Ficus carica

[maturidi]

İNCİR

Ağaç | 3-20m | 5-8 Aylar | Na | Meyveleri, Sütü

İncir, Feige, Ficus carica
Yemiş
Ballıdarı
Bardacık

Familyası: Dutgillerden, Maulbeerbaumgewaechse, Moraceae

Drugları: İncir meyvesi; Caricae fructus
İncir Yaprağı Ekstraktı;
İncir sütü: Caricae lacteus
İncir meyvesi taze veya kurutulmuş olarak yenir ve de natürel ilaç ya-pımında kullanılır. İnce dallarının kesilmesi ile elde edilen sütü haricen kullanılır.

Giriş: Vatanının Türkiye olduğu tahmin edilen incir zamanla önce Akdeniz ülkeleri ve Hindistan'a sonrada ılıman iklimin hâkim olduğu hemen her yerde yayılmıştır ve hatta Almanya gibi soğuk sayılabilecek ülkelerde dahi yetiştirilmektedir. İncirin Türkiye'de genellikle iki alttürü yetişir.
a) Sultan inciri; Ficus carica var. grasse, bu tür soluk sarı renkli olup genellikle kurutularak pazarlanır.
b) Kavak inciri; Ficus carica var. violette, bu tür morumsu siyah renkte olup genellikle taze olarak tüketilir.

Botanik: İncir ağacı veya çalısı diyebiliriz, zira incir yetiştiği yöreye göre 3-10m büyüklüğünde bazen bir ağaç, bazen de bir çalı görünümünde olabilir ve hatta Paşaelin'de (balkanlar) 20m boyunu bulabilir. Yaprakları 3-5loplu, ortadaki lop diğerlerine göre büyükçe, kenarları kertikli, üst yüzeyi koyu, alt yüzeyi grimsi renkte, 10-20cm büyüklüğünde 7-15cm eninde, uzun saplı ve değişken sıra ile dizilmiştir. Çiçekleri oldukça küçük ve zamanla büyüyen meyvenin içinde kalır, erkek çiçeklerle dişi çiçekler ayrı ayrı ağaçlarda olur ve sadece dişi çiçekleri meyveye dönüşür. Mey-veleri armut veya küre şeklinde 5-8cm uzunluğunda 3-6cm eninde açık sarı, sarı, pembe, mor veya morumsu siyah renkte olabilir ve içi binlerce küçük tohumdan meydana gelir.

Hasat zamanı: Olgunlaşan meyvelerine kısaca incir denir ve bu meyveleri kurutulacaksa kekik suyuna batırıldıktan sonra kurutulur veya taze olarak yeni veya pazarlanır.

Birleşimi:
a) İncirin birleşiminde İnvert şeker (Fruktoz, Glikoz vb. Sakaroz karışımlar) %50-70 arasında, %5 Pektin, %1,3 oranında Sabit yağ, %3,3 Protein
b) Vitaminlerden B,C ve D ile Provitamin A (β-Karotin)
c) Mineraller çok az olup bunlardan; Potasyum, Kalsiyum, Fosfor, Kükürt, Magnezyum ve Sodyum içerir.

Tesir şekli: Hafif müshil yapıcı ve hafif öksürüğü önleyici özelliklere sahiptir.

Araştırmalar;
1-) Alrena V Lightbourn ^* ve Ronald D Thomas Temel ve Farmasötik Bilimler Bölümü, Eczacılık ve Eczacılık Bilimleri Fakültesi, Florida A&M Üniversitesi, Tallahassee, FL, ABD. PMC'de yayınlanan makaleye atıfta bulunan diğer makalelere bakın. İncir ( Ficus carica) ağaçlar dünyadaki en eski bitkiler arasındadır. İncirin kanseri önlemede işlevsel bir role sahip olduğunu gösteren bileşen polifenollerin ve lifin kimyasal önleyici özellikleri tam olarak açıklanmamıştır.
Fitoöstrojenlerin meme kanserinin halk sağlığı yükünü hafifletmedeki olası katkısı ivme kazanmaktadır. Bu pilot çalışma, bu çalışma sırasında açık literatürde doğal kemopreventif ajanların bulunmadığı karsinojenezin başlangıç aşamasını özel olarak hedeflemiştir. Bu araştırmadan, Ficus carica yaprağı ekstresi ile yapılan tedavinin, bireysel, dönüştürülmemiş (iyi huylu), insan epitelyal meme tümörü hücrelerinde (MCF10A) spontan DNA hasarını engellediğini ve steroidal olmayan östrojen (DES) ile indüklenen DNA zinciri kopmalarını tersine çevirdiğini bildirdik. ficus caricaDNA onarımını farklı şekilde destekler ve DES'in (DESQ) oksidatif kinin metabolitlerinin nükleer aparat ile geri dönüşümsüz etkileşimi nedeniyle kuyruklu yıldız oluşumunu iyileştirir. Bildiğimiz kadarıyla, bu, erken evre meme kanserinde hem kemopreventif hem de kanser tedavi edici bir role sahip olan Ficus carica yaprağı ekstraktını ima eden ilk çalışmalar arasındadır .
2-) Diş Hekimliği Fakültesi, Universitas Airlangga, Surabaya, Endonezya yaptıüı araştırmlarda Enterococcus faecalis , kanal tedavisi sonrası kanal ve pulpa enfeksiyonlarında yaygın olarak bulunan bakterilerden biridir. Sodyum hipoklorit en yaygın kullanılan kanal irrigasyonudur, ancak periradiküler dokulara maruz kaldığında toksik özelliklere sahiptir. Kanal irrigasyonu için alternatif geliştirilmesi gerekmektedir. İncir yaprağı ( Ficus carica Linn.) özütü, antibakteriyel etkileri ile bilinen flavonoid, tanen ve terpenoid gibi aktif maddeler içerir.
3-) İncir yaprağı kaynatmasının tip 1 veya 2 diyabetli hastaların kan şekeri seviyesini düşürdüğü [ 24 – 26 ] ve yaprakların çözücü ekstraktlarının sıçanlarda anti-inflamatuar aktivite gösterdiği [ 27 ] bildirilmiştir. Son yıllarda, incir yaprağı ekstrelerinin insan meme kanseri hücrelerinin MDA-MB-231 büyümesini baskıladığı ve daha geniş kanser baskılayıcı etkileri olabileceği ortaya çıktı [ 28 ].
4-) Toyo Institute of Food Technology, Kawanishi, Japan, Takahashi et al . incir yapraklarındaki başlıca polifenollerin kafeoil-malik asit, rutin ve izoschaftosit olduğunu bildirmiştir [ 30 ]. Bu bileşenler arasında rutinin alerji baskılayıcı etkileri olduğu bildirilmiştir.


Kullanılması:
a) Üniversite kliniklerinde tedavi denemeleri ve araştırmalar yapılmıştır.
1-) Florida A&M Üniversitesi Meme Kanserine karı etkili olduğu Alrena V. Lightbourn etkisi ispatlamıştır.
(Temel ve Farmasötik Bilimler Bölümü, Eczacılık ve Eczacılık Bilimleri Fakültesi, Florida A&M Üniversitesi, 2074 Midyette Rd, Suite 117, Tallahassee, FL, ABD
2-) Diş tedavisinde Diş Kanalı enfeksiyonuna sebep olan Enterococcus faecalis bakterisinin İncir Yaprağı ekstraktının zararsız hale getirdiği belgelenmiştir.
3-) Takahashi ve ekibi yaptıkları araştırmlarda İncir yaprağı ekstraktının birleşimindeki rutinin Alerjiyi baskıladığını belgelemişlerdir.

b) Halk arasında; Genellikle küçük çocuklarda sıkça görülen kabızlığa karşı zararsız bir müshil yapıcı olarak kullanılır. Akşamları az kaynatılmış sütün içinde incir ezilerek çocuklara içirilir. 100gr kuru veya yaş incir 500 ml suda 3-5saat bekletildikten sonra süzülerek 250-300gr şeker ilave edilerek şurup elde edilir. Bu şuruptan bir iki yemek kaşığı alınırsa müshil yapar. İncirin ince dalları kesildiğinde süt gibi bir mayi akar, bu mayiden günde 2-3defa 1-2hafta süreyle siğillere sürülürse siğilleri iyileştirir. İnci yapraklarının sıcak su ile haşlandıktan sonra çıbanlar üzerine sarılırsa çıbanı olgunlaştırır. İncir üzerine söylenenler halk arasında yapılan uygulamalardır ve şimdiye kadar ciddi bir klinik araştırma yapılmamıştır.

Yan tesirleri: Bilinen bir yan tesiri yoktur.

[maturidi]

Yenilebilir Ham İncir ( Ficus carica ) Yaprağı Ekstresi, Tek Hücreli Jel Elektroforezinde (SCGE)/Comet Testinde Dietilstilbestrol (DES)-indüklenen DNA İplik Kırılmalarını Önler: Literatür İncelemesi ve Pilot Çalışma

Alrena V Lightbourn ^* ve Ronald D Thomas

Temel ve Farmasötik Bilimler Bölümü, Eczacılık ve Eczacılık Bilimleri Fakültesi, Florida A&M Üniversitesi, Tallahassee, FL, ABD.

PMC'de yayınlanan makaleye atıfta bulunan diğer makalelere bakın.
Git: Soyut


İncir ( Ficus carica) ağaçlar dünyadaki en eski bitkiler arasındadır. İncirin kanseri önlemede işlevsel bir role sahip olduğunu gösteren bileşen polifenollerin ve lifin kimyasal önleyici özellikleri tam olarak açıklanmamıştır. Bu nedenle, incir yaprağı ekstraktının MCF10A insan meme epitel hücrelerinde DES kaynaklı DNA tek iplikli kırılmasını önleyeceğini (veya azaltacağını) varsaydık. Bu hipotezi test etmek için, MCF10A hücreleri DES (1, 10, 100 μM), ham incir yaprağı ekstresi (5, 10, 15 μL) veya eş zamanlı DES (100 μM)/incir yaprağı ekstresi (5, 10) ile tedavi edildi. , 15 uL). Hücreler, DNA hasarının bir işareti olarak ortalama zeytin kuyruğu momenti ile SCGE/COMET tahlili kullanılarak DNA zinciri kırılması için analiz edildi. DMSO ve tedavi edilmeyen kontrollere kıyasla tüm tedavi seviyelerinde DES kaynaklı DNA zinciri kopmaları. 1, 10 konsantrasyonlarında DES, ve 100 μM, DMSO kontrol değerinden (0.6803) istatistiksel olarak anlamlı (p<0.05) daha yüksek olan sırasıyla 1.2082 (%177.6), 1.2702 (%186.7) ve 1.1275 (%165.7) ortalama zeytin kuyruğu momenti üretti. İncir yaprağı ekstresine maruz kalma, DNA hasarı oluşturmadı. Bunun yerine, DES ile indüklenen DNA zincir kırılmalarında arzu edilen doza bağlı bir azalma gözlemlendi. MCF10A hücrelerinin DES ve incir yaprağı ekstresi ile kompozit tedavisi, DES kaynaklı DNA iplik kopmalarını hafifletti. Birlikte ele alındığında, bu sonuçlar kanser kemoprevensiyonu için potansiyel bir mekanizma önermektedir. İlgili aktif içerikleri belirlemek, etki mekanizmasını doğrulamak ve erken evre meme kanseri kemoprevensiyonu için incir yaprağı ekstraktının terapötik potansiyelini daha fazla aydınlatmak için ek çalışmalar gereklidir. DMSO kontrol değerinden (0.6803) istatistiksel olarak anlamlı (p<0.05) daha yüksekti. İncir yaprağı ekstresine maruz kalma, DNA hasarı oluşturmadı. Bunun yerine, DES ile indüklenen DNA zincir kırılmalarında arzu edilen doza bağlı bir azalma gözlemlendi. MCF10A hücrelerinin DES ve incir yaprağı ekstresi ile kompozit tedavisi, DES kaynaklı DNA iplik kopmalarını hafifletti. Birlikte ele alındığında, bu sonuçlar kanser kemoprevensiyonu için potansiyel bir mekanizma önermektedir. İlgili aktif içerikleri belirlemek, etki mekanizmasını doğrulamak ve erken evre meme kanseri kemoprevensiyonu için incir yaprağı ekstraktının terapötik potansiyelini daha fazla aydınlatmak için ek çalışmalar gereklidir. DMSO kontrol değerinden (0.6803) istatistiksel olarak anlamlı (p<0.05) daha yüksekti. İncir yaprağı ekstresine maruz kalma, DNA hasarı oluşturmadı. Bunun yerine, DES ile indüklenen DNA zincir kırılmalarında arzu edilen doza bağlı bir azalma gözlemlendi. MCF10A hücrelerinin DES ve incir yaprağı ekstresi ile kompozit tedavisi, DES kaynaklı DNA iplik kopmalarını hafifletti. Birlikte ele alındığında, bu sonuçlar kanser kemoprevensiyonu için potansiyel bir mekanizma önermektedir. İlgili aktif içerikleri belirlemek, etki mekanizmasını doğrulamak ve erken evre meme kanseri kemoprevensiyonu için incir yaprağı ekstraktının terapötik potansiyelini daha fazla aydınlatmak için ek çalışmalar gereklidir. DES ile indüklenen DNA zincir kırılmalarında arzu edilen doza bağlı bir azalma gözlendi. MCF10A hücrelerinin DES ve incir yaprağı ekstresi ile kompozit tedavisi, DES kaynaklı DNA iplik kopmalarını hafifletti. Birlikte ele alındığında, bu sonuçlar kanser kemoprevensiyonu için potansiyel bir mekanizma önermektedir. İlgili aktif içerikleri belirlemek, etki mekanizmasını doğrulamak ve erken evre meme kanseri kemoprevensiyonu için incir yaprağı ekstraktının terapötik potansiyelini daha fazla aydınlatmak için ek çalışmalar gereklidir. DES ile indüklenen DNA zincir kırılmalarında arzu edilen doza bağlı bir azalma gözlendi. MCF10A hücrelerinin DES ve incir yaprağı ekstresi ile kompozit tedavisi, DES kaynaklı DNA iplik kopmalarını hafifletti. Birlikte ele alındığında, bu sonuçlar kanser kemoprevensiyonu için potansiyel bir mekanizma önermektedir. İlgili aktif içerikleri belirlemek, etki mekanizmasını doğrulamak ve erken evre meme kanseri kemoprevensiyonu için incir yaprağı ekstraktının terapötik potansiyelini daha fazla aydınlatmak için ek çalışmalar gereklidir.

Anahtar Kelimeler: Dietilstilbestrol, İncir, Ficus carica , DNA hasarı, Tel kopması, SCGE, COMET tahlili, MCF10A, Meme kanseri
Git: giriiş


Amerika Birleşik Devletleri'nde [ 1 ] ve Florida'da [ 2 ] önde gelen ikinci ölüm nedeni olarak sıralanan kanser, kadınlar arasında 1 numaralı ölüm nedeni olarak meme kanserine atfedilmek üzere ayrıca ayrılmıştır [ 3 , 4 ]. En son küresel kanser istatistikleri (12 Eylül 2018), dünyanın 185 ülkesinde ölçülen 36 kanser türüne dayalı olarak kanser insidansı ve mortalitesinde artan bir örüntüye işaret ediyor. Sadece 2018'de küresel olarak yaklaşık 18,1 milyon yeni vaka ve 9,6 milyon kanser ölümü bekleniyor. Bu vakalardan Amerika'da (Kuzey, Güney ve Orta Amerika ve Karayipler) kanser insidansı ve mortalitesinin %21,0 ( _~ 3,8 milyon) ve %14,4 ( _{~~ 3,8 milyon) olduğu tahmin edilmektedir.}1.4 milyon) vaka, sırasıyla. Her iki cinsiyette de en sık teşhis edilen kanserler (akciğer, meme, kolorektal, mide, karaciğer ve prostat) arasında meme kanseri insidansı ikinci (%11,6) ve ölümler beşinci (%6,6) sırada yer almaktadır. Kadın kanser kurbanları, yeni vakaların %24,2'sini (8,6 milyon) ve ölümlerin kabaca %15,0'ını (4,2 milyon) temsil etmektedir [ 5 ]. Genel olarak, 2017-2018 yılları arasında, 50-69 yaş arasındaki kadınlarda meme kanserinin birincil formu (%28) in situ vakalardır; 60-69 yaşları arasında invaziv vakalar (%27) hakimdir; ve ölümler en yaygın (%27) ≥ 80 yaşında [ 1 , 6 , 7 ].

Kadın meme kanseri insidansında, daha büyük tümörlü (2,0 – 4,9 cm) Beyaz kadınlara kıyasla 100.000 Siyah başına daha küçük (<2,0 cm) tümör oranını gösteren 1975-2014 verilerine dayanan farklılıklar mevcuttur. 1975-2015 yılları arasında meme kanserli Siyah kadınlar arasındaki genel ölüm oranının daha yakından gözden geçirilmesi, Beyaz kadınlarda belirtilen ölüm oranlarındaki daha belirgin düşüşe kıyasla, ölüm oranında daha ince bir genel düşüşü ortaya çıkardı. 2015'te Siyah kadınlar, Beyazlardan (2000.000'de 20,8) _~ %39 daha yüksek ölüm oranları (100.000'de 29.5) yaşadı; bu fark muhtemelen ilişkili risk faktörlerindeki (örn. sosyoekonomik koşullar, obezite gibi komorbiditeler) farklılıklara bağlandı. sağkalım oranı, tanıdan sonra %9 gibi yetersizdi [ 6 ].

Meme kanseri tedavisinden iyileşme şansını artırmak için erken müdahale zorunludur. Duktal veya lobüler maligniteler, başlangıçta memenin morfolojisinde bir yumru veya başka bir görünür değişiklik olarak saptanabilir. Meme kanseri geliştirme şansını artıran genel risk faktörleri şunları içerebilir: yakın kadın aile üyelerinde hastalığın aile öyküsü; kişisel iyi huylu meme tümörü öyküsü; kişisel invaziv, in situ veya lobüler malignite öyküsü ; yoğun meme dokusu; meme kanseri genlerinin kalıtsal genetik mutasyonları (örneğin, BRCA1, BRCA2); menarşın erken başlangıcı; ilk doğumun daha büyük yaşı; radyasyona maruz kalma; obezite; alkol tüketimi; sedanter yaşam tarzı; menopozun hormonal tedavisi [ 8 ] ve yüksek yağ tüketimi [ 9 ]]. Meme kanserine yönelik mevcut klinik müdahaleler, aşağıdakiler gibi tarama önlemlerini içerir: klinik meme muayenesi; tarama mamografisi; meme tomosentezi; meme ultrasonu; meme MRG [ 10 ]; termografi; ince iğne aspirasyonu, meme başı aspirasyonu veya duktal lavaj yoluyla doku örneklemesi; kemoterapi; adjuvan tedavi; memenin veya ilgili doku bölgesinin cerrahi olarak çıkarılması [ 8 ]. 40 yaşından büyük kadınlar için yıllık bir mamogram önerilir ve 30 yaşından büyük kadınlardan oluşan belirli yüksek riskli (örn. yıllık prosedürler [ 6]. Mevcut bazı tarama yöntemlerinin invaziv doğası ve radyasyona maruz kalma nedeniyle kanser büyümesi riskinin artması nedeniyle, kadın meme kanserini hem önlemek hem de tedavi etmek için alternatif yaklaşımlara ihtiyaç vardır. 1990'lardan bu yana, alternatif tıp, kısmen uzun süreli rahatsızlıkları (örn. bronşit, artrit, romatizma, kalp hastalığı, sırt ağrısı, yüksek tansiyon) tedavi edemeyen modern farmasötiklerin [ 11 , 12 ] bıraktığı terapi boşluklarını kapatmaya yardımcı oldu. kan basıncı, ülserler vb.) ve bazen yaşlanmanın kronik dejeneratif hastalıkları [ 13 ]. Şimdiye kadar, çok sayıda çalışma kanser insidansı ile meyve ve sebze alımı arasında ters bir ilişki olduğunu göstermiştir [ 8 , 14 ].

Yenilebilir incir ( Ficus carica L. ) ağaçları Moraceae (dut) familyasına ait dikotiledonlu, çok yıllık bitkilerdir. Mısır veya Batı Asya'ya özgü olan incir ağaçları, Orta Doğu ve Avrupa uygarlıklarının yanı sıra Amerika Birleşik Devletleri'nin çeşitli bölgelerine tanıtıldı: New England (MA); Orta Atlantik (NY, PA); Güney Atlantik (FL, NC, SC, VA, DC); Doğu Güney Merkez (AL, MS, TN); Batı Güney Merkez (LA, TX); ve Pasifik (CA) [ 15 – 19 ]. Amerika Birleşik Devletleri, Türkiye, Yunanistan ve İspanya dünyanın en büyük incir üreticileri arasındadır [ 15]. ABD'de incir tüketimi, bu emtianın hem ithalatı hem de ihracatı ile ölçülür. 2017-2018 yılları arasında yaklaşık 47 milyon dolar değerinde yaklaşık 27 milyon pound taze veya kuru incir ithal edildi. Aynı dönem için ulusal tarım istatistikleri, yaklaşık 14 milyon dolarlık yeni bir kazanç için 6,9 milyon pound incirin ihraç edildiğini gösterdi [ 17 , 18 ]. Kaliforniya eyaletindeki üretim , incir ezmesi, konsantre, toz veya külçelere dahil edilebilen veya basitçe doğranmış veya dilimlenmiş ABD'de yetiştirilen incirlerin [ 20 ] %98'ini oluşturur [ 15 , 21 ].

İncirin tıbbi [ 22 , 23 ], folklorik [ 24 ] ve İncil'deki [ 25 ] kullanımları yüzyıllardır belgelenmiştir. İncirler yağsızdır, sodyum oranı düşüktür ve kolesterol içermez [ 15 ]. İncir, doğal şeker, vitaminler (A, Bl, B2, B3 ve C), mineraller (potasyum, çinko, magnezyum, demir, azot, kalsiyum, fosfor), lif ve antioksidanların ( polifenoller) besin açısından zengin bir besin kaynağıdır. , 26 ]. İncirde bulunan besleyici olmayan bileşenler şunları içerir: benzaldehit ve kumarinler (yani angelisin, marmesin, psoralen, umbelliferon ve bergapten) [ 15]. İncir yaprağının bileşenleri şunları içerir: beta-sitosterol ve taraxasterol gibi fitosteroller; ve furanokumarinler, örneğin: psoralen ve bergapten, [ 15 , 23 , 27 ]. Lateks (beyaz süt) incir meyvesinden, ince dallardan ve incir yapraklarından elde edilebilir. Mısır ve siğiller gibi büyümeleri çözebilen bir proteolitik enzim olan ficin [ 22 – 24 ], incir yapraklarında bulunur.

