Duyuru

***maturidi*** · 13 September 2023, 09:49

Melaleuca quinquenervia (Cav.) ST Blake (Myrtales: Myrtaceae): Sivrisinek kontrolü için doğal alternatif

Yazar bağlantıları yer paylaşımı panelini açarMaureen Leyva ¹,Leidys Fransız-Pacheco ²,Felipe Quintana'nın ^3'ü,Domingo Montada ¹,Mayda Castex ¹,Ariel Hernandez ¹,María del Carmen Marquetti ¹ ¹ Tropikal Tıp Enstitüsü 'Pedro Kouri', Küba ² Kimyasal Araştırma Merkezi, Morelos, Meksika ³ Entegrasyon ve Sosyal Refah Merkezi, Küba
Alınma tarihi 22 Mayıs 2016, Revize edilme tarihi 23 Haziran 2016, Kabul tarihi 19 Temmuz 2016, Çevrimiçi erişim tarihi: 10 Ağustos 2016, Kayıt Versiyonu 26 Ekim 2016 .

Daha az göster
Mendeley'e ekle
Paylaşmak
Anmak
https://doi.org/10.1016/j.apjtm.2016.07.034 Haklara ve içeriğe sahip olun
Creative Commons Altındalisans
açık Erişim

Anahtar Kelimeler

Melaleuca quinquenervia
Larva öldürücü aktivite
Yetişkinlere yönelik aktivite
Uçucu yağlar
Aedes spp.
Culex quinquefasciatus

1 . giriiş
Culex quinquefasciatus ( Cx. quinquefasciatus ), Aedes albopictus ( Ae. albopictus ) ve Aedes aegypti ( Ae. aegypti ), Batı Nil [1] , Dang humması gibi virüslerin bakımı ve bulaşmasından sorumlu vektörler olan sivrisineklerin entomolojik faunasında yer almaktadır. [2] , Chikungunya [3] ve Zika [4] Amerika bölgesinde. Artan nüfus yoğunluğu, yüksek işsizlik seviyeleri, yoksulluk ve siyasi irade eksikliği, diğerlerinin yanı sıra, bu endemik hastalıkların dolaşımını ve devamını kolaylaştıran faktörlerdir. gelişmekte olan ülkelerin topluluklarında [5] .

Ne yazık ki vektör kaynaklı hastalıkların çoğu için aşı adayları mevcut değildir; kimyasal kontrol, sivrisinek popülasyonlarını ve dolayısıyla hastalık görülme sıklığını azaltmanın temel önlemidir. Bu azalma genellikle, bulaşmadan sorumlu türlerin ekolojik yönleri tam olarak anlaşılmadan geçicidir: diğerlerinin yanı sıra davranış, habitat tercihleri ve uygulanan insektisitlere duyarlılık [6] , [7] , [8] .

Küba'da tıbbi öneme sahip bu vektörlerde sentetik böcek öldürücülere karşı artan direnç, 1990'ların sonlarından beri laboratuvar düzeyinde tespit edilmiştir [7] , [9] . İstilaların yüksek olduğu dönemlerde böcek ilacı uygulamasının hastalıkların görülme sıklığını azaltan önlem olduğu doğru olsa da, tarladaki sivrisinek popülasyonunda sentetik böcek ilaçlarına karşı direnci geciktirmek veya azaltmak için kapsamlı bir yaklaşımla alternatif kontrolün araştırılması da gereklidir.

Melaleuca quinquenervia ( M. quinquenervia) (Cav.) ST Blake (Myrtales: Myrtaceae), kanıtlanmış böcek öldürücü aktivitesi, geniş çapta dağılması, tıbbi veya gıda gibi tamamlayıcı faydalara sahip olması ve çevresel açıdan sürdürülebilir olması nedeniyle vektör kontrolü için düşünülen bir bitkidir. Bu bitki, Asya ülkelerinde ve Amerika'nın bazı bölgelerinde yaygın olarak dağıtılan bir ağaçtır [10] , [11] , [12] .

Küba'ya tanıtılmasının ardından bu bitki, Zapata'nın Ciénaga sulak alanlarında istilacı bir tür haline gelmiş, yüksek üreme potansiyeli ve uzun kurak dönemlere dayanma yeteneği nedeniyle botanik biyolojik çeşitlilikte kayıplara neden olmuştur [13 ] .

