebral iskemiden sonra nöroproteksiyona aracılık eder . İnme 41 , 538–543. 10.1161/STROKEAHA.109.572537, PMID: [ Ücretsiz PMC makalesi ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
Zhao P., Yue S., Ma S., Zhu J., Liang Y., Li L., et al. (2016). Storax'ın oksijen-glukoz yoksunluğu / reoksijenasyon tarafından indüklenen beyin mikrovasküler endotel hücrelerinin yaralanması üzerindeki etkileri . Çene. J. Clin. Eczane. 32 , 847–849. 10.13699/j.cnki.1001-6821.2016.09.025 [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
Zhou M., Zhao P., Zhu J., Wang X., Zhang M., Zhang B. (2015). Storax'ın sıçanlarda fokal serebral iskemi üzerindeki etkileri . Tianjin J. Tradit. Çene. Med. 32 , 496–500. 10.1177/1470320314563424, PMID: [ CrossRef ] [ Google Akademik ]

***maturidi*** · 08 April 2023, 12:42

Farelerde oral ve intranazal uygulamadan sonra styrax'ın sedatif ve antikonvülsan aktiviteleri

Jianming Guo¹, Jin Ao Duan , Yuping Tang , yawen li
üyelikler yıkılmak üyelik

¹TCM formülleri Araştırması için Jiangsu Anahtar laboratuvarı, Nanjing Çin Tıbbı Üniversitesi, Nanjing, Çin Halk Cumhuriyeti.

PMID: 21428734
DOI: 10.3109/13880209.2011.561438

Soyut

İçerik: Styrax, Liquidambar orientalis Mill reçinesi. (NO Hamamelaceae), geleneksel Çin tıbbında resüsitasyona neden olan aromatik bitkilere aittir ve resüsitasyona neden olma ve vicdanlılığı geri kazanma işlevlerine sahiptir.

Amaç: Styrax'ın CNS üzerindeki olası sedatif ve antikonvülsan aktiviteleri araştırıldı. İki farklı yolun (oral ve intranazal uygulama) etki başlangıçları karşılaştırıldı.

Gereçler ve yöntemler: Styrax, sırasıyla lokomotor aktivite değerlendirmesi, pentobarbital kaynaklı uyku süresi ve pentilentetrazol (PTZ) kaynaklı konvülsiyon kullanılarak sedatif, hipnotik ve antikonvülsan etkiler açısından test edildi.

Sonuçlar: Oral uygulamadan sonra (25, 50, 100 mg/kg), styrax, sodyum pentobarbital kaynaklı uyku süresini uzattı. Oral uygulamaya kıyasla intranazal uygulama (12.5, 25, 50 mg/kg) daha düşük dozlarda uyku süresini uzatmıştır. Ayrıca, styrax (100 ve 200 mg/kg), oral uygulamadan 30 dakika sonra PTZ'nin neden olduğu nöbetlere ve ölüme karşı önemli bir koruma sağladı. Bunun tersine, intranazal uygulamadan 5 dakika sonra, styrax daha düşük dozlarda (25 ve 50 mg/kg) önemli ölçüde koruma sağlamıştır. Bu veriler, styrax'ın intragastrik yolla karşılaştırıldığında intranazal yolla daha hızlı etki başlangıcına (5'e karşı 30 dakika) ve daha iyi antikonvülsan etkinliğe (25, 50'ye karşı 100, 200 mg/kg) sahip olduğunu göstermektedir. Styrax, oral uygulamadan sonra 5-60 dakikalık aralıklarla 100 mg/kg'da spontan hareket hareketlerini azaltmıştır.

Tartışma ve sonuç: Styrax'ın sedatif ve antikonvülsan aktiviteleri vardır. Ayrıca, styrax, intragastrik yoldan daha düşük dozda intranazal uygulamadan sonra daha hızlı etki başlangıcına ve daha güçlü etkinliğe sahiptir. Bu sonuç, intranazal uygulamanın geleneksel uygulama yollarına umut verici bir alternatif olarak hareket edebileceğini göstermektedir.

***maturidi*** · 08 April 2023, 12:54

Geleneksel Çin tıbbının değiştirilmiş bir formülasyonu, Alzheimer hastalığının Tg-APPswe/PS1dE9 fare modelinde hafıza bozukluğunu iyileştirir ve Aβ seviyesini azaltır.

Songhee Jeon¹, Shambhunath Bose , Jinyoung Hur , Kiyoung Jun , Young-Kyoon Kim , Kyoung San Cho , Byung-Soo Koo
üyelikler yıkılmak üyelik

¹Dongguk Üniversitesi Biyoteknoloji Araştırma Enstitüsü, 26, 3-GA, Pil-dong, Chung-gu, Seul 100-715, Kore Cumhuriyeti. jsong0304@dongguk.edu

PMID: 21762767
DOI: 10.1016/j.jep.2011.06.046

Soyut

Etnopharmakolojik uygunluk: Bir Çin geleneksel ilacı olan SuHeXiang Wan (SHXW), nöbetler, çocuk nöbetleri, inme ve benzerlerinin tedavisi için ağızdan kullanılmıştır. Daha önce, koku inhalasyonundan sonra sedatif etki, antikonvülsan özellik ve antioksidatif aktivite üzerinde şifalı bitkiler içeren kokunun modifiye edilmiş SHXW esansiyel yağ karışımının etkilerini rapor etmiştik.

Malzemeler ve yöntemler: Bu çalışma, Liquidambar orientalis Miller reçinesi, Myristica fragrans Houtt. tohumu, Cnidium officinale Makino rizomları, Santalum kerestesi dahil olmak üzere 8 bitkinin etanol özünden oluşan değiştirilmiş bir SHXW tarifinin (KSOP1009 olarak adlandırılır) yararlı etkilerini değerlendirmek için yapılmıştır. album L., Piper longum L. fructus, Eugenia caryophyllata Merrill et Perry çiçek tomurcukları, Typha orientalis Presl. poleni ve Salvia miltiorrhiza Bunge kökü Alzheimer hastalığı (AD) gibi nörodejeneratif hastalıklarda. AD'nin transgenik fareleri, Tg-APPswe/PS1dE9, 4.5 aylıktan itibaren 3 ay boyunca KSOP1009 veya pozitif kontrol olarak donepezil ile beslendi. Beyinde hafıza bozukluğu, Aβ birikimi ve plak birikimini değerlendirmek için davranışsal, immünolojik ve ELISA analizleri kullanıldı.

Sonuçlar: KSOP1009 alımı, donepezil tedavisi kadar Tg-APPswe/PS1dE9 farelerinin beyninde Aβ kaynaklı hafıza bozukluğunu iyileştirdi ve Aβ seviyelerini ve beyindeki plak birikimini baskıladı. KSOP1009, AD benzeri beyinlerde fosfo-CREB'nin aşağı regülasyonunu ve artan AKT fosforilasyonunu önledi. Ayrıca KSOP1009, SH-SY5Y hücrelerinde Ap kaynaklı apoptozu ve ROS üretimini baskılar.

Sonuç: Bu çalışma, KSOP1009'un AD hastalarının tedavisi için terapötik bir ilaç olarak gelişebileceğini düşündürmektedir.

Telif hakkı © 2011 Elsevier Ireland Ltd. Tüm hakları saklıdır.

**ozgurcay** · 06 June 2023, 12:27

Candida Mantarı, Hastane Enfeksiyonu ve Mide Hastalıklarına Karşı Sığla MSM Mix Yağı

Duyuru

Siğla msm yaği

Siğla msm yaği

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap

Yorum yap