İncir ağacının biyolojik ve ekolojik önemi göz ardı edilemez. Yabani incir, diğer bitki ve hayvanların hayatta kalması için gerekli olduğu anlamına gelen “kilit taşı meyvesi” olarak saygı görür [ 28 ]. İncir bitkisi, en az kırk farklı sağlık durumuna çare olarak tanımlanmaktadır ve sağlığa faydaları, insan vücudunun kardiyovasküler, solunum, sindirim, idrar, örtü, kas, bağışıklık, karaciğer, üreme ve endokrin sistemleri ile ilişkilidir [ 27 ]. İncir yapraklarının, meyvelerinin, köklerinin veya kabuğunun tıbbi ve biyolojik kullanımları, şu şekilde uygulanmasını içerir: kısırlık, dayanıklılık veya erektil disfonksiyon için afrodizyak [ 29 , 30 ], müshil [ 22 ], yaralar ve boğaz ağrısı için rahatlama [22 ], antibakteriyel, antiviral, antifungal, anti-diyabet [ 22 , 31 ], antioksidan, anti-kanser, hepatoprotektif, hipoglisemik, hipolipidemik, anti-HSV, antipiretik, anti-tüberküloz, nematidal, anti-spazmodik, anti-trombosit, anti-helmintik ve anti-mutajenik aktivite [ 22 , 29 , 32 – 34 ]. İncirin ayrıca Alzheimer hastalığı riskini azalttığı [ 35 ], sivilceleri (hemoroid) tedavi ettiği ve cilt ve saç sağlığını iyileştirdiği [ 36 ] bulunmuştur. İncir, adet kanamasının düzenli olmadığı durumlarda (amenore) adet akışını uyarabilen folklorik bir emmenagogdur [ 24]. Eski İncil günlerinde, Aden Bahçesi'nde [ 37 ] “yasak meyve” olarak biliniyordu ve daha sonra Kral Süleyman'ın incir suyunu kaynatmak için kullandığı söylenir [ 24 ]. Geniş erişimi nedeniyle incir bitkisinin fito-tıbbın geleceği için büyük umut vaat ettiği düşünülmektedir.

İncirin insan sağlığı üzerindeki etki mekanizmaları tam olarak aydınlatılamamış olsa da, polifenollerin her yerde bulunması ve yüksek flavonoid içeriği, güçlü bir antikanser potansiyeli olduğunu düşündürmektedir. Narenciye meyvelerinde ortak olan bu maddeler, aşağıdakiler yoluyla sağlanan korumalarla bilinir: antioksidan etkilerin uygulanması; vücudun doğuştan gelen detoksifikasyon sisteminin sitokrom P450 (CYP450) monooksijenaz sistemi aracılığıyla güçlendirilmesi; ve kanser hücreleri tarafından üretilen enzimlerin düzenlenmesi [ 13 , 15 ]. İncire atfedilen bilinen sağlık yararları şunları içerir: kilo kaybı; kolesterolü düşürmek; kabızlık, kalp hastalığı, kolon kanseri, hipertansiyon, makula dejenerasyonunun önlenmesi; diyabet kontrolü; boğaz ağrısının giderilmesi; idrar kalsiyum kaybı; cinsel hastalık; kemikleri güçlendirir; bronşit; cinsel işlev bozukluğu için afrodizyak.

Meme kanseri tedavisini çevreleyen konular zorlu ve tartışmalıdır. Meme kanserinin erken teşhisi, uzun yıllardır meme kanseri ölüm oranlarını azalttığı kanıtlanmış tek tarama aracı olarak kabul edilen düşük dozlu bir röntgen (mamogram) uygulamasıyla mümkün olmaktadır [ 10 , 6 ]. Kuzey Amerika Radyoloji Derneği (RSNA) 1 Aralık 2009'da, yıllık mamogramlar sırasında terapötik, düşük doz radyasyona maruz kalmanın yanı sıra tekrarlanan maruz kalmaların, tanı konmamış bireylerde kanser geliştirme riskini artırabileceğini bildirdi. ailesel veya genetik yatkınlık [ 10 ]. Yüksek riskli denekler arasındaki olasılık oranları, radyolojik maruziyetten yoksun benzer yüksek riskli kadınlarda gözlenenden 1.5 kat daha yüksekti [10 , 38 , 39 ]. Göğüs taraması düşünüldüğünde [ 40 – 43 ], birkaç araştırmacı mamogramın tomosentez ile desteklenmesinin meme kanseri tespitini önemli ölçüde artırdığını buldu [ 42 , 43 ]. Benzer şekilde, RSNA [ 10 ], tek başına herhangi birinden daha fazla meme kanserinin kombine dijital ölçümlerle tespit edildiğini bildirmektedir [ 44 ]. Meme kanserinden kurtulanlarda da yaygın olarak gözlenen komorbiditeler bildirilmiştir [ 45 ].]. Rezidüel kanser hücrelerini yok etmek için adjuvan radyoterapinin diğer postoperatif kullanımlarında, radyoterapinin meme kanseri mortalitesini azalttığı, bunun yerine Birleşik Devletler'de [ 46 ] ve Almanya'da [ 47 ] kardiyovasküler hastalıkları ve akciğer kanserini arttırdığı bulundu. Meme kanseri için uzun süreli radyoterapiden sonra kalp hastalığından ölüm Bouillon ve arkadaşları tarafından da gözlemlenmiştir [ 48 ]. İnsan vücudunun hemen hemen her sisteminde bulunan incirin tıbbi özelliklerinin, diğer komorbiditelerin yanı sıra meme kanserini de hafifletmesi mümkündür.

Koruyucu etkilerini ortaya çıkarmak için fitokimyasallar, hücre içi moleküller, yollar ve organellerin yanı sıra çeşitli hücre dışı yapısal bileşenlerle etkileşime girerek, insan vücudunda kanser ve kanser dışı, kronik hastalıkların gelişimine karşı koyar. Kanser, yaygın olarak genetik mutasyon, düzensiz hücresel proliferasyon ve anormal tümör büyümesi ve gelişimi ile karakterize bir hastalıktır. Bitki kimyasallarının kanseri önlemedeki önemi, en etkili oldukları çok aşamalı karsinojenez sürecinin belirli alanlarını belirlemenin önemini kabul eden araştırmacılar için özellikle ilgi çekicidir. Meme kanseri de çok aşamalı bir süreçtir (Şekil 1) kimyasallar, radyasyon, virüsler veya genetik faktörler tarafından indüklenebilir [ 49 ]. Prokarsinojenik kimyasalların vücuttan zamanında detoksifikasyonu ve eliminasyonu yoksa, kansere neden olan ajanların müteakip emilimi ve metabolizması, türetildikleri ana bileşikten daha zararlı etkiler yaratabilecek reaktif metabolitlerin oluşumuna yol açabilir. Fitokimyasallar ve karsinojenez süreci arasındaki kritik arayüzün farkında olarak, Michael Sporn , tümör oluşumunu inhibe edebilen, tersine çevirebilen veya geciktirebilen maddeleri tanımlamak için 'chemoprevention' [ 50 , 51 ] terimini türetmiştir [ 14 ].

Şekil 1:
Meme kanseri gelişiminin aşamaları. Kadınlarda meme kanserinin tıbbi olarak tanınan dört aşamada ilerlemesi: Aşama 0 (göğüs kanallarında veya süt bezlerinde lokalize malignitenin erken teşhisi); Aşama 1 (kanser yerinden çıkar ve yağlı meme dokusu veya daha az ölçüde lenf düğümleri gibi sağlıklı, sağlam dokuyu istila edebilir); Aşama 2 (kanser büyümesinin başlangıcı, yayılması veya her ikisi); Evre 3 (kanser tedaviye daha dirençlidir ancak kemik veya organlarla temas etmemiştir); Evre 4 (kanser meme ve lenften vücudun diğer bölgelerine metastaz yapmıştır). Şekil http ://www.arimedex.com'dan uyarlanmıştır .

'Kemoprevention' terimi aynı zamanda kimyasal önleyici ajanların iki ana fonksiyonel sınıfını kapsar: normal hücrelerin prokarsinojenik saldırısını bloke edenler (örneğin, ellajik asit, indol-3-karbinol ve flavinoidler) ve başlatılan hücrelerin dönüşümünü baskılayan veya geciktirenler. neoplastik lezyonlara (beta-karoten, kurkumin, genistein, resveratrol ve kapsaisin) [ 14 ]. Bununla birlikte, bu bulgulara dayanarak, karsinojenezin hız sınırlayıcı, hızlı, geri döndürülemez ilk aşamasını inhibe edebilen, tersine çevirebilen veya geciktirebilen ajanların keşfinde bir boşluk kalmıştır.(yani, başlatma) aracılığıyla kalıtsal genetik değişikliklerin meydana gelebileceği. Prokarsinojenik, promutajenik bir maddenin DNA ile fiziksel etkileşiminin DNA hasarına yol açması karsinojenezin başlangıç aşamasındadır [ 52 ]. Elektrofilik karsinojenlerin doğrudan etkisi, DNA'ya kovalent olarak bağlanan, DNA-adduct oluşumuna neden olan ve genotoksik etkiler uygulayan oldukça reaktif, nükleofilik metabolitler üretebilir. Reaktif oksijen, nitrojen veya kükürt türleri ile etkileşimler de genotoksik olabilir [ 52 , 14 ]. Bu araştırma sırasında, bitkilerden elde edilen ve kimyasal önleyici özelliklere sahip doğal ürünlerin mekanizması tam olarak açıklanmamıştı. Ayrıca, kemopreventif maddenin etki mekanizmalarını anlamanın odak noktası,İyi huylu koşullara karşı kötü huylu neoplazmalara göre incelediğimiz Ficus carica yaprağı özütü, henüz emekleme aşamasındaydı.

Dietilstilbestrol genel olarak, hormonal bir etki şekli olan genotoksik olmayan (epigenetik) bir kimyasal kanserojen olarak sınıflandırılmıştır [ 52 ]. Epigenetik karsinojenler, etkilerini “kimyasalın veya metabolitlerinin DNA ile DNA bağlanması, hasar görmesi veya etkileşimi [içermeyen]” mekanizmalar yoluyla göstermeleri üzücüdür [ 52 ].]. Bu tartışmaların ardından, incir yaprağı ekstraktının DES ile indüklenen DNA stand kırılmalarını ortadan kaldıracağını veya azaltacağını varsaydık. Tek hücreli jel elektroforezi ve kuyruklu yıldız tahlilini kullanarak, bu hedefi gerçekleştirmeye yönelik ilgili pilot çalışmanın hedefleri bizi şu noktalara götürdü: (1) tedavi edilmemiş insan göğüs epitel hücrelerinde temel deoksiribonükleik asit (DNA) hasarını belirlemek; (2) incir yaprağı ekstraktının tek başına MCF10A hücreleri üzerindeki etkisini belirlemek; (3) MCF10-A hücrelerinin DES'e veya onun metaboliti olan DESQ'ya karsinojen maruziyetini takiben DNA'nın bütünlüğünü değerlendirmek; ve (4) incir yaprağı ekstraktının MCF10A hücrelerinde DES ile indüklenen nükleer etkileri yok etme kabiliyetini değerlendirmek. Bu ön veriler, incir yaprağı ekstraktının hem kemoprotektif hem de kemopreventif özellikler gösterdiği yönündeki önerimizin temelini oluşturmaktadır. Bulgularımız sadece DES'in genotoksik bir ajan olarak yeniden değerlendirilmesini garanti etmekle kalmaz, aynı zamanda doğrudan karsinojenez aşama 1'i (başlatma) hedefleyen bir fitokimyasal müdahale için kanıt sağlar. Bu çalışmadan elde edilen bilgiler, bu ajanı içeren daha fazla meme kanseri araştırmasına duyulan ihtiyacı körüklüyor ve gelecekteki klinik kullanımı için umut vaat ediyor.Erken evre meme kanseri gelişimi ile mücadele için Ficus carica yaprağı ekstresi.

Git: Malzemeler ve yöntemler

Hücreler ve kimyasallar


Fibrokistik meme hastalığı olan 36 yaşındaki beyaz bir kadından elde edilen ölümsüzleştirilmiş, dönüştürülmemiş, tümörijenik olmayan (iyi huylu) insan meme epitelyal (MCF10A) hücreleri, Rockville, MD'deki American Type Cell Culture Collection'dan (ATCC) satın alınmıştır. Kullanılan kimyasallar arasında Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM), streptomisin, fosfat tamponlu solüsyon (PBS) ve tripsin yer aldı ve Sigma Chemical Company'den (St. Eouis, MO) satın alınan tek kullanımlık malzemelerle satın alındı. Tüm soğutulmuş solüsyonlar kullanımdan önce oda sıcaklığına getirildi. Hücre kültürü


İnsan göğüs epitelyal (MCF10A) hücreleri, streptomisin ile takviye edilmiş serumsuz Dulbecco's Modified Eagle's Medium'da (DMEM) haftada iki kez alt kültürlendi. İnkübatör ayarları %5 CO2 _, 37 °C'de %95 hava ve %100 nem idi. Hücreler, birleşme sağlanana kadar üssel olarak büyüyen tek tabakalar olarak tutuldu. Hücreler PBS içinde yıkandı, tripsinize edildi ve tedaviden önce DMEM içinde yeniden süspanse edildi. Ficus carica yapraklarının sulu ekstraksiyonu


İncir yaprağı ekstresi, araştırma deneylerinde ileride kullanılmak üzere hazırlandı ve soğutuldu. Laboratuar protokolüne göre incir yaprakları tartıldı ve suda iki kez 30 dakika kaynatıldı ve ekstrakt vakumla süzüldü. Ekstrakt, yaprak gramı başına 3 ml %1 HC1 ile işlendi, 3000 rpm'de 10 dakika santrifüjlendi ve süpernatant, vakumla süzülerek süzüldü. Öz, 50 ml'ye konsantre edildi ve pH, 7.4'e ayarlandı. COMET tahlili ile DNA zinciri kopmalarının analizi


Tek hücreli jel elektroforezi (SCGE) veya 'kuyruklu yıldız tahlili' hızlı, hassas ve güvenilir bir biyokimyasal tekniktir (şekil 2) bireysel memeli hücrelerinde DNA hasarını belirlemek ve ölçmek için. Mevcut çalışmada, normal meme epitelyal (MCF10A) hücrelerinde kanserojen kaynaklı DNA parçalanmasının değişen düzeylerini saptamak için kuyruklu yıldız tahlili kullanıldı. Hücreler, 6 saat boyunca dimetil sülfoksit (DMSO), farklı hacimlerde incir özü veya her ikisinin bir kombinasyonu içinde çözülmüş değişen dozlarda DES'ye maruz bırakıldı. Daha sonra, düşük erime noktalı agaroz ile karıştırılmış MCF10A hücreleri, buzlu slaytlar üzerine kaplandı. Bir alkalin lizis tamponunda gece boyunca inkübasyonun ardından hücreler, 30 dakika boyunca 25V/300mA'da taze bir alkalin durulama solüsyonunda elektroforeze tabi tutuldu. Hücreler daha sonra nötralize edildi ve mikroskopi için hazırlık olarak havada kurutuldu. Slaytlar, florokrom olarak propidium iyodür kullanılarak 20x büyütmede görselleştirildi.

Şekil 2:
Kademeli COMET tahlil prosedürü. Çok aşamalı süreç, hücre büyümesi ve tedavisi ile başlar. Askıya alınan hücreler, alkalin liziz, çözme ve elektroforez öncesinde slaytlara sabitlenir. Nötralize slaytlar buzdolabında saklanabilir ve görüntüleme gerekli olana kadar ışıktan uzak tutulabilir. Slayt, floresan görüntüleme ve kuyruklu yıldız puanlamasından hemen önce propidium iyodür ile ayrı ayrı boyanır. Kontrast mikroskopi aşaması


Kimyasal işlemden kaynaklanan MCF10A hücrelerinin ve kuyruklu yıldızların kültürlerinin büyümesi, bir Zeiss floresan mikroskobu kullanılarak faz kontrast mikroskobu ile gözlemlendi. Propidyum iyodür ile boyanmış DNA, yeşil ışıkla süzüldü (uyarma ≈546 nm). Mümkün olduğunda, DNA hasarı ve/veya onarımını belirlemek ve jel elektroforezi sırasında bir kuyruklu yıldızın modelini oluşturan kuyruk parçalarının göçünü görselleştirmek için kuyruklu yıldızların fotoğrafları çekildi. istatistiksel analiz


Nicel veriler (tablo 1) bağımsız, in vitro deneylerden elde edilen numunelerin üçlü deneylerini (ortalama ± SEM) temsil eder . Ölçülen 34 parametreden, zeytin kuyruk momenti (OTM) - yüzde kuyruk DNA'sının ürünü ve baş ile kuyruktaki ağırlık merkezleri arasındaki mesafe [ 53 ] seçildi. 51 slayttan toplam 2000 kuyruklu yıldız değerlendirildi. Tedavi grubuna göre ortalama zeytin kuyruğu momentinin istatistiksel analizlerini yapmak için SAS ^{® yazılımı kullanıldı.} Sürekli değişkenin ("tedavi") dağılımı, PROC UNIVARIATE prosedürü kullanılarak araştırıldı. Tüm tedavi grupları için, tedavi ortalamaları ile sıfır arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark vardı (p<.0001, ' _{*** ile gösterilir)}'). Tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ile belirlenen spesifik tedavi grupları arasındaki farklılıklar, Tukey, çoklu karşılaştırmalar, post-hoc testi kullanılarak ayrıca değerlendirildi. _{İstatistiksel anlamlılık, p<.05 (' *} ' ile gösterilir) alfa düzeyinde belirlenmiştir . Uygun ve uygun olduğunda, Microsoft Excel'de bazı grafikler çizildi. Tablo 1:


Bir ksenoöstrojen olan dietilstilbestrol (DES) ve kinon metabolitinin insan meme epitel hücresi (MCF10A) DNA bütünlüğü üzerindeki etkisi.

NoTrtCtrl	1 A	40	0.863	±	0.169	120	0.813	±	0.090
1b	40	0.817	±	0.165
1c	40	0.759	±	0.132
DMSO Kontrolü	2a	40	0.707	±	0.114	120	0.680	±	0.068
2b	40	0.767	±	0.109
2c	40	0.568	±	0.132
DES-1 μM	3 A	40	2.003	±	0.667	120	1.208	±	0.246
3b	40	0.754	±	0.257
3c	40	0.868	±	0.144
DES-10 μM	4a	40	1.007	±	0.249	120	1.270	±	0.142
4b	40	2.089	±	0.285
4c	40	0.715	±	0.117
DES-100 μM	5a	40	0.822	±	0.144	120	1.128	±	0.105
5b	40	0.984	±	0.121
5c	40	1.576	±	0.240
DESQ-1 μM	6a	40	0.574	±	0.111	120	0.873	±	0.089
6b	40	0.559	±	0.122
6c	40	1.486	±	0.177
DESQ-10 μM	7a	40	0.754	±	0.142	120	0.588	±	0.059
7b	40	0.459	±	0.065
7c	40	0.550	±	0.079
DESQ-100 μM	8a	40	0.678	±	0.081	120	0.618	±	0.055
8b	40	0.649	±	0.128
8c	40	0.527	±	0.066

Ayrı bir pencerede aç
Git: Sonuçlar

COMET testinin duyarlılığı


SCGE/COMET testi hassas, radyometrik olmayan bir prosedürdür. Bu teknik, iyi huylu insan meme epitelyal (MCF10A) hücrelerinde DES ile indüklenen DNA hasarının değerlendirilmesinde ve ayrıca çevresel östrojenler ve bunların metabolitleri tarafından MCF10A'ya uygulanan nükleer hasarın boyutunun ölçülmesinde etkiliydi. Bu genotoksik etkilere aracılık etmede incir yaprağı ekstraktının koruyucu etkileri, 6 saatlik kanserojen tedavisinin ardından ölçülebilirdi. Mikrolitre miktarlarda incir yaprağı ekstresi, COMET analizi ile tespit edilebilen DNA onarımı ile sonuçlanan hücresel değişiklikleri uyandırmak için de yeterince güçlüydü. Hücre yapısındaki, özellikle bozulmamış veya parçalanmış DNA'daki morfolojik değişiklikler, karanlık alan mikroskobu ile görsel olarak gözlemlendi.Figür 3).

Figür 3:
Uyaran varlığında veya yokluğunda MCF10A hücrelerinin kuyruklu yıldız profilleri. DNA iplikçik kırılmalarını, parçalanmasını ve parçaların göçünü temsil eden örnek kuyruklu yıldız galerisi. araçların analizi


^{SAS ®} 'daki MEANS prosedürüne dayalı olarak, 17 farklı muamele grubu için ortalama zeytin kuyruk momentinin (OTM) sıfıra eşit olduğu sıfır hipotezi reddedildi (p<.00005), bireysel muamele araçlarının eşit olmadığı alternatif hipotezine karşı sıfıra. Gerçek ortalamanın sıfırdan büyük olduğunu gösteren ortalama OTM'nin her tedavi türü için farklı olduğu sonucuna varıyoruz. Bu sonuç, SAS®'taki ANOVA prosedürü ile de ^doğrulandı . Veriler, Ortalama ± SEM olarak sunulmuştur.

Tedavi edilmemiş MCF10A hücrelerinde temel DNA hasarı


İnsan epitelyal göğüs hücrelerinde taban çizgisi (spontane) DNA stand kırılmalarının oluşumunu ölçmek için, büyüme ortamında inkübe edilen tedavi edilmemiş MCF10A hücreleri kuyruklu yıldızlar için izlendi. 120 işlenmemiş MCF10A hücresinde puanlanan kuyruklu yıldızlar için ortalama zeytin kuyruğu momenti 0.81 ±0.09 (p<.00005) idi. Muamele edilmemiş hücrelerde sıfırın üzerindeki bir puan, bu hücreler içindeki DNA'da kendiliğinden meydana gelen hasarın (ve onarımın) olduğunu doğrular; bu, kendi kendini düzenleyen endojen homeostaz süreçleri ile tutarlıdır.

DMSO ile muamele edilmiş MCF10A hücrelerinde nükleer kriyo koruma


Dimetil sülfoksit, proteinleri dondurma sırasında denatüre olmaktan korumak ve korumak için memeli hücrelerine rutin olarak eklenir. Dondurarak saklamanın DMSO içinde süspanse edilen insan epitelyal meme (MCF10A) hücreleri içindeki DNA bütünlüğü üzerindeki etkisi kuyruklu yıldızlar için izlendi. 120 DMSO ile muamele edilmiş MCF10A hücrelerinde puanlanan kuyruklu yıldızlar için ortalama zeytin kuyruğu momenti 0.68 ± 0.06 (p<.00005) idi. Bu puan, DMSO tedavisinin ardından tedavi edilmeyen kontrollere kıyasla (0-81 ± 0.09) %16,4 daha az DNA hasarı meydana geldiğinden, DMSO'nun ilave faydasını doğrulamaktadır.