Ekosistem üzerindeki olumsuz etkilerine rağmen, uçucu yağı ve çeşitli ekstraktları antiprotozoal [14] , antimalaryal [15] , bakterisit , fungisit [16] ve böcek kovucu [17] olarak potansiyel göstermektedir .

Vektör kontrolü için doğal alternatiflerin araştırılmasını gerektiren önem nedeniyle amaç, ( M. quinquenervia) esansiyel yağının Ae vektör türü üzerindeki insektisit aktivitesini belirlemekti . albopictus, Cx. quinquefasciatus ve Ae. Mısır.

2 . Malzemeler ve yöntemler
2.1 . Çalışmadaki sivrisinek popülasyonları

Nüfus Fraga 2012: Ae. albopictus türü 2012 yılında Havana Küba'nın La Lisa belediyesindeki Reparto Juan de Dios Fraga'da larva aşamasında toplandı.
Nüfus Regla 2013: Cx. quinquefasciatus türü 2013 yılında Küba'nın Havana kentindeki Regla belediyesinden larva ve pupa aşamasında toplandı.
Nüfus Rockefeller: Ae. aegypti , insektisitlere duyarlı laboratuvar referans suşu, Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezi (CDC), San Juan, Porto Riko, 1996 tarafından sağlanır.
Nüfus Marianao 2013: Ae. aegypti türü suşu, 2013 yılında Küba'nın Havana kentindeki Marianao belediyesinde yoğun bir vektör kontrolü aşamasında larva ve pupa aşamalarında toplandı.

Sivrisinek kolonileri , http://blue/bvs1/monografias/manual.pdf adresinde bulunan Manuel Teknik Endikasyonlar Insectarium [18] metodolojisi izlenerek, Tropikal Tıp 'Pedro Kouri' Küba'nın İnsektarium Vektör Kontrol Enstitüsü bölümünde stabilize edilmiştir .

2.2 . Esansiyel yağların larvisid aktivitesini belirlemek için biyoanalizler
Esansiyel yağa maruz kalan sivrisinek larvalarının duyarlılık seviyelerini belirlemek için WHO tarafından standartlaştırılmış metodoloji kullanılmıştır [19] . Stok çözeltiler mutlak etanol içerisinde hazırlandı. Her konsantrasyonun bir ml'si 99 mL su hacmine ilave edildi. Ae'nin üçüncü veya erken dördüncü dönemindeki toplam 125 larva . Mısır , Ae. albopictus ve Cx. quinquefasciatus her konsantrasyon için eklenmiştir. Her konsantrasyonun bir kontrolü vardı. Dört kopya yapıldı. Ölüm oranı 24 saat sonra belirlendi ve ölümcül konsantrasyonlar (LC50 _ve LC90 ₎ , SPSS'de (Windows için sürüm 11) uygulanan Probit testi kullanılarak hesaplandı.

2.3 . Gelişimi inhibe edici aktiviteleri belirlemek için biyoanalizler
Üç sivrisinek türünün üçüncü dönem larvaları , 500 mL kapasiteli cam kaplarda M. quinquenervia yağının LC ₅₀ ve LC ₉₀ dozuna (her popülasyon için hesaplanan) maruz bırakıldı. Her tür için 500 mL sudaki 150 larva kontrol olarak kullanıldı. 24 saat maruz kaldıktan sonra ölü larvalar atıldı ve hayatta kalanlara yiyecek olarak balık unu eklendi. Pupa durumuna ulaşana kadar suya maruz kaldılar. Larva ve pupaların ölümleri günlük olarak kaydedildi. Hayatta kalan pupalar, yetişkinler ortaya çıkana kadar ayrı şişelerde cinsiyete göre ayrıldı. Veri normalliğinin analizi için Kolmogorov-Smirnov testleri ve Shapiro-Wilk kullanıldı. Tüm türler için her eyaletteki günlük ölüm oranının analizine Çok Faktörlü ANOVA uygulandı (Statistica 7). Doz ve olgunlaşmamış aşamalar arasındaki farkları belirlemek için Tukey post hoc testi kullanıldı.