DES'in MCF10A hücreleri üzerindeki etkisi


DES (ana bileşik), MCF10A hücrelerinde hücre ölümünü indükledi, bu, hücresel çekirdekler tarafından propidyum iyodür alımı ile kanıtlandı. Ayrıca, 1 μM (1.21 ± 0.25), 10 μM (1.27 ± 1.14) veya 100 μM (1.13 ± 0.10) konsantrasyonda DES uygulaması, diğer tüm tedavi gruplarına göre OTM'de (p<.00005) en büyük etkiye sahipti. . DES'in düşük dozlarında ortalama OTM lineer bir şekilde artmasına rağmen, yüksek doz seviyesinde biraz daha düşük bir yanıt görülmektedir. Bu ortalama puanlar, tedavi edilmemiş kontrol hücre seviyelerinin (0-81 ± 0.09) üzerinde sırasıyla %148.7, %156.3 ve %138.7 idi. DMSO kontrolleri (0-68 ± 0.07) ile karşılaştırıldığında, ilgili DES tedavi gruplarında ortalama OTM %178, %187 ve %166 daha yüksekti. Bu tedavi grubu için en düşük DNA hasarı miktarına sahip DES dozu DES 100 μM idi.

DES-Quinone'un MCF10A hücreleri üzerindeki etkisi


DESQ'nun (DES'in bir metaboliti) MCF10A hücrelerinde hücre ölümünü indükleme derecesi, DES ile tedavi edilen hücrelerin tüm dozları için gözlemlenenden daha azdı. DESQ'nun 1 μM (0.87 ± 0.09) konsantrasyonunda uygulanması, ancak 10 μM (0.59 ± 0.06) veya 100 μM (0.62 ±0.05) konsantrasyonlarında uygulanmaması, OTM'yi (%107.4) işlenmemiş kontrol değerlerinin (0.4%) üzerinde önemli ölçüde artırdı. -81 ± 0.09). Sonraki doz seviyeleri, DNA zinciri kopmalarına neden olmada daha az etkiliydi (sırasıyla %72.3 ve %76.0). DESQ'nun artan doz seviyeleri ile ortalama OTM'de görülen azalma doğrusal değildi, ancak DES metaboliti iplik kopmalarına neden olmada ana bileşiğe göre belirgin şekilde daha az etkiliydi. Bu ortalama puanlar sırasıyla DMSO kontrol değerlerinin % 128, % 86 ve % 91'iydi (0-68 ± 0.07). Bu tedavi grubu için en düşük DNA hasarı miktarına sahip DESQ dozu DESQ 10 μM idi.

İncir yaprağı ekstraktının MCF10A hücreleri üzerindeki etkisi


Tek başına uygulanan sulu incir yaprağı ekstresi, tüm çalışma hacimlerinde (5 μL, 10 μL ve 15 μL) DNA hasarını azalttı. Ortalama OTM değerleri, tedavi edilmeyen kontrollerle (0-81±0.09) karşılaştırıldığında sırasıyla 0.71 ± 0.09 (%86.9), 0.69 ± 0.06 (%84.3) ve 0.79 ± 0.08 (%96.7) idi. DMSO kontrolleri (0-68 ± 0.07) ile karşılaştırıldığında, 5 μL, 10 μL veya 15 μL incir yaprağı ekstresi ile dozlama, ortalama OTM'de (sırasıyla %104, %101 ve %116) kabaca karşılaştırılabilir farklılıklar ortaya çıkardı. Bu tedavi grubu için en düşük miktarda DNA hasarı üreten incir yaprağı ekstresi Şekil 10 μL olmuştur.

DES (Ana Bileşik) ve incir yaprağı ekstresinin MCF10A hücreleri üzerindeki birleşik etkileri


Yukarıdaki gibi, tek başına uygulanan DES (1, 10 veya 100 uM), sırasıyla 1.21, 1.27 ve 1.13'lük OTM'ler üretti. Yüksek dozlu DES'nin (100 μM) etkisi, 5 μL (1.01 ± 0.10), 10 μL (0.52 ± 0.04) veya 15 μL (0.63 ± 0.07) hacimlerinde incir yaprağı ekstraktının uygulanmasıyla dengelendi, bu da genel olarak somut olduğunu gösteriyor. DNA hasarında azalma ve daha yüksek dozlarda incir yaprağı ekstresi aracılı koruma. Tow hacmi özütü, yüksek doz DES tarafından ortaya çıkan DNA iplik kopmalarının miktarını sadece marjinal olarak azalttı (Tablo 2). Tablo 2:


İncir ( Ficus carica ) yaprağı ekstraktının insan meme epitel hücresi (MCF10A) DNA bütünlüğünde diethystiblestrol (DES) ile indüklenen etkisi.

ŞEKİL-5 μL	9a	40	0.949	±	0.256	120	0.707	±	0.093
	9b	40	0,547	±	0.074
	9c	40	0.624	±	0.080
ŞEKİL-10 μL	10 A	40	0.739	±	0.117	120	0.685	±	0.059
10b	40	0.720	±	0.098
10c	40	0,597	±	0.094
ŞEKİL-15 μL	11a	40	0.965	±	0.160	120	0.786	±	0.082
11b	40	0.751	±	0.156
11c	40	0.643	±	0.099
DES100+ŞEKİL5	12a	40	1.013	±	0.244	120	1.013	±	0.104
12b	40	1.233	±	0.171
12c	40	0.793	±	0.093
DES100+ŞEKİL10	13a	40	0.487	±	0.066	120	0.516	±	0.042
13b	40	0.561	±	0.089
13c	40	0,502	±	0.060
DES100+ŞEKİL15	14a	40	0.537	±	0.075	80	0.631	±	0.066
14b	40	0.802	±	0.119
DESQ10+ŞEKİL5	15a	40	0.554	±	0.075	120	0.663	±	0.055
15b	40	0,594	±	0.094
15c	40	0.842	±	0.111
DESQ10+ŞEKİL10	16a	40	0.807	±	0.127	120	0.715	±	0.067
16b	40	0.833	±	0.130
16c	40	0.505	±	0.079
DESQ10+ŞEKİL15	17c	40	0,495	±	0.096	120	0,587	±	0.058
17a	40	0.686	±	0.092
17b	40	0.581	±	0.111

Ayrı bir pencerede aç
Kombine tedavilerden kaynaklanan OTM'ler, tedavi edilmemiş kontrol seviyelerinin %124,7'si (DES 100-Şekil5), %63,5'i (DES100-Şekil10) ve %77.6'sı (DES100-Şekil5) ve %149'u (DES100-Şekil5), %76'sı (DES100- Şekil10) ve %93'ü (DES100-Figl5) DMSO kontrol değerleri. DES100-Fig 5 grubu dışında, DNA hasarındaki azalmalar (kuyruklu yıldız oluşumu, DNA iplik kopmaları) önemliydi. 100 μM DES'nin neden olduğu, marjinal olarak zayıflatılmış DNA zinciri kopmaları. Bununla birlikte, incir ekstraktının hacminin iki katına veya üç katına çıkarılması, DES'nin neden olduğu DNA hasarını önemli ölçüde ortadan kaldırdı. DES 100 μM ile Şekil 10 μL kombinasyonu, bu tedavi grubu için kuyruklu yıldız analizi ile gözlemlenen en az miktarda DNA hasarı üretti.

DESQ (Metabolit) ve incir yaprağı ekstresinin MCF10A hücreleri üzerindeki birleşik etkileri


Bir kanserojen ksenoöstrojenin metabolitine ön-maruziyet yoluyla DNA hasarının indüklenmesini takiben, incir yaprağı ekstresinin tatbik edilmesi, bu etkilerin tersine çevrilmesiyle sonuçlanmıştır, bu, muamele edilmemiş kontrollerde gözlenen DNA hasarı seviyesinin altında olmuştur. Artan hacimlerde incir yaprağı ekstresi ile birlikte DESQ (10 µM) uygulamasını takiben ortalama OTM sırasıyla 0.66 ± 0.06 (5 µL), 0.715 ± 0.07 (10 µL) ve 0.59 ± 0.06 (15 µL) idi. Bu değerler, tedavi edilmemiş kontrollerle (0-81 ± 0.09) karşılaştırıldığında sırasıyla %81.6, %107.8 ve %82.2, DMSO kontrolleriyle (0-68 ± 0.07) karşılaştırıldığında ise %98, %105 ve %86 idi. Yüksek hacimli incir yaprağı ekstresi (15 μL), DES-Q (10 μM) ile indüklenen DNA zinciri kırılmasını önlemede en başarılıydı.

MCF10A hücrelerinde tedavi grupları arasında OTM'lerin çoklu karşılaştırmaları


ANOVA posthoc OTM ortalamalarının çoklu karşılaştırmalarında, Tukey'in öğrencileştirilmiş aralık testi, aşağıdaki grupları istatistiksel olarak önemli ölçüde farklı olarak tanımladı:

• DES 1 μM, aşağıdakilerden önemli ölçüde farklıydı: DMSO kontrolü; Şekil 5; Şekil 10; DES100-Fig10; DESQ-10; DESQ-100; DESQ10-Şekil5; DESQ10-Fig10; ve DESQ10-Figl5 tedavi grupları (p<.05).
• DES 10 uM, şunlardan önemli ölçüde farklıydı: DMSO kontrolü; Şekil5; Şekil10; DES100-Fig10; DES100-Figl5; DESQ-10; DESQ-100; DESQ10-Şekil5; DESQ10-Fig10; DESQ10-Figl5 (p<.05).
• DES-100 μM, DES100-Fig10'dan önemli ölçüde farklıydı; DESQ-10; DESQ-100; ve DESQ10-Figl5 (p<.05).
• DES-100 μM-Fig 5 μL, DES 100-Fig10'dan önemli ölçüde farklıydı (p<.05).

Git: Tartışma


Bu in vitro pilot çalışma, Ficus carica L. (incir) yaprağı ekstresinin insan meme kanseri riskini azaltmadaki faydasını araştırmak için benzersiz bir şekilde tasarlanmıştır . İncirin anti-mutajenik potansiyelinin sadece öne sürüldüğü , ancak açık literatürde ayrıntılı olarak araştırılmadığı bir zamanda, normal meme epitelyal (MCF10A) hücrelerinde incir yaprağı ekstraktının DES ile indüklenen DNA tek iplikli kırılmasını önleyeceğini varsaydık . Pilot çalışma, kanser gelişiminin ilk aşaması sırasında MCF10A insan meme epitel hücrelerinde DES ile indüklenen DNA iplik kopmalarını hafifleten incir yaprağı ekstresi gibi ilk deneysel verileri sağlayarak hipotezimizi doğruladı.

Çok aşamalı karsinojenez modelinde, nükleer deoksiribonükleik asit (DNA) hasarı, genomun kararsızlığına yol açan genetik lezyonların üretimi için gerekli bir başlangıç olayıdır. Kanserojen maddelere maruz kalma, mutasyonlara neden olabilir ve DNA onarımını ve hücre döngüsü kontrol genlerini değiştirebilir. Dietilstilbestrol (DES), toksikolojik olarak tam bir kanserojen olarak karakterize edilen sentetik bir östrojenik hormonun bir örneğidir. İnsan meme epitel hücrelerinde ve ayrıca kemirgen modellerinde habis tümörlerin gelişimini indüklediği ve desteklediği bilinmektedir. DES, sitokrom P450 ilaç metabolize edici enzimler tarafından aktif olarak birincil metabolik olarak aktif ara ürün olan DES-4,4'-kinon'a (DESQ) biyolojik olarak dönüştürülür. DESQ'nun DNA ile etkileşimi, DNA eklentilerinin ve zincir kırılmalarının oluşumuyla sonuçlanır [ 55 ]]. Onarımın yokluğunda, bu süreçleri düzenleyen genlerdeki değişiklikler, normal hücrelerin malign fenotiplere dönüşmesine neden olabilir. Bu hücrelerin replikasyonu, tümörijenezin ilerlemesini destekleyebilir. Mevcut pilot çalışma, ana bileşik olan DES'in, DNA hasarının uyarılmasının söz konusu olduğu metaboliti DESQ'dan daha güçlü bir potensi gösterdi. Ana bileşik tarafından ortaya çıkarılan yıkıcı etkiler, kemoprevensiyon için kullanılan metabolit ve/veya fitokimyasallardan tutarlı bir şekilde daha belirgindi. Bu paradoks, tek bir hücrede kanserin başlamasında yaygın olarak rol oynayan üç süreç nedeniyle ilginçtir: metabolizma, DNA onarımı ve hücre proliferasyonu [ 56 ]. DESQ, O- veya S- reaktif nükleofile metabolize edilebilir (Şekil 4) ve her ikisi de DNA hasarını indükleme yeteneğine sahiptir [ 55 ]. Bu mevcut bulgu aynı zamanda tartışmalıdır, çünkü ya DES'in insan meme epitel hücrelerinde genotoksik etkiler üretmesi için metabolizmanın zorunlu olmadığını ya da kanserin uzun vadeli (~30 yıl) gelişiminin geleneksel görünümü gibi, düşük dozların dereceli etkileri gibi. kanserojenler uzun bir süre boyunca hala neoplazm gelişiminin aynı sonucu anlamına gelir. Alternatif olarak, DES'nin mitojenik ER-alfa'ya yüksek afinite ile bağlandığı, DESQ'nun etkisine ER-beta'da 'aldatıcı bir şekilde koruyucu' bir mekanizma aracılık ettiği bir ayrım mekanizmasının varlığını düşünmek mantıklıdır [ 57 – 61 ]. Bu konuları aydınlatmak için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.

Şekil 4:
Dietilstilbestrolün Metabolizması . DES'in oldukça aktif metabolite dönüştürülmesi, DES-kinon (DES-Q), DNA yapısında kansere neden olan güçlü bir mutasyon başlatıcısıdır.

Bu çalışmada, tehlikeli maddelere maruz kalmadan veya kriyoprotektif ajan DMSO'ya maruz kalma avantajı ile insan meme epitel (MCF10A) hücrelerinde kendiliğinden oluşan düşük seviyeli DNA hasarı. Bu bulgu, belirli koşullar altında endojen östrojenin kendisinin DNA hasarının başlatıcısı olarak işlev görebileceğini [ 62 , 63 ] ve menopoz öncesi ve menopoz sonrası kadınlarda meme kanseri riskini artırdığını öne süren sınırlı kanıtlarla tutarlıdır [ 64 ]. Mikolitrelik miktarlarda Ficus carica yaprağı ekstresinin eklenmesiyle östrojene duyarlı meme dokusundan hücrelerin mikro ortamının değiştirilmesi, deneysel kontrollere göre minimum DNA hasarı üretti ve bunun tümör hücre dönüşümünü baskılamadaki faydalarını ortaya koydu.65 ], ER-beta için potansiyel bir tercih [ 66 ] ve çok daha zayıf bir östrojenik etkinin fitoöstrojenlerin karakteristiği olduğuna dair köklü gözlem (Şekil 5) [ 66 ]. Bu bulgular ayrıca, bu deneylerde kullanılan incir yaprağı ekstresinin, kanserojenlerle kombinasyon halinde kullanıldığında biyolojik aktivitesinin farklılaşmasına izin vererek, kontroller kadar kabaca güvenli olduğunu göstermektedir. İncir yapraklarındaki yüksek fenolik içeriğin ve Ficus türlerinin [ 67 , 68 ] oksijen tutucu, koruyucu, iyileştirici özelliklerinin, insan meme epitel hücrelerinde, iyi huylu olan ancak bunu yapabilen rutin doğal homeostaz onarım mekanizmaları ile birlikte hareket etmesi muhtemeldir. aktivasyon [ 63 ]. Zhang ve arkadaşları [ 69 ] tarafından yapılan çalışmalarda, Ficus carica yaprağı ekstresi ile tedavi, MCF10A hücrelerinin canlılığını tehlikeye atmamıştır.

Şekil 5:
Benign İnsan Meme Epitel (MCF10A) Hücrelerinde Comet Assay ile Ölçülen Kimyasal Olarak İndüklenen DNA Hasarı.

DES, incir özü veya kombine tedavilerin MCF10A hücreleri üzerindeki etkileri. 6 saate kadar DES (0,1 – 10 μM), incir özü (5 – 15 μL) veya yüksek doz DES artı incir kombinasyonları ile insan meme epitelyal (MCF10A) hücrelerinde DNA hasarının indüksiyonu veya zayıflaması.

NoTrtCtrl = Tedavi kontrolü yok; DMSOCtrl = Dimetil sülfoksit korumalı kontrol; DES = Dietilstilbestrol; İNCİR = Ficus carica yaprağı ekstresi; DES-1, DES-10, DES-100 = DES 1, 10 ve 100 μM sırasıyla; ŞEKİL-5, ŞEKİL-10, ŞEKİL-15 = ŞEKİL 5, 10 ve 15 μL sırasıyla.

* DMSO kontrolü ile karşılaştırıldığında, p<.05

+ DES-10 ile karşılaştırıldığında, p<.05

Δ DES-1 ile karşılaştırıldığında, p<.05

# DES-100 ile karşılaştırıldığında, p<.05

▼ DES 100-Şekil 10 ile karşılaştırıldığında

DES'in, metabolitlerinin veya analoglarının etki mekanizması tartışmalıdır ve karsinojenez ile ilgili olarak bunu aydınlatmaya yönelik çabalar ortaya çıkmaya devam etmektedir. Yapısal benzerlikler nedeniyle, bir fenolik A halkasının varlığı, östrojen reseptöründe reseptör bağlanması ve östrojenik aktivite için kritiktir, ancak diğer steroid reseptörleri için değil [ 9 ]. 3-OH ve 17-OH'de 12.1 Â aralıklı iki fenol grubuna sahip olan DES ile karşılaştırıldığında, estradioldeki bu parçalar arasındaki mesafe 10.9Â'dır [ 9 ]. Bu özellikleri koruyan DES metabolitleri veya analogları, ER'de önemli aktivite sergiler, ancak östrojenik aktivite onlarsız ortadan kalkar [ 9 ]. DES ve estradiol benzer bağlanma afinitelerini paylaşırlar (1.0 × 10 _10'un ^Kaöstrojen reseptörü için ± 0.8 ve 1.5 × 10 ^{10 ± 0.3).} DES hem ER-alfa hem de ER-beta'ya bağlanır [ 70 ], çoğu fitoöstrojen ise anti-östrojenik etkilerini ER-beta [ 60 , 59 ] yoluyla gösterir. Bununla birlikte, molekülün karsinojenik potansiyelinin ana bileşik tarafından mı yoksa bir oksidatif metabolit tarafından mı beslendiği uzun süredir belirsizdir [ 71 ]. Geçmişteki araştırmalar, DESQ'nun belirli koşullar altında DES'ten somut olarak daha fazla aktiviteye sahip olduğunu göstermiştir [ 72 ].

DES'in kanserojen özelliklerini değerlendiren bu çalışmada, biyolojik aktivitesi daha fazla miktarda DNA zincir kırılması üreten DES (ana bileşik) idi, burada onun birçok reaktif oksidatif metabolitinden biri olan daha zayıf DESQ'dan ziyade [ 72 , 73 ]]. Burada, bu prokarsinojenin metabolizmasının genomik kararsızlığa neden olması gerekliliği, belki de gözlemlenen genotoksik yanıtın tek belirleyicisi değildi. Hem DES hem de DESQ, östrojen reseptörüne (ER) daha fazla bağlanmak için çekirdeğe yer değiştirmeden önce sitozole girmek için lipofilik sitoplazmik membranı geçebilir. DESQ'nun sitokrom P450 (CYP450) monooksijenaz sistemi tarafından hızlı metabolizması da etkilenen hücrelerde daha zayıf bir fizyolojik tepkiye neden olur. DESQ geri dönüşümsüz olarak bağlanır ve DES'nin bağlanma afinitesinin yalnızca bir kısmı ile ER'ye daha zayıf ancak kalıcı bir uyaran sağlar [ 74 ]]. DES ve DESQ, çok farklı oranlarda olsa da, östrojenik ve kanserojen etkileri farklı şekilde indükler. DESQ'nun acil serviste daha uzun süre kalması ve sürekli düşük etkisi, genomik etkileşimlerin olasılığını artırır ve sonunda kanserin ilerlemesine katkıda bulunabilir [ 75 ]. Bu bulgular aynı zamanda DES'in östrojen reseptörü ile üstün yapısal hizalanmasının ve bunun sonucunda ortaya çıkan genomik bozulmanın saptanması için tek hücreli jel elektroforezinin ("kuyruklu yıldız tahlili") spesifik ve hassas doğasını da doğrulayabilir [ 76 , 77 ].

Östrojene duyarlı hücrelerin DNA hasarına duyarlılığı göz önüne alındığında, bu çalışma neoplastik süreci tetiklemede çevresel östrojenleri içerir. Çalışmamızda, iyi huylu insan meme tümöründen elde edilen MCF10A hücrelerine, dış uyaranların etkisi olmadan DNA hasarı uygulandı. DES'in eklenmesi, tüm dozlarda DNA zincir kırıklarının üretimini hızlandırdı. Büyüme ortamına incir yaprağı ekstraktının eklenmesiyle ekstraktın antioksidan bileşenleri DNA hasarını baskılayarak tüm doz seviyelerinde DNA zincir kırıklarının birikmesini engellemiştir. Buna karşılık, Zhang ve meslektaşları [ 69 ] Ficus carica'yı kullandılar.Üçlü negatif meme kanseri MDA-MB-231 hücrelerinde neoplastik hücre sağkalımını, hücre döngüsünü ve göçü baskılamak için yaprak özleri. Bildirilen cezalarımızın yanı sıra, dönüştürülmemiş, insan meme epitel hücrelerinde insan meme kanseri gelişiminin başlangıç aşamasını hedeflemek için bir Ficus carica yaprağı ekstresi kullanmaya yönelik başka bir girişim bulunmadı. Başarılı Ficus carica L. kemoprevensiyonu, DNA hasarının (DNA iplik kopmaları) inhibisyonu ve/veya tersine çevrilmesi ve MCF10A hücrelerinin insanoğlunun bildiği ilk sentetik östrojene maruz kalmasının ardından DNA onarımının belirgin şekilde desteklenmesi ile kanıtlanmıştır.

Git: Çözüm


Steroid olmayan karsinojenik potansiyele sahip ilk sentetik östrojen olan Dietilstilbestrol'ün, transforme edilmemiş (iyi huylu) insan epitelyal meme tümörü (MCF10A) hücrelerinin genomik ve morfolojik bütünlüğünü bozarak geniş DNA hasarına (iplik kopmaları ve parçalanma) neden olduğu gösterilmiştir. kanserin başlangıcından. Bu kanserojenin oksidatif kinon ara maddesine (DESQ) hücresel metabolizması da MCF10A hücreleri için güçlüydü.