2.4 . Şişeleri farklı konsantrasyonlarda emprenye ederek yetişkin öldürücü aktiviteyi belirlemek için biyolojik tahliller
Farklı dozlarda uçucu yağ ile yetişkin öldürücü aktiviteyi değerlendirmek için, şişeler önerilen metodolojiye göre emprenye edildi [20] . 250 mL kapasiteli buzlu cam kapaklı cam şişeler kullanıldı. Şişeler, yağın her konsantrasyonundan 1 mL ile emprenye edildi ve solvent olarak kullanılan aseton buharlaşana kadar her yöne döndürüldü. Şişeler alüminyum folyo ile kapatıldı ve gece boyunca üstü açık tutuldu. Daha sonra kullanılıncaya kadar kapatıldılar. Değerlendirilen her konsantrasyon için bir kontrol ve dört kopya kullanıldı. Her türden kanla beslenmeyen, üç günlük on beş dişi maruz bırakıldı. 1 saat boyunca her 5 dakikada bir sivrisineklerin öldürüldüğü kaydedildi. Sivrisineklerin yok edilmesini sağlayan dozların verileri, SPSS'de (Windows için sürüm 11) uygulanan Probit testiyle analiz edildi.

3 . Sonuçlar
M. quinquenervia esansiyel yağı, üç sivrisinek türünde değerlendirilen konsantrasyonlarda larvisid aktivite gösterdi ( Tablo 1 ). Yağ Cx'te daha etkiliydi . quinquefascitus ve ardından Ae. aegypti ve Ae. _{hesaplanan LC 50} değerlerine göre albopictus . Tablo 1 . M. quinquenervi a'nın Ae. popülasyonlarında larva öldürücü aktivitesi . aegypti, Ae. albopictus ve Cx. Çalışmada kullanılan quinquefasciatus .

Rockefeller ( Ae. aegypti )	12,85 ± 0,99	0,004 7 (%0,45–%0,51)	0,006 0 (%0,58–%0,64)	1,04 (0,400)
Marianao 2013 ( Ae. aegypti )	2,63 ± 0,26	0,004 7 (%0,1 %8–%1,20)	0,014 0 (%0,75–%2,00)	20,40 (0,000)
Regla 2013 ( Cx. quinquefasciatus )	2,72 ± 0,21	0,002 1 (%0,11–%0,37)	0,006 4 (%0,37–%3,20)	15,98 (0,001)
Fraga 2012 ( Ae. albopictus )	4,92 ± 0,73	0,004 9 (%0,45–%0,57)	0,008 9 (%0,78–%1,10)	4.11 (0.870)

A b, regresyon katsayısını veya eğimi ifade eder.
Erişkin öldürücü aktivitenin değerlendirilmesinde, Rockefeller popülasyonunda 40 mg/mL'lik doz kullanıldığında 30 dakika sonra %100'lük bir yok etme elde edildi. Marianao 2013, Regla 2013 ve Fraga 2012 popülasyonlarında, popülasyonun %100'ünün 30 dakika içinde yok edilmesi için dozun 50 mg/mL'ye çıkarılması gerekti. Toksik etkisini elde etmek için dozdaki hafif artışa rağmen, bu petrol karşısında üç saha popülasyonunun tepkisi homojendi ( Şekil 1 ).

Şekil 1 . Farklı M konsantrasyonlarına 1 saatlik maruz kalma sırasında elde edilen yıkılma yüzdesi . Ae'de quinquenervia yağı . aegypti, Cx. quinquefasciatus ve Ae. albopiktus . Tablo 2'de , Rockefeller için 40 mg/mL ve değerlendirilen popülasyonların geri kalanı için 50 mg/mL'lik hesaplanan devre dışı bırakma süresi (TKN) dozları gösterilmektedir. Elde edilen süreler (TKN50 ₎ , test edilen üç türün herhangi birinde yağın maruz kaldıktan sonra nispeten hızlı etki gösterdiğini göstermektedir.
Tablo 2 . Ae popülasyonlarında elde edilen nakavt süreleri . aegypti, Ae. albopictus ve Cx. Çalışmada quinquefasciatus'un , şişelerin M. quinquenervia yağı ile emprenye edilmesiyle kullanıldı.