Fitoöstrojenlerin meme kanserinin halk sağlığı yükünü hafifletmedeki olası katkısı ivme kazanmaktadır. Bu pilot çalışma, bu çalışma sırasında açık literatürde doğal kemopreventif ajanların bulunmadığı karsinojenezin başlangıç aşamasını özel olarak hedeflemiştir. Bu araştırmadan, Ficus carica yaprağı ekstresi ile yapılan tedavinin, bireysel, dönüştürülmemiş (iyi huylu), insan epitelyal meme tümörü hücrelerinde (MCF10A) spontan DNA hasarını engellediğini ve steroidal olmayan östrojen (DES) ile indüklenen DNA zinciri kopmalarını tersine çevirdiğini bildirdik. ficus caricaDNA onarımını farklı şekilde destekler ve DES'in (DESQ) oksidatif kinin metabolitlerinin nükleer aparat ile geri dönüşümsüz etkileşimi nedeniyle kuyruklu yıldız oluşumunu iyileştirir. Bildiğimiz kadarıyla, bu, erken evre meme kanserinde hem kemopreventif hem de kanser tedavi edici bir role sahip olan Ficus carica yaprağı ekstraktını ima eden ilk çalışmalar arasındadır .

Bu nedenle, Ficus carica L. yaprak ekstraktının in vitro biyolojik olarak reaktif olduğu ve dietilstilbestrol (DES) ve oksidatif kinin metaboliti 4' varlığında veya yokluğunda MCF10A hücrelerinde DNA zincir kırılmalarını ortadan kaldırmak için nükleer kompleks ile etkileşime girdiği sonucuna vardık. 4”-dietilstilbestrol kinin (DESQ).

Git: teşekkür


Yazar, bu çalışmayı kendisine emanet ettiği için Dr. Ronald D. Thomas'a (öldükten sonra) minnettardır. Bu araştırma kısmen NIH hibeleri RR08111 ve RR03020 tarafından desteklenmiştir. Listelenen tüm yazarlar, bu araştırmanın konseptine, deneysel tasarımına ve başlatılmasına katkıda bulunmuştur. İlk yazarın önemli katkıları arasında şunlar yer almaktadır: veri toplama (kuyruklu yıldızları puanlama), veri kalitesi değerlendirmesi, istatistiksel analiz ve veri yorumlama; literatür incelemesi; bu makalenin entelektüel içeriğinin geliştirilmesi, makalenin taslağının hazırlanması ve düzenlenmesi; yanı sıra yayın için finansman ve teslim. Laboratuvar teknisyeni Alicia Tucker'a paha biçilmez eğitim/destek için ve ayrıca özüt geliştirme üzerinde çalışmış olabilecek eski laboratuvar üyelerine teşekkür ederiz. 'AACR Azınlık Bilim İnsanı Ödülü', bu çığır açan araştırma 2007 AACR konferansında ilk kez sunulduğunda yazara verildi. Pilot çalışma ve geliştirilmiş literatür taraması, benim için inanılmaz bir akıl hocası olan Dr. Ronald D. Thomas'ın onuruna burada sunulmaktadır.

Git: Kısaltmalar:

SCGE:	Tek Hücreli Jel Elektroforezi
DES:	dietilstilbestrol
DMSO:	Dimetil sülfoksit
DES-Q:	DES-4,4'-Kinon

Git: Dipnotlar




Çıkar çatışması

Yazar, bu makaleyle ilgili herhangi bir finansal çıkar veya herhangi bir çıkar çatışması hakkında bilgi sahibi değildir.



Git: Referanslar

1. Xu J, Murphy SL, Kochanek KD, Bastian B, Di EA, et al. (2018) Ulusal Hayati İstatistik Sistemi. Ölümler: 2016 için nihai veriler . Ulusal Hayati İstatistik Raporları 67 : 1-76. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
2. Dünya Yaşam Beklentisi. Kanser Devlet Sıralaması . 17 Eylül 2018'de çevrimiçi olarak erişildi.
3. Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezleri, Ulusal Sağlık İstatistikleri Merkezi, Ulusal Hayati İstatistikler Sistemi 2017. Yaş grubuna göre önde gelen on ölüm nedeni, Amerika Birleşik Devletleri – 2016 . Atlanta, GA. [ Google Akademik ]
4. Florida Sağlık Bakanlığı (2017) Florida Morbidite İstatistikleri Raporu 2016. Bölüm 8 – Kanser Sürveyansı . [ Google Akademik ]
5. Bray F, Ferlay J, Soerjomataram I, Siegel RL, Torre LA, et al. (2018) Küresel kanser istatistikleri 2018: 185 ülkede 36 kanser için dünya çapında GLOBOCAN insidans ve mortalite tahminleri . CA Cancer J Clin 68 : 394–424. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
6. Amerikan Kanser Derneği; 2018. Meme kanseri gerçekleri ve rakamları – 2017-2018 . Atlanta, GA: Amerikan Kanser Derneği, Inc; 2017. [ Google Akademik ]
7. Sürveyans, Epidemiyoloji ve Son Sonuçlar (SEER) Programı, SEER 9 Kayıtları, Ulusal Kanser Enstitüsü, 2017. Meme kanseri . Erişim tarihi: 17 Eylül 2018.
8. Ulusal Kanser Enstitüleri 2017. Meme kanseri . [ Google Akademik ]
9. Blok G (1992) Veriler, Kanser Riskini Azaltmada Antioksidanların Rolünü Destekliyor . Nutr Rev 50 :207–213. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
10. Radiological Society of North America, Inc. (RSNA), 2018. Mamografi bazı yüksek riskli kadınlarda meme kanseri riskini artırabilir: RSNA 2009 Yıllık Toplantısından Haberler. [ Google Akademik ]
11. Sporn MB, Suh N (2000) Kanserin kemoprevensiyonu . Karsinojenez 21 : 525-530. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
12. Sporn MB, Suh N (2002) Kemoprevensiyon: Kanseri kontrol etmek için temel bir yaklaşım . Nat Rev Kanser 2 : 537-543. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
13. Marderosian D, Kratz AH, Riedlinger JE ( 2000 ) Tamamlayıcı ve alternatif tıbbi sağlık hizmetleri Gennaro'da AR Remington: Eczacılık Bilimi ve Uygulaması . 20. Baskı Baltimore, MD: Lippincott Williams & Wilkins; 1762-1764. [ Google Akademik ]
14. Surh YJ (2003) Diyet fitokimyasalları ile kanser kemoprevensiyonu . Nat Rev Can 3 : 768–780. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
15. Vinson JA (1999) Şek . Tahıl Gıdaları Dünyası 44 : 82-87. [ Google Akademik ]
16. Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı (USDA), Doğal Kaynakları Koruma Servisi (NRCS), 2008. BİTKİLER Veritabanı . Ulusal Bitki Veri Ekibi, Greensboro, NC. [ Google Akademik ]
17. Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı (USDA), Ekonomik Araştırma Servisi (ERS), 2018b. Verileri Dışa Aktarma ve İçe Aktarma – 2018 . [ Google Akademik ]
18. Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı (USDA), Doğal Kaynakları Koruma Servisi (NRCS), 2018c. BİTKİLER Veritabanı . Ulusal Bitki Veri Ekibi, Greensboro, NC. [ Google Akademik ]
19. Kuzey Amerika Merkezi Kanser Kayıt Kuruluşları Birliği (NAACCR) 2017. NAACCR hızlı istatistikleri: ABD bölgeleri .
20. Ulusal Tarım I İstatistik Servisi (NASS) 2018. Şekiller – istatistikler . Erişim tarihi: 17 Eylül 2018.
21. Tarımsal Pazarlama Kaynak Merkezi (AgMRC), 2018. Emtialar ve Ürünler: Şekiller . Erişim tarihi: 17 Eylül 2018.
22. Buchman DD (1996). Bitkisel İlaç . New York, NY: Kanatlar Kitapları. [ Google Akademik ]
23. Jellin JM, Gregory PJ, Batz F, Bonakdar R, Marshall J. et al. (2009) Eczacı Mektubu/Reçete Yazan Mektubu - Doğal İlaçlar Kapsamlı Veritabanı , 11. Baskı Stockton, CA: Terapötik Araştırma Fakültesi; 648-649. [ Google Akademik ]
24. Dük JA (1997). Yeşil Eczane . New York, NY: Rodale Inc; 453. [ Google Akademik ]
25. Goor A (1965) Eski çağlardan günümüze Kutsal Topraklarda incirin tarihi . Econ Bot 19 : 124–135. [ Google Akademik ]
26. Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı (USDA), Tarımsal Araştırma Servisi (ARS), 2018a. Standart Referans Eski sürüm için Ulusal Besin Veritabanı Temel Rapor: 09089, Şekiller, ham . [ Google Akademik ]
27. Badgujar SB, Patel VV, Bandivdekar AH, Mahajan RT (2014) Ficus carica'nın geleneksel kullanımları, fitokimyası ve farmakolojisi : Bir inceleme . Eczacı Biol 52 : 1487–1503. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
28. O'Brien TG, Kinniar MF, Silver SC (1998) İncirleri bu kadar özel yapan nedir? Doğa 392 : 668–668. [ Google Akademik ]
29. Mawa S, Husain K, Jantan I (2013) Ficus carica L. (Moraceae): Fitokimya, geleneksel kullanımlar ve biyolojik aktiviteler . Kanıta dayalı Tamamlayıcı ve Alternatif Tıp 2013 : 1–8. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
30. Cassidy A, Franz M, Rimm EB (2016) Diyet flavonoid alımı ve erektil disfonksiyon insidansı . J Clin Nut 103 Am : 534–541. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
31. Bouyahya A, Bensaid M, Bakri Y, Dakka N (2016) Ficus carica'nın fitokimyası ve etnofarmakolojisi . Uluslararası J Biochem Res 14 : 1–12. [ Google Akademik ]
32. Steward WP, Brown K (2013) Kanser kemoprevensiyonu: Hızla gelişen bir alan . Brit J Kanser 109 : 1–7. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
33. Mehta RG, Murillo G, Naithani R, Peng X (2010) Doğal ürünlerle kanser kemoprevensiyonu: Ne kadar yol kat ettik? Pharm Res 27 : 950-961. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
34. Tawfik MS, Alhejy M (2014) İncirde ( Ficus carica L.) bulunan antioksidanlar ve hamsterlarda damar sertliğinin önlenmesindeki etkileri . J Food Nut Sci 2 : 138. [ Google Akademik ]
35. Subash S, Essa MM, Al-Asmi A, Al-Adawi S, Vaishnav R, et al. (2014) Alzheimer Hastalığı Transgenik Fare Modelinde oksidatif stresin modifikasyonu üzerine %4 incirin kronik diyet takviyesi . BioMed Res Uluslararası 2014 : 1–8. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
36. Al-Snafi AE (2017) Ficus carica'nın beslenme ve farmakolojik önemi : Bir inceleme . IOSR J Ecz 7 : 33–48. [ Google Akademik ]
37. Fraser C (2014) İncirin on inanılmaz sağlık faydası .
38. Greuter MJ, Jansen-van der Weide MC, Jacobi CE, Osterwijk JC, Jansen L, et al. (2010) Kalıtsal olarak artmış meme kanseri riski olan kadınlarda mamografi meme kanseri taraması için radyasyon riskini içeren simülasyon modelinin doğrulanması . Eur J Kanser 46 : 495-504. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
39. Jansen-van der Weide MC, Greuter MJ, Jansen L, Oosterwijk JC, Pijnappel RM, et al. (2010) Ailesel veya genetik yatkınlığı olan kadınlarda düşük doz radyasyona maruz kalma ve meme kanseri riski: Bir meta-analiz . Eur Radiol 20 : 2547-2556. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
40. Joe BN, Sickles EA (2014) Meme görüntülemenin evrimi: geçmişten günümüze . Radyoloji 273 : S23–S44. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
41. Sardanelli F, Fallenberg EM, Clauster P, Trimboli RM, Camps-Herrero J, et al. (2016) Mamografi: Kadınlara yönelik bilgilere ilişkin EUSOBI tavsiyelerinin bir güncellemesi . Görüntüleme İçgörüleri 8 : 11–18. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
42. Caumo F, Romanucci G, Hunter K, Zorzi M, Brunelli S, et al. (2018). Dijital meme tomosentez taramasına geçiş sonrası Verona tarama programında saptanan meme kanserlerinin, dijital mamografi taramasında saptanan kanserlerle karşılaştırılması . Meme Kanseri Araştırma ve Tedavisi 170 : 391-397. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
43. Weber B, Hayes J, Evans WP (2018) Meme yoğunluğu ve tamamlayıcı taramanın önemi . Güncel Meme kanseri Raporları 10 : 122–130. [ Google Akademik ]
44. Rafferty EA, Park JM, Philpotts LE, Poplack SP, Sumkin JH, et al. (2013). Tek başına dijital mamografi ile karşılaştırıldığında kombine dijital mamografi ve meme tomosentezi kullanılarak radyolog performansının değerlendirilmesi: Çok merkezli, çok okuyuculu bir denemenin sonuçları . Radyoloji 266 : 104-113. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
45. Obi N, Gornyk D, Heinz J, Vrieling A, Seibold P, et al. (2014) Meme kanserinden kurtulanlar arasında yeni teşhis edilen komorbiditelerin belirleyicileri . J Kanserden Kurtulma 8 : 384-393. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
46. Darby S, McGale P, Taylor CW, Peto RP (2005) Erken meme kanseri için radyoterapi sonrası kalp hastalığı ve akciğer kanserinden kaynaklanan uzun süreli mortalite: ABD SEER kanser kayıtlarında yaklaşık 300.000 kadının prospektif kohort çalışması . Lancet (Onkoloji) 6 : 557–565. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
47. Obi N, Eulenburg C, Seibold P, Eilber U, Thone K. et al. (2018) Bir Alman meme kanseri kohortunda adjuvan radyoterapi ile farklı ölüm nedenleri arasındaki ilişkiler . Göğüs 38 : 75-80. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
48. Bouillon K, Haddy N, Delaloge S, Garbay JR, Garsi JP, et al. (2011) Meme kanseri için radyoterapi sonrası uzun süreli kardiyovasküler mortalite . J Am Coll Cardiol 57 : 445–452. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
49. Russo J, Russo IH (2000) Atlas ve sıçan meme bezi tümörlerinin histolojik sınıflandırması . J Meme Bezi Biol Neoplasia 5 : 187–200. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
50. Sporn MB, Dunlop NM, Newton DL, Smith JM (1976) A vitamini ve sentetik analogları (retinoidler) ile kimyasal karsinojenezin önlenmesi . Fed Proc 35 : 1332-1338. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
51. Sporn MB (1976) Kanserden korunmada Vitamin A ve analogları (retinoidler) . Curr Kavramları Nutr 6 : 119–130. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
52. Klaunig JE, Kamendulis LM (2010) Kimyasal karsinojenez . 2. Baskı, McGraw-Hill Medical, San Francisco: Pp: 109–120. [ Google Akademik ]
53. Olive PL, Banath JP (2006) Kuyruklu yıldız tahlili: Tek tek hücrelerde DNA hasarını ölçmek için bir yöntem . Nat Protokolü 1 : 23-29. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
54. Agabeili RA, Kasımova TE (2005) Armoracia rusticana, Zea mays ve Ficus carica bitki ekstraktlarının ve bunların karışımlarının anti-mutajenik aktivitesi . Tsitol Genet 39 : 75-79. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
55. Carmichael PL, Mills JJ, Campbell M, Basu M, Caldwell J (2001) p53+/− hemizigoz nakavt farede hormonal karsinogenez mekanizmaları: Dietilstilbestrol ile çalışmalar . Toksikol Patol 29 : 155-160. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
56. Melnick RL, Kohn MC, Portier CJ (1996) Kimyasal karsinojenezin önerilen genotoksik olmayan mekanizmalarının risk değerlendirmesi için çıkarımlar . Çevre Sağlığı Perspektifi 104 : 123–134. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
57. Hall JM, Couse JF, Korach KS (2001) Östradiol ve östrojen reseptör sinyalleşmesinin çok yönlü mekanizmaları . J Biol Chem 276 : 36869-36872. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
58. Levin ER, Pietras RJ (2008) Meme kanserinde çekirdeğin dışındaki östrojen reseptörleri . Meme Kanseri Tedavisi 108 : 351–361. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
59. Turner AV, Kustrin SA, Glass BD (2007) Östrojen reseptörlerinde fitoöstrojen seçici bağlanmasının moleküler yönleri . J Pharm Sci 96 : 1879–1885. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
60. Zhao E, Mu Q (2011) Memeli üreme sistemi ve kanser bezi üzerindeki fitoöstrojen biyolojik etkileri . Bilim Eczanesi 79 : 1–20. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
61. Chrzan BG, Bradford PG (2007) Fitoöstrojenler, insan meme ve kemik kanseri hücre dizilerinde östrojen reseptörü beta-1 ve östrojenik tepkileri aktive eder . Mol Nutr Gıda Res 51 : 171–177. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
62. Mense SM, Remotti F, Bhan A, Singh B, El-Tamer M, et al. (2008) Östrojen maruziyetinin bir fonksiyonu olarak meme morfolojisinde östrojen kaynaklı meme kanseri değişiklikleri ve oksidatif stres . Toxicol Appl Pharmacol 232 : 78–85. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
63. Yasuda MT, Sakakibara H, Shimoi K (2017) Meme kanserinde östrojen ve stres kaynaklı DNA hasarı ve diyet flavinoid ile kemoprevensiyon . Genler Çevre 39 : 10-18. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
64. Hankinson SE, Eliassen AH (2007) Meme kanseri ile ilişkili endojen östrojen, testosteron ve progesteron seviyeleri . J Steroid Biochem Mol Biol 106 : 24–30. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
65. Aghel N, Kalantari H, Rezazadeh S (2011) Ficus carica yaprağı ekstresinin karbon tetraklorür ile sarhoş olan farelerde hepatoprotektif etkisi . İran J Pharm Res 10 : 63-68. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
66. Márquez SR, Hernández H, Flores JA, Gutiérrez M, Duarte G, et al. (2012) Fitoöstrojenlerin memeli üreme fizyolojisi üzerindeki etkileri . Tropikal Subtropikal Agroecosystems 15 : S129–S145. [ Google Akademik ]
67. Oliveira AP, Valentao P, Pereiva JA, Silva BM, Tavares F, et al. (2009) Ficus carica L.: Metabolik ve biyolojik tarama . Gıda Kimyasal Toksu 47 : 2841–2846. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
68. Lansky EP, Paavilainen HM, Pawlus AD, Newman RA (2008) Ficus spp. (şekil): Etnobotanik ve antikanser ve antiinflamatuar ajanlar olarak potansiyel . J Ethnopharmacol 119 : 195–213. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
69. Zhang Y, Wan Y, Huo B, Li B, Jin Y, et al. (2018) Ficus carica yapraklarının özleri ve bileşenleri, üçlü negatif meme kanseri MDA-MB-231 hücrelerinin hayatta kalmasını, hücre döngüsünü ve göçünü baskılar . Onco Hedefleri ve Tedavisi 11 : 4377-4386. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
70. Farooq A (2015) Östrojen reseptör ligandlarının yapısal ve fonksiyonel çeşitliliği . Curr Top Med Chem 15 : 1372-1384. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
71. Korach KS, Metzler M, McLachlan JA (1978) Bazı dietilstilbestrol metabolitleri ve analoglarının in vivo ve in vitro östrojenik aktivitesi . Proc Nat'l Acad Sciences 75 : 468-471. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
72. Liehr JG, DaGue BB, Ballatore AM, Henkin J (1983) Dietilstilbestrol (DES) kinin: DES metabolizmasında reaktif bir ara madde . Biochem Pharmacol 32 : 3711–3718. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
73. Liehr JG, DaGue BB, Ballatore AM (1985) Dietilstilbestrolün bir metabolik ara ürünü olan 4',4”-dietilstilbestrol kinin reaktivitesi . Karsinojenez 6 : 829-836. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
74. Chae K, Lindzey J, McLachlan JA, Korach KS (1998) Dietilstilbestrol, dietilstilbestrol-4',4”-kinon'un bir oksidatif metaboliti ile östrojene bağımlı gen düzenlemesi . Steroidler 63 : 149-157. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
75. Korach KS, McLachlan JA (1985) Dietilstilbestrol toksisitesinde östrojen reseptörünün rolü . Arch Toxicol Suppl 8 : 33–42. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
76. Fairbairn DW, Olive PL, O'Neill KL (1995) Kuyruklu yıldız tahlili: Kapsamlı bir inceleme . Mutat Res 339 : 37–59. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
77. Tice RR, Agurell E, Anderson D, Burlinson B, Hartmann A, et al. (2000) Tek hücreli jel/kuyruklu yıldız tahlili: İn vitro ve in vivo genetik toksikoloji testleri için kılavuzlar . Environ Mol Mutagen 35 : 206–221. [ PubMed ] [ Google Akademik ]

[maturidi]

İncir yaprağının ( Ficus carica Linn.) Enterococcus faecalis'e karşı antibakteriyel aktivitesi ve fibroblast hücreleri üzerindeki sitotoksisite etkileri

Intan Nirvana , ¹Devi Rianti , ¹ R. Helal Soekartono , ¹ Rr. Dwi Listyorini , ² ve Desi Putri Basuki ²
Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
Bu makale, PMC'deki diğer makaleler tarafından alıntılanmıştır .

¹ Dental Malzemeler Anabilim Dalı, Diş Hekimliği Fakültesi, Universitas Airlangga, Surabaya, Endonezya
² Diş Hekimliği Fakültesi Lisans Öğrencisi, Universitas Airlangga, Surabaya, Endonezya

Soyut
Arka fon:

Enterococcus faecalis , kanal tedavisi sonrası kanal ve pulpa enfeksiyonlarında yaygın olarak bulunan bakterilerden biridir. Sodyum hipoklorit en yaygın kullanılan kanal irrigasyonudur, ancak periradiküler dokulara maruz kaldığında toksik özelliklere sahiptir. Kanal irrigasyonu için alternatif geliştirilmesi gerekmektedir. İncir yaprağı ( Ficus carica Linn.) özütü, antibakteriyel etkileri ile bilinen flavonoid, tanen ve terpenoid gibi aktif maddeler içerir.

Amaç:

Bu çalışma , in vitro olarak incir yaprağı ( F. carica Linn.) ekstraktının E. faecalis'e karşı minimum bakterisit konsantrasyonunu (MBC) ve fibroblast hücreleri üzerindeki sitotoksisitesini belirlemeyi amaçlamıştır .

Malzemeler ve yöntemler:

Besleyici agar ortamında yetiştirilen E. faecalis üzerindeki incir yaprağı ekstraktının MBC'sini belirlemek için bir seri seyreltme yöntemi kullanıldı . İnokulasyon, minimum inhibitör konsantrasyondan (MIC), MBC'den, MIC ve MBC arasındaki konsantrasyondan ve kontrol gruplarından şüphelenilen konsantrasyonlarda farklı besleyici agar üzerinde gerçekleştirildi. E. faecalis'e karşı incir yaprağı ekstraktının MIC ve MBC'si, CFU/ml'de besleyici agar ortamında bakteri kolonilerinin büyümesi sayılarak biliniyordu. Elde edilen ekstrenin MIC ve MBC'sinin sitotoksisitesi 3- ( 4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyum bromür tahlili kullanılarak test edildi ve sonuçlar bir ELISA okuyucusu kullanılarak okundu. E. faecalis kolonilerinin verileri Kruskal-Wallis ve Mann-Whitney testi kullanılarak analiz edildi.

Sonuçlar:

Sonuç, gruplar arasında anlamlı bir farklılık gösterdi (p<0.05). incir yaprağı ekstresi %50 konsantrasyonda bakteri üremesi göstermemiş ve bu konsantrasyonda hücre canlılığı %77.7 olmuştur.

Çözüm:

İncir yaprağı ekstresi %50 MBC ile E. faecalis üzerinde antibakteriyel etkiye sahiptir ve fibroblast hücrelerine sitotoksik değildir.

Anahtar Kelimeler: Enterococcus faecalis , incir yaprağı ( Ficus carica Linn.) ekstresi, minimum bakterisit konsantrasyon, 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyum bromür tahlili
Git: giriiş


Diş hekimliğinde kanal tedavisi, kök kanal sistemi içindeki bakteri ve metabolik atıkları uzaklaştırarak pulpa hastalığı için bir tedavi seçeneğidir. Kök kanal sistemini temizlemek ve kapatmak için bir prosedür olan kanal tedavisi, patojenleri uzaklaştırmayı, yeniden enfeksiyonu önlemeyi ve iyileşme sürecinin gerçekleşmesini sağlamayı amaçlar [ 1 ]. Kanal tedavisinin en önemli basamağı irrigasyondur. İrrigasyon materyali bir debris çözücü görevi görür ve kök kanal hazırlığı sırasında alet hareketini kolaylaştırır [ 2 ]. İdeal kök kanal irrigasyon materyali, düşük yüzey gerilimine ve düşük toksisiteye sahip olmalı, ayrıca smear tabakası içermeyen, ucuz ve kullanımı kolay olmalıdır [ 3 ].

Kök kanallarında bulunan en yaygın bakteri Enterococcus faecali dir . Bu bakteriler genellikle başarısız kök kanal tedavisinde bulunur. E. faecalis bakterisinin kök kanal yetmezliğindeki prevalansı %38'e ulaştı [ 4 ].

Kök kanal tedavisinde yaygın olarak kullanılan irrigasyon materyali, periradiküler doku ile temas ettiğinde toksik hale gelmesi gibi bazı zayıf yönleri olan sodyum hipoklorittir. Sodyum hipoklorit hem Gram pozitif hem de negatif bakterilere, sporlara, mantarlara ve virüslere karşı antimikrobiyaldir [ 5 ]. Bununla birlikte, NaOCl'nin organik dokuyu çözmek için optimal özelliği seçici değildir, yani özellikle yüksek konsantrasyonlarda hem nekrotik hem de hayati pulpa kalıntılarını ayırt edilemez şekilde çözebilir . İn vitro çalışmalar %0.5 sodyum hipokloritin daha uzun bir inkübasyon süresine sahip olduğunu göstermiştir. E. faecalis'in yok edilmesinde diğer sulama bileşenlerinden daha fazla [ 6 ].

incir yaprağı, E. faecalis direncinin doğası gereği alternatif bir tedavi olarak kullanılabilir . İncir yaprağı, antioksidan, antikanser, anti-inflamasyon, antiviral ve antibakteriyel [ 8 ] gibi biyolojik aktiviteleri olan flavonoidler, tanenler, seskiterpenler, alkaloidler ve saponinler [ 7 ] gibi çeşitli aktif bileşikler içerir . Yine de kök kanal irrigasyon materyali adayı olarak incir yaprağı ekstresi biyouyumluluk şartını sağlamalıdır, bu nedenle konak dokuya uygulanan materyal hasar veya yaralanmaya neden olmaz. Sitotoksisite değerlendirmesi, malzemelerin biyouyumluluk değerlendirmesi için bir ön koşuldur [ 9 - 12]. Bu nedenle, bir ajanın sitotoksisitesi, hücre kültüründe bir materyalin veya ekstraktının toksikolojik riskleri olarak tanımlanabilir [ 11 , 13 ]. Malzeme ve bileşenleri arasındaki hücre ile etkileşim, iltihaplanma ve nekroz gibi doku reaksiyonlarına neden olacaktır [ 14 ]. Ficus carica Linn'in sitotoksisite değerlendirmesi . diş eti ve oral mukoza bağ dokusu ile yakın temas nedeniyle kanal sulama materyali olarak yaprak özü vazgeçilmezdir [ 9 ].

Ayrıca, bir bitkinin terapötik ajan adayı olarak güvenliği sağlanmalı ve yan etkileri konakçı tarafından kabul edilebilir olmalıdır. Konak üzerinde toksik etkisi olmayan veya daha az toksik etkiye sahip olan biyoaktif bileşikler, ilaç formülasyonları için iyi adaylar olarak kabul edilebilir [ 15 ]. Bu nedenle tıbbi bitkilerin sitotoksik seviyeleri konukçu hücrelere karşı da değerlendirilmelidir.

E. faecalis , dentin tübüllerinde kolonize olabilen ve diğer bakterilerin desteği olmadan kök kanalında yaşayabilen bir bakteridir [ 16 ]. Bununla birlikte, önceki araştırmalar, E. faecalis için incir yaprağı ekstraktının minimum bakterisidal konsantrasyonunu (MBC) hala bilmiyorlardı .

Yukarıdaki açıklamaya dayanarak, kök kanal irrigasyon malzemelerine alternatif olarak E. faecalis'e karşı antibakteriyel ajan olarak incir yaprağı ekstraktının aktivitesi üzerine bir araştırma yapılması gerekmektedir. Bu araştırma , in vitro olarak incir yaprağı ekstraktının E. faecalis'e karşı MBC'sini ve fibroblast hücresine karşı sitotoksisitesini belirlemeyi amaçlamıştır .

Git: Malzemeler ve yöntemler
etik onay
Tüm işlemler, Universitas Airlangga Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır (numara 248/KKEPK.FKG/X/2016).

Araştırma materyalleri

İncir yaprağı ekstresinin ( F. carica Linn.) E. faecalis'e karşı MBC'sini belirlemek için kullanılan malzemeler , incir yaprağı ekstresi, %96 etanol, E. faecalis bakterisi, Beyin Kalp İnfüzyon Broth (BHIB) ve besleyici agar (Oxoid CM0003) idi. ).

MTT testi için kullanılan malzemeler 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyum bromür, %10 fetal bovin serumu (FBS), 100 birim/ml fungizon, dimetil sülfoksit (DMSO) idi. , insan dişeti fibroblast hücreleri (birincil kültür), Eagle'ın minimum esansiyel ortamı (EMEM), kanamisin ve fosfat tamponlu salin. Araştırma Yöntemleri


Bitki materyalinin hazırlanması

İncir yaprağı kriterleri, incir ağacının tepesinden yaklaşık olarak beşinci yapraktan vb. toplanabilen 4-6 aylık yeşil Jordan türleridir. incir yaprağı ekstresi, %96 etanol solventi ile maserasyon yöntemi kullanılarak hazırlanmıştır.

İncir yaprağı ekstresinin fitokimyasal taraması

Fitokimyasal taramada, aşağıdaki aktif bileşen grupları araştırıldı: Flavonoidler, terpenoidler, saponinler, tanenler ve alkaloidler.

flavonoidlerin tanımlanması

1 ml ekstrakte yaklaşık 1 ml %10 kurşun asetat çözeltisi ilave edildi. Sarı bir çökelti oluşumu, flavonoidlerin varlığı için pozitif bir test olarak alındı.

terpenoidlerin tanımlanması

Yaklaşık 2 ml özüt, 2 ml CHCI3 içinde çözündürüldü _ve kuruyana kadar buharlaştırıldı. _{Daha sonra 2} ml H2S04 ilave edildi ve yaklaşık ₂ dakika ısıtıldı. Grimsi bir rengin gelişmesi, terpenoidlerin varlığını gösterir.

Saponinlerin tanımlanması

Yaklaşık 5 ml ekstrakt bir test tüpünde 5 ml distile su ile kuvvetlice çalkalandı ve ısıtıldı. Stabil köpük oluşumu, saponinlerin varlığının bir göstergesi olarak alınmıştır.

tanenlerin tanımlanması

Yaklaşık 2 ml özüt, 2 ml damıtılmış su ile karıştırıldı ve birkaç damla demir klorür (FeCl3 ₎ çözeltisi ilave edildi. Yeşil çökelti oluşumu, tanenlerin varlığının bir göstergesiydi.

alkaloitlerin tanımlanması

Yaklaşık 3 ml özüt, buhar banyosu üzerinde 3 ml %1 HC1 ile karıştırıldı. 1 ml karışım ayrı ayrı iki deney tüpüne alındı. Bir tüpe birkaç damla Dragendorff reaktifi eklendi ve turuncu-kırmızı çökelme oluşumu pozitif olarak alındı. İkinci tüpe Mayer reaktifi eklendi ve devetüyü renkli çökelti görünümü alkaloidlerin varlığı açısından pozitif bir test olarak alındı [ 17 ].

E. faecalis'in hazırlanması

E. faecalis , Universitas Airlangga Diş Hekimliği Fakültesi mikrobiyoloji laboratuvarının E. faecalis stokundan steril bir aşılama öznesi kullanılarak alındı ve BHIB sıvı ortamını içeren bir test tüpüne konuldu. E. faecalis kültürleri anaerobik bir atmosfer altında anaerobik kavanoza konuldu ve daha sonra bulanıklığının 0,5 McFarland (10 ⁸ CFU/ml ) standardına eşitlenmesi için 24 saat 37°C'lik bir oda sıcaklığında bir inkübatörde inkübe edildi. ).

Minimum inhibitör konsantrasyonu (MIC) ve MBC tayini

MIC, bir gece boyunca inkübe edildikten sonra bir mikroorganizmanın görünür büyümesini engelleyebilen bir antimikrobiyal ajanın en düşük konsantrasyonudur [ 18 ]. İncir yaprağı ekstraktının seri dilüsyonları %100, %50, %25, %12.5, %6.25, %3.125, %1.565 ve %0.781 konsantrasyonlarında makrodilüsyon tüplerinde yapılmıştır. ^{0,5 McFarland standardının (10 8} CFU/mL) bulanıklığına uyacak şekilde logaritmik faz büyümesine ayarlanmış E. faecalis süspansiyonları tüm tüplere 0.1 mL kadar ilave edildi ve tüpler daha sonra 37°'de inkübe edildi. 24 saat C.

Her tüp bakteri üremesi açısından incelendi ve kontrol ile karşılaştırıldı. Pozitif kontrol tüpü, 0.1 ml'ye kadar 0.5 McFarland (10 ⁸ CFU/mL) ve BHIB ortamı içeren standartlaştırılmış bir E. faecalis süspansiyonu ile dolduruldu. Negatif kontrol tüpü BHIB ortamı ile dolduruldu. E. faecalis'in büyümesi üzerine incir yaprağı ekstraktının seyreltme serisinin sonucu, bulanıklık veya tortu varlığı ile karakterize edildi. Bakteri üremesinin olmaması antibakteriyel aktivite olarak tanımlandı.

MBC, belirli bir bakteriyi öldürmek için gereken incir yaprağı ekstresinin en düşük konsantrasyonudur. MBC testi için iki kez altı dilüsyon gerçekleştirilmiştir. 24 saat inkübe edildikten sonra tüpler MIC için analiz edildi ve ardından tüm makroskopik olarak berrak tüplerden (MBC testinde değerlendirilecek seviyeler için MIC'in altında dilüsyon kullanıldı) ve ilk bulanık tüp örneklenerek MBC belirlendi. dizide. 0.1 mL'ye kadar olan süspansiyon, nütrient agar (Oxoid CM0003) plakalarına aşılandı. Plakalar 24 saat 37°C'de inkübe edildi. Her deney 3 kez gerçekleştirildi ve kontrol [ 19 ] ile ilişkilendirildi. Elde edilen MIC ve MBC, MTT testi kullanılarak sitotoksisite testi için kullanılacaktır.

In vitro sitotoksisite MTT testi

Sitotoksisite MTT yöntemi ile değerlendirildi. İnsan dişeti fibroblast hücre kültürü ve 96 steril kuyucuklu mikroplakalar laminer akışta hazırlandı. Mikroplakaların ilk kolonundaki kuyular, kontrol ortamı olarak kullanılan EMEM, Kanamisin, %1 penstrep, %10 FBS ve 100 birim/ml fungizon ile 100 µl kadar dolduruldu. ^{Mikroplakaların ikinci kolonundaki kuyular, EMEM, kanamisin, % 1} penstrep, %10 FBS ve kontrol hücresi olarak 100 ul'ye kadar 100 birim/ml fungizon içinde 3x103 yoğunluğa sahip fibroblast hücreleri ile dolduruldu . MİK değeri %37.5, MBC değeri %50 olan incir yaprağı ekstresi UV sterilizatörü kullanılarak sterilize edilmiş ve ^3. ve 4. ^kolonlardaki her bir kuyucuğa 50 µl kadar eklenmiştir. Her tedavi farklı bir kuyuda 10 kez tekrarlandı.

Mikroplakalar, 20 saat boyunca 37°C'de %5 CO2 ile inkübe edildi _. Mikroplakalar daha sonra inkübasyon cihazından çıkarılırken, bu kuyulardaki kültür ortamı ve incir yaprağı ekstresi bir şırınga ile alındı. Yine de fibroblast hücreleri kuyularda kaldı. Daha sonra, her bir oyuk, 100 ul kültür ortamı ile yeniden dolduruldu. Her kuyucuğa 0.20 µm'lik bir milipor kullanılarak filtre edilmiş yirmi mikrolitre MTT solüsyonu ilave edildi. Plakalar 4 saat daha inkübe edildi ve ortam çıkarıldı. Formazan kristallerini çözmek için her bir oyuğa elli mikrolitre DMSO ilave edildi. Formazanın optik yoğunluk (OD) değeri Elisa okuyucu tarafından 620 nm dalga boyunda okunmuştur. Hücre canlılığının yüzdesini değerlendirmek için aşağıdaki formül kullanıldı [ 20 ].



Absorbans kontrolü, %1 DMSO ile tedavi edilen hücrelerin absorbansı iken absorbans numunesi, test numunesi ile muamele edilen hücrelerin absorbansıdır.

Bu araştırmanın sonuçları parametrik olmayan bir test, Kruskal-Wallis testi ve ardından Mann-Whitney kullanılarak test edildi.

Git: Sonuçlar

İncir yaprağı ekstraktının fitokimyasal taraması

İncir yaprağı ekstraktının fitokimyasal taraması flavonoidler, terpenoidler ve tanenler üzerinde olumlu sonuçlar verirken saponin ve alkaloid üzerinde olumsuz sonuçlar göstermiştir.

İncir yaprağı ekstraktlarının antibakteriyel aktivitesi

Bu araştırmanın sonuçları, incir yaprağı ekstraktının %25'lik bir konsantrasyonda MİK olarak kabul edildiğini, MBC'nin ise %50'lik bir konsantrasyonda olduğunu göstermiştir. Sonuç olarak, %50 ile %25 arasında, yani %37,5'lik bir konsantrasyon kullanılarak MBC'nin doğruluğunu belirlemek için daha fazla araştırma yapılmıştır. İncir yaprağı ekstraktının %50 konsantrasyonunda E. faecalis büyümesi görülmezken , %37.5 ve %25 konsantrasyonunda E. faecalis büyümeye devam etmektedir (Şekil 1). %37.5 konsantrasyonda incir yaprağı ekstresi, E. faecalis kolonilerinin sayısının %25 konsantrasyona göre daha düşük olduğunu göstermiştir. Bu nedenle %37,5'lik konsantrasyon MİK olarak kabul edildi. Bu nedenle sitotoksisite testi %37.5 ve %50 konsantrasyonda yapıldı. E. faecalis'in ortalama ve standart sapması şu şekilde sunulmuştur:Tablo 1.


Şekil 1
(a) %50, (b) %37.5, (c) %25, (d) hücre kontrolü , ( e) medya kontrolü. Tablo 1


Enterococcus faecalis kolonisinin ortalama ve standart sapması .

bir - %50	3	0	0
b - %37,5	3	13,0000 a	2.000.000
c - %25	3	28,0000 b	9.53939
d - hücre kontrolü	3	139,3333 y	34.67468
e - medya kontrolü	3	0	0

Ayrı bir pencerede aç
Aynı sütunda farklı harflerle üst simge anlamlı farklılık göstermektedir (p<0.05). SD=Standart sapma Ekstraktların fibroblast hücre kültürü üzerindeki sitotoksisite aktivitesi


Sonuçlar, %37.5 konsantrasyonda incir yaprağı ekstraktının %97.6 hücre canlılığına sahip olduğunu, ancak daha yüksek konsantrasyonda (%50) %77.7 hücre canlılığına sahip olduğunu göstermiştir. Bu çalışma, fibroblast hücre kültürü üzerinde test edilen konsantrasyonda toksisite göstermedi. OD'nin ortalama ve standart sapması şu şekilde sunulur:Tablo 2. OD değeri ne kadar yüksek olursa, hücrenin canlılığı o kadar yüksek olur. Tablo 2


MTT testinin ortalama ve standart sapması.

%37.5	10	0,5516 bir	97.6	0.01386	0.000*
%50	10	0,4394 b	77.7	0.02036
hücre kontrolü	10	0,5650 c		0.03708

Ayrı bir pencerede aç
Aynı sütunda farklı harflerle üst simge anlamlı farklılık gösterdi (p<0.05). SD=Standart sapma, MTT=3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyum bromür, OD=Optik yoğunluk

Git: Tartışma

İncir yaprağı ekstraktlarının antibakteriyel aktivitesi

Bu çalışma, incir yaprağı ekstraktlarının E. faecalis için sırasıyla %37.5 ve %50 konsantrasyonlarında MIC ve MBC'ye sahip olduğunu göstermiş ve aşağıdaki tabloda sunulmuştur.Tablo 1. İncir yaprağı ekstrelerinin antibakteriyel aktiviteye sahip olduğunu kanıtlıyor. Bitkisel özleri antibakteriyel olarak kullanan bazı çalışmalar, antibakteriyel aktivitenin flavonoidler, tanenler ve terpenoidlerin içeriğinden kaynaklandığını düşündürmektedir. Bu çalışmada incir yaprağı ekstrelerinin fitokimyasal taramasına dayanarak, flavonoidler, tanenler ve terpenoidler gibi aynı aktif bileşenleri içerir. Bu aktif bileşiklerin kendi mekanizmaları vardır [ 7 ]. Antimikrobiyal aktiviteye sahip olduğu kanıtlanmış flavonoidler, tanenler ve terpenoid gibi bileşiklerin varlığı dikkate alındığında, ekstraktların antimikrobiyal aktivitesinin bunların varlığı ile ilişkili olabileceği sonucuna varılmıştır. Bileşikler. MBC ile ilgili olarak, değer %50 idi.

Flavonoidlerin antibakteriyel mekanizmaları, nükleik asit sentezini inhibe etmek, enerji metabolizmasını inhibe etmek ve sitoplazmik membran fonksiyonunu bozmaktı [ 21 ]. Benzer araştırma, bakteri hücrelerinin membran akışkanlığını azaltarak antibakteriyel aktivite ile membran etkileşimi arasında bir korelasyon olduğunu gösterdi [ 22 ]. İncir yaprağı içeren flavonoidler nedeniyle bakteri zarlarındaki lipozomlar, küçük moleküllerin intralipozomal boşluktan sızdığını ve lipozomların birikmesini, bakteriyel membran hasarına yol açtığını gösterebilir [ 21 ].

Antibakteriyel olarak flavonoidlerin çoklu hücresel hedefleri vardır. Flavonoidler, hidrojen bağı ve hidrofobik etkiler gibi spesifik olmayan kuvvetler yoluyla ve ayrıca kovalent bağ oluşumu oluşturarak proteinlerle kompleks oluşturabilirler. Bu nedenle, antimikrobiyal etki biçimleri, mikrobiyal adezinleri, enzimleri, hücre zarfı taşıma proteinlerini ve benzerlerini inaktive etme yeteneği ile ilgili olabilir. Lipofilik flavonoidler ayrıca mikrobiyal membranları parçalama yeteneğine de sahiptir [ 23 ]. Önceki araştırmalar, bakterilerde oksijen tüketiminde enerji güçlü bir şekilde inhibe edildiğinden flavonoidlerin enerji metabolizmasına müdahale edebileceğini gösterdi [ 24 ].

Ayrıca, bakteriler için toksik bir bileşik olarak kabul edilen tanenler, hücre duvarlarını bağlayabilir, büyümelerini ve proteaz aktivitelerini önleyebilir [ 25 ]. Tanenler, bakteri hücrelerinde proteinlerle hidrojen bağları oluşturarak bakterilerin büyümesini engelleyebilir ve bu da protein denatürasyonuna neden olur ve böylece bakteri metabolizması bozulur. Tanenler ve proteinler arasında hidrojen bağlarının oluşumu, protein moleküllerinin şeklinde biyokimyasal aktivitelerini azaltabilecek değişikliklere yol açabilir. Tanenler ayrıca bakterilerin büyümesini engelleyebilir ve bakterilerin hücre zarında bulunan fosfolipidlerle reaksiyona girerek onları öldürebilir, membran hasarını ve önemli metabolit sızıntısını tetikleyerek inaktif bir bakteriyel enzim sistemi ile sonuçlanarak büyümenin inhibisyonuna ve bakteri ölümüne neden olabilir [ 26 ].]. Bu arada terpenoid bileşiğinin bakterilere karşı da aktif olduğu bilinmektedir. Terpenoidlerin antibakteriyel aktivitesinin, lipofilik bileşikler tarafından tetiklenen membran bozulmasını içerdiği düşünülmektedir [ 25 ].

İncir yapraklarındaki flavonoidler, tanenler ve terpenoid bileşikler, ilgili mekanizmaları ile ayrıca E. faecalis'e karşı sinerjik olarak çalışırlar . Bu mekanizma, E. faecalis'in fizyolojik aktivitesinin azalmasını tetikleyerek E. faecalis büyümesinin inhibe olmasına ve E. faecalis'in ölümüne neden olabilir. E. faecalis kök kanalındaki en dirençli bakteri olmasının yanı sıra kök kanal yetmezliği nedenlerinden biridir.

E. faecalis için %50 MBC değerine sahip incir yaprağı ekstresi kanal irrigasyon materyali adayı olarak kullanılacaktır. Sitotoksisite testi, bazı bitki bileşikleri normal sistemimiz için toksik olduğundan, diş hekimliği için uyumlu bileşenlerden biri olan, öngörülen gerekliliklere uymak için yapılmalıdır; bu nedenle, yeni ilaçların geliştirilmesinde güvenlik kritik öneme sahiptir [ 15 ].