Rockefeller ( Ae. aegypti )	40	3,86 ± 0,35	12,5 (9,0–16,8)	28,2 (20,4–59,4)	15,6 (0,004)
Marianao 2013 ( Ae. aegypti )	50	3,32 ± 0,33	14,2 (12,8–15,8)	34,7 (29,5–43,4)	3,38 (0,490)
Regla 2013 ( Cx. quinquefasciatus )	50	3,12 ± 0,31	9,6 (6,6–12,6)	25,8 (19,2–45,4)	8,89 (0,064)
Fraga 2012 ( Ae. albopictus )	50	2,13 ± 0,28	6,6 (4,8–10,8)	26,4 (15,6–33,2)	18,4 (0,001)

A b, regresyon katsayısını veya eğimi ifade eder.
Gelişimin engelleyici aktivitesi açısından, her öldürücü konsantrasyona maruz kalan bireyler ile kontrol arasında önemli bir fark bulunmuştur ( F = 4.829 7, P = 0.008 03), bu da M. quinquenervia yağının sivrisinek larvalarındaki toksik etkisini açıkça ortaya koymaktadır. incelenen üç tür.

Olgunlaşmamış aşamalar arasındaki ölüm analizi, tüm sivrisinek türlerinde larvalar ve pupalar arasında ve pupalar ile yetişkinler arasında önemli farklılıklar olduğunu gösterdi ( F = 6.853 0, P = 0.000 02). En büyük öldürücü etki A. albopictus'ta meydana geldi ve onu Cx izledi . quinquefasciatus ve Ae. aegypti ( Şekil 2 ). Üç sivrisinek türünün hayatta kalan pupalarının yalnızca %4'ü yetişkin aşamasına ulaştı. Ortaya çıkan erkek sivrisinek sayısı dişi sivrisineklerin 3 katını aştı. Ortaya çıkan bireylerin toplam N'si , M. quinquenervia yağının doğurganlık üzerindeki etkisini incelemek için yeterli değildi .

Şekil 2 . Sivrisineklerin olgunlaşmamış aşamaları ile elde edilen ölüm Ae. albopictus, Cx. quinquefasciatus ve Ae. aegypti türleri LC ₅₀ ve LC _{90 ,}M. quinquenervia yağı dozlarına maruz bırakıldı . Multifaktör Anova ile elde edilen grafik ( F = 2,089 3, P = 0,0795 4). Hata çubukları güven aralıklarını temsil eder.

4 . Tartışma
Çevresel sürdürülebilirlik olarak anlaşılmaktadır: komşu çeşitliliği ve ekosistem üretkenliğini etkilemeden biyolojik bir sistemin limitinin altında kullanılması ve yenilenmesi [21] . Bir bitki, kanıtlanmış böcek öldürücü etkinliğine ek olarak çevresel olarak sürdürülebilir nitelikler sunuyorsa, vektör kontrolüne aday olarak kabul edilebilir.

M. quinquenervia, Küba'daki ekosisteme en zararlı ve botanik türler için en büyük endişe kaynağı olan 100 tür arasında öne çıkıyor. Her ikisi de Matanzas ilindeki Zapata'nın Ciénaga ve Majaguillar'ın Ciénaga bataklıklarında yaklaşık 40.000 hektarlık alanı istila eder [22] . Bu yenilenebilir kaynağın bir kullanım şekli, aşırı büyümelerinin neden olduğu hasarı azaltan esansiyel yağını elde etmektir [13] .

Alternatif vektör kontrol yöntemlerine ve bu durumda böcek öldürücü aktiviteye sahip bitkilere yönelik yoğun araştırmalar, çoğunlukla esansiyel yağların ve ekstraktların tıbbi biyoaktiviteye veya çeşnilerin kullanımına sahip olduğu bitkilere odaklanmıştır [23], [24 ] , [ 25 ] . Pestisit biyoaktivitesi büyük ölçüde botanik türe, ekstraksiyon yöntemine, kullanılan böceklere ve bunların sentetik insektisitlere duyarlılığına bağlıdır [26] , [27] .

DSÖ, doğal ürünlerin larvisid aktivitesinin belirlenmesi için teşhis dozu oluşturmamıştır. Komalamisra ve ark. gibi yazarlar . _{2005, CL 50} ≤ 50 mg/L olan doğal bir ürünün aktif olduğunu ve LC _50'nin 50 mg/L ile 100 mg/L arasında olması durumunda orta derecede aktif olduğunu ileri sürmektedir [28] . Ayrıca Ravi-Kiran ve ark. 2006 [29] , CL ₅₀ ≤ 100 mg/L olan bileşiklerin önemli bir larvisid aktivite sergilediğini ileri sürmektedir. Tüm çalışmalarımızda 50 mg/L'nin altında LC ₅₀ değerlerine sahibiz, dolayısıyla M. quinquenervia yağı aktiftir ve Culex ve Aedes türleri için önemli bir larvisid aktiviteye sahiptir.spp.