Ekstraktların fibroblast hücre kültürü üzerindeki sitotoksisite aktivitesi

Hücre kültüründeki sitotoksisite tipik olarak LC50 olarak ifade edilir , bu, belirli bir ajanın konsantrasyonunun hücrelerin % _50'si için öldürücü olduğu anlamına gelir. Ayrıca, hücre kültüründe sitotoksisiteyi tanımlamanın en yaygın yolu, kültürde test edilen hücrelerin yarısını öldüren bir ilacın konsantrasyonu olan LC50'dir [ ₂₇ ] .

Bu araştırmada, incir yaprağı ekstraktının %37,5 ve %50 konsantrasyonlarındaki sitotoksik etkileri, MTT tahlili kullanılarak insan dişeti fibroblastı üzerinde incelenmiştir. Sonuçlar, incir yaprağı ekstraktının sitotoksik etkisinin olmadığını gösterdi. 24 saatlik maruziyetten sonra MIC'de (%37.5) hücre canlılığı yüzdesi %97.6 iken MBC'de (%50) %77.7 idi (Tabel-2).

%50 konsantrasyonda incir yaprağı özütü sitotoksik değildi ancak E. faecalis'i öldürme yeteneğine sahip olduğundan, bir kök kanalı irrigasyon materyali adayı olarak daha fazla araştırılma potansiyeline sahiptir. Biyomedikal uygulamalarını uygun deneysel modeller aracılığıyla ayrıntılı bir mekanizma ile araştırmak için daha ileri çalışmalar tasarlanacaktır.

Git: Çözüm


%50 konsantrasyondaki incir yaprağı ekstraktının E. faecalis'e karşı antibakteriyel aktiviteye sahip olduğu ve fibroblast hücreleri için toksik olmadığı sonucuna varılabilir .

Git: Yazar katkıları

IN, araştırma çalışması planını ve bir araştırma koordinatörü tasarlamıştır. RDL ve DPB veri toplama işlemini gerçekleştirdi. DR ve RHS laboratuvar çalışmasına katıldı ve sonuçları analiz etti. Tüm yazarlar son makaleyi okudu ve onayladı.

Git: Teşekkür


Yazarlar, tüm araştırma olanaklarını sağladıkları için Endonezya, Surabaya, Universitas Airlangga'daki Diş Hekimliği Fakültesine müteşekkirdir. Bu çalışma herhangi bir dış finansman almamıştır.

Git: Rekabetçi İlgi Alanları


Yazarlar, rekabet eden çıkarları olmadığını beyan eder.

Git: Referanslar

1. Carrotte P. Endodonti Bölüm 1 kök kanal tedavisinin modern kavramları. Br. diş. J. 2004; 197 :181–183. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
2. Estrela C, Holland R, Estrela CRA, Alencar AHG, Sousa-Neto MD, Pécora JD Başarılı kök kanal tedavisinin karakterizasyonu. Braz. diş. 2014 ; 25 :3–11. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
3. Jaju S, Jaju PP Ufukta daha yeni kök kanal irrigantları: Bir inceleme. Int. J. Dent. 2011; 2011 :1–10. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
4. Rôças IN, Siqueira JF Tedavi sonrası hastalıklı kök kanal tedavili dişlerin mikrobiyotasının karakterizasyonu. J. Clin. Mikrobiyol. 2012; 50 :1721–1724. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
5. Vidana R, Sullivan A, Billstrom H, Ahlquist M, Lund B. Kök kanallarında Enterococcus faecalis enfeksiyonu konakçı kaynaklı mı yoksa eksojen kaynaklı mı? Lett. Uygulama Mikrobiyol. 2011; 52 :109–115. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
6. Borzini L, Condò R, De Dominicis P, Casaglia A, Cerroni L. Kök kanal sulama: Enterococcus faecalis'e karşı kimyasal maddeler ve bitki özleri . diş. J.2016 ; 10 :692–703. [ Google Akademik ]
7. Tchombe LN, Louajri A. Ficus carica yapraklarının terapötik etkileri : Kısa bir inceleme. ARPN J. Sci. Teknoloji. 2015; 5 :37-41. [ Google Akademik ]
8. Badgujar SB, Patel VV, Bandivdekar AH, Raghunath T. Mahajan Ficus carica'nın geleneksel kullanımları, fitokimyası ve farmakolojisi : Bir inceleme. Eczacılık Biol. 2014; 52 :1487–1503. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
9. Soares DG, Brito CA, Tavares RH, Ribeiro AP, Hebling J, Costa CA Dentin yüzeylerinde uygulama protokollerine göre HEMA içermeyen rezin bazlı yapıştırma simanlarının sito-uyumluluğu. Int. Endod. J.2016 ; 49 :551–560. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
10. Siqueira PC, Magalhães AP, Pires WC, Pereira FC, Silveira-Lacerda EP, Carrião MS, Bakuzis AF, Estrela C. Gümüş nanopartiküller içeren cam iyonomer çimentolarının sitotoksisitesi. J. Clin. Tecrübe. diş. 2015; 7 :622–627. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
11. Elias ST, Santos AF, Garcia FC, Pereira PN, Hilgert LA, Fonseca-Bazzo YM, Ribeiro APD Polimerizasyon süresine göre üniversal, self-etch ve etch-and-runse adeziv sistemlerinin sitotoksisitesi. Braz. diş. 2015 ; 26 :160–168. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
12. Demirci M, Hiller KA, Bosl C, Galler K, Schmalz G, Schweikl H. Dental adezivler tarafından oksidatif stres, sitotoksisite ve genotoksisite indüksiyonu. diş. Anne. 2005; 24 :362–371. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
13. Cao T, Saw TY, Heng BC, Liu H, Yap AU, Ng ML Kompozit reçinelerin sitotoksisitesinin değerlendirilmesi için farklı test modellerinin karşılaştırılması. Uygulama Toksikol. J.2005 ; 25 :101–108. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
14. Akhavan A, Arbabzadeh F, Bouzari M, Razavi SM, Davoudi A. Dentin yapıştırıcıları ve mineral trioksit Agrega ile doğrudan pulpa kaplamasının ardından pulpa yanıtı;An Animal Stud. İran. Endod. J.2017 ; 12 :226–230. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
15. Morobe IC, Mthethwa NS, Bisi-Johnson MA, Vasaikar SD, Obi CL, Oyedeji AO, Hattori T. Güney Afrika'dan aktif tıbbi bitki özlerinin sitotoksik etkileri ve güvenlik profilleri. J. Mikrobiyol. Araş. 2012; 2 : 176–182. [ Google Akademik ]
16. Cogulu D, Uzel A, Oncag O, Aksoy SC, Eronat C. Kültür ve polimeraz zincir reaksiyonu yöntemleri ile nekrotik kök kanallarında Enterococcus faecalis'in tespiti . Avro. J. Dent. 2007; 1 :216–221. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
17. Bargah RK Moringa pterygosperma Gaertn'in ham etanolik ve sulu ekstraktının fitokimyasal taramasının ön testi . J. Ecz. Bitki kimyası. 2015; 4 :7–9. [ Google Akademik ]
18. Kaya O, Akçam F, Yaylı G. Çeşitli antibiyotiklerin Brucella melitensis suşlarına karşı in vitro aktivitelerinin araştırılması. Türk. J. Med. bilim 2012; 42 :145-148. [ Google Akademik ]
19. Yılmaz MT Bor bileşiklerinin çeşitli bakteri suşlarına karşı minimum inhibitör ve minimum bakterisit konsantrasyonları. Türk. J. Med. bilim 2012; 42 :1423–1429. [ Google Akademik ]
20. Reddy NR, Abraham AP, Murugesan K, Matsa V. Nikel-krom dental döküm alaşımlarının elementel salınımı ve sitotoksisitesinin in vitro analizi. J. Hint. protez. Soc. 2011; 11 :106–112. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
21. Cushnie TP, Lamb AJ Flavonoidlerin antimikrobiyal aktivitesi. Int. J. Antimikrobiyal. Ajanlar. 2005; 26 :351–352. [ Google Akademik ]
22. Nazzaro F, Fratianni F, De Martino L, Coppola R, De Feo V. Uçucu yağların patojenik bakteriler üzerindeki etkisi. İlaç. 2013; 6 :1451–1474. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
23. Mishra AK, Mishra A, Kehri HK, Sharma B, Pandey AK Hint baharat bitkisi Cinnamomum zeylanicum'un Alternaria solani ve Curvularia lunata'ya karşı patojenik dematia kalıplarına karşı inhibitör aktivitesi. Anne. Klinik. Mikrobiyol. Antimikrobiyal. 2009; 8 :1–7. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
24. Anitha J, Jayraaj IA İn vitro antibakteriyel aktivite ve solucan tozundaki (eudrilus eugeniae) flavonoid ve fenolün değerlendirilmesi World J. Pharm. Eczacılık bilim 2013; 2 :4917–4928. [ Google Akademik ]
25. Działo M, Mierziak J, Korzun U, Preisner M, Szopa J, Kulm A. Cilt bozukluklarının önlenmesi ve tedavisinde bitki fenoliklerinin potansiyeli. Int. J. Mol. bilim 2016; 17 :1–41. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
26. Mailoa MN, Mahendradatta M, Laga A, Djide N. Guava yapraklarından ( Psidium guajava L) tanenlerin mikrobiyal patojenler üzerindeki antimikrobiyal aktiviteleri. Int. J. Sci. Teknoloji. Araş. 2014; 3 :236–239. [ Google Akademik ]
27. Zhang M, Aguilera D, Das C, Vasquez H, Zage P, Gopalakrishnan V, Wolff J. Measuring sitotoksisite: LC50'ye yeni bir bakış açısı. Antikanser Araş. 2007; 27 :35–38. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
28. Nemudzivhadi V, Masoko P. Ricinus communis ( Euphorbiaceae ) yaprak ekstraktlarının sitotoksisite, antioksidan ve anti-inflamatuar aktivitelerinin in vitro değerlendirmesi. Kötü. Tabanlı Tamamlayıcı Alternatif. Med. 2014; 2014 :1–8. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]

[maturidi]

İncir ( Ficus carica L.) yaprak çayı, IgE-reseptör komplekslerinin hızlanarak demontajını sağlayarak alerjiyi bastırır


Tatsuya Abe
Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry , Cilt 84, Sayı 5, 3 Mayıs 2020, Sayfa 1013–1022, https://doi.org/10.1080/09168451.2020.1722608
Yayınlanan:

03 Mayıs 2020

• Bölünmüş Görünüm
• Anmak
• İzinler Simgesi izinler
• Paylaşmak

Soyut

Bu çalışmada incir ( Ficus carica L.) yapraklarından yapılan çayın alerji baskılayıcı etkisini araştırdım . Sıçan bazofil hücre hattı RBL-2H3'te, degranülasyon, incir çayı ile aynı zamanda IgE antikorlarının eklenmesiyle (hassaslaştırma) işleme tabi tutularak önemli ölçüde baskılanmıştır. İncir çayı ile muamele süresine bağlı olarak hücre yüzeyine bağlı IgE ortamda serbest bırakıldı. Bu nedenle, incir çayının etki mekanizmasının, IgE'nin FceRI reseptörlerinden ayrılmasını teşvik ettiği öne sürülmüştür. Böyle bir mekanizma gıda maddelerinde yenidir. Farelere oral uygulamada incir çayı, alerjik dermatit üzerinde engelleyici bir etki göstermiştir. Ayrıca, NC/Nga farelerinde bir atopik dermatit modelinin kullanıldığı testlerde, incir çayının sürekli uygulanması, antijen uygulamasından sonra semptom alevlenmesini bastırdı.

Kısaltmalar
AD: atopik dermatit; β-Heks: β-heksosaminidaz; FCM: akış sitometrisi; OA: oral uygulama; TA: transdermal uygulamaİncir çayı ile baskılama alerjisi şeması

Yeni sekmede açSlaytı indirİncir ( Ficus carica L. ) çayı , tip 1 alerji , ige antikoru , FceRI reseptörü , atopik dermatit
Ders
Gıda ve Beslenme Bilimi
Sorun Bölümü:
Madde
Alerji, uygunsuz veya aşırı bağışıklık reaksiyonunun neden olduğu fiziksel bir bozukluktur. Alerjisi olan hasta sayısı her yıl artmakta ve dünya çapında ciddi bir sağlık sorunu haline gelmektedir [ 1 ]. Yardımcı T1 (Th1) hücreleri ile Th2 hücreleri arasındaki dengenin alerjik semptomların gelişimi için önemli olduğu düşünülmektedir. Bu hücreler, aktive edilmiş saf T hücrelerinden (Th0) farklılaşır. Th0 hücrelerinin Th1 veya Th2 hücrelerine farklılaşıp farklılaşmadığı sitokinler ve lipid aracıları tarafından kontrol edilir. İnterlökin 12 (IL-12) ve interferon y (INF-y), Thl hücrelerine farklılaşmayı destekler. IL-4, IL-13 ve prostaglandin E2 (PGE 2) Th2 hücrelerine farklılaşmayı destekler [ 2 , 3]. Th1 hücreleri, INF-y ve IL-2 gibi sitokinler üreterek hücre aracılı bağışıklığı aktive eder. Oysa Th2 hücreleri, IL-4, IL-5 ve IL-13 üreterek IgE antikor sentezini aktive eder. Alerjik hastalarda, Th2 hücrelerinin baskın bir durumu koruduğu ve IgE'nin aşırı üretildiği varsayılır [ 4 – 6 ].

Saman nezlesi ve bronşiyal astım gibi ani tip (tip I) alerji, esas olarak IgE antikorlarının neden olduğu bir alerjidir. Mukoza zarlarındaki mast hücreleri ve periferik kandaki bazofil hücreler, hücre yüzeyinde transmembran tipi yüksek afiniteli bir IgE reseptörü olan FceRI'yi eksprese eder. Alerjene özgü bir IgE antikoru, hücre yüzeyindeki FceRI'ye bağlandığında, duyarlı hale gelir. Duyarlı hücrelerde FceRI reseptörlerinin ekspresyon seviyesi artar ve hücrelerde histamin ve lökotrien gibi kimyasal mediyatörler birikir.]. Alerjen, reseptörlere bağlı antikorları çapraz bağlayan yeniden istila eder ve uyaran hücreye aktarılır. FceRI'yi çapraz bağlayarak, tirozin fosforile edilmiş Lyn, immünoreseptör tirozin bazlı aktivasyon motiflerini (ITAM'ler) ve Syk'yi fosforile eder. ^{Syk'nin fosforilasyonu, MAP kinazın aktivasyonu ve hücre içi Ca2 +} konsantrasyonunun yükselmesi yoluyla hücrelerden kimyasal aracıların salınmasını (degranülasyon) destekler [ 11 – 13 ]. Salınan kimyasal aracılar ödem, kan basıncının düşmesi ve ürtiker gibi alerjik semptomlara neden olur [ 14 ].

Tip I alerji, IgE antikor üretimi, antikor-reseptör bağlanması, hücre içi sinyal iletimi ve kimyasal aracılara duyarlılığın azalması gibi her bir reaksiyon adımının inhibisyonu ile baskılanır. Bu mekanizmaları uygulayan çeşitli anti-alerjik ilaçlar geliştirilmiştir. Suplatasttosilat, Th2 hücrelerinde IL-4 ve IL-5 üretimini baskılayarak B hücrelerinden IgE antikorlarının üretimini baskılar [ 15 ]. Bir anti-IgE antikoru olan omalizumab, serbest IgE antikorlarını yakalayarak FceRI'ye bağlanmayı inhibe eder [ 16 ]. Sodyum kromoglikat ve pemirolast, fosfodiesteraz ve fosfolipaz C'nin aktivitesini inhibe eder, böylece mast hücrelerinde yüksek Ca2 ⁺ konsantrasyonunu baskılar ve degranülasyonu baskılar [ 17 , 18 ]]. Loratadin, oksatomid ve montelukast sodyum gibi histamin ve lökotrien antagonistleri, reseptörlere antagonist olarak bağlanır ve alerjiyi inhibe eder. Benzer şekilde alerjileri baskılayan veya hafifleten fonksiyonel gıdalar da geliştirilmiş ve pratik olarak uygulanmıştır. “Benifuki” çayında bulunan metillenmiş kateşin, Lyn ve Syk'in fosforilasyonunu inhibe ederek ve FceRI ekspresyonunu baskılayarak alerjiyi bastırır [ 19 – 21 ]. Ayrıca belirli laktik asit bakterilerinin ( Lactobacillus plantarum ) yutulmasının Th1/Th2 dengesini iyileştirdiği, IgE antikor üretimini azalttığı ve alerjiyi baskıladığı bildirilmiştir [ 22 ].

İncir ( Ficus carica L.), Moraceae familyasına ait bir meyve ağacı olup, meyveleri çiğ olarak yenir ve işlenir. Öte yandan yapraklar uzun süredir geleneksel ve Çin tıbbında kullanılmaktadır ve çeşitli tıbbi özellikleri rapor edilmiştir [ 23 ]. İncir yaprağı kaynatmasının tip 1 veya 2 diyabetli hastaların kan şekeri seviyesini düşürdüğü [ 24 – 26 ] ve yaprakların çözücü ekstraktlarının sıçanlarda anti-inflamatuar aktivite gösterdiği [ 27 ] bildirilmiştir. Son yıllarda, incir yaprağı ekstrelerinin insan meme kanseri hücrelerinin MDA-MB-231 büyümesini baskıladığı ve daha geniş kanser baskılayıcı etkileri olabileceği ortaya çıktı [ 28 ].

Bu çalışmada incir yapraklarının çeşitli fizyolojik aktivitelerini analiz ettim ve özellikle yeşil çay ile aynı şekilde işlenen incir çayının alerji baskılayıcı etkisini değerlendirdim. İncir çayı, hücrelerde ve in vivo olarak tip I alerjiyi bastırdı . Baskılama mekanizmasının, IgE antikorunun FceRI reseptöründen ayrılmasının desteklenmesi olduğu belirlendi. Bu, gıda maddelerinde böyle bir mekanizmanın ilk raporudur.

Malzemeler ve yöntemler
örnek hazırlama

İncir çayı “Masui Dauphine” incir çeşidinin yapraklarından hazırlanır. Hammadde meyve bahçemizden (Kawanishi, Hyogo, Japonya) toplanmıştır. Su ile yıkandıktan sonra yapraklar seramik mutfak bıçağı ile 2,0 cm'lik kareler şeklinde kesildi. Yapraklar metal bir kafese yerleştirildi ve bir buhar konveksiyon fırını FCCM 202 (Fujimac, Tokyo, Japonya) içinde 90°C'de veya daha fazla 4 dakika süreyle pişirildi. Daha sonra yapraklar soğutulup 30 dakika oda sıcaklığında kurutuldu, sıcak bir plaka üzerinde yoğruldu ve vantilatör ile kurutuldu. Kurutulmuş yapraklar alüminyum folyo lamine poşet içinde paketlendi ve kullanılıncaya kadar -20°C'de saklandı.

İncir çayı infüzyonunun hazırlanması (incir çayı), 1.0, 10 ve 100 mg çay yaprağı, 1.0 mL su ile 80°C'de 3 dakika boyunca özümlendi, daha sonra naylon ağlardan süzüldü (gözenek boyutu: 48 um).

Hücre kültürü

Sıçan bazofilik hücre çizgisi RBL-2H3, JCRB'den (Osaka, Japonya) satın alındı ve degranülasyon baskılayıcı etkisini değerlendirmek için kullanıldı. Hücreler, %10 fetal sığır serumu (FBS), 100 birim/mL penisilin ve 100 ug/mL streptomisin ile takviye edilmiş Eagle'ın minimal temel ortamında (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, ABD) kültürlendi. Kültürleme, 37°C'de %5 C02 içinde gerçekleştirilmiştir _.

β-heksosaminidaz salınımının ölçümü

β-heksosaminidazın (β-Hex) salınımı, Matsuda ve arkadaşlarının yöntemine göre ölçüldü . bazı değişikliklerle. [ 29 ] Deneyden önce, RBL-2H3 hücreleri, 0.45 ug/mL fare monoklonal anti-dinitrofenil ⁽ DNP)-IgE antikoru (Merck, Darmstadt, Almanya) ve hücrelerin sensitizasyonu için 37°C'de %5 _{C02 içinde gece boyunca inkübe edildi.} Daha sonra hücreler iki kez fosfat tamponlu tuzlu su (PBS) ile yıkandı ve 180 uL Siraganian tamponunda (119 mM NaCl, 5 mM KCl, 0.4 mM MgCl2 _, 25 mM piperazin-1,4-bis-etansülfonik asit, 40 mM ) inkübe edildi. NaOH, 5.6 mM glikoz, 1 mM _CaCl2, %0.1 BSA, pH 7.2) 10 dakika 37°C'de. Daha sonra antijen olarak 20 μL 0.1 μg/mL DNP-BSA (Merck) ilave edildi ve alerjik reaksiyonu (degranülasyon) uyarmak için 37°C'de 30 dakika inkübe edildi. Reaksiyon, buz üzerinde 10 dakika soğutularak durduruldu. Daha sonra, 50 uL süpernatan, 96 oyuklu bir mikroplaka (ThermoFisher Scientific) ve 50 uL 1.0 mM p-nitrofenil-N-asetil-β-D-glukozaminid (Merck) çözeltisine (0.1 M sitrat tamponunda, pH 4.5) eklendi ve 37°C'de 1 saat inkübe edildi. Reaksiyon, 100 uL 2.0 M glisin (pH 10.5) eklenerek durduruldu. Absorbans, bir mikroplaka okuyucu (SYNERGY HTX, BioTek Japonya, Tokyo, Japonya) ile 405 nm'de ölçüldü. Her örneğin β-Hex salım hızı aşağıdaki formül 1 kullanılarak hesaplandı.

β-Hex serbest bırakma oranı (%) = [(T ˗ B)/(E ˗ B)] × 100

Test (T): DNP-BSA (+), Test örneği (+)

Boş (B): DNP-BSA (-), Test örneği (+)

Endojen (E): Boş numuneye eklenen %1.0 Triton X ile hücre lizatının süpernatantı

Her numune, IgE antikorunun eklenmesinden hemen sonra (duyarlılaştırma) veya DNP-BSA eklenmesinden (degranülasyon) 30 dakika önce işlendi. Her numunenin degranülasyon baskılayıcı etkisi, kontrol grubunun [DNP-BSA (+), Test numunesi (-)] salım miktarına dayalı nispi bir oran olarak değerlendirildi. yeniden duyarlılaştırma testi


RBL-2H3 hücreleri, 0.45 ug/mL anti DNP-IgE antikoru ve incir çayı içeren bir ortam kullanılarak 4 x 105 hücre/kuyu ^{konsantrasyonunda} 24 oyuklu plakalara ekildi . Hücreler gece boyunca 37°C'de %5 C02 içinde inkübe edildi _. PBS ile iki kez yıkandıktan sonra hücreler, sadece antikor veya antikor ve incir çayı içeren bir ortam kullanılarak 3 saat inkübe edildi. Daha sonra β-Hex salım miktarı yukarıda açıklanan yöntemle ölçülmüştür.

Akış sitometrik (FCM) analizi

RBL-2H3 hücrelerine bağlanan antikor miktarını incelemek için FCM analizleri yapıldı. Hücre, 0.45 ug/mL anti DNP-IgE (Merck) içeren bir ortamda 1.5 x 106 hücre/kuyu konsantrasyonunda 6 oyuklu plakalara (SANPLATEC) ekildi ve gece boyunca 37°'de %5 C02 ^içinde inkübe edildi _. Hücrelerin duyarlılığı için C. Daha sonra hücreler iki kez PBS ile yıkandı, bir hücre kazıyıcı kullanılarak toplandı ve PBS içinde 1.0 x 106 hücre/mL olacak şekilde süspanse ^edildi . Daha sonra hücreler 1.0 μL 0.5 μg/mL biotin konjuge keçi anti-fare IgE (Beckman Coulter, Pasadena, CA, ABD) ve 1.0 μL streptavidin-PE (Beckman Coulter) ile etiketlendi ve analiz edildi. Ortamda ayrışmış IgE miktarının ölçümü


RBL-2H3 hücreleri, 0.45 ug/mL anti-DNP-IgE (Merck) içeren ortamda 1.5 x 106 hücre/kuyu konsantrasyonunda 6 oyuklu plakalara (SANPLATEC) ekildi ve 1 saat %5 CO2 ^içinde inkübe _edildiduyarlılık için 37°C'de. Duyarlılaştırmadan sonra, ortam çıkarılarak ve iki kez PBS ile yıkanarak fazla antikor çıkarıldı. Daha sonra numuneyi içeren ortam eklendi ve her zaman noktasında ortam toplandı. İmmünopresipitasyon ile IgE elde etmek için, toplanan ortama 100 ng/mL biotin konjuge keçi anti-fare IgE (Beckman Coulter) ilave edildi ve oda sıcaklığında 1 saat ters çevrilerek karıştırıldı. Daha sonra, 20 μL yüksek performanslı streptavidin sefaroz (GE Healthcare Japonya, Tokyo, Japonya) ilave edildi ve 4°C'de 24 saat ters çevrilerek karıştırıldı. Sefaroz boncukları santrifüjleme ile geri kazanıldı, PBS ile yıkandı ve 50 uL SDS-PAGE numune tamponu (180 mM Tris-HCl tamponu pH 6.8, 0.2 M SDS, %20 gliserol, %0.01 bromofenol mavisi) ilave edildi ve 95 °C'de 5 dk. Süpernatan, santrifüjleme ile toplandı ve SDS-PAGE numune tamponuna eşit hacimde Tris-tamponlu salin (pH 7.4) eklendi ve protein, %3- %10 prekast gradyan jeli (ATTO, Osaka, Japonya). IgE antikorları, bir HRP-konjuge keçi anti-fare IgE antikoru (1:10,000; Beckman Coulter) kullanılarak western blotlama ile tespit edildi. IgE'nin sinyal tespiti ve ölçümü, sırasıyla ImageQuant LAS4000 ve TL yazılımı (GE Healthcare Japonya) kullanılarak gerçekleştirilmiştir. IgE antikorları, bir HRP-konjuge keçi anti-fare IgE antikoru (1:10,000; Beckman Coulter) kullanılarak western blotlama ile tespit edildi. IgE'nin sinyal tespiti ve ölçümü, sırasıyla ImageQuant LAS4000 ve TL yazılımı (GE Healthcare Japonya) kullanılarak gerçekleştirilmiştir. IgE antikorları, bir HRP-konjuge keçi anti-fare IgE antikoru (1:10,000; Beckman Coulter) kullanılarak western blotlama ile tespit edildi. IgE'nin sinyal tespiti ve ölçümü, sırasıyla ImageQuant LAS4000 ve TL yazılımı (GE Healthcare Japonya) kullanılarak gerçekleştirilmiştir.

Hayvan çalışması

Yedi haftalık BALB/c dişi fareler, Charles River Laboratories Japan'dan (Yokohama, Japonya) ve yedi haftalık NC/Nga dişi fareler, Japan SLC'den (Shizuoka, Japonya) satın alındı. Fareler, 23 ± 2°C'lik bir sıcaklıkta spesifik patojen içermeyen bir ortam altında ayrı, iyi havalandırılan kafeslerde tutuldu. Fareler, 12 saatlik bir aydınlık/karanlık döngüsüne maruz bırakıldı. Tüm deneylerde iklimlendirme periyodu 7 gün olarak belirlenmiştir. Numunenin oral uygulaması günde bir kez 10 mL/kg miktarında gerçekleştirildi. Transdermal uygulama için numune, 100 mg çay tozu ve 1 g merhem karıştırılarak hazırlandı. Karışım numunesi günde bir kez 20 mg miktarında sağ kulağa uygulandı.

Alerjik semptomların indüklenmesi ve kulak kalınlığının ölçülmesi

BALB/c fareleri rastgele olarak sekiz hayvandan oluşan beş gruba ayrıldı: a, oral uygulama (OA) kontrolü (su); b, OA 0.01 g/kg incir çayı; c, OA 0.1 g/kg incir çayı; d, transdermal uygulama (TA) kontrolü (araç); e, 0.1 g/kg karışım numunesinin TA'sı (Onay No. 2016-A-001). Örnekler, alışma döneminden sonra 10 gün süreyle uygulanmıştır. Ölçümden bir gün önce, farelere sağ kulaklarının ventral tarafına 20 uL 0.5 ug/mL anti-DNP fare IgE antikor çözeltisi (Merck KGaA) intradermal olarak enjekte edildi. Ölçümden bir saat önce, sağ kulakta alerjik semptomlar uyandırmak için 100 μL 0,5 mg/mL DNP-BSA antijen solüsyonu (Bioresearch Technologies, Novart, ABD) kuyruk damarına enjekte edildi.

NC/Nga fareleri rastgele sekiz hayvandan oluşan iki gruba ayrıldı: a, OA kontrolü (su); b, OA 0.1 g/kg incir çayı (Onay No. 2017-A-002). Örnekler, alışma döneminden sonra 28 gün boyunca uygulandı. NC/Nga farelerine, 0, 3, 7. günlerde alerjik semptomları uyandırmak için sağ kulaklarının ventral tarafına 5 μL 10 μg/mL akar antijeni (Mite Extract-DP: Cosmo Bio, Tokyo, Japonya) intradermal olarak enjekte edildi. 10 ve 14. Antijen yükleme periyodu sırasında (0-15 günler), incir çayının alerji baskılayıcı etkisi test edildi. Antijen yükleme periyodundan sonra (16-28. günler), incir çayının alerjik semptomlardan kurtulma üzerindeki etkisi değerlendirildi.

BALB/c farelerinde, kulak kalınlığı her antijen enjeksiyonundan 1 saat önce ve 1 saat sonra ölçülmüştür. NC/Nga farelerinde, kulak kalınlığı 15. güne kadar yüklemeden sonra her 24 saatte bir, ardından 18. günden itibaren 2 ila 3 günde bir ölçülmüştür. Tüm kulak kalınlığı ölçümleri için, dik bir gösterge (Ozaki, Tokyo, Japonya) kullanıldı ve kulak kalınlığındaki bir artış, her bir zaman noktasından antijenin ilk enjeksiyonundan önce kulak kalınlığının çıkarılmasıyla belirlendi. histolojik analiz


Her BALB/c faresinden 10. günde bir kulak örneği alındı ve %10 nötr tamponlu formalin içinde sabitlendi. Dokular parafine gömüldü, 5 um'de kesitler alındı ve ardından hematoksilen ve eozin (HE) veya toluidin mavisi (TB) ile boyandı. istatistiksel analiz


Veriler, üç veya daha fazla ölçüm için ortalama ± Standart sapma (SD) olarak sunulur. İstatistiksel analizler Statcel3 (OMS yayıncılık, Tokyo, Japonya) veya EXSUS (Sürüm 8.1, CAC Croit, Tokyo, Japonya) programları kullanılarak yapıldı. İki grup arasındaki karşılaştırmalarda Student's t testi kullanıldı. Birden fazla grup arasındaki farklılıkların karşılaştırılması için, Tukey testi veya Dunnett testinin ardından tek yönlü değerlik analizi kullanıldı. 0.05'ten küçük bir p değeri anlamlı kabul edildi. Sonuçlar

İncir çayı alerjiyi bastırdı

İncir çayının hücre çoğalmasına etkisi


İncir çayının RBL-2H3 hücrelerinin proliferasyonu üzerindeki etkisi araştırıldı. Çeşitli konsantrasyonlarda (1.0, 10, 100 mg/mL) incir çayı, ortamın 1/10 hacminde ilave edildi. 1.0 ve 10 mg/mL'lik konsantrasyonlar hücre çoğalmasını engellemedi, ancak 100 mg/mL, 12 saatlik kültürden sonra hücre çoğalmasını engelledi (Şekil S1 ). Bu nedenle, sonraki hücre kültürü deneylerinde 1.0 mg/mL incir çayının maksimum nihai konsantrasyonu kullanıldı. Kültürlenmiş hücrelerde incir çayı ile alerjinin baskılanması


İncir çayının alerji baskılayıcı etkisi, RBL-2H3 hücrelerinin degranülasyonunda salınan β-Hex miktarı ölçülerek değerlendirildi. β-Hex salınımı, duyarlılaştırma sırasında 1.0 mg/mL incir çayı ile işleme tabi tutularak zamana bağlı bir şekilde baskılanmıştır. Tedaviden 24 saat sonra, salım oranı %40 veya daha az oldu ve en güçlü inhibitör etki gözlendi. Buna karşılık, degranülasyonda incir çayı ilavesi hiçbir inhibitör etki göstermedi ( Şekil 1 ).

Şekil 1.

Yeni sekmede açSlaytı indir
İncir çayının tedavi konsantrasyonunun, süresinin ve zamanlamasının, antijenle uyarılan RBL-2H3 hücrelerinden β-Hex salınımı üzerindeki inhibe edici etkisi. Ortalama ± SD'yi (n ≥ 3) temsil eden sonuçlar, kontrolün yüzdesi olarak sunuldu. Duyarlılık: IgE antikorunun eklenmesinden hemen sonra numunenin eklenmesi; degranülasyon: antijenin (DNP-BSA) eklenmesinden 30 dakika önce numunenin eklenmesi. İstatistiksel olarak anlamlı sonuçlar (** p < 0.01), tek yönlü varyans analizi ve ardından Dunnett testi (bir Kontrole karşı çoklu karşılaştırmalar) ile belirlendi. Farelerde incir çayı ile alerjinin baskılanması


İncir çayının kulak şişmesi üzerindeki etkisi, BALB/c farelerinde yapay olarak tip I alerjisi oluşturulduktan sonra araştırıldı. OA sonrasında, kontrol grubunun kulak kalınlığındaki artış, 0.01 g/kg incir çayı doz grubunda 71.0 ± 13.0 μm ve 0.1 g/kg incir çayı doz grubunda 71.1 ± 6.5 μm ile karşılaştırıldığında 98.4 ± 9.9 μm idi. Ayrıca incir çayı uygulama grubunda TA 92.4 ± 16.4 μm iken, kontrol grubunda 121.6 ± 8.8 μm idi. Herhangi bir uygulama yöntemi ve konsantrasyonu kullanıldığında, kulağın şişmesi kontrole kıyasla yaklaşık %75 oranında iyileşme eğilimindeydi ( Şekil 2). Anlamlı bir fark olmamasına rağmen, bu sonuçlar incir çayının hayvanlarda baskılayıcı etkisini ortaya koydu. İncir çayı uygulanan fareler, kontrol fareleri ile karşılaştırıldığında vücut ağırlığı veya genel durumda hiçbir fark göstermedi.

Şekil 2.

Yeni sekmede açSlaytı indir
İncir çayı, BALB/c farelerinde tip I alerjiyi etkili bir şekilde bastırır. İncir çayının alerji baskılayıcı etkisi, 10 gün boyunca oral veya transdermal olarak uygulanan BALB/c farelerinde kulak kalınlığının ölçülmesiyle değerlendirildi. Ölçümden yirmi dört saat önce, duyarlılık için kulağa 20 µL anti-DNP-IgE enjekte edildi ve daha sonra alerjiye neden olmak için kuyruk damarından 100 µL DNP-BSA uygulandı. Grafik, ortalama ± SD'yi (n = 8) gösterir. Dunnett'in testinde anlamlı bir fark yoktu.

OA kontrol grubu ve OA incir çayı grubundan kulaklar toplandı ve histolojik olarak analiz edildi ( Şekil 3(a )). Her iki grupta da vazodilatasyon, ödem ve nötrofil infiltrasyonu gözlendi ve bu semptomların hiçbirinde belirgin bir iyileşme etkisi olmadı. Bu semptomlar tip I alerjinin uyarılmasına bağlı olarak vasküler geçirgenliğin artmasına dayandığından, bu çalışmada her iki grupta da tip I allerji geliştirdiği düşünülmüştür. Bununla birlikte, enflamatuar semptom skoru ölçüldüğünde, incir çayı fareleri, kontrol farelerine kıyasla bir gelişme gösterdi ( Şekil 3(b )). Mast hücrelerinin sayısı ölçülürken, kontrol fareleri arasında önemli bir fark yoktu (45.3 ± 6.3 hücre/ ^mm2) ve incir çayı uygulanan fareler (46.5 ± 6.2 hücre/mm2 ⁾ .

Figür 3.

Yeni sekmede açSlaytı indir
BALB/c farelerinde histolojik analiz. (a) Kulak bölümlerinin temsili fotomikrografları hematoksilen ve eozin (HE) veya toluidin mavisi ile boyanmıştır. HE görüntülerinden vazodilatasyon, ödem ve nötrofil hücre infiltrasyonunun derecesi gözlemlendi ve toluidin mavisi ile boyanmış görüntülerde birim alandaki mast hücre sayısı sayıldı. (b) Belirti puanı. Her semptom skoru aşağıdaki kriterlere göre belirlendi. Vazodilatasyon: lümenin hafif genişlemesi (küçük), lümenin büyük genişlemesi (hafif). Ödem: dermiste sınırlı (minör), dermiste kas tabakasına (hafif) mevcudiyet. Enflamatuar hücre infiltrasyonu: birkaç dağınık hücre (minör), bazı kümelenmiş hücreler (hafif). İncir çayının alerjiyi baskıladığı mekanizma, FcεRI'den IgE ayrışmasının teşvik edilmesini içerir.

İncir çayının IgE-FceRI reseptör bağlanmasına etkisi


İncir çayının alerji baskılayıcı etkisi sadece sensitizasyonda gözlemlendiğinden, incir çayının bağlayıcı IgE antikorunu ve IgE antikorunun bir reseptörü olan FceRI'yi etkilediği varsayılmıştır. Duyarlılaştırmadan sonra RBL-2H3 hücre yüzeyine bağlanan IgE antikoru miktarı FCM analizi ile ölçülmüştür. Antikor bağlama miktarı (ortalama floresan yoğunluğu, MFI) kontrol grubunda 104.40 ± 36.30 ve incir çayı uygulanan grupta 55.65 ± 26.19'du, dolayısıyla incir çayı grubunda bağlanan antikor miktarı, kontrolünkinin yaklaşık yarısı kadardı. ve bu istatistiksel olarak anlamlı bir düşüştü ( p = 0.0467, Şekil 4 ). Bu, incir çayının alerjiyi baskıladığı mekanizmanın, hücre yüzeyindeki IgE'nin bağlanma miktarında bir azalmayı içerebileceğini öne sürdü.

Şekil 4.

Yeni sekmede açSlaytı indir
FCM tarafından bağlanan IgE antikor miktarının ölçümü. RBL-2H3 hücrelerini duyarlı hale getirmek için 1 mg/mL incir çayı veya su (Kontrol) eklendi ve 24 saat sonra hücre yüzeyine bağlanan antikor miktarı ölçüldü. Antikorlar, biotin-konjuge keçi anti-fare IgE ve streptavidin-PE ile floresan olarak etiketlendi ve FCM ile ölçüldü. Aşağıdaki veriler, makalede bildirilenleri temsil ediyordu. Düz çizgi: etiketli, kesikli çizgi: etiketsiz. Ortalama floresan yoğunluğu (MFI), ortalama ± SD'yi (n = 4) gösterdi.

IgE'nin FceRI reseptörlerinden ayrılmasının desteklenmesi

İncir çayının aktif bileşiklerinin hedef moleküllerinin ya antikorlar ya da reseptörler olduğu düşünülmüştür çünkü incir çayı hücre yüzeyindeki antikor bağlanma miktarını azaltmıştır. Daha önce incir çayına maruz bırakılan IgE antikorları veya hücreleri (reseptörler), degranülasyonun baskılanması üzerindeki etkisini araştırmak için kullanıldı, ancak hedef molekülün tek başına antikor veya reseptör olmadığını gösteren her iki tedaviden sonra degranülasyon baskılanmadı ( Şekil 5 ). Ardından, hedef molekülün bir IgE-FceRI kompleksi olduğu varsayıldı ve hassaslaştırılmış hücrelere incir çayı eklenmesinin IgE'nin ayrışmasını destekleyip desteklemediğini test ettim. İncir çayı muamelesinden sonra, her geçen zamanda besiyerinde bulunan IgE miktarı western blotlama ile tespit edildi ( Şekil 6(a).)). İncir çayına maruz kalma süresiyle orantılı olarak, ortamdaki serbest IgE miktarı arttı ve tedaviden 24 saat sonra kontrolün dört katına ulaştı ( Şekil 6(b )).

Şekil 5.

Yeni sekmede açSlaytı indir
İncir çayı için tek başına bir antikor veya reseptör hedef molekül değildir. Salınan β-Hex miktarı, 24 saat boyunca 1.0 mg/mL incir çayına önceden maruz bırakılan antikorlar veya hücreler kullanılarak değerlendirildi. Ortalama ± SD'yi (n = 3) temsil eden sonuçlar, kontrolün yüzdesi olarak sunuldu. Farklı harfler önemli farklılıkları gösterir ( p < 0.01). İstatistiksel olarak anlamlı sonuçlar, Tukey testinin ardından tek yönlü varyans analizi ile belirlendi.


Şekil 6.

Yeni sekmede açSlaytı indir
İncir çayı, FceRI reseptöründen IgE antikor ayrışmasını hızlandırır. (a) FceRI'den salınan IgE'nin tespiti. RBL-2H3 hücrelerine antikor bağlanmasından sonra, ortam aspire edilerek ve yıkanarak fazla antikor çıkarıldı. Daha sonra ortam ve her numune eklendi ve ortam her zaman noktasında toplandı. IgE antikorları, toplanan ortamdan biotin-konjuge anti-IgE ve streptavidin sefaroz ile immünopresipitasyon yoluyla geri kazanıldı. IgE, western blotlama ile tespit edildi. Bir naylon membrana aktarıldıktan sonra jel, toplam proteini saptamak için Coomassie parlak mavi R-250 ile boyandı. (b) Tespit edilen IgE, ImageQuant TL görüntü analiz yazılımı kullanılarak ölçülmüştür. Ortalama ± SD'yi (n = 3) temsil eden sonuçlar, kontrolün yüzdesi olarak sunuldu. Farklı harfler önemli farklılıkları gösterir (p < 0.05). İstatistiksel olarak anlamlı sonuçlar, Tukey testinin ardından tek yönlü varyans analizi ile belirlendi.

İncir çayı alerjik semptomlardan kurtulmayı teşvik etti
İncir çayının antikor ayrışma aktivitesinin sürdürülebilirliği

Antikor, incir çayı muamelesiyle ayrıştıktan sonra RBL-2H3 (yeniden duyarlılaştırma) hücrelerine tekrar antikor içeren bir ortam ilave edildi ve 3 saat sonra β-Hex salınımının miktarı ölçüldü. Yeniden duyarlılaştırmada incir çayının eklendiği hücrelerin β-Hex salım hızı, geleneksel inhibisyon hızına eşdeğer olan kontrolünkinin yaklaşık %50'siydi. Ek olarak, yeniden duyarlılaştırmada incir çayı eklenmemiş hücrelerde bile β-Hex salım oranı %64'e kadar bastırılmıştır, bu da yeniden duyarlılaştırmada incir çayı nedeniyle bir fark olmadığını gösterir ( Şekil 7 ).

Şekil 7.

Yeni sekmede açSlaytı indir
İncir çayı nedeniyle hızlandırılmış antikor ayrışması olan hücreler, düşük antikor bağlama kapasitesine sahiptir. 1.0 mg/mL incir çayı muamelesiyle antikorun ayrıldığı hücreler, incir çayı olmayan bir ortamda yeniden süspanse edildi. Yalnızca antikor veya antikor ve incir çayı tekrar eklendi (yeniden duyarlılaştırma) ve 3 saatlik yeniden duyarlılaştırmadan sonra salınan β-Hex miktarı ölçüldü. Ortalama ± SD'yi (n = 3) temsil eden sonuçlar, kontrolün yüzdesi olarak sunuldu. Farklı harfler önemli farklılıkları gösterir ( p < 0.05). İstatistiksel olarak anlamlı sonuçlar, Tukey testinin ardından tek yönlü varyans analizi ile belirlendi.

Atopik dermatit (AD) fare modelinde incir çayının iyileşme etkisi

Bir AD modeli olan NC/Nga farelerini kullanarak incir çayının AD'den kurtarma etkisini araştırdım. Test, numunenin ve antijenin uygulanmasını içeren ilk yarı (0-14 gün) ve yalnızca örneğin uygulanmasını içeren ikinci yarı (15-28 gün) olarak bölünmüştür. İlk yarı boyunca, incir çayı uygulanan farelerde kulak şişmesi baskılanma eğilimindeydi ve 11. günde, incir çayı grubunda 374,6 ± 17,8 μm ile karşılaştırıldığında, kontrol grubunda kulak kalınlığı 459,5 ± 22,4 μm idi. ( p= 0.010). İkinci yarıda antijen verilmemesine rağmen kontrol grubunda kulak kalınlığında artış olurken incir çayı grubunda artış olmadı. Çalışmanın sonunda (28. gün), kulak kalınlığı kontrol grubunda 683.6 ± 33.2 µm ve incir çayı grubunda 519.6 ± 45.6 µm olup, önemli ölçüde baskılanmıştır ( p = 0.012, Şekil 8 ).

Şekil 8.

Yeni sekmede açSlaytı indir
İncir çayı, NC/Nga farelerinde atopik dermatiti (AD) hafifletir. Akar antijeni ile AD gelişen NC/Nga farelerine 28 gün süreyle 10 mg/mL incir çayı ağızdan verildi ve semptomlardaki değişiklikler araştırıldı. Kulak kalınlığı ölçümü antijen uygulamasından 24 saat sonra 15. güne kadar ve 18. günden itibaren 2-3 günde bir yapıldı. Grafik, ortalama ± SD'yi (n = 8) gösterir. İstatistiksel anlamlılık, örnekleri kontrol ile karşılaştırmak için Student t -testi kullanılarak belirlendi (* p < 0.05).