Çok sayıda çalışmada bitkilerin insektisit etkisi biyoanalizlerin yanı sıra böceklerde enzimatik çalışmalar ve yağların çoğunluk bileşiğini destekleyen kromatografik analizlerle desteklenmektedir [30] , [31] , [32] , [33] . Yazarlar, birçok bitkideki sekonder metabolitlerin etki mekanizmalarının farklı olması (asetilkolinesterazın inhibisyonu , Na ve K kanallarının engellenmesi, oktopamin reseptörlerinin bloke edilmesi) ve böceklerde sentetik insektisitler tarafından kullanılanlara benzer olması nedeniyle bunu önermişlerdir [34] , [35] .

M. quinquenervi a, esas olarak monoterpenler ve seskiterpenler 1.8 sineol ve viridiflorolün oranına dayalı olarak farklı kemotipler üretir [10] , [11] , [12] . Çalışmalarımızda kullanılan uçucu yağın kimyasal karakterizasyonunda çoğunluk bileşikleri olarak 1.8 sineol, α-pinen, β-pinen, α-terpineol, limonen ve hidroksillenmiş seskiterpenoid viridiflorol içeren monoterpenlerin tamamı 1’e göre üstün bileşimde olduğu belirlenmiştir. % [36] . Birkaç yazar, M. quinquenervia'nın esansiyel yağındaki bu metabolitlerin varlığını bağlamaktadır., diğer bitkilerden elde edilen yağlarda bulunan insektisit etkisine [23] , [37] .

Böcek öldürücü aktivitenin yağın ana bileşenlerine mi, yoksa özellikle birine mi atfedileceği konusunda bir fikir birliği yoktur. İzole edilen bazı metabolitler kendi başlarına değerlendirildiğinde agonist etki yaratırken diğerleri yağın diğer bileşenleriyle birleştirildiğinde sinerjistik etki gösterir [37] , [38] .

Giatropoulus ve ark. 2012 [39] Ae türüyle . albopictus'ta , α ve β-pinen izolatlar için hesaplanan CL ₅₀ değerinde ve izole edilen üç turunçgil yağı_{CL 50} ile karşılaştırıldığında daha yüksekti . Bu sonuç, bir özün içindeki bileşenlerin sinerjik rolünü ortaya koydu. Kim ve ark. , 2008 [40] Culex pipiens ile karşılaştırıldığında 1.8 sineolün önemli larvisit ve yetişkin öldürücü aktivitesini buldu ve Zahran ve ark.., 2011, 500 mg/mL'lik dozlarda bu türe karşı larvisid aktivite tespit etmiş ve 48 saatlik maruziyetten sonra henüz etkili yetişkin öldürücü aktivite geçmemiştir [41] . Noleto-Diaz ve ark. (2015), izole metabolitleri değerlendirmese de, çalışmalarında kullanılan beş bitkiden Eugenia piauhiensis , daha düşük CL ₅₀ değeri sunar ve monoterpenler 1.8 cineol, α-pinene, β-pinene, α-terpineol ve viridifloroldür. çoğunluk bileşikleri özündedir [42] .

Her durumda, alanında uzman kişilerin kriterlerin değişkenliği nedeniyle izole metabolitlerle tamamlayıcı çalışmaların yapılması gerekmektedir. Ancak elde edilen sonuçlar, yağda bulunan metabolitlerin insektisidal aktivitesini göstermektedir.

Yetişkin böceklerin fizyolojik olarak daha güçlü olması nedeniyle, fitokimyasallara verilen biyolojik tepkiler larvalar ve yetişkinler arasında farklılık gösterebilir; bu da yetişkinlerdeki CL ₅₀ artışını haklı gösterebilir . Bitkisel yağların yetişkin öldürücü aktivitesini değerlendirmek için emdirilmiş şişeler yönteminin (CDC metodolojisi) kullanıldığı makaleler bulunmaktadır. Bu tür aktiviteyi değerlendiren makaleler, kağıtların uçucu yağların veya izole edilmiş metabolitlerin solüsyonlarıyla emprenye edilmesiyle yapılır, ancak çoğu standart bir metodolojiye sahip değildir [43] , [44] . Şişelerin metodolojisi ucuz, basit ve laboratuvar koşullarında ve arazi şartlarında kolaylıkla uygulanabilen bir yöntemdir.