Tartışma
Bu çalışmada incir ( Ficus carica L.) yapraklarından yapılan çayın alerji baskılayıcı etkisini araştırdım . RBL-2H3 hücrelerinde, hassaslaştırma üzerine incir çayı ilave edilerek degranülasyon önemli ölçüde bastırılmıştır. Ayrıca, farelerde yapılan deneyler, incir çayının tip I alerji ve AD'ye karşı inhibitör etkisini göstermiştir. Daha önce incir çayının anti-alerjik etkisi sadece RBL-2H3 hücrelerinde bildiriliyordu, bu nedenle bu çalışma canlı organizmalardaki etkilerini açıklayan ilk çalışma oldu.

Takahashi et al . incir yapraklarındaki başlıca polifenollerin kafeoil-malik asit, rutin ve izoschaftosit olduğunu bildirmiştir [ 30 ]. Bu bileşenler arasında rutinin alerji baskılayıcı etkileri olduğu bildirilmiştir. AD farelerinde, rutinin transdermal uygulaması, alerjik reaksiyonları teşvik eden IL-4 ve IL-5 gibi inflamatuar sitokinlerin indüksiyonunu baskıladı ve kulak kalınlığını ve kan IgE konsantrasyonunu azalttı [ 31 ]. Morinda citrifolia'nın meyve ve yapraklarının ekstraktları rutin ve ursolik asit içeriyordu ve bu ekstraktların oral yoldan verilmesini takiben ICR farelerinde iltihaplanmaya bağlı kulak ödemi azaldı [ 32 ].]. Birlikte ele alındığında, bu kanıt, rutinin incir çayının anti-alerjik etkisinin aktif bir bileşeni olduğunu kuvvetle önerir. Ayrıca incir çayının rutin içeriği, yaprak ekstraktından üç kat daha fazlaydı. Bu nedenle incir çayının anti-alerjik etki elde etmek için daha uygun olduğu düşünülmüştür.

İncir çayı sadece IgE ve FceRI'yi bağladığında (duyarlılık) etki etti ve antijen-antikor reaksiyonları (degranülasyon) üzerinde hiçbir etkisi olmadı. Ayrıca FCM analizi, incir çayı ile muamele sonrası hücre yüzeyine bağlanan IgE antikor miktarının azaldığını, western blot analizi ise incir çayının muamele süresine bağlı olarak besiyerinde serbest kalan IgE antikor miktarının arttığını ortaya koydu. Bu sonuçlar, incir çayının alerjiyi baskıladığı mekanizmanın, FcεRI reseptörüne bağlı IgE antikorunun ayrışmasını teşvik etmeyi ve ardından antijen ve antikorun birleşme sıklığını azaltmayı içerdiğini ortaya koydu. IgE antikor ayrışma aktivitesine sahip gıda malzemelerinin keşfi yeniydi. Bununla birlikte, benzer etkilere sahip iki madde rapor edilmiştir,33 ]. Her iki madde de IgE antikorlarına bağlanarak işlev görür, ancak bağlanma yerleri farklıdır. Bu bileşenlerin etki mekanizması açıklığa kavuşturulmamış olsa da, bir antikora bağlanma üzerine IgE-FceRI kompleksinin konformasyonundaki bir değişikliğin ayrışmaya neden olduğu tahmin edilmektedir. Aslında, IgE reseptörlerinden biri olan CD23'ün IgE antikoruna bağlanmasından kaynaklanan antikordaki yapısal değişiklik, FceRI'ye bağlanmayı inhibe eder [ 34 ]. İncir çayının etken maddesi olarak kabul edilen rutin, hücre içi Ca2 ⁺ artışını baskılar ve RBL-2H3 hücrelerinin degranülasyonunu engeller [ 35 ].]. Bu nedenle, rutin dışındaki bileşenlerin incir çayının IgE antikor ayrışmasını teşvik edici aktivitesine katkıda bulunduğu tahmin edilmektedir.

İncir çayının degranülasyon önleyici etkisi gecikmiş ve 12 saatlik tedaviden sonra güçlenmiştir. Oysa antikor yeniden ekleme deneyinde, 3 saatlik tedaviden sonra degranülasyon güçlü bir şekilde bastırıldı. İncir çayının IgE antikor ayrışma etkisi 9 saatlik tedaviden sonra daha güçlü hale geldiğinden, yeniden ekleme deneyinin sonucunun, antikorun ayrışmasından ziyade reseptöre bağlanmanın inhibisyonunu yansıttığı öne sürülmüştür. Diğer bir deyişle, incir çayının aşağıdaki iki aktiviteye sahip olduğu varsayılmıştır: (1) antikorun reseptörden ayrılması ve (2) reseptördeki yapısal değişikliği sürdüren bağlanmanın inhibisyonu. Ohnmacht ve Voehringer, farelerde bazofil hücre dönüşümünün en az 60 saat olduğunu göstermek için floresan BrdU kullandı [ 36 ].]. Bazofil hücrelerinin devri IgE'nin bağlanmasıyla değişmezse, incir çayı tüketen hayvanlarda antikor ayrışması ile alerjik semptomların hafifletilmesi ve reseptöre bağlanmanın inhibisyonunun neden olduğu önleyici ve iyileştirici etkiler beklenebilir. BALB/c farelerinde, kulağa intradermal IgE uygulamasını takiben lokal olarak alerjik deri iltihabı (bir tip I alerji) gelişti. İncir çayı ile tedavi edilen fareler, yutma yönteminden bağımsız olarak iltihaplanma nedeniyle şişmeyi bastırma eğilimi gösterdi. Tip I alerji kaynaklı inflamasyona esas olarak mast hücre degranülasyonu neden oldu, bu da incir çayının sadece bazofil hücrelerinde değil aynı zamanda mast hücrelerinde de etkili olduğunu düşündürdü. NC/Nga farelerinde, incir çayı uygulama grubu, kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, antijen uygulamasının tamamlanmasından sonra dermatitte hafifleme ve alevlenmenin baskılanması gösterdi. NC/Nga farelerindeki deri lezyonları sadece klinik ve histopatolojik olarak AD'ye çok benzemekle kalmadı, aynı zamanda IL-4'e karşı artan hassasiyet ve JAK3'ün fosforilasyonu gibi benzer özelliklere de sahipti. Bu nedenle, NC/Nga fareleri, AD modelleri olarak yaygın olarak kullanılmaktadır.37 ]. Bu çalışmanın sonuçları, incir çayının AD gibi kronik alerjik dermatit durumlarının semptomlarını hafifletmede etkili olduğunu göstermiştir. Tomimori ve arkadaşlarına göre , 2,4-dinitroflorobenzenin (DNFB) tekrar tekrar uygulanması nedeniyle iltihaplanma geliştiren C3H farelerinde ve NC/Nga farelerinde, C3H fareleri, DNFB uygulamasının sona ermesi üzerine semptomlarda hızlı bir iyileşme gösterdi, oysa NC/Nga'da farelerin kulak şişmesi, uygulama sona erdikten 4 hafta sonraya kadar devam etti [ 38]. Bu çalışmada NC/Nga fareleri kullanıldığından, antijen verildikten sonra hayvanların iyileşmesi zaman almış olabilir, oysa C3H farelerinin kullanılması incir çayının iyileşme etkisi üzerinde daha net sonuçlar verebilir. Son zamanlarda, bazofil hücrelerini seçici olarak çıkarabilen farelerin kullanıldığı çalışmalardan, bazofil hücrelerinin, AD gibi kronik alerjik inflamatuar durumlarda efektör hücrelerden ziyade başlatıcı hücreler olarak hareket edebileceği öne sürülmüştür [ 39 , 40 ]. Bazofil hücrelerinin kronik alerjik enflamasyonunun başlangıç mekanizmasının aydınlatılmasının in vivo alerji bastırma mekanizmasının incir çayı ile aydınlatılmasına yol açması beklenmektedir.

Teşekkür
Edanz Group'tan ( www.edanzediting.com/ac ) DPhil'den Kate Fox'a bu yazının bir taslağını düzenlediği için teşekkür ederim. Bu araştırma, kamu, ticari veya kar amacı gütmeyen sektörlerdeki finansman kuruluşlarından herhangi bir özel hibe almamıştır.

Açıklama bildirimi
Yazar tarafından herhangi bir potansiyel çıkar çatışması rapor edilmemiştir. tamamlayıcı malzemeler


Bu makale için ek verilere buradan erişilebilir

Veri kullanılabilirliği beyanı
Bu makalede açıklanan veriler, DOI:10.17605/OSF.IO/TPA6U adresindeki Açık Bilim Çerçevesinde açıkça mevcuttur . Referanslar

[maturidi]

Taze ve kuru incirin faydaları nelerdir? İncir yaprağı ne işe yarar?

11 Mayıs 2022 | Kategori:

İncir, eski çağlardan beri, özellikle mitlerde sağlık, refah, bereket ve güç ile ilişkilendirilmiştir. İnciri benzersiz kılan sadece lezzeti değil, aynı zamanda içerdiği besinlerdir. Lif, vitamin ve mineraller açısından son derece zengindir ve tüm bu besinlerle özellikle kalp ve sindirim sağlığını destekler. Kabızlığı önleyebilir, yüksek tansiyonu düşürebilir ve içerdiği kalsiyum ile kemik sağlığını destekler. Ayrıca incirin yaprağı da kanserde, cilt hastalıklarında ve tip 1 diyabette tedaviyi destekleyici olarak kullanılabilmektedir. İncir hem taze hem de kuru olarak tüketilebilir, ancak kuru incirin kalorisi ve içerdiği şeker tazesine göre daha yüksektir. Bu nedenle özellikle diyabet hastalarının kontrollü tüketmesi gerekir.

Bir küçük boy taze incirin (yaklaşık 40 g) içerdiği besinler:

• Kalori: 30
• Protein: 0 g (gram)
• Yağ: 0 g
• Karbonhidrat: 8 g
• Lif: 1 g
• Bakır: Günlük ihtiyacın %3’ü
• Magnezyum: Günlük ihtiyacın %2’si
• Potasyum: Günlük ihtiyacın %2’si
• B2 vitamini: Günlük ihtiyacın %2’si
• B1 vitamini: Günlük ihtiyacın %2’si
• B6 Vitamini: Günlük ihtiyacın %3’ü
• K Vitamini: Günlük ihtiyacın %2’si

1 incir kaç kalori? Kuru incir kaç kalori?
İncir ayrıca iyi bir A ve C vitamini, kalsiyum ve kaynağıdır. Taze incirin kalorisi düşüktür, ancak kuru incir, şeker ve kalori bakımından yüksektir. 100 g taze incir 74 kaloridir. 100 g kuru incir 249 kaloridir.

İncirin faydaları
Yüksek tansiyonu düşürebilir
Hipertansiyon (tansiyon yüksekliği), kalp hastalığı ve felç gibi komplikasyonlara yol açabilir. Yüksek tansiyona neden olan faktörlerden biri de çok fazla sodyum ve yetersiz potasyum tüketmekten kaynaklanan potasyum dengesizliğidir. İncirin içerdiği lif, fazla sodyumun sistemden atılmasına, içerdiği potasyum da eksikliğin giderilmesine yardımcı olabilir. (1)

Sindirim sağlığını destekler ve kabızlığı önler


İncirin mükemmel bir prebiyotik olması, genel bağırsak sağlığı için önemlidir. Dışkıyı yumuşatarak ve hacmini arttırarak kabızlığı önler. Ayrıca lifli prebiyotik yapısı ile bağırsaklardaki yararlı bakterileri besler ve sindirim sağlığını destekler.



Yapılan araştırmalar, incir özünün ya da kuru incirin yiyeceklerin sindirim sistemi boyunca hareketini hızlandırdığını, kabızlığı azalttığını ve ülseratif kolit gibi sindirim bozukluklarının semptomlarını iyileştirebildiğini göstermektedir. (2,3)
İncir kemik yoğunluğunu artırır


İncir, kemik sağlığı için son derece önemli mineraller olan kalsiyum ve potasyum için iyi bir kaynaktır. Bu mineraller, birlikte çalışarak kemik yoğunluğunu arttırır ve osteoporoz gibi kemik sorunlarını önleyebilir. (4)

Ayrıca kalsiyum kemiklerin önemli bir yapısal bileşenidir ve araştırmalar yeterli kalsiyum alımının özellikle çocuklarda ve ergenlerde kemik mineral yapısını iyileştirdiği göstermektedir.

İncir pekmezi faydaları


İncir pekmezi hem son derece lezzetli hem de taze ve kuru incirin faydalarını içinde barındıran bir süper gıda örneğidir.

• Şiddetli kabızlığın tedavisine yardımcı olabilir.
• Soğuk algınlığı semptomlarını ve boğaz ağrısını hafifletebilir.
• Düzenli tüketildiğinde kanserli hücrelerin gelişimini azaltabilir.
• Kandaki oksijen seviyesini yükselterek yorgunluk hissini hafifletmeye yardımcı olabilir.
• Yüksek tansiyonu düşürebilir.
• Kan şekeri seviyesini düzenleyebilir.
• Kalsiyum açısından zengin olan pekmez, kemikleri güçlendirerek, büyümeyi teşvik eder ve bozulmayı önleyebilir.

İncir pekmezi tatlılar ve hamur işlerinde, yulaf karışımlarında ya da smoothilerde alternatif tatlandırıcı olarak kullanılabilir. Diğer tatlandırıcılara göre çok daha besleyicidir.

Ayrıca şampuanlara ve saç kremlerine eklenebilir. İçerdiği çinko ve bakır sayesinde saç dökülmesini önleyebilir ve yeni saçların çıkmasını teşvik eder.

İncir yaprağının faydaları

• Kahvaltıda incir yaprağı çayı içmek Tip 1 diyabet hastalarında insülin ihtiyacını azaltabilir.
• Düzenli tüketildiğinde vücutta trigliserit seviyelerini kademeli olarak düşürebilir. Bu da obezite ve kalp hastalığı riskini azaltabilir.

• Araştırmalar incirin yapraklarının ve bu yapraklardan çıkan sütün kolon kanseri, meme kanseri, rahim ağzı kanseri ve karaciğer kanseri hücrelerine karşı antitümör aktivite sergilediğini göstermektedir.
• Yine yapraktan elde edilen süt, egzama, sedef hastalığı ve vitiligo gibi cilt sorunlarının ve siğillerin tedavisinde kullanılabilir.

İncir yaprağı çayı nasıl yapılır?


İncir yaprağı çayını taze ya da kuru yapraklarla yapabilirsiniz. Taze yapraklarla:

• 2-3 incir yaprağını ve yarım litre suyu bir tencereye koyun
• 1-2 dakika kadar kaynatın.
• Ardından 5-10 dakika demlenmesini bekleyin.
• Yaprakları süzüp tüketebilirsiniz.

Kuruttuğunuz incir yapraklarıyla:

• Bir tencereye 1 bardak su ve elinizle ufaladığınız incirin kuru yapraklarından 1 tatlı kaşığı kadar koyun.
• 1-2 dakika kaynatıp demlenmeye bırakın.
• Süzdükten sonra dilerseniz bal ya da limon ekleyerek lezzet katabilirsiniz.

İncir yaprağı çayı ne işe yarar?
İncir yaprağı çayı anti-diyabetik özelliktedir, düzenli tüketildiğinde tip1 diyabet hastalarında insülin ihtiyacını azaltabilir. Ayrıca vücutta, obezite ve kalp hastalığı riskini arttıran trigliserit seviyelerini düşürebilir. Bronşit tedavisinde kullanılabilir. Kansere karşı koruyucu özelliği olduğu düşünülmektedir.

İncir sirkesinin faydaları
Sirkenin yapım sürecinde alkol, asetik asite dönüştürülür. Pastörize edilmemiş, filtrelenmemiş incir sirkesinde, bazı probiyotik bakteriler ile birlikte incirin içerdiği bileşenler ve enzimler bulunur. Bu sayede de:

• Kan şekerinin yönetimine yardımcı olur.
• Anti-oksidanlar açısından zengindir.
• Bolca vitamin ve mineral içerir.
• Cilt ve saç sağlığını destekler.
• Kilo vermeye yardımcı olabilir.
• Kalp sağlığını destekler.
• Sindirim sistemi için faydalıdır.

İncir sirkesi nasıl kullanılır?
Her gün 1-2 yemek kaşığı sirkeyi bir bardak suyla karıştırın ve için. Sirke tadının ağzınızda çok uzun süre kalmaması için pipet kullanabilirsiniz. İncir nasıl kurutulur?

Güneşte incir kurutma

• Kurutmak için incirleri seçerken ağaçtan düşmüş, olgun olanları tercih edin.
• İncirleri güzelce yıkadıktan sonra 30 saniye kadar, önceden kaynattığınız tuzlu batırın ve ardından temiz bir havlu üzerine sererek kurumalarını bekleyin.
• İncirleri her birine 5-6 adet sığacak şekilde barbekü şişlerine dizin ve doğrudan güneş alan bir yere asıp birkaç gün kurumalarını bekleyin.
• İncirlerin çok sertleşmemesi için birkaç gün sonra yarı gölge bir yere taşıyın ve yaklaşık bir hafta bekleyin.
• İncirler kuruduktan sonra eğer yassı şekil vermek istiyorsanız ve olmuyorsa tekrar kaynar tuzlu suya batırın ve nazikçe şekil verin.
• Ardından incirleri temiz bir keten bez üzerine yayın ve birkaç saat kadar güneşte tekrar kurutun.
• Küflenmeyi önlemek için, kaldırmadan önce kesinlikle kuru olduklarından emin olun.

İncir fırında nasıl kurutulur?

• İncirleri güzelce yıkayın ve kâğıt havlu ya da temiz bir bez ile nazikçe kurulayın.
• Fırınınızı önceden 60 °C’de ısıtın.
• İncirleri ortadan ikiye bölün ve kesik yüzleri yukarı gelecek şekilde fırın tepsisine dizin.
• Kurutma işlemi 10-12 saat sürebilir. İşlem sırasında fırın kapağını hafif aralık bırakın ve ara ara kontrol ederek incirleri eşit şekilde kurumaları için çevirin.
• Yeterince kuruduktan sonra incirleri soğumaya bırakın.

Kuru incir nasıl saklanır?

Tamamen soğuduğundan emin olduğunuz kuru incirleri hava geçirmez bir kaba veya hava geçirmez plastik poşetlere aktarın. Ancak uzun süre dayanabilmesi için incirlerin tamamen kuru olması gerekir. Serin ve kuru bir yerde veya buzdolabında saklayabilirsiniz. Ayrıca daha uzun süre dayanmasını istiyorsanız derin dondurucuya da koyabilirsiniz. Kuru incir derin dondurucuda lezzetini kaybetmeden birkaç yıla kadar dayanabilir.

Kuru incir mi taze incir mi?

Kuru incirin içerdiği su oranı düşüktür, bu nedenle besinler içinde konsantre halde bulunur. İçerdiği kalori, şeker, karbonhidrat, lif, protein aynı miktardaki taze incirin yaklaşık 3 katıdır. Ayrıca taze incire göre vitamin ve mineral bakımından daha zengindir. Ancak yüksek şeker ve kalori oranı nedeniyle dikkatli tüketilmelidir.

Kuru incirin faydaları

• Kuru incirin lif oranı çok yüksektir ve bu sayede kabızlığı önleyebilir.
• Bir fincan kuru incir, önerilen günlük kalsiyum alımının yaklaşık dörtte birini sağlar. Böylece kemik sağlığını destekleyerek kemik kaybına ve osteoporoza karşı koruma sağlayabilir.
• İçerdiği yüksek oranda lif uzun süre tok kalmayı sağlayabilir. Bu sayede yiyecek tüketimini azaltmaya yardımcı olur ve kilo vermeyi destekler. Ancak ölçülü tüketmek gerekir.
• Cilt sağlığını destekleyen ve saçınızı güçlendiren antioksidanlar ve diğer mikro besinlerle yüklüdür.
  İçerdiği antioksidanlarla beyindeki oksidatif hasarı azaltabilir, Alzheimer hastalığında meydana gelen plak oluşumunu geciktirebilir ve nörodejeneratif hastalıklara karşı koruma sağlayabilir.

• Şeker oranı çok yüksek olmasına rağmen E vitamini, steroller, kumarinler, tanenler ve antidiyabetik özelliklere sahip diğer biyoaktif bileşikler bakımından zengindir. Bu sayede kan şekeri kontrolünü sağlayarak diyabet komplikasyonlarını hafifletebilir.

Kuru incir zeytinyağı karışımı
Zeytinyağlı kuru incir faydaları

• Cildi gençleştirir: İncirdeki C vitamini, cildi yaşlanmaya karşı koruyan ve elastikiyetini arttıran kolajen üretimini arttırır. Zeytinyağının içerdiği E vitamini ise cildi serbest radikallere karşı korur ve parlaklık kazandırır.

• Kabızlığı önler: Yağa batırılmış incir, lif ve antioksidanlarla doludur ve bu sayede kabızlık için etkili bir tedavidir. Sabah aç karnına yediğinizde son derece hızlı etki eder.
• Kısırlıkta etkili olabilir: Düzenli olarak tüketildiğinde, hem erkeklerde hem de kadınlarda kısırlığın tedavisine yardımcı olabilir. İncirdeki yüksek demir içeriği kadınlarda sağlıklı yumurta, erkeklerde sağlıklı sperm üretimine yardımcı olur.

Zeytinyağı incir kürü nasıl yapılır?

• Bir cam kavanoza ihtiyacınız kadar kuru inciri sıkışık bir şekilde sığdırın.
• Daha sonra zeytinyağı ile kavanozu doldurun.
• Kavanozun ağzını sıkıca kapatın ve yaklaşık kırk gün bir köşede tutun.
• Sürenin sonunda artık incirlerinizi yiyebilirsiniz.
• En iyi sonucu alabilmek için (özellikle kabızlık tedavisinde) incirleri aç karnına yiyin.

Kuru inciri bir gün önceden de zeytinyağına batırıp ertesi sabah yiyebilirsiniz. Ancak besinlerin birbirleriyle iyice kaynaşabilmesi için incirin zeytinyağında daha uzun süre kalması gerekebilir. İncirin zararları

• Çok lifli bir besindir, fazlası ishale neden olabilir.
• İçerdiği K vitamini Varfarin gibi kan inceltici ilaçların etkisini azaltabilir.
• Huş ağacı polenine alerjisi olanlarda incir alerjisi olma olasılığı da yüksektir.

Günde en fazla kaç incir yenmeli?

İncir lif açısından zengin ve kalorisi düşük bir meyvedir. Ancak yine de çok fazla tüketildiğinde ishale neden olabilir. Günde en fazla 4 adet orta boy taze incir tüketin. Kuru incirin ise kalorisi tazesine göre çok daha yüksektir. Bu nedenle günde 2 taneden fazla kuru incir tüketmeyin.

Kaynaklar ve Referanslar:

[ahmetkirmizi]

İNCİR YAPRAĞI ile Meme Kanseri ve Diyabete Çözüm. Enterococcus Faecalis Bakterisini Yok Eder