Esansiyel yağların sivrisineklere karşı yetişkin öldürücü aktivitesi açısından sonuçların karşılaştırılmasına olanak tanıyan çok az makale bulunmaktadır. Rockefeller popülasyonunda 40 mg/mL'lik bir dozla, maruz kalan dişilerin %100 nakavt edilmesi elde edildi. Çalışmamızda popülasyonun geri kalanı için kullanılan doz (50 mg/mL = %5), diğer çalışmalarda, örneğin Melaleuca cajeputi'nin aereosolü ile yürütülen deneylerde kullanılan aralıktadır [45 ] . Hafif doz artışı, incelenen popülasyonlardan üçünün yüksek pestisit uygulamasının olduğu bir dönemde toplanması ve bazı insektisit gruplarına dirençli olmasıyla ilişkili olabilir [46]. Bu nedenle doz artışını etkileyebilecek detoksifiye edici enzimlerin ve antioksidan mekanizmaların seviyelerinde artış olması muhtemeldir. Bu çapraz yanıt olgusu birçok makalede zaten açıklanmıştır [47] . M. quinquenervia'nın esansiyel yağından oluşanlar üzerindeki metabolik etki mekanizmalarının olası etkisi, bu umut verici adayın vektör kontrolü için kullanılma olasılığı göz önüne alındığında daha ayrıntılı olarak araştırılmalıdır. Diğer yazarların önerdiği gibi, herhangi bir spesifik tipte enzim aktivitesi göstermeyen tarla popülasyonlarının kontrol edilmesi için bu yağı içeren çeşitli formülasyonlar kullanılabilir [47] .

Gelişimi inhibe edici aktivitesi ile ilgili olarak, M. quinquenervia yağı kümülatif ölümcül olmayan dozlara maruz kalan larvalar üzerinde toksik bir etkiye sahiptir; bu olgunlaşmamış aşamada gözlenen ölü veya deforme olmuş pupalarda bulunan yüksek mortalitenin de yansıttığı gibi ve erkeklerin ortaya çıkmasının engellenmesiyle ortaya çıkmıştır. exuvia'lara bağlı kaldı.

Bu sonuçlar, ölümcül olmayan dozlara maruz kalan böceklerde bazı ikincil metabolitlerin neden olduğu hormonal dengenin bozulmasından kaynaklanıyor olabilir [48] , [49] .

Olası etki bölgeleri ve hedef organlar üzerinde moleküler çalışmalar yapılmalıdır. Sivrisineklere karşı insektisidal aktiviteye sahip olduğu anlaşılan bitkilerin çoğu en azından larvisid aktiviteye sahiptir ancak az sayıda çalışma aynı bitki üzerinde geniş bir biyoaktiviteyi (larvisit, yetişkin öldürücü, gelişimi engelleyici ve kovucu) kapsamaktadır. Sonuçlarımız , vektör sivrisinek kontrolü için M. quinquenervia yağının kullanılmasının önerilmesine olanak sağlar . Bu şekilde ülkemizin batı kısmındaki istilacı bir sulak alan bitkisinden faydalanmayı başarıyor ve sivrisinek popülasyonlarını kontrol etmek için bir alternatif sunarak çevresel açıdan sürdürülebilir bir haşere yönetimine katkıda bulunuyor.

Çıkar çatışması beyanı
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışmasının olmadığını beyan ederler.

Teşekkür
Bu çalışma Bilim, Teknoloji ve Çevre Bakanlığı'nın 'Hassas gruplarda belirleyici sağlık riskleri ve hastalıkların önlenmesi' programı tarafından desteklenmiştir . Proje 1601078 Tropikal Tıp Enstitüsü 'Pedro Kouri'nin ' Sivrisinek kontrolüne doğal bir alternatif olarak uçucu yağların böcek öldürücü aktivitesi' .

Referanslar

Duyuru

Nioli yağı, Melaleuca quinquenervia

Nioli yağı, Melaleuca quinquenervia

Yorum